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Immunology and Infection

गुलाब बंगाल-मध्यस्थता Photodynamic थेरेपी कैंडिडा अल्बिकन्स को बाधित करने के लिए

Published: March 24th, 2022

DOI:

10.3791/63558

* These authors contributed equally

दवा प्रतिरोधी कैंडिडा अल्बिकन्स की बढ़ती घटना दुनिया भर में एक गंभीर स्वास्थ्य मुद्दा है। रोगाणुरोधी फोटोडायनामिक थेरेपी (एपीडीटी) दवा प्रतिरोधी फंगल संक्रमण के खिलाफ लड़ने के लिए एक रणनीति प्रदान कर सकती है। वर्तमान प्रोटोकॉल इन विट्रो में एक मल्टीड्रग-प्रतिरोधी सी अल्बिकन्स स्ट्रेन पर रोज़ बंगाल-मध्यस्थता एपीडीटी प्रभावकारिता का वर्णन करता है।

इनवेसिव कैंडिडा अल्बिकन्स संक्रमण मनुष्यों में एक महत्वपूर्ण अवसरवादी फंगल संक्रमण है क्योंकि यह आंत, मुंह, योनि और त्वचा के सबसे आम उपनिवेशवादियों में से एक है। एंटिफंगल दवा की उपलब्धता के बावजूद, आक्रामक कैंडिडिआसिस की मृत्यु दर ~ 50% बनी हुई है। दुर्भाग्य से, दवा प्रतिरोधी सी अल्बिकन्स की घटनाएं विश्व स्तर पर बढ़ रही हैं। रोगाणुरोधी फोटोडायनामिक थेरेपी (एपीडीटी) सी अल्बिकन्स बायोफिल्म गठन को बाधित करने और दवा प्रतिरोध को दूर करने के लिए एक वैकल्पिक या सहायक उपचार प्रदान कर सकती है। रोज बंगाल (आरबी) - मध्यस्थता aPDT बैक्टीरिया और सी albicans के प्रभावी सेल हत्या दिखाया गया है. इस अध्ययन में, मल्टीड्रग-प्रतिरोधी सी अल्बिकन्स पर आरबी-एपीडीटी की प्रभावकारिता का वर्णन किया गया है। एक घर का बना हरा प्रकाश उत्सर्जक डायोड (एलईडी) प्रकाश स्रोत एक 96-अच्छी तरह से प्लेट के एक कुएं के केंद्र के साथ संरेखित करने के लिए डिज़ाइन किया गया है। खमीर को आरबी के विभिन्न सांद्रता वाले कुओं में इनक्यूबेट किया गया था और हरे रंग की रोशनी के अलग-अलग समृद्धि के साथ रोशन किया गया था। हत्या के प्रभावों का विश्लेषण प्लेट कमजोर पड़ने की विधि द्वारा किया गया था। प्रकाश और आरबी के इष्टतम संयोजन के साथ, 3-लॉग विकास निषेध प्राप्त किया गया था। यह निष्कर्ष निकाला गया था कि आरबी-एपीडीटी संभावित रूप से दवा प्रतिरोधी सी अल्बिकन्स को रोक सकता है।

C. albicans स्वस्थ व्यक्तियों के जठरांत्र संबंधी और genitourinary tracts में उपनिवेशऔर लगभग 50 प्रतिशत व्यक्तियों में सामान्य माइक्रोबायोटा के रूप में पता लगाया जा सकताहै। यदि मेजबान और रोगज़नक़ के बीच असंतुलन पैदा होता है, तो सी अल्बिकन्स आक्रमण करने और बीमारी पैदा करने में सक्षम है। संक्रमण स्थानीय श्लेष्म झिल्ली संक्रमण से लेकर कई अंग विफलता 2 तक हो सकताहै। अमेरिका में एक बहु-केंद्रीय निगरानी अध्ययन में, 2009 और 2017 के बीच आक्रामक कैंडिडिआसिस वाले रोगियों से लगभग आधे आइसोलेट्स सी अल्बिकन्स3 हैं। कैंडिडेमिया उच्च रुग्णता दर, मृत्यु दर, लंबे समय तक अस्पताल में रहने के ....

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1. aPDT प्रणाली की तैयारी

  1. एक एलईडी पट्टी से चार हरे रंग के प्रकाश उत्सर्जक डायोड (एलईडी) काटें ( सामग्री की तालिका देखें) और उन्हें 96-अच्छी तरह से प्लेट (चित्रा 1) के चार कुओं के साथ स?.......

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चित्रा 1 वर्तमान अध्ययन में उपयोग की जा रही एपीडीटी प्रणाली को दर्शाता है। चूंकि उच्च तापमान महत्वपूर्ण सेल मृत्यु का कारण बन सकता है, इसलिए एलईडी सरणी को एक बिजली के पंखे द्वारा ठंडा किया ज?.......

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फंगल केराटाइटिस के लिए आरबी-पीडीटी के नैदानिक अनुप्रयोगों के उत्साहजनक परिणाम हाल ही में19 की सूचना दी गई है। आरबी का अवशोषण शिखर 450-650 एनएम पर है। एक सफल aPDT के लिए प्रकाश स्रोत की समृद्धि दर निर्ध?.......

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इस काम को एप्लाइड नैनोमेडिसिन के केंद्र से धन प्राप्त हुआ है, राष्ट्रीय चेंग कुंग विश्वविद्यालय शिक्षा मंत्रालय (एमओई) द्वारा उच्च शिक्षा स्प्राउट परियोजना के ढांचे के भीतर विशेष रुप से प्रदर्शित क्षेत्रों के अनुसंधान केंद्र कार्यक्रम से, और विज्ञान और प्रौद्योगिकी मंत्रालय, ताइवान [MOST 109-2327-B-006-005] TW वोंग के लिए। जे.एच. हंग नेशनल चेंग कुंग यूनिवर्सिटी हॉस्पिटल, ताइवान [NCKUH-11006018], और [MOST 110-2314-B-006-086-MY3] से धन स्वीकार करता है।

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NameCompanyCatalog NumberComments
1.5 mL microfuge tubeNeptune, San Diego, USA#3745.x
5 mL round-bottom tube with cell strainer capFalcon, USA#352235
96-well plateAlpha plus, Taoyuan Hsien, Taiwan#16196
Aluminum foilsunmei, Tainan, Taiwan
Aluminum heat sinkNanyi electronics Co., Ltd., Tainan, TaiwanBK-T220-0051-01
CentrifugeEppendorf, UK5415Rdisperses heat from the LED array
Graph pad prism softwareGraphPad 8.0, San Diego, California, USAgraphing and statistics software
Green light emitting diode (LED) stripNanyi electronics Co., Ltd., Tainan, Taiwan2835
IncubatorYihder, Taipei, TaiwanLM-570D (R)Emission peak wavelength: 525 nm, Viewing angle: 150°; originated from https://www.aliva.com.tw/product.php?id=63
Light power meterOphir, Jerusalem, IsraelPD300-3W-V1-SENSOR,
Millex 0.22 μm filterMerck, NJ, USASLGVR33RS
Multidrug-resistant Candida albicansBioresource Collection and Research CenterBioresource, Hsinchu, TaiwanBCRC 21538/ATCC 10231http://catalog.bcrc.firdi.org.tw/BcrcContent?bid=21538
OD600 spectrophotometerBiochrom, London, UKUltrospec 10
Rose BengalSigma-Aldrich, MO, USA330000stock concentration 40 mg/mL = 4%, prepare in PBS, stored at 4 °C
Sterilized glass tubeSunmei Co., Ltd., Tainan, TaiwanAK45048-16100
Yeast Extract Peptone Dextrose MediumHIMEDIA, IndiaM1363

  1. Naglik, J. R., Challacombe, S. J., Hube, B. Candida albicans secreted aspartyl proteinases in virulence and pathogenesis. Microbiology and Molecular Biology Reviews. 67 (3), 400-428 (2003).
  2. Pappas, P. G., et al. Clinical practice guideline for the management of candidiasis: 2016 update by the Infectious Diseases Society of America. Clinical Infectious Diseases. 62 (4), 1-50 (2016).
  3. Ricotta, E. E., et al. Invasive candidiasis species distribution and trends, United States, 2009-2017. Journal of Infectious Diseases. 223 (7), 1295-1302 (2021).
  4. Koehler, P., et al. Morbidity and mortality of candidaemia in Europe: an epidemiologic meta-analysis. Clinical Microbiology and Infection. 25 (10), 1200-1212 (2019).
  5. Toda, M., et al. Population-based active surveillance for culture-confirmed candidemia - four sites, United States, 2012-2016. Morbidity and Mortality Weekly Report Surveillance Summaries. 68 (8), 1-15 (2019).
  6. Lee, C. N., Hsu, R., Chen, H., Wong, T. W. Daylight photodynamic therapy: an update. Molecules. 25 (21), 5195 (2020).
  7. Wainwright, M. Photodynamic antimicrobial chemotherapy (PACT). Journal of Antimicrobial Chemotherapy. 42 (1), 13-28 (1998).
  8. Wong, T. W., et al. Indocyanine green-mediated photodynamic therapy reduces methicillin-resistant staphylococcus aureus drug resistance. Journal of Clinical Medicine. 8 (3), 411 (2019).
  9. Kim, M. M., Darafsheh, A. Light sources and dosimetry techniques for photodynamic therapy. Photochemistry and Photobiology. 96 (2), 280-294 (2020).
  10. Wong, T. W., Sheu, H. M., Lee, J. Y., Fletcher, R. J. Photodynamic therapy for Bowen's disease (squamous cell carcinoma in situ) of the digit. Dermatologic Surgery. 27 (5), 452-456 (2001).
  11. Wong, T. W., et al. Photodynamic inactivation of methicillin-resistant Staphylococcus aureus by indocyanine green and near infrared light. Dermatologica Sinica. 36 (1), 8-15 (2018).
  12. Stasko, N., et al. Visible blue light inhibits infection and replication of SARS-CoV-2 at doses that are well-tolerated by human respiratory tissue. Scientific Reports. 11 (1), 20595 (2021).
  13. Crosbie, J., Winser, K., Collins, P. Mapping the light field of the Waldmann PDT 1200 lamp: potential for wide-field low light irradiance aminolevulinic acid photodynamic therapy. Photochemistry and Photobiology. 76 (2), 204-207 (2002).
  14. Feenstra, R. P., Tseng, S. C. Comparison of fluorescein and rose bengal staining. Ophthalmology. 99 (4), 605-617 (1992).
  15. Demidova, T. N., Hamblin, M. R. Effect of cell-photosensitizer binding and cell density on microbial photoinactivation. Antimicrobial Agents and Chemotherapy. 49 (6), 2329-2335 (2005).
  16. Shahid, H., et al. Duclauxin derivatives from fungi and their biological activities. Frontiers in Microbiology. 12, 766440 (2021).
  17. Arendrup, M. C., Park, S., Brown, S., Pfaller, M., Perlin, D. S. Evaluation of CLSI M44-A2 disk diffusion and associated breakpoint testing of caspofungin and micafungin using a well-characterized panel of wild-type and fks hot spot mutant Candida isolates. Antimicrobial Agents and Chemotherapy. 55 (5), 1891-1895 (2011).
  18. Mukaremera, L., Lee, K. K., Mora-Montes, H. M., Gow, N. A. R. Candida albicans yeast, pseudohyphal, and hyphal morphogenesis differentially affects immune recognition. Frontiers in Immunology. 8, 629 (2017).
  19. Hung, J. H., et al. Recent advances in photodynamic therapy against fungal keratitis. Pharmaceutics. 13 (12), 2011 (2021).
  20. Martinez, J. D., et al. Rose Bengal photodynamic antimicrobial therapy: a pilot safety study. Cornea. 40 (8), 1036-1043 (2021).

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