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The Complete and Updated "Rotifer Polyculture Method" for Rearing First Feeding Zebrafish

The zebrafish (Danio rerio) is a model organism of increasing importance in many fields of science.  One of the most demanding technical aspects of ...

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&#x7EFF;&#x8272;&#x8367;&#x5149;&#x86CB;&#x767D; (GFP) &#x5BB6;&#x5EAD;&#x6210;&#x5458;&#x5171;&#x4EAB;&#x5E8F;&#x5217;&#x76F8;&#x4F3C;&#x6027;&#x548C; 11 &#x7EDE; beta &#x6876;&#x6298;&#x53E0;&#x3002;&#x7531;&#x80BD;&#x94FE;&#x672C;&#x8EAB;&#xFF0C;&#x800C;&#x4E0D;&#x6309;&#x8981;&#x6C42;&#x7684;&#x5185;&#x5728;&#x5C5E;&#x6027;&#x542F;&#x7528;&#x8367;&#x5149;&#x6216;&#x9C9C;&#x4EAE;&#x7684;&#x989C;&#x8272;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x4E2A;&#x5BB6;&#x65CF;&#x7684;&#x8BB8;&#x591A;&#x6210;&#x5458;&#x4E2D;&#x89C2;&#x5BDF;&#x5230;&#x3002;&#x8367;&#x5149;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x6C28;&#x57FA;&#x9178;&#x5E8F;&#x5217;&#x53EF;&#x4EE5;&#x901A;&#x8FC7;&#x57FA;&#x56E0;&#x5DE5;&#x7A0B;&#x4EA7;&#x751F;&#x53D8;&#x79CD;&#x5177;&#x6709;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x5149;&#x8C31;&#x7279;&#x6027;&#xFF0C;&#x9002;&#x5408;&#x76F4;&#x63A5;&#x53EF;&#x89C6;&#x5316;&#x7684;&#x5206;&#x5B50;&#x548C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x8FDB;&#x884C;&#x66F4;&#x6539;&#x3002;&#x81EA;&#x7136;&#x53D1;&#x751F;&#x7684;&#x7EFF;&#x8272;&#x8367;&#x5149;&#x86CB;&#x767D;&#x6837;&#x86CB;&#x767D;&#x5305;&#x62EC;&#x8367;&#x5149;&#x86CB;&#x767D;&#x4ECE; Hydrozoa &#x548C;&#x73CA;&#x745A;&#x866B;&#x7C7B;&#x3001; &#x523A;&#x80DE;&#x52A8;&#x7269;&#x548C;&#x6861;&#x8DB3;&#x7C7B;&#x7684; Pontellidae &#x5BB6;&#x5EAD;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x53CA;&#x975E;&#x8367;&#x5149;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x73CA;&#x745A;&#x866B;&#x3002;&#x6700;&#x8FD1;&#xFF0C;&#x4ECE; Pontellidae&#xFF0C;&#x6D89;&#x53CA;&#x5230; GFP &#x8367;&#x5149;&#x7EFF;&#x8272;&#x8367;&#x5149;&#x86CB;&#x767D;&#x6837;&#x86CB;&#x767D; AmphiGFP&#xFF0C;&#x7F16;&#x7801; mRNA &#x5DF2;&#x5206;&#x79BB;&#x51FA;&#x6587;&#x660C;&#x9C7C;&#x6587;&#x660C;&#x9C7C; floridae&#xFF0C;cephalochordate&#xFF0C;Deheyn &#x4E2D;&#x5357;&#x5DE5;&#x4E1A;&#x5927;&#x5B66;&#x3001; &#x8D44;&#x52A9;&#x5F3A;&#x5EA6;&#x516C;&#x725B; 2007&#x5E74; 213:95&#xFF09;&#x3002;

&#x7EFF;&#x8272;&#x8367;&#x5149;&#x86CB;&#x767D;&#x6837;&#x86CB;&#x767D;&#x4E0D;&#x540C;&#x5149;&#x8C31;&#x7279;&#x6027;&#x5728;&#x6587;&#x660C;&#x9C7C;&#x6587;&#x660C;&#x9C7C; floridae &#x7684;&#x4E00;&#x4E2A;&#x5BB6;&#x5EAD;&#x3002;

Members of the green fluorescent protein (GFP) family share sequence similarity and the 11-stranded beta-barrel fold. Fluorescence or bright coloration, observed in many members of this family, is enabled by the intrinsic properties of the polypeptide chain itself, without the requirement for cofactors. Amino acid sequence of fluorescent proteins can be altered by genetic engineering to produce variants with different spectral properties, suitable for direct visualization of molecular and cellular processes. Naturally occurring GFP-like proteins include fluorescent proteins from cnidarians of the Hydrozoa and Anthozoa classes, and from copepods of the Pontellidae family, as well as non-fluorescent proteins from Anthozoa. Recently, an mRNA encoding a fluorescent GFP-like protein AmphiGFP, related to GFP from Pontellidae, has been isolated from the lancelet Branchiostoma floridae, a cephalochordate (Deheyn et al., Biol Bull, 2007 213:95).

A family of GFP-like proteins with different spectral properties in lancelet Branchiostoma floridae.

Les membres de la prot&#xE9;ine verte (GFP) fluorescente similarit&#xE9; de s&#xE9;quence de la famille de partager et de la 11-b&#xEA;ta-brin baril fois. Coloration par fluorescence ou brillant, observ&#xE9;e dans de nombreux membres de cette famille, est activ&#xE9; par les propri&#xE9;t&#xE9;s intrins&#xE8;ques de la cha&#xEE;ne polypeptidique elle-m&#xEA;me, sans l&#x26;#39;exigence de cofacteurs. S&#xE9;quence d&#x26;#39;acides amin&#xE9;s des prot&#xE9;ines fluorescentes peut &#xEA;tre modifi&#xE9;e par g&#xE9;nie g&#xE9;n&#xE9;tique pour produire des variantes ayant des propri&#xE9;t&#xE9;s spectrales diff&#xE9;rentes, adapt&#xE9;es pour la visualisation directe des processus mol&#xE9;culaires et cellulaires. Naturelle GFP de type prot&#xE9;ines comprennent des prot&#xE9;ines fluorescentes de cnidaires du Hydrozoaires et les classes Anthozoaires, et de cop&#xE9;podes de la famille Pontellidae, ainsi que des prot&#xE9;ines non fluorescents provenant Anthozoaires. R&#xE9;cemment, une ARNm codant pour une prot&#xE9;ine fluorescente AmphiGFP GFP de type, li&#xE9; &#xE0; la GFP de Pontellidae, a &#xE9;t&#xE9; isol&#xE9; &#xE0; partir du Branchiostoma branchiostome floridae, une c&#xE9;phalochord&#xE9; (Deheyn et al., Biol Bull, 2007 213:95).

Une famille de prot&#xE9;ines de type GFP avec des propri&#xE9;t&#xE9;s spectrales diff&#xE9;rentes &#xE0; branchiostome Branchiostoma floridae

Gr&uuml;n fluoreszierendes Protein (GFP) Familienmitglieder Teilen Sequenz &Auml;hnlichkeit und die 11-angeschwemmte Beta-Fass-Klappe. Fluoreszenz oder helle F&auml;rbung, beobachtet in viele Mitglieder dieser Familie, ist von der inh&auml;renten Eigenschaften der Polypeptid-Kette selbst, ohne dass Kofaktoren aktiviert. Aminos&auml;uresequenz fluoreszierende Proteine kann durch Gentechnik Varianten mit unterschiedlichen spektralen Eigenschaften, geeignet f&uuml;r direkte Visualisierung der molekularen und zellul&auml;ren Prozesse produzieren ge&auml;ndert werden. Nat&uuml;rlich auch vorkommende GFP-&auml;hnliche Proteine fluoreszierende Proteine aus Nesseltieren der Hydrozoen und Anthozoa Klassen und Copepoden aus der Familie der Pontellidae, als auch nicht-fluoreszierende Proteine von Anthozoa. Eine mRNA Kodierung ein fluoreszierendes Protein GFP-wie AmphiGFP, mit Bezug zu GFP aus Pontellidae, seit kurzem von der Lanzettfischchen Branchiostoma Floridae, ein Cephalochordate (Deheyn Et Al., Biol Bull, 2007 213:95) isoliert.

Eine Familie von GFP-&auml;hnliche Proteine mit unterschiedlichen spektralen Eigenschaften in Lanzettfischchen Branchiostoma Floridae.

Membri della famiglia della proteina fluorescente verde (GFP) condividono la somiglianza di sequenza e la piega del beta-barilotto 11-stranded. Fluorescenza o colorazione brillante, osservato in molti membri di questa famiglia, &egrave; abilitato per le propriet&agrave; intrinseche della catena del polipeptide stessa, senza il requisito di cofattori. Sequenza dell&#39;amminoacido delle proteine fluorescenti pu&ograve; essere modificato dall&#39;ingegneria genetica per produrre varianti con differenti propriet&agrave; spettrali, adatto per la visualizzazione diretta dei processi molecolari e cellulari. Naturalmente avvenimento GFP-come proteine includono le proteine fluorescenti da cnidari delle classi Hydrozoa e Anthozoa e da copepodi della famiglia Pontellidae, cos&igrave; come le proteine non fluorescenti da Anthozoa. Recentemente, un mRNA che codifica una proteina fluorescente GFP-come AmphiGFP, correlata a GFP da Pontellidae, &egrave; stato isolato dall&#39;anfiosso Branchiostoma floridae, un cephalochordate (Deheyn et al., Biol Bull, 213:95 2007).

Una famiglia di proteine GFP-come con diverse propriet&agrave; spettrali in anfiosso Branchiostoma floridae.

&#x7DD1;&#x8272;&#x86CD;&#x5149;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#xFF08;GFP&#xFF09;&#x5BB6;&#x65CF;&#x306E;&#x5171;&#x6709;&#x914D;&#x5217;&#x306E;&#x985E;&#x4F3C;&#x6027;&#x3068;11&#x672C;&#x9396;&#x3B2;-&#x30D0;&#x30EC;&#x30EB;&#x500D;&#x306E;&#x30E1;&#x30F3;&#x30D0;&#x30FC;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x5BB6;&#x65CF;&#x306E;&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x30E1;&#x30F3;&#x30D0;&#x30FC;&#x3067;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x86CD;&#x5149;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x660E;&#x308B;&#x3044;&#x914D;&#x8272;&#x306F;&#x3001;&#x88DC;&#x56E0;&#x5B50;&#x3092;&#x5FC5;&#x8981;&#x3068;&#x305B;&#x305A;&#x306B;&#x3001;&#x30DD;&#x30EA;&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C9;&#x9396;&#x81EA;&#x4F53;&#x306B;&#x56FA;&#x6709;&#x306E;&#x7279;&#x6027;&#x304C;&#x6709;&#x52B9;&#x306B;&#x306A;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x86CD;&#x5149;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x30A2;&#x30DF;&#x30CE;&#x9178;&#x914D;&#x5217;&#x306F;&#x3001;&#x5206;&#x5B50;&#x3084;&#x7D30;&#x80DE;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x306E;&#x76F4;&#x63A5;&#x53EF;&#x8996;&#x5316;&#x306B;&#x9069;&#x3057;&#x305F;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x5206;&#x5149;&#x7279;&#x6027;&#x3092;&#x6301;&#x3064;&#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x3092;&#x751F;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x5DE5;&#x5B66;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5909;&#x66F4;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5929;&#x7136;&#x306E;GFP&#x69D8;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306F;&#x3001;&#x30D2;&#x30C9;&#x30ED;&#x866B;&#x3068;&#x82B1;&#x866B;&#x7DB1;&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9;&#x306E;&#x523A;&#x80DE;&#x52D5;&#x7269;&#x304B;&#x3089;&#x3001;&#x3068;Pontellidae&#x30D5;&#x30A1;&#x30DF;&#x30EA;&#x30FC;&#x306E;&#x30AB;&#x30A4;&#x30A2;&#x30B7;&#x985E;&#x3068;&#x540C;&#x69D8;&#x306B;&#x3001;&#x975E;&#x86CD;&#x5149;&#x6027;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x304B;&#x3089;&#x82B1;&#x866B;&#x7DB1;&#x304B;&#x3089;&#x86CD;&#x5149;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x304C;&#x542B;&#x307E;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6700;&#x8FD1;&#x3001;Pontellidae&#x304B;&#x3089;GFP&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x3057;&#x305F;&#x86CD;&#x5149;GFP&#x69D8;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;AmphiGFP&#x3092;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C9;&#x3059;&#x308B;mRNA&#x306F;&#x3001;&#x30CA;&#x30E1;&#x30AF;&#x30B8;&#x30A6;&#x30AA;Branchiostoma floridae&#x3001;&#x982D;&#x7D22;&#x985E;&#x306E;&#x52D5;&#x7269;&#xFF08;Deheyn&#x3089;&#x3001;Biol&#x30EC;&#x30C3;&#x30C9;&#x30D6;&#x30EB;&#x3001;2007 213:95&#xFF09;&#x304B;&#x3089;&#x5358;&#x96E2;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;

&#x30CA;&#x30E1;&#x30AF;&#x30B8;&#x30A6;&#x30AA;Branchiostoma Floridae&#x5185;&#x306E;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x30B9;&#x30DA;&#x30AF;&#x30C8;&#x30EB;&#x7279;&#x6027;&#x3092;&#x6301;&#x3064;GFP&#x69D8;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x30D5;&#x30A1;&#x30DF;&#x30EA;&#x30FC;

&#xB179;&#xC0C9; &#xD615;&#xAD11; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; (GFP) &#xAC00;&#xC871;&#xC758; &#xACF5;&#xC720; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4; &#xC720;&#xC0AC;&#xC131; &#xBC0F; 11 &#xC88C;&#xCD08; &#xBCA0;&#xD0C0; &#xBC30;&#xB7F4; &#xC811;&#xAE30;. &#xD615;&#xAD11; &#xB610;&#xB294;&#xC774; &#xAC00;&#xC871;&#xC758; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xAD6C;&#xC131;&#xC6D0;&#xC5D0; &#xBC1D;&#xC740; &#xCC44;&#xC0C9; &#xACF5;&#xB3D9; &#xC778;&#xC790;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC694;&#xAD6C; &#xC0AC;&#xD56D; &#xC5C6;&#xC774; polypeptide &#xC0AC;&#xC2AC; &#xC790;&#xCCB4;&#xC758; &#xBCF8;&#xC9C8;&#xC801;&#xC778; &#xC18D;&#xC131;&#xC73C;&#xB85C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD615;&#xAD11; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xC544;&#xBBF8;&#xB178;&#xC0B0; &#xC11C; &#xC5F4;&#xC740; &#xBD84;&#xC790; &#xBC0F; &#xC138;&#xD3EC; &#xD504;&#xB85C;&#xC138;&#xC2A4;&#xC758; &#xC9C1;&#xC811; &#xC2DC;&#xAC01;&#xD654;&#xC5D0; &#xC801;&#xD569; &#xD55C; &#xB2E4;&#xB978; &#xC2A4;&#xD399;&#xD2B8;&#xB7FC; &#xD2B9;&#xC131;&#xC744; &#xAC00;&#xC9C4; &#xBCC0;&#xC885; &#xC0DD;&#xC0B0; &#xC720;&#xC804; &#xACF5;&#xD559;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xBCC0;&#xACBD; &#xB420; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC790;&#xC5F0;&#xC2A4;&#xB7FD; &#xAC8C; &#xBC1C;&#xC0DD; GFP &#xAC19;&#xC740; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC0B0;&#xD638;&#xCDA9;&#xAC15;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBE44; &#xD615;&#xAD11; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC73C;&#xB85C; &#xC11C; &#xD615;&#xAD11; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xD788;&#xB4DC;&#xB77C;&#xCDA9;&#xAC15; &#xBC0F; &#xC0B0;&#xD638;&#xCDA9;&#xAC15; &#xD074;&#xB798;&#xC2A4;&#xC758; cnidarians &#xBC0F; Pontellidae &#xAC00;&#xC871;&#xC758; copepods&#xC5D0; &#xD3EC;&#xD568; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xCD5C;&#xADFC;, &#xD615;&#xAD11; GFP &#xAC19;&#xC740; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; AmphiGFP, Pontellidae&#xC5D0;&#xC11C; GFP &#xAD00;&#xB828; &#xC778;&#xCF54;&#xB529; &#xD558;&#xB294; mRNA (Deheyn &#xADF8; &#xC678; &#xC5EC;&#xB7EC;&#xBD84;, Biol &#xD669;&#xC18C;, 2007 213:95) cephalochordate lancelet Branchiostoma floridae &#xBD84;&#xB9AC; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xB2E4;&#xB978; &#xC2A4;&#xD399;&#xD2B8;&#xB7FC; &#xC18D;&#xC131; lancelet Branchiostoma floridae GFP &#xAC19;&#xC740; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xAC00;&#xC871;.

Los miembros de la prote&#xED;na verde fluorescente (GFP) de la familia similitud de secuencia de acciones y la tapa 11 de hebra beta-barril. Coloraci&#xF3;n o de fluorescencia brillante, observada en muchos miembros de esta familia, est&#xE1; habilitada por las propiedades intr&#xED;nsecas de la cadena polipept&#xED;dica s&#xED; mismo, sin el requerimiento de cofactores. La secuencia de amino&#xE1;cidos de las prote&#xED;nas fluorescentes puede ser alterado por ingenier&#xED;a gen&#xE9;tica para producir variantes con diferentes propiedades espectrales, adecuadas para la visualizaci&#xF3;n directa de los procesos celulares y moleculares. Origen natural como GFP-prote&#xED;nas incluyen prote&#xED;nas fluorescentes de cnidarios de la Hydrozoa y clases Anthozoa, y de cop&#xE9;podos de la familia Pontellidae, as&#xED; como no fluorescentes prote&#xED;nas de Anthozoa. Recientemente, un ARNm que codifica un fluorescente GFP como AmphiGFP prote&#xED;na, relacionada con GFP de Pontellidae, se ha aislado de la Branchiostoma anfioxo floridae, un cephalochordate (Deheyn et al., Biol. Bull, 2007 213:95).

Una familia de las buenas pr&#xE1;cticas agrarias, como las prote&#xED;nas con diferentes propiedades espectrales de anfioxo Branchiostoma floridae

The saltwater rotifer, Brachionus plicatilis, is widely used in the aquaculture industry as a prey item for first-feeding fishes due to its ease of culture, small size, rapid reproductive rate, and amenability to enrichment with nutrients. Despite the distinct advantages of this approach, rotifers have only been sporadically utilized for rearing larval zebrafish, primarily because of the common misconception that maintaining cultures of rotifers is difficult and excessively time-consuming. Here we present simple methods for maintaining continuous cultures of rotifers capable of supporting even the very largest zebrafish aquaculture facility, with minimal investments in materials, time, labor, and space. Examples of the methods' application in one large, existing facility is provided, and troubleshooting of common problems is discussed.

Erik Sanders

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The Complete and Updated "Rotifer Polyculture Method" for Rearing First Feeding Zebrafish