इमेजिंग माइक्रोप्लेट में प्री-कास्ट पॉली (एथिलीन ग्लाइकॉल) (पीईजी) हाइड्रोगेल का उपयोग करके एक संवहनी ओस्टोजेनिक अस्थि मज्जा आला की सरल स्थापना

अस्थि और अस्थि मज्जा अत्यधिक संवहनी और संरचनात्मक रूप से जटिल अंग हैं, और कैंसर और मेटास्टेसिस गठन के लिए साइटें हैं। इन विट्रो मॉडल हड्डी और अस्थि मज्जा-विशिष्ट कार्यों को पुन: परिभाषित करते हैं, जिसमें वैस्कुलराइजेशन भी शामिल है, जो ड्रग स्क्रीनिंग के साथ संगत हैं, अत्यधिक वांछनीय हैं। इस तरह के मॉडल इन विट्रो मॉडल में सरलीकृत, संरचनात्मक रूप से अप्रासंगिक दो-आयामी (2 डी) और विवो मॉडल में अधिक महंगे, नैतिक रूप से चुनौतीपूर्ण के बीच की खाई को पाट सकते हैं। यह लेख संवहनी, ओस्टोजेनिक अस्थि-मज्जा आला की पीढ़ी के लिए इंजीनियर पॉली (एथिलीन ग्लाइकॉल) (पीईजी) मैट्रिसेस के आधार पर एक नियंत्रणीय त्रि-आयामी (3 डी) सह-संस्कृति परख का वर्णन करता है। पीईजी मैट्रिक्स डिजाइन एक सरल सेल सीडिंग चरण के माध्यम से 3 डी सेल संस्कृतियों के विकास की अनुमति देता है जिसमें कोई एनकैप्सुलेशन की आवश्यकता नहीं होती है, इस प्रकार जटिल सह-संस्कृति प्रणालियों के विकास को सक्षम किया जाता है। इसके अलावा, मैट्रिसेस पारदर्शी हैं और ग्लास-बॉटम 96-वेल इमेजिंग प्लेटों पर पूर्व-कास्ट हैं, जिससे सिस्टम माइक्रोस्कोपी के लिए उपयुक्त है। यहां वर्णित परख के लिए, मानव अस्थि मज्जा-व्युत्पन्न मेसेनकाइमल स्ट्रोमल कोशिकाओं (एचबीएम-एमएससी) को पहले सुसंस्कृत किया जाता है जब तक कि पर्याप्त रूप से विकसित 3 डी सेल नेटवर्क नहीं बनता है। इसके बाद, जीएफपी-व्यक्त मानव नाभि शिरा एंडोथेलियल कोशिकाओं (एचयूवीईसी) को जोड़ा जाता है। संस्कृति विकास के बाद उज्ज्वल-क्षेत्र और प्रतिदीप्ति माइक्रोस्कोपी होती है। एचबीएम-एमएससी नेटवर्क की उपस्थिति संवहनी जैसी संरचनाओं के गठन का समर्थन करती है जो अन्यथा नहीं बनती हैं और जो कम से कम 7 दिनों तक स्थिर रहती हैं। संवहनी जैसे नेटवर्क गठन की सीमा को आसानी से निर्धारित किया जा सकता है। इस मॉडल को अस्थि मोर्फोजेनेटिक प्रोटीन 2 (बीएमपी -2) के साथ संस्कृति माध्यम को पूरक करके एक ओस्टोजेनिक अस्थि-मज्जा आला की ओर ट्यून किया जा सकता है, जो एचबीएम-एमएससी के ओस्टोजेनिक भेदभाव को बढ़ावा देता है, जैसा कि सह-संस्कृति के दिन 4 और दिन 7 में क्षारीय फॉस्फेट (एएलपी) गतिविधि में वृद्धि द्वारा मूल्यांकन किया गया है। इस सेलुलर मॉडल का उपयोग विभिन्न कैंसर कोशिकाओं के संवर्धन के लिए एक मंच के रूप में किया जा सकता है और अध्ययन किया जा सकता है कि वे अस्थि- और अस्थि मज्जा-विशिष्ट संवहनी niches के साथ कैसे बातचीत करते हैं। इसके अलावा, यह स्वचालन और उच्च-सामग्री विश्लेषण के लिए उपयुक्त है, जिसका अर्थ है कि यह अत्यधिक प्रतिलिपि प्रस्तुत करने योग्य संस्कृति स्थितियों के तहत कैंसर की दवा स्क्रीनिंग को सक्षम करेगा।