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Abstract

Immunology and Infection

用肽:主要组织相容性复合物四聚体鉴定小鼠肺中的稀有抗原特异性 T 细胞

Published: July 19th, 2024

DOI:

10.3791/66939

Abstract

在健康和疾病过程中抗原特异性 T 细胞的鉴定和表征仍然是提高我们对免疫病理生理学理解的关键。肽:MHC 四聚体试剂的开发大大推进了在内源性 T 细胞库中追踪抗原特异性 T 细胞群的技术挑战。这些荧光标记的 MHC I 类或 II 类分子的可溶性多聚体与抗原肽表位复合,直接与具有相应 T 细胞受体 (TCR) 特异性的 T 细胞结合,因此可以识别天然状态下的抗原特异性 T 细胞群,而无需离 诱导的功能反应刺激。对于极其罕见的群体,可以磁性富集四聚体结合的 T 细胞,以提高检测的灵敏度和可靠性。

随着组织驻留 T 细胞免疫研究的深入,迫切需要识别转运到非淋巴组织并驻留在非淋巴组织中的抗原特异性 T 细胞。在该协议中,我们提出了一组详细的说明,用于分离和表征小鼠肺中存在的抗原特异性 T 细胞。这包括从消化的肺组织中分离 T 细胞,然后进行一般的 T 细胞磁性富集步骤和四聚体染色,以进行流式细胞术分析和分选。该方案中强调的步骤利用了常用技术和现成的试剂,使其几乎适用于任何从事小鼠 T 细胞免疫学的研究人员,并且高度适用于驻留在肺内的任何低频抗原特异性 T 细胞群的各种下游分析。

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