Ottimizzazione del metodo di occlusione dell'arteria cerebrale media Longa per la riperfusione completa

Summary

Questo protocollo presenta una guida passo passo per i ricercatori per eseguire la procedura di occlusione dell'arteria cerebrale media sui topi utilizzando il metodo dell'arteria carotide esterna Longa modificata. Le modifiche presentate in questo articolo mirano ad aumentare l'accuratezza dell'occlusione dell'arteria cerebrale media e a garantire la completa riperfusione.

Abstract

Il modello di occlusione dell'arteria cerebrale media funge da modello animale primario per lo studio dell'ictus ischemico. Nonostante sia utilizzato nella ricerca da oltre tre decenni, la sua standardizzazione rimane inadeguata. Condotta prevalentemente su ratti e topi, la procedura pone sfide a causa della natura più piccola e fragile dei topi. A differenza del metodo dell'arteria carotide comune di Koizumi, l'arteria carotide esterna Longa è l'unico modello di corsa del filamento intraluminale che garantisce la completa riperfusione post-ischemia. Questo aspetto ha un'importanza critica per gli studi che indagano i fenomeni di riperfusione. Le modifiche chirurgiche dimostrate in questo articolo assicurano un flusso sanguigno continuo dall'arteria carotide comune durante tutta la fase ischemica e dopo l'insorgenza della riperfusione. L'obiettivo di queste modifiche è quello di occludere selettivamente l'arteria cerebrale media mantenendo la perfusione ininterrotta nei rami prossimali all'arteria cerebrale media durante il periodo di ischemia. Inoltre, l'insorgenza della riperfusione è improvvisa e può essere controllata con precisione, modellando così la trombectomia endovascolare in medicina umana in modo più accurato. Il nostro obiettivo nel presentare questo articolo video completo è quello di facilitare la formazione di nuovi chirurghi e promuovere la standardizzazione delle procedure chirurgiche all'interno della comunità scientifica.

Introduction

L'ictus è la seconda causa di morte e la terza causa di morte e disabilità combinate¹. Per sua causa, l'ictus può essere ischemico o emorragico, con l'ictus ischemico che è significativamente più diffuso nella pratica clinica. L'ictus ischemico deriva da un blocco in un'arteria che fornisce sangue al tessuto cerebrale, portando a ischemia, morte cellulare e infiammazione. Dall'avvento delle terapie di riperfusione come la trombolisi e la trombectomia meccanica, sono stati fatti grandi progressi nel trattamento dell'ictus. Tuttavia, tutte le terapie di riperfusione comportano il rischio di esacerbare le condizio....

Protocol

Tutte le procedure e le procedure di gestione degli animali sono state approvate dal Comitato etico per le licenze della Scuola di medicina dell'Università di Zagabria e dal Comitato etico per la protezione degli animali utilizzati per scopi scientifici del Ministero dell'Agricoltura della Repubblica di Croazia. Le procedure sperimentali sono state condotte secondo la legge croata sulla protezione degli animali (NN 102/17, 32/19), le modifiche alla legge sulla protezione degli animali (.......

Discussion

La MCAO è una procedura molto impegnativa per l'operatore e debilitante per l'animale. Per questo motivo, è della massima importanza per i ricercatori disporre di una procedura operativa standard che riduca al minimo la gravità dell'ictus, riduca il fallimento procedurale e migliori il benessere dell'animale dopo la procedura. Questo protocollo MCAO evidenzia alcuni degli aspetti chiave da considerare quando si esegue questa procedura su un mouse.

La scelt.......

Materials

Name	Company	Catalog Number	Comments
Betadine cutaneous solution 10g/100ml	Alkaloid Skopje	N/A
Braided silk suture	Fine Science Tools	18020-60
Dafilon suture 5/0 DS16	B. Braun	C0936154
Dolokain 20 mg/g gel	Jadran-Galenski Laboratorij	N/A
Dumont #5 forceps	Fine Science Tools	11251-20	2 pieces
Dumont #7 forceps	Fine Science Tools	11271-30
Dumont N0 self-closing forceps	Fine Science Tools	11480-11
Durapore Surgical Tape 1,25cm x 9,1m	3M	7100057169
Durapore Surgical Tape 2,5cm x 9,1m	3M	7100057168
External thermostat	Petnap	1012536
Halsey needle holders	Fine Science Tools	12500-12
Hot bead sterilizer	Fine Science Tools	18000-50
Iris scissors	Fine Science Tools	14060-10
Isoflurane USP	Piramal critical care	N/A
Laser Doppler Monitor	Moor	MOORVMS-LDF2
Metal Pet Heat Pad	Petnap	1012525
Micro Vannas spring scissors	Fine Science Tools	15000-00
Mini-colibri retractor	Fine Science Tools	17000-01
Recugel eye ointment	Bausch&Lomb	N/A
S&T B-1 vessel micro clamp	Fine Science Tools	00396-01	2 pieces
S&T micro clamp applying forceps	Fine Science Tools	00071-14
Schwartz micro serrefines	Fine Science Tools	18052-01
Stemi DV4 Spot stereo microscope	Zeiss	000000-1018-453
Steri-Strip Reinforced Adhesive Skin Closures 3 mm x 75 mm	3M	7100236545
Straight tissue forceps	Fine Science Tools	11023-10
SZX Stand Arm	Olympus	SZ2-STS
Tec III 300 series calibrated vaporizer	Vaporizer Sales and Service inc.	N/A
Universal Stand Type 2	Olympus	SZ2-STU2
VetFlo Six Channel Anesthesia Stand	Kent Scientific	VetFlo-1225	Modified for O2/N2 mixing