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  • Summary
  • Abstract
  • Introduction
  • Protocol
  • Representative Results
  • Discussion
  • Disclosures
  • Acknowledgements
  • Materials
  • References
  • Reprints and Permissions

Summary

Questo protocollo descrive un metodo per facilitare la raccolta di campioni da campioni di prostatectomia radicale. L'obiettivo è quello di mappare, caratterizzare e sezionare con micro-macro campioni di tessuto dai campioni in base a criteri anatomopatologici prima di conservarli in una biobanca.

Abstract

L'acquisizione di campioni di tessuto tumorale freschi e ben caratterizzati è fondamentale per condurre studi "omici" di alta qualità. Tuttavia, può essere particolarmente impegnativo nel contesto del cancro alla prostata (PC) a causa della natura unica di questo organo e dell'elevata eterogeneità associata a questo tumore. D'altra parte, anche caratterizzare istopatologicamente i campioni prima della loro conservazione senza causare alterazioni tissutali significative è una sfida intrigante. In questo contesto, presentiamo un nuovo metodo per l'acquisizione, la mappatura, la caratterizzazione e la micro-dissezione del tessuto prostatico resecato basato su criteri anatomopatologici.

A differenza dei protocolli pubblicati in precedenza, questo metodo riduce il tempo necessario per l'analisi istopatologica del campione prostatico senza comprometterne la struttura, che è fondamentale per la valutazione dei margini chirurgici. Inoltre, consente la delineazione e la dissezione micro-macro di campioni di tessuto prostatico fresco, con particolare attenzione alle aree tumorali istologiche definite da criteri patologici come il punteggio di Gleason, le lesioni precursori (neoplasia intraepiteliale prostatica di alto grado - PIN) e le lesioni infiammatorie (prostatite). Questi campioni vengono poi conservati in una Biobanca per successive analisi di ricerca.

Introduction

Il cancro alla prostata (PC) è il 2° tumore più frequente negli uomini e la 5° causa di morte in tutto il mondo1. Il trattamento e la prognosi del paziente dipendono dalla stadiazione e dal grado (punteggio di Gleason) del tumore, come evidenziato dai tassi di sopravvivenza a 5 anni più elevati dei tumori localizzati e di basso grado (grado 6 di Gleason) (99%) rispetto ai tumori di Gleason di alto grado e metastatici (31%)2.

La recidiva locale di PC e il fallimento del trattamento sono stati collegati alla caratteristica elevata eterogeneità genetica intratumorale di ques....

Protocol

Questo metodo è stato sviluppato attraverso sforzi collaborativi che hanno coinvolto diversi servizi clinici (Urologia, Patologia e Biobanca dell'Ospedale La Fe). Lo studio è stato condotto in conformità con le linee guida istituzionali, nazionali e internazionali per il benessere umano e ha ricevuto l'approvazione dal Comitato Etico per la Ricerca Biomedica presso l'Instituto de Investigación Sanitaria Hospital Universitario y Politécnico La Fe (Valencia, Spagna). Tutti i campioni sono stati conservati presso la Bi.......

Representative Results

I risultati rivelano che questa tecnica ha permesso di ottenere materiale tumorale nel 61% dei casi studiati (25 casi su 41) (Tabella 1).

Tabella 1: Dati istopatologici dei campioni di studio. Riepilogo dei dati istopatologici per i campioni utilizzati nello studio. Il cilindro diagnostico si riferisce al campione di biopsia prostatica ottenuto a scopo diagnostico, mentre il cilindro processato corrisponde al cilindro ottenuto dal campione di prostatectomia a .......

Discussion

In qualsiasi studio di ricerca, l'ottenimento di campioni di qualità è un requisito essenziale per ridurre le distorsioni sistematiche e ottenere risultati affidabili22. Pertanto, il controllo di variabili preanalitiche come la temperatura alla quale i campioni vengono processati e conservati, il tempo trascorso dalla raccolta del campione alla conservazione, l'uso di materiali sterilizzati o gli effetti che l'aggiunta di conservanti o altri additivi può avere sui campioni deve essere considera.......

Disclosures

Gli autori dichiarano di non avere conflitti di interesse.

Acknowledgements

A.L. riconosce un contratto post-dottorato "Margarita Salas" (numero 21-076) e MAM-T un contratto di ricerca "Maria Zambrano" (numero MAZ/2021/03 UP2021-021). Entrambi i contratti sono stati finanziati dall'Unione Europea-Next generation EU.

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Materials

NameCompanyCatalog NumberComments
Cadiere forcepsIntuitivePN1052082-US 10/2021Part number: 471049. 18 uses.
Conventional slidesKnittel Glass2021Ground/ Frosted end
Cryostat microtomeThermo Fisher Scientific---Criostato CryoStar NX50
CryotubesGreiner Bio-One GmbHRef.: 122280.CRYO S. PP, with screw cap, sterile. 
Da Vinci surgical systemIntuitivePN1052082-US 10/2021XI model
Dissection instrumentsBayer---Two tweezers and a surgical blade 
DPX Eukitt Medizin- und Labortechnik GmbH6.00.01.0001.06.01.01
EosinAgilent157252
Fenestrated bipolar forcepsIntuitivePN1052082-US 10/2021Part number: 471205. 14 lives.
Force bipolarIntuitivePN1052082-US 10/2021Part number: 471405. 12 uses.
FreezersThermo ScientificMODEL 907. -80 ºC
HematoxylinAgilent157251
Inmunohistochemistry SlidesAgilent-DakoK802021-2
Large needle driverIntuitivePN1052082-US 10/2021Part number: 471006. 15 uses.
Maryland bipolar forcepsIntuitivePN1052082-US 10/2021Part number: 471172. 14 uses.
MicroscopeOlympus---Olympus cx40
Microtome bladesPFM Medicala35
Monopolar curved scissorsIntuitivePN1052082-US 10/2021Part number: 470179. 10 uses.
OCT compoundNEG-50LOT.117340
PlusSpeed S Single-use Biopsy Device with beveled tipPeter Pflugbeil GmbH PSS-1825-S
ProGasp forcepsIntuitivePN1052082-US 10/2021Part number: 471093. 18 uses.
Sample holder DiscDavidson Cryo Chuck. BradleyProducts30 mm 
Tissue inkPelikan2021Ink 4001 brilliant black (301168)
XylolQuimipurRef. 169

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