Utilizzo di un sistema di perfusione tissutale in vitro per rilevare le attività funzionali dei tubi intestinali isolati in tempo reale

Summary

Presentiamo un metodo per isolare i tubi intestinali di ratto e valutare l'impatto dei farmaci sulla loro tensione, frequenza e ampiezza in vitro. Questo metodo offre un approccio prezioso per i ricercatori che studiano i tubi intestinali.

Abstract

Le malattie gastrointestinali, che hanno un'elevata incidenza, rappresentano sfide considerevoli per l'uomo. L'intestino tenue è parte integrante della digestione e dell'assorbimento di alimenti e farmaci e svolge un ruolo cruciale nel trattamento di queste malattie. L'esperimento del movimento del tubo intestinale, un metodo in vitro comune ed essenziale, viene utilizzato per studiare la dinamica gastrointestinale. Ciò include la preparazione del tubo intestinale isolato, nonché la sospensione del tubo intestinale preparato nella vasca da bagno e il suo collegamento a un rilevatore di segnale. Segue la registrazione e l'analisi di una serie di parametri, come la tensione, che possono essere utilizzati per valutare la funzione motoria intestinale, nonché le considerazioni per mantenere attivo il tubo intestinale in vitro. Il programma standardizzato dal campionamento alla raccolta dei dati migliora notevolmente la ripetibilità dei dati sperimentali e garantisce l'autenticità della registrazione della tensione intestinale dopo interventi fisiologici, patologici e farmacologici. Qui presentiamo le principali problematiche in fase sperimentale e un valido protocollo sperimentale di riferimento per lo studio di farmaci che regolano la motilità gastrointestinale.

Introduction

Le malattie gastrointestinali, una condizione prevalente, hanno un grave impatto sulla vita e sulla salute umana¹. Il disturbo della motilità gastrointestinale è una parte importante delle malattie gastrointestinali funzionali, che si manifesta principalmente con sintomi debilitanti, svuotamento gastrico ritardato e gravi problemi gastrici². Può interrompere la coordinazione gastrointestinale, ostacolare lo svuotamento gastrico, influire sull'intolleranza alimentare intestinale e persino causare ostruzione funzionale nell'intestino tenue o^crasso. Per i pazienti so....

Protocol

Questo protocollo è derivato dalla letteratura precedentemente pubblicata 14,15,16,17. Per il presente studio sono stati utilizzati ratti maschi Sprague Dawley (SD) (260-300 g, 8-10 settimane di età). Il protocollo sugli animali è stato rivisto e approvato dal Comitato di Gestione dell'Università di Medicina Tradizionale Cinese di Chengdu (Record No. 202301.......

Discussion

La motilità gastrointestinale è ottenuta da una serie di contrazioni e rilassamenti della muscolatura liscia coordinati con precisione. Questo processo comporta la contrazione ritmica di un gruppo di gruppi muscolari, la contrazione coordinata di più gruppi e la speciale contrazione propulsiva^20,21. L'insorgenza di disturbi della motilità gastrointestinale può essere associata a disfunzioni a diversi livelli, come il sistema.......

Materials

Name	Company	Catalog Number	Comments
Acetylcholine	Sigma, USA	A6625
atropine	Sangon Biotech Co., Ltd., Shanghai, China	IA06501
Barium chloride	Macklin Biochemical Co.,Ltd.,Shanghai, China	B861682
CaCl2	Sangon Biotech Co., Ltd., Shanghai, China	A501330
D-glucose	Sangon Biotech Co., Ltd., Shanghai, China	A610219
drawing software	GraphPad Software, San Diego, California, USA	—
Epinephrine	Sigma, USA	E4642
HEPES	Xiya Reagent Co., Ltd., Shandong, China	S3872
In vitro tissue perfusion system	PowerLab, ADInstruments, Australia	ML0146
KCl	Sangon Biotech Co., Ltd., Shanghai, China	A100395
KH2PO4	Sangon Biotech Co., Ltd., Shanghai, China	A100781
LabChart Professional version 8.3	ADInstruments, Australia	—
MgCl2·6H2O	Sangon Biotech Co., Ltd., Shanghai, China	A100288
NaCl	Sangon Biotech Co., Ltd., Shanghai, China	A100241
NaHCO3	Sangon Biotech Co., Ltd., Shanghai, China	A100865
nifedipine	Macklin Biochemical Co.,Ltd.,Shanghai, China	N5087
statistical analysis software	GraphPad Software, San Diego, California, USA	—
Surgical sutures	Johnson, USA	—