A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.
* These authors contributed equally
Значение миниатюрных колоний в лекарственной устойчивости Candida spp. до конца не изучено. Антимикробная фотодинамическая терапия (аФДТ) предлагает многообещающую стратегию против лекарственно-устойчивых грибковых инфекций. Это исследование демонстрирует, что аФДТ, опосредованная бенгальской розой, эффективно деактивирует Candida glabrata и индуцирует миниатюрные колонии, представляя собой уникальную процедуру.
Сталкиваясь с 40% смертностью у пациентов с кандидемией, лекарственно-устойчивые Candida и их миниатюрные мутанты остаются серьезной проблемой лечения. Антимикробная фотодинамическая терапия (аФДТ) нацелена на несколько грибковых структур, в отличие от антибиотиков/противогрибковых препаратов, потенциально препятствуя резистентности. Традиционные методы индуцирования миниатюрных колоний основаны на бромиде этидия или флуконазоле, которые могут влиять на чувствительность к лекарствам и реакцию на стресс. В этом исследовании изучалось применение зеленого света (пик 520 нм) и фотосенсибилизатора розовой бенгалии (RB) для борьбы с лекарственно-устойчивым изолятом Candida glabrata . Результаты показали, что лечение аФДТ значительно ингибировало рост клеток (снижение на ≥99,9%) и эффективно индуцировало образование миниатюрных колоний, о чем свидетельствует уменьшение размера и потеря окрашивания митохондриальных окислительно-восстановительных индикаторов. Это исследование предоставляет первоначальные доказательства того, что аФДТ может индуцировать миниатюрные колонии в штамме C. glabrata с множественной лекарственной устойчивостью in vitro, предлагая потенциально трансформационный подход к борьбе с устойчивыми грибковыми инфекциями.
Грибковые инфекции, особенно вызванные Candida albicans и все более устойчивой к лекарствам Candida glabrata, представляют серьезную глобальную угрозу1. Эти инфекции могут быть смертельными, особенно для госпитализированных пациентов и людей с ослабленной иммунной системой. Растущая устойчивость к противогрибковым препаратам угрожает борьбе с инвазивным кандидозом, тяжелой грибковой инфекцией с высокой смертностью, особенно от Candida albicans2. Резистентные штаммы препятствуют эффективному лечению, потенциально увеличивая как сложность, так и смертность. В округе Аламеда, штат Калифорния, США,....
1. Культивирование C. glabrata
Примечание: Для экспериментов используется C. glabrata с множественной лекарственной устойчивостью (C2-1000907), устойчивый к большинству противогрибковых агентов, включая флуконазол. Экспериментальные условия, возможно, придется адап?.......
Данные представлены в виде среднего значения со стандартной погрешностью ± и были получены из трех независимых экспериментов, по крайней мере, с тройками в каждой группе. Экспериментальные данные, включая количество колоний, измерения OD600 и результаты окрашивания TTC, были построе.......
Это исследование раскрывает ФДТ как первый зарегистрированный метод индуцирования образования миниатюрных колоний у Candida, превосходящий установленные эффекты бромида этидия и флуконазола. Это новое наблюдение требует дальнейших исследований, чтобы разгадать его последствия как для.......
Эта работа получила финансирование от Министерства науки и технологий Тайваня [MOST 110-2314-B-006-086-MY3], Национального университета Ченг Кун [K111-B094], [K111-B095], Национальной больницы Университета Чэн Кун, Тайвань [NCKUH-11204031], [NCKUMCS2022057].
....Name | Company | Catalog Number | Comments |
0.22 μm filter | Merck, Taipei, Taiwan | Millex, SLGVR33RS | |
1.5 mL microfuge tube | Neptune, San Diego, USA | #3745 | |
20% Triphenyltetrazolium chloride (TTC) | Sigma-Aldrich, MO, USA | T8877 | |
5 mL polypropylene round bottom tube | Corning, AZ, USA | 352059 | |
5 mL round-bottom tube with cell strainer cap | Corning, AZ, USA | Falcon, #352235 | |
96-well plate | Alpha plus, Taoyuan Hsien, Taiwan | #16196 | |
Agar | BRS, Tainan, Taiwan | AG012 | |
Blank disk | Advantec, Tokyo, Japan | 49005040 | |
Centrifuge | Eppendorf, UK | 5415R | |
Ethidium bromide solution | Sigma-Aldrich, MO, USA | E1510 | |
Fluconazole, 2 mg/mL | Pfizer, NY, USA | BC18790248 | |
GraphPad Prism | GraphPad Software | Version 7.0 | |
Green light emitting diode (LED) strip | Nanyi electronics Co.,Ltd, Tainan, Taiwan | 5050 | Excitation wave: 500~550 nm |
Low Temperature. shake Incubators | Yihder, Taipei, Taiwan | LM-570D (R) | |
Mouth care cotton swabs | Good Verita Enterprise, Taipei, Taiwan | 161357 | |
Muller Hinton II agar | BD biosciences, California, USA | 211438 | |
Multimode microplate reader | Molecular Devices | SpectraMax i3x | |
OD600 spectrophotometer | Biochrom, London, UK | Ultrospec 10 | |
Rose Bengal | Sigma-Aldrich, USA | 330000 | stock concentration 40 mg/mL = 4%, prepare in PBS, stored at 4 °C |
Sterilized glass tube | Sunmei, Tainan, Taiwan | AK45048-16100 | |
Yeast Extract Peptone Dextrose Medium | HIMEDIA, India | M1363 |
This article has been published
Video Coming Soon
ABOUT JoVE
Copyright © 2025 MyJoVE Corporation. All rights reserved