Summary
Abstract
Introduction
Protocol
Representative Results
Discussion
Acknowledgements
Materials
References
Biology
वर्तमान प्रोटोकॉल छवि मात्रा का ठहराव के तरीकों के साथ ओकुलर लेंस में परिधीय संरचनाओं के दृश्य के लिए उपन्यास पूरे माउंट इमेजिंग का वर्णन करते हैं। इन प्रोटोकॉल का उपयोग लेंस माइक्रोस्केल संरचनाओं और लेंस विकास / फ़ंक्शन के बीच संबंधों को बेहतर ढंग से समझने के लिए अध्ययन में किया जा सकता है।
ओकुलर लेंस एक पारदर्शी लचीला ऊतक है जो रेटिना पर विभिन्न दूरी से प्रकाश को केंद्रित करने के लिए अपने आकार को बदल देता है। अंग के चारों ओर एक तहखाने झिल्ली के अलावा, जिसे कैप्सूल कहा जाता है, लेंस पूरी तरह से सेलुलर होता है जिसमें पूर्वकाल गोलार्ध पर उपकला कोशिकाओं का एक मोनोलेयर और लेंस फाइबर कोशिकाओं का एक बड़ा द्रव्यमान होता है। पूरे जीवन में, उपकला कोशिकाएं लेंस भूमध्य रेखा पर अंकुरण क्षेत्र में फैलती हैं, और भूमध्यरेखीय उपकला कोशिकाएं नवगठित फाइबर कोशिकाओं में माइग्रेट करती हैं, लम्बी होती हैं और अंतर करती हैं। भूमध्यरेखीय उपकला कोशिकाएं काफी हद तक आकृति विज्ञान को बेतरतीब ढंग से पैक किए गए कोबल-पत्थर के आकार की कोशिकाओं में संरेखित षट्भुज के आकार की कोशिकाओं में बदल देती हैं, जिससे मेरिडियल पंक्तियाँ बनती हैं। नवगठित लेंस फाइबर कोशिकाएं हेक्सागोनल सेल आकार को बनाए रखती हैं और पूर्वकाल और पीछे के ध्रुवों की ओर बढ़ती हैं, जिससे कोशिकाओं का एक नया खोल बनता है जो फाइबर की पिछली पीढ़ियों पर मढ़ा जाता है। उन तंत्रों के बारे में बहुत कम जानकारी है जो लेंस उपकला कोशिकाओं के उल्लेखनीय आकारिकी को फाइबर कोशिकाओं तक ले जाते हैं। लेंस संरचना, विकास और कार्य को बेहतर ढंग से समझने के लिए, ओकुलर लेंस के पूरे माउंट का उपयोग करके परिधीय संरचनाओं की छवि के लिए नए इमेजिंग प्रोटोकॉल विकसित किए गए हैं। यहां, कैप्सूल मोटाई, उपकला सेल क्षेत्र, सेल परमाणु क्षेत्र और आकार, मेरिडियल पंक्ति सेल ऑर्डर और पैकिंग, और फाइबर सेल चौड़ाई की मात्रा निर्धारित करने के तरीके दिखाए जाते हैं। ये माप आजीवन लेंस विकास के दौरान होने वाले सेलुलर परिवर्तनों को स्पष्ट करने और उम्र या विकृति के साथ होने वाले परिवर्तनों को समझने के लिए आवश्यक हैं।
ओकुलर लेंस आंख के पूर्वकाल क्षेत्र में स्थित एक लचीला, पारदर्शी ऊतक है जो रेटिना पर प्रकाश को ठीक करने का कार्य करता है। लेंस के कार्य करने की क्षमता को इसकी जटिल वास्तुकला और संगठन 1,2,3,4,5,6 के लिए जिम्मेदार ठहराया जा सकता है। लेंस ऊतक के आसपास कैप्सूल है, लेंस संरचना और बायोमैकेनिकल गुणों 7,8,9 को बनाए रखने के लिए आवश्यक एक तहखाने झिल्ली. लेंस स्वयं पूरी तरह से सेलुलर है, जिसम....
वर्णित प्रोटोकॉल लेंस के पूर्वकाल और भूमध्यरेखीय क्षेत्रों में परिधीय लेंस संरचनाओं और कोशिकाओं के उच्च स्थानिक संकल्प दृश्य को सक्षम करते हैं। इस अध्ययन में, बरकरार (लाइव या निश्चित) लेंस का उपयोग क?.......
इस काम को नेशनल आई इंस्टीट्यूट ग्रांट R01 EY032056 से CC और R01 EY017724 से VMF के साथ-साथ नेशनल इंस्टीट्यूट ऑफ जनरल मेडिकल साइंसेज द्वारा अनुदान संख्या P20GM139760 के तहत समर्थित किया गया था। एसटीआई को एनआईएच-एनआईजीएमएस टी 32-GM133395 द्वारा रसायन विज्ञान-जीवविज्ञान इंटरफ़ेस प्रीडॉक्टोरल प्रशिक्षण कार्यक्रम के हिस्से के रूप में और डेलावेयर ग्रेजुएट स्कॉलर्स अवार्ड विश्वविद्यालय द्वारा समर्थित किया गया था।
....Name | Company | Catalog Number | Comments |
3 mm Biopsy Punch | Acuderm Inc | NC9084780 | |
Agarose | Apex BioResearch Products | 20-102GP | |
Antimycotic/Antibiotic | Cytiva | SV30079.01 | |
Bovine Serum Albumin (Fraction V) | Prometheus | 25-529 | |
Delicate task wipes | Kimwipe | ||
Glass bottomed dish (Fluorodish) | World Precision International | FD35-100 | |
Hoescht 33342 | Biotium | 40046 | |
Laser scanning confocal Microscope 880 | Zeiss | ||
MatTek Imaging Dish | MatTek Life Sciences | P35G-1.5-14 | |
Paraformaldehyde | Electron Microscopy Sciences | 100503-917 | |
PBS | GenClone | 25-507B | |
Phenol red-free medium 199 | Gibco | 11043023 | |
Rhodamine-Phalloidin | Thermo Fisher | 00027 | |
Triton X100 | Sigma-Aldrich | 11332481001 | |
WGA-640 | Biotium | CF 640R |
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