Teste de segurança contra ameaças sociais revela fenótipos psicossociais relacionados ao estresse

Summary

O teste de segurança contra ameaças sociais permite uma avaliação simultânea do desenvolvimento de evitação social como uma medida da aprendizagem condicionada aversiva e da capacidade de discriminação de segurança contra ameaças sociais, ambos utilizados para identificar indivíduos suscetíveis e resilientes ao estresse dentro de um único grupo de camundongos machos cronicamente derrotados socialmente.

Abstract

O estresse social é uma das principais causas do desenvolvimento de transtornos mentais. Para aumentar o valor translacional de estudos pré-clínicos, a experiência de estresse social e seu impacto comportamental em camundongos devem ser comparáveis aos humanos. A derrota social crônica (DSC) utiliza um tipo de estresse social envolvendo ataques físicos e ameaças sensoriais para induzir disfunções mentais semelhantes a transtornos afetivos humanos. Para fortalecer o componente psicossocial do DSC, aplicou-se um protocolo de 10 dias de DSC, no qual as agressões físicas diárias são padronizadas para três episódios de 10 segundos seguidos por uma fase sensorial de 24 horas. Após a^10ª fase sensorial, o protocolo de DSC é seguido por um ensaio comportamental refinado chamado teste de segurança de ameaça social (STST). Os ensaios comportamentais pós-estresse precisam determinar como e em que medida o estressor social influenciou o comportamento. O STST permite que camundongos machos cronicamente derrotados socialmente interajam com 2 novos indivíduos masculinos (alvos sociais): um alvo social da cepa atacante encontrada durante os dias de DSC e o outro de uma nova cepa. Ambos são apresentados simultaneamente em diferentes compartimentos de uma arena de teste de três câmaras. O teste permite uma avaliação simultânea do desenvolvimento da evitação social para medir a aprendizagem condicionada aversiva bem-sucedida e a capacidade de discriminação de segurança e ameaça social. O desenvolvimento de evitação social para ambas as cepas reflete uma resposta aversiva generalizada e, portanto, uma medida de suscetibilidade ao estresse. Enquanto isso, o desenvolvimento de evitação social em relação apenas à cepa agressora reflete discriminação ameaça-segurança e, portanto, uma medida de resiliência ao estresse. Finalmente, a ausência de evitação social em relação à tensão agressora reflete aprendizagem condicionada aversiva prejudicada. O protocolo visa refinar os modelos de camundongos atualmente usados de suscetibilidade/resiliência ao estresse, incluindo critérios translacionais, especificamente discriminação de segurança de ameaça e generalização de resposta aversiva, para categorizar um único grupo de animais cronicamente derrotados socialmente em subgrupos resilientes e suscetíveis, eventualmente avançando futuras abordagens translacionais.

Introduction

O estresse é definido como a ruptura da homeostase causada por estímulos físicos ou psicológicos¹. O estresse é um importante fator de risco bem conhecido para o desenvolvimento de transtornos mentais, como transtorno de estresse pós-traumático, depressão e ansiedade ^2,3. Em particular, o estresse social é considerado um importante fator de risco para o desenvolvimento de transtornos mentais relacionados ao estresse⁴. Um tipo de estresse social que tem ganhado particular importância nas pesquisas é o estresse de subordinação social⁵. Os ca....

Protocol

Todos os procedimentos foram realizados em conformidade com a Directiva do Conselho das Comunidades Europeias relativa aos cuidados e utilização de animais em procedimentos experimentais e foram aprovados pelas autoridades locais (Landesuntersuchungsamt Rheinland-Pfalz). A Figura 1 representa uma linha do tempo esquemática.

1. Tratamento

1. Animais de interesse: Obter camundongos machos C57BL6/J com 7 semanas de idade e, na chegada, em u.......

Discussion

O protocolo comportamental aqui descreve o Teste de Segurança de Ameaça Social, usado para dividir um único grupo de tratamento pós-DSC em três subgrupos diferentes, servindo como um método para investigar a biologia subjacente da suscetibilidade ao estresse e resiliência e testar terapias potenciais. O contexto biológico e os detalhes técnicos precisam ser cuidadosamente considerados para orientar um planejamento experimental completo.

Diferentes condições de moradia podem alterar .......

Materials

Name	Company	Catalog Number	Comments
Arenas	Noldus, Sociability cage, Wageningen, the Netherlands	https://www.noldus.com/applications/sociability-cage	Three-chambered, rectangle in shape with a total size of 60 cm x  40 cm, made of acrylic transparent walls and smooth floors
Camera for video recording	Basler AG, Germany An der Strusbek 60-62 22926 Ahrensburg	ace Classic acA1300-60gc	If using automatic detection program, make sure cameras are compatible
Camera objective	KOWA Kowa Optimed Deutschland GmbH Fichtenstr. 123 40233 Duesseldorf: LMVZ4411 | 1/1.8" 4.4~11mm Varifokal Objektiv	Part-No. 10504
Detection program/Timer	Noldus, EthoVision-XT, Wageningen, the Netherlands	https://www.noldus.com/ethovision-xt	Detection can be achieved either manually (using a timer or a software for manual scoring) or automatically
Housing cages	ZOONLAB GmbH, Hermannstraße 6, 44579 Castrop-Rauxel	3010010	Type 2 cages: 265 mm x 205 mm x 140 mm (l x w x h) i.e. 360 cm² bottom area. Made of Polycarbonate (Makrolone©) and Polysulfone. Lids are made of stainless steel. European standard cages for up to 5 mice (20–25 g). Autoclavable up to 134 °C
Mesh enclosures	Part of the Arena Package: Noldus, Sociability cage, Wageningen, the Netherlands	https://www.noldus.com/applications/sociability-cage	Small acrylic or metal cage-like with a diameter of 100 mm and a height of 200 mm with openings of a 10 mm in size. Two mesh enclosures per arena would work but four is preferable (see point 2.5 in protocol)
Mesh wall	selfmade	N/A	Acrylic or metal, one for each cage. Size depends on cages used. The walls must not allow the two animals to have a physical contact
Social targets: Mice of the strains CD-1 and 129/Sv; retired male breeders	Mice provided by Charles River: Strain name: CD-1®IGS Mouse 129S2/SvPasCrl	Crl:CD1(ICR); 129S2/SvPasCrl	CD-1 and 129/Sv retired male breeders, single-housed, novel (unknown) conspecifics to the animals of interest. If retired male breeders are not available then males older than 1 year from both strains would suffice