الحفاظ على أنواع الأنسجة والخلايا المختلفة للعين وتقييمها باستخدام نظام سوائع جديد بدون مضخة

تتطلب العديد من النماذج في المختبر المستخدمة للتحقيق في وظيفة الأنسجة وبيولوجيا الخلية تدفقا للوسائط لتوفير الأوكسجين الكافي وظروف الخلية المثلى اللازمة للحفاظ على الوظيفة والحيوية. وتحقيقا لهذه الغاية ، قمنا بتطوير نظام زراعة تدفق متعدد القنوات للحفاظ على الأنسجة والخلايا في الثقافة وتقييم الوظيفة والجدوى باستمرار إما عن طريق أجهزة الاستشعار في الخط و / أو جمع كسور التدفق الخارجي. يجمع النظام بين 8 قنوات ، والاستشعار البصري المستمر لمعدل استهلاك الأكسجين مع مجمع الكسر المدمج لقياس معدلات إنتاج المستقلبات وإفراز الهرمونات في وقت واحد. على الرغم من أنها قادرة على الحفاظ على مجموعة واسعة من نماذج الأنسجة والخلايا وتقييمها ، بما في ذلك الجزر الصغيرة والعضلات وما تحت المهاد ، فإننا هنا نصف مبادئ التشغيل والمستحضرات / البروتوكولات التجريبية التي استخدمناها للتحقيق في تنظيم الطاقة الحيوية لشبكية العين المعزولة للفأر ، ظهارة صبغة شبكية الفأر (RPE) - المشيمية الصلبة ، وخلايا RPE البشرية المستزرعة. أنتجت الابتكارات في تصميم النظام ، مثل تدفق السوائل بدون مضخة ، عملية مبسطة إلى حد كبير لنظام تدفق متعدد القنوات. يتم عرض مقاطع الفيديو والصور التي توضح كيفية تجميع وإعداد الأداة للتجربة وتحميل نماذج الأنسجة / الخلايا المختلفة في غرف الاندماج. بالإضافة إلى ذلك ، يتم تحديد ومناقشة المبادئ التوجيهية لاختيار شروط التجارب الخاصة بالبروتوكول والأنسجة ، بما في ذلك تحديد معدل التدفق الصحيح إلى نسبة الأنسجة للحصول على ظروف زراعة متسقة ومستقرة وتحديد دقيق لمعدلات الاستهلاك والإنتاج. إن الجمع بين الصيانة المثلى للأنسجة والتقييم في الوقت الفعلي لمعلمات متعددة ينتج عنه مجموعات بيانات غنية بالمعلومات سيكون لها فائدة كبيرة للبحث في فسيولوجيا العين واكتشاف الأدوية لعلاج ضعف البصر.