JoVE Logo
Faculty Resource Center
Authors
Librarians
High Schools
About

Sign In

Summary

Abstract

Introduction

Protocol

Representative Results

Discussion

Acknowledgements

Materials

References

Medicine

تحليل السائل الزليلي لتحديد هشاشة العظام

Published: October 20th, 2022

DOI:

10.3791/64351

1Rheumatology Unit, Department of Medicine-DIMED, University of Padova

يستخدم تحليل السائل الزليلي تحت المجهر الضوئي المرسل والمستقطب والمعوض لتقييم الطبيعة الالتهابية أو غير الالتهابية للعينة من خلال خطوات بسيطة. من المفيد بشكل خاص في هشاشة العظام الكشف عن بلورات الكالسيوم وتحديد مجموعة فرعية أكثر حدة من هشاشة العظام.

تحليل السائل الزليلي (SF) مهم في تشخيص هشاشة العظام (OA). تساعد الميزات العيانية والمجهرية ، بما في ذلك عدد خلايا الدم البيضاء الكلية والتفاضلية (WBC) ، في تحديد الطبيعة غير الالتهابية ل SF ، والتي تعد سمة مميزة ل OA. في المرضى الذين يعانون من هشاشة العظام ، لا يتجاوز WBC في عينات SF عادة 2000 خلية لكل ميكرولتر ، والنسبة المئوية للخلايا الالتهابية ، مثل العدلات ، منخفضة جدا أو غائبة. بلورات الكالسيوم متكررة في SF التي تم جمعها من مرضى الزراعة العضوية. على الرغم من أن دورها في التسبب في هشاشة العظام لا يزال غير واضح ، فقد ارتبطت بعملية التهابية خفيفة وتطور مرض أكثر حدة. في الآونة الأخيرة ، تم وصف بلورات الكالسيوم في كل من المراحل المبكرة والمتأخرة من الزراعة العضوية ، مما يشير إلى أنها قد تلعب دورا حيويا في تشخيص مجموعات فرعية سريرية مختلفة من الزراعة العضوية والعلاج الدوائي. الهدف العام من تحليل SF في الزراعة العضوية ذو شقين: التأكد من الدرجة غير الالتهابية ل SF وتسليط الضوء على وجود بلورات الكالسيوم.

هشاشة العظام (OA) هو مرض مزمن معقد ومتعدد العوامل في المفاصل ، مع انتشار عالمي مجمع يقدر ب 16٪ في الأشخاص الذين تتراوح أعمارهم بين 15 وما فوق ، و 23٪ في الأشخاص الذين تتراوح أعمارهم بين 40 وما فوق1. من المتوقع أن يزداد حدوث هشاشة العظام بسبب شيخوخة السكان وزيادة عوامل الخطر ، مثل السمنة ومتلازمة التمثيل الغذائي2.

من بين القضايا الرئيسية المرتبطة بهشاشة العظام صعوبة تشخيص المرض في مراحله المبكرة والعلاجات المتاحة حاليا التي تقتصر على إدارة الألم والأدوية بطيئة المفعول (SYSADOAs) مثل الجليكوزامينوجليكان. يعتمد تشخيص هشاشة العظام على الأعراض السريرية ونتائج التصوير. ومع ذلك ، فإن عدم وجود علاقة ب....

Log in or to access full content. Learn more about your institution’s access to JoVE content here

يتوافق البروتوكول الحالي مع المبادئ التوجيهية للجنة الأخلاقيات في مستشفى جامعة بادوفا. تم جمع SF بموافقة المريض من مفاصل الركبة للمرضى الذين يتلقون بزل المفصل العلاجي لانصباب المفاصل عند تقديمهم الأولي إلى العيادة أو استجابة لتوهج التهاب المفاصل. كانت موانع الإجراء: اعتلال التخثر ، الأد?.......

Log in or to access full content. Learn more about your institution’s access to JoVE content here

غالبا ما تتورم المفاصل الكبيرة المتأثرة بهشاشة العظام وتنتج كميات كبيرة من SF ، والتي يتم تصريفها عن طريق بزل المفصل15. تشمل الخصائص العيانية ل SF التي تم تقييمها مباشرة بعد بزل المفصل بشكل أساسي الكمية واللون والوضوح واللزوجة17. على الرغم من خصوصيتها المنخفضة ?.......

Log in or to access full content. Learn more about your institution’s access to JoVE content here

في الزراعة العضوية ، يساعد تحليل SF في تحديد خصائص المرض من خلال خطوات بسيطة: تعداد الكريات البيض الكلي والتفاضلي والبحث عن البلورات ، بما في ذلك CPP و BCP. علاوة على ذلك ، قد يسلط اكتشاف بلورات جامعة ولاية ميشيغان الضوء على الأمراض المصاحبة المهمة.

على الرغم من التكاليف المنخفض?.......

Log in or to access full content. Learn more about your institution’s access to JoVE content here

يود المؤلفون أن يشكروا البروفيسور ليوناردو بونزي على إرشاده الثمين في مجال تحليل السائل الزليلي ومستشفى جامعة بادوفا لدعمه.

....

Log in or to access full content. Learn more about your institution’s access to JoVE content here

NameCompanyCatalog NumberComments
Alizarin red SMerckA5533For BCP crystal search
Burker chamberMerckBR718905For total white blood cell count
Cover glassesMerckC7931For microscopic examination 
EDTA tubesBD368861For SF collection 
Glass slides MerckS8902For crystal search
Lambda filter (compensator)Any Refer to microscope companyFor crystal identification 
Malassez-Potain pipetteArtiglass54830000For dilution of synovial fluid
Methylene blue solutionMerck3978For total white blood cell count
Polarized microscope Leica, Nikon, othersDepending on the model and companyFor complete synovial fluid analysis
Polarizing lensAny Refer to microscope companyFor crystal identification 
Testsimplet Waldeck14386Supravital staining for cell differentiation

  1. Cui, A., et al. Global, regional prevalence, incidence and risk factors of knee osteoarthritis in population-based studies. EClinicalMedicine. 29, 100587 (2020).
  2. Hunter, D. J., Bierma-Zeinstra, S. Osteoarthritis. Lancet. 393 (10182), 1745-1759 (2019).
  3. Mandell, B. F. . Synovial Fluid Analysis and the Evaluation of Patients with Arthritis. , (2022).
  4. Schmerling, R. H. Guidelines for the initial evaluation of the adult patient with acute musculoskeletal symptoms. Arthritis & Rheumatism. 39 (1), 1-8 (1996).
  5. Coakley, G., et al. RCGP and BSAC guidelines for management of the hot swollen joint in adults. Rheumatology. 45 (8), 1039-1041 (2006).
  6. Frallonardo, P., et al. Basic calcium phosphate and pyrophosphate crystals in early and late osteoarthritis: relationship with clinical indices and inflammation. Clinical Rheumatology. 37 (10), 2847-2853 (2018).
  7. Nalbant, S., et al. Synovial fluid features and their relations to osteoarthritis severity: new findings from sequential studies. Osteoarthritis Cartilage. 11 (1), 50-54 (2003).
  8. Fuerst, M., et al. Calcification of articular cartilage in human osteoarthritis. Arthritis & Rheumatism. 60 (9), 2694-2703 (2009).
  9. Campillo-Gimenez, L., et al. Inflammatory potential of four different phases of calcium pyrophosphate relies on NF-κB activation and MAPK pathways. Frontiers in Immunology. 9, 2248 (2018).
  10. Pazár, B. Basic calcium phosphate crystals induce monocyte/macrophage IL-1β secretion through the NLRP3 inflammasome in vitro. The Journal of Immunology. 186 (4), 2495-2502 (2011).
  11. Martín, M. J. A., et al. Automated cell count in body fluids: a review. Advances in Laboratory Medicine. 2, 149-161 (2021).
  12. Seghezzi, , et al. Optimization of cellular analysis of synovial fluids by optical microscopy and automated count using the Sysmex XN body fluid mode. Clinica Chimica Acta. 462, 41-48 (2016).
  13. Reginato, A. J., Maldonado, I., Reginato, A. M., Falasca, G. F., O'Connor, C. R. Supravital staining of synovial fluid with Testsimplets. Diagnostic Cytopathology. 8 (2), 147-152 (1992).
  14. Lumbreras, B., et al. Analysis for crystals in synovial fluid: training of the analysts results in high consistency. Annals of the Rheumatic Diseases. 64 (4), 612-615 (2005).
  15. Tieng, A., Franchin, G. Knee arthrocentesis in adults. Journal of Visualized Experiments. , e63135 (2022).
  16. Punzi, L., Oliviero, F. Arthrocentesis and synovial fluid analysis in clinical practice: value of sonography in difficult cases. Annals of the New York Academy of Sciences. 1154 (1), 152-158 (2009).
  17. Schumacher, H. R., Reginato, A. J. . Atlas of Synovial Fluid Analysis and Crystal Identification. , (1991).
  18. Mopin, A., Driss, V., Brinster, C. A. Detailed protocol for characterizing the murine C1498 cell line and its associated leukemia mouse model. Journal of Visualized Experiments. (116), e54270 (2016).
  19. Oliviero, F., Punzi, L. Basics of Polarized Light Microscopy. Synovial Fluid Analysis and the Evaluation of Patients with Arthritis. , 79-90 (2022).
  20. Paul, H., Reginato, A. J., Schumacher, H. R. Alizarin red S staining as a screening test to detect calcium compounds in synovial fluid. Arthritis & Rheumatism. 26 (2), 191-200 (1983).
  21. Favero, M., et al. Synovial fluid fetuin-A levels in patients affected by osteoarthritis with or without evidence of calcium crystals. Rheumatology. 58 (4), 729-730 (2019).
  22. Frallonardo, P., et al. Detection of calcium crystals in knee osteoarthritis synovial fluid: a comparison between polarized light and scanning electron microscopy. Journal of Clinical Rheumatology. 22 (7), 369-371 (2016).
  23. Peffers, M. J., Smagul, A., Anderson, J. R. Proteomic analysis of synovial fluid: current and potential uses to improve clinical outcomes. Expert Review of Proteomics. 16 (4), 287-302 (2019).

This article has been published

Video Coming Soon

JoVE Logo

Privacy

Terms of Use

Policies

Contact Us

Recommend to library

JoVE NEWSLETTERS

Research

Education

Authors

Librarians

ABOUT JoVE

Copyright © 2024 MyJoVE Corporation. All rights reserved