Producción celular a gran escala basada en microportadores porosos solubles de grado GMP

Los investigadores de la industria de la terapia celular y génica (CGT) se han enfrentado durante mucho tiempo a un desafío formidable en la expansión eficiente y a gran escala de las células. Para abordar las principales deficiencias del sistema de cultivo plano bidimensional (2D), desarrollamos de manera innovadora una plataforma automatizada de producción celular a escala industrial cerrada (ACISCP) basada en un microportador poroso, soluble y de grado GMP para el cultivo 3D de células adherentes, incluidas las células madre/estroma mesenquimales humanas (hMSC), las células HEK293T y las células Vero. Para lograr una expansión a gran escala, se llevó a cabo una expansión en dos etapas con biorreactores de tanque agitado de 5 L y 15 L para producir 1,1 x 10¹⁰ hMSC con una expansión total de 128 veces en 9 días. Las células se cosecharon disolviendo completamente los microportadores, se concentraron, se lavaron y se formularon con un sistema de procesamiento celular basado en centrífugas de flujo continuo, y luego se alícuota con un sistema de llenado celular. En comparación con el cultivo plano 2D, no hay diferencias significativas en la calidad de las hMSC recolectadas del cultivo 3D. También hemos aplicado estos microportadores porosos solubles a otros tipos de células populares en el sector CGT; en concreto, se han cultivado células HEK293T y células Vero a densidades celulares máximas de 1,68 x 10 7 células/ml y 1,08 x 10⁷ células/ml, respectivamente. Este estudio proporciona un protocolo para el uso de una plataforma de ingeniería de bioprocesos que aprovecha las características de los microportadores solubles de grado GMP y equipos cerrados avanzados para lograr la fabricación a escala industrial de células adherentes.