A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.
Abstract
Bioengineering
Zebrafisk er en spændende modelorganisme kendt for sin bemærkelsesværdige hjerteregenereringskapacitet. At studere det kontraherende hjerte in vivo er afgørende for at få indsigt i strukturelle og funktionelle ændringer som reaktion på skader. Det er dog stadig udfordrende at opnå højopløselige og hurtige 4-dimensionelle (4D, 3D rumlige + 1D tidsmæssige) billeder af zebrafiskens hjerte for at vurdere hjertearkitektur og kontraktilitet. I denne sammenhæng bruges et internt lysarkmikroskop (LSM) og tilpasset beregningsanalyse til at overvinde disse tekniske begrænsninger. Denne strategi, der involverer LSM-systemkonstruktion, retrospektiv synkronisering, enkeltcellesporing og brugerrettet analyse, gør det muligt at undersøge mikrostrukturen og kontraktilfunktionen på tværs af hele hjertet ved enkeltcelleopløsningen i de transgene Tg (myl7: nucGFP) zebrafisklarver. Derudover er vi i stand til yderligere at inkorporere mikroinjektion af små molekyleforbindelser for at fremkalde hjerteskade på en præcis og kontrolleret måde. Samlet set giver denne ramme mulighed for at spore fysiologiske og patofysiologiske ændringer såvel som den regionale mekanik på enkeltcelleniveau under hjertemorfogenese og regenerering.
ABOUT JoVE
Copyright © 2024 MyJoVE Corporation. All rights reserved