Anofel Sivrisineklerinde Spermatogenezi İncelemek için Tam Montajlı Floresan In Situ Hibridizasyon

Spermatogenez, diploid hücrelerin ardışık mitotik ve mayotik bölünmeye uğradığı ve ardından haploid spermatozoa oluşturmak için büyük yapısal değişikliklerin izlediği karmaşık bir biyolojik süreçtir. Biyolojik yönün yanı sıra, spermatogenezin incelenmesi, sırasıyla Mendel kalıtımını ve sperm cinsiyet oranını değiştirerek, zararlı böcek popülasyonlarını kontrol etmek için kullanılabilecek gen sürücüsü ve sentetik cinsiyet oranı bozucuları gibi genetik teknolojileri anlamak ve geliştirmek için büyük önem taşımaktadır. Bu teknolojilerin laboratuvar ortamlarında çok umut verici olduğu kanıtlanmıştır ve potansiyel olarak sıtma vektörleri olan Anopheles sivrisineklerinin vahşi popülasyonlarını kontrol etmek için kullanılabilir. Testis anatomisinin basitliği ve tıbbi önemi nedeniyle, Sahra altı Afrika'da önemli bir sıtma vektörü olan Anopheles gambiae, spermatogenezi incelemek için iyi bir sitolojik modeli temsil eder. Bu protokol, X ve Y kromozomlarını spesifik olarak boyayan floresan problar kullanılarak spermatogenez yoluyla hücre nükleer yapısındaki dramatik değişiklikleri incelemek için tam montajlı floresan in situ hibridizasyonun (WFISH) nasıl kullanılabileceğini açıklar. FISH genellikle mitotik veya mayotik kromozomları ortaya çıkarmak için üreme organlarının parçalanmasını gerektirir ve floresan problarla spesifik genomik bölgelerin boyanmasına izin verir. WFISH, tekrarlayan DNA dizilerini hedefleyen floresan problardan iyi bir sinyal algılama seviyesi ile birlikte testisin doğal sitolojik yapısının korunmasını sağlar. Bu, araştırmacıların, sürecin her aşamasının açıkça ayırt edilebildiği organın yapısı boyunca mayoz bölünme geçiren hücrelerin kromozomal davranışındaki değişiklikleri takip etmelerini sağlar. Bu teknik, kromozom mayotik eşleşmesini incelemek ve örneğin sentetik cinsiyet oranı bozucuları, hibrit erkek kısırlığı ve spermatogenezde yer alan genlerin nakavt edilmesi ile ilişkili sitolojik fenotipleri araştırmak için özellikle yararlı olabilir.