Storskalig cellproduktion baserad på upplösbara porösa mikrobärare av GMP-kvalitet

Forskare inom cell- och genterapiindustrin (CGT) har länge stått inför en formidabel utmaning i den effektiva och storskaliga expansionen av celler. För att ta itu med de primära bristerna i det tvådimensionella (2D) plana odlingssystemet utvecklade vi innovativt en automatiserad plattform för produktion av celler i industriell skala (ACISCP) baserad på en GMP-klassad, upplösbar och porös mikrobärare för 3D-odling av vidhäftande celler, inklusive humana mesenkymala stam-/stromaceller (hMSC), HEK293T-celler och Vero-celler. För att uppnå storskalig expansion genomfördes en tvåstegsexpansion med 5 L och 15 L omrörda tankbioreaktorer för att ge 1,1 x 10¹⁰ hMSC med en total 128-faldig expansion inom 9 dagar. Cellerna skördades genom att helt lösa upp mikrobärarna, koncentrerades, tvättades och formulerades med ett centrifugbaserat cellbearbetningssystem med kontinuerligt flöde och aliciterades sedan med ett cellfyllningssystem. Jämfört med 2D-plan kultur finns det inga signifikanta skillnader i kvaliteten på hMSC som skördas från 3D-kultur. Vi har också applicerat dessa upplösbara porösa mikrobärare på andra populära celltyper inom CGT-sektorn; specifikt har HEK293T celler och Vero-celler odlats till toppcelldensiteter på 1,68 x 10 7 celler/ml respektive 1,08 x 10⁷ celler/ml. Denna studie ger ett protokoll för att använda en bioprocessteknisk plattform som utnyttjar egenskaperna hos GMP-upplösbara mikrobärare och avancerad sluten utrustning för att uppnå industriell tillverkning av vidhäftande celler.