जीएमपी-ग्रेड विघटित छिद्रपूर्ण माइक्रोकैरियर्स पर आधारित बड़े पैमाने पर सेल उत्पादन

सेल और जीन थेरेपी (सीजीटी) उद्योग में शोधकर्ताओं को लंबे समय से कोशिकाओं के कुशल और बड़े पैमाने पर विस्तार में एक दुर्जेय चुनौती का सामना करना पड़ा है। दो-आयामी (2 डी) प्लानर संवर्धन प्रणाली की प्राथमिक कमियों को दूर करने के लिए, हमने मानव मेसेनकाइमल स्टेम / स्ट्रोमल कोशिकाओं (एचएमएससी), HEK293T कोशिकाओं और वेरो कोशिकाओं सहित अनुयायी कोशिकाओं की 3 डी संस्कृति के लिए जीएमपी-ग्रेड, विघटित और छिद्रपूर्ण माइक्रोकैरियर पर आधारित एक स्वचालित बंद औद्योगिक पैमाने सेल उत्पादन (एसीआईएससीपी) मंच विकसित किया है। बड़े पैमाने पर विस्तार प्राप्त करने के लिए, 5 एल और 15 एल हलचल-टैंक बायोरिएक्टर के साथ दो-चरण विस्तार आयोजित किया गया था ताकि 9 दिनों के भीतर कुल 128 गुना विस्तार के साथ 1.1 x 10¹⁰ एचएमएससी का उत्पादन किया जा सके। कोशिकाओं को माइक्रोकैरियर्स को पूरी तरह से भंग करके काटा गया था, एक निरंतर-प्रवाह सेंट्रीफ्यूज-आधारित सेल प्रोसेसिंग सिस्टम के साथ केंद्रित, धोया और तैयार किया गया था, और फिर सेल भरने की प्रणाली के साथ एलिकोट किया गया था। 2 डी प्लानर संस्कृति की तुलना में, 3 डी संस्कृति से काटे गए एचएमएससी की गुणवत्ता में कोई महत्वपूर्ण अंतर नहीं है। हमने सीजीटी क्षेत्र में अन्य लोकप्रिय सेल प्रकारों के लिए इन घुलने योग्य छिद्रपूर्ण माइक्रोकैरियर्स को भी लागू किया है; विशेष रूप से, HEK293T कोशिकाओं और वेरो कोशिकाओं को क्रमशः 1.68 x 10 7 कोशिकाओं / एमएल और 1.08 x 10⁷ कोशिकाओं / एमएल के चरम सेल घनत्व के लिए खेती की गई है। यह अध्ययन एक बायोप्रोसेस इंजीनियरिंग प्लेटफॉर्म का उपयोग करने के लिए एक प्रोटोकॉल प्रदान करता है जो जीएमपी-ग्रेड घुलने योग्य माइक्रोकैरियर ्स और उन्नत बंद उपकरणों की विशेषताओं का उपयोग करता है ताकि अनुयायी कोशिकाओं के औद्योगिक पैमाने पर निर्माण को प्राप्त किया जा सके।