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Utilizzo di un sistema di perfusione tissutale in vitro per rilevare le attività funzionali dei tubi intestinali isolati in tempo reale
In This Article
Summary
Presentiamo un metodo per isolare i tubi intestinali di ratto e valutare l'impatto dei farmaci sulla loro tensione, frequenza e ampiezza in vitro. Questo metodo offre un approccio prezioso per i ricercatori che studiano i tubi intestinali.
Abstract
Le malattie gastrointestinali, che hanno un'elevata incidenza, rappresentano sfide considerevoli per l'uomo. L'intestino tenue è parte integrante della digestione e dell'assorbimento di alimenti e farmaci e svolge un ruolo cruciale nel trattamento di queste malattie. L'esperimento del movimento del tubo intestinale, un metodo in vitro comune ed essenziale, viene utilizzato per studiare la dinamica gastrointestinale. Ciò include la preparazione del tubo intestinale isolato, nonché la sospensione del tubo intestinale preparato nella vasca da bagno e il suo collegamento a un rilevatore di segnale. Segue la registrazione e l'analisi di una serie di parametri, come la tensione, che possono essere utilizzati per valutare la funzione motoria intestinale, nonché le considerazioni per mantenere attivo il tubo intestinale in vitro. Il programma standardizzato dal campionamento alla raccolta dei dati migliora notevolmente la ripetibilità dei dati sperimentali e garantisce l'autenticità della registrazione della tensione intestinale dopo interventi fisiologici, patologici e farmacologici. Qui presentiamo le principali problematiche in fase sperimentale e un valido protocollo sperimentale di riferimento per lo studio di farmaci che regolano la motilità gastrointestinale.
Introduction
Le malattie gastrointestinali, una condizione prevalente, hanno un grave impatto sulla vita e sulla salute umana1. Il disturbo della motilità gastrointestinale è una parte importante delle malattie gastrointestinali funzionali, che si manifesta principalmente con sintomi debilitanti, svuotamento gastrico ritardato e gravi problemi gastrici2. Può interrompere la coordinazione gastrointestinale, ostacolare lo svuotamento gastrico, influire sull'intolleranza alimentare intestinale e persino causare ostruzione funzionale nell'intestino tenue ocrasso. Per i pazienti so....
Protocol
Questo protocollo è derivato dalla letteratura precedentemente pubblicata 14,15,16,17. Per il presente studio sono stati utilizzati ratti maschi Sprague Dawley (SD) (260-300 g, 8-10 settimane di età). Il protocollo sugli animali è stato rivisto e approvato dal Comitato di Gestione dell'Università di Medicina Tradizionale Cinese di Chengdu (Record No. 202301.......
Representative Results
La prima parte dello studio si concentra sul processo di separazione dei tubi intestinali isolati dal corpo e sulla loro conversione in tubi di 2 cm in vitro. Questo processo è illustrato in dettaglio nella Figura 1. La seconda parte prevede la sospensione e la standardizzazione dell'anello del tubo intestinale isolato. Il successo di questo processo è dimostrato nella Figura 2, che mostra la contrazione ritmica autom.......
Discussion
La motilità gastrointestinale è ottenuta da una serie di contrazioni e rilassamenti della muscolatura liscia coordinati con precisione. Questo processo comporta la contrazione ritmica di un gruppo di gruppi muscolari, la contrazione coordinata di più gruppi e la speciale contrazione propulsiva20,21. L'insorgenza di disturbi della motilità gastrointestinale può essere associata a disfunzioni a diversi livelli, come il sistema.......
Acknowledgements
Questo lavoro è stato sostenuto dallo Special Talent Program dell'Università di Medicina Tradizionale Cinese di Chengdu per "Xinglin Scholars and Discipline Talents Research Promotion Plan" (33002324).
....Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Acetylcholine | Sigma, USA | A6625 | |
| atropine | Sangon Biotech Co., Ltd., Shanghai, China | IA06501 | |
| Barium chloride | Macklin Biochemical Co.,Ltd.,Shanghai, China | B861682 | |
| CaCl2 | Sangon Biotech Co., Ltd., Shanghai, China | A501330 | |
| D-glucose | Sangon Biotech Co., Ltd., Shanghai, China | A610219 | |
| drawing software | GraphPad Software, San Diego, California, USA | — | |
| Epinephrine | Sigma, USA | E4642 | |
| HEPES | Xiya Reagent Co., Ltd., Shandong, China | S3872 | |
| In vitro tissue perfusion system | PowerLab, ADInstruments, Australia | ML0146 | |
| KCl | Sangon Biotech Co., Ltd., Shanghai, China | A100395 | |
| KH2PO4 | Sangon Biotech Co., Ltd., Shanghai, China | A100781 | |
| LabChart Professional version 8.3 | ADInstruments, Australia | — | |
| MgCl2·6H2O | Sangon Biotech Co., Ltd., Shanghai, China | A100288 | |
| NaCl | Sangon Biotech Co., Ltd., Shanghai, China | A100241 | |
| NaHCO3 | Sangon Biotech Co., Ltd., Shanghai, China | A100865 | |
| nifedipine | Macklin Biochemical Co.,Ltd.,Shanghai, China | N5087 | |
| statistical analysis software | GraphPad Software, San Diego, California, USA | — | |
| Surgical sutures | Johnson, USA | — |
References
- Jiang, Z., et al. Therapeutic role of wuda granule in gastrointestinal motility disorder through promoting gastrointestinal motility and decreasing inflammatory level. Front Pharmacol. 14, 1-15 (2023).
- Talley, N. J.
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