A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.
כאן, פותחה ואומתה פלטפורמת ניתוח תמונה אימונוהיסטוכימית דיגיטלית לניתוח כמותי של תאי החיסון של רירית הרחם של חולים עם הפלות חוזרות בחלון ההשתלה.
כדי להעריך את המיקרו-סביבה החיסונית של רירית הרחם של חולים עם הפלות חוזרות (RM), פותחה ואומתה פלטפורמת ניתוח תמונה דיגיטלית של אימונוהיסטוכימיה כדי לנתח כמותית תאים חיסוניים של רירית הרחם במהלך השלב האמצעי-לוטאלי. כל דגימות רירית הרחם נאספו במהלך השלב האמצעי-לוטאלי של המחזור החודשי. רקמות רירית הרחם המשובצות בפרפין חולקו לשקופיות בעובי 4 מיקרומטר, וצביעה אימונוהיסטוכימית (IHC) בוצעה לאיתור תאים חיסוניים של רירית הרחם, כולל תאי CD56+ uNK, Foxp3+ Tregs, מקרופאגים CD163+ M2, DCs CD1a+ ותאי T CD8+. השקופיות הפנורמיות נסרקו באמצעות סורק שקופיות דיגיטלי ומערכת ניתוח תמונות מסחרית שימשה לניתוח כמותי. אחוז תאי מערכת החיסון של רירית הרחם חושב על ידי חלוקת מספר תאי החיסון בסך תאי רירית הרחם. באמצעות מערכת ניתוח התמונה המסחרית, הערכה כמותית של תאי מערכת החיסון של רירית הרחם, שקשה או בלתי אפשרי לנתח באמצעות ניתוח תמונה קונבנציונלי, יכולה להיות מנותחת בקלות ובמדויק. מתודולוגיה זו יכולה להיות מיושמת כדי לאפיין כמותית את המיקרו-סביבה של רירית הרחם, כולל אינטראקציה בין תאים חיסוניים, ואת ההטרוגניות שלה עבור חולים שונים באי ספיקת רבייה. הפלטפורמה להערכה כמותית של תאי מערכת החיסון של רירית הרחם עשויה להיות בעלת משמעות קלינית חשובה לאבחון וטיפול בחולי RM.
הפלה חוזרת (RM) היא אובדן של שני הריונות רצופים או יותר והיא מחלה מורכבת המושכת תשומת לב מצד רופאים בשנים האחרונות. שיעור ההיארעות של RM בנשים בגיל הפוריות הוא 1%-5% 1. תוצאות מחקרים קודמים מראות כי גורמים חיסוניים קשורים קשר הדוק עם הפתוגנזה של RM 2,3,4,5. שמירה על הומאוסטזיס חיסוני בממשק האם-עובר נדרשת להשתלת עובר והתפתחותו. תאי חיסון רירית הרחם מבצעים מספר תפקידי ויסות לשמירה על הומאוסטזיס זה, כגון קידום פלישת טרופובלסט, עיצוב מחדש של עורקים ספירליים ותרומה להתפתחות שליה 6,7,8,9.<....
תוכן המחקר והפרוטוקול נבדקו באופן אתי ואושרו על ידי ועדת האתיקה של המחקר של בית החולים האורולוגי שנג'ן ז'ונגשאן. כל הנשים (בגילאי 20-40) שהשתתפו במחקר סיפקו הסכמה מדעת לאיסוף הדגימות ולשימושן.
1. רכישת רקמה פתולוגית
על מנת להעריך כמותית את תאי מערכת החיסון של רירית הרחם ולהפחית את חוסר היציבות הנגרם כתוצאה מטעויות תפעוליות מעשה ידי אדם, הקמנו פלטפורמת ניתוח כמותית דיגיטלית לתאי מערכת החיסון של רירית הרחם באמצעות זיהוי אוטומטי של אימונוהיסטוכימיקלים ומערכת הערכה כמותית דיגיטלית. פלטפורמת ניתוח תמונ.......
פרוטוקול זה הקים פלטפורמת ניתוח תמונה דיגיטלית של אימונוהיסטוכימיה לניתוח כמותי של תאי חיסון רירית הרחם של חולי RM. כאן, שישה סמנים חיסוניים רירית הרחם זוהו כדי להעריך את microenvironment החיסון רירית הרחם בחולי RM.
רירית הרחם הפתוחה בשלב האמצעי-לוטאלי היא המפתח להשתרשות מוצלחות ולה.......
המחברים אסירי תודה לכל הנשים שהסכימו ותרמו דגימות למחקר זה.
....Name | Company | Catalog Number | Comments |
Automated coverslipper | Sakuraus | DRS-Prisma-P-JCS&Film-JC2 | |
CD163 | GrowGn Biotechnology | NCL-L-CD163 | |
CD1a | Gene Tech | GM357129 | |
CD56 | Gene Tech | GT200529 | |
CD8 | Novocastra | NCL-L-CD8-4B11 | |
Dehydrator | Thermo Fisher | Excelsior ES | |
Digital pathology and | Indica labs | HALO | |
Foxp3 | YILIFANG biological | 14-477-82 | |
IHC stainer | Leica | BOND III | |
Image analysis platform | Indica labs | HALO | |
Slide Scanner | Olympus life science | VS200 |
Explore More Articles
This article has been published
Video Coming Soon
ABOUT JoVE
Copyright © 2025 MyJoVE Corporation. All rights reserved