Sign In

A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.

In This Article

  • Summary
  • Abstract
  • Introduction
  • Protocol
  • Representative Results
  • Discussion
  • Acknowledgements
  • Materials
  • References
  • Reprints and Permissions

Summary

כאן, פותחה ואומתה פלטפורמת ניתוח תמונה אימונוהיסטוכימית דיגיטלית לניתוח כמותי של תאי החיסון של רירית הרחם של חולים עם הפלות חוזרות בחלון ההשתלה.

Abstract

כדי להעריך את המיקרו-סביבה החיסונית של רירית הרחם של חולים עם הפלות חוזרות (RM), פותחה ואומתה פלטפורמת ניתוח תמונה דיגיטלית של אימונוהיסטוכימיה כדי לנתח כמותית תאים חיסוניים של רירית הרחם במהלך השלב האמצעי-לוטאלי. כל דגימות רירית הרחם נאספו במהלך השלב האמצעי-לוטאלי של המחזור החודשי. רקמות רירית הרחם המשובצות בפרפין חולקו לשקופיות בעובי 4 מיקרומטר, וצביעה אימונוהיסטוכימית (IHC) בוצעה לאיתור תאים חיסוניים של רירית הרחם, כולל תאי CD56+ uNK, Foxp3+ Tregs, מקרופאגים CD163+ M2, DCs CD1a+ ותאי T CD8+. השקופיות הפנורמיות נסרקו באמצעות סורק שקופיות דיגיטלי ומערכת ניתוח תמונות מסחרית שימשה לניתוח כמותי. אחוז תאי מערכת החיסון של רירית הרחם חושב על ידי חלוקת מספר תאי החיסון בסך תאי רירית הרחם. באמצעות מערכת ניתוח התמונה המסחרית, הערכה כמותית של תאי מערכת החיסון של רירית הרחם, שקשה או בלתי אפשרי לנתח באמצעות ניתוח תמונה קונבנציונלי, יכולה להיות מנותחת בקלות ובמדויק. מתודולוגיה זו יכולה להיות מיושמת כדי לאפיין כמותית את המיקרו-סביבה של רירית הרחם, כולל אינטראקציה בין תאים חיסוניים, ואת ההטרוגניות שלה עבור חולים שונים באי ספיקת רבייה. הפלטפורמה להערכה כמותית של תאי מערכת החיסון של רירית הרחם עשויה להיות בעלת משמעות קלינית חשובה לאבחון וטיפול בחולי RM.

Introduction

הפלה חוזרת (RM) היא אובדן של שני הריונות רצופים או יותר והיא מחלה מורכבת המושכת תשומת לב מצד רופאים בשנים האחרונות. שיעור ההיארעות של RM בנשים בגיל הפוריות הוא 1%-5% 1. תוצאות מחקרים קודמים מראות כי גורמים חיסוניים קשורים קשר הדוק עם הפתוגנזה של RM 2,3,4,5. שמירה על הומאוסטזיס חיסוני בממשק האם-עובר נדרשת להשתלת עובר והתפתחותו. תאי חיסון רירית הרחם מבצעים מספר תפקידי ויסות לשמירה על הומאוסטזיס זה, כגון קידום פלישת טרופובלסט, עיצוב מחדש של עורקים ספירליים ותרומה להתפתחות שליה 6,7,8,9.<....

Protocol

תוכן המחקר והפרוטוקול נבדקו באופן אתי ואושרו על ידי ועדת האתיקה של המחקר של בית החולים האורולוגי שנג'ן ז'ונגשאן. כל הנשים (בגילאי 20-40) שהשתתפו במחקר סיפקו הסכמה מדעת לאיסוף הדגימות ולשימושן.

1. רכישת רקמה פתולוגית

  1. הכינו את הכלים לקצירת רקמות, כלומר סרגל מדידה, ט?.......

Representative Results

על מנת להעריך כמותית את תאי מערכת החיסון של רירית הרחם ולהפחית את חוסר היציבות הנגרם כתוצאה מטעויות תפעוליות מעשה ידי אדם, הקמנו פלטפורמת ניתוח כמותית דיגיטלית לתאי מערכת החיסון של רירית הרחם באמצעות זיהוי אוטומטי של אימונוהיסטוכימיקלים ומערכת הערכה כמותית דיגיטלית. פלטפורמת ניתוח תמונ.......

Discussion

פרוטוקול זה הקים פלטפורמת ניתוח תמונה דיגיטלית של אימונוהיסטוכימיה לניתוח כמותי של תאי חיסון רירית הרחם של חולי RM. כאן, שישה סמנים חיסוניים רירית הרחם זוהו כדי להעריך את microenvironment החיסון רירית הרחם בחולי RM.

רירית הרחם הפתוחה בשלב האמצעי-לוטאלי היא המפתח להשתרשות מוצלחות ולה.......

Acknowledgements

המחברים אסירי תודה לכל הנשים שהסכימו ותרמו דגימות למחקר זה.

....

Materials

NameCompanyCatalog NumberComments
Automated coverslipperSakurausDRS-Prisma-P-JCS&Film-JC2
CD163GrowGn BiotechnologyNCL-L-CD163
CD1aGene TechGM357129
CD56Gene TechGT200529
CD8NovocastraNCL-L-CD8-4B11
DehydratorThermo FisherExcelsior ES
Digital pathology andIndica labsHALO
Foxp3YILIFANG biological14-477-82
IHC stainerLeicaBOND III
Image analysis platformIndica labsHALO
Slide ScannerOlympus life scienceVS200

References

  1. Practice Committee of the American Society for Reproductive. Evaluation and treatment of recurrent pregnancy loss: a committee opinion. Fertility and Sterility. 98 (5), 1103-1111 (2012).
  2. Dimitriadis, E., Menkhorst, E., Saito, S., Kutteh, W. H., Brosens, J. J.

Explore More Articles

CD56 UNCFoxp3 TregsCD163 M2CD1a DCsT CD8

This article has been published

Video Coming Soon

JoVE Logo

Privacy

Terms of Use

Policies

Research

Education

ABOUT JoVE

Copyright © 2025 MyJoVE Corporation. All rights reserved