JoVE Logo

Sign In

A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.

Abstract

Neuroscience

Ex vivo OCT-baseret multimodal billeddannelse af menneskelige donorøjne til forskning i aldersrelateret makuladegeneration

Published: May 26th, 2023

DOI:

10.3791/65240

1Department of Ophthalmology and Visual Sciences, University of Alabama at Birmingham Heersink School of Medicine, 2Department of Ophthalmology, University Hospital of Zurich, 3Vitreous Retina Macula Consultants of New York, 4Department of Ophthalmology, New York University Grossman School of Medicine, 5Advancing Sight Network, 6Department of Ophthalmology, University Hospital Bonn

* These authors contributed equally

Abstract

En progressionssekvens for aldersrelateret makuladegeneration (AMD) lært af optisk kohærenstomografi (OCT) -baseret multimodal (MMI) klinisk billeddannelse kunne tilføje prognostisk værdi til laboratoriefund. I dette arbejde blev ex vivo OCT og MMI anvendt på humane donorøjne før retinal vævssektionering. Øjnene blev genvundet fra ikke-diabetiske hvide donorer i alderen ≥80 år med en død-til-bevaringstid (DtoP) på ≤6 timer. Globerne blev genfundet på stedet, scoret med en 18 mm trephin for at lette hornhindefjernelsen og nedsænket i bufret 4% paraformaldehyd. Farvefundusbilleder blev erhvervet efter fjernelse af forreste segment med et dissekeromfang og et spejlreflekskamera ved hjælp af trans-, epi- og flashbelysning ved tre forstørrelser. Globerne blev placeret i en buffer i et specialdesignet kammer med en 60 dioptrilinse. De blev afbildet med spektraldomæne OCT (30 ° makulaterning, 30 μm afstand, gennemsnit = 25), nær-infrarød reflektans, 488 nm autofluorescens og 787 nm autofluorescens. AMD-øjnene viste en ændring i retinale pigmentepitel (RPE) med drusen eller subretinale drusenoidaflejringer (SDD'er), med eller uden neovaskularisering og uden tegn på andre årsager. Mellem juni 2016 og september 2017 blev 94 højre øjne og 90 venstre øjne genoprettet (DtoP: 3,9 ± 1,0 timer). Af de 184 øjne havde 40,2% AMD, herunder tidlig mellemliggende (22,8%), atrofisk (7,6%) og neovaskulær (9,8%) AMD, og 39,7% havde unremarkable makulaer. Drusen, SDD'er, hyperreflekterende foci, atrofi og fibrovaskulære ar blev identificeret ved hjælp af OCT. Artefakter omfattede vævsopacificering, løsrivelser (bacillær, retinal, RPE, choroidal), foveal cystisk forandring, en bølgende RPE og mekanisk skade. For at styre kryo-sektioneringen blev OCT-volumener brugt til at finde fovea og optisk nervehoved landemærker og specifikke patologier. Ex vivo-mængderne blev registreret med in vivo-volumenerne ved at vælge referencefunktionen til øjensporing. Ex vivo-synligheden af den patologi, der ses in vivo , afhænger af bevaringskvaliteten. Inden for 16 måneder blev 75 hurtige DtoP-donorøjne på alle stadier af AMD genoprettet og iscenesat ved hjælp af kliniske MMI-metoder.

Explore More Videos

Neurovidenskab

This article has been published

Video Coming Soon

JoVE Logo

Privacy

Terms of Use

Policies

Research

Education

ABOUT JoVE

Copyright © 2024 MyJoVE Corporation. All rights reserved