Sign In

A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.

In This Article

  • Summary
  • Abstract
  • Introduction
  • Protocol
  • Representative Results
  • Discussion
  • Acknowledgements
  • Materials
  • References
  • Reprints and Permissions

Summary

Внутрикожный микродиализ — это минимально инвазивный метод, используемый для исследования функции микрососудов в норме и при заболеваниях. Для изучения механизмов вазодилатации и сужения сосудов в кожном кровообращении могут быть использованы как протоколы «доза-реакция», так и протоколы локального нагревания.

Abstract

Кожная сосудистая сеть является доступной тканью, которая может быть использована для оценки функции микрососудов у человека. Внутрикожный микродиализ – это минимально инвазивный метод, используемый для исследования механизмов гладкой мускулатуры и функции эндотелия сосудов в кожном кровообращении. Данная методика позволяет провести фармакологическое препарирование патофизиологии эндотелиальной дисфункции микрососудов, которая выражается снижением вазодилатации, опосредованной оксидом азота, что является индикатором риска развития сердечно-сосудистых заболеваний. При этом методе микродиализный зонд помещается в дермальный слой кожи, а над зондом помещается локальный нагревательный блок с лазерным доплеровским флоуметрическим зондом для измерения потока эритроцитов. Локальная температура кожи зажимается или стимулируется прямым применением тепла, а фармакологические агенты перфузируются через зонд для стимуляции или ингибирования внутриклеточных сигнальных путей, чтобы вызвать вазодилатацию или вазоконстрикцию или исследовать интересующие механизмы (кофакторы, антиоксиданты и т. д.). Количественно оценивается кожная сосудистая проводимость и очерчиваются механизмы эндотелиальной дисфункции при болезненных состояниях.

Introduction

Сердечно-сосудистые заболевания (ССЗ) являются основной причиной смертив Соединенных Штатах 1. Гипертония (АГ) является независимым фактором риска инсульта, ишемической болезни сердца и сердечной недостаточности и, по оценкам, затрагивает более ~50% населения Соединенных Штатов 2. АГ может развиваться как самостоятельное ССЗ (первичная АГ) или в результате другого состояния, такого как поликистоз почек и/или эндокринные нарушения (вторичная АГ). Широта этиологии АГ затрудняет изучение основных механизмов и повреждений органов-мишеней, наблюдаемых при АГ. Необходимы разнообразные и новые исследовательские подходы к патофи....

Protocol

Все процедуры утверждаются Институциональным наблюдательным советом Университета штата Пенсильвания перед набором участников.

1. Настройка оборудования

  1. Включите локальный нагревательный блок и лазерный доплеровский расходомер.
    ПРИМЕЧАНИЕ: Перед сбором данных.......

Representative Results

Ацетилхолин протокол «доза-ответ»

На рисунке 1А изображена схема, подробно описывающая протокол АЧ «доза-реакция». На рисунке 1B показана репрезентативная трассировка значений потока эритроцитов (единиц перфузии, PU; среднее знач?.......

Discussion

Техника внутрикожного микродиализа является универсальным инструментом в исследовании сосудов человека. Исследователи могут изменить протокол, чтобы еще больше диверсифицировать его применение. Например, мы описываем протокол АХГ «доза-реакция», но в других исследованиях механизмо.......

Acknowledgements

Никакой.

....

Materials

NameCompanyCatalog NumberComments
1 mL syringesBD Syringes302100
AcetlycholineUnited States Pharmacopeia1424511Pilot data collected in our lab indicate drying acetylcholine increases variability of CVC response; do not dry, store in desiccator
Alcohol swabsMckesson191089
Baby Bee Syringe DriveBioanalytical Systems, IncorporatedMD-1001In this study the optional 3-syringe bracket (catalg number MD-1002) was utilized
CMA 30 Linear Microdialysis ProbesHarvard ApparatusCMA8010460
Connex Spot MonitorWelchAllyn74CT-Bautomated blood pressure monitor
Hive Syringe Pump ControllerBioanalytical Systems, IncorporatedMD-1020Controls up to 4 Baby Bee Syringe Drives
LabChart 8AD Instruments**PowerLab hardware and LabChart software must be compatible versions
Lactated Ringer's SolutionAvantor (VWR)76313-478
Laser Doppler Blood FlowMeterMoor InstrumentsMoorVMS-LDF
Laser Doppler probe calibration kitMoor InstrumentsCAL
Laser Doppler VP12 probeMoor InstrumentsVP12
Linear Microdialysis ProbesBioanalytical Systems, Inc.MD-2000
NG-nitro-l-arginine methyl esterSigma Aldrich483125-ML-NAME
Povidone-iodine / betadineDynarex1202
PowerLab C Data Acquisition DeviceAD InstrumentsPLC01**
PowerLab C Instrument InterfaceAD InstrumentsPLCI1**
Probe adhesive discsMoor Instrumentsattach local heating unit to skin
Skin Heater ControllerMoor InstrumentsmoorVMS-HEAT 1.3
Small heating probeMoor InstrumentsVHP2
Sterile drapesHalyard89731
Sterile gauzeDukal Corporation2085
Sterile surgical glovesEsteem Cardinal Health8856Ncatalogue number followed by the initials of the glove size, then the letter "B" (e.g., 8856NMB for medium)
Surgical scissorsCole-ParmerUX-06287-26

References

  1. Xu, J. Q., Murphy, S. L., Kochanek, K. D., Arias, E. Mortality in the United States, 2021. NCHS Data Brief. 456, (2022).
  2. Tsao, C. W., et al. Heart disease and stroke statistics-2023 update: A report from the American heart....

Explore More Articles

This article has been published

Video Coming Soon

JoVE Logo

Privacy

Terms of Use

Policies

Research

Education

ABOUT JoVE

Copyright © 2025 MyJoVE Corporation. All rights reserved