用于冷冻电子显微镜的单层石墨烯涂层网格的制备

低温电子显微镜（cryoEM）已成为探测大分子复合物原子结构的有力技术。冷冻电镜的样品制备需要将标本保存在一层薄薄的玻璃冰中，玻璃冰通常悬浮在开窗支撑膜的孔内。然而，冷冻电镜研究的所有常用样品制备方法都将样品暴露在空气-水界面下，对样品产生强烈的疏水作用，通常会导致变性、聚集和复杂的解离。此外，样品区域和空气-水界面之间优选的疏水相互作用会影响大分子采用的取向，从而产生具有各向异性方向分辨率的 3D 重建。

冷冻电镜标本吸附在单层石墨烯上已被证明有助于减轻与空气-水界面的相互作用，同时最大限度地减少背景噪声的引入。石墨烯载体还具有大幅降低冷冻电镜成像所需蛋白质浓度的优点。尽管这些支架具有优势，但由于商业选择的高昂费用以及与大规模内部生产相关的挑战，石墨烯涂层网格并未被冷冻电镜社区广泛使用。本文描述了一种制备几乎完全覆盖单层石墨烯的冷冻电镜网格的有效方法。