ペプチド:主要組織適合遺伝子複合体四量体を用いたマウス肺由来の希少抗原特異的T細胞の同定

健康および疾患における抗原特異的T細胞の同定と特性評価は、免疫病態生理学の理解を深めるための鍵であり続けています。内因性T細胞レパートリー内の抗原特異的T細胞集団を追跡するという技術的課題は、ペプチド:MHCテトラマー試薬の開発によって大幅に進歩しました。抗原性ペプチドエピトープに複合体を形成したMHCクラスIまたはクラスII分子のこれらの蛍光標識可溶性マルチマーは、対応するT細胞受容体(TCR)特異性を持つT細胞に直接結合するため、 ex vivo によって誘導される機能的応答を必要とせずに、天然状態の抗原特異的T細胞集団を同定できます刺激。非常にまれな集団の場合、四量体に結合したT細胞を磁気的に濃縮して、検出の感度と信頼性を高めることができます。

組織に常在するT細胞免疫の研究が深まるにつれ、非リンパ組織に輸送され、非リンパ組織に存在する抗原特異的T細胞の同定が急務となっています。このプロトコルでは、マウスの肺内に存在する抗原特異的T細胞の単離と特性評価のための詳細な指示を提示します。これには、消化された肺組織からのT細胞の単離と、フローサイトメトリー分析とソーティングのための一般的なT細胞磁気濃縮ステップとテトラマー染色が含まれます。このプロトコルで強調されているステップは、一般的な技術と容易に利用可能な試薬を利用しているため、マウスT細胞免疫学に従事するほぼすべての研究者がアクセスでき、肺内に存在している低頻度抗原特異的T細胞集団のさまざまなダウンストリーム分析に非常に適応性があります。