Мышиная внутрилегочная трансплантация трахеи: модель для исследования облитерирующего заболевания дыхательных путей после трансплантации легких

Summary

Мышиная модель внутрилегочной трансплантации трахеи (IPTT) ценна для изучения облитерирующей болезни дыхательных путей (ОАД) после трансплантации легких. Он дает представление о легоспецифическом иммунологическом и ангиогенной поведении при облитерации дыхательных путей после аллотрансплантации с высокой воспроизводимостью. В этой статье мы опишем процедуру IPTT и ее ожидаемые результаты.

Abstract

Мышиная внутрилегочная трансплантация трахеи (IPTT) используется в качестве модели облитерирующей болезни дыхательных путей (ОАД) после трансплантации легких. Эта модель, о которой первоначально сообщила наша команда, получила широкое распространение в изучении ОАД благодаря своей высокой технической воспроизводимости и пригодности для исследования иммунологического поведения и терапевтических вмешательств.

В модели IPTT трахейный трансплантат грызуна вводится непосредственно в легкое реципиента через плевру. Эта модель отличается от модели гетеротопической трансплантации трахеи (HTT), в которой трансплантаты трансплантаты трансплантируются в подкожные или сальниковые участки, и от модели ортотопической трансплантации трахеи (OTT), в которой донорская трахея заменяет трахею реципиента.

Успешная реализация модели IPTT требует продвинутых анестезиологических и хирургических навыков. Навыки анестезиолога включают эндотрахеальную интубацию реципиента, настройку соответствующих параметров вентиляции легких и адекватное время экстубации после восстановления после анестезии. Хирургические навыки необходимы для точного размещения трансплантата в легком и для обеспечения эффективной герметизации висцеральной плевры для предотвращения утечки воздуха и кровотечения. В целом, процесс обучения занимает примерно 2 месяца.

В отличие от моделей HTT и OTT, в модели IPTT в дыхательных путях аллотрансплантата развивается облитерация дыхательных путей в соответствующем микроокружении легких. Это позволяет изучать легоспецифические иммунологические и ангиогенные процессы, участвующие в облитерации дыхательных путей после трансплантации легких. Кроме того, эта модель уникальна еще и тем, что в ней присутствуют третичные лимфоидные органы (TLO), которые также наблюдаются в аллотрансплантатах легких человека. ТЛО состоят из популяций Т- и В-клеток и характеризуются наличием высоких эндотелиальных венул, которые направляют рекрутирование иммунных клеток; Следовательно, они, вероятно, будут играть решающую роль в принятии и отторжении трансплантата. Сделан вывод о том, что модель IPTT является полезным инструментом для изучения внутрилегочных иммунных и профибротических путей, участвующих в развитии облитерации дыхательных путей в аллотрансплантате легкого.

Introduction

Трансплантация легких зарекомендовала себя как эффективный метод лечения пациентов с терминальной стадией респираторных заболеваний. Тем не менее, средняя выживаемость реципиентов трансплантата легких человека составляет всего около 6 лет, при этом развитие облитерирующего бронхиолита (ОБВ), типа обструктивной болезни дыхательных путей (ОАД), является основной причиной смерти после первого года после^{трансплантации1}.

Для исследования механизма, лежащего в основе ОАД, было использовано несколько моделей на животных. Одной из таких моделей является гетеротопическая трансплантация трахеи (HTT) модель²

Protocol

Все животные проходили лечение в соответствии с рекомендациями, изложенными Канадским советом по уходу за животными в Руководстве по уходу и использованию экспериментальных животных. Протокол эксперимента был одобрен Комитетом по уходу за животными Научно-исследовательского инстит.......

Discussion

Процедура IPTT на мышах включает в себя важнейшие этапы. Что касается анестезии, то первым важным этапом является эндотрахеальная интубация. Важно держать мышь на соответствующей высоте, положив ноги на стол, чтобы визуализировать голосовые связки и облегчить немедленную интубацию. Кро?.......

Materials

Name	Company	Catalog Number	Comments
BALB/cJ	The Jackson Laboratory	8-10 weeks 25-30 g	Male, Donor
BD 1 mL Syringe	Becton Dickinson	309659
BD PrecisionGlide Needle Aiguile BD PrecisionGlide	Becton Dickinson	305122
Bovie Change-A-Tip Deluxe High-Temperture	Bovie	DEL1
C57BL/6J	The Jackson Laboratory	8-10 weeks 25-30 g	Male, Recipient
Dumont #5/45 Forceps	F·S·T	11251-35
Ethicon Ligaclip Multiple -Clip Appliers-	Ethicon	LX107
Extra Fine Graefe Forceps	F·S·T	11150-10
Glover Bulldog Clamp	Integra	320-127
Halsted-Mosquito Hemostats	F·S·T	13009-12
Horizon Titanium Ligating Clips	Teleflex	001201
Leica M651 Manual surgical microscope for microsurgical procedures	Leica
Magnetix Fixator with spring lock	CD+ LABS	ACD-001
Microsurgical Scissor	Jarit	277-051
Mouse and Perinatal Rat Ventilator Model 687	Harvard	55-0001
Perfadex Plus	XVIVO	19850
Retractor Tip Blunt - 2.5 mm	CD+ LABS	ACD-011
small animal table	CD+ LABS	ACD-003
Surgipro Blue 24" CV-1 Taper, Double Armed	Covidien	VP702X
Systane ointment	Alconn	1444062
System Elastomer	CD+ LABS	ACD-007
Terumo Surflo IV Catheter, 20 G x 1 in	Terumo Medical Corporation	SR-OX2025CA
VMT table Top	benson	91803300