Induzione dell'infiammazione della superficie oculare e raccolta dei tessuti coinvolti

L'infiammazione della superficie oculare danneggia i tessuti della superficie oculare e compromette le funzioni vitali dell'occhio. Il presente protocollo descrive un metodo per indurre l'infiammazione oculare e raccogliere i tessuti compromessi in un modello murino di disfunzione della ghiandola di Meibomio (MGD).

Le malattie della superficie oculare comprendono una serie di disturbi che disturbano le funzioni e le strutture della cornea, della congiuntiva e della rete di ghiandole superficiali oculari associate. Le ghiandole di Meibomio (MG) secernono lipidi che creano uno strato di copertura che impedisce l'evaporazione della parte acquosa del film lacrimale. I neutrofili e le trappole del DNA extracellulare popolano la MG e la superficie oculare in un modello murino di malattia allergica dell'occhio. Le trappole extracellulari aggregate di neutrofili (aggNET) formulano una matrice simile a una maglia composta da cromatina extracellulare che occlude le prese di MG e condiziona la disfunzione della MG. Qui viene presentato un metodo per indurre l'infiammazione della superficie oculare e la disfunzione MG. Le procedure per la raccolta di organi relativi alla superficie oculare, come la cornea, la congiuntiva e le palpebre, sono descritte in dettaglio. Utilizzando tecniche consolidate per l'elaborazione di ciascun organo, vengono anche mostrate le principali caratteristiche morfologiche e istopatologiche della disfunzione MG. Gli essudati oculari offrono l'opportunità di valutare lo stato infiammatorio della superficie oculare. Queste procedure consentono lo studio di interventi antinfiammatori topici e sistemici a livello preclinico.

Ogni battito di ciglia riempie il film lacrimale liscio disperso sulla cornea. Gli epiteli della superficie oculare facilitano la distribuzione e il corretto orientamento del film lacrimale sulla superficie oculare. Le mucine sono fornite dalla cornea e dalle cellule epiteliali congiuntiva per aiutare a posizionare la parte acquosa del film lacrimale proveniente dalle ghiandole lacrimali sulla superficie degli occhi. Infine, MG secerne lipidi che creano uno strato di copertura che impedisce l'evaporazione della parte acquosa del film lacrimale ^1,2,3. In questo modo, le funzio....

Tutte le procedure che coinvolgono gli animali sono state condotte secondo le linee guida istituzionali sul benessere degli animali e approvate dalla commissione per il benessere degli animali della Friedrich-Alexander-University Erlangen-Nuremberg (FAU) (numero di autorizzazione: 55.2.2-2532-2-1217). Per il presente studio sono stati utilizzati topi femmina C57Bl/6, di età compresa tra 7 e 9 settimane. I topi sono stati ottenuti da fonti commerciali (vedi Tabella dei materiali) e tenuti in condizioni s.......

Il presente protocollo descrive i passaggi sequenziali per stabilire un modello murino di infiammazione della superficie oculare. I protocolli mirano a mostrare come applicare le terapie localmente, ottenere essudati oculari e asportare organi accessori associati come palpebre sane e infiammate (Figura 2), la cornea e la congiuntiva. Bisogna prestare attenzione quando le palpebre superiori vengono sezionate per l'isolamento della congiuntiva e deve essere conservato in 1x PBS durante la diss.......

La secrezione oleosa delle ghiandole di Meibomio è di grande importanza per un occhio sano²². Tuttavia, l'ostruzione di queste ghiandole sebacee da parte di trappole extracellulari di neutrofili aggregati (aggNET) che si allineano come filamenti paralleli situati sulle placche tarsali di entrambe le palpebre può interrompere il film lacrimale²³. Questa interruzione provoca disfunzione della ghiandola di Meibomio (MGD)¹ e un'evaporazione lacrimale a.......

Questo lavoro è stato parzialmente sostenuto dalla Fondazione tedesca per la ricerca (DFG) 2886 PANDORA Project-No.B3; SCHA 2040/1-1; MU 4240/2-1; CRC1181(C03); TRR241(B04), H2020-FETOPEN-2018-2020 Project 861878, e dalla Volkswagen-Stiftung (Grant 97744) a MH.