एसिनेटोबैक्टर बायोफिल्म के लिए परिमाणीकरण, व्यवहार्यता मूल्यांकन और विज़ुअलाइज़ेशन रणनीतियाँ

एसिनेटोबैक्टर नोसोकोमियल संक्रमण का कारण बनता है और इसका बायोफिल्म गठन अस्पताल के वातावरण जैसी शुष्क सतहों पर जीवित रहने में योगदान कर सकता है। इस प्रकार, बायोफिल्म परिमाणीकरण और विज़ुअलाइज़ेशन नोसोकोमियल संक्रमण पैदा करने के लिए एसिनेटोबैक्टर उपभेदों की क्षमता का आकलन करने के लिए महत्वपूर्ण तरीके हैं। माइक्रोप्लेट की सतह पर बनने वाले बायोफिल्म को मात्रा और सेल संख्या के संदर्भ में निर्धारित किया जा सकता है। बायोफिल्म वॉल्यूम को क्रिस्टल वायलेट का उपयोग करके धुंधला करके, धोने, इथेनॉल का उपयोग करके डिस्टेन करने के द्वारा निर्धारित किया जा सकता है, फिर माइक्रोप्लेट रीडर का उपयोग करके घुलनशील डाई को मापा जा सकता है। बायोफिल्म में एम्बेडेड कोशिकाओं की संख्या निर्धारित करने के लिए, बायोफिल्म को सेल स्क्रैपर्स का उपयोग करके खत्म कर दिया जाता है, खारा में काटा जाता है, कांच के मोतियों की उपस्थिति में सख्ती से उत्तेजित किया जाता है, और एसिनेटोबैक्टर एगर पर फैलाया जाता है। फिर, प्लेटों को 24-42 घंटे के लिए 30 डिग्री सेल्सियस पर इनक्यूबेट किया जाता है। इनक्यूबेशन बाद, बायोफिल्म में कोशिकाओं की संख्या का अनुमान लगाने के लिए लाल कॉलोनियों की गणना की जाती है। यह व्यवहार्य गणना विधि मिश्रित प्रजातियों के बायोफिल्म में एसिनेटोबैक्टर कोशिकाओं की गिनती के लिए भी उपयोगी हो सकती है। फ्लोरोसेंट रंगों का उपयोग करके एसिनेटोबैक्टर बायोफिल्म की कल्पना की जा सकती है। सूक्ष्म विश्लेषण के लिए डिज़ाइन किया गया एक व्यावसायिक रूप से उपलब्ध माइक्रोप्लेट बायोफिल्म बनाने के लिए नियोजित किया जाता है। फिर, नीचे की सतह से जुड़े बायोफिल्म को SYTO9 और प्रोपिडियम आयोडाइड रंगों से रंगा जाता है, धोया जाता है, फिर कॉन्फोकल लेजर स्कैनिंग माइक्रोस्कोपी के साथ कल्पना की जाती है।