Sign In

A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.

Abstract

Neuroscience

Ex Vivo OCT-gebaseerde multimodale beeldvorming van menselijke donorogen voor onderzoek naar leeftijdsgebonden maculaire degeneratie

Published: May 26th, 2023

DOI:

10.3791/65240

* These authors contributed equally

Abstract

Een progressiesequentie voor leeftijdsgebonden maculaire degeneratie (AMD) geleerd van op optische coherentie tomografie (OCT) gebaseerde multimodale (MMI) klinische beeldvorming zou prognostische waarde kunnen toevoegen aan laboratoriumbevindingen. In dit werk werden ex vivo OCT en MMI toegepast op menselijke donorogen voorafgaand aan retinale weefselsectie. De ogen werden hersteld van niet-diabetische witte donoren van ≥80 jaar oud, met een death-to-preservation time (DtoP) van ≤6 uur. De bollen werden ter plaatse teruggevonden, gescoord met een trephine van 18 mm om het verwijderen van het hoornvlies te vergemakkelijken en ondergedompeld in gebufferd 4% paraformaldehyde. Kleurenfundusbeelden werden verkregen na verwijdering van het voorste segment met een ontleedkijker en een spiegelreflexcamera met behulp van trans-, epi- en flitsverlichting bij drie vergrotingen. De bollen werden in een buffer geplaatst in een speciaal ontworpen kamer met een 60 dioptrie lens. Ze werden afgebeeld met spectraaldomein OCT (30° maculakubus, 30 μm afstand, gemiddeld = 25), nabij-infrarode reflectie, 488 nm autofluorescentie en 787 nm autofluorescentie. De AMD-ogen vertoonden een verandering in het retinale pigmentepitheel (RPE), met drusen of subretinale drusenoïde afzettingen (SDD's), met of zonder neovascularisatie en zonder bewijs van andere oorzaken. Tussen juni 2016 en september 2017 werden 94 rechterogen en 90 linkerogen hersteld (DtoP: 3,9 ± 1,0 uur). Van de 184 ogen had 40,2% AMD, inclusief vroege intermediaire (22,8%), atrofische (7,6%) en neovasculaire (9,8%) AMD, en 39,7% had onopvallende macula's. Drusen, SDD's, hyperreflecterende foci, atrofie en fibrovasculaire littekens werden geïdentificeerd met behulp van OCT. Artefacten omvatten weefselopacificatie, loslatingen (bacillair, retinaal, RPE, choroïdaal), foveale cystische verandering, een golvende RPE en mechanische schade. Om de cryo-sectie te begeleiden, werden OCT-volumes gebruikt om de fovea- en oogzenuwkoporiëntatiepunten en specifieke pathologieën te vinden. De ex vivo volumes werden geregistreerd bij de in vivo volumes door de referentiefunctie voor eye tracking te selecteren. De ex vivo zichtbaarheid van de in vivo waargenomen pathologie hangt af van de conserveringskwaliteit. Binnen 16 maanden werden 75 snelle DtoP-donorogen in alle stadia van AMD hersteld en geënsceneerd met behulp van klinische MMI-methoden.

Explore More Videos

Neuroscience

This article has been published

Video Coming Soon

JoVE Logo

Privacy

Terms of Use

Policies

Research

Education

ABOUT JoVE

Copyright © 2024 MyJoVE Corporation. All rights reserved