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* These authors contributed equally
Questo protocollo descrive un metodo per facilitare la raccolta di campioni da campioni di prostatectomia radicale. L'obiettivo è quello di mappare, caratterizzare e sezionare con micro-macro campioni di tessuto dai campioni in base a criteri anatomopatologici prima di conservarli in una biobanca.
L'acquisizione di campioni di tessuto tumorale freschi e ben caratterizzati è fondamentale per condurre studi "omici" di alta qualità. Tuttavia, può essere particolarmente impegnativo nel contesto del cancro alla prostata (PC) a causa della natura unica di questo organo e dell'elevata eterogeneità associata a questo tumore. D'altra parte, anche caratterizzare istopatologicamente i campioni prima della loro conservazione senza causare alterazioni tissutali significative è una sfida intrigante. In questo contesto, presentiamo un nuovo metodo per l'acquisizione, la mappatura, la caratterizzazione e la micro-dissezione del tessuto prostatico resecato basato su criteri anatomopatologici.
A differenza dei protocolli pubblicati in precedenza, questo metodo riduce il tempo necessario per l'analisi istopatologica del campione prostatico senza comprometterne la struttura, che è fondamentale per la valutazione dei margini chirurgici. Inoltre, consente la delineazione e la dissezione micro-macro di campioni di tessuto prostatico fresco, con particolare attenzione alle aree tumorali istologiche definite da criteri patologici come il punteggio di Gleason, le lesioni precursori (neoplasia intraepiteliale prostatica di alto grado - PIN) e le lesioni infiammatorie (prostatite). Questi campioni vengono poi conservati in una Biobanca per successive analisi di ricerca.
Il cancro alla prostata (PC) è il 2° tumore più frequente negli uomini e la 5° causa di morte in tutto il mondo1. Il trattamento e la prognosi del paziente dipendono dalla stadiazione e dal grado (punteggio di Gleason) del tumore, come evidenziato dai tassi di sopravvivenza a 5 anni più elevati dei tumori localizzati e di basso grado (grado 6 di Gleason) (99%) rispetto ai tumori di Gleason di alto grado e metastatici (31%)2.
La recidiva locale di PC e il fallimento del trattamento sono stati collegati alla caratteristica elevata eterogeneità genetica intratumorale di ques....
Questo metodo è stato sviluppato attraverso sforzi collaborativi che hanno coinvolto diversi servizi clinici (Urologia, Patologia e Biobanca dell'Ospedale La Fe). Lo studio è stato condotto in conformità con le linee guida istituzionali, nazionali e internazionali per il benessere umano e ha ricevuto l'approvazione dal Comitato Etico per la Ricerca Biomedica presso l'Instituto de Investigación Sanitaria Hospital Universitario y Politécnico La Fe (Valencia, Spagna). Tutti i campioni sono stati conservati presso la Bi.......
I risultati rivelano che questa tecnica ha permesso di ottenere materiale tumorale nel 61% dei casi studiati (25 casi su 41) (Tabella 1).
Tabella 1: Dati istopatologici dei campioni di studio. Riepilogo dei dati istopatologici per i campioni utilizzati nello studio. Il cilindro diagnostico si riferisce al campione di biopsia prostatica ottenuto a scopo diagnostico, mentre il cilindro processato corrisponde al cilindro ottenuto dal campione di prostatectomia a .......
In qualsiasi studio di ricerca, l'ottenimento di campioni di qualità è un requisito essenziale per ridurre le distorsioni sistematiche e ottenere risultati affidabili22. Pertanto, il controllo di variabili preanalitiche come la temperatura alla quale i campioni vengono processati e conservati, il tempo trascorso dalla raccolta del campione alla conservazione, l'uso di materiali sterilizzati o gli effetti che l'aggiunta di conservanti o altri additivi può avere sui campioni deve essere considera.......
A.L. riconosce un contratto post-dottorato "Margarita Salas" (numero 21-076) e MAM-T un contratto di ricerca "Maria Zambrano" (numero MAZ/2021/03 UP2021-021). Entrambi i contratti sono stati finanziati dall'Unione Europea-Next generation EU.
....Name | Company | Catalog Number | Comments |
Cadiere forceps | Intuitive | PN1052082-US 10/2021 | Part number: 471049. 18 uses. |
Conventional slides | Knittel Glass | 2021 | Ground/ Frosted end |
Cryostat microtome | Thermo Fisher Scientific | --- | Criostato CryoStar NX50 |
Cryotubes | Greiner Bio-One GmbH | Ref.: 122280. | CRYO S. PP, with screw cap, sterile. |
Da Vinci surgical system | Intuitive | PN1052082-US 10/2021 | XI model |
Dissection instruments | Bayer | --- | Two tweezers and a surgical blade |
DPX Eukitt | Medizin- und Labortechnik GmbH | 6.00.01.0001.06.01.01 | |
Eosin | Agilent | 157252 | |
Fenestrated bipolar forceps | Intuitive | PN1052082-US 10/2021 | Part number: 471205. 14 lives. |
Force bipolar | Intuitive | PN1052082-US 10/2021 | Part number: 471405. 12 uses. |
Freezers | Thermo Scientific | MODEL 907. -80 ºC | |
Hematoxylin | Agilent | 157251 | |
Inmunohistochemistry Slides | Agilent-Dako | K802021-2 | |
Large needle driver | Intuitive | PN1052082-US 10/2021 | Part number: 471006. 15 uses. |
Maryland bipolar forceps | Intuitive | PN1052082-US 10/2021 | Part number: 471172. 14 uses. |
Microscope | Olympus | --- | Olympus cx40 |
Microtome blades | PFM Medical | a35 | |
Monopolar curved scissors | Intuitive | PN1052082-US 10/2021 | Part number: 470179. 10 uses. |
OCT compound | NEG-50 | LOT.117340 | |
PlusSpeed S Single-use Biopsy Device with beveled tip | Peter Pflugbeil GmbH | PSS-1825-S | |
ProGasp forceps | Intuitive | PN1052082-US 10/2021 | Part number: 471093. 18 uses. |
Sample holder Disc | Davidson Cryo Chuck. BradleyProducts | 30 mm | |
Tissue ink | Pelikan | 2021 | Ink 4001 brilliant black (301168) |
Xylol | Quimipur | Ref. 169 |
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