एक्स विवो ऑर्गेनोटाइपिक स्यूडोमाइक्सोमा पेरिटोनी ट्यूमर स्लाइस की संस्कृति और इमेजिंग मानव ट्यूमर नमूने से

हम मानव कैंसर के उत्पादन, संस्कृति और विज़ुअलाइज़ेशन के लिए एक प्रोटोकॉल का वर्णन करते हैं, जो पेरिटोनियल सतहों पर मेटास्टेसाइज्ड होते हैं। निकाले गए ट्यूमर के नमूनों को एक वाइब्रेटोम का उपयोग करके काटा जाता है और ऑक्सीजन और व्यवहार्यता में वृद्धि के लिए पारगम्य आवेषण पर सुसंस्कृत किया जाता है, इसके बाद कॉन्फोकल माइक्रोस्कोपी और फ्लो साइटोमेट्री का उपयोग करके इमेजिंग और डाउनस्ट्रीम विश्लेषण किया जाता है।

स्यूडोमाइक्सोमा पेरिटोनी (पीएमपी) एक दुर्लभ स्थिति है जो एक श्लेष्म प्राथमिक ट्यूमर के प्रसार और पेरिटोनियल गुहा में म्यूसिन-स्रावित ट्यूमर कोशिकाओं के परिणामस्वरूप संचय के परिणामस्वरूप होती है। पीएमपी विभिन्न प्रकार के कैंसर से उत्पन्न हो सकता है, जिसमें परिशिष्ट, डिम्बग्रंथि और कोलोरेक्टल शामिल हैं, हालांकि परिशिष्ट नियोप्लाज्म अब तक का सबसे आम एटियलजि है। पीएमपी अपनी (1) दुर्लभता, (2) सीमित मुराइन मॉडल, और (3) श्लेष्म, एककोशिकीय ऊतक विज्ञान के कारण अध्ययन करना चुनौतीपूर्ण है। यहां प्रस्तुत विधि एक तैयारी में रोगी-व्युत्पन्न पूर्व विवो ऑर्गेनोटाइपिक स्लाइस का उपयोग करके इन ट्यूमर प्रकारों के वास्तविक समय के विज़ुअलाइज़ेशन और पूछताछ की अनुमति देती है जहां ट्यूमर माइक्रोएन्वायरमेंट (टीएमई) बरकरार रहता है। इस प्रोटोकॉल में, हम पहले एक विब्राटोम और बाद में दीर्घकालिक संस्कृति का उपयोग करके ट्यूमर स्लाइस की तैयारी का वर्णन करते हैं। दूसरा, हम ट्यूमर स्लाइस के कॉन्फोकल इमेजिंग का वर्णन करते हैं और व्यवहार्यता, कैल्शियम इमेजिंग और स्थानीय प्रसार के कार्यात्मक रीडआउट की निगरानी कैसे करें। संक्षेप में, स्लाइस इमेजिंग रंगों से भरे होते हैं और एक इमेजिंग कक्ष में रखे जाते हैं जिन्हें कॉन्फोकल माइक्रोस्कोप पर रखा जा सकता है। प्रारंभिक व्यवहार्यता और सेलुलर कार्यक्षमता का आकलन करने के लिए टाइम-लैप्स वीडियो और कॉन्फोकल छवियों का उपयोग किया जाता है। यह प्रक्रिया टीएमई में ट्रांसलेशनल सेलुलर आंदोलन और पैराक्रिन सिग्नलिंग इंटरैक्शन की भी पड़ताल करती है। अंत में, हम प्रवाह साइटोमेट्री विश्लेषण के लिए उपयोग किए जाने वाले ट्यूमर स्लाइस के लिए एक पृथक्करण प्रोटोकॉल का वर्णन करते हैं। मात्रात्मक प्रवाह साइटोमेट्री विश्लेषण का उपयोग प्रतिरक्षा परिदृश्य और उपकला कोशिका सामग्री के भीतर होने वाले परिवर्तनों को निर्धारित करने के लिए बेंच-टू-बेडसाइड चिकित्सीय परीक्षण के लिए किया जा सकता है।

स्यूडोमाइक्सोमा पेरिटोनी (पीएमपी) दुर्लभ सिंड्रोम है जिसमें प्रति वर्ष प्रति मिलियन लोगों पर 1 की घटना दर^होती है। अधिकांश पीएमपी मामले परिशिष्ट नियोप्लाज्म से मेटास्टेस के कारण होते हैं। यह देखते हुए कि चूहों में मानव जैसा अपेंडिक्स नहीं होता है, इस प्रकार के कैंसर का मॉडलिंग बेहद चुनौतीपूर्ण रहता है। जबकि प्राथमिक रोग अक्सर सर्जिकल रिसेक्शन द्वारा इलाज योग्य होता है, मेटास्टैटिक बीमारी के लिए उपचार के विकल्प सीमित होते हैं। इसलिए, इस उपन्यास ऑर्गेनोटाइपिक स्लाइस मॉडल को विकसित करने का तर्क पीएमपी के पैथोबायोलॉजी का अध्ययन करना है। आज तक, कोई परिशिष्ट ऑर्गेनॉइड मॉडल नहीं हैं जिन्हें हमेशा सुसंस्कृत किया जा सकता है; हालांकि, एक हालिया मॉडल को चि....

कैलिफोर्निया विश्वविद्यालय, सैन डिएगो में आईआरबी-अनुमोदित प्रोटोकॉल के तहत सभी ऊतकों की पहचान और अधिग्रहण किया गया था।

1. ऊतक प्रसंस्करण और संस्कृति के लिए मानव पीएमपी ऊतकों की तैयारी.......

संक्षेप में, पीएमपी से मानव ट्यूमर के नमूने आईआरबी-अनुमोदित प्रोटोकॉल के तहत प्राप्त किए जाते हैं। ऊतक को तैयार किया जाता है, सूक्ष्म-विच्छेदित किया जाता है, और एक विब्राटोम का उपयोग करके काटने के लिए ए.......

यह पांडुलिपि एक ऐसी तकनीक का वर्णन करती है जिसका उपयोग मानव स्यूडोमाइक्सोमा पेरिटोनी (पीएमपी) ट्यूमर नमूनों की संस्कृति, पूछताछ और विश्लेषण के लिए किया जा सकता है। हमने ट्यूमर प्रतिरक्षा माइक्रोएन्व.......

लेखक माइक्रोस्कोप यूसीएसडी विशेष कैंसर सहायता केंद्र पी 30 अनुदान 2पी 30सीए023100 के साथ मदद के लिए मूर्स कैंसर सेंटर इमेजिंग कोर सुविधा से केर्सी पेस्टोनजामास्प को धन्यवाद देना चाहते हैं। इस काम को जोवे प्रकाशन अनुदान (जेआरडब्ल्यू) के साथ-साथ एलिजाबेथ और एड क्रेमर्स की संपत्ति, यूस्के फैमिली फाउंडेशन, गैस्ट्रोइंटेस्टाइनल कैंसर रिसर्च फंड और पेरिटोनियल मेटास्टेसिस रिसर्च फंड (एएमएल) से उदार उपहार भी दिए गए थे।