JoVE Logo
Faculty Resource Center

Sign In

Summary

Abstract

Introduction

Protocol

Representative Results

Discussion

Acknowledgements

Materials

References

Medicine

ניתוח נוזלים סינוביאלי לזיהוי דלקת מפרקים ניוונית

Published: October 20th, 2022

DOI:

10.3791/64351

1Rheumatology Unit, Department of Medicine-DIMED, University of Padova

ניתוח נוזל סינוביאלי תחת מיקרוסקופ אור מועבר, מקוטב ומפוצה משמש להערכת האופי הדלקתי או הלא דלקתי של דגימה באמצעות צעדים פשוטים. זה שימושי במיוחד בדלקת מפרקים ניוונית כדי לזהות גבישי סידן ולזהות תת-קבוצה חמורה יותר של דלקת מפרקים ניוונית.

ניתוח נוזל סינוביאלי (SF) חשוב באבחון דלקת מפרקים ניוונית (OA). מאפיינים מקרוסקופיים ומיקרוסקופיים, כולל ספירה כוללת ודיפרנציאלית של תאי דם לבנים (WBC), עוזרים להגדיר את האופי הלא דלקתי של SF, שהוא סימן ההיכר של OA. בחולים עם OA, WBC בדגימות SF בדרך כלל אינו עולה על 2000 תאים למיקרוליטר, ואחוז התאים הדלקתיים, כגון נויטרופילים, נמוך מאוד או נעדר. גבישי סידן שכיחים ב- SF שנאספו מחולי OA. למרות שתפקידם בפתוגנזה של OA נותר לא ברור, הם נקשרו לתהליך דלקתי קל ולהתקדמות מחלה חמורה יותר. לאחרונה, גבישי סידן תוארו הן בשלבים המוקדמים והן בשלבים המאוחרים של OA, מה שמצביע על כך שהם עשויים למלא תפקיד חיוני באבחון תת-קבוצות קליניות שונות של OA וטיפול תרופתי. המטרה הכוללת של ניתוח SF ב- OA היא כפולה: לוודא את הדרגה הלא דלקתית של SF ולהדגיש את נוכחותם של גבישי סידן.

דלקת מפרקים ניוונית (OA) היא מחלת מפרקים כרונית מורכבת ורב-גורמית, עם שכיחות עולמית מאוגדת של 16% בנבדקים בני 15 ומעלה, ו-23% בנבדקים בני 40ומעלה. התחלואה ב-OA צפויה לעלות עקב הזדקנות האוכלוסייה ועלייה בגורמי סיכון, כגון השמנת יתר ותסמונת מטבולית2.

בין הבעיות העיקריות הקשורות ל- OA הם הקושי באבחון המחלה בשלביה המוקדמים והטיפולים הזמינים כיום המוגבלים לניהול כאב ותרופות סימפטומטיות איטיות (SYSADOAs) כגון גליקוזאמינוגליקנים. האבחנה של OA מבוססת על תסמינים קליניים וממצאי הדמיה. עם זאת, חוסר המתאם בין שתי ההערכות עלול לגרום לעיכוב של שנים באבחון OA ובהתחלת הטיפול2. OA מאופי....

Log in or to access full content. Learn more about your institution’s access to JoVE content here

הפרוטוקול הנוכחי תואם את הנחיות ועדת האתיקה של בית החולים האוניברסיטאי פדובה. SF נאסף בהסכמת המטופל ממפרקי הברך של חולים שקיבלו ארתרוסנטזיס טיפולי לשיוף מפרקים בהצגתם הראשונית למרפאה או בתגובה להתלקחות דלקת פרקים. התוויות נגד להליך היו: קרישת דם, תרופות נוגדות קרישה, נגעים בעור, דרמטיטיס ?.......

Log in or to access full content. Learn more about your institution’s access to JoVE content here

מפרקים גדולים המושפעים על ידי OA הם לעתים קרובות נפוחים לייצר כמויות משמעותיות של SF, אשר מנוקזים באמצעות arthrocentesis15. המאפיינים המקרוסקופיים של SF המוערכים מיד לאחר arthrocentesis כוללים למעשה את הכמות, צבע, בהירות, צמיגות17. למרות הספציפיות הנמוכה שלהם, הם מספקים נתונים.......

Log in or to access full content. Learn more about your institution’s access to JoVE content here

ב- OA, ניתוח SF מסייע להגדיר מאפייני מחלה באמצעות צעדים פשוטים: ספירת לויקוציטים כוללת ודיפרנציאלית וחיפוש גבישים, כולל CPP ו- BCP. יתר על כן, זיהוי של גבישי MSU עשוי להדגיש תחלואה נלווית חשובה.

למרות עלויות נמוכות וביצוע פשוט, רגישות הבדיקות ואמינות התוצאות עשויות להיפגע בשל אנליס?.......

Log in or to access full content. Learn more about your institution’s access to JoVE content here

המחברים מבקשים להודות לפרופסור לאונרדו פונצי על חונכותו היקרה בתחום ניתוח נוזלים סינוביאליים ולבית החולים האוניברסיטאי פדובה על תמיכתו.

....

Log in or to access full content. Learn more about your institution’s access to JoVE content here

NameCompanyCatalog NumberComments
Alizarin red SMerckA5533For BCP crystal search
Burker chamberMerckBR718905For total white blood cell count
Cover glassesMerckC7931For microscopic examination 
EDTA tubesBD368861For SF collection 
Glass slides MerckS8902For crystal search
Lambda filter (compensator)Any Refer to microscope companyFor crystal identification 
Malassez-Potain pipetteArtiglass54830000For dilution of synovial fluid
Methylene blue solutionMerck3978For total white blood cell count
Polarized microscope Leica, Nikon, othersDepending on the model and companyFor complete synovial fluid analysis
Polarizing lensAny Refer to microscope companyFor crystal identification 
Testsimplet Waldeck14386Supravital staining for cell differentiation

  1. Cui, A., et al. Global, regional prevalence, incidence and risk factors of knee osteoarthritis in population-based studies. EClinicalMedicine. 29, 100587 (2020).
  2. Hunter, D. J., Bierma-Zeinstra, S. Osteoarthritis. Lancet. 393 (10182), 1745-1759 (2019).
  3. Mandell, B. F. . Synovial Fluid Analysis and the Evaluation of Patients with Arthritis. , (2022).
  4. Schmerling, R. H. Guidelines for the initial evaluation of the adult patient with acute musculoskeletal symptoms. Arthritis & Rheumatism. 39 (1), 1-8 (1996).
  5. Coakley, G., et al. RCGP and BSAC guidelines for management of the hot swollen joint in adults. Rheumatology. 45 (8), 1039-1041 (2006).
  6. Frallonardo, P., et al. Basic calcium phosphate and pyrophosphate crystals in early and late osteoarthritis: relationship with clinical indices and inflammation. Clinical Rheumatology. 37 (10), 2847-2853 (2018).
  7. Nalbant, S., et al. Synovial fluid features and their relations to osteoarthritis severity: new findings from sequential studies. Osteoarthritis Cartilage. 11 (1), 50-54 (2003).
  8. Fuerst, M., et al. Calcification of articular cartilage in human osteoarthritis. Arthritis & Rheumatism. 60 (9), 2694-2703 (2009).
  9. Campillo-Gimenez, L., et al. Inflammatory potential of four different phases of calcium pyrophosphate relies on NF-κB activation and MAPK pathways. Frontiers in Immunology. 9, 2248 (2018).
  10. Pazár, B. Basic calcium phosphate crystals induce monocyte/macrophage IL-1β secretion through the NLRP3 inflammasome in vitro. The Journal of Immunology. 186 (4), 2495-2502 (2011).
  11. Martín, M. J. A., et al. Automated cell count in body fluids: a review. Advances in Laboratory Medicine. 2, 149-161 (2021).
  12. Seghezzi, , et al. Optimization of cellular analysis of synovial fluids by optical microscopy and automated count using the Sysmex XN body fluid mode. Clinica Chimica Acta. 462, 41-48 (2016).
  13. Reginato, A. J., Maldonado, I., Reginato, A. M., Falasca, G. F., O'Connor, C. R. Supravital staining of synovial fluid with Testsimplets. Diagnostic Cytopathology. 8 (2), 147-152 (1992).
  14. Lumbreras, B., et al. Analysis for crystals in synovial fluid: training of the analysts results in high consistency. Annals of the Rheumatic Diseases. 64 (4), 612-615 (2005).
  15. Tieng, A., Franchin, G. Knee arthrocentesis in adults. Journal of Visualized Experiments. , e63135 (2022).
  16. Punzi, L., Oliviero, F. Arthrocentesis and synovial fluid analysis in clinical practice: value of sonography in difficult cases. Annals of the New York Academy of Sciences. 1154 (1), 152-158 (2009).
  17. Schumacher, H. R., Reginato, A. J. . Atlas of Synovial Fluid Analysis and Crystal Identification. , (1991).
  18. Mopin, A., Driss, V., Brinster, C. A. Detailed protocol for characterizing the murine C1498 cell line and its associated leukemia mouse model. Journal of Visualized Experiments. (116), e54270 (2016).
  19. Oliviero, F., Punzi, L. Basics of Polarized Light Microscopy. Synovial Fluid Analysis and the Evaluation of Patients with Arthritis. , 79-90 (2022).
  20. Paul, H., Reginato, A. J., Schumacher, H. R. Alizarin red S staining as a screening test to detect calcium compounds in synovial fluid. Arthritis & Rheumatism. 26 (2), 191-200 (1983).
  21. Favero, M., et al. Synovial fluid fetuin-A levels in patients affected by osteoarthritis with or without evidence of calcium crystals. Rheumatology. 58 (4), 729-730 (2019).
  22. Frallonardo, P., et al. Detection of calcium crystals in knee osteoarthritis synovial fluid: a comparison between polarized light and scanning electron microscopy. Journal of Clinical Rheumatology. 22 (7), 369-371 (2016).
  23. Peffers, M. J., Smagul, A., Anderson, J. R. Proteomic analysis of synovial fluid: current and potential uses to improve clinical outcomes. Expert Review of Proteomics. 16 (4), 287-302 (2019).

This article has been published

Video Coming Soon

JoVE Logo

Privacy

Terms of Use

Policies

Research

Education

ABOUT JoVE

Copyright © 2024 MyJoVE Corporation. All rights reserved