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Abstract

Biology

アシネトバクターバイオフィルムの定量化、生存率評価、可視化戦略

Published: August 4th, 2023

DOI:

10.3791/65517

1Korea Food Research Institute, 2Department of Food Biotechnology, Korea University of Science and Technology, 3Advanced Radiation Technology Institute, Korea Atomic Energy Research Institute

Abstract

アシネトバクター は院内感染を引き起こし、そのバイオフィルム形成は病院環境などの乾燥した表面での生存に寄与する可能性があります。したがって、バイオフィルムの定量化と可視化は、 アシネトバクター 株が院内感染を引き起こす可能性を評価するための重要な方法です。マイクロプレートの表面に形成されるバイオフィルムは、体積と細胞数で定量化できます。バイオフィルムの量は、クリスタルバイオレットを使用した染色、洗浄、エタノールによる脱色、およびマイクロプレートリーダーを使用した可溶化色素の測定によって定量化できます。バイオフィルムに埋め込まれた細胞の数を定量化するために、バイオフィルムを細胞スクレーパーを使用してスクラップし、生理食塩水で回収し、ガラスビーズの存在下で激しく攪拌し、アシネトバクター寒天培地に広げます。次に、プレートを30°Cで24〜42時間インキュベートします。インキュベーション後、赤いコロニーを列挙して、バイオフィルム内の細胞数を推定します。この実行可能な計数法は、混合種バイオフィルム中の アシネトバクター 細胞を計数するのにも有用です。 アシネトバクター のバイオフィルムは、蛍光色素を用いて可視化することができます。顕微鏡分析用に設計された市販のマイクロプレートを使用して、バイオフィルムを形成します。次に、底面に付着したバイオフィルムをSYTO9およびヨウ化プロピジウム色素で染色し、洗浄した後、共焦点レーザー走査型顕微鏡で可視化します。

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