A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.
Децеллюляризованный матрикс селезенки (DSM) имеет многообещающее применение в области тканевой инженерии печени. В этом протоколе описана процедура подготовки DSM крысы, которая включает в себя сбор селезенки крысы, децеллюляризацию их с помощью перфузии и оценку полученного DSM для подтверждения его характеристик.
Трансплантация печени является основным методом лечения терминальной стадии заболевания печени. Однако нехватка и недостаточное качество донорских органов обусловливают необходимость разработки альтернативных методов лечения. Биоискусственная печень (БАЛ), использующая децеллюляризованный матрикс печени (DLM), стала многообещающим решением. Однако поиск подходящих DLM остается сложной задачей. Использование децеллюляризованной матрицы селезенки (DSM) было изучено в качестве основы для БАЛ, предлагая легкодоступную альтернативу. В этом исследовании селезенка крыс была собрана и децеллюляризирована с использованием комбинации циклов замораживания-оттаивания и перфузии с реагентами децеллюляризации. Протокол сохранил микроструктуры и компоненты внеклеточного матрикса (ECM) в DSM. Полный процесс децеллюляризации занял около 11 часов, в результате чего в DSM образовалась неповрежденная ВКМ. Гистологический анализ подтвердил удаление клеточных компонентов при сохранении структуры и состава ВКМ. Представленный протокол обеспечивает комплексный метод получения DSM, предлагая потенциальные приложения в тканевой инженерии печени и клеточной терапии. Эти результаты способствуют разработке альтернативных подходов к лечению терминальной стадии заболевания печени.
Трансплантация печени остается единственным окончательным методом лечения терминальной стадии заболевания печени 1,2,3. Однако критическая нехватка и снижение качества донорских органов повысили потребность в альтернативных методах лечения4. В области регенеративной медицины биоискусственная печень (БАЛ) с использованием децеллюляризованного матрикса печени (ДЛМ) стала многообещающим решением 5,6,7. DLM сохраняет исходную структуру печени, включая ее сложную м....
Это исследование было одобрено Комитетом по этике экспериментов на животных Сианьского университета Цзяотун и проведено в соответствии с руководящими принципами по уходу за лабораторными животными и их использованию.
1. Забор селезенки
В этом протоколе использовалась комбинация повторяющихся циклов замораживания-оттаивания и перфузии с децеллюляризирующими реагентами для децеллюляризации селезенки крыс. Полная децеллюляризация селезенки была достигнута примерно через 11 ч (рис. 2A). На протяжении вс.......
БАЛ представляют собой эффективный подход к лечению терминальной стадии заболевания печени, особенно в тех случаях, когда трансплантация печени затруднена из-за текущей нехватки донорских органов6. Многообещающим вариантом создания БАЛ является использование ДЛМ, котор?.......
Авторы заявили об отсутствии конфликта интересов.
Эта работа была поддержана Национальным фондом естественных наук Китая (82000624), Программой фундаментальных исследований в области естественных наук провинции Шэньси (2022JQ-899 и 2021JM-268), Программой поддержки инновационного потенциала провинции Шэньси (2023KJXX-030), Совместным проектом Университета ключевых исследований и разработок провинции Шэньси (2021GXLH-Z-047), Институциональным фондом Первой аффилированной больницы Сианьского университета Цзяотун (2021HL-42 & 2021HL-21).
....Name | Company | Catalog Number | Comments |
Anesthesia Machine | Harvard Apparatus | tabletop | animal anesthesia |
bubble trap | Shandong Weigao Group Medical Polymer Co., Ltd. | pore diameter: 5 μm | prevent air bubbles |
Buprenorphine | TIPR Pharmaceutical Responsible Co.,Ltd | an analgesic | |
Hemostatic Forceps | Shanghai Medical Instruments Co., Ltd | J31020 | surgical tool |
Heparinized Saline | SPH No.1 Biochemical & Pharmaceutical Co., LTD | prevent the formation of thrombosis | |
Isoflurane | RWD life Science Co. | anesthetic:for the induction and maintenanceof anesthesia | |
Penicillin-Streptomycin | Beyotime Biotechnology Co., Ltd. | C0222 | antibiotics in vitro to prevent microbial contamination |
Peristaltic Pump | Baoding Longer Precision Pump Co., Ltd. | BT100-1L | |
Phosphate-Buffered Saline | Shanghai Titan Scientific Co., Ltd. | 4481228 | phosphoric acid buffer salt solution |
Silicone Tube | Baoding Longer Precision Pump Co., Ltd. | 2.4×0.8mm | |
Silk Suture | Yangzhou Jinhuan Medical Instrument Factory | 6-0 and 3-0 | ligate blood vessels |
Sodium Dodecyl Sulfate | Shanghai Titan Scientific Co., Ltd. | 151-21-3 | ionic detergent, dissolves both cell and nuclear membranes |
Syringe Pump | Shenzhen Mindray Bio-Medical Electronics Co., Ltd | BeneFusion SP5 | intravenous infusion |
Triton X-100 | Shanghai Titan Scientific Co., Ltd. | 9002-93-1 | non-ionic detergent, disrupts lipid-lipid, lipid-protein, and DNA-protein interactions |
Venous Catheter | B. Braun Company | 24G | inserting the spleen artery |
Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article
Request PermissionThis article has been published
Video Coming Soon
ABOUT JoVE
Copyright © 2025 MyJoVE Corporation. All rights reserved