Sign In

A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.

In This Article

  • Summary
  • Abstract
  • Introduction
  • Protocol
  • Representative Results
  • Discussion
  • Disclosures
  • Acknowledgements
  • Materials
  • References
  • Reprints and Permissions

Summary

O teste mecânico de ossos de roedores é um método valioso para extrair informações sobre a suscetibilidade de um osso à fratura. Na falta de compreensão prática adequada, os resultados podem ser superinterpretados ou não ter validade. Este protocolo servirá como um guia para garantir que os ensaios mecânicos sejam realizados com precisão para fornecer dados válidos e funcionais.

Abstract

A fragilidade esquelética que leva à fratura é uma crise de saúde pública americana que resulta em 1,5 milhão de fraturas a cada ano e US$ 18 bilhões em custos diretos de atendimento. A capacidade de compreender os mecanismos subjacentes à doença óssea e a resposta ao tratamento não é apenas desejada, mas crítica. O teste mecânico do osso serve como uma técnica valiosa para entender e quantificar a suscetibilidade de um osso à fratura. Embora esse método pareça simples de executar, conclusões inadequadas e imprecisas podem ser alcançadas se as suposições governantes e as etapas-chave forem desconsideradas pelo usuário. Isso tem sido observado em todas as disciplinas, à medida que os estudos continuam a ser publicados com uso indevido de métodos e interpretação incorreta dos resultados. Este protocolo servirá como um primer para os princípios associados aos ensaios mecânicos juntamente com a aplicação dessas técnicas - desde considerações sobre o tamanho da amostra, passando pela coleta e armazenamento dos tecidos, até a análise e interpretação dos dados. Com isso em mãos, informações valiosas sobre a suscetibilidade de um osso à fratura podem ser obtidas, favorecendo o entendimento tanto para pesquisas acadêmicas quanto para soluções clínicas.

Introduction

O teste mecânico do osso é o principal método para extrair informações funcionais relacionadas à suscetibilidade de um osso à fratura. Em estudos pré-clínicos, várias modalidades de teste podem ser usadas, mas de longe a mais comum é a flexão de ossos longos. Esses testes são fáceis de realizar e podem ser usados em ossos que variam em tamanho de humano a camundongo. Como os camundongos são um dos animais mais comumente estudados em pesquisas pré-clínicas, este protocolo se concentrará em testes de flexão realizados nos fêmures e tíbias de camundongos.

Antes de realizar testes de flexão, os ossos devem ser adequadamente colhidos e armazenad....

Protocol

Todos os procedimentos descritos ao longo deste protocolo que envolveram animais foram aprovados pelo Comitê Institucional de Animais e Uso da Escola de Ciência da Universidade de Indiana (IACUC) antes do procedimento. Os animais descritos no procedimento foram eutanasiados por inalação de CO2seguido de luxação cervical como meio secundário de eutanásia.

1. Colheita, armazenamento e descongelamento de ossos

  1. Colheita e armazenagem
    1. Coloque o l.......

Representative Results

Após a conclusão da tomografia computadorizada, a maioria dos exames inadequados pode ser detectada na reconstrução. Muitas vezes, varreduras ruins terão uma compensação de alto desalinhamento que é um indicador claro de um erro durante a varredura. No entanto, erros podem ocorrer em outras etapas e também podem levar a dados imprecisos. Esses erros muitas vezes podem ser detectados à medida que as propriedades arquitetônicas calculadas individuais são examinadas. Se os valores ficarem muito fora do intervalo.......

Discussion

Durante todo o processo de digitalização e teste, há momentos em que a solução de problemas e a otimização são apropriadas. A primeira delas ocorre ao escanear ossos usando μCT. Enquanto muitos sistemas vêm com um suporte no qual um objeto pode ser mantido e digitalizado, os suportes personalizados podem ser fabricados para digitalizar vários ossos ao mesmo tempo. A varredura de vários ossos pode ser um excelente ponto para otimização, mas deve-se ter cuidado durante todo o processo de digitalização e an?.......

Disclosures

Os autores declaram não haver conflitos de interesse.

Acknowledgements

O trabalho realizado para desenvolver este protocolo tem sido apoiado pelo National Institutes of Health [AR072609].

....

Materials

NameCompanyCatalog NumberComments
CTAnBrukerNACT Scan Analysis Software
DataViewerBrukerNACT Scan Rotation Software
Matrix Laboratory (MATLAB) 2023aMathWorksNACoding platform used for data analysis
NReconBrukerNACT Scan Reconstruction software
SKYSCAN 1272-100 kV w/ 16 MP CCD detector, incl 3D Suite Software  Micro Photonics IncSKY-016814Micro-CT system that can non-destructively visualize up to 209 mPs in every virtual slice through an object 

References

  1. Vesper, E. O., Hammond, M. A., Allen, M. R., Wallace, J. M. Even with rehydration, preservation in ethanol influences the mechanical properties of bone and how bone responds to experimental manipulation. Bone. 97, 49-53 (2017).
  2. Jepsen, K. J., Silva, M. J., Vashishth, D., Guo, X. E., van der Meulen, M. C.

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Explore More Articles

Considera es Pr ticasProjetoExecu oInterpreta oEstudosTestes de Flex o ssea TotalOssos de RoedoresFragilidade Esquel ticaFraturaCrise de Sa de P blica AmericanaDoen a sseaResposta ao TratamentoTeste Mec nicoSuscetibilidade ssea FraturaPressupostos GovernantesPrincipais EtapasUso Indevido de M todosInterpreta o Incorreta dos ResultadosProtocoloPrinc piosTamanho da AmostraColeta de TecidosArmazenamentoAn lise de DadosPesquisa Acad micaSolu es Cl nicas

This article has been published

Video Coming Soon

JoVE Logo

Privacy

Terms of Use

Policies

Research

Education

ABOUT JoVE

Copyright © 2025 MyJoVE Corporation. All rights reserved