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Primer-Free Aptamer Selection Using A Random DNA Library

Aptamers are highly structured oligonucleotides (DNA or RNA) that can bind to targets with affinities comparable to antibodies 1. They are identified ...

Pennsylvania State University

&#x5DF2;&#x9694;&#x79BB;&#x6A21;&#x5F0F;&#x9057;&#x4F20;&#x751F;&#x7269;&#x6240;&#x9700;&#x7684;&#x6B63;&#x5E38;&#x6838;&#x8FC1;&#x79FB;&#x548C;&#x53D1;&#x5C55;&#x7684;&#x8FDB;&#x7A0B;&#x4E2D;&#x53D1;&#x6325;&#x4F5C;&#x7528;&#x7684;&#x5173;&#x952E;&#x57FA;&#x56E0;&#x3002;&#x6709;&#x4E00;&#x4E2A;&#x8FD9;&#x79CD;&#x57FA;&#x56E0;&#x662F; nudC &#xFF08;&#x6838;&#x5206;&#x5E03; C&#xFF09;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x662F;&#x5B9A;&#x4F4D;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6838;&#x4E2D;&#x7684;&#x4E1D;&#x72B6;&#x771F;&#x83CC;&#x6784;&#x5DE2;&#x66F2;&#x9709;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8D28;&#x548C;&#x6B63;&#x5E38;&#x83CC;&#x843D;&#x751F;&#x957F;&#x7684;&#x9700;&#x8981;&#x3002;&#x8FD9;&#x79CD;&#x57FA;&#x56E0;&#x9AD8;&#x5EA6;&#x4FDD;&#x5B88;&#xFF0C;&#x7ED3;&#x6784;&#x4E0A;&#x548C;&#x529F;&#x80FD;&#x4E0A;&#xFF0C;&#x6574;&#x4E2A;&#x8FDB;&#x5316;&#x548C;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x540C;&#x6E90;&#xFF0C;HnudC&#xFF0C;&#x5DF2;&#x88AB;&#x514B;&#x9686;&#x3002;&#x7814;&#x7A76;&#x7684;&#x9AD8;&#x7B49;&#x771F;&#x6838;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x7684; nudC &#x51FD;&#x6570;&#xFF0C;HnudC &#x662F;&#x7F16;&#x7801;&#x901A;&#x8FC7;&#x5236;&#x5B9A;&#x4E09;&#x6838;&#x9176;&#x6784;&#x9020;&#xFF0C;&#x7EC4;&#x6210;&#x7684;&#x4E24;&#x4E2A;&#x987A;&#x5F0F;&#x6838;&#x9176;&#x7684;&#x89E3;&#x653E; HnudC &#x9488;&#x5BF9;&#x5185;&#x90E8;&#x8DE8;&#x4EE3;&#x7406;&#x6838;&#x9176;&#x3002;&#x9AD8;&#x6548;&#x88C2;&#x89E3;&#x7F51;&#x7AD9; HnudC mRNA &#x4E2D;&#x7684;&#x786E;&#x5B9A;&#x4E86;&#x4F7F;&#x7528;&#x5E93;&#x9009;&#x62E9;&#x6280;&#x672F;&#x548C;&#x9488;&#x5BF9; HnudC &#x7684;&#x5185;&#x90E8;&#x6838;&#x9176;&#x88AB;&#x514B;&#x9686;&#x5230;&#x4E09;&#x6838;&#x9176;&#x5361;&#x5E26;&#x3002;&#x4E09;&#x6838;&#x9176;&#x6784;&#x9020;&#x5230;&#x8715;&#x76AE;&#x6FC0;&#x7D20;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x8868;&#x8FBE;&#x8F7D;&#x4F53; subcloned&#xFF0C;&#x7A33;&#x5B9A;&#x8F6C;&#x67D3;&#x5230;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x80DA;&#x80CE; 293 &#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;Muristerone A &#x8BF1;&#x5BFC; HnudC &#x6838;&#x9176;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x548C;&#x5236;&#x4F5C; HnudC mRNA &#x7684;&#x5177;&#x4F53;&#x51CF;&#x5C11;&#x3002;HnudC &#x4E0B;&#x8C03; mRNA &#x663E;&#x8457;&#x6291;&#x5236;&#x7EC6;&#x80DE;&#x589E;&#x6B96;&#x7684;&#x514B;&#x9686;&#x8868;&#x8FBE;&#x6838;&#x9488;&#x5BF9; HnudC &#x7684;&#x4E09;&#x91CD;&#x9176;&#xFF0C;&#x5176;&#x4E2D;&#x4E2D;&#x975E;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x540C;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6216;&#x5355;&#x72EC;&#x7684;&#x77E2;&#x91CF;&#x8F6C;&#x67D3;&#x7EC6;&#x80DE;&#x672A;&#x89C2;&#x5BDF;&#x5230;&#x7684;&#x7ED3;&#x679C;&#x3002;&#x5728;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x6587;&#x5316;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x8BB8;&#x591A;&#x6709;&#x4E1D;&#x5206;&#x88C2;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5728;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6709;&#x4E1D;&#x5206;&#x88C2;&#x671F;&#x95F4;&#x8868;&#x73B0;&#x51FA;&#x4E3B;&#x8F74;&#x7684;&#x4F53;&#x7CFB;&#x7ED3;&#x6784;&#x4E2D;&#x7684;&#x7F3A;&#x9677;&#x3002;&#x89C2;&#x5BDF;&#x5230;&#x7684;&#x6700;&#x5E38;&#x89C1;&#x7684;&#x7F3A;&#x9677;&#x662F;&#x591A;&#x4E2A;&#x7EBA;&#x9524;&#x4E24;&#x6781;&#xFF0C;&#x800C;&#x4E0D;&#x662F;&#x9884;&#x671F;&#x7684;&#x4E24;&#x6781;&#x7ED3;&#x6784;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x6570;&#x636E;&#x8868;&#x660E; HnudC &#x5728;&#x771F;&#x6838;&#x7EC6;&#x80DE;&#x589E;&#x6B96;&#x7684;&#x6839;&#x672C;&#x91CD;&#x8981;&#x6027;&#x804C;&#x80FD;&#x4F5C;&#x7528;&#x4E3A; HnudC &#x5728;&#x4E3B;&#x8F74;&#x5F62;&#x6210;&#x5728;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6709;&#x4E1D;&#x5206;&#x88C2;&#x3002;

&#x771F;&#x83CC;&#x6838;&#x8FC1;&#x79FB;&#x57FA;&#x56E0; nudC &#x4EBA;&#x7C7B;&#x540C;&#x6E90;&#x7EC6;&#x80DE;&#x589E;&#x6B96;&#x4E0E;&#x7EBA;&#x9524;&#x5F62;&#x6210;&#x7684;&#x53C2;&#x4E0E;&#x3002;

Essential genes which are required for normal nuclear migration and play a role in developmental processes have been isolated from model genetic organisms. One such gene is nudC (nuclear distribution C), which is required for positioning nuclei in the cytoplasm of the filamentous fungus Aspergillus nidulans and for normal colony growth. This gene is highly conserved, structurally and functionally, throughout evolution and the human homolog, HnudC, has been cloned. To study the function of nudC in higher eukaryotic cells, HnudC was downregulated by developing triple ribozyme constructs, consisting of two cis-acting ribozymes which liberate an internal trans-acting ribozyme targeted to HnudC. Efficient cleavage sites in HnudC mRNA were identified using a library selection technique and HnudC-targeted internal ribozymes were cloned into a triple ribozyme cassette. Triple ribozyme constructs were subcloned into an ecdysone-inducible expression vector and stably transfected into human embryonic 293 cells. Muristerone A induced expression of the HnudC ribozyme and produced specific reduction of HnudC mRNA. Downregulation of HnudC mRNA resulted in significant inhibition of cell proliferation in clones expressing the HnudC-targeted triple ribozyme, which was not observed in uninduced cells or cells transfected with vector alone. In induced cultures, many mitotic cells demonstrated defects in spindle architecture during mitosis. The most common defect observed was multiple mitotic spindle poles rather than the expected bipolar structure. These data demonstrate the fundamental importance of HnudC in eukaryotic cell proliferation and a functional role for HnudC in spindle formation at mitosis.

Involvement of the fungal nuclear migration gene nudC human homolog in cell proliferation and mitotic spindle formation.

G&#xE8;nes essentiels qui sont n&#xE9;cessaires &#xE0; la migration nucl&#xE9;aire normale et jouer un r&#xF4;le dans les processus de d&#xE9;veloppement ont &#xE9;t&#xE9; isol&#xE9;s &#xE0; partir des organismes mod&#xE8;les g&#xE9;n&#xE9;tiques. Un g&#xE8;ne tel est nudC (r&#xE9;partition nucl&#xE9;aire C), qui est n&#xE9;cessaire pour les noyaux de positionnement dans le cytoplasme de la champignon filamenteux Aspergillus nidulans et pour la croissance de colonies normale. Ce g&#xE8;ne est hautement conserv&#xE9;, structurellement et fonctionnellement, &#xE0; travers l&#x26;#39;&#xE9;volution et l&#x26;#39;homologue humain, HnudC, a &#xE9;t&#xE9; clon&#xE9;. Pour &#xE9;tudier la fonction d&#x26;#39;nudC dans des cellules eucaryotes sup&#xE9;rieures, sont diminu&#xE9;s par HnudC d&#xE9;velopper des constructions ribozyme triple, consistant en deux agissant en cis des ribozymes qui lib&#xE8;rent une int&#xE9;rieur ribozyme agissant en trans cibl&#xE9; &#xE0; HnudC. Des sites de clivage efficaces dans l&#x26;#39;ARNm HnudC ont &#xE9;t&#xE9; identifi&#xE9;s par une technique de s&#xE9;lection et de la biblioth&#xE8;que HnudC cibl&#xE9;es ribozymes internes ont &#xE9;t&#xE9; clon&#xE9;es dans une cassette ribozyme triple. Triple constructions ribozymes ont &#xE9;t&#xE9; sous-clon&#xE9; dans un vecteur d&#x26;#39;expression inductible et ecdysone-transfect&#xE9;es de fa&#xE7;on stable dans des cellules embryonnaires humaines 293. Muristerone Une expression induite de la ribozyme HnudC et produit une r&#xE9;duction sp&#xE9;cifique de l&#x26;#39;ARNm HnudC. R&#xE9;gulation &#xE0; la baisse de l&#x26;#39;ARNm HnudC a entra&#xEE;n&#xE9; une inhibition significative de la prolif&#xE9;ration cellulaire dans les clones exprimant le ribozyme HnudC cibl&#xE9;e triples, qui n&#x26;#39;a pas &#xE9;t&#xE9; observ&#xE9;e dans les cellules non induites ou cellules transfect&#xE9;es avec un vecteur seul. Dans les cultures induites, de nombreuses cellules en mitose d&#xE9;montr&#xE9; les d&#xE9;fauts de l&#x26;#39;architecture de broche lors de la mitose. Le d&#xE9;faut le plus couramment observ&#xE9; est plusieurs p&#xF4;les du fuseau mitotique, plut&#xF4;t que la structure bipolaire attendu. Ces donn&#xE9;es d&#xE9;montrent l&#x26;#39;importance fondamentale de HnudC dans la prolif&#xE9;ration de cellules eucaryotes et un r&#xF4;le fonctionnel pour HnudC dans la formation du fuseau lors de la mitose.

Implication du g&#xE8;ne fongique Homolog nucl&#xE9;aire NudC les Migrations Humaines de la prolif&#xE9;ration cellulaire et la formation du fuseau mitotique

Die Beteiligung des Pilz-Gen Kernwanderung nudC humanen Homolog bei der Zellproliferation und mitotischen Spindel.

Geni essenziali che sono necessari per la normale migrazione nucleare e giocano un ruolo nei processi di sviluppo sono stati isolati da organismi genetici modello. Un tale gene &egrave; nudC (distribuzione nucleare C), che &egrave; richiesto per il posizionamento di nuclei nel citoplasma del fungo filamentoso Aspergillus nidulans e per la crescita normale Colonia. Questo gene &egrave; altamente conservato, strutturalmente e funzionalmente, nel corso dell&#39;evoluzione e dell&#39;omologo umano, HnudC, &egrave; stato clonato. Per studiare la funzione dei nudC nelle cellule eucariotiche superiori, HnudC era downregolata attraverso lo sviluppo di costrutti ribozima triplo, costituito da due ribozimi cis-acting che liberano un ribozima trans-recitazione interna mirata a HnudC. Siti di clivaggio efficiente in HnudC mRNA sono stati identificati usando una tecnica di selezione biblioteca e targeting HnudC interni ribozimi sono stati duplicati in una cassetta tripla ribozima. Tripla ribozima costrutti sono stati subcloned in un vettore di espressione ecdisone-inducible e stabile transfected in cellule embrionali umane di 293. Muristerone A indotta da espressione fra il ribozima HnudC e prodotto specifico riduzione del mRNA di HnudC. MRNA downregulation del HnudC ha portato significativo inibizione della proliferazione cellulare nei cloni che esprimono il ribozima triplo HnudC-mirate, che non &egrave; stato osservato in cellule uninduced o celle transfected con il vettore da solo. Nelle culture indotte, molte cellule mitotic dimostrato difetti nell&#39;architettura del mandrino durante la mitosi. Il difetto pi&ugrave; comune osservato era pi&ugrave; poli del fuso mitotico, piuttosto che la struttura bipolare prevista. Questi dati dimostrano l&#39;importanza fondamentale di HnudC nella proliferazione delle cellule eucariotiche e un ruolo funzionale per HnudC nella formazione di mandrino a mitosi.

Coinvolgimento dell&#39;omologo umano fungine migrazione nucleare gene nudC nella proliferazione cellulare e la formazione del fuso mitotico.

&#x901A;&#x5E38;&#x306E;&#x6838;&#x79FB;&#x884C;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x306A;&#x767A;&#x9054;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x3067;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x679C;&#x305F;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x5FC5;&#x9808;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306F;&#x3001;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x907A;&#x4F1D;&#x7684;&#x751F;&#x7269;&#x304B;&#x3089;&#x5358;&#x96E2;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x305D;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306F;&#x3001;&#x7CF8;&#x72B6;&#x83CC;&#x30A2;&#x30B9;&#x30DA;&#x30EB;&#x30AE;&#x30EB;&#x30B9;&#xB7;&#x7D30;&#x80DE;&#x8CEA;&#x306E;&#x4F4D;&#x7F6E;&#x6C7A;&#x3081;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x6838;&#x3068;&#x901A;&#x5E38;&#x306E;&#x30B3;&#x30ED;&#x30CB;&#x30FC;&#x306E;&#x6210;&#x9577;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x3068;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x3001;&#xFF08;&#x6838;&#x5206;&#x5E03;C&#xFF09;nudC&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306F;&#x9AD8;&#x5EA6;&#x306B;&#x9032;&#x5316;&#x306E;&#x904E;&#x7A0B;&#x3067;&#x3001;&#x69CB;&#x9020;&#x7684;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x6A5F;&#x80FD;&#x7684;&#x306B;&#x3001;&#x4FDD;&#x5B58;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3068;&#x30D2;&#x30C8;&#x76F8;&#x540C;&#x4F53;&#x3001;HnudC&#x306F;&#x3001;&#x30AF;&#x30ED;&#x30FC;&#x30F3;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x9AD8;&#x7B49;&#x771F;&#x6838;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;nudC&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3092;&#x8ABF;&#x3079;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;HnudC&#x306F;HnudC&#x3092;&#x5BFE;&#x8C61;&#x3068;&#x3057;&#x305F;&#x5185;&#x90E8;&#x306E;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x4F5C;&#x7528;&#x30EA;&#x30DC;&#x30B6;&#x30A4;&#x30E0;&#x3092;&#x89E3;&#x653E;&#x3059;&#x308B;2&#x30B7;&#x30B9;&#x4F5C;&#x7528;&#x30EA;&#x30DC;&#x30B6;&#x30A4;&#x30E0;&#x304B;&#x3089;&#x306A;&#x308B;&#x3001;&#x4E09;&#x91CD;&#x30EA;&#x30DC;&#x30B6;&#x30A4;&#x30E0;&#x69CB;&#x7BC9;&#x7269;&#x3092;&#x958B;&#x767A;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x30C0;&#x30A6;&#x30F3;&#x30EC;&#x30AE;&#x30E5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30C8;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3002; HnudC mRNA&#x306E;&#x52B9;&#x7387;&#x7684;&#x306A;&#x5207;&#x65AD;&#x90E8;&#x4F4D;&#x306F;&#x3001;&#x4E09;&#x91CD;&#x30EA;&#x30DC;&#x30B6;&#x30A4;&#x30E0;&#x30AB;&#x30BB;&#x30C3;&#x30C8;&#x306B;&#x30AF;&#x30ED;&#x30FC;&#x30CB;&#x30F3;&#x30B0;&#x3057;&#x305F;&#x30E9;&#x30A4;&#x30D6;&#x30E9;&#x30EA;&#x3092;&#x9078;&#x629E;&#x3059;&#x308B;&#x624B;&#x6CD5;&#x3068;HnudC&#x6A19;&#x7684;&#x5185;&#x90E8;&#x30EA;&#x30DC;&#x30B6;&#x30A4;&#x30E0;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x3066;&#x540C;&#x5B9A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x4E09;&#x91CD;&#x30EA;&#x30DC;&#x30B6;&#x30A4;&#x30E0;&#x69CB;&#x7BC9;&#x7269;&#x306F;&#x3001;&#x30A8;&#x30AF;&#x30B8;&#x30BD;&#x30F3;&#x8A98;&#x5C0E;&#x767A;&#x73FE;&#x30D9;&#x30AF;&#x30BF;&#x30FC;&#x306B;&#x30B5;&#x30D6;&#x30AF;&#x30ED;&#x30FC;&#x30CB;&#x30F3;&#x30B0;&#x3057;&#x3001;&#x5B89;&#x5B9A;&#x3057;&#x305F;&#x30D2;&#x30C8;&#x80DA;293&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A7;&#x30AF;&#x30C8;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30E0;&#x30EA;&#x30B9;&#x30C6;&#x30ED;&#x30F3;HnudC&#x30EA;&#x30DC;&#x30B6;&#x30A4;&#x30E0;&#x3068;HnudC mRNA&#x306E;&#x751F;&#x7523;&#x5177;&#x4F53;&#x7684;&#x306A;&#x524A;&#x6E1B;&#x306E;&#x8A98;&#x5C0E;&#x767A;&#x73FE;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002; HnudC mRNA&#x306E;&#x30C0;&#x30A6;&#x30F3;&#x30EC;&#x30AE;&#x30E5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306F;&#x3001;&#x30D9;&#x30AF;&#x30BF;&#x30FC;&#x306E;&#x307F;&#x3092;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A7;&#x30AF;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x975E;&#x8A98;&#x5C0E;&#x7D30;&#x80DE;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;&#x306F;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3055;&#x308C;&#x306A;&#x304B;&#x3063;&#x305F;HnudC&#x3092;&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#x3068;&#x3057;&#x305F;&#x4E09;&#x91CD;&#x30EA;&#x30DC;&#x30B6;&#x30A4;&#x30E0;&#x3092;&#x767A;&#x73FE;&#x3059;&#x308B;&#x30AF;&#x30ED;&#x30FC;&#x30F3;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x5897;&#x6B96;&#x306E;&#x6709;&#x610F;&#x306A;&#x963B;&#x5BB3;&#x3092;&#x3082;&#x305F;&#x3089;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x8A98;&#x5C0E;&#x57F9;&#x990A;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x6709;&#x7CF8;&#x5206;&#x88C2;&#x7D30;&#x80DE;&#x304C;&#x6709;&#x7CF8;&#x5206;&#x88C2;&#x6642;&#x306E;&#x7D21;&#x9318;&#x4F53;&#x306E;&#x30A2;&#x30FC;&#x30AD;&#x30C6;&#x30AF;&#x30C1;&#x30E3;&#x306E;&#x6B20;&#x9665;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x6700;&#x3082;&#x4E00;&#x822C;&#x7684;&#x306A;&#x6B20;&#x9665;&#x3067;&#x306F;&#x306A;&#x304F;&#x4E88;&#x60F3;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x30D0;&#x30A4;&#x30DD;&#x30FC;&#x30E9;&#x69CB;&#x9020;&#x3088;&#x308A;&#x3082;&#x3001;&#x8907;&#x6570;&#x306E;&#x6709;&#x7CF8;&#x5206;&#x88C2;&#x7D21;&#x9318;&#x4F53;&#x6975;&#x3067;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x306F;&#x3001;&#x771F;&#x6838;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5897;&#x6B96;&#x3084;&#x6709;&#x7CF8;&#x5206;&#x88C2;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x7D21;&#x9318;&#x4F53;&#x5F62;&#x6210;&#x306E;HnudC&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x7684;&#x5F79;&#x5272;&#x306E;HnudC&#x306E;&#x57FA;&#x672C;&#x7684;&#x306A;&#x91CD;&#x8981;&#x6027;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x7D30;&#x80DE;&#x5897;&#x6B96;&#x3084;&#x6709;&#x7CF8;&#x5206;&#x88C2;&#x7D21;&#x9318;&#x4F53;&#x5F62;&#x6210;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x83CC;&#x6838;&#x79FB;&#x884C;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;NudC&#x30D2;&#x30C8;&#x76F8;&#x540C;&#x4F53;&#x306E;&#x95A2;&#x4E0E;

&#xC815;&#xC0C1;&#xC801;&#xC778; &#xD575; &#xC774;&#xB3D9;&#xC5D0; &#xD544;&#xC694;&#xD55C; &#xBC1C;&#xB2EC; &#xACFC;&#xC815;&#xC5D0; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xD558;&#xB294; &#xD544;&#xC218; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBAA8;&#xB378; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xC720;&#xAE30; &#xCCB4; &#xACE0;&#xB9BD; &#xB418;&#xC5B4; &#xC788;&#xB2E4;. &#xAC19;&#xC740; &#xD55C; &#xC720;&#xC804;&#xC790; filamentous &#xACF0; &#xD321;&#xC774; Aspergillus nidulans&#xC758; &#xC138;&#xD3EC;&#xC9C8;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD575; &#xC704;&#xCE58; &#xBC0F; &#xC815;&#xC0C1; &#xC2DD;&#xBBFC;&#xC9C0; &#xC131;&#xC7A5;&#xC5D0; &#xD544;&#xC694;&#xD55C; nudC (&#xD575; &#xBC30;&#xD3EC; C) &#xC774;&#xB2E4;. &#xC774; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xB294; &#xACE0;&#xB3C4;&#xB85C; &#xBCF4;&#xC874;, &#xAD6C;&#xC870;&#xC801; &#xBC0F; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C;, &#xC9C4;&#xD654;&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; &#xD558; &#xACE0; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xCCB4;, HnudC, &#xBCF5;&#xC81C; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. NudC &#xB192;&#xC740; &#xC9C4; &#xD575; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC758; &#xAE30;&#xB2A5; &#xC5F0;&#xAD6C;, HnudC HnudC &#xB300;&#xC0C1; &#xB0B4;&#xBD80; &#xD2B8;&#xB79C;&#xC2A4; &#xC5F0;&#xAE30; ribozyme&#xC744; &#xD574;&#xBC29; &#xD558;&#xB294; &#xB450; &#xAC1C;&#xC758; cis &#xC5F0;&#xAE30; ribozymes &#xAD6C;&#xC131; &#xB41C; &#xD2B8;&#xB9AC;&#xD50C; ribozyme &#xAD6C;&#xC870;&#xB97C; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xD558; &#xC5EC; downregulated&#xB97C; &#xD588;&#xB2E4;. HnudC Mrna&#xC5D0; &#xD6A8;&#xC728;&#xC801;&#xC778; &#xBD84;&#xC5F4; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8; &#xB77C;&#xC774;&#xBE0C;&#xB7EC;&#xB9AC; &#xC120;&#xD0DD; &#xAE30;&#xC220;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xB41C; &#xBC0F; &#xB0B4;&#xBD80; ribozymes HnudC &#xB300;&#xC0C1;&#xC73C;&#xB85C; &#xD2B8;&#xB9AC;&#xD50C; ribozyme &#xCE74;&#xC138;&#xD2B8;&#xC5D0; &#xBCF5;&#xC81C; &#xB41C;. &#xD2B8;&#xB9AC;&#xD50C; ribozyme &#xAD6C;&#xBB38; ecdysone &#xC720;&#xB3C4;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xC2DD; &#xBCA1;&#xD130;&#xC5D0; subcloned &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xC548;&#xC815;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xBC30;&#xC544; 293 &#xC138;&#xD3EC;&#xB85C; &#xD398;. Muristerone A HnudC ribozyme &#xC2DD; &#xC720;&#xB3C4; &#xBC0F; HnudC Mrna&#xC758; &#xD2B9;&#xC815; &#xAC10;&#xC18C;&#xB97C; &#xC0DD;&#xC0B0;. HnudC Downregulation mRNA &#xD45C;&#xD604; &#xD558;&#xB294; HnudC &#xB300;&#xC0C1;&#xC73C;&#xB85C; &#xD2B8;&#xB9AC;&#xD50C; ribozyme, uninduced &#xC140; &#xB610;&#xB294; &#xC140; &#xBCA1;&#xD130; &#xD63C;&#xC790; &#xD398;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAD00;&#xCC30; &#xD558;&#xC9C0;&#xB294; &#xD074;&#xB860;&#xC758; &#xC138;&#xD3EC; &#xC99D;&#xC2DD;&#xC758; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC800;&#xD574; &#xADC0;&#xCC29;&#xB418; &#xC5C8; &#xB2E4;. &#xC720;&#xB3C4; &#xBB38;&#xD654; &#xB9CE;&#xC740; mitotic &#xC140; &#xC720;&#xC0AC; &#xBD84;&#xC5F4; &#xC911; &#xC2A4;&#xD540; &#xB4E4; &#xC544;&#xD0A4;&#xD14D;&#xCC98;&#xC5D0; &#xACB0;&#xD568;&#xC744; &#xC2DC;&#xC5F0; &#xD588;&#xB2E4;. &#xAC00;&#xC7A5; &#xC77C;&#xBC18;&#xC801;&#xC778; &#xACB0;&#xD568; &#xAD00;&#xCC30; &#xC608;&#xC0C1;&#xB41C; &#xBC14;&#xC774; &#xD3F4;&#xB77C; &#xAD6C;&#xC870; &#xBCF4;&#xB2E4;&#xB294; &#xC5EC;&#xB7EC; mitotic &#xC2A4;&#xD540; &#xB4E4; &#xADF9; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xB370;&#xC774;&#xD130; &#xC720;&#xC0AC; &#xBD84;&#xC5F4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC2A4;&#xD540; &#xB4E4; &#xD615;&#xC131;&#xC5D0; Hnudc&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC9C4; &#xD575; &#xC138;&#xD3EC; &#xC99D;&#xC2DD;&#xC5D0; Hnudc&#xC758; &#xADFC;&#xBCF8;&#xC801;&#xC778; &#xC911;&#xC694;&#xC131; &#xBC0F; &#xAE30;&#xB2A5; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC;.

&#xADE0; &#xD575; &#xC774;&#xB3D9; &#xC9C4; nudC &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xCCB4; &#xC138;&#xD3EC; &#xC99D;&#xC2DD; &#xBC0F; mitotic &#xC2A4;&#xD540; &#xB4E4; &#xD615;&#xC131;&#xC5D0;&#xC758; &#xCC38;&#xC5EC;.

Los genes esenciales que se requieren para la migraci&#xF3;n nuclear normal y jugar un papel en los procesos de desarrollo se han aislado de organismos modelo gen&#xE9;ticos. Uno de estos genes es NUDC (nucleares distribuci&#xF3;n C), que se requiere para los n&#xFA;cleos de posicionamiento en el citoplasma de la hongo filamentoso Aspergillus nidulans y para el crecimiento de colonias normal. Este gen est&#xE1; altamente conservada, estructural y funcionalmente, a trav&#xE9;s de la evoluci&#xF3;n y el hom&#xF3;logo humano, HnudC, ha sido clonado. Para estudiar la funci&#xF3;n de NUDC en c&#xE9;lulas eucariotas superiores, HnudC se downregulated mediante el desarrollo de construcciones triples ribozima, que consta de dos de acci&#xF3;n cis-ribozimas que liberan un interno de trans-acci&#xF3;n dirigido a HnudC ribozima. Sitios de escisi&#xF3;n eficientes en ARNm HnudC se identificaron utilizando una t&#xE9;cnica de selecci&#xF3;n de biblioteca y HnudC orientados por ribozimas internos fueron clonados en un casete de ribozima triples. Triple constructos de ribozima se subclonaron en un vector de expresi&#xF3;n inducible por ecdisona y establemente transfectadas en c&#xE9;lulas embrionarias humanas 293. Muristerone Una expresi&#xF3;n inducida de la ribozima HnudC y la reducci&#xF3;n espec&#xED;fica de ARNm producido HnudC. Downregulation de ARNm HnudC result&#xF3; en una inhibici&#xF3;n significativa de la proliferaci&#xF3;n celular en los clones que expresan la ribozima triples HnudC-espec&#xED;fica, que no se observ&#xF3; en las c&#xE9;lulas no inducidas o c&#xE9;lulas transfectadas con el vector solo. En cultivos inducidos, muchas c&#xE9;lulas mit&#xF3;ticas demostrado defectos en la arquitectura del huso durante la mitosis. El defecto m&#xE1;s com&#xFA;n observada fue de m&#xFA;ltiples polos del huso mit&#xF3;tico en lugar de la estructura bipolar esperado. Estos datos demuestran la importancia fundamental de HnudC en la proliferaci&#xF3;n de c&#xE9;lulas eucariotas y un papel funcional para HnudC en la formaci&#xF3;n del huso en la mitosis.

La participaci&#xF3;n de los hongos de genes nucleares Hom&#xF3;logo Migraci&#xF3;n NUDC Humanos en la proliferaci&#xF3;n celular y la formaci&#xF3;n del huso mit&#xF3;tico

&#x914D;&#x4F53;&#x6307;&#x6570;&#x6D53;&#x7F29; &#xFF08;&#x6280;&#x672F;&#xFF09; &#x534F;&#x8BAE;&#x6807;&#x51C6;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x8FDB;&#x5316;&#x9700;&#x8981;&#x5305;&#x542B;&#x4E24;&#x4E2A;&#x5F15;&#xFF0C;&#x4E00;&#x4E2A;&#x4E2D;&#x592E;&#x968F;&#x673A;&#x57DF;&#x7684;&#x6BCF;&#x4E00;&#x4FA7;&#x6240;&#x5141;&#x8BB8;&#x7684;&#x76EE;&#x6807;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5E8F;&#x5217;&#x901A;&#x8FC7; PCR &#x6216; RT-PCR &#x6269;&#x589E;&#x7684;&#x5E93;&#x3002;&#x4F46;&#x662F;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x5F15;&#x7269;&#x5E8F;&#x5217;&#x6309;&#x5176;&#x6027;&#x8D28;&#x5BFC;&#x81F4;&#x975E;&#x7279;&#x5F02;&#x6027;&#x7ED1;&#x5B9A; &#xFF08;&#x4E00;&#x822C;&#x6DFB;&#x52A0;&#x7EA6; 20 &#x65B0;&#x53F0;&#x5E01;&#x7EA6;&#x968F;&#x673A;&#x5E8F;&#x5217;&#x7684;&#x6BCF;&#x4E2A;&#x7AEF;&#x4E0A; 30-40 nt)&#xFF0C;&#x548C;&#x53EF;&#x4EE5;&#x9020;&#x6210;&#x5927;&#x91CF;&#x7684;&#x5047;&#x9633;&#x6027;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5E8F;&#x5217;&#x548C;/&#x6216;&#x5E72;&#x6270;&#x597D;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x7684;&#x968F;&#x673A;&#x5E8F;&#x5217;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5236;&#x5B9A;&#x4E86;&#x4E24;&#x79CD;&#x57FA;&#x4E8E; DNA &#x7684;&#x65B9;&#x6CD5;&#xFF0C;&#x51CF;&#x5C11;&#x6216;&#x6D88;&#x9664;&#x5F15;&#x7269;&#x5E8F;&#x5217;&#x4ECE;&#x76EE;&#x6807;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x6B65;&#x9AA4;&#xFF0C;&#x4ECE;&#x800C;&#x51CF;&#x5C11;&#x6216;&#x6D88;&#x9664;&#x5E72;&#x6270;&#x7684;&#x5F15;&#x7269;&#x5E8F;&#x5217;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x65B9;&#x6CD5;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x8D77;&#x59CB;&#x7684;&#x9009;&#x62E9;&#x5E93;&#x5305;&#x542B;&#x4E00;&#x4E2A;&#x4E2D;&#x592E;&#x7684;&#x968F;&#x673A;&#x5E8F;&#x5217;&#xFF0C;&#x662F;&#xFF1A; (i) &#x4E24;&#x4FA7;&#x662F;&#x552F;&#x4E00; 2 nt &#x6BCF;&#x4E00;&#x4FA7; &#xFF08;&#x6700;&#x5C0F;&#x5E95;&#x6F06;&#xFF09; &#xFF1B;&#x6216;&#x8005; (ii) &#x53EA;&#x80FD;&#x901A;&#x8FC7;&#x4EFB;&#x4E00; 2 &#x6216; 0 nt &#x4E0A;&#x624B;&#x7684; 3&#39; &#x7AEF;&#x4E24;&#x4FA7; (&#x65E0;&#x5E95;&#x6F06;)&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x65B9;&#x6CD5;&#x5141;&#x8BB8;&#x5E95;&#x6F06;&#x518D;&#x751F;&#x548C; re-elimination &#x4E4B;&#x540E;&#x548C;&#x4E4B;&#x524D;&#x7684;&#x9009;&#x62E9;&#xFF0C;&#x662F;&#x5FEB;&#x901F;&#x548C;&#x7B80;&#x5355;&#xFF0C;&#x4E0D;&#x9700;&#x8981;&#x4EFB;&#x4F55;&#x5316;&#x5B66;&#x4FEE;&#x6539;&#x9009;&#x62E9;&#x4E2D;&#x7684;&#x5404;&#x79CD;&#x6761;&#x4EF6;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x9009;&#x62E9;&#x8F6E; DNA &#x4F4E;&#x805A;&#x7269;&#xFF0C;&#x4E00;&#x822C;&#x90FD;&#x91C7;&#x7528;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x6700;&#x7EC8;&#x4EA7;&#x54C1;&#x9002;&#x914D;&#x5B50;&#x4E0E;&#x6267;&#x884C;&#x3002;

&#x6700;&#x5C0F;&#x7684;&#x5E95;&#x6F06;&#x548C;&#x9002;&#x914D;&#x5B50;&#x968F;&#x673A; DNA &#x5E93;&#x4E2D;&#x9009;&#x62E9;&#x65E0;&#x5E95;&#x6F06;&#x7684;&#x6280;&#x672F;&#x89C4;&#x7A0B;&#x3002;

Standard systematic evolution of ligands by exponential enrichment (SELEX) protocols require libraries that contain two primers, one on each side of a central random domain, which allow amplification of target-bound sequences via PCR or RT-PCR. However, these primer sequences cause nonspecific binding by their nature (generally adding about 20 nt on each end of the random sequence of about 30-40 nt), and can result in large numbers of false-positive binding sequences and/or interfere with good binding random sequences. Here, we have developed two DNA-based methods that reduce and/or eliminate the primer sequences from the target-binding step, thus reducing or eliminating the interference caused by the primer sequences. In these methods, the starting selection libraries contain a central random sequence that is: (i) flanked by only 2 nt on each side (minimal primer); or (ii) flanked only by either a 2- or 0-nt overhand on the 3' end (primer-free). These methods allow primer regeneration and re-elimination after and before selection, are fast and simple, and don't require any chemical modifications for selection in a variety of conditions. Further, the selection rounds are performed with DNA oligomers, which are generally employed as end product aptamers.

Minimal primer and primer-free SELEX protocols for selection of aptamers from random DNA libraries.

Standard &#xE9;volution syst&#xE9;matique des ligands par exponentielles d&#x26;#39;enrichissement (SELEX) protocoles n&#xE9;cessitent biblioth&#xE8;ques contenant deux amorces, une de chaque c&#xF4;t&#xE9; d&#x26;#39;un domaine central al&#xE9;atoire, qui permettent l&#x26;#39;amplification de s&#xE9;quences cibles li&#xE9;s via PCR ou RT-PCR. Toutefois, ces s&#xE9;quences d&#x26;#39;amorces provoquer une liaison non sp&#xE9;cifique de par leur nature (g&#xE9;n&#xE9;ralement en ajoutant environ 20 nt &#xE0; chaque extr&#xE9;mit&#xE9; de la s&#xE9;quence al&#xE9;atoire de environ 30-40 nt), et peut conduire &#xE0; un grand nombre de faux positifs des s&#xE9;quences de liaison et / ou d&#x26;#39;interf&#xE9;rer avec une bonne contraignantes des s&#xE9;quences al&#xE9;atoires. Ici, nous avons d&#xE9;velopp&#xE9; deux m&#xE9;thodes bas&#xE9;es sur l&#x26;#39;ADN qui permettent de r&#xE9;duire et / ou d&#x26;#39;&#xE9;liminer les s&#xE9;quences des amorces de l&#x26;#39;&#xE9;tape de la cible de liaison, r&#xE9;duisant ou &#xE9;liminant ainsi l&#x26;#39;interf&#xE9;rence caus&#xE9;e par les s&#xE9;quences des amorces. Dans ces proc&#xE9;d&#xE9;s, les biblioth&#xE8;ques de s&#xE9;lection de d&#xE9;part contiennent une s&#xE9;quence al&#xE9;atoire qui est centrale: (i) flanqu&#xE9;e de deux seulement nt sur chaque c&#xF4;t&#xE9; (amorce minimale) ou (ii) flanqu&#xE9;e seulement par un 2 - ou 0-nt sur la pronation extr&#xE9;mit&#xE9; 3 &#x26;#39;(amorce gratuit). Ces m&#xE9;thodes permettent la r&#xE9;g&#xE9;n&#xE9;ration primaire et re-&#xE9;limination avant et apr&#xE8;s s&#xE9;lection, sont simples et rapides, et ne n&#xE9;cessitent pas de modifications chimiques pour la s&#xE9;lection dans une vari&#xE9;t&#xE9; de conditions. En outre, les tours de s&#xE9;lection sont effectu&#xE9;es avec des oligom&#xE8;res d&#x26;#39;ADN, qui sont g&#xE9;n&#xE9;ralement employ&#xE9;s comme aptam&#xE8;res produits finis.

Primer Primer minimale et sans Protocoles SELEX pour la s&#xE9;lection des aptam&#xE8;res &#xE0; partir des biblioth&#xE8;ques d&#x26;#39;ADN au hasard

Norm systematische Evolution von Liganden durch exponentielle Anreicherung (SELEX) Protokolle erfordern Bibliotheken, die zwei Z&uuml;ndkapseln, einer auf jeder Seite einer zentralen zuf&auml;llige Dom&auml;ne enthalten die Verst&auml;rkung der Ziel-gebundenen Sequenzen &uuml;ber PCR oder RT-PCR erlauben. Jedoch verursachen diese Grundierung-Sequenzen unspezifische Bindung ihrer Natur (addieren in der Regel etwa 20 nt an jedem Ende der Zufallsfolge von ca. 30-40-nt), und k&ouml;nnen in gro&szlig;er Zahl der falsch-positiven Bindung Sequenzen f&uuml;hren bzw. gute Bindung zuf&auml;llige Sequenzen st&ouml;ren. Hier haben wir zwei DNA-basierte Methoden, die reduzieren oder eliminieren die Z&uuml;ndkapsel-Sequenzen aus dem Ziel-Bindung-Schritt entwickelt, dadurch Reduzierung oder Beseitigung der Fernsehst&ouml;rungen, die durch die Grundierung-Sequenzen. In diesen Methoden die ersten Auswahl-Bibliotheken enthalten eine zentrale Zufallsfolge, das ist: (i) flankiert von nur 2 nt auf jeder Seite (minimal Primer); oder (Ii) flankiert nur entweder eine 2 oder 0-nt-&uuml;berhand auf dem 3&#39;-Ende (Grundierung-frei). Diese Methoden erm&ouml;glichen Grundierung Regenerations- und Re-elimination nach und vor der Auswahl, sind schnell und einfach, und brauchen keine chemischen &Auml;nderungen in einer Vielzahl von Bedingungen zur Auswahl. Dar&uuml;ber hinaus werden die Auswahlrunden mit DNA-Oligomere, durchgef&uuml;hrt, die im Allgemeinen als Endprodukt Aptamere besch&auml;ftigt sind.

Minimale Primer und Grundierung-freie SELEX-Protokolle f&uuml;r die Auswahl der Aptamere aus zuf&auml;lligen DNA-Bibliotheken.

Standard evoluzione sistematica dei ligandi dai protocolli di arricchimento esponenziale (SELEX) richiedono librerie che contengono due iniettori, uno su ciascun lato di un dominio centrale casuale, che permettono l&#39;amplificazione di sequenze di destinazione associato tramite PCR o RT-PCR. Tuttavia, queste sequenze primer causano legame per loro natura (generalmente aggiungendo circa 20 nt su ciascuna estremit&agrave; della sequenza casuale di circa 30-40 nt) e pu&ograve; risultare in un gran numero di sequenze di falsi-positivi associazione e/o interferire con sequenze casuali di associazione buona. Qui, abbiamo sviluppato due metodi basati sul DNA che riducono o eliminano le sequenze primer dal passo target vincolanti, cos&igrave; riducendo o eliminando le interferenze causate dalle sequenze di primer. In questi metodi, le librerie di selezione iniziale contengono una sequenza casuale centrale che &egrave;: (i) fiancheggiato da solo 2 nt su ciascun lato (minimal primer); o (ii) affiancata solo da neanche un overhand 2-0-nt all&#39;estremit&agrave; 3&#39; (senza primer). Questi metodi consentono la rigenerazione primer re-elimination dopo e prima selezione, sono veloci e semplici e non richiedono alcuna modifica chimica per la selezione in una variet&agrave; di condizioni. Ulteriormente, i turni di selezione vengono eseguiti con oligomeri del DNA, che sono generalmente impiegati come prodotto finale aptameri.

Primer minimal e senza primer SELEX protocolli per la selezione di aptameri da librerie di DNA casuale.

&#x6A19;&#x6E96;&#x306E;&#x4F53;&#x7CFB;&#x7684;&#x306A;&#x6307;&#x6570;&#x6FC3;&#x7E2E;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x914D;&#x4F4D;&#x5B50;&#x306E;&#x9032;&#x5316;&#xFF08;SELEX&#xFF09;&#x200B;&#x200B;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C8;&#x30B3;&#x30EB;&#x306F;&#x3001;PCR&#x307E;&#x305F;&#x306F;RT-PCR&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#x306B;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x914D;&#x5217;&#x306E;&#x5897;&#x5E45;&#x3092;&#x53EF;&#x80FD;&#x306B;&#x3059;&#x308B;2&#x3064;&#x306E;&#x30D7;&#x30E9;&#x30A4;&#x30DE;&#x30FC;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x3001;&#x4E2D;&#x592E;&#x306E;&#x30E9;&#x30F3;&#x30C0;&#x30E0;&#x306A;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x306E;&#x5404;&#x5074;&#x9762;&#x306E;&#x3044;&#x305A;&#x308C;&#x304B;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x30E9;&#x30A4;&#x30D6;&#x30E9;&#x30EA;&#x3092;&#x5FC5;&#x8981;&#x3068;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30D7;&#x30E9;&#x30A4;&#x30DE;&#x30FC;&#x914D;&#x5217;&#xFF08;&#x901A;&#x5E38;&#x306F;&#x7D04;30-40&#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30AA;&#x30C1;&#x30C9;&#x306E;&#x30E9;&#x30F3;&#x30C0;&#x30E0;&#x914D;&#x5217;&#x306E;&#x4E21;&#x7AEF;&#x306B;&#x7D04;20 nt&#x3092;&#x8FFD;&#x52A0;&#x3059;&#x308B;&#xFF09;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x6027;&#x8CEA;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x975E;&#x7279;&#x7570;&#x7684;&#x306A;&#x7D50;&#x5408;&#x3092;&#x5F15;&#x304D;&#x8D77;&#x3053;&#x3057;&#x3001;&#x507D;&#x967D;&#x6027;&#x306E;&#x7D50;&#x5408;&#x914D;&#x5217;&#x306E;&#x591A;&#x6570;&#x306B;&#x306A;&#x308A;&#x3001;&#x305D;&#x3057;&#x3066;/&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x3001;&#x826F;&#x3044;&#x306E;&#x59A8;&#x3052;&#x306B;&#x306A;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x7D50;&#x5408;&#x306E;&#x30E9;&#x30F3;&#x30C0;&#x30E0;&#x306A;&#x914D;&#x5217;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x30D7;&#x30E9;&#x30A4;&#x30DE;&#x30FC;&#x306E;&#x914D;&#x5217;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5F15;&#x304D;&#x8D77;&#x3053;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x5E72;&#x6E09;&#x3092;&#x4F4E;&#x6E1B;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x6392;&#x9664;&#x3057;&#x3001;&#x6A19;&#x7684;&#x7D50;&#x5408;&#x30B9;&#x30C6;&#x30C3;&#x30D7;&#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x30D7;&#x30E9;&#x30A4;&#x30DE;&#x30FC;&#x914D;&#x5217;&#x3092;&#x524A;&#x6E1B;&#x3057;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;/&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x9664;&#x53BB;&#x3059;&#x308B;&#x4E8C;&#x3064;&#x306E;DNA&#x30D9;&#x30FC;&#x30B9;&#x306E;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3092;&#x958B;&#x767A;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x8D77;&#x52D5;&#x9078;&#x629E;&#x306E;&#x30E9;&#x30A4;&#x30D6;&#x30E9;&#x30EA;&#x306F;&#x3001;&#x4E2D;&#x592E;&#x306E;&#x30E9;&#x30F3;&#x30C0;&#x30E0;&#x914D;&#x5217;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#xFF1A;&#xFF08;i&#xFF09;&#x5404;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C9;&#x3067;&#x308F;&#x305A;&#x304B;2 NT&#xFF08;&#x6700;&#x5C0F;&#x9650;&#x306E;&#x30D7;&#x30E9;&#x30A4;&#x30DE;&#x30FC;&#xFF09;&#x306B;&#x631F;&#x307E;&#x308C;&#x305F;&#x3001;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#xFF08;ii&#xFF09;2&#x306E;&#x3044;&#x305A;&#x308C;&#x304B;&#x306E;&#x307F;&#x3067;&#x631F;&#x307E;&#x308C;&#x305F; - &#x307E;&#x305F;&#x306F;0-NT&#x30AA;&#x30FC;&#x30D0;&#x30FC;&#x30CF;&#x30F3;&#x30C9;3 &#x26;#39;&#x672B;&#x7AEF;&#xFF08;&#x30D7;&#x30E9;&#x30A4;&#x30DE;&#x30FC;&#x30D5;&#x30EA;&#x30FC;&#xFF09;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30E1;&#x30BD;&#x30C3;&#x30C9;&#x306F;&#x3001;&#x9078;&#x629E;&#x3057;&#x305F;&#x5F8C;&#x3068;&#x524D;&#x306B;&#x30D7;&#x30E9;&#x30A4;&#x30DE;&#x30FC;&#x306E;&#x518D;&#x751F;&#x3068;&#x518D;&#x9664;&#x53BB;&#x3092;&#x53EF;&#x80FD;&#x306B;&#x3059;&#x308B;&#x8FC5;&#x901F;&#x304B;&#x3064;&#x7C21;&#x5358;&#x3067;&#x3042;&#x308A;&#x3001;&#x69D8;&#x3005;&#x306A;&#x6761;&#x4EF6;&#x3067;&#x306E;&#x9078;&#x629E;&#x306E;&#x4EFB;&#x610F;&#x306E;&#x5316;&#x5B66;&#x4FEE;&#x98FE;&#x3092;&#x5FC5;&#x8981;&#x3068;&#x3057;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;&#x9078;&#x629E;&#x306E;&#x30E9;&#x30A6;&#x30F3;&#x30C9;&#x306F;&#x3001;&#x4E00;&#x822C;&#x7684;&#x306B;&#x6700;&#x7D42;&#x88FD;&#x54C1;&#x306E;&#x30A2;&#x30D7;&#x30BF;&#x30DE;&#x30FC;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x63A1;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x305F;DNA&#x30AA;&#x30EA;&#x30B4;&#x30DE;&#x30FC;&#x3067;&#x5B9F;&#x884C;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x6700;&#x5C0F;&#x9650;&#x306E;&#x30D7;&#x30E9;&#x30A4;&#x30DE;&#x30FC;&#x3068;&#x30E9;&#x30F3;&#x30C0;&#x30E0;DNA&#x30E9;&#x30A4;&#x30D6;&#x30E9;&#x30EA;&#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x30A2;&#x30D7;&#x30BF;&#x30DE;&#x30FC;&#x306E;&#x9078;&#x629E;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x30D7;&#x30E9;&#x30A4;&#x30DE;&#x30FC;&#x30D5;&#x30EA;&#x30FC;SELEX&#x30D7;&#x30ED;&#x30C8;&#x30B3;&#x30EB;

&#xC9C0; &#xC218; &#xB18D;&#xCD95; (SELEX) &#xD504;&#xB85C;&#xD1A0;&#xCF5C;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; ligands&#xC758; &#xD45C;&#xC900; &#xCCB4;&#xACC4;&#xC801;&#xC778; &#xC9C4;&#xD654; &#xB450; &#xB1CC;&#xAD00;, &#xC911;&#xC559; &#xC784;&#xC758;&#xC758; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778;&#xC758; &#xAC01; &#xCE21;&#xBA74;&#xC5D0; &#xD558;&#xB098;&#xC758; &#xC99D;&#xD3ED; PCR &#xB610;&#xB294; RT-PCR&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xB300;&#xC0C1; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4;&#xC758; &#xC218;&#xB97C; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558;&#xB294; &#xB77C;&#xC774;&#xBE0C;&#xB7EC;&#xB9AC;&#xAC00; &#xD544;&#xC694; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xB1CC;&#xAD00; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4; &#xD2B9;&#xC131;&#xC0C1; &#xC77C;&#xBC18; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xBC1C;&#xC0DD; (&#xC77C;&#xBC18;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC57D; 20 &#xCD94;&#xAC00; nt&#xC5D0; &#xB300;&#xD574; &#xC784;&#xC758;&#xC758; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4;&#xC758; &#xAC01; &#xB05D;&#xC5D0; 30-40 nt), &#xAE0D;&#xC815; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4;&#xC758; &#xD070; &#xC22B;&#xC790;&#xAC00; &#xBC1C;&#xC0DD;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xBC0F; &#xC88B;&#xC740; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xC784;&#xC758;&#xC758; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4;&#xB97C; &#xBC29;&#xD574;. &#xC5EC;&#xAE30;, &#xB530;&#xB77C;&#xC11C; &#xAC10;&#xC18C; &#xB610;&#xB294; &#xB1CC;&#xAD00; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD558;&#xB294; &#xAC04;&#xC12D; &#xC81C;&#xAC70;&#xB97C; &#xC904;&#xC774;&#xAC70;&#xB098; &#xB300;&#xC0C1; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xB2E8;&#xACC4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB1CC;&#xAD00; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4;&#xB97C; &#xC81C;&#xAC70; &#xD558;&#xB294; &#xB450; &#xAC00;&#xC9C0; DNA &#xAE30;&#xBC18; &#xBC29;&#xBC95;&#xC744; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xBC29;&#xBC95;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC2DC;&#xC791; &#xC120;&#xD0DD; &#xB77C;&#xC774;&#xBE0C;&#xB7EC;&#xB9AC;&#xB294; &#xC911;&#xC559; &#xC784;&#xC758;&#xC758; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4;&#xB97C; &#xD3EC;&#xD568;: (i) 2&#xB9CC;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xD615;&#xBC8C; &#xC591;&#xCABD; (&#xCD5C;&#xC18C;&#xD55C;&#xC758; &#xB1CC;&#xAD00;);&#xC5D0; nt &#xB610;&#xB294; (ii) (&#xB1CC;&#xAD00; &#xBB34;&#xB8CC;) 3&#39; &#xB05D;&#xC5D0; &#xC5B4;&#xB290; 2 &#xB610;&#xB294; 0 nt &#xB3CC;&#xB9B0;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574;&#xC11C;&#xB9CC; &#xD615;&#xBC8C;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xBA54;&#xC11C;&#xB4DC;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xB1CC;&#xAD00; &#xC911;&#xC0DD;&#xACFC; re-elimination&#xC640; &#xC120;&#xD0DD;, &#xBE60;&#xB974;&#xACE0; &#xAC04;&#xB2E8; &#xD558; &#xAC8C;, &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xC870;&#xAC74;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC120;&#xD0DD; &#xB41C; &#xD654;&#xD559; &#xC218;&#xC815; &#xD544;&#xC694; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C;, &#xC120;&#xD0DD; &#xB77C;&#xC6B4;&#xB4DC; &#xCD5C;&#xC885; &#xC81C;&#xD488; aptamers&#xB85C; &#xACE0;&#xC6A9; &#xC77C;&#xBC18;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; DNA &#xC62C;&#xB9AC;&#xACE0; &#xD568;&#xAED8; &#xC218;&#xD589; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xCD5C;&#xC18C;&#xD55C;&#xC758; &#xB1CC;&#xAD00; &#xBC0F; &#xC784;&#xC758; DNA &#xB77C;&#xC774;&#xBE0C;&#xB7EC;&#xB9AC;&#xC5D0;&#xC11C; aptamers&#xC758; &#xC120;&#xD0DD;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC785;&#xBB38;&#xC11C;-&#xBB34;&#xB8CC; SELEX &#xD504;&#xB85C;&#xD1A0;&#xCF5C;.

Evoluci&#xF3;n est&#xE1;ndar sistem&#xE1;tica de ligandos por enriquecimiento exponencial (SELEX) protocolos requieren bibliotecas que contienen dos cebadores, uno a cada lado de un dominio aleatorio central, que permite la amplificaci&#xF3;n de diana enlazados a trav&#xE9;s de secuencias de PCR o RT-PCR. Sin embargo, estas secuencias de los cebadores causar la uni&#xF3;n no espec&#xED;fica por su propia naturaleza (generalmente la adici&#xF3;n de aproximadamente 20 nt en cada extremo de la secuencia al azar de aproximadamente 30-40 nt), y puede resultar en un gran n&#xFA;mero de falsos positivos secuencias de uni&#xF3;n y / o interferir con el bien uni&#xF3;n secuencias aleatorias. Aqu&#xED;, hemos desarrollado dos m&#xE9;todos basados &#x200B;&#x200B;en el ADN que reducen y / o eliminar las secuencias de los cebadores de la etapa de destino de uni&#xF3;n, lo que reduce o elimina la interferencia causada por las secuencias de los cebadores. En estos m&#xE9;todos, las bibliotecas de selecci&#xF3;n de partida contienen una secuencia central al azar que es: (i) flanqueado por s&#xF3;lo 2 nt en cada lado (cebador m&#xED;nimo), o (ii) flanqueado por cualquiera de s&#xF3;lo un 2 - 0-nt o de rizo en el el extremo 3 &#x26;#39;(cebador libre). Estos m&#xE9;todos permiten la regeneraci&#xF3;n de imprimaci&#xF3;n y de re-eliminaci&#xF3;n despu&#xE9;s y antes de la selecci&#xF3;n, son r&#xE1;pida y sencilla, y no requiere ninguna modificaci&#xF3;n qu&#xED;mica para la selecci&#xF3;n en una variedad de condiciones. Adem&#xE1;s, las rondas de selecci&#xF3;n se realiz&#xF3; con olig&#xF3;meros de ADN, que se emplean generalmente como apt&#xE1;meros producto final.

Primer m&#xED;nimo y libres de Primer-SELEX Protocolos para la selecci&#xF3;n de apt&#xE1;meros de Bibliotecas de ADN al azar

&#x6211;&#x4EEC;&#x62E5;&#x6709;&#x6838;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#x770B;&#x6765;&#x662F;&#x764C;&#x53D8;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x4E2D;&#x6240;&#x6D89;&#x53CA;&#x7684;&#x957F;&#x671F;&#x5174;&#x8DA3;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x6700;&#x8FD1;&#x53D1;&#x73B0;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x9AD8;&#x6E29;&#x9700;&#x6C42;&#x56E0;&#x7D20; A 1 (HtrA1)&#xFF0C;&#x4E5F;&#x79F0;&#x4E3A; Prss11&#xFF0C;&#x8FD9;&#x662F;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#x7684;&#x6C27;&#x5316;&#x5E94;&#x6FC0;&#x53CD;&#x5E94;&#x5BB6;&#x5EAD;&#x7684;&#x6210;&#x5458;&#x3002;&#x73B0;&#x5DF2;&#x88AB; HtrA1 &#x5217;&#x4E3A;&#x5206;&#x6CCC;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#x53C2;&#x4E0E; TGFbeta &#x4FE1;&#x53F7;&#xFF0C;&#x4F46;&#x6700;&#x8FD1;&#x7684;&#x5DE5;&#x4F5C;&#x8868;&#x660E;&#xFF0C;HtrA1 &#x662F;&#x80BF;&#x7624;&#x6291;&#x5236;&#x56E0;&#x5B50;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x6211;&#x4EEC;&#x5C55;&#x793A;&#x819C;&#x5C42;&#x548C; intranuclearly&#xFF0C;&#x53D1;&#x73B0;&#x52A0;&#x5DE5;&#x7684;&#x5F62;&#x5F0F;&#x7684; HtrA1 &#x548C; HtrA1 &#x7684;&#x6D3B;&#x52A8;&#x6838;&#x5185;&#x5305;&#x6DB5;&#x7A97;&#x4F53;&#x663E;&#x793A;&#x5927;&#x7EA6;&#x5148;&#x751F; 29,000&#x3002;&#x8FDB;&#x4E00;&#x6B65;&#xFF0C;HPV E6/E7 &#x86CB;&#x767D;&#x8868;&#x8FBE;&#x7684;&#x662F;&#x4E0E;&#x8F6C;&#x5F55;&#x8C03;&#x63A7;&#x7684; HtrA1 &#x5173;&#x8054; &#xFF08;&#x6700;&#x7A81;&#x51FA;&#x7684;&#x662F;&#x6838;&#x7684;&#x5F62;&#x5F0F;&#xFF09;&#xFF0C;&#x548C; HtrA1 &#x53D1;&#x73B0; HPV E6 &#x548C; E7 &#x86CB;&#x767D;&#x4E0E;&#x76F8;&#x5173;&#x8054;&#x3002;

&#x80DE;&#x5185;&#x5B9A;&#x4F4D;&#x7684;&#x6291;&#x764C; HtrA1/Prss11 &#x548C;&#x5176;&#x4E0E; HPV16 E6 &#x548C; E7 &#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x5173;&#x8054;&#x3002;

We have a long-standing interest in a nuclear protease which appears to be involved in carcinogenesis. We recently identified the protease as high temperature requirement factor A 1 (HtrA1), also known as Prss11, which is member of an oxidative stress-response family of proteases. HtrA1 has been classified as a secreted protease involved in TGFbeta signaling, but recent work has shown HtrA1 to be a tumor suppressor. Here we show that processed forms of HtrA1 are found intracellularly and intranuclearly, and the active intranuclear form of HtrA1 shows an approximately Mr 29,000. Further, expression of HPV E6/E7 proteins is associated with a post-transcriptional up-regulation of HtrA1 (most notably the nuclear form), and HtrA1 is found associated with both HPV E6 and E7 proteins.

Intracellular localization of the tumor suppressor HtrA1/Prss11 and its association with HPV16 E6 and E7 proteins.

Nous avons un int&#xE9;r&#xEA;t de longue date dans une prot&#xE9;ase nucl&#xE9;aire qui semble &#xEA;tre impliqu&#xE9; dans la carcinogen&#xE8;se. Nous avons r&#xE9;cemment identifi&#xE9; la prot&#xE9;ase en tant que facteur de temp&#xE9;rature haute exigence A 1 (HTRA1), &#xE9;galement connu sous le nom Prss11, qui est membre d&#x26;#39;un stress oxydatif r&#xE9;action de la famille des prot&#xE9;ases. HTRA1 a &#xE9;t&#xE9; class&#xE9; comme une prot&#xE9;ase s&#xE9;cr&#xE9;t&#xE9;e impliqu&#xE9;e dans la signalisation TGFbeta, mais des travaux r&#xE9;cents ont montr&#xE9; HTRA1 &#xEA;tre un suppresseur de tumeur. Ici, nous montrons que les formes trait&#xE9;es de HTRA1 se trouvent les cellules et intranuclearly, et la forme active de la intranucl&#xE9;aire HTRA1 montre un M. d&#x26;#39;environ 29.000. En outre, l&#x26;#39;expression de prot&#xE9;ines HPV E6/E7 est associ&#xE9; &#xE0; une post-transcriptionnelle up-r&#xE9;gulation de la HTRA1 (notamment sous la forme nucl&#xE9;aire), et HTRA1 se trouve associ&#xE9; &#xE0; la fois contre le VPH prot&#xE9;ines E6 et E7.

La localisation intracellulaire des HtrA1/Prss11 suppresseur de tumeur et son association avec HPV16 prot&#xE9;ines E6 et E7

Wir haben ein langj&auml;hriges Interesse an einem nuklearen Protease zu Karzinogenese beteiligt zu sein scheint. Wir vor kurzem identifiziert die Protease als Hochtemperatur-Anforderung Faktor A 1 (HtrA1), auch bekannt als Prss11, die Mitglied einer Familie oxidative Stressantwort von Proteasen ist. HtrA1 ist eingestuft worden, wie eine sezernierte Protease TGFbeta Signalisierung beteiligt, aber die j&uuml;ngsten Arbeiten ergab HtrA1 Tumorsuppressor sein. Hier zeigen wir, dass verarbeitete Formen der HtrA1 intrazellul&auml;r und intranuclearly gefunden werden, und die aktive intranukle&auml;ren Form des HtrA1 zeigt eine etwa Herr 29.000. Dar&uuml;ber hinaus Ausdruck HPV E6/E7-Proteine ist eine Posttranskriptionale bis-Verordnung von HtrA1 zugeordnet (vor allem die atomare Form), und HtrA1 Zusammenhang mit HPV E6 und E7 Proteine gefunden wird.

Intrazellul&auml;re Lokalisation der Tumorsuppressor HtrA1/Prss11 und ihrer Verbindung mit HPV16 E6 und E7-Proteine.

Abbiamo un interesse in una proteasi nucleare che sembra essere coinvolto nella cancerogenesi. Recentemente abbiamo identificato la proteasi come fattore di requisito di alta temperatura A 1 (HtrA1), noto anche come Prss11, che &egrave; membro di una famiglia di risposta allo stress ossidativo delle proteasi. HtrA1 &egrave; stata classificata come una proteasi secreta coinvolti in TGFbeta signaling, ma lavoro recente ha mostrato HtrA1 essere un soppressore del tumore. Qui vi mostriamo che si trovano trasformate forme di HtrA1 intracellularly e intranuclearly, e la forma attiva intranucleari di HtrA1 Mostra un circa 29.000 signor. Ulteriormente, espressione delle proteine E6/E7 di HPV &egrave; associata un&#39;espresione up-regolazione di HtrA1 (in particolare la forma nucleare), e HtrA1 viene trovato associato a proteine sia HPV E6 ed E7.

Localizzazione intracellulare di soppressore tumorale HtrA1/Prss11 e la sua associazione con proteine HPV16 E6 ed E7.

&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x767A;&#x764C;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3059;&#x308B;&#x3068;&#x8868;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x3001;&#x6838;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A2;&#x30FC;&#x30BC;&#x3067;&#x9577;&#x5E74;&#x95A2;&#x5FC3;&#x3092;&#x6301;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x6700;&#x8FD1;&#x3001;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A2;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E;&#x9178;&#x5316;&#x30B9;&#x30C8;&#x30EC;&#x30B9;&#x5FDC;&#x7B54;&#x306E;&#x5BB6;&#x65CF;&#x306E;&#x4E00;&#x54E1;&#x3067;&#x3082;&#x3042;&#x308B;Prss11&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x77E5;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x9AD8;&#x6E29;&#x8981;&#x4EF6;&#x56E0;&#x5B50;1&#xFF08;HtrA1&#xFF09;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A2;&#x30FC;&#x30BC;&#x3092;&#x540C;&#x5B9A;&#x3057;&#x305F;&#x3002; HtrA1&#x306F;TGFbeta&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3059;&#x308B;&#x5206;&#x6CCC;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A2;&#x30FC;&#x30BC;&#x306B;&#x5206;&#x985E;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x304D;&#x305F;&#x304C;&#x3001;&#x6700;&#x8FD1;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x306F;&#x3001;&#x816B;&#x760D;&#x6291;&#x5236;&#x56E0;&#x5B50;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;HtrA1&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;HtrA1&#x306E;&#x51E6;&#x7406;&#x5F62;&#x614B;&#x306F;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x3068;intranuclearly&#x767A;&#x898B;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3001;HtrA1&#x306E;&#x7A4D;&#x6975;&#x7684;&#x306A;&#x6838;&#x5F62;&#x614B;&#x306F;&#x3001;&#x7D04;&#x6C0F;29000&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;HPV E6/E7&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x306F;&#x3001;HtrA1&#x306E;&#x8EE2;&#x5199;&#x5F8C;&#x306E;&#x30A2;&#x30C3;&#x30D7;&#x30EC;&#x30AE;&#x30E5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#xFF08;&#x7279;&#x306B;&#x6838;&#x306E;&#x5F62;&#xFF09;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x304A;&#x308A;&#x3001;HtrA1&#x306F;&#x3001;HPV E6&#x304A;&#x3088;&#x3073;E7&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x898B;&#x3064;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3002;

&#x764C;&#x6291;&#x5236;HtrA1/Prss11&#x3068;HPV16 E6&#x304A;&#x3088;&#x3073;E7&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3068;&#x306E;&#x95A2;&#x9023;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x5C40;&#x5728;

&#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0A9;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xBC1C;&#xC554;&#xC5D0; &#xAD00;&#xC5EC; &#xD558;&#xB294; &#xD575; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC5D0; &#xC624;&#xB79C; &#xAD00;&#xC2EC;&#xC744;&#xAC00;&#xC9C0;&#xACE0;. &#xCD5C;&#xADFC;&#xC5D0; protease &#xACE0;&#xC628; &#xC694;&#xAD6C; &#xC0AC;&#xD56D; &#xC694;&#xC778; A 1 (HtrA1)&#xB85C; &#xC54C;&#xB824;&#xC9C4; prss11&#xC740; &#xD504;&#xB85C; &#xD14C;&#xC544;&#xC758; &#xC0B0;&#xD654; &#xC2A4;&#xD2B8;&#xB808;&#xC2A4; &#xC751;&#xB2F5; &#xAC00;&#xC871;&#xC758; &#xAD6C;&#xC131;&#xC6D0;&#xC73C;&#xB85C; &#xC2DD;&#xBCC4;. &#xBE44; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; TGFbeta &#xC2E0;&#xD638;&#xC5D0; &#xAD00;&#xC5EC; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xCD5C;&#xADFC; &#xC9C1;&#xC7A5; &#xC885;&#xC591; &#xC5B5;&#xC555; &#xD558;&#xB294; Htra1&#xB97C; &#xBCF4;&#xC774;&#xACE0; &#xC788;&#xB2E4; HtrA1 &#xBD84;&#xB958; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30; &#xCE68; &#xBC0F; intranuclearly, HtrA1 &#xCC98;&#xB9AC; &#xB41C; &#xD615;&#xD0DC;&#xC758; &#xBC1C;&#xACAC; &#xB418; &#xACE0; &#xD65C;&#xC131; intranuclear &#xD615;&#xD0DC;&#xC758; HtrA1 &#xD45C;&#xC2DC;&#xB97C; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xD55C; &#xC57D; &#xC528; 29, 000. &#xB610;&#xD55C;, HPV E6/E7 &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xC2DD;&#xC774; &#xC5F0;&#xAD00; &#xB41C; Htra1&#xC758; post-transcriptional &#xC5C5; &#xADDC;&#xC81C; (&#xD2B9;&#xD788; &#xD575; &#xC591;&#xC2DD;), HtrA1 &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; HPV E6 &#xBC0F; E7 &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xBC1C;&#xACAC; &#xB418; &#xACE0;.

&#xC885;&#xC591; &#xC5B5;&#xC81C;&#xAE30; HtrA1/prss11&#xC640;&#xC758; &#xC5F0;&#xAD00; HPV16 E6 &#xBC0F; E7 &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xC138;&#xD3EC;&#xB0B4; &#xC9C0;&#xC5ED;&#xD654;.

Tenemos un inter&#xE9;s de larga data en una proteasa nuclear que parece estar implicada en la carcinog&#xE9;nesis. Recientemente hemos identificado la proteasa como factor de alta exigencia temperatura A 1 (HTRA1), tambi&#xE9;n conocido como Prss11, que es miembro de una respuesta de estr&#xE9;s oxidativo familia de las proteasas. HTRA1 ha sido clasificada como una proteasa secretada implicados en la se&#xF1;alizaci&#xF3;n de TGFbeta, pero el trabajo reciente ha demostrado HTRA1 ser un supresor de tumores. Aqu&#xED; nos muestran que las formas elaboradas de HTRA1 se encuentra intracelularmente y intranuclearly, y la forma activa intranuclear de HTRA1 muestra un se&#xF1;or de aproximadamente 29.000. Adem&#xE1;s, la expresi&#xF3;n de prote&#xED;nas E6/E7 del VPH se asocia con un post-transcripcional sobre regulaci&#xF3;n de HTRA1 (sobre todo la forma nuclear), y HTRA1 se encuentra asociado con el VPH prote&#xED;nas E6 y E7.

La localizaci&#xF3;n intracelular de la HtrA1/Prss11 supresor de tumores y su asociaci&#xF3;n con el HPV16 prote&#xED;nas E6 y E7

&#x867D;&#x7136;&#x50AC;&#x5316; RNA &#x9176; &#xFF08;CRzs&#xFF09; &#x8BB8;&#x591A;&#x751F;&#x7269;&#x4F53;&#x5185;&#x81EA;&#x7136;&#x53D1;&#x751F;&#x7684; DNA &#x540C;&#x884C; (CDzs&#xFF09; &#x5236;&#x5B9A;&#x4E86;&#x4F53;&#x5916;&#x9009;&#x62E9;/&#x6F14;&#x53D8;&#x968F;&#x673A;&#x5E8F;&#x5217;&#x5E93;&#x4E2D;&#x3002;

&#x50AC;&#x5316;&#x8131;&#x6C27;&#x6838;&#x9176;&#xFF1A; &#x6D3E;&#x751F;&#x548C;&#x804C;&#x80FD;&#x3002;

Although catalytic RNA enzymes (CRzs) are naturally occurring in many organisms, their DNA counterparts (CDzs) were developed by in vitro selection/evolution from random sequence libraries.

Catalytic DNAzymes: derivations and functions.

Bien que les enzymes catalytiques d&#x26;#39;ARN (CRzs) sont naturellement pr&#xE9;sents dans de nombreux organismes, leurs homologues d&#x26;#39;ADN (CDzs) ont &#xE9;t&#xE9; mis au point par s&#xE9;lection in vitro / &#xE9;volution de banques de s&#xE9;quences al&#xE9;atoires.

ADNzymes catalytiques: D&#xE9;rivations et fonctions

Obwohl katalytische RNA-Enzyme (CRzs) in vielen Organismen nat&uuml;rlich vorkommenden sind, wurden ihre DNA-Pendants (CDzs) von in-vitro-Auswahl/Evolution aus zuf&auml;lligen Abfolge Bibliotheken entwickelt.

Katalytische DNAzymes: Ableitungen und Funktionen.

Sebbene enzimi RNA catalitici (CRzs) sono presenti in natura in molti organismi, omologhi del DNA (CDzs) sono stati sviluppati da selezione/evoluzione in vitro da librerie sequenza casuale.

DNAzimi catalitica: derivazioni e funzioni.

&#x89E6;&#x5A92;RNA&#x9175;&#x7D20;&#xFF08;CRzs&#xFF09;&#x81EA;&#x7136;&#x306B;&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x751F;&#x7269;&#x3067;&#x767A;&#x751F;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x304C;&#x3001;&#x305D;&#x306E;DNA&#x306E;&#x30AB;&#x30A6;&#x30F3;&#x30BF;&#x30FC;&#x30D1;&#x30FC;&#x30C8;&#xFF08;CDzs&#xFF09;&#x306F;&#x3001;&#x30E9;&#x30F3;&#x30C0;&#x30E0;&#x914D;&#x5217;&#x30E9;&#x30A4;&#x30D6;&#x30E9;&#x30EA;&#x30FC;&#x304B;&#x3089;in vitro&#x3067;&#x306E;&#x9078;&#x629E;/&#x9032;&#x5316;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x958B;&#x767A;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;

&#x89E6;&#x5A92;DNAzymes&#xFF1A;&#x6D3E;&#x751F;&#x3068;&#x6A5F;&#x80FD;

&#xCD09;&#xB9E4; RNA &#xD6A8;&#xC18C; (CRzs) &#xB9CE;&#xC740; &#xC0DD;&#xBB3C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC790;&#xC5F0;&#xC2A4;&#xB7FD; &#xAC8C; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD558;&#xB294;, &#xBE44;&#xB85D; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; DNA &#xB300;&#xC751; (CDzs) &#xC784;&#xC758;&#xC758; &#xC21C;&#xC11C;&#xB85C; &#xB77C;&#xC774;&#xBE0C;&#xB7EC;&#xB9AC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xCCB4; &#xC678; &#xC120;&#xD0DD;/&#xC9C4;&#xD654;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;.

&#xCD09;&#xB9E4; DNAzymes: &#xD30C;&#xC0DD; &#xBC0F; &#xD568;&#xC218;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

A pesar de las enzimas de ARN catal&#xED;ticos (CRzs) son de origen natural en muchos organismos, sus hom&#xF3;logos de ADN (CDzs) fueron desarrollados por la selecci&#xF3;n in vitro / evoluci&#xF3;n de las bibliotecas de secuencias aleatorias.

ADNzimas catal&#xED;ticos: Derivaciones y funciones

&#x5BE1;&#x6838;&#x82F7;&#x9178;&#x9002;&#x914D;&#x5B50;&#x662F;&#x9AD8;&#x5EA6;&#x7ED3;&#x6784;&#x5316;&#x7684; DNA &#x6216; RNA &#x5206;&#x5B50;&#x6216;&#x4FEE;&#x6539;&#x540E;&#x7684;&#x7248;&#x672C;&#xFF0C;&#x53EF;&#x4EE5;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5230;&#x7279;&#x5B9A;&#x4EB2;&#x548C;&#x529B;&#x6297;&#x4F53;&#x76F8;&#x5AB2;&#x7F8E;&#x7684;&#x76EE;&#x6807;&#x3002;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x662F;&#x901A;&#x8FC7;&#x79F0;&#x4E3A;&#x6280;&#x672F; &#xFF08;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x6F14;&#x5316;&#x7684;&#x914D;&#x4F53;&#x6307;&#x6570;&#x7EA7;) &#x627F;&#x8BA4;&#x5404;&#x79CD;&#x5404;&#x6837;&#x7684;&#x76EE;&#x6807;&#xFF0C;&#x4ECE;&#x5C0F;&#x5206;&#x5B50;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#xFF0C;&#x548C;&#x5BF9;&#x6574;&#x4E2A;&#x751F;&#x7269;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4F53;&#x5916;&#x9009;&#x62E9;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x786E;&#x5B9A;&#x7684;&#x3002;&#x9002;&#x914D;&#x5B50;&#x62E5;&#x6709;&#x4E00;&#x4E9B;&#x53EF;&#x53D6;&#x7684;&#x5C5E;&#x6027;&#xFF0C;&#x4F8B;&#x5982;&#x5408;&#x6210;&#x3001; &#x7A33;&#x5B9A;&#x6027;&#x3001; &#x9C81;&#x68D2;&#x6027;&#x548C;&#x7F3A;&#x4E4F;&#x514D;&#x75AB;&#x539F;&#x6027;&#x7684;&#x6613;&#x7528;&#x6027;&#x3002;&#x6807;&#x51C6;&#x6280;&#x672F;&#x5E93;&#x9700;&#x8981;&#x4E24;&#x4E2A;&#x5F15;&#x7269;&#xFF0C;&#x4E00;&#x4E2A;&#x4E2D;&#x592E;&#x7684;&#x968F;&#x673A;&#x57DF;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x653E;&#x5927;&#x901A;&#x8FC7; PCR &#x6216; RT-PCR &#x68C0;&#x6D4B;&#x76EE;&#x6807;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5E8F;&#x5217;&#x7684;&#x6BCF;&#x4E00;&#x4FA7;&#x3002;&#x4F46;&#x662F;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x5F15;&#x7269;&#x5E8F;&#x5217;&#x6309;&#x5176;&#x6027;&#x8D28;&#xFF0C;&#x5BFC;&#x81F4;&#x975E;&#x7279;&#x5B9A;&#x7684;&#x7ED1;&#x5B9A;&#xFF0C;&#x5E76;&#x4E14;&#x5BFC;&#x81F4;&#x5927;&#x91CF;&#x7684;&#x5047;&#x9633;&#x6027;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5E8F;&#x5217;&#x6216;&#x5E72;&#x6270;&#x7684;&#x5E8F;&#x5217;&#x968F;&#x673A;&#x533A;&#x57DF;&#x5185;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5DF2;&#x62A5;&#x544A;&#x3002;&#x8FD9;&#x6B21;&#x5BA1;&#x67E5;&#x7684;&#x91CD;&#x70B9;&#x662F;&#x65B9;&#x6CD5;&#x800C;&#x5F97;&#x5230;&#x4E86;&#x6D88;&#x9664;&#x56FA;&#x5B9A;&#x5E95;&#x6F06;&#x6280;&#x672F;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x4E2D;&#x7684;&#x5E72;&#x6270;&#x3002;

&#x8D8A;&#x77ED;&#x8D8A;&#x597D;&#xFF1A; &#x51CF;&#x5C11;&#x56FA;&#x5B9A;&#x5E95;&#x6F06;&#x533A;&#x57DF;&#x7684;&#x5BE1;&#x6838;&#x82F7;&#x9178;&#x9002;&#x914D;&#x5B50;&#x9009;&#x62E9;&#x7684;&#x5E93;&#x3002;

Oligonucleotide aptamers are highly structured DNA or RNA molecules, or modified versions thereof, that can bind to targets with specific affinities comparable to antibodies. They are identified through an in vitro selection process termed SELEX (Systematic Evolution of Ligands by EXponential enrichment) to recognize a wide variety of targets, from small molecules to proteins, and from cultured cells to whole organisms. Aptamers possess a number of desirable properties, such as ease of synthesis, stability, robustness, and lack of immunogenicity. Standard SELEX libraries require two primers, one on each side of a central random domain, to amplify the target-bound sequences via PCR or RT-PCR. However, these primer sequences cause non-specific binding by their nature, and have been reported to lead to large numbers of false-positive binding sequences, or to interfere with binding of sequences within the random regions. This review is focused on methods which have been developed to eliminate fixed primer interference during the SELEX process.

The shorter the better: reducing fixed primer regions of oligonucleotide libraries for aptamer selection.

Aptam&#xE8;res oligonucl&#xE9;otides d&#x26;#39;ADN sont tr&#xE8;s structur&#xE9;s ou des mol&#xE9;cules d&#x26;#39;ARN, ou des versions modifi&#xE9;es de celui-ci, qui peut se lier &#xE0; des cibles avec des affinit&#xE9;s sp&#xE9;cifiques comparables &#xE0; des anticorps. Ils sont identifi&#xE9;s par un dans le processus de s&#xE9;lection in vitro appel&#xE9; SELEX (&#xE9;volution syst&#xE9;matique de ligands par enrichissement exponentiel) pour reconna&#xEE;tre une grande vari&#xE9;t&#xE9; de cibles, &#xE0; partir de petites mol&#xE9;cules de prot&#xE9;ines, et &#xE0; partir de cellules cultiv&#xE9;es &#xE0; des organismes entiers. Les aptam&#xE8;res poss&#xE8;dent un certain nombre de propri&#xE9;t&#xE9;s souhaitables, comme la facilit&#xE9; de la synth&#xE8;se, la stabilit&#xE9;, la robustesse, et le manque d&#x26;#39;immunog&#xE9;nicit&#xE9;. Standard biblioth&#xE8;ques SELEX exiger deux amorces, une de chaque c&#xF4;t&#xE9; d&#x26;#39;un domaine central al&#xE9;atoire, pour amplifier les s&#xE9;quences cible li&#xE9;s via PCR ou RT-PCR. Toutefois, ces s&#xE9;quences d&#x26;#39;amorces provoquer une liaison non sp&#xE9;cifique de par leur nature, et ont &#xE9;t&#xE9; signal&#xE9;s &#xE0; conduire &#xE0; un grand nombre de faux positifs des s&#xE9;quences de liaison, ou d&#x26;#39;interf&#xE9;rer avec la liaison de s&#xE9;quences dans les r&#xE9;gions al&#xE9;atoires. Cette revue est focalis&#xE9;e sur les m&#xE9;thodes qui ont &#xE9;t&#xE9; d&#xE9;velopp&#xE9;s pour &#xE9;liminer les interf&#xE9;rences amorce fixe au cours du processus SELEX.

Le court sera le mieux: R&#xE9;duire les r&#xE9;gions Primer fixes de biblioth&#xE8;ques pour les oligonucl&#xE9;otides aptam&#xE8;res s&#xE9;lection

Oligonucleotide Aptamere sind stark strukturierten DNA oder RNA-Molek&uuml;le oder modifizierte Versionen davon, die Ziele mit spezifischen Affinit&auml;ten vergleichbar mit Antik&ouml;rper binden k&ouml;nnen. Sie sind gekennzeichnet durch ein in-vitro-Auswahlverfahren SELEX (systematische Evolution von Liganden durch exponentielle Anreicherung) bezeichnet, um eine Vielzahl von Zielen, von kleinen Molek&uuml;len an Proteine und von kultivierten Zellen bis hin zu ganzen Organismen zu erkennen. Aptamere besitzen eine Reihe von w&uuml;nschenswerten Eigenschaften, z. B. einfache Synthese, Stabilit&auml;t, Robustheit und mangelnde Immunogenit&auml;t. SELEX Standardbibliotheken erfordern zwei Z&uuml;ndkapseln, einer auf jeder Seite einer zentralen zuf&auml;llige Dom&auml;ne, um die Ziel-gebundenen Sequenzen &uuml;ber PCR oder RT-PCR zu verst&auml;rken. Jedoch diese Grundierung-Sequenzen verursachen unspezifische Bindung ihrer Natur und an eine gro&szlig;e Anzahl von falsch-positiven Bindung Sequenzen zu f&uuml;hren oder zu st&ouml;ren, Bindung von Sequenzen innerhalb der zuf&auml;lligen Regionen berichtet. Diesen Bericht konzentriert sich auf Methoden, die entwickelt wurden, um feste Grundierung St&ouml;rungen w&auml;hrend der SELEX-Verfahren zu beseitigen.

Je k&uuml;rzer desto besser: feste Grundierung Regionen Oligonukleotid-Bibliotheken f&uuml;r Aptamer Auswahl reduzieren.

Oligonucleotide aptameri sono molecole di DNA o RNA altamente strutturati, o versioni modificate, che possono legarsi ai bersagli con specifiche affinit&agrave; paragonabile agli anticorpi. Sono identificati attraverso un processo di selezione in vitro definito SELEX (evoluzione sistematica dei ligandi di arricchimento esponenziale) per riconoscere una grande variet&agrave; di destinazioni, da piccole molecole di proteine e da cellule in coltura di organismi interi. Aptameri possiedono un numero di propriet&agrave; desiderabili, come la facilit&agrave; di sintesi, stabilit&agrave;, robustezza e mancanza di immunogenicit&agrave;. Le librerie standard di SELEX richiedono due iniettori, uno su ciascun lato di un dominio centrale casuale, per amplificare le sequenze di destinazione associato tramite PCR o RT-PCR. Tuttavia, queste sequenze primer causano legame non specifico per la loro natura e sono state segnalate per condurre a un gran numero di sequenze di associazione di falsi-positivi, o interferire con l&#39;associazione di sequenze all&#39;interno delle regioni casuali. Questa recensione &egrave; focalizzata sui metodi che sono stati sviluppati per eliminare le interferenze di primer fisso durante il processo di SELEX.

Pi&ugrave; breve il meglio: riduzione fissa primer regioni delle librerie del oligonucleotide per selezione aptamer.

&#x30AA;&#x30EA;&#x30B4;&#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30AA;&#x30C1;&#x30C9;&#x30A2;&#x30D7;&#x30BF;&#x30DE;&#x30FC;&#x306F;&#x3001;&#x6297;&#x4F53;&#x306B;&#x5339;&#x6575;&#x3059;&#x308B;&#x7279;&#x5B9A;&#x306E;&#x89AA;&#x548C;&#x6027;&#x3092;&#x6709;&#x3059;&#x308B;&#x6A19;&#x7684;&#x306B;&#x7D50;&#x5408;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x9AD8;&#x5EA6;&#x306B;&#x69CB;&#x9020;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x305F;DNA&#x307E;&#x305F;&#x306F;RNA&#x5206;&#x5B50;&#x3001;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x305D;&#x306E;&#x4FEE;&#x6B63;&#x7248;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x5F7C;&#x3089;&#x306F;&#x3001;SELEX&#xFF08;&#x6307;&#x6570;&#x6FC3;&#x7E2E;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x30EA;&#x30AC;&#x30F3;&#x30C9;&#x306E;&#x7CFB;&#x7D71;&#x7684;&#x9032;&#x5316;&#xFF09;&#x306F;&#x3001;&#x5C0F;&#x5206;&#x5B50;&#x304B;&#x3089;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306B;&#x3001;&#x57F9;&#x990A;&#x7D30;&#x80DE;&#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x5168;&#x751F;&#x7269;&#x306B;&#x3001;&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#x306E;&#x591A;&#x7A2E;&#x591A;&#x69D8;&#x3092;&#x8A8D;&#x8B58;&#x3059;&#x308B;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x3068;&#x547C;&#x3070;&#x308C;&#x308B;&#x8A66;&#x9A13;&#x7BA1;&#x5185;&#x9078;&#x629E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x3092;&#x901A;&#x3058;&#x3066;&#x8B58;&#x5225;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30A2;&#x30D7;&#x30BF;&#x30DE;&#x30FC;&#x306F;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x5408;&#x6210;&#x306E;&#x5BB9;&#x6613;&#x3055;&#x3001;&#x5B89;&#x5B9A;&#x6027;&#x3001;&#x5805;&#x7262;&#x6027;&#x3001;&#x514D;&#x75AB;&#x539F;&#x6027;&#x306E;&#x6B20;&#x5982;&#x306A;&#x3069;&#x306E;&#x671B;&#x307E;&#x3057;&#x3044;&#x7279;&#x6027;&#x306E;&#x6570;&#x3092;&#x6301;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6A19;&#x6E96;SELEX&#x30E9;&#x30A4;&#x30D6;&#x30E9;&#x30EA;&#x306F;&#x3001;2&#x3064;&#x306E;&#x30D7;&#x30E9;&#x30A4;&#x30DE;&#x30FC;&#x3001;&#x4E2D;&#x592E;&#x30E9;&#x30F3;&#x30C0;&#x30E0;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x306E;&#x5404;&#x5074;&#x9762;&#x306E;1&#x3064;&#x306F;&#x3001;PCR&#x307E;&#x305F;&#x306F;RT-PCR&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#x306B;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x914D;&#x5217;&#x3092;&#x5897;&#x5E45;&#x3059;&#x308B;&#x5FC5;&#x8981;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30D7;&#x30E9;&#x30A4;&#x30DE;&#x30FC;&#x914D;&#x5217;&#x306F;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x6027;&#x8CEA;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x975E;&#x7279;&#x7570;&#x7684;&#x7D50;&#x5408;&#x3092;&#x5F15;&#x304D;&#x8D77;&#x3053;&#x3057;&#x3001;&#x507D;&#x967D;&#x6027;&#x306E;&#x7D50;&#x5408;&#x914D;&#x5217;&#x306E;&#x591A;&#x6570;&#x306B;&#x3064;&#x306A;&#x304C;&#x308B;&#x3001;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x30E9;&#x30F3;&#x30C0;&#x30E0;&#x306A;&#x9818;&#x57DF;&#x5185;&#x306E;&#x914D;&#x5217;&#x306E;&#x7D50;&#x5408;&#x3092;&#x59A8;&#x5BB3;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x5831;&#x544A;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x30EC;&#x30D3;&#x30E5;&#x30FC;&#x306F;SELEX&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x306E;&#x9593;&#x306B;&#x56FA;&#x5B9A;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30D7;&#x30E9;&#x30A4;&#x30DE;&#x30FC;&#x5E72;&#x6E09;&#x3092;&#x6392;&#x9664;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x958B;&#x767A;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x65B9;&#x6CD5;&#x306B;&#x7126;&#x70B9;&#x3092;&#x5F53;&#x3066;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x77ED;&#x3044;&#x307B;&#x3069;&#x3088;&#x3044;&#x3002;&#x30A2;&#x30D7;&#x30BF;&#x30DE;&#x30FC;&#x306E;&#x9078;&#x629E;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x30AA;&#x30EA;&#x30B4;&#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30AA;&#x30C1;&#x30C9;&#x30E9;&#x30A4;&#x30D6;&#x30E9;&#x30EA;&#x30FC;&#x306E;&#x56FA;&#x5B9A;&#x30D7;&#x30E9;&#x30A4;&#x30DE;&#x30FC;&#x9818;&#x57DF;&#x306E;&#x524A;&#x6E1B;

Oligonucleotide aptamers&#xB294; &#xACE0;&#xB3C4;&#xB85C; &#xAD6C;&#xC870;&#xD654; &#xB41C; DNA &#xB610;&#xB294; RNA &#xBD84;&#xC790; &#xB610;&#xB294; &#xD2B9;&#xC815; &#xC120;&#xD638;&#xB3C4; &#xBE44;&#xAD50; &#xD56D; &#xCCB4;&#xC640; &#xD568;&#xAED8; &#xB300;&#xC0C1;&#xC5D0; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB294;, &#xC218;&#xC815;&#xB41C; &#xBC84;&#xC804;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. SELEX (&#xCCB4;&#xACC4;&#xC801;&#xC778; &#xC9C4;&#xD654;&#xC758; Ligands &#xC9C0; &#xC218; &#xB18D;&#xCD95; &#xD558; &#xC5EC;)&#xC744; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xB300;&#xC0C1;, &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;, &#xC791;&#xC740; &#xBD84;&#xC790; &#xBC0F; &#xC804;&#xCCB4; &#xC720;&#xAE30; &#xCCB4;&#xB97C; &#xBC30;&#xC591;&#xB41C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC778;&#xC2DD; &#xB418; &#xB098; &#xCCB4; &#xC678; &#xC120;&#xD0DD; &#xACFC;&#xC815;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. Aptamers &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xD569;&#xC131;, &#xC548;&#xC815;&#xC131;, &#xACAC;&#xACE0;&#xC131;, &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; immunogenicity &#xBD80;&#xC871;&#xC758; &#xC6A9;&#xC774;&#xC131; &#xB4F1;&#xC758; &#xBC14;&#xB78C;&#xC9C1;&#xD55C; &#xC18D;&#xC131; &#xBCF4;&#xC720;. &#xD45C;&#xC900; SELEX &#xB77C;&#xC774;&#xBE0C;&#xB7EC;&#xB9AC; &#xD544;&#xC694; &#xD558;&#xB098; PCR &#xB610;&#xB294; RT-PCR&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xB300;&#xC0C1; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xC21C;&#xC11C;&#xB97C; &#xC99D;&#xD3ED; &#xD558; &#xC911;&#xC559; &#xC784;&#xC758;&#xC758; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778;&#xC758; &#xAC01; &#xCE21;&#xBA74;&#xC5D0; 2 &#xAC1C;&#xC758; &#xB1CC;&#xAD00;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xB1CC;&#xAD00; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4; &#xBE44; &#xD2B9;&#xC815; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xBCF8;&#xC131;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD558; &#xACE0; &#xAE0D;&#xC815; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4;&#xC758; &#xB2E4; &#xC218;&#xB97C;&#xC774; &#xB04C; &#xB610;&#xB294; &#xC784;&#xC758;&#xC758; &#xC601;&#xC5ED;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4;&#xC758; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xC744; &#xBC29;&#xD574; &#xBCF4;&#xACE0; &#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xAC80;&#xD1A0; SELEX &#xACFC;&#xC815; &#xACE0;&#xC815;&#xB41C; &#xB1CC;&#xAD00; &#xAC04;&#xC12D; &#xC81C;&#xAC70; &#xD558;&#xB3C4;&#xB85D; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xB41C; &#xBC29;&#xBC95;&#xC5D0; &#xCD08;&#xC810;&#xC744; &#xB9DE;&#xCD94;&#xACE0;.

&#xB354; &#xC9E7;&#xC740; &#xB354; &#xB098;&#xC740; &#xAC83;: aptamer &#xC120;&#xD0DD; oligonucleotide &#xB77C;&#xC774;&#xBE0C;&#xB7EC;&#xB9AC;&#xC758; &#xACE0;&#xC815;&#xB41C; &#xB1CC;&#xAD00; &#xC601;&#xC5ED;&#xC744; &#xAC10;&#xC18C;.

Apt&#xE1;meros oligonucle&#xF3;tidos son altamente estructurados ADN o mol&#xE9;culas de ARN, o versiones modificadas de los mismos, que puede unirse a objetivos espec&#xED;ficos con afinidades comparables a los anticuerpos. Se identifican a trav&#xE9;s de un proceso de selecci&#xF3;n in vitro en denomina SELEX (Evoluci&#xF3;n sistem&#xE1;tica de ligandos por enriquecimiento exponencial) para reconocer una amplia variedad de objetivos, a partir de mol&#xE9;culas peque&#xF1;as a las prote&#xED;nas, y de c&#xE9;lulas cultivadas para los organismos enteros. Apt&#xE1;meros poseen un n&#xFA;mero de propiedades deseables, tales como la facilidad de s&#xED;ntesis, la estabilidad, la robustez y la falta de inmunogenicidad. Standard bibliotecas SELEX requieren dos cebadores, uno a cada lado de un dominio aleatorio central, para amplificar las secuencias diana enlazados-a trav&#xE9;s de PCR o RT-PCR. Sin embargo, estas secuencias de los cebadores causar la uni&#xF3;n no espec&#xED;fica por su propia naturaleza, y se ha informado que conducen a un gran n&#xFA;mero de falsos positivos secuencias de uni&#xF3;n, o para interferir con la uni&#xF3;n de secuencias dentro de las regiones al azar. Esta revisi&#xF3;n se centra en los m&#xE9;todos que se han desarrollado para eliminar la interferencia de imprimaci&#xF3;n fija durante el proceso de SELEX.

Cuanto m&#xE1;s corto mejor: La reducci&#xF3;n de las Regiones Primer fijos de las Bibliotecas de oligonucle&#xF3;tidos para la Selecci&#xF3;n apt&#xE1;mero

&#x73B0;&#x5728;&#x6E05;&#x695A;&#x5730;&#x8BA4;&#x8BC6;&#x5230; Microrna (&#x5927;&#x9E4F;) &#x63A7;&#x5236;&#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x4E2D;&#x7684;&#x91CD;&#x8981;&#x6027;&#x3002;&#x867D;&#x7136;&#x4E2A;&#x522B; Microrna &#x7684;&#x601D;&#x60F3;&#x5BF9;&#x4E0D;&#x540C;&#x5206;&#x6CCC;&#x4E0D;&#x5B8C;&#x7F8E;&#x914D;&#x5BF9;&#x7684;&#x57FA;&#x5730;&#x901A;&#x8FC7;&#x6570;&#x767E;&#x4E2A;&#x76EE;&#x6807;&#xFF0C;&#x4E86;&#x89E3;&#x751A;&#x5C11;&#x7684;&#x548C;&#x5E73;&#x53F7;&#x7A7A;&#x95F4;&#x7AD9;&#x76EE;&#x6807;&#x7AD9;&#x70B9;&#x7684;&#x7279;&#x70B9;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x6211;&#x4EEC;&#x5C55;&#x793A;&#x5927;&#x9E4F;&#x53EF;&#x4EE5;&#x914D;&#x5408;&#x5728;&#x76EE;&#x6807; RNA KRT &#x7EC6;&#x80DE;&#x89D2;&#x86CB;&#x767D; 19&#xFF09;&#xFF0C;&#x6839;&#x636E;&#x7ECF;&#x9A8C;&#x786E;&#x5B9A;&#x6613;&#x4E8E;&#x8BBF;&#x95EE;&#x7684;&#x7F51;&#x7AD9;&#x548C;&#x5BF9;&#x9F50;&#x7684;&#x5927;&#x9E4F;&#x7684;&#x4E00;&#x4E9B;&#x529F;&#x80FD;&#x4E0B;-KRT &#x8868;&#x8FBE;&#x7684;&#x8C03;&#x8282; post-transcriptionally&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x96C7;&#x4E86;&#x6838;&#x7CD6;&#x6838;&#x9178;&#x9176; H &#x57FA;&#x4E8E;&#x968F;&#x673A;&#x5E93;&#x9009;&#x62E9;&#x534F;&#x8BAE;&#x786E;&#x5B9A; KRT RNA &#x5728;&#x6613;&#x4E8E;&#x8BBF;&#x95EE;&#x7684;&#x7F51;&#x7AD9;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7136;&#x540E;&#x5BF9;&#x9F50;&#x7684;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x5927;&#x9E4F;&#x5411; KRT mRNA &#x7684;&#x6851;&#x683C;&#x7814;&#x7A76;&#x6240;&#x6570;&#x636E;&#x5E93;&#x96C6;&#x5408;&#x548C;&#x8FD8;&#x5BF9;&#x9F50;&#x5B83;&#x4EEC;&#x4F7F;&#x7528;&#x57FA;&#x4E8E; web &#x7684; MicroInspector &#x7A0B;&#x5E8F;&#x3002;&#x5BF9;&#x9F50;&#x4E0E;&#x7ECF;&#x9A8C; &#xFF1B; &#x786E;&#x5B9A;&#x53EF;&#x4EE5;&#x8BBF;&#x95EE;&#x7AD9;&#x70B9;&#x7684;&#x5927;&#x591A;&#x6570;&#x5927;&#x9E4F;&#x90A3;&#x4E9B;&#x4E0D;&#x7B26;&#x5408;&#x7ECF;&#x9A8C;&#x4E0A;&#x786E;&#x8BA4;&#x7684;&#x5730;&#x70B9;&#x4E5F;&#x6709;&#x6548;&#x8FD0;&#x4F5C;&#x4E2D;&#x57FA;&#x4E8E;&#x6838;&#x7CD6;&#x6838;&#x9178;&#x9176; H &#x7684;&#x68C0;&#x6D4B;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3002;&#x4E0E; RNA (Mammoglobin) &#x7684;&#x7B2C;&#x4E8C;&#x4E2A;&#x76EE;&#x6807;&#x5F97;&#x5230;&#x4E86;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x7684;&#x7ED3;&#x679C;&#x3002;&#x77AC;&#x65F6;&#x8F6C;&#x67D3;&#x68C0;&#x6D4B;&#x65B9;&#x6CD5;&#x5EFA;&#x7ACB;&#x8FD9;&#x660E;&#x663E;&#x4E0E; KRT &#x5BF9;&#x9F50;&#x7684;&#x5927;&#x9E4F;&#x7684;&#x4E00;&#x4E9B;&#x4E0B;&#x8C03;&#x5B83;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x4E00;&#x7EA7;&#x5BF9; RNA &#x6C34;&#x5E73;&#x6CA1;&#x6709;&#x4EFB;&#x4F55;&#x5F71;&#x54CD;&#x3002;&#x800C;&#x4E0E; 3&#39; &#x975E;&#x7FFB;&#x8BD1;&#x533A;&#x57DF;&#x5BF9;&#x9F50;&#x7684;&#x5927;&#x9E4F;&#x6B21;&#x6570;&#x5E76;&#x6CA1;&#x6709;&#x4EA7;&#x751F;&#x4E0B;&#x8C03;&#xFF0C;KRT &#x7684;&#x7F16;&#x7801;&#x533A;&#x57DF;&#x5185;&#x5BF9;&#x9F50;&#x529F;&#x80FD;&#x6709;&#x6548;&#x7684;&#x5927;&#x9E4F;&#x3002;

Microrna &#x5BF9;&#x9F50;&#x4E0E;&#x76EE;&#x6807; mRNAs &#x5728;&#x6613;&#x4E8E;&#x8BBF;&#x95EE;&#x7684;&#x7F51;&#x7AD9;&#x3002;

The importance of microRNAs (miRs) in control of gene expression is now clearly recognized. While individual microRNAs are thought to target hundreds of disparate mRNAs via imperfect base pairing, little is known about the characteristics of miR target sites. Here we show that the miRs can be aligned with empirically identified accessible sites in a target RNA (Cytokeratin 19, KRT), and that some of the aligned miRs functionally down-regulate KRT expression post-transcriptionally. We employed an RNase-H-based random library selection protocol to identify accessible sites in KRT RNA. We then aligned the Sanger Institute database collection of human miRs to KRT mRNA, and also aligned them using the web-based MicroInspector program. Most miRs aligned with the accessible sites identified empirically; those not aligned with the empirically identified sites also functioned effectively in RNase-H-based assays. Similar results were obtained with a second target RNA (Mammoglobin). Transient transfection assays established that some of the miRs which aligned with KRT significantly down-regulated it at the protein level, with no effect on RNA level. The functionally effective miRs aligned within the coding region of KRT, whereas a number of miRs which aligned with the 3'-untranslated region did not produce down-regulation.

MicroRNAs align with accessible sites in target mRNAs.

L&#x26;#39;importance des microARN (MIRS) dans le contr&#xF4;le de l&#x26;#39;expression g&#xE9;nique est maintenant clairement reconnue. Alors que les microARN sont individuels pens&#xE9; &#xE0; cibler des centaines d&#x26;#39;ARNm disparates via l&#x26;#39;appariement des bases imparfaites, on sait peu sur les caract&#xE9;ristiques des sites cibles miR. Ici, nous montrons que les mirs peut &#xEA;tre align&#xE9; avec empiriquement aux sites identifi&#xE9;s comme accessibles dans un ARN cible (cytok&#xE9;ratine 19, KRT), et que quelques-uns des mirs align&#xE9;s fonctionnellement r&#xE9;guler &#xE0; la baisse l&#x26;#39;expression post-transcriptionnelle KRT. Nous avons utilis&#xE9; une RNase-H-protocole bas&#xE9; sur la biblioth&#xE8;que de s&#xE9;lection al&#xE9;atoire pour identifier les sites accessibles &#xE0; KRT ARN. Nous avons ensuite align&#xE9; la collection de base de donn&#xE9;es Sanger Institute de MIRS de l&#x26;#39;homme &#xE0; KRT ARNm, et aussi les align&#xE9; en utilisant le programme bas&#xE9; sur le Web MicroInspector. La plupart des mirs align&#xE9; avec les sites accessibles identifi&#xE9;es empiriquement; ceux qui n&#x26;#39;ont pas align&#xE9; avec les sites identifi&#xE9;s de fa&#xE7;on empirique aussi bien fonctionn&#xE9; dans RNase-H-base de dosages. Des r&#xE9;sultats similaires ont &#xE9;t&#xE9; obtenus avec une seconde cible l&#x26;#39;ARN (Mammoglobin). Des exp&#xE9;riences de transfection transitoire &#xE9;tabli que certains des mirs qui &#xE9;tait align&#xE9; avec KRT de mani&#xE8;re significative sa r&#xE9;gul&#xE9;e &#xE0; la baisse au niveau des prot&#xE9;ines, avec aucun effet sur le niveau de l&#x26;#39;ARN. Les mirs fonctionnellement efficaces align&#xE9; dans la r&#xE9;gion codante du KRT, tandis qu&#x26;#39;un certain nombre de PSE qui &#xE9;tait align&#xE9; avec la r&#xE9;gion 3 &#x26;#39;non traduite ne produisent pas de r&#xE9;gulation &#xE0; la baisse.

Les microARN Aligner avec les sites accessibles en ARNm cibles

Die Bedeutung der MicroRNAs (MiRs) Kontrolle der Genexpression ist jetzt klar zu erkennen. W&auml;hrend einzelne MicroRNAs an Ziel Hunderte unterschiedliche mRNAs &uuml;ber unvollkommene Base Paarung gedacht sind, ist wenig &uuml;ber die Eigenschaften der Ziel-Sites von MiR bekannt. Hier zeigen wir, dass die MiRs mit empirisch ermittelten zug&auml;nglichen Websites in eine Ziel-RNA (Keratin 19, KRT) ausgerichtet werden k&ouml;nnen und einige der ausgerichteten MiRs funktional nach unten-KRT Ausdruck post-transcriptionally regulieren. Wir Besch&auml;ftigten eine RNase-H-basierten random-Bibliothek-Auswahl-Protokoll zug&auml;nglich Standorte in KRT RNA identifiziert. Wir dann die Sanger Institute-Datenbank-Auflistung der menschlichen MiRs auf KRT mRNA, und auch ausgerichtet mit das webbasierten MicroInspector-Programm. Die meisten MiRs in Einklang mit den empirisch ermittelten zug&auml;nglichen Standorten; diejenigen die nicht mit den empirisch ermittelten Standorten ausgerichtet funktionierten auch effektiv in RNase-H-basierte Assays. &Auml;hnliche Ergebnisse wurden mit einem zweiten Ziel-RNA (Mammoglobin) erzielt. Transiente Transfektion Proben festgestellt, dass einige der MiRs die dar&uuml;berstehenden KRT deutlich unten-es auf Protein-Ebene keine Auswirkungen auf RNA-Ebene geregelt. Die funktionell wirksame MiRs in die kodierende Region KRT, ausgerichtet, w&auml;hrend eine Reihe von MiRs, die mit der nicht 3&#39;-&uuml;bersetzte Region ausgerichtet Herunterregulation nicht ausgewirkt habe.

MicroRNAs angeh&ouml;renden zug&auml;nglichen Websites in deiner mRNAs.

L&#39;importanza di microRNA (MIR) nel controllo dell&#39;espressione genica &egrave; ora chiaramente riconosciuto. Mentre singoli microRNA &egrave; pensati per target centinaia dei mRNAs disparati tramite base imperfetto accoppiamento, poco si sa circa le caratteristiche dei siti di destinazione miR. Qui vi mostriamo che la Mir possono essere allineati con empiricamente identificati siti accessibili in una destinazione di RNA (citocheratina 19, KRT), e che alcuni del miRs allineati funzionalmente down-regolano espressione KRT post-transcriptionally. Abbiamo impiegato un protocollo di selezione RNasi H-random libreria basata per identificare i siti accessibili in RNA KRT. Abbiamo quindi allineati insieme database Sanger Institute di Mir umana a KRT mRNA e anche allineati mediante il programma di MicroInspector web-based. MiRs pi&ugrave; allineati con i siti accessibili identificati empiricamente; quelli non allineati con i siti individuati empiricamente anche funzionato efficacemente in dosaggi RNasi H-basati. Risultati simili sono stati ottenuti con un secondo obiettivo di RNA (Mammoglobin). Trasfezione transiente dosaggi stabilito che alcuni del miRs che allineati con KRT significativamente gi&ugrave;-regolato a livello di proteine, senza alcun effetto sul livello di RNA. Il miRs funzionalmente efficace allineato all&#39;interno della regione codificante del KRT, considerando che un certo numero di Mir che allineato con il 3&#39;-untranslated regione non produrre down-regulation.

MicroRNA allinea con siti accessibili in mRNA bersaglio.

&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x767A;&#x73FE;&#x306E;&#x5236;&#x5FA1;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;RNA&#xFF08;miR&#x304C;&#xFF09;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x6027;&#x304C;&#x4ECA;&#x306F;&#x3063;&#x304D;&#x308A;&#x3068;&#x8A8D;&#x8B58;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x500B;&#x3005;&#x306E;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;RNA&#x306F;&#x4E0D;&#x5B8C;&#x5168;&#x306A;&#x5869;&#x57FA;&#x5BFE;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x7570;&#x306A;&#x308B;mRNA&#x306E;&#x4F55;&#x767E;&#x3082;&#x306E;&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#x3068;&#x8003;&#x3048;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x4E00;&#x65B9;&#x3067;&#x3001;&#x5C11;&#x3057;&#x306F;miR&#x306E;&#x6A19;&#x7684;&#x90E8;&#x4F4D;&#x306E;&#x7279;&#x6027;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x306F;&#x307B;&#x3068;&#x3093;&#x3069;&#x77E5;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x306A;&#x3044;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;miR&#x306F;&#x3001;&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;RNA&#xFF08;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x30B1;&#x30E9;&#x30C1;&#x30F3;19&#x3001;KRT&#xFF09;&#x306E;&#x7D4C;&#x9A13;&#x7684;&#x306B;&#x8B58;&#x5225;&#x3055;&#x308C;&#x30A2;&#x30AF;&#x30BB;&#x30B9;&#x53EF;&#x80FD;&#x306A;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x3067;&#x6574;&#x5217;&#x3055;&#x305B;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3001;&#x6574;&#x5217;miR&#x306E;&#x4E00;&#x90E8;&#x306F;&#x3001;&#x6A5F;&#x80FD;&#x7684;&#x306B;&#x306F;&#x8EE2;&#x5199;&#x5F8C;&#x306B;KRT&#x767A;&#x73FE;&#x3092;&#x30C0;&#x30A6;&#x30F3;&#x30EC;&#x30AE;&#x30E5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30C8;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;KRT RNA&#x306E;&#x30A2;&#x30AF;&#x30BB;&#x30B9;&#x53EF;&#x80FD;&#x306A;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x3092;&#x8B58;&#x5225;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;RNase H&#x30D9;&#x30FC;&#x30B9;&#x306E;&#x30E9;&#x30F3;&#x30C0;&#x30E0;&#x30E9;&#x30A4;&#x30D6;&#x30E9;&#x30EA;&#x30FC;&#x3092;&#x9078;&#x629E;&#x3059;&#x308B;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C8;&#x30B3;&#x30EB;&#x3092;&#x63A1;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x305D;&#x306E;&#x5F8C;&#x3001;mRNA&#x3092;KRT&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x4EBA;&#x9593;&#x306E;miR&#x306E;&#x30B5;&#x30F3;&#x30AC;&#x30FC;&#x7814;&#x7A76;&#x6240;&#x306E;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x30D9;&#x30FC;&#x30B9;&#x306E;&#x30B3;&#x30EC;&#x30AF;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3092;&#x63C3;&#x3048;&#x3001;&#x307E;&#x305F;Web&#x30D9;&#x30FC;&#x30B9;&#x306E;MicroInspector&#x30D7;&#x30ED;&#x30B0;&#x30E9;&#x30E0;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x305D;&#x308C;&#x3089;&#x3092;&#x6574;&#x5217;&#x3002;&#x7D4C;&#x9A13;&#x7684;&#x306B;&#x8B58;&#x5225;&#x3055;&#x308C;&#x30A2;&#x30AF;&#x30BB;&#x30B9;&#x53EF;&#x80FD;&#x306A;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x306B;&#x5408;&#x308F;&#x305B;&#x3001;&#x307B;&#x3068;&#x3093;&#x3069;&#x306E;miR&#x304C;&#x3001;&#x307E;&#x305F;&#x306E;RNase H&#x30D9;&#x30FC;&#x30B9;&#x306E;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x3067;&#x52B9;&#x679C;&#x7684;&#x306B;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3057;&#x3066;&#x7D4C;&#x9A13;&#x7684;&#x306B;&#x8B58;&#x5225;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x3067;&#x6574;&#x5217;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x306A;&#x3044;&#x3082;&#x306E;&#x3002;&#x540C;&#x69D8;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x304C;&#x7B2C;&#x4E8C;&#x306E;&#x6A19;&#x7684;RNA&#xFF08;Mammoglobin&#xFF09;&#x3067;&#x5F97;&#x3089;&#x308C;&#x305F;&#x3002;&#x4E00;&#x904E;&#x6027;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A7;&#x30AF;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x306F;&#x3001;RNA&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x306B;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x4E0E;&#x3048;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306A;&#x304F;&#x3001;KRT&#x306B;&#x5408;&#x308F;&#x305B;miR&#x306E;&#x4E00;&#x90E8;&#x304C;&#x5927;&#x5E45;&#x306B;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3067;&#x305D;&#x308C;&#x3092;&#x30C0;&#x30A6;&#x30F3;&#x30EC;&#x30AE;&#x30E5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30C8;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x78BA;&#x7ACB;&#x3057;&#x305F;&#x3002; 3&#x26;#39;-&#x975E;&#x7FFB;&#x8A33;&#x9818;&#x57DF;&#x306B;&#x5408;&#x308F;&#x305B;miR&#x306E;&#x6570;&#x306F;&#x30C0;&#x30A6;&#x30F3;&#x30EC;&#x30AE;&#x30E5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3092;&#x751F;&#x3058;&#x306A;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x306E;&#x306B;&#x5BFE;&#x3057;&#x3001;&#x6A5F;&#x80FD;&#x7684;&#x306B;&#x52B9;&#x679C;&#x7684;&#x306A;miR&#x304C;&#x304C;&#x3001;KRT&#x306E;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C7;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B0;&#x9818;&#x57DF;&#x5185;&#x3067;&#x6574;&#x5217;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x3002;

microRNA&#x306F;&#x3001;&#x6A19;&#x7684;mRNA&#x306B;&#x30A2;&#x30AF;&#x30BB;&#x30B9;&#x53EF;&#x80FD;&#x306A;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x306B;&#x5408;&#x308F;&#x305B;&#x3066;

&#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBC1C;&#xD604;&#xC758; &#xCEE8;&#xD2B8;&#xB864;&#xC5D0;&#xC11C; microRNAs (&#xBBF8;&#xB974;)&#xC758; &#xC911;&#xC694;&#xC131;&#xC740; &#xBA85;&#xD655; &#xD558; &#xAC8C; &#xC778;&#xC2DD; &#xC9C0;&#xAE08;. &#xAC1C;&#xBCC4; microRNAs &#xC218;&#xBC31; &#xC30D; &#xBD88;&#xC644;&#xC804; &#xD55C; &#xC790;&#xB8CC;&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; &#xC774;&#xC9C8;&#xC801;&#xC778; Mrnas&#xC758; &#xB300;&#xC0C1;&#xC73C;&#xB85C; &#xC0DD;&#xAC01; &#xB418; &#xACE0;, &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xC791;&#xC740; &#xBBF8;&#xB974; &#xB300;&#xC0C1; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;&#xC758; &#xD2B9;&#xC131;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC54C;&#xB824;&#xC838; &#xC788;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xBBF8;&#xB974; &#xB300;&#xC0C1; RNA (Cytokeratin 19, KRT)&#xC5D0;&#xC11C; &#xACBD;&#xD5D8;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xD655;&#xC778; &#xB41C; &#xC561;&#xC138;&#xC2A4;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;&#xC640; &#xB9DE;&#xCD9C; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xADF8; &#xC77C;&#xBD80; &#xC815;&#xB82C; &#xB41C; &#xBBF8;&#xB974; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xB2E4;&#xC6B4;-&#xADDC;&#xC81C; KRT &#xC2DD; post-transcriptionally &#xD45C;&#xC2DC; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC; &#xACE0;&#xC6A9; KRT RNA&#xC5D0; &#xC561;&#xC138;&#xC2A4;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;&#xB97C; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xD558;&#xB294; &#xC784;&#xC758;&#xC758; &#xB77C;&#xC774;&#xBE0C;&#xB7EC;&#xB9AC; RNase H &#xAE30;&#xBC18; &#xC120;&#xD0DD; &#xD504;&#xB85C;&#xD1A0;&#xCF5C;. &#xC6B0;&#xB9AC; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xBBF8;&#xB974; KRT mRNA &#xC0DD;&#xC5B4; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC18C; &#xB370;&#xC774;&#xD130;&#xBCA0;&#xC774;&#xC2A4; &#xCEEC;&#xB809;&#xC158;&#xC744; &#xC815;&#xB82C; &#xD558; &#xACE0; &#xB610;&#xD55C; MicroInspector &#xC6F9; &#xAE30;&#xBC18; &#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB7A8;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xC815;&#xB82C; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB300;&#xBD80;&#xBD84;&#xC758; &#xBBF8;&#xB974; &#xC815;&#xB82C;; &#xACBD;&#xD5D8;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xD655;&#xC778; &#xB41C; &#xC561;&#xC138;&#xC2A4;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8; &#xACBD;&#xD5D8;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xD655;&#xC778; &#xB41C; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;&#xC640; &#xC815;&#xB82C; &#xB418;&#xC9C0; &#xADF8; &#xB610;&#xD55C; RNase H &#xAE30;&#xBC18; &#xBD84;&#xC11D; &#xC2E4;&#xD5D8;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD6A8;&#xACFC;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC791;&#xC6A9; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xBE44;&#xC2B7;&#xD55C; &#xACB0;&#xACFC; &#xB450; &#xBC88;&#xC9F8; &#xB300;&#xC0C1; RNA (Mammoglobin)&#xC744; &#xD68D;&#xB4DD; &#xD588;&#xB2E4;. &#xBD84;&#xC11D; &#xC2E4;&#xD5D8; &#xACFC;&#xB3C4; transfection&#xB294; KRT&#xC5D0; &#xD06C;&#xAC8C; &#xBD80;&#xD569; &#xD558;&#xB294; &#xBBF8;&#xB974;&#xC758; &#xC77C;&#xBD80; &#xB2E4;&#xC6B4;-&#xADDC;&#xC81C; &#xADF8;&#xAC83; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC218;&#xC900;&#xC5D0;&#xC11C; RNA &#xC218;&#xC900;&#xC5D0; &#xC544;&#xBB34;&#xB7F0; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xC124;&#xB9BD;. &#xAE30;&#xB2A5;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xD6A8;&#xACFC;&#xC801;&#xC778; &#xBBF8;&#xB974; &#xBBF8;&#xB974; 3&#39;-untranslated &#xC601;&#xC5ED;&#xC5D0; &#xBD80;&#xD569; &#xD558;&#xB294; &#xC218; &#xB2E4;&#xC6B4; &#xB808; &#xADE4; &#xB808;&#xC774; &#xC158;&#xC744; &#xC0DD;&#xC131; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC740; &#xBC18;&#xBA74; KRT, &#xCF54;&#xB529; &#xC601;&#xC5ED; &#xB0B4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC815;&#xB82C; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;.

MicroRNAs &#xB300;&#xC0C1; Mrnas&#xC5D0; &#xC561;&#xC138;&#xC2A4;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;&#xC640; &#xC77C;&#xCE58;.

La importancia de los microRNAs (MIR) en el control de la expresi&#xF3;n g&#xE9;nica est&#xE1; claramente reconocida. Mientras que los microARNs individuales se cree que dirigirse a cientos de ARNm dispares a trav&#xE9;s de la base de sincronizaci&#xF3;n imperfecta, poco se sabe sobre las caracter&#xED;sticas de los sitios objetivo del MIR. Aqu&#xED; nos muestran que los MIR se pueden alinear con emp&#xED;ricamente identificados los sitios accesibles en un ARN diana (citoqueratina 19, KRT), y que algunos de los MIR alineados funcionalmente regular a la baja la expresi&#xF3;n de KRT post-transcripcional. Se emple&#xF3; una RNasa-H basada en protocolo de selecci&#xF3;n aleatoria biblioteca para identificar los sitios accesibles en KRT ARN. A continuaci&#xF3;n, alinea la colecci&#xF3;n Sanger Institute base de datos de MIR humanos a KRT ARNm, y tambi&#xE9;n los alineados con el programa basado en la web MicroInspector. La mayor&#xED;a de los MIR en consonancia con los sitios accesibles identificados emp&#xED;ricamente, los que no est&#xE1;n alineados con los sitios identificados tambi&#xE9;n emp&#xED;ricamente la eficacia del funcionamiento en RNasa H basados &#x200B;&#x200B;en ensayos. Resultados similares se obtuvieron con un segundo objetivo de ARN (Mammoglobin). Los ensayos de transfecci&#xF3;n transitoria estableci&#xF3; que algunos de los MIR, que alineados con KRT significativamente hacia abajo-regulado a nivel de prote&#xED;nas, sin efecto sobre los niveles de ARN. Los Mirs eficaces funcionalmente alineadas dentro de la regi&#xF3;n codificante del KRT, mientras que un n&#xFA;mero de MIR que alineados con la regi&#xF3;n 3 &#x26;#39;no traducida no produjo baja regulaci&#xF3;n.

Los microARNs Alinear con sitios accesibles en la meta mRNAs

&#x8FD9;&#x53EF;&#x4EE5;&#x4ECE;&#x5927;&#x91CF;&#x7684;&#x968F;&#x673A;&#x5E93;&#x7531;&#x9009;&#x5B9A;&#x914D;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x8FDB;&#x5316;&#x6307;&#x6570;&#x6D53;&#x7F29; (&#x6280;&#x672F;) &#x534F;&#x8BAE;&#xFF0C;&#x4E0E;&#x4EB2;&#x7F18;&#x5173;&#x7CFB;&#x548C;&#x5177;&#x4F53;&#x60C5;&#x51B5;&#x76F8;&#x5F53;&#x6216;&#x4F18;&#x4E8E;&#x6297;&#x4F53;&#x9AD8;&#x4EB2;&#x548C;&#x6027;&#x5BE1;&#x6838;&#x82F7;&#x9178;&#x9002;&#x914D;&#x5B50;&#x3002;&#x6280;&#x672F;&#x534F;&#x8BAE;&#x5305;&#x62EC;&#x591A;&#x8F6E;&#x7684;&#x9009;&#x62E9;&#xFF0C;&#x5176;&#x4E2D;&#x6BCF;&#x4E2A;&#x9700;&#x8981;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x7684;&#x914D;&#x4F53;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x53CD;&#x8FC7;&#x6765;&#x9700;&#x8981;&#x56FA;&#x5B9A;&#x7684;&#x5F15;&#x7269;&#x5E8F;&#x5217;&#x4FA7;&#x7FFC;&#x968F;&#x673A;&#x5E93;&#x5730;&#x533A;&#x7684;&#x518D;&#x751F;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x56FA;&#x5B9A;&#x7684;&#x5F15;&#x7269;&#x5E8F;&#x5217;&#x53EF;&#x4EE5;&#x5E72;&#x6270; (&#x8BEF;&#x62A5;&#x548C;&#x5E95;&#x7247;) &#x7504;&#x9009;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x63D0;&#x51FA;&#x4F7F;&#x7528;&#x968F;&#x673A;&#x7684; DNA &#x5E93;&#x7684;&#x65E0;&#x5E95;&#x6F06;&#x7684;&#x534F;&#x8BAE;&#x3002;

&#x65E0;&#x5E95;&#x6F06;&#x7684;&#x9644;&#x7740;&#x9009;&#x62E9;&#x4F7F;&#x7528;&#x4E00;&#x4E2A;&#x968F;&#x673A;&#x7684; DNA &#x5E93;&#x3002;

Aptamers are high-affinity oligonucleotides which can be selected from large random libraries by systematic evolution of ligands by exponential enrichment (SELEX) protocols, with affinities and specificities comparable or better than antibodies. The SELEX protocols comprise multiple rounds of selection, each of which require regeneration of bound ligands, which in turn require fixed primer sequences flanking the random library regions. These fixed primer sequences can interfere (with false positives and negatives) with the selection process. Here we present a primer-free protocol using a random DNA library.

Primer-free aptamer selection using a random DNA library.

Les aptam&#xE8;res sont des oligonucl&#xE9;otides de haute affinit&#xE9; qui peuvent &#xEA;tre choisis parmi les grandes biblioth&#xE8;ques al&#xE9;atoires par l&#x26;#39;&#xE9;volution syst&#xE9;matique des ligands par enrichissement exponentiel (SELEX) protocoles, avec des affinit&#xE9;s et sp&#xE9;cificit&#xE9;s comparables ou mieux que les anticorps. Les protocoles SELEX comprennent plusieurs s&#xE9;ries de s&#xE9;lection, dont chacun n&#xE9;cessitant la r&#xE9;g&#xE9;n&#xE9;ration de ligands li&#xE9;s, qui &#xE0; son tour n&#xE9;cessitant s&#xE9;quences d&#x26;#39;amorces flanquantes fixes les r&#xE9;gions de biblioth&#xE8;ques al&#xE9;atoires. Ces s&#xE9;quences d&#x26;#39;amorces fixes peuvent interf&#xE9;rer (avec de faux positifs et n&#xE9;gatifs) avec le processus de s&#xE9;lection. Ici, nous pr&#xE9;sentons un protocole d&#x26;#39;amorce sans l&#x26;#39;aide d&#x26;#39;une biblioth&#xE8;que d&#x26;#39;ADN al&#xE9;atoire.

Primer sans s&#xE9;lection des aptam&#xE8;res utilisation d&#x26;#39;une biblioth&#xE8;que d&#x26;#39;ADN au hasard

Aptamere sind hoher Affinit&auml;t Oligonukleotide, die aus gro&szlig;en zuf&auml;llige Bibliotheken durch systematische Evolution von Liganden durch exponentielle Anreicherung (SELEX) Protokolle, mit Affinit&auml;ten und Besonderheiten vergleichbar oder besser als Antik&ouml;rper gew&auml;hlt werden k&ouml;nnen. Die SELEX-Protokolle umfassen mehrere Runden der Auswahl, die Regeneration von gebundenen Liganden, erfordern, die wiederum feste Grundierung Sequenzen flankierenden Regionen random-Bibliothek ben&ouml;tigen. Diese feste Grundierung Sequenzen (falsch positive und negative) mit dem Auswahlprozess st&ouml;ren k&ouml;nnen. Hier pr&auml;sentieren wir eine Z&uuml;ndkapsel-free-Protokoll mithilfe einer zuf&auml;lligen DNA-Bibliothek.

Grundierung-freie Aptamer Auswahl mithilfe einer zuf&auml;lligen DNA-Bibliothek.

Aptameri sono oligonucleotidi ad alta affinit&agrave; che possono essere selezionati da grandi biblioteche casuale evoluzione sistematica dei ligandi dai protocolli di arricchimento esponenziale (SELEX), con affinit&agrave; e specificit&agrave; paragonabile o meglio di anticorpi. I protocolli SELEX comprendono pi&ugrave; turni di selezione, ciascuna delle quali richiede la rigenerazione dei ligandi legati, che a loro volta richiedono fisso primer sequenze fiancheggianti regioni libreria casuale. Questi fissa primer sequenze possono interferire (con falsi positivi e negativi) con il processo di selezione. Qui di seguito presentiamo un protocollo senza primer utilizzando una libreria casuale del DNA.

Selezione senza primer aptamer utilizzando una libreria casuale del DNA.

&#x30A2;&#x30D7;&#x30BF;&#x30DE;&#x30FC;&#x306F;&#x3001;&#x540C;&#x7B49;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x6297;&#x4F53;&#x3088;&#x308A;&#x3082;&#x512A;&#x308C;&#x305F;&#x89AA;&#x548C;&#x6027;&#x3068;&#x7279;&#x7570;&#x6027;&#x3067;&#x3001;&#x6307;&#x6570;&#x95A2;&#x6570;&#x7684;&#x6FC3;&#x7E2E;&#xFF08;SELEX&#xFF09;&#x200B;&#x200B;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C8;&#x30B3;&#x30EB;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x30EA;&#x30AC;&#x30F3;&#x30C9;&#x306E;&#x7CFB;&#x7D71;&#x7684;&#x9032;&#x5316;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x5927;&#x304D;&#x306A;&#x30E9;&#x30F3;&#x30C0;&#x30E0;&#x30E9;&#x30A4;&#x30D6;&#x30E9;&#x30EA;&#x30FC;&#x304B;&#x3089;&#x9078;&#x629E;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x3001;&#x9AD8;&#x89AA;&#x548C;&#x6027;&#x30AA;&#x30EA;&#x30B4;&#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30AA;&#x30C1;&#x30C9;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002; SELEX&#x30D7;&#x30ED;&#x30C8;&#x30B3;&#x30EB;&#x306F;&#x3001;&#x9806;&#x756A;&#x306B;&#x30E9;&#x30F3;&#x30C0;&#x30E0;&#x30E9;&#x30A4;&#x30D6;&#x30E9;&#x30EA;&#x9818;&#x57DF;&#x306B;&#x96A3;&#x63A5;&#x3059;&#x308B;&#x56FA;&#x5B9A;&#x306E;&#x30D7;&#x30E9;&#x30A4;&#x30DE;&#x30FC;&#x914D;&#x5217;&#x3092;&#x5FC5;&#x8981;&#x3068;&#x3059;&#x308B;&#x7D50;&#x5408;&#x30EA;&#x30AC;&#x30F3;&#x30C9;&#x306E;&#x518D;&#x751F;&#x3092;&#x5FC5;&#x8981;&#x3068;&#x3059;&#x308B;&#x305D;&#x308C;&#x305E;&#x308C;&#x306E;&#x9078;&#x629E;&#x306E;&#x8907;&#x6570;&#x306E;&#x30E9;&#x30A6;&#x30F3;&#x30C9;&#x3092;&#x3001;&#x69CB;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x56FA;&#x5B9A;&#x30D7;&#x30E9;&#x30A4;&#x30DE;&#x30FC;&#x914D;&#x5217;&#x306F;&#x3001;&#x9078;&#x629E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x3067;&#xFF08;&#x507D;&#x967D;&#x6027;&#x3068;&#x9670;&#x6027;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#xFF09;&#x3092;&#x59A8;&#x5BB3;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x30E9;&#x30F3;&#x30C0;&#x30E0;DNA&#x30E9;&#x30A4;&#x30D6;&#x30E9;&#x30EA;&#x30FC;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x30D7;&#x30E9;&#x30A4;&#x30DE;&#x30FC;&#x30D5;&#x30EA;&#x30FC;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C8;&#x30B3;&#x30EB;&#x3092;&#x63D0;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30E9;&#x30F3;&#x30C0;&#x30E0;DNA&#x30E9;&#x30A4;&#x30D6;&#x30E9;&#x30EA;&#x30FC;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x305F;&#x30D7;&#x30E9;&#x30A4;&#x30DE;&#x30FC;&#x30D5;&#x30EA;&#x30FC;&#x30A2;&#x30D7;&#x30BF;&#x30DE;&#x30FC;&#x306E;&#x9078;&#x629E;

Aptamers&#xB294; &#xB192;&#xC740; &#xC120;&#xD638;&#xB3C4; oligonucleotides &#xC120;&#xD638;&#xB3C4;&#xC640; &#xD2B9;&#xC774;&#xC131; &#xBE44;&#xAD50; &#xB610;&#xB294; &#xD56D; &#xCCB4; &#xBCF4;&#xB2E4;&#xB294; &#xB354; &#xB098;&#xC740; &#xC9C0; &#xC218; &#xB18D;&#xCD95; (SELEX) &#xD504;&#xB85C;&#xD1A0;&#xCF5C;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; ligands&#xC758; &#xCCB4;&#xACC4;&#xC801;&#xC778; &#xC9C4;&#xD654;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xD070; &#xC784;&#xC758;&#xC758; &#xB77C;&#xC774;&#xBE0C;&#xB7EC;&#xB9AC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC120;&#xD0DD;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB294;. SELEX &#xD504;&#xB85C;&#xD1A0;&#xCF5C; &#xAD6C;&#xC131; &#xC120;&#xD0DD;, &#xC5EC;&#xB7EC; &#xCC28;&#xB840; &#xAC01;&#xAC01; &#xCC28;&#xB840;&#xB85C; &#xBB34;&#xC791;&#xC704; &#xB77C;&#xC774;&#xBE0C;&#xB7EC;&#xB9AC; &#xC601;&#xC5ED; &#xCE21;&#xBA74; &#xACE0;&#xC815;&#xB41C; &#xB1CC;&#xAD00; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4;&#xB97C; &#xC694;&#xAD6C; &#xD558;&#xB294; &#xBC14;&#xC6B4;&#xB4DC; ligands&#xC758; &#xC7AC;&#xC0DD;&#xC744; &#xD544;&#xC694;&#xB85C; &#xD558;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xACE0;&#xC815; &#xB1CC;&#xAD00; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4; &#xC120;&#xD0DD; &#xACFC;&#xC815; (&#xD2C0;&#xB9B0; &#xD655;&#xC2E4;&#xC131; &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xB124;&#xAC70;&#xD2F0;&#xBE0C;)&#xC640; &#xBC29;&#xD574;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30;&#xC5D0; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xD604;&#xC7AC; &#xC784;&#xC758;&#xC758; DNA &#xB77C;&#xC774;&#xBE0C;&#xB7EC;&#xB9AC;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xB1CC;&#xAD00; &#xBB34;&#xB8CC; &#xD504;&#xB85C;&#xD1A0;&#xCF5C;.

&#xC784;&#xC758;&#xC758; DNA &#xB77C;&#xC774;&#xBE0C;&#xB7EC;&#xB9AC;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xB1CC;&#xAD00; &#xBB34;&#xB8CC; aptamer &#xC120;&#xD0DD;.

Los apt&#xE1;meros son de alta afinidad de oligonucle&#xF3;tidos que pueden ser seleccionados al azar de las grandes bibliotecas de la evoluci&#xF3;n sistem&#xE1;tica de ligandos por enriquecimiento exponencial (SELEX) protocolos, con afinidades y especificidades comparables o mejores que los anticuerpos. Los protocolos SELEX comprenden m&#xFA;ltiples rondas de selecci&#xF3;n, cada uno de los cuales requieren la regeneraci&#xF3;n de los ligandos unidos, que a su vez requieren secuencias fijas de cebadores que flanquean las regiones de la biblioteca al azar. Estas secuencias de los cebadores fijos pueden interferir (con falsos positivos y negativos) con el proceso de selecci&#xF3;n. Aqu&#xED; se presenta un protocolo libre de imprimaci&#xF3;n con una biblioteca de ADN al azar.

Primer libre de Selecci&#xF3;n apt&#xE1;mero utilizar una biblioteca de ADN al azar

&#x6709;&#x6781;&#x5927;&#x7684;&#x5174;&#x8DA3;&#xFF0C;&#x5728;&#x8BB8;&#x591A; &#xFF08;&#x5982;&#x679C;&#x4E0D;&#x662F;&#x6240;&#x6709;&#x7684;&#xFF09; &#x7C7B;&#x578B;&#x7684;&#x764C;&#x75C7;&#xFF0C;&#x60A3;&#x8005;&#x5FAA;&#x73AF;&#x80BF;&#x7624;&#x7EC6;&#x80DE; &#xFF08;&#x9A8C;&#x8F66;&#xFF09; &#x4F5C;&#x4E3A;&#x4E00;&#x9879;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x8BCA;&#x65AD;&#x53CA;&#x9884;&#x540E;&#x5224;&#x65AD;&#x6307;&#x6807;&#x68C0;&#x6D4B;&#xFF0C;&#x8BB8;&#x591A;&#x7814;&#x7A76;&#x5DF2;&#x786E;&#x7ACB;&#x7684;&#x9A8C;&#x8F66;&#x7684;&#x7EDD;&#x5BF9;&#x6C34;&#x5E73;&#x662F;&#x4E00;&#x4E2A;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x51B3;&#x5B9A;&#x56E0;&#x7D20;&#x3002;&#x9274;&#x4E8E;&#x6B64;&#xFF0C;&#x5728;&#x8BE5;&#x5B57;&#x6BB5;&#x4E2D;&#x7684;&#x5927;&#x591A;&#x6570;&#x7814;&#x7A76;&#x73B0;&#x5728;&#x5229;&#x7528;&#x9006;&#x8F6C;&#x5F55;/&#x805A;&#x5408;&#x9176;&#x94FE;&#x53CD;&#x5E94;&#x57FA;&#x4E8E;&#x6D4B;&#x91CF;&#xFF0C;&#x53EA;&#x96C6;&#x4E2D;&#x4E8E;&#x6240;&#x9009;&#x6807;&#x8BB0; RNAs &#x7684;&#x7279;&#x5B9A;&#x80BF;&#x7624;&#x7C7B;&#x578B;&#x3002;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x79CD;&#x6D4B;&#x91CF;&#x4EFB;&#x52A1;&#x63D0;&#x524D;&#x9009;&#x62E9; RNAs &#x6807;&#x8BB0;&#x548C;&#x53EA;&#x6709;&#x4E3A;&#x6570;&#x6709;&#x9650;&#x7684;&#x6807;&#x8BB0;&#x53EF;&#x4EE5;&#x5728;&#x53CD;&#x5E94;&#x4E2D;&#x8FDB;&#x884C;&#x68C0;&#x67E5;&#x3002;&#x663E;&#x7136;&#xFF0C;&#x4E00;&#x79CD;&#x66F4;&#x53EF;&#x9760;&#x7684;&#x68C0;&#x6D4B;&#x65B9;&#x6CD5;&#x5C06;&#x5141;&#x8BB8;&#x8BB8;&#x591A;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684; Rna&#xFF0C;&#x540C;&#x65F6;&#x6D4B;&#x91CF;&#x548C;&#x8BB8;&#x591A;&#x4E0D;&#x540C;&#x7C7B;&#x578B;&#x7684;&#x764C;&#x75C7;&#x5BFB;&#x627E;&#x7684;&#x80FD;&#x529B;&#x5C06;&#x63D0;&#x4F9B;&#x5F88;&#x5927;&#x7684;&#x4F18;&#x52BF;&#xFF0C;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x4E00;&#x79CD;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x7B5B;&#x9009;&#x5DE5;&#x5177;&#x3002;

&#x53CD;&#x6050;&#x59D4;&#x5458;&#x4F1A;&#x68C0;&#x6D4B; RNA &#x4F20;&#x611F;&#x5668;&#x5E73;&#x53F0;&#xFF1A; &#x68C0;&#x6D4B;&#x80BF;&#x7624;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6807;&#x8BB0; RNAs &#x7684;&#x7EB3;&#x7C73;&#x6280;&#x672F;&#x3002;

There is great interest in the detection of circulating tumour cells (CTCs) as an important diagnostic and prognostic indicator for patients with many (if not all) types of cancer, and many studies have established that the absolute level of CTCs is a critical determinant. Given that, most studies in the field now utilise reverse transcription/polymerase chain reaction-based measurements, focussing on selected marker RNAs for the particular tumour type. However, such measurements mandate choosing the marker RNAs in advance, and only a limited number of markers can be examined in the reactions. Clearly, a more robust assay would allow simultaneous measurement of many different RNAs, and the ability to look for many different types of cancer would provide a major advantage as a potential screening tool.

An RNA Sensor Platform for CTC Detection: Nanotechnology for Detection of Tumour Cell Marker RNAs.

Il ya un grand int&#xE9;r&#xEA;t dans la d&#xE9;tection de cellules tumorales circulantes (CTC) comme un indicateur important de diagnostic et de pronostic pour les patients atteints de nombreux types (sinon tous) de cancer, et de nombreuses &#xE9;tudes ont &#xE9;tabli que le niveau absolu de CTC est un facteur d&#xE9;terminant. &#xC9;tant donn&#xE9; que, la plupart des &#xE9;tudes dans le domaine d&#xE9;sormais utiliser reverse transcription / en cha&#xEE;ne par polym&#xE9;rase &#xE0; base de mesures, mettant l&#x26;#39;accent sur les ARN marqueurs s&#xE9;lectionn&#xE9;s pour le type particulier de tumeur. Toutefois, de telles mesures mandat de choisir les marqueurs ARN &#xE0; l&#x26;#39;avance, et seul un nombre limit&#xE9; de marqueurs peuvent &#xEA;tre examin&#xE9;s dans les r&#xE9;actions. De toute &#xE9;vidence, un test plus robuste permettant la mesure simultan&#xE9;e de nombreux ARN diff&#xE9;rents, et la capacit&#xE9; &#xE0; rechercher de nombreux types de cancer serait de fournir un avantage majeur comme outil de d&#xE9;pistage potentiel.

Une plate-forme de capteur pour la d&#xE9;tection de l&#x26;#39;ARN de la CCT: la nanotechnologie pour la d&#xE9;tection des ARN cellulaires tumorales Marker

Es gibt gro&szlig;es Interesse an den Nachweis zirkulierender Tumorzellen (CTCs) als wichtiger diagnostischer und prognostischer Indikator f&uuml;r Patienten mit viele (wenn nicht alle) Arten von Krebs, und viele Studien haben festgestellt, dass die absolute H&ouml;he der CTCs ein kritischer Faktor ist. Da nutzen die meisten Studien im Bereich jetzt reverse Transkription/Polymerase Kettenreaktion-basierte Messungen, Fokussierung auf ausgew&auml;hlte Marker RNAs f&uuml;r die bestimmten Tumorart. Jedoch solche Messungen Mandat den Marker RNAs im Voraus ausw&auml;hlen und nur eine begrenzte Anzahl von Markern in den Reaktionen gepr&uuml;ft werden kann. Klar, ein robuster Assay erm&ouml;glicht gleichzeitige Messung von vielen verschiedenen RNAs, und die M&ouml;glichkeit, viele verschiedene Arten von Krebs zu suchen w&auml;re einen gro&szlig;en Vorteil als eine m&ouml;gliche Screening-Tool bieten.

Eine RNA-Sensor-Plattform f&uuml;r CTC-Erkennung: Nanotechnologie f&uuml;r die Erkennung von Tumor Zelle Marker RNAs.

C&#39;&egrave; grande interesse per l&#39;individuazione di cellule tumorali (CTCs) in circolazione come indicatore diagnostico e prognostico importante per i pazienti con molti (se non tutti) tipi di cancro, e molti studi hanno stabilito che il livello assoluto del CTCs &egrave; un determinante critico. Dato che, la maggior parte dei studi nel campo ora utilizzano misure basate sulla reazione a catena trascrizione inversa/polimerasi, concentrandosi sul marcatore selezionato RNAs per il tipo di tumore particolare. Tuttavia, tali misure mandato scegliendo il marcatore RNAs in anticipo, e pu&ograve; essere esaminato solo un numero limitato di indicatori nelle reazioni. Chiaramente, un dosaggio pi&ugrave; robusto consentirebbe la misura simultanea di molti differenti RNAs, e la capacit&agrave; di cercare diversi tipi di cancro sarebbe fornire un vantaggio importante come un potenziale strumento di screening.

Una piattaforma di RNA sensore per il rilevamento di CTC: nanotecnologie per la rilevazione del marcatore tumorale cellulare RNAs.

&#x305D;&#x3053;&#x306B;&#x304C;&#x3093;&#x306E;&#xFF08;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x3067;&#x306F;&#x306A;&#x3044;&#x306B;&#x305B;&#x3088;&#xFF09;&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x7A2E;&#x985E;&#x306E;&#x60A3;&#x8005;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x8A3A;&#x65AD;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x4E88;&#x5F8C;&#x306E;&#x6307;&#x6A19;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x816B;&#x760D;&#x7D30;&#x80DE;&#xFF08;CTC&#x306E;&#xFF09;&#x5FAA;&#x74B0;&#x306E;&#x691C;&#x51FA;&#x306B;&#x5927;&#x304D;&#x306A;&#x95A2;&#x5FC3;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x3001;&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x306F;&#x3001;CTC&#x306E;&#x7D76;&#x5BFE;&#x6C34;&#x6E96;&#x304C;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x56E0;&#x5B50;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x78BA;&#x7ACB;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x8003;&#x3048;&#x308B;&#x3068;&#x3001;&#x30D5;&#x30A3;&#x30FC;&#x30EB;&#x30C9;&#x5185;&#x306E;&#x307B;&#x3068;&#x3093;&#x3069;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x306F;&#x73FE;&#x5728;&#x3001;&#x7279;&#x5B9A;&#x306E;&#x816B;&#x760D;&#x30BF;&#x30A4;&#x30D7;&#x306E;&#x9078;&#x629E;&#x30DE;&#x30FC;&#x30AB;&#x30FC;&#x306E;RNA&#x306B;&#x7126;&#x70B9;&#x3092;&#x5F53;&#x3066;&#x3066;&#x3001;&#x9006;&#x8EE2;&#x5199;/&#x30DD;&#x30EA;&#x30E1;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x9023;&#x9396;&#x53CD;&#x5FDC;&#x30D9;&#x30FC;&#x30B9;&#x306E;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x3092;&#x5229;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x306E;&#x7FA9;&#x52D9;&#x3001;&#x4E8B;&#x524D;&#x306B;&#x30DE;&#x30FC;&#x30AB;&#x30FC;RNA&#x3092;&#x9078;&#x629E;&#x3057;&#x3001;&#x30DE;&#x30FC;&#x30AB;&#x30FC;&#x306E;&#x9650;&#x3089;&#x308C;&#x305F;&#x6570;&#x306F;&#x3001;&#x53CD;&#x5FDC;&#x3067;&#x8ABF;&#x3079;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3001;&#x3088;&#x308A;&#x5805;&#x7262;&#x306A;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x306F;&#x3001;&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x7570;&#x306A;&#x3063;&#x305F;RNA&#x306E;&#x540C;&#x6642;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x3092;&#x53EF;&#x80FD;&#x306B;&#x3059;&#x308B;&#x3067;&#x3042;&#x308D;&#x3046;&#x3068;&#x3001;&#x764C;&#x306E;&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x7A2E;&#x985E;&#x3092;&#x691C;&#x7D22;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x80FD;&#x529B;&#x306F;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x306A;&#x30B9;&#x30AF;&#x30EA;&#x30FC;&#x30CB;&#x30F3;&#x30B0;&#x30C4;&#x30FC;&#x30EB;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x5927;&#x304D;&#x306A;&#x5229;&#x70B9;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3059;&#x308B;&#x3067;&#x3042;&#x308D;&#x3046;&#x3002;

CTC&#x306E;&#x691C;&#x51FA;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;RNA&#x30BB;&#x30F3;&#x30B5;&#x30FC;&#x30D7;&#x30E9;&#x30C3;&#x30C8;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;&#xFF1A;&#x816B;&#x760D;&#x7D30;&#x80DE;&#x30DE;&#x30FC;&#x30AB;&#x30FC;RNA&#x306E;&#x691C;&#x51FA;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x30CA;&#x30CE;&#x30C6;&#x30AF;&#x30CE;&#x30ED;&#x30B8;&#x30FC;

(&#xB9CC;&#xC57D;&#xC5D0; &#xBAA8;&#xB450; &#xC544;&#xB2D9;&#xB2C8;&#xB2E4;) &#xB9CE;&#xC740; &#xC885;&#xB958;&#xC758; &#xC554;, &#xD658;&#xC790;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC9C4;&#xB2E8; &#xBC0F; &#xC804;&#xC870; &#xC9C0;&#xD45C;&#xB85C; &#xC11C; &#xC885;&#xC591; &#xC138;&#xD3EC; (CTCs) &#xC21C;&#xD658;&#xC758; &#xAC80;&#xC0C9;&#xC5D0; &#xD070; &#xAD00;&#xC2EC; &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xB9CE;&#xC740; &#xC5F0;&#xAD6C; Ctcs&#xC758; &#xC808;&#xB300; &#xC218;&#xC900;&#xC774; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xACB0;&#xC815;&#xC740; &#xC124;&#xB9BD;. &#xAC10;&#xC548;&#xD560; &#xB54C;, &#xB300;&#xBD80;&#xBD84;&#xC758; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xBD84;&#xC57C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC9C0;&#xAE08; &#xC120;&#xD0DD;&#xD55C; &#xB9C8;&#xCEE4; Rnas&#xC758; &#xD2B9;&#xC815; &#xC885;&#xC591; &#xC885;&#xB958;&#xC5D0; &#xAD6D;&#xD55C; &#xC5ED;&#xBC29;&#xD5A5; &#xC804;&#xC0AC;/&#xC911; &#xD569; &#xD6A8;&#xC18C; &#xC5F0;&#xC1C4; &#xBC18;&#xC751;&#xC5D0; &#xAE30;&#xCD08;&#xB97C; &#xB454; &#xCE21;&#xC815; &#xD65C;&#xC6A9;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xCE21;&#xC815; &#xC704;&#xC784; RNAs &#xD45C;&#xC2DC;&#xC790;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC804;&#xC5D0; &#xC120;&#xD0DD; &#xD558; &#xACE0; &#xC81C;&#xD55C; &#xB41C; &#xC218;&#xC758; &#xB9C8;&#xCEE4;&#xB97C; &#xAC80;&#xC0AC; &#xD558;&#xB294; &#xBC18;&#xC751;&#xC5D0;&#xC11C;. &#xBA85;&#xD655; &#xD558; &#xAC8C;, &#xB354; &#xAC15;&#xB825;&#xD55C; &#xBD84;&#xC11D; &#xACB0;&#xACFC; &#xB9CE;&#xC740; &#xB2E4;&#xB978; Rnas&#xC758; &#xB3D9;&#xC2DC; &#xCE21;&#xC815; &#xD5C8;&#xC6A9; &#xD558; &#xACE0; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xC720;&#xD615;&#xC758; &#xC554;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xBCFC; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xB2A5;&#xB825; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xC801;&#xC778; &#xC2EC;&#xC0AC; &#xB3C4;&#xAD6C;&#xB85C; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC774;&#xC810;&#xC740; &#xC81C;&#xACF5; &#xD558;&#xB294; &#xAC83;.

CTC &#xAC80;&#xCD9C;&#xC744; &#xC704;&#xD55C; RNA &#xC13C;&#xC11C; &#xD50C;&#xB7AB;&#xD3FC;: &#xC885;&#xC591; &#xC138;&#xD3EC; &#xB9C8;&#xCEE4; Rnas&#xC758; &#xAC80;&#xCD9C;&#xC744; &#xC704;&#xD55C; &#xB098;&#xB178;&#xAE30;&#xC220;.

Existe un gran inter&#xE9;s en la detecci&#xF3;n de c&#xE9;lulas tumorales circulantes (CTC) como un importante indicador diagn&#xF3;stico y pron&#xF3;stico para los pacientes con muchos tipos (si no todos) de c&#xE1;ncer, y muchos estudios han demostrado que el nivel absoluto de CTC es un determinante cr&#xED;tico. Teniendo en cuenta que, la mayor&#xED;a de los estudios en el campo ahora utilizan la transcripci&#xF3;n reversa / reacci&#xF3;n en cadena de la polimerasa basados &#x200B;&#x200B;en las mediciones, centr&#xE1;ndose en el ARN marcadores seleccionados para el tipo de tumor en particular. Sin embargo, estas mediciones mandato elegir los RNAs marcador de antemano, y s&#xF3;lo un n&#xFA;mero limitado de marcadores pueden ser examinados en las reacciones. Claramente, un ensayo m&#xE1;s robusto que permiten la medici&#xF3;n simult&#xE1;nea de muchos diferentes ARN, y la capacidad de mirar para muchos tipos diferentes de c&#xE1;ncer proporcionar&#xED;a una ventaja importante como una herramienta de detecci&#xF3;n potencial.

Una plataforma de sensor para la detecci&#xF3;n de ARN del CTC: Nanotecnolog&#xED;a para la detecci&#xF3;n de ARN marcador de c&#xE9;lulas tumorales

&#x65B0;&#x578B;&#x9690;&#x7403;&#x83CC;&#x6027;&#x8111;&#x819C;&#x708E;&#x4E3B;&#x8981;&#x5F15;&#x8D77;&#x7684;&#x65B0;&#x751F;&#x9690;&#x7403;&#x83CC;&#x548C;&#x9690;&#x7403;&#x83CC; gattii&#xFF0C;&#x4F46;&#x5076;&#x5C14;&#x4F1A;&#x6D89;&#x53CA;&#x5176;&#x4ED6;&#x7684;&#x9690;&#x7403;&#x83CC;&#x7269;&#x79CD;&#x53CA;&#x548C;&#x76F8;&#x5173;&#x7684;&#x7269;&#x79CD;&#x3002;&#x672C;&#x6587;&#x6240;&#x8FF0;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x76EE;&#x524D;&#x6765;&#x81EA;&#x4E2D;&#x56FD;&#x7684;&#x5511;&#x7C7B;&#x548C;&#x6C1F;&#x5C3F;&#x5627;&#x5576;&#x8010; Filobasidium uniguttulatum &#x662F;&#x5F15;&#x8D77;&#x9690;&#x7403;&#x83CC;&#x6027;&#x8111;&#x819C;&#x708E;&#x4E00;&#x4F8B;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x6982;&#x8FF0;&#x7684;&#x8111;&#x819C;&#x708E;&#x5F15;&#x8D77;&#x9690;&#x7403;&#x83CC; C.&#x9690;&#x7403;&#x83CC;&#x548C; C.gattii &#x4EE5;&#x5916;&#x7684;&#x5176;&#x4ED6;&#x79CD;&#x7C7B;&#x7684;&#x6587;&#x5B66;&#x3002;8 &#x8D77;&#x6848;&#x4EF6;&#x6D89;&#x53CA;&#x7684;&#x4E2D;&#x67A2;&#x795E;&#x7ECF;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x611F;&#x67D3;&#x3002;&#x767D;&#x8840;&#x75C5;&#x548C;&#x764C;&#x75C7;&#x662F;&#x827E;&#x6ECB;&#x75C5;&#x6BD2;&#x6297;&#x4F53;&#x9634;&#x6027;&#x60A3;&#x8005;&#x7684;&#x91CD;&#x8981;&#x5371;&#x9669;&#x56E0;&#x7D20;&#x3002;&#x5206;&#x5B50;&#x9274;&#x5B9A;&#x548C;&#x836F;&#x654F;&#x8BD5;&#x9A8C;&#x975E;&#x5E38;&#x91CD;&#x8981;&#x9002;&#x5F53;&#x7BA1;&#x7406;&#x7684;&#x75C5;&#x4EBA;&#xFF0C;&#x56E0;&#x4E3A;&#x6D89;&#x53CA;&#x7684;&#x7269;&#x79CD;&#x5728;&#x6297;&#x771F;&#x83CC;&#x836F;&#x7269;&#x654F;&#x611F;&#x6027;&#x53EF;&#x80FD;&#x6709;&#x6240;&#x4E0D;&#x540C;&#x3002;

&#x8111;&#x819C;&#x708E;&#x5F15;&#x8D77;&#x7684; Filobasidium uniguttulatum&#xFF1A; &#x75C5;&#x4F8B;&#x62A5;&#x544A;&#x53CA;&#x6587;&#x732E;&#x7EFC;&#x8FF0;&#x3002;

Cryptococcal meningitis is mainly caused by Cryptococcus neoformans and Cryptococcus gattii, but occasionally other Cryptococcus species and phylogenetically related species are involved. Herein, we present a case of cryptococcal meningitis from China, which was caused by an azole and flucytosine resistant Filobasidium uniguttulatum. In addition, we present an overview of the literature of meningitis caused by Cryptococcus species other than C. neoformans and C. gattii. Eight cases were related to infections of the central nervous system. Leukaemia and cancer were important risk factors in HIV-negative patients. Molecular identification and susceptibility testing are important for proper management of patients because the species involved may differ in susceptibility to antifungal drugs.

Meningitis caused by Filobasidium uniguttulatum: case report and overview of the literature.

M&eacute;ningite cryptococcique est caus&eacute;e principalement par Cryptococcus neoformans et Cryptococcus gattii, mais parfois les autres esp&egrave;ces de Cryptococcus et esp&egrave;ces phylog&eacute;n&eacute;tiquement apparent&eacute;es sont impliqu&eacute;s. Ici, nous pr&eacute;sentons un cas de m&eacute;ningite &agrave; cryptocoques provenant de la Chine, qui a &eacute;t&eacute; caus&eacute;e par un azole et r&eacute;sistant &agrave; la flucytosine Filobasidium uniguttulatum. En outre, nous pr&eacute;sentons un aper&ccedil;u de la litt&eacute;rature de la m&eacute;ningite caus&eacute;e par des esp&egrave;ces de Cryptococcus autre que c. neoformans et c. gattii. Huit cas ont &eacute;t&eacute; associ&eacute;s &agrave; des infections du syst&egrave;me nerveux central. La leuc&eacute;mie et le cancer ont &eacute;t&eacute; des facteurs de risque importants chez les patients VIH-n&eacute;gatifs. Identification mol&eacute;culaire et les tests de sensibilit&eacute; sont importants pour une bonne gestion des patients car les esp&egrave;ces concern&eacute;es peuvent diff&eacute;rer dans la sensibilit&eacute; aux antifongiques.

M&eacute;ningite caus&eacute;e par Filobasidium uniguttulatum : vue d&#39;ensemble de la documentation et de rapport de cas.

Kryptokokkenmeningitis ist haupts&auml;chlich durch Cryptococcus Neoformans und Cryptococcus Gattii verursacht, aber gelegentlich andere Cryptococcus und phylogenetisch Verwandte Arten beteiligt sind. Hier pr&auml;sentieren wir einen Fall von Kryptokokkenmeningitis aus China, die durch eine Azole und Flucytosin best&auml;ndig Filobasidium Uniguttulatum verursacht wurde. Dar&uuml;ber hinaus pr&auml;sentieren wir Ihnen einen &Uuml;berblick &uuml;ber die Literatur der Meningitis durch Cryptococcus Arten als C. Neoformans und C. Gattii verursacht. Acht F&auml;lle bezogen sich auf Infektionen des zentralen Nervensystems. Leuk&auml;mie und Krebs waren wichtige Risikofaktoren bei HIV-Negative Patienten. Molekulare Identifizierung und Resistenztestung sind wichtig f&uuml;r die ordnungsgem&auml;&szlig;e Verwaltung der Patienten, weil der beteiligten Spezies in Anf&auml;lligkeit f&uuml;r Antimykotika unterscheiden k&ouml;nnen.

Meningitis verursacht durch Filobasidium Uniguttulatum: Bericht und &Uuml;berblick &uuml;ber die Literatur.

La meningite da criptococco &egrave; principalmente causata da Cryptococcus neoformans e Cryptococcus gattii, ma occasionalmente sono coinvolti altri Cryptococcus specie e specie filogeneticamente affini. Qui, vi presentiamo un caso di meningite da criptococco dalla Cina, che &egrave; stato causato da un azoli e resistente Flucitosina Filobasidium uniguttulatum. Inoltre, vi presentiamo una panoramica della letteratura di meningite causata da specie Cryptococcus neoformans c. e c. gattii. Otto casi erano legati alle infezioni del sistema nervoso centrale. Leucemia e cancro sono importanti fattori di rischio in pazienti HIV-negativi. Identificazione molecolare e antibiogramma sono importanti per una corretta gestione dei pazienti perch&eacute; la specie in questione possono differire nella suscettibilit&agrave; ai farmaci antifungini.

Meningite causata da Filobasidium uniguttulatum: case report e panoramica della letteratura.

&#x30AF;&#x30EA;&#x30D7;&#x30C8;&#x30B3;&#x30C3;&#x30AB;&#x30B9;&#x9AC4;&#x819C;&#x708E;&#x306F;&#x3001;&#x4E3B;&#x306B;&#x30AF;&#x30EA;&#x30D7;&#x30C8;&#x30B3;&#x30C3;&#x30AB;&#x30B9; &#x30EC;&#x30C8;&#x30ED;&#x30B9;&#x30DA;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x3068; cryptococcus&#x3001;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5F15;&#x304D;&#x8D77;&#x3053;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x304C;&#x3001;&#x6642;&#x6298;&#x4ED6;&#x306E;&#x30AF;&#x30EA;&#x30D7;&#x30C8;&#x30B3;&#x30C3;&#x30AB;&#x30B9;&#x7A2E;&#x3068;&#x7CFB;&#x7D71;&#x306E;&#x8FD1;&#x7E01;&#x7A2E;&#x304C;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x672C;&#x660E;&#x7D30;&#x66F8;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x30A2;&#x30BE;&#x30FC;&#x30EB;&#x7CFB;&#x3084;&#x30D5;&#x30EB;&#x30B7;&#x30C8;&#x30B7;&#x30F3;&#x8010;&#x6027; Filobasidium uniguttulatum &#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5F15;&#x304D;&#x8D77;&#x3053;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x4E2D;&#x56FD;&#x304B;&#x3089;&#x30AF;&#x30EA;&#x30D7;&#x30C8;&#x30B3;&#x30C3;&#x30AB;&#x30B9;&#x9AC4;&#x819C;&#x708E;&#x3092;&#x63D0;&#x6848;&#x3059;&#x308B;.&#x307E;&#x305F;&#x3001;&#x30AF;&#x30EA;&#x30D7;&#x30C8;&#x30B3;&#x30C3;&#x30AB;&#x30B9;&#x3068; C. gattii &#x4EE5;&#x5916;&#x306E;&#x30AF;&#x30EA;&#x30D7;&#x30C8;&#x30B3;&#x30C3;&#x30AB;&#x30B9;&#x7A2E;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x9AC4;&#x819C;&#x708E;&#x306E;&#x6587;&#x5B66;&#x306E;&#x6982;&#x8981;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;8 &#x4F8B;&#x4E2D;&#x67A2;&#x795E;&#x7D4C;&#x7CFB;&#x306E;&#x611F;&#x67D3;&#x75C7;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x3002;&#x767D;&#x8840;&#x75C5;&#x3084;&#x304C;&#x3093; HIV &#x9670;&#x6027;&#x4F8B;&#x3067;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x30EA;&#x30B9;&#x30AF;&#x8981;&#x56E0;.&#x6297;&#x771F;&#x83CC;&#x85AC;&#x611F;&#x53D7;&#x6027;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3059;&#x308B;&#x7A2E;&#x304C;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x5834;&#x5408;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x306E;&#x3067;&#x5206;&#x5B50;&#x540C;&#x5B9A;&#x3068;&#x611F;&#x53D7;&#x6027;&#x8A66;&#x9A13;&#x306F;&#x60A3;&#x8005;&#x306E;&#x9069;&#x5207;&#x306A;&#x7BA1;&#x7406;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x3067;&#x3059;&#x3002;

Filobasidium uniguttulatum &#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x9AC4;&#x819C;&#x708E;: &#x75C7;&#x4F8B;&#x5831;&#x544A;&#x3068;&#x6587;&#x732E;&#x306E;&#x6982;&#x8981;&#x3002;

Cryptococcal &#xB1CC; &#xC218; &#xB9C9; &#xC5FC;&#xC740; &#xC8FC;&#xB85C; Cryptococcus neoformans &#xBC0F; Cryptococcus gattii&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xAC00;&#xB054; &#xB2E4;&#xB978; Cryptococcus &#xC885; &#xBC0F; phylogenetically &#xAD00;&#xB828;&#xB41C; &#xC885; &#xAD00;&#xB828;. &#xC5EC;&#xAE30;&#xC5D0;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; azole &#xACE0; flucytosine &#xC800;&#xD56D; Filobasidium uniguttulatum&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD588;&#xB2E4; &#xC911;&#xAD6D;&#xC5D0;&#xC11C; cryptococcal &#xB1CC; &#xC218; &#xB9C9; &#xC5FC;&#xC758; &#xACBD;&#xC6B0; &#xD604;&#xC7AC;. &#xB610;&#xD55C;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; C. neoformans C. gattii &#xC774;&#xC678;&#xC758; Cryptococcus &#xC885;&#xC73C;&#xB85C; &#xC778; &#xD55C; &#xB1CC; &#xC218; &#xB9C9; &#xC5FC;&#xC758; &#xBB38;&#xD559; &#xAC1C;&#xC694;&#xB97C; &#xC81C;&#xC2DC;. 8&#xC758; &#xACBD;&#xC6B0;&#xB294; &#xC911;&#xC559; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC870;&#xC9C1; &#xAC10;&#xC5FC;&#xC73C;&#xB85C; &#xAD00;&#xB828;&#xC774; &#xC788;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xBC31;&#xD608;&#xBCD1;&#xACFC; &#xC554; HIV &#xC74C;&#xC131; &#xD658;&#xC790;&#xC5D0; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC704;&#xD5D8; &#xC694;&#xC18C;&#xB97C; &#xD588;&#xB2E4;. &#xBD84;&#xC790; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xBC0F; &#xC790;&#xD654; &#xC728; &#xD14C;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xCC38;&#xC5EC; &#xC885; &#xD56D;&#xC9C4;&#xADE0; &#xC57D;&#xBB3C; &#xBBFC;&#xAC10;&#xC131;&#xC5D0; &#xB2E4;&#xB97C; &#xC218; &#xC788;&#xAE30; &#xB54C;&#xBB38;&#xC5D0; &#xD658;&#xC790; &#xB4E4;&#xC758; &#xC801;&#xC808; &#xD55C; &#xAD00;&#xB9AC;&#xB97C; &#xC704;&#xD574; &#xC911;&#xC694; &#xD558;&#xB2E4;.

Filobasidium uniguttulatum&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD558;&#xB294; &#xB1CC; &#xC218; &#xB9C9; &#xC5FC;: &#xC0AC;&#xB840; &#xBCF4;&#xACE0;&#xC11C; &#xBC0F; &#xD64D;&#xBCF4; &#xC790;&#xB8CC;&#xC758; &#xAC1C;&#xC694;.

La meningitis criptoc&oacute;cica es causada principalmente por Cryptococcus neoformans y Cryptococcus gattii, pero en ocasiones participan otras especies de Cryptococcus y especies relacionadas filogen&eacute;ticamente. Adjunto, presentamos un caso de la meningitis criptoc&oacute;cica de China, que fue causado por un azol y flucitosina resistente Filobasidium uniguttulatum. Adem&aacute;s, presentamos un Resumen de la literatura de meningitis causada por especies Cryptococcus neoformans de la C. y C. gattii. Ocho casos fueron relacionadas con infecciones del sistema nervioso central. Leucemia y c&aacute;ncer fueron importantes factores de riesgo en pacientes HIV-negative. Identificaci&oacute;n molecular y pruebas de sensibilidad son importantes para el manejo adecuado de los pacientes porque pueden diferir las especies implicadas en la sensibilidad a f&aacute;rmacos antimic&oacute;ticos.

Meningitis causada por Filobasidium uniguttulatum: informe del caso y Resumen de la literatura.

&#x5206;&#x6790;&#x5728;&#x773C;&#x524D;&#x8282;&#x5149;&#x5B66;&#x76F8;&#x5E72;&#x65AD;&#x5C42;&#x626B;&#x63CF; &#xFF08;AS-10 &#x6708;&#xFF09;&#xFF0C;&#x4E00;&#x79CD;&#x9AD8;&#x5206;&#x8FA8;&#x7387;&#x3001; &#x975E;&#x63A5;&#x89E6;&#x7684;&#x68C0;&#x6D4B;&#x65B9;&#x6CD5;&#x4E0E;&#x5C0F;&#x6881;&#x5207;&#x9664;&#x672F;&#x540E; 1 &#x5468;&#x5185; supraciliochoroidal &#x6D41;&#x4F53; (SCF) &#x7684;&#x5916;&#x89C2;&#x3002;

Supraciliochoroidal &#x6D41;&#x4F53;&#x53D1;&#x75C5;&#x7387;&#x5728;&#x5C0F;&#x6881;&#x5207;&#x9664;&#x672F;&#x540E;&#x7684;&#x65E9;&#x671F;&#x9636;&#x6BB5;&#xFF1A; &#x4E0E;&#x773C;&#x524D;&#x8282;&#x5149;&#x5B66;&#x76F8;&#x5E72;&#x5C42;&#x6790;&#x6210;&#x50CF;&#x6280;&#x672F;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x3002;

To analyze the appearance of supraciliochoroidal fluid (SCF) within 1 week after trabeculectomy with anterior segment optical coherence tomography (AS-OCT), a high-resolution, non-contact detection method.

Supraciliochoroidal fluid incidence at the early stage after trabeculectomy: study with anterior segment optical coherence tomography.

Pour analyser l&#39;apparence du liquide supraciliochoroidal (EFC) moins d&#39;une semaine apr&egrave;s la trab&eacute;culectomie avec tomographie par coh&eacute;rence optique de segment ant&eacute;rieur (AS-OCT), une m&eacute;thode de d&eacute;tection &agrave; haute r&eacute;solution et sans contact.

Supraciliochoroidal incidence fluide au stade pr&eacute;coce apr&egrave;s une trab&eacute;culectomie : &eacute;tude par tomographie &agrave; coh&eacute;rence optique segment ant&eacute;rieur.

Die Darstellung der Supraciliochoroidal Fl&uuml;ssigkeit (SCF) innerhalb von 1 Woche nach Trabeculectomy mit Vorderabschnitt Optische Koh&auml;renztomografie (AS-OCT), ein hochaufl&ouml;sender, ber&uuml;hrungslose Nachweisverfahren analysieren.

Supraciliochoroidal fl&uuml;ssig-Inzidenz in der Fr&uuml;hphase nach Trabeculectomy: studieren mit Vorderabschnitt Optische Koh&auml;renztomografie.

Per analizzare l&#39;aspetto del liquido supraciliochoroidal (SCF) entro 1 settimana dopo trabeculectomy con segmento anteriore optical coherence tomography (AS-OCT), un metodo di rilevazione ad alta risoluzione, senza contatto.

Supraciliochoroidal fluido incidenza in fase precoce dopo trabeculectomy: lo studio con tomografia a coerenza ottica segmento anteriore.

Supraciliochoroidal &#x6D41;&#x4F53; &#xFF08;SCF&#xFF09; &#x306E;&#x5916;&#x89B3;&#x306E;&#x524D;&#x65B9;&#x30BB;&#x30B0;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#x5149;&#x5E72;&#x6E09;&#x65AD;&#x5C64;&#x6CD5; &#xFF08;AS 10 &#x6708;&#xFF09;&#x3001;&#x9AD8;&#x89E3;&#x50CF;&#x5EA6;&#x3001;&#x975E;&#x63A5;&#x89E6;&#x691C;&#x51FA;&#x6CD5;&#x3068;&#x5E2F;&#x5207;&#x9664;&#x5F8C; 1 &#x9031;&#x9593;&#x4EE5;&#x5185;&#x3092;&#x5206;&#x6790;&#x3059;&#x308B;&#x306B;&#x306F;&#x3002;

Supraciliochoroidal &#x6D41;&#x4F53;&#x5165;&#x5C04;&#x5E2F;&#x5207;&#x9664;&#x5F8C;&#x65E9;&#x671F;: &#x524D;&#x6B6F;&#x30BB;&#x30B0;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#x3068;&#x5149;&#x30B3;&#x30D2;&#x30FC;&#x30EC;&#x30F3;&#x30B9;&#x30C8;&#x30E2;&#x30B0;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x3092;&#x52C9;&#x5F37;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#xC55E;&#xCABD;&#xC5D0; &#xC138;&#xADF8;&#xBA3C;&#xD2B8; &#xAD11;&#xD559; &#xC77C;&#xAD00;&#xC131; &#xB2E8;&#xCE35; &#xCD2C;&#xC601; (AS-10 &#xC6D4;), &#xACE0;&#xD574;&#xC0C1;&#xB3C4;, &#xBE44; &#xC811;&#xCD09; &#xAC80;&#xCD9C; &#xBC29;&#xC2DD;&#xC73C;&#xB85C; trabeculectomy &#xD6C4; 1 &#xC8FC; &#xC774;&#xB0B4; supraciliochoroidal &#xC561;&#xCCB4; (SCF)&#xC758; &#xBAA8;&#xC591;&#xC744; &#xBD84;&#xC11D; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Supraciliochoroidal trabeculectomy &#xD6C4; &#xC870;&#xAE30;&#xC5D0; &#xC720;&#xCCB4; &#xBC1C;&#xC0DD;&#xB960;: &#xC55E;&#xCABD;&#xC5D0; &#xC138;&#xADF8;&#xBA3C;&#xD2B8; &#xAD11;&#xD559; &#xC77C;&#xAD00;&#xC131; &#xB2E8;&#xCE35; &#xCD2C;&#xC601;&#xACFC; &#xACF5;&#xBD80;.

Analizar la aparici&oacute;n de l&iacute;quido supraciliochoroidal (SCF) dentro de 1 semana despu&eacute;s de trabeculectom&iacute;a con tomograf&iacute;a de coherencia &oacute;ptica de segmento anterior (AS-OCT), un m&eacute;todo de detecci&oacute;n de alta resoluci&oacute;n, sin contacto.

La incidencia de fluido de Supraciliochoroidal en la primera etapa despu&eacute;s de trabeculectom&iacute;a: estudio con tomograf&iacute;a de coherencia &oacute;ptica de segmento anterior.

&#x6709;&#x5E7F;&#x6CDB;&#x7684;&#x5174;&#x8DA3;&#xFF0C;&#x5728;&#x5FAA;&#x73AF;&#x8840;&#x6DB2;&#x4E2D;&#x7684;&#x80BF;&#x7624;&#x7EC6;&#x80DE; &#xFF08;&#x9A8C;&#x8F66;&#xFF09;&#x3002;&#x76F4;&#x63A5;&#x68C0;&#x6D4B;&#x7684;&#x9A8C;&#x8F66; &#xFF08;&#x5F80;&#x5F80; &lt; 1/mL&#xFF09; &#x5F88;&#x590D;&#x6742;&#x7684;&#x82E5;&#x5E72;&#x56E0;&#x7D20;&#xFF0C;&#x4F46;&#x6BCF;&#x53CD;&#x6050;&#x59D4;&#x5458;&#x4F1A;&#xFF0C;&#x52A0;&#x4E0A;&#x7B80;&#x5355;&#x7684;&#x5BCC;&#x96C6;&#x76EE;&#x6807; RNA&#xFF09; &#x62F7;&#x8D1D; &sim;10(3) &#x7684;&#x5B58;&#x5728;&#xFF0C;&#x53EF;&#x4EE5;&#x5927;&#x5927;&#x63D0;&#x9AD8;&#x68C0;&#x6D4B;&#x80FD;&#x529B;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x9879;&#x7814;&#x7A76;&#x4E2D;&#x6211;&#x4EEC;&#x7528;&#x4E8E;&#x5927;&#x4F17;&#x653E;&#x5927;&#x9EC4;&#x91D1;&#x7EB3;&#x7C73;&#x7C92;&#x5B50;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x7684;&#x5171;&#x632F;&#x9891;&#x7387;&#x53D8;&#x5316;&#x68C0;&#x6D4B;&#x6742;&#x4EA4;&#x4E09;&#x660E;&#x6CBB;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5230;&#x529F;&#x80FD;&#x6027;&#x7EB3;&#x7C73;&#x7EBF;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x9009;&#x62E9; PCA3 RNA &#x4F5C;&#x4E3A;&#x4E00;&#x4E2A;&#x6807;&#x8BB0;&#xFF0C;&#x524D;&#x5217;&#x817A;&#x764C;&#xFF0C;&#x4F18;&#x5316;&#x53CD;&#x4E49;&#x7ED3;&#x5408;&#x4F4D;&#x70B9;&#xFF0C;&#x548C;&#x5B9A;&#x4E49;&#x6761;&#x4EF6;&#x5141;&#x8BB8;&#x5355;&#x6838;&#x82F7;&#x9178;&#x4E0D;&#x5339;&#x914D;&#x7684;&#x6B67;&#x89C6;&#xFF0C;&#x548C;&#x4F7F;&#x7528;&#x7ED3;&#x5408;&#x81EA;&#x4E0A;&#x800C;&#x4E0B;&#x7684;&#x5236;&#x4F5C;&#x4E0E;&#x81EA;&#x4E0B;&#x800C;&#x4E0A;&#x7684;&#x52A0;&#x5DE5;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x542F;&#x7528;&#x591A;&#x8DEF;&#x590D;&#x7528;&#x9065;&#x611F;&#x4F18;&#x52BF;&#x8981;&#x7D20;&#x6DF7;&#x5408;&#x8C10;&#x632F;&#x5668;&#x96C6;&#x6210;&#x65B9;&#x6848;&#x3002;&#x4ECE;&#x9891;&#x7387;&#x8BA1;&#x7B97;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x7684;&#x5927;&#x89C4;&#x6A21;&#x8F6C;&#x79FB;&#x4F30;&#x8BA1;&#x7684;&#x8BA1;&#x6570;&#x91D1;&#x7EB3;&#x7C73;&#x7C92;&#x5B50;&#x7684;&#x5339;&#x914D;&#x7684;&#x5927;&#x4F17;&#x3002;&#x8FD9;&#x8868;&#x793A;&#x4F7F;&#x7528;&#x6B64;&#x7C7B;&#x7684; nanoresonators&#xFF0C;&#x663E;&#x793A;&#x4F18;&#x79C0;&#x7684;&#x7279;&#x5F02;&#x6027;&#x548C;&#x5B9A;&#x91CF;&#x654F;&#x611F;&#x6027;&#x7684;&#x627F;&#x8BFA;&#x9996;&#x6B21;&#x5C55;&#x793A;&#x3002;

Nanoresonator &#x7684;&#x5FAA;&#x73AF;&#x80BF;&#x7624;&#x7EC6;&#x80DE;&#x68C0;&#x6D4B;&#x57FA;&#x4E8E;&#x82AF;&#x7247;&#x7684; RNA &#x4F20;&#x611F;&#x5668;&#x7B56;&#x7565;&#xFF1A; &#x4F7F;&#x7528; PCA3 &#x4F5C;&#x4E3A;&#x524D;&#x5217;&#x817A;&#x764C;&#x6807;&#x5FD7;&#x7269;&#x7684;&#x53CD;&#x5E94;&#x3002;

There is widespread interest in circulating tumor cells (CTCs) in blood. Direct detection of CTCs (often < 1/mL) is complicated by a number of factors, but the presence of âˆ¼10(3) to 10(4) copies of target RNA per CTC, coupled with simple enrichments, can greatly increase detection capability. In this study we used resonance frequency shifts induced by mass-amplifying gold nanoparticles to detect a hybridization sandwich bound to functionalized nanowires. We selected PCA3 RNA as a marker for prostate cancer, optimized antisense binding sites, and defined conditions allowing single nucleotide mismatch discrimination, and used a hybrid resonator integration scheme, which combines elements of top-down fabrication with strengths of bottom-up fabrication, with a view to enable multiplexed sensing. Bound mass calculated from frequency shifts matched mass estimated by counting gold nanoparticles. This represents the first demonstration of use of such nanoresonators, which show promise of both excellent specificity and quantitative sensitivity.

Nanoresonator chip-based RNA sensor strategy for detection of circulating tumor cells: response using PCA3 as a prostate cancer marker.

Il ya un int&#xE9;r&#xEA;t g&#xE9;n&#xE9;ralis&#xE9; &#xE0; des cellules tumorales circulantes (CTC) dans le sang. La d&#xE9;tection directe de CTC (souvent &#x26;lt;1/ml) est compliqu&#xE9;e par un certain nombre de facteurs, mais la pr&#xE9;sence de ~ 10 (3) &#xE0; 10 (4) copies de l&#x26;#39;ARN cible par la CCT, coupl&#xE9; avec des enrichissements simples, peut augmenter consid&#xE9;rablement la capacit&#xE9; de d&#xE9;tection . Dans cette &#xE9;tude nous avons utilis&#xE9; la fr&#xE9;quence de r&#xE9;sonance se d&#xE9;place induite par des nanoparticules d&#x26;#39;or de masse-amplification pour d&#xE9;tecter une hybridation sandwich li&#xE9; &#xE0; nanofils fonctionnalis&#xE9;s. Nous avons choisi PCA3 ARN comme un marqueur de cancer de la prostate, les sites optimis&#xE9;s antisens contraignantes, et les conditions d&#xE9;finies permettant la discrimination simple d&#xE9;calage de nucl&#xE9;otides, et a utilis&#xE9; un sch&#xE9;ma d&#x26;#39;int&#xE9;gration hybride r&#xE9;sonateur, qui combine des &#xE9;l&#xE9;ments de haut en bas de fabrication avec les forces de bottom-up de fabrication, avec en vue de permettre la d&#xE9;tection multiplex&#xE9;s. De masse li&#xE9; calcul&#xE9;e &#xE0; partir de d&#xE9;calages de fr&#xE9;quence de masse correspond estim&#xE9; par comptage des nanoparticules d&#x26;#39;or. Cela repr&#xE9;sente la premi&#xE8;re d&#xE9;monstration de l&#x26;#39;utilisation de ces nanor&#xE9;sonateurs, qui montrent &#xE0; la fois promesse de la sp&#xE9;cificit&#xE9; et une sensibilit&#xE9; excellentes quantitative.

Nanor&#xE9;sonateur Chip une strat&#xE9;gie ax&#xE9;e sur capteur pour la d&#xE9;tection de l&#x26;#39;ARN des cellules tumorales circulantes: r&#xE9;ponse &#xE0; l&#x26;#39;aide d&#x26;#39;un marqueur PCA3 Comme le cancer de la prostate

Es gibt weit verbreitete Interesse an zirkulierender Tumorzellen (CTCs) im Blut. Direkter Nachweis von CTCs (oft &lt; 1/mL) wird durch eine Reihe von Faktoren, aber die Pr&auml;senz von &sim;10(3) auf 10 4 Kopien der Ziel-RNA pro CTC, gepaart mit einfachen Bereicherungen erschwert, k&ouml;nnen Nachweisverm&ouml;gen erheblich erh&ouml;hen. In dieser Studie haben wir Resonanz Frequenz Verschiebungen induziert durch Masse-Verst&auml;rkung gold-Nanopartikeln verwendet, eine Hybridisierung-Sandwich an funktionalisierten Nanowires gebunden zu erkennen. Wir ausgew&auml;hlte PCA3 RNA als Marker f&uuml;r Prostatakrebs, optimiert antisense Bindungsstellen, und erm&ouml;glicht, dass Einzel-Nukleotid-Konflikt Diskriminierung definiert und verwendet eine Hybrid Resonator Integration-Regelung, die Elemente der Fabrikation von oben nach unten mit St&auml;rken der Bottom-up-Fabrikation, um zu aktivieren, die Multiplex-Sensorik kombiniert. Gebundene Masse berechnet von der Frequenz verschiebt &uuml;bereinstimmenden Masse durch z&auml;hlen der gold-Nanopartikel gesch&auml;tzt. Dies stellt die erste Demonstration der Verwendung von solchen Nanoresonators, die Versprechen der ausgezeichneten Spezifit&auml;t und quantitative Empfindlichkeit zeigen.

Nanoresonator Chip-basierten RNA-Sensor-Strategie f&uuml;r den Nachweis von zirkulierenden Tumorzellen: Reaktion mit PCA3 als ein Prostatakrebs-Marker.

Non c&#39;&egrave; interesse diffuso in circolazione le cellule tumorali (CTCs) nel sangue. Diretta rilevazione del CTCs (spesso &lt; 1/mL) &egrave; complicata da un certo numero di fattori, ma la presenza di &sim;10(3) recano copie di RNA bersaglio per CTC, accoppiato con arricchimenti semplici, pu&ograve; aumentare notevolmente la capacit&agrave; di rilevazione. In questo studio abbiamo utilizzato turni di frequenza di risonanza indotti dalla massa-amplificando le nanoparticelle d&#39;oro per rilevare un panino di ibridazione associato a nanofili funzionalizzate. Abbiamo selezionato PCA3 RNA come un marcatore per il tumore prostatico, ottimizzato i siti di legame antisenso e definite condizioni permettendo la discriminazione di mancata corrispondenza di singolo nucleotide e utilizzato uno schema di integrazione risonatore ibrido, che combina elementi di fabbricazione di top-down con punti di forza di fabbricazione bottom-up, al fine di abilitare multiplexed sensing. Associato massa calcolata dalla frequenza spostamenti abbinato massa stimata contando le nanoparticelle d&#39;oro. Questo rappresenta la prima dimostrazione di utilizzo di tali nanoresonators, che mostrano la promessa di eccellente specificit&agrave; e sensibilit&agrave; quantitativa.

Nanoresonator basata su chip RNA sensore strategia per la rilevazione di cellule tumorali circolanti: risposta utilizzando PCA3 come marcatore cancro alla prostata.

&#x8840;&#x6DB2;&#x4E2D;&#x306E;&#x816B;&#x760D;&#x7D30;&#x80DE;&#xFF08;CTC&#x306E;&#xFF09;&#x5FAA;&#x74B0;&#x306E;&#x5E83;&#x7BC4;&#x306A;&#x95A2;&#x5FC3;&#x304C;&#x9AD8;&#x307E;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002; CTC&#x306E;&#x76F4;&#x63A5;&#x691C;&#x51FA;&#xFF08;&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x5834;&#x5408;&#x3001;&#x26;lt;1/mL&#xFF09;&#x306F;&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x8981;&#x56E0;&#x304C;&#x8907;&#x96D1;&#x3067;&#x3059;&#x304C;&#x3001;&#x301C;10&#xFF08;3&#xFF09;&#x301C;10&#xFF08;4&#xFF09;CTC&#x3042;&#x305F;&#x308A;&#x306E;&#x6A19;&#x7684;RNA&#x306E;&#x30B3;&#x30D4;&#x30FC;&#x306E;&#x5B58;&#x5728;&#x306F;&#x3001;&#x5358;&#x7D14;&#x306A;&#x6FC3;&#x7E2E;&#x3068;&#x7D50;&#x5408;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3001;&#x975E;&#x5E38;&#x306B;&#x691C;&#x51FA;&#x80FD;&#x529B;&#x3092;&#x5411;&#x4E0A;&#x3055;&#x305B;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x5B98;&#x80FD;&#x6027;&#x30CA;&#x30CE;&#x30EF;&#x30A4;&#x30E4;&#x30FC;&#x306B;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30CF;&#x30A4;&#x30D6;&#x30EA;&#x30C0;&#x30A4;&#x30BC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x30B5;&#x30F3;&#x30C9;&#x30A4;&#x30C3;&#x30C1;&#x3092;&#x691C;&#x51FA;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5927;&#x91CF;&#x5897;&#x5E45;&#x91D1;&#x30CA;&#x30CE;&#x7C92;&#x5B50;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x5171;&#x632F;&#x5468;&#x6CE2;&#x6570;&#x30B7;&#x30D5;&#x30C8;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x79C1;&#x305F;&#x3061;&#x306F;&#x3001;&#x4E00;&#x5869;&#x57FA;&#x30DF;&#x30B9;&#x30DE;&#x30C3;&#x30C1;&#x306E;&#x8B58;&#x5225;&#x3092;&#x53EF;&#x80FD;&#x306B;&#x3059;&#x308B;&#x524D;&#x7ACB;&#x817A;&#x764C;&#x3001;&#x6700;&#x9069;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30A2;&#x30F3;&#x30C1;&#x30BB;&#x30F3;&#x30B9;&#x7D50;&#x5408;&#x90E8;&#x4F4D;&#x3068;&#x5B9A;&#x7FA9;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x6761;&#x4EF6;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x30DE;&#x30FC;&#x30AB;&#x30FC;&#x3068;&#x3057;&#x3066;PCA3 RNA&#x3092;&#x9078;&#x629E;&#x3057;&#x3001;&#x30DC;&#x30C8;&#x30E0;&#x30A2;&#x30C3;&#x30D7;&#x88FD;&#x9020;&#x306E;&#x5F37;&#x307F;&#x3092;&#x30C8;&#x30C3;&#x30D7;&#x30C0;&#x30A6;&#x30F3;&#x88FD;&#x9020;&#x306E;&#x8981;&#x7D20;&#x3092;&#x7D44;&#x307F;&#x5408;&#x308F;&#x305B;&#x305F;&#x30CF;&#x30A4;&#x30D6;&#x30EA;&#x30C3;&#x30C9;&#x5171;&#x632F;&#x5668;&#x306E;&#x7D71;&#x5408;&#x65B9;&#x5F0F;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x591A;&#x91CD;&#x691C;&#x51FA;&#x3092;&#x6709;&#x52B9;&#x306B;&#x3059;&#x308B;&#x30D3;&#x30E5;&#x30FC;&#x3002;&#x5468;&#x6CE2;&#x6570;&#x304B;&#x3089;&#x8A08;&#x7B97;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x8CEA;&#x91CF;&#x306F;&#x3001;&#x91D1;&#x30CA;&#x30CE;&#x7C92;&#x5B50;&#x3092;&#x6570;&#x3048;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x63A8;&#x5B9A;&#x30DE;&#x30C3;&#x30C1;&#x5927;&#x91CF;&#x306B;&#x30B7;&#x30D5;&#x30C8;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x306F;&#x3001;&#x512A;&#x308C;&#x305F;&#x7279;&#x7570;&#x6027;&#x3068;&#x5B9A;&#x91CF;&#x611F;&#x5EA6;&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x306E;&#x7D04;&#x675F;&#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x3088;&#x3046;&#x306A;nanoresonators&#x306E;&#x4F7F;&#x7528;&#x306E;&#x6700;&#x521D;&#x306E;&#x30C7;&#x30E2;&#x30F3;&#x30B9;&#x30C8;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3092;&#x8868;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x5FAA;&#x74B0;&#x816B;&#x760D;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x691C;&#x51FA;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;Nanoresonator&#x30C1;&#x30C3;&#x30D7;&#x30D9;&#x30FC;&#x30B9;&#x306E;RNA&#x30BB;&#x30F3;&#x30B5;&#x30FC;&#x306E;&#x6226;&#x7565;&#xFF1A;&#x524D;&#x7ACB;&#x817A;&#x304C;&#x3093;&#x306E;&#x30DE;&#x30FC;&#x30AB;&#x30FC;&#x3068;&#x3057;&#x3066;PCA3&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x305F;&#x30EC;&#x30B9;&#x30DD;&#x30F3;&#x30B9;

&#xC885;&#xC591; &#xC138;&#xD3EC; (CTCs) &#xD608;&#xC561; &#xC21C;&#xD658;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xAD11;&#xBC94;&#xC704; &#xD55C; &#xAD00;&#xC2EC;&#xC774;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. CTCs &#xD0D0;&#xC9C0;&#xB97C; &#xC9C1;&#xC811; (&#xC885;&#xC885; &lt; 1/mL) CTC, &#xAC04;&#xB2E8;&#xD55C; enrichments&#xACFC; &#xD568;&#xAED8; &#xB2F9; &#xB300;&#xC0C1; RNA&#xC758; 10(4) &#xBCF5;&#xC0AC;&#xBCF8;&#xC744; &sim;10(3)&#xC758; &#xC874;&#xC7AC; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xC694;&#xC778;&#xC758; &#xC22B;&#xC790;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; &#xB370;, &#xD0D0;&#xC9C0; &#xB2A5;&#xB825;&#xC744; &#xD06C;&#xAC8C; &#xC99D;&#xAC00; &#xC2DC;&#xD0AC; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0;&#xC11C;&#xB294; &#xACF5;&#xC5C5;&#xD654; &#xC815;&#xC5D0; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xB41C; &#xAD50; &#xC7A1; &#xC0CC;&#xB4DC;&#xC704;&#xCE58; &#xAC10;&#xC9C0; &#xD558; &#xACE8;&#xB4DC; &#xB098;&#xB178; &#xC785;&#xC790; &#xB300;&#xB7C9; &#xC99D;&#xD3ED;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC720;&#xB3C4; &#xB41C; &#xACF5;&#xBA85; &#xC8FC;&#xD30C;&#xC218; &#xBCC0;&#xD654;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC804;&#xB9BD;&#xC120; &#xC554;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD45C;&#xC2DD; &#xC13C;&#xC2A4; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;&#xC5D0; &#xCD5C;&#xC801;&#xD654; &#xB41C; &#xB2E8;&#xC77C; &#xB274;&#xD074;&#xB808;&#xC624;&#xD2F0;&#xB4DC; &#xBD88;&#xC77C;&#xCE58; &#xCC28;&#xBCC4;&#xC744; &#xD5C8;&#xC6A9; &#xD558;&#xB294; &#xC870;&#xAC74;&#xC744; &#xC815;&#xC758; &#xD558; &#xACE0; &#xC0C1;&#xD5A5;&#xC2DD; &#xC81C;&#xC870;, &#xB2E4;&#xC911;&#xD654; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xAC10;&#xC9C0; &#xD558;&#xB294; &#xAD00;&#xC810;&#xC758; &#xAC15;&#xC810;&#xACFC; &#xD1B1; &#xB2E4;&#xC6B4; &#xC81C;&#xC870;&#xC758; &#xC694;&#xC18C;&#xB97C; &#xACB0;&#xD569; &#xD558;&#xC774;&#xBE0C;&#xB9AC;&#xB4DC; &#xACF5; &#xC9C4; &#xAE30; &#xD1B5;&#xD569; &#xCCB4;&#xACC4;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558;&#xB294; PCA3 RNA&#xB97C; &#xC120;&#xD0DD;. &#xC8FC;&#xD30C;&#xC218;&#xC5D0;&#xC11C; &#xACC4;&#xC0B0; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xB41C; &#xB300;&#xB7C9; &#xAE08; &#xB098;&#xB178; &#xC785;&#xC790;&#xB97C; &#xACC4;&#xC0B0;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xCD94;&#xC815; &#xC77C;&#xCE58; &#xB41C; &#xC9C8;&#xB7C9;&#xC744; &#xC774;&#xB3D9; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xC6B0;&#xC218;&#xD55C; &#xD2B9;&#xC774;&#xC131; &#xBC0F; &#xC591;&#xC801; &#xAC10;&#xB3C4;&#xC758; &#xC57D;&#xC18D;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xAC19;&#xC740; nanoresonators&#xC758; &#xC0AC;&#xC6A9;&#xC758; &#xCCAB; &#xBC88;&#xC9F8; &#xB370;&#xBAA8;&#xB97C; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0C5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Nanoresonator RNA &#xCE69; &#xAE30;&#xBC18; &#xC13C;&#xC11C; &#xC21C;&#xD658; &#xC885;&#xC591; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xAC80;&#xCD9C;&#xC744; &#xC704;&#xD55C; &#xC804;&#xB7B5;: &#xC804;&#xB9BD;&#xC120; &#xC554; &#xD45C;&#xC2DD;&#xC73C;&#xB85C; pca3&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xC751;&#xB2F5; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Hay un inter&#xE9;s generalizado en las c&#xE9;lulas tumorales circulantes (CTC) en sangre. La detecci&#xF3;n directa de CTC (a menudo &#x26;lt;1/ml) se complica por una serie de factores, pero la presencia de ~ 10 (3) a 10 (4) copias de ARN diana por CTC, junto con enriquecimientos simples, puede aumentar la capacidad de detecci&#xF3;n . En este estudio se utiliz&#xF3; la frecuencia de resonancia cambia inducida por nanopart&#xED;culas de oro en masa de amplificaci&#xF3;n para la detecci&#xF3;n de un s&#xE1;ndwich de hibridaci&#xF3;n obligado a nanocables funcionalizados. Hemos seleccionado PCA3 ARN como un marcador para el c&#xE1;ncer de pr&#xF3;stata, optimizados antisentido sitios de uni&#xF3;n, y las condiciones definidos que permitan la discriminaci&#xF3;n &#xFA;nico desajuste de nucle&#xF3;tidos, y se utiliza un esquema h&#xED;brido de integraci&#xF3;n resonador, que combina elementos de arriba hacia abajo de la fabricaci&#xF3;n con puntos fuertes de abajo hacia arriba de fabricaci&#xF3;n, con un campo de visi&#xF3;n para permitir la detecci&#xF3;n multiplexados. Masa ligada calculado a partir de la frecuencia de cambios de la masa corresponde estima contando las nanopart&#xED;culas de oro. Esto representa la primera demostraci&#xF3;n de uso de tales nanoresonadores, que muestran tanto promesa de excelente especificidad y sensibilidad cuantitativa.

Nanoresonator chip basado en ARN Estrategia de sensor para la detecci&#xF3;n de c&#xE9;lulas tumorales circulantes: Respuesta de Uso PCA3 como un marcador del c&#xE1;ncer de pr&#xF3;stata

Weihua Pan

Department of Pathology,
Hershey Medical Center,
Department of Pathology, Hershey Medical Center

Pennsylvania State University

Primer-Free Aptamer Selection Using A Random DNA Library

Weihua Pan

.css-o250i3{font-size:18px;font-family:Open Sans,sans-serif;line-height:21.6px;}Department of Pathology,Hershey Medical Center,Department of Pathology, Hershey Medical Center

Pennsylvania State University

Primer-Free Aptamer Selection Using A Random DNA Library

Department of Pathology,
Hershey Medical Center,
Department of Pathology, Hershey Medical Center