Usando um sistema de perfusão tecidual in vitro para detectar as atividades funcionais de tubos intestinais isolados em tempo real

Summary

Apresentamos um método para isolar tubos intestinais de ratos e avaliar o impacto dos medicamentos em sua tensão, frequência e amplitude in vitro. Este método oferece uma abordagem valiosa para pesquisadores que investigam tubos intestinais.

Abstract

As doenças gastrointestinais, que têm alta incidência, representam desafios consideráveis para os seres humanos. O intestino delgado é parte integrante da digestão e absorção de alimentos e medicamentos e desempenha um papel crucial no tratamento dessas doenças. O experimento de movimentação do tubo intestinal, um método in vitro comum e essencial, é utilizado para estudar a dinâmica gastrointestinal. Isso inclui a preparação do tubo intestinal isolado, bem como a suspensão do tubo intestinal preparado no banho e sua conexão a um detector de sinal. Segue-se o registro e análise de uma série de parâmetros, como a tensão, que pode ser usada para avaliar a função motora intestinal, bem como considerações para manter o tubo intestinal ativo in vitro. O programa padronizado desde a amostragem até a coleta de dados melhora muito a repetibilidade dos dados experimentais e garante a autenticidade do registro da tensão intestinal após intervenção fisiológica, patológica e medicamentosa. Aqui apresentamos os principais problemas na operação experimental e um valioso protocolo experimental de referência para estudar drogas que regulam a motilidade gastrointestinal.

Introduction

As doenças gastrointestinais, uma condição prevalente, afetam gravemente a vida e a saúde humanas¹. O distúrbio da motilidade gastrointestinal é uma parte importante das doenças gastrointestinais funcionais, manifestando-se principalmente em sintomas debilitantes, retardo do esvaziamento gástrico e problemas gástricos graves². Pode atrapalhar a coordenação gastrointestinal, dificultar o esvaziamento gástrico, impactar a intolerância alimentar intestinal e até causar obstrução funcional no intestino delgado ou grosso³. Para pacientes submetidos a cirurgia gastroint....

Protocol

Esse protocolo é derivado da literatura publicada anteriormente 14,15,16,17. Ratos machos da raça Sprague Dawley (SD) (260-300 g, 8-10 semanas de idade) foram utilizados para o presente estudo. O protocolo animal foi revisado e aprovado pelo Comitê de Gestão da Universidade de Medicina Tradicional Chinesa de Chengdu (Registro nº 2023017). Antes do experime.......

Discussion

A motilidade gastrointestinal é realizada por uma série de contrações e relaxamentos do músculo liso coordenados com precisão. Esse processo envolve contração rítmica de um grupo de grupos musculares, contração coordenada de múltiplos grupos e contração propulsora especial^20,21. A ocorrência de distúrbios da motilidade gastrointestinal pode estar associada a disfunções em diferentes níveis, como sistema nervoso.......

Materials

Name	Company	Catalog Number	Comments
Acetylcholine	Sigma, USA	A6625
atropine	Sangon Biotech Co., Ltd., Shanghai, China	IA06501
Barium chloride	Macklin Biochemical Co.,Ltd.,Shanghai, China	B861682
CaCl2	Sangon Biotech Co., Ltd., Shanghai, China	A501330
D-glucose	Sangon Biotech Co., Ltd., Shanghai, China	A610219
drawing software	GraphPad Software, San Diego, California, USA	—
Epinephrine	Sigma, USA	E4642
HEPES	Xiya Reagent Co., Ltd., Shandong, China	S3872
In vitro tissue perfusion system	PowerLab, ADInstruments, Australia	ML0146
KCl	Sangon Biotech Co., Ltd., Shanghai, China	A100395
KH2PO4	Sangon Biotech Co., Ltd., Shanghai, China	A100781
LabChart Professional version 8.3	ADInstruments, Australia	—
MgCl2·6H2O	Sangon Biotech Co., Ltd., Shanghai, China	A100288
NaCl	Sangon Biotech Co., Ltd., Shanghai, China	A100241
NaHCO3	Sangon Biotech Co., Ltd., Shanghai, China	A100865
nifedipine	Macklin Biochemical Co.,Ltd.,Shanghai, China	N5087
statistical analysis software	GraphPad Software, San Diego, California, USA	—
Surgical sutures	Johnson, USA	—