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Immunology and Infection

Anopheles 모기의 정자 형성을 연구하기 위한 전체 장착 형광 In Situ 교잡

Published: May 26th, 2023

DOI:

10.3791/65356

* These authors contributed equally

Abstract

정자 형성은 이배체 세포가 연속적인 유사분열 및 감수분열 분열을 겪은 후 반수체 정자를 형성하기 위해 큰 구조적 변화를 겪는 복잡한 생물학적 과정입니다. 생물학적 측면 외에도 정자 형성을 연구하는 것은 유전자 드라이브 및 합성 성비 왜곡제와 같은 유전 기술을 이해하고 개발하는 데 가장 중요하며, 이는 각각 멘델 유전과 정자 성비를 변경하여 해충 곤충 개체수를 통제하는 데 사용할 수 있습니다. 이러한 기술은 실험실 환경에서 매우 유망한 것으로 입증되었으며 말라리아 매개체인 Anopheles 모기의 야생 개체군을 통제하는 데 잠재적으로 사용될 수 있습니다. 고환 해부학의 단순성과 의학적 중요성으로 인해 사하라 사막 이남 아프리카의 주요 말라리아 매개체인 Anopheles gambiae는 정자 형성을 연구하기 위한 좋은 세포학적 모델을 나타냅니다. 이 프로토콜은 X 및 Y 염색체를 특이적으로 염색하는 형광 프로브를 사용하여 정자 형성을 통한 세포 핵 구조의 극적인 변화를 연구하기 위해 전체 장착 형광 in situ hybridization(WFISH)을 사용하는 방법을 설명합니다. FISH는 일반적으로 유사분열 또는 감수분열 염색체를 노출시키고 형광 프로브로 특정 게놈 영역을 염색할 수 있도록 생식 기관을 파괴해야 합니다. WFISH는 반복적인 DNA 염기서열을 표적으로 하는 형광 프로브의 우수한 신호 검출과 함께 고환의 본래 세포학적 구조를 보존할 수 있습니다. 이를 통해 연구자들은 장기의 구조를 따라 감수분열을 겪는 세포의 염색체 거동 변화를 추적할 수 있으며, 이 과정에서 각 단계를 명확하게 구별할 수 있습니다. 이 기술은 염색체 감수분열 쌍을 연구하고 예를 들어 합성 성비 왜곡자, 하이브리드 남성 불임 및 정자 형성에 관여하는 유전자의 녹아웃과 관련된 세포학적 표현형을 조사하는 데 특히 유용할 수 있습니다.

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