JoVE Logo
Faculty Resource Center

Sign In

Summary

Abstract

Introduction

Protocol

Representative Results

Discussion

Acknowledgements

Materials

References

Medicine

Osteoartriti Tanımlamak için Sinovyal Sıvı Analizi

Published: October 20th, 2022

DOI:

10.3791/64351

1Rheumatology Unit, Department of Medicine-DIMED, University of Padova

İletilen, polarize ve kompanse ışık mikroskobu altındaki sinovyal sıvı analizi, bir numunenin enflamatuar veya enflamatuar olmayan doğasını basit adımlarla değerlendirmek için kullanılır. Osteoartritte kalsiyum kristallerini tespit etmek ve osteoartritin daha ciddi bir alt kümesini tanımlamak için özellikle yararlıdır.

Sinovyal sıvı (SF) analizi osteoartrit (OA) tanısında önemlidir. Toplam ve diferansiyel beyaz kan hücresi (WBC) sayısı da dahil olmak üzere makroskobik ve mikroskobik özellikler, OA'nın ayırt edici özelliği olan SF'nin enflamatuar olmayan doğasını tanımlamaya yardımcı olur. OA'lı hastalarda, SF örneklerinde WBC genellikle mikrolitre başına 2000 hücreyi geçmez ve nötrofiller gibi enflamatuar hücrelerin yüzdesi çok düşüktür veya yoktur. OA hastalarından toplanan SF'lerde kalsiyum kristalleri sık görülür. OA patogenezindeki rolleri tam olarak bilinmemekle birlikte, hafif inflamatuar süreç ve daha ciddi hastalık progresyonu ile ilişkilendirilmişlerdir. Son zamanlarda, kalsiyum kristalleri OA'nın hem erken hem de geç evrelerinde tanımlanmıştır, bu da OA'nın farklı klinik alt kümelerinin ve farmakolojik tedavinin teşhisinde hayati bir rol oynayabileceklerini göstermektedir. OA'da SF analizinin genel amacı iki yönlüdür: SF'nin enflamatuar olmayan derecesini belirlemek ve kalsiyum kristallerinin varlığını vurgulamak.

Osteoartrit (OA) kompleks ve multifaktöriyel kronik eklem hastalığıdır ve 15 yaş ve üstü kişilerde %16, 40 yaşve üstü kişilerde %23 gibi tahmini bir küresel prevalansı vardır. OA insidansının yaşlanan bir popülasyon ve obezite ve metabolik sendrom gibi risk faktörlerindeki artışa bağlı olarak artması beklenmektedir2.

OA ile ilişkili başlıca sorunlar arasında, hastalığın erken evrelerinde teşhis edilmesindeki zorluk ve şu anda mevcut tedaviler, ağrı yönetimi ve glikozaminoglikanlar gibi semptomatik yavaş etkili ilaçlar (SYSADOA'lar) ile sınırlıdır. OA tanısı klinik semptomlara ve görüntüleme bu....

Log in or to access full content. Learn more about your institution’s access to JoVE content here

Bu protokol, Padova Üniversitesi Hastanesi Etik Kurulu'nun yönergelerine uygundur. SF, eklem efüzyonu için terapötik artrosentez alan hastaların diz eklemlerinden kliniğe ilk sunumlarında veya artritik bir alevlenmeye yanıt olarak hasta onayı ile toplandı. Prosedüre kontrendikasyonlar şunlardı: koagülopati, antikoagülan ilaçlar, cilt lezyonları, dermatit veya eklemin üzerinde bulunan selülit. Tüm SF örnekleri tanımlandı.

1. Sinovyal sıvı preparatı

.......

Log in or to access full content. Learn more about your institution’s access to JoVE content here

OA'dan etkilenen büyük eklemler sıklıkla şişer ve artrosentez15 yoluyla boşaltılan önemli miktarda SF üretir. Artrosentezden hemen sonra değerlendirilen SF'nin makroskopik özellikleri esas olarak miktar, renk, berraklık ve viskoziteyi içerir17. Düşük özgüllüklerine rağmen, inflamasyon derecesi hakkında ön veri sağlarlar. Renk, SF hücreselliğine ve hücre dışı matriks makromoleküllerinin parçalanma derecesine bağlıdır. OA'lı hastal.......

Log in or to access full content. Learn more about your institution’s access to JoVE content here

OA'da, SF analizi basit adımlarla hastalık özelliklerini tanımlamaya yardımcı olur: toplam ve diferansiyel lökosit sayıları ve CPP ve BCP dahil olmak üzere kristallerin aranması. Ayrıca, MSU kristallerinin saptanması önemli komorbiditeleri vurgulayabilir.

Düşük maliyetlere ve basit uygulamaya rağmen, testlerin duyarlılığı ve sonuçların güvenilirliği, deneyimsiz analistler nedeniyle etkilenebilir - esas olarak kristal tanımlama ile ilgili olduğu için. Analistin eği.......

Log in or to access full content. Learn more about your institution’s access to JoVE content here

Yazarlar, Profesör Leonardo Punzi'ye sinovyal sıvı analizi alanındaki değerli mentorluğu için ve Padova Üniversitesi Hastanesi'ne desteği için teşekkür etmek istiyor.

....

Log in or to access full content. Learn more about your institution’s access to JoVE content here

NameCompanyCatalog NumberComments
Alizarin red SMerckA5533For BCP crystal search
Burker chamberMerckBR718905For total white blood cell count
Cover glassesMerckC7931For microscopic examination 
EDTA tubesBD368861For SF collection 
Glass slides MerckS8902For crystal search
Lambda filter (compensator)Any Refer to microscope companyFor crystal identification 
Malassez-Potain pipetteArtiglass54830000For dilution of synovial fluid
Methylene blue solutionMerck3978For total white blood cell count
Polarized microscope Leica, Nikon, othersDepending on the model and companyFor complete synovial fluid analysis
Polarizing lensAny Refer to microscope companyFor crystal identification 
Testsimplet Waldeck14386Supravital staining for cell differentiation

  1. Cui, A., et al. Global, regional prevalence, incidence and risk factors of knee osteoarthritis in population-based studies. EClinicalMedicine. 29, 100587 (2020).
  2. Hunter, D. J., Bierma-Zeinstra, S. Osteoarthritis. Lancet. 393 (10182), 1745-1759 (2019).
  3. Mandell, B. F. . Synovial Fluid Analysis and the Evaluation of Patients with Arthritis. , (2022).
  4. Schmerling, R. H. Guidelines for the initial evaluation of the adult patient with acute musculoskeletal symptoms. Arthritis & Rheumatism. 39 (1), 1-8 (1996).
  5. Coakley, G., et al. RCGP and BSAC guidelines for management of the hot swollen joint in adults. Rheumatology. 45 (8), 1039-1041 (2006).
  6. Frallonardo, P., et al. Basic calcium phosphate and pyrophosphate crystals in early and late osteoarthritis: relationship with clinical indices and inflammation. Clinical Rheumatology. 37 (10), 2847-2853 (2018).
  7. Nalbant, S., et al. Synovial fluid features and their relations to osteoarthritis severity: new findings from sequential studies. Osteoarthritis Cartilage. 11 (1), 50-54 (2003).
  8. Fuerst, M., et al. Calcification of articular cartilage in human osteoarthritis. Arthritis & Rheumatism. 60 (9), 2694-2703 (2009).
  9. Campillo-Gimenez, L., et al. Inflammatory potential of four different phases of calcium pyrophosphate relies on NF-κB activation and MAPK pathways. Frontiers in Immunology. 9, 2248 (2018).
  10. Pazár, B. Basic calcium phosphate crystals induce monocyte/macrophage IL-1β secretion through the NLRP3 inflammasome in vitro. The Journal of Immunology. 186 (4), 2495-2502 (2011).
  11. Martín, M. J. A., et al. Automated cell count in body fluids: a review. Advances in Laboratory Medicine. 2, 149-161 (2021).
  12. Seghezzi, , et al. Optimization of cellular analysis of synovial fluids by optical microscopy and automated count using the Sysmex XN body fluid mode. Clinica Chimica Acta. 462, 41-48 (2016).
  13. Reginato, A. J., Maldonado, I., Reginato, A. M., Falasca, G. F., O'Connor, C. R. Supravital staining of synovial fluid with Testsimplets. Diagnostic Cytopathology. 8 (2), 147-152 (1992).
  14. Lumbreras, B., et al. Analysis for crystals in synovial fluid: training of the analysts results in high consistency. Annals of the Rheumatic Diseases. 64 (4), 612-615 (2005).
  15. Tieng, A., Franchin, G. Knee arthrocentesis in adults. Journal of Visualized Experiments. , e63135 (2022).
  16. Punzi, L., Oliviero, F. Arthrocentesis and synovial fluid analysis in clinical practice: value of sonography in difficult cases. Annals of the New York Academy of Sciences. 1154 (1), 152-158 (2009).
  17. Schumacher, H. R., Reginato, A. J. . Atlas of Synovial Fluid Analysis and Crystal Identification. , (1991).
  18. Mopin, A., Driss, V., Brinster, C. A. Detailed protocol for characterizing the murine C1498 cell line and its associated leukemia mouse model. Journal of Visualized Experiments. (116), e54270 (2016).
  19. Oliviero, F., Punzi, L. Basics of Polarized Light Microscopy. Synovial Fluid Analysis and the Evaluation of Patients with Arthritis. , 79-90 (2022).
  20. Paul, H., Reginato, A. J., Schumacher, H. R. Alizarin red S staining as a screening test to detect calcium compounds in synovial fluid. Arthritis & Rheumatism. 26 (2), 191-200 (1983).
  21. Favero, M., et al. Synovial fluid fetuin-A levels in patients affected by osteoarthritis with or without evidence of calcium crystals. Rheumatology. 58 (4), 729-730 (2019).
  22. Frallonardo, P., et al. Detection of calcium crystals in knee osteoarthritis synovial fluid: a comparison between polarized light and scanning electron microscopy. Journal of Clinical Rheumatology. 22 (7), 369-371 (2016).
  23. Peffers, M. J., Smagul, A., Anderson, J. R. Proteomic analysis of synovial fluid: current and potential uses to improve clinical outcomes. Expert Review of Proteomics. 16 (4), 287-302 (2019).

This article has been published

Video Coming Soon

JoVE Logo

Privacy

Terms of Use

Policies

Research

Education

ABOUT JoVE

Copyright © 2024 MyJoVE Corporation. All rights reserved