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Abstract

Bioengineering

Ernte, Einbettung und Kultivierung von dorsalen Wurzelganglien in Geräten mit mehreren Kompartimenten zur Untersuchung peripherer neuronaler Merkmale

Published: June 28th, 2024

DOI:

10.3791/66854

Abstract

Das häufigste periphere neuronale Merkmal des Schmerzes ist eine erniedrigte Stimulationsschwelle oder Überempfindlichkeit der terminalen Nerven aus den Spinalganglien (DRG). Eine vermutete Ursache für diese Überempfindlichkeit ist die Interaktion zwischen Immunzellen im peripheren Gewebe und Neuronen. In-vitro-Modelle haben grundlegende Erkenntnisse geliefert, um zu verstehen, wie diese Mechanismen zur Überempfindlichkeit von Nozizeptoren führen. In-vitro-Modelle stehen jedoch vor der Herausforderung, die Wirksamkeit auf den Menschen zu übertragen. Um dieser Herausforderung zu begegnen, wurde ein physiologisch und anatomisch relevantes in vitro-Modell für die Kultur von intakten Spinalganglien (DRGs) in drei isolierten Kompartimenten in einer 48-Well-Platte entwickelt. Primäre DRGs werden von erwachsenen Sprague-Dawley-Ratten nach humaner Euthanasie geerntet. Überschüssige Nervenwurzeln werden beschnitten und das DRG wird in geeignete Größen für die Kultur geschnitten. DRGs werden dann in natürlichen Hydrogelen gezüchtet, was ein robustes Wachstum in allen Kompartimenten ermöglicht. Dieses Multikompartimentsystem bietet anatomisch relevante Isolierung der DRG-Zellkörper aus Neuriten, physiologisch relevante Zelltypen und mechanische Eigenschaften, um die Wechselwirkungen zwischen Nerven- und Immunzellen zu untersuchen. Somit bietet diese Kulturplattform ein wertvolles Werkzeug für die Untersuchung von Behandlungsisolationsstrategien, was letztendlich zu einem verbesserten Screening-Ansatz zur Vorhersage von Schmerzen führt.

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