טרנספורמציה של שורש סויה שעיר לניתוח תפקוד גנים

פולי סויה (Glycine max) הוא גידול יקר ערך בחקלאות שיש לו אלפי שימושים תעשייתיים. שורשי פולי סויה הם האתר העיקרי של אינטראקציה עם מיקרובים הנישאים באדמה היוצרים סימביוזה כדי לתקן חנקן ופתוגנים, מה שהופך את המחקר המערב גנטיקה של שורש סויה לבעל חשיבות עליונה לשיפור הייצור החקלאי שלה. השינוי הגנטי של שורשים שעירים מפולי סויה (HRs) מתווך על ידי זן קנה השורש Agrobacterium NCPPB2659 (K599) והוא כלי יעיל לחקר תפקוד גנים בשורשי סויה, לוקח רק חודשיים מתחילתו ועד סופו. כאן, אנו מספקים פרוטוקול מפורט המתאר את השיטה לביטוי יתר והשתקה של גן בעל עניין ב- HRs סויה. מתודולוגיה זו כוללת עיקור זרעי סויה, זיהום של cotyledons עם K599, ובחירה וקציר של HRs מותמרים גנטית עבור בידוד RNA, ואם יש צורך, ניתוח מטבוליטים. התפוקה של הגישה מספיקה כדי לחקור בו זמנית מספר גנים או רשתות ויכולה לקבוע את האסטרטגיות ההנדסיות האופטימליות לפני התחייבות לגישות טרנספורמציה יציבות ארוכות טווח.