JoVE Logo
Faculty Resource Center

Sign In

Summary

Abstract

Introduction

Protocol

Representative Results

Discussion

Acknowledgements

Materials

References

Medicine

Анализ синовиальной жидкости для выявления остеоартроза

Published: October 20th, 2022

DOI:

10.3791/64351

1Rheumatology Unit, Department of Medicine-DIMED, University of Padova

Анализ синовиальной жидкости при проходящей, поляризованной и компенсированной световой микроскопии используется для оценки воспалительной или невоспалительной природы образца с помощью простых шагов. Это особенно полезно при остеоартрите для обнаружения кристаллов кальция и выявления более тяжелой подгруппы остеоартрита.

Анализ синовиальной жидкости (СФ) важен для диагностики остеоартрита (ОА). Макроскопические и микроскопические признаки, включая общее и дифференциальное количество лейкоцитов (WBC), помогают определить невоспалительную природу SF, которая является отличительной чертой ОА. У пациентов с ОА лейкоциты в образцах СФ обычно не превышают 2000 клеток на микролитр, а процент воспалительных клеток, таких как нейтрофилы, очень низок или отсутствует. Кристаллы кальция часто встречаются в СФ, собранных у пациентов с ОА. Хотя их роль в патогенезе ОА остается неясной, они были связаны с легким воспалительным процессом и более тяжелым прогрессированием заболевания. В последнее время кристаллы кальция были описаны как на ранних, так и на поздних стадиях ОА, что указывает на то, что они могут играть жизненно важную роль в диагностике различных клинических подмножеств ОА и фармакологического лечения. Общая цель анализа СФ при ОА двоякая: установить невоспалительную степень СФ и выделить присутствие кристаллов кальция.

Остеоартрит (ОА) является сложным и многофакторным хроническим заболеванием суставов, общая распространенность которого, по оценкам, составляет 16% у пациентов в возрасте 15 лет и старше и 23% у пациентов в возрасте 40 лет и старше1 года. Ожидается, что заболеваемость ОА увеличится из-за старения населения и увеличения факторов риска, таких как ожирение и метаболический синдром2.

Среди основных проблем, связанных с ОА, - сложность диагностики заболевания на ранних стадиях и доступные в настоящее время методы лечения, ограниченные обезболиванием и симптоматическими препаратами медленного действ....

Log in or to access full content. Learn more about your institution’s access to JoVE content here

Настоящий протокол соответствует руководящим принципам Комитета по этике Университетской больницы Падуи. СФ собирали с согласия пациента из коленных суставов пациентов, получавших терапевтический артроцентез по поводу выпота в суставах при их первичном обращении в клинику или в отв.......

Log in or to access full content. Learn more about your institution’s access to JoVE content here

Крупные суставы, пораженные ОА, часто опухают и производят значительное количество SF, которые дренируются с помощью артроцентеза15. Макроскопические характеристики SF, оцениваемые сразу после артроцентеза, по существу включают количество, цвет, прозрачность и вязкост?.......

Log in or to access full content. Learn more about your institution’s access to JoVE content here

При ОА SF-анализ помогает определить характеристики заболевания с помощью простых шагов: общего и дифференциального количества лейкоцитов и поиска кристаллов, включая CPP и BCP. Кроме того, обнаружение кристаллов МГУ может выявить важные сопутствующие заболевания.

Несмотр?.......

Log in or to access full content. Learn more about your institution’s access to JoVE content here

Авторы выражают благодарность профессору Леонардо Пунци за его ценное наставничество в области анализа синовиальной жидкости и Университетской больнице Падуи за поддержку.

....

Log in or to access full content. Learn more about your institution’s access to JoVE content here

NameCompanyCatalog NumberComments
Alizarin red SMerckA5533For BCP crystal search
Burker chamberMerckBR718905For total white blood cell count
Cover glassesMerckC7931For microscopic examination 
EDTA tubesBD368861For SF collection 
Glass slides MerckS8902For crystal search
Lambda filter (compensator)Any Refer to microscope companyFor crystal identification 
Malassez-Potain pipetteArtiglass54830000For dilution of synovial fluid
Methylene blue solutionMerck3978For total white blood cell count
Polarized microscope Leica, Nikon, othersDepending on the model and companyFor complete synovial fluid analysis
Polarizing lensAny Refer to microscope companyFor crystal identification 
Testsimplet Waldeck14386Supravital staining for cell differentiation

  1. Cui, A., et al. Global, regional prevalence, incidence and risk factors of knee osteoarthritis in population-based studies. EClinicalMedicine. 29, 100587 (2020).
  2. Hunter, D. J., Bierma-Zeinstra, S. Osteoarthritis. Lancet. 393 (10182), 1745-1759 (2019).
  3. Mandell, B. F. . Synovial Fluid Analysis and the Evaluation of Patients with Arthritis. , (2022).
  4. Schmerling, R. H. Guidelines for the initial evaluation of the adult patient with acute musculoskeletal symptoms. Arthritis & Rheumatism. 39 (1), 1-8 (1996).
  5. Coakley, G., et al. RCGP and BSAC guidelines for management of the hot swollen joint in adults. Rheumatology. 45 (8), 1039-1041 (2006).
  6. Frallonardo, P., et al. Basic calcium phosphate and pyrophosphate crystals in early and late osteoarthritis: relationship with clinical indices and inflammation. Clinical Rheumatology. 37 (10), 2847-2853 (2018).
  7. Nalbant, S., et al. Synovial fluid features and their relations to osteoarthritis severity: new findings from sequential studies. Osteoarthritis Cartilage. 11 (1), 50-54 (2003).
  8. Fuerst, M., et al. Calcification of articular cartilage in human osteoarthritis. Arthritis & Rheumatism. 60 (9), 2694-2703 (2009).
  9. Campillo-Gimenez, L., et al. Inflammatory potential of four different phases of calcium pyrophosphate relies on NF-κB activation and MAPK pathways. Frontiers in Immunology. 9, 2248 (2018).
  10. Pazár, B. Basic calcium phosphate crystals induce monocyte/macrophage IL-1β secretion through the NLRP3 inflammasome in vitro. The Journal of Immunology. 186 (4), 2495-2502 (2011).
  11. Martín, M. J. A., et al. Automated cell count in body fluids: a review. Advances in Laboratory Medicine. 2, 149-161 (2021).
  12. Seghezzi, , et al. Optimization of cellular analysis of synovial fluids by optical microscopy and automated count using the Sysmex XN body fluid mode. Clinica Chimica Acta. 462, 41-48 (2016).
  13. Reginato, A. J., Maldonado, I., Reginato, A. M., Falasca, G. F., O'Connor, C. R. Supravital staining of synovial fluid with Testsimplets. Diagnostic Cytopathology. 8 (2), 147-152 (1992).
  14. Lumbreras, B., et al. Analysis for crystals in synovial fluid: training of the analysts results in high consistency. Annals of the Rheumatic Diseases. 64 (4), 612-615 (2005).
  15. Tieng, A., Franchin, G. Knee arthrocentesis in adults. Journal of Visualized Experiments. , e63135 (2022).
  16. Punzi, L., Oliviero, F. Arthrocentesis and synovial fluid analysis in clinical practice: value of sonography in difficult cases. Annals of the New York Academy of Sciences. 1154 (1), 152-158 (2009).
  17. Schumacher, H. R., Reginato, A. J. . Atlas of Synovial Fluid Analysis and Crystal Identification. , (1991).
  18. Mopin, A., Driss, V., Brinster, C. A. Detailed protocol for characterizing the murine C1498 cell line and its associated leukemia mouse model. Journal of Visualized Experiments. (116), e54270 (2016).
  19. Oliviero, F., Punzi, L. Basics of Polarized Light Microscopy. Synovial Fluid Analysis and the Evaluation of Patients with Arthritis. , 79-90 (2022).
  20. Paul, H., Reginato, A. J., Schumacher, H. R. Alizarin red S staining as a screening test to detect calcium compounds in synovial fluid. Arthritis & Rheumatism. 26 (2), 191-200 (1983).
  21. Favero, M., et al. Synovial fluid fetuin-A levels in patients affected by osteoarthritis with or without evidence of calcium crystals. Rheumatology. 58 (4), 729-730 (2019).
  22. Frallonardo, P., et al. Detection of calcium crystals in knee osteoarthritis synovial fluid: a comparison between polarized light and scanning electron microscopy. Journal of Clinical Rheumatology. 22 (7), 369-371 (2016).
  23. Peffers, M. J., Smagul, A., Anderson, J. R. Proteomic analysis of synovial fluid: current and potential uses to improve clinical outcomes. Expert Review of Proteomics. 16 (4), 287-302 (2019).

This article has been published

Video Coming Soon

JoVE Logo

Privacy

Terms of Use

Policies

Research

Education

ABOUT JoVE

Copyright © 2024 MyJoVE Corporation. All rights reserved