GMP Sınıfı Çözünebilir Gözenekli Mikro Taşıyıcılara Dayalı Büyük Ölçekli Hücre Üretimi

Hücre ve gen terapisi (CGT) endüstrisindeki araştırmacılar, hücrelerin verimli ve büyük ölçekli genişlemesinde uzun süredir zorlu bir zorlukla karşı karşıya kaldılar. İki boyutlu (2D) düzlemsel kültür sisteminin birincil eksikliklerini gidermek için, insan mezenkimal kök/stromal hücreler (hMSC'ler), HEK293T hücreleri ve Vero hücreleri dahil olmak üzere yapışık hücrelerin 3D kültürü için GMP dereceli, çözünebilir ve gözenekli bir mikro taşıyıcıya dayalı otomatik bir kapalı endüstriyel ölçekli hücre üretimi (ACISCP) platformu geliştirdik. Büyük ölçekli genişleme elde etmek için, 9 gün içinde toplam 128 kat genişleme ile 1,1 x 10 10 hMSC elde etmek için 5 L ve¹⁵ L karıştırılmış tank biyoreaktörleri ile iki aşamalı bir genişleme gerçekleştirildi. Hücreler, mikro taşıyıcıların tamamen çözülmesiyle toplandı, konsantre edildi, yıkandı ve sürekli akışlı santrifüj tabanlı bir hücre işleme sistemi ile formüle edildi ve daha sonra bir hücre doldurma sistemi ile birleştirildi. 2D düzlemsel kültürle karşılaştırıldığında, 3D kültürden hasat edilen hMSC'lerin kalitesinde önemli bir fark yoktur. Bu çözünebilir gözenekli mikro taşıyıcıları CGT sektöründeki diğer popüler hücre tiplerine de uyguladık; spesifik olarak, HEK293T hücreleri ve Vero hücreleri, sırasıyla 1.68 x 10 7 hücre / mL ve 1.08 x 10⁷ hücre / mL'lik pik hücre yoğunluklarına kadar ekilmiştir. Bu çalışma, yapışık hücrelerin endüstriyel ölçekte üretimini sağlamak için GMP sınıfı çözünebilir mikro taşıyıcıların ve gelişmiş kapalı ekipmanın özelliklerinden yararlanan bir biyoproses mühendisliği platformunun kullanılması için bir protokol sağlar.