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Neuronal Cell Cultures from Aplysia for High-Resolution Imaging of Growth Cones

Neuronal growth cones are the highly motile structures at the tip of axons that can detect guidance cues in the environment and transduce this information ...

Purdue University

&#x80BE;&#x4E0A;&#x817A;&#x7D20;&#x80FD;&#x795E;&#x7ECF;&#x652F;&#x914D;&#x548C; (&#x6216;) &#x5FAA;&#x73AF;&#x513F;&#x8336;&#x915A;&#x80FA;&#x5BF9;&#x809D;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x5316;&#x7EC6;&#x80DE;&#x529F;&#x80FD;&#x7684;&#x5F71;&#x54CD;&#x4E86;&#x89E3;&#x751A;&#x5C11;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x76EE;&#x7684;&#x662F;&#x8C03;&#x67E5;&#x5F71;&#x54CD;&#x7684;&#x53BB;&#x7532;&#x80BE;&#x4E0A;&#x817A;&#x7D20;&#x80FD;&#x62EE;&#x6297;&#x5242;&#x5BF9;&#x56DB;&#x6C2F;&#x5316;&#x78B3; (CCl4)-&#x81F4;&#x5927;&#x9F20;&#x809D;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x5316;&#x3002;&#x4E24;&#x4E2A;&#x661F;&#x671F;&#x52A0;&#x5165; ccl4 &#x901F;&#x5EA6;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x5927;&#x7EA6;&#x4E94;&#x6298;&#x589E;&#x52A0;&#x5730;&#x533A;&#x7684;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x5316;&#x5BF9;&#x7167;&#x7EC4;&#x8FDB;&#x884C;&#x6BD4;&#x8F83;&#x3002;6-&#x7F9F;&#x57FA;&#x591A;&#x5DF4;&#x80FA; (&#x7F9F;&#x57FA;)&#xFF0C;&#x4E00;&#x79CD;&#x6BD2;&#x7D20;&#xFF0C;&#x6467;&#x6BC1;&#x53BB;&#x7532;&#x80BE;&#x4E0A;&#x817A;&#x7D20;&#x80FD;&#x7EA4;&#x7EF4;&#xFF0C;&#x589E;&#x52A0;&#x4E0B;&#x8DCC; 60%&#x7684;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x5316;&#x3002;6 &#x661F;&#x671F;&#x540E;&#x52A0;&#x5165; ccl4 &#x901F;&#x5EA6;&#xFF0C;CCl4 &#x6CBB;&#x7597;&#x52A8;&#x7269;&#x7EA6;&#x8FD0;&#x8F93;&#x91CF;&#x589E;&#x52A0;&#x4E0E;&#x88AB;&#x4E0B;&#x8DCC; 36%&#x7F9F;&#x57FA;&#x4E0E;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x5316;&#x7684;&#x5730;&#x533A;&#x3002;&#x5728; 2 &#x4E2A;&#x661F;&#x671F;&#xFF0C;&#x7F9F;&#x57FA;&#x5E9F;&#x9664; mRNA &#x6C34;&#x5E73;&#x7684;&#x57FA;&#x8D28;&#x91D1;&#x5C5E;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;-1 (&#x86CB;&#x767D;&#x9176;-1&#xFF09;&#xFF0C;&#x6291;&#x5236;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5916;&#x57FA;&#x8D28;&#x964D;&#x89E3;&#x5242;&#x6291;&#x5236; CCl4 &#x8BF1;&#x5BFC;&#x589E;&#x52A0;&#xFF0C;&#x5B83;&#x6781;&#x5927;&#x5730;&#x51CF;&#x5C11;&#x5728; 6 &#x4E2A;&#x661F;&#x671F;&#x3002;&#x6700;&#x540E;&#xFF0C;&#x5F53;&#x62EE;&#x6297;&#x5242; 1-&#x80BE;&#x4E0A;&#x817A;&#x7D20;&#x53D7;&#x4F53;&#xFF0C;&#x8FD8;&#x6536;&#x5230;&#x4E86; 2 &#x4E2A;&#x661F;&#x671F;&#xFF0C;&#x54CC;&#x5511;&#x55EA; CCl4 &#x5927;&#x9F20;&#x6CBB;&#x7597;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x5316;&#x88AB;&#x4E0B;&#x8DCC; 83%&#x3002;&#x6700;&#x540E;&#xFF0C;&#x53BB;&#x7532;&#x80BE;&#x4E0A;&#x817A;&#x7D20;&#x80FD;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x7684;&#x7834;&#x574F;&#x6216;&#x53BB;&#x7532;&#x80BE;&#x4E0A;&#x817A;&#x7D20;&#x80FD;&#x4FE1;&#x53F7;&#x901A;&#x8FC7; 1 &#x53D7;&#x4F53;&#x53CA;&#x5176;&#x53D7;&#x4F53;&#x7684;&#x62EE;&#x6297;&#x4F5C;&#x7528;&#x6291;&#x5236;&#x809D;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x5316;&#x7684;&#x53D1;&#x5C55;&#x3002;&#x80BE;&#x4E0A;&#x817A;&#x7D20;&#x80FD;&#x53D7;&#x4F53;&#x62EE;&#x6297;&#x5242;&#x6709;&#x975E;&#x5E38;&#x5B8C;&#x5584;&#x7684;&#x5B89;&#x5168;&#x914D;&#x7F6E;&#x6587;&#x4EF6;&#xFF0C;&#x56E0;&#x4E3A;&#x5B83;&#x4EEC;&#x663E;&#x793A;&#x4E3A;&#x6709;&#x5438;&#x5F15;&#x529B;&#x7684;&#x836F;&#x7269;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x51CF;&#x5C11;&#x809D;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x5316;&#x3002;

&#x901A;&#x8FC7;&#x53BB;&#x7532;&#x80BE;&#x4E0A;&#x817A;&#x7D20;&#x80FD;&#x62EE;&#x6297;&#x5927;&#x9F20;&#x809D;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x5316;&#x7684;&#x6291;&#x5236;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;

The effect of adrenergic innervation and/or circulating catecholamines on the function of liver fibrogenic cells is poorly understood. Our aim was to investigate the effects of noradrenergic antagonism on carbon tetrachloride (CCl4)-induced liver fibrosis in rats. Two weeks of CCl4 induced an approximately 5-fold increase in the area of fibrosis as compared with controls. The addition of 6-hydroxydopamine (OHDA), a toxin that destroys noradrenergic fibers, decreased fibrosis by 60%. After 6 weeks of CCl4, the area of fibrosis increased about 30-fold in CCl4-treated animals and was decreased by 36% with OHDA. At 2 weeks, OHDA abrogated the CCl4-induced increase in mRNA level of tissue inhibitor of matrix metalloproteinases-1 (TIMP-1), an inhibitor of extracellular matrix degradation, and it greatly reduced it at 6 weeks. Finally, when rats treated with CCl4 for 2 weeks also received prazosin, an antagonist of alpha1-adrenergic receptors, fibrosis was decreased by 83%. In conclusion, destruction of noradrenergic fibers or antagonism of noradrenergic signaling through alpha1 receptors inhibited the development of liver fibrosis. Because adrenoreceptor antagonists have a very sound safety profile, they appear as attractive drugs to reduce liver fibrogenesis.

Inhibition of rat liver fibrogenesis through noradrenergic antagonism.

L&#39;effet de l&#39;innervation adr&eacute;nergique et/ou de cat&eacute;cholamines sur la fonction des cellules du foie fibrog&egrave;nes circulantes est mal comprise. Notre objectif &eacute;tait d&#39;&eacute;tudier les effets de l&#39;antagonisme noradr&eacute;nergique sur le t&eacute;trachlorure de carbone (CCl4)-induit une fibrose du foie chez les rats. Deux semaines de CCl4 a induit une augmentation d&#39;environ 5 fois dans le domaine de la fibrose comparativement aux t&eacute;moins. L&#39;addition de 6-hydroxydopamine (OHDA), une toxine qui d&eacute;truit les fibres noradr&eacute;nergiques, diminue la fibrose de 60 %. Apr&egrave;s 6 semaines de CCl4, la zone de fibrose ont augment&eacute; environ 30 fois chez les animaux trait&eacute;s CCl4 et a diminu&eacute; de 36 % avec OHDA. Au bout de 2 semaines, OHDA abrog&eacute; l&#39;augmentation induite par le CCl4 au niveau de l&#39;ARNm de l&#39;inhibiteur tissulaire des matrix metalloproteinases-1 (TIMP-1), un inhibiteur de la d&eacute;gradation de la matrice extracellulaire, et il l&#39;a grandement r&eacute;duit &agrave; 6 semaines. Enfin, lorsque des rats trait&eacute;s avec CCl4 pour prazosine 2 semaines a &eacute;galement re&ccedil;us, un antagoniste des r&eacute;cepteurs adr&eacute;nergiques alpha1, fibrose a diminu&eacute; de 83 %. En conclusion, la destruction des fibres noradr&eacute;nergiques ou antagonisme de signalisation noradr&eacute;nergiques via les r&eacute;cepteurs alpha1 inhibe le d&eacute;veloppement de la fibrose h&eacute;patique. Antagonistes des r&eacute;cepteurs adr&eacute;nergiques ayant un profil de s&eacute;curit&eacute; tr&egrave;s solide, ils apparaissent comme drogue attrayante pour r&eacute;duire FIBROG&Eacute;N&Egrave;SE h&eacute;patique.

Inhibition de la FIBROG&Eacute;N&Egrave;SE h&eacute;patique de rat par l&#39;antagonisme noradr&eacute;nergique.

Die Hemmung der Ratte Leberfibrose durch noradrenerge Antagonismus.

L&#39;effetto di innervazione adrenergica e/o circolanti di catecolamine sulla funzione delle cellule del fegato fibrogenic mal inteso. Il nostro obiettivo era quello di indagare gli effetti di antagonismo noradrenergico su tetracloruro di carbonio (CCl4)-indotta da fibrosi epatica nel ratto. Due settimane di CCl4 indotta da un aumento di circa 5 volte nella zona di fibrosi rispetto ai controlli. L&#39;aggiunta di 6-hydroxydopamine (OHDA), una tossina che distrugge le fibre noradrenergico, diminuita fibrosi del 60%. Dopo 6 settimane di CCl4, l&#39;area di fibrosi aumentato circa 30-fold negli animali trattati con CCl4 ed &egrave; diminuita del 36% con OHDA. A 2 settimane, OHDA abrogata l&#39;aumento indotto da CCl4 mRNA livello di inibitore del tessuto della matrice metalloproteinasi-1 (TIMP-1), un inibitore della degradazione della matrice extracellulare, e &egrave; notevolmente ridotta a 6 settimane. Infine, quando ratti trattati con CCl4 per prazosina 2 settimane ha anche ricevute, un antagonista dei recettori alfa1-adrenergici, la fibrosi &egrave; diminuita del 83%. In conclusione, la distruzione delle fibre noradrenergico o antagonismo di segnalazione noradrenergico attraverso i recettori alfa1 inibito lo sviluppo di fibrosi epatica. Perch&eacute; adrenergici antagonisti hanno un profilo di sicurezza molto suono, essi appaiono come attraente farmaci per ridurre il fegato fibrogenesis.

Inibizione del fegato di ratto fibrogenesis attraverso noradrenergico antagonismo.

&#x30A2;&#x30C9;&#x30EC;&#x30CA;&#x30EA;&#x30F3;&#x4F5C;&#x52D5;&#x6027;&#x795E;&#x7D4C;&#x652F;&#x914D;&#x3068;&#x5FAA;&#x74B0;&#x30AB;&#x30C6;&#x30B3;&#x30FC;&#x30EB;&#x30A2;&#x30DF;&#x30F3;&#x809D;&#x7DDA;&#x7DAD;&#x5F62;&#x6210;&#x6027;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x4E0A;&#x306E;&#x52B9;&#x679C;&#x306F;&#x3088;&#x304F;&#x308F;&#x304B;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;&#x30CE;&#x30EB;&#x30A2;&#x30C9;&#x30EC;&#x30CA;&#x30EA;&#x30F3;&#x4F5C;&#x52D5;&#x6027;&#x306E;&#x62EE;&#x6297;&#x56DB;&#x5869;&#x5316;&#x70AD;&#x7D20; (CCl4) &#x306E;&#x52B9;&#x679C;&#x3092;&#x8ABF;&#x67FB;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x6211;&#x3005; &#x306E;&#x76EE;&#x6A19;&#x3060;&#x3063;&#x305F;-&#x8A98;&#x767A;&#x30E9;&#x30C3;&#x30C8;&#x809D;&#x7DDA;&#x7DAD;&#x5316;&#x3002;2 &#x9031;&#x9593; CCl4 &#x306E;&#x7D04; 5-fold &#x5897;&#x52A0;&#x306E;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C8;&#x30ED;&#x30FC;&#x30EB;&#x3068;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3057;&#x3066;&#x7DDA;&#x7DAD;&#x75C7;&#x306E;&#x8A98;&#x767A;&#x3002;6-&#x30D2;&#x30C9;&#x30ED;&#x30AD;&#x30B7;&#x30C9;&#x30FC;&#x30D1;&#x30DF;&#x30F3; &#xFF08;&#x5927;&#x7530;&#xFF09;&#x3001;&#x30CE;&#x30EB;&#x30A2;&#x30C9;&#x30EC;&#x30CA;&#x30EA;&#x30F3;&#x4F5C;&#x52D5;&#x6027;&#x7E4A;&#x7DAD;&#x3092;&#x7834;&#x58CA;&#x3059;&#x308B;&#x6BD2;&#x7D20;&#x306E;&#x8FFD;&#x52A0;&#x7DDA;&#x7DAD;&#x5316; 60% &#x6E1B;&#x3067;&#x3059;&#x3002;6 &#x9031;&#x9593;&#x306E; CCl4 &#x5F8C;&#x7DDA;&#x7DAD;&#x5316;&#x306E;&#x9818;&#x57DF; CCl4 &#x51E6;&#x7406;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x52D5;&#x7269;&#x306E;&#x7D04; 30 &#x500D;&#x5897;&#x52A0;&#x3057;&#x3001;&#x5927;&#x7530;&#x3067; 36 &#xFF05; &#x6E1B;&#x5C11;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;2 &#x9031;&#x9593;&#x3067;&#x5927;&#x7530; mRNA &#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x306E;&#x30DE;&#x30C8;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9; &#x30DE;&#x30C8;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x30E1;&#x30BF;&#x30ED;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A2;&#x30FC;&#x30BC; 1 (TIMP-1), &#x7D30;&#x80DE;&#x5916;&#x30DE;&#x30C8;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x5206;&#x89E3;&#x306E;&#x963B;&#x5BB3;&#x5264;&#x306E;&#x7D44;&#x7E54;&#x963B;&#x5BB3;&#x5264;&#x306E; CCl4 &#x8A98;&#x8D77;&#x5897;&#x52A0; abrogated &#x3057;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x5927;&#x5E45;&#x306B; 6 &#x9031;&#x3067;&#x305D;&#x308C;&#x3092;&#x524A;&#x6E1B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6700;&#x5F8C;&#x306B;&#x3001;&#x30A2;&#x30C9;&#x30EC;&#x30CA;&#x30EA;&#x30F3; &alpha; 1 &#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x62EE;&#x6297;&#x85AC; 2 &#x9031;&#x9593;&#x3082;&#x53D7;&#x3051;&#x305F;&#x30D7;&#x30E9;&#x30BE;&#x30B7;&#x30F3;&#x306E; CCl4 &#x3092;&#x30E9;&#x30C3;&#x30C8;&#x306B;&#x6295;&#x4E0E;&#x3059;&#x308B;&#x3068;&#x7DDA;&#x7DAD;&#x5316;&#x306F; 83 &#xFF05; &#x6E1B;&#x5C11;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x7D50;&#x8AD6;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x306F;&#x3001;&#x30CE;&#x30EB;&#x30A2;&#x30C9;&#x30EC;&#x30CA;&#x30EA;&#x30F3;&#x306E;&#x7834;&#x58CA;&#x3084;&#x30CE;&#x30EB;&#x30A2;&#x30C9;&#x30EC;&#x30CA;&#x30EA;&#x30F3;&#x4F5C;&#x52D5;&#x6027;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066; &alpha; 1 &#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x62EE;&#x6297;&#x306F;&#x809D;&#x7DDA;&#x7DAD;&#x5316;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x3092;&#x963B;&#x5BB3;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30A2;&#x30C9;&#x30EC;&#x30CA;&#x30EA;&#x30F3;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x62EE;&#x6297;&#x85AC;&#x306F;&#x975E;&#x5E38;&#x306B;&#x5065;&#x5168;&#x5B89;&#x5168;&#x30D7;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30A4;&#x30EB;&#x304C;&#x3042;&#x308B;&#x306E;&#x3067;&#x3001;&#x5F7C;&#x3089;&#x306F;&#x809D;&#x7DDA;&#x7DAD;&#x5316;&#x3092;&#x6E1B;&#x3089;&#x3059;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x9B45;&#x529B;&#x7684;&#x306A;&#x85AC;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x8868;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30CE;&#x30EB;&#x30A2;&#x30C9;&#x30EC;&#x30CA;&#x30EA;&#x30F3;&#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x62EE;&#x6297;&#x4F5C;&#x7528;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x30E9;&#x30C3;&#x30C8;&#x809D;&#x7DDA;&#x7DAD;&#x5316;&#x306E;&#x963B;&#x5BB3;&#x3067;&#x3059;&#x3002;

&#xC544;&#xB4DC;&#xB808;&#xB0A0;&#xB9B0; innervation &#xD574;&#xC8FC;&#xC5B4; &#xAC04; fibrogenic &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC5D0; &#xC21C;&#xD658;&#xC758; &#xD6A8;&#xACFC; &#xC81C;&#xB300;&#xB85C; &#xC774;&#xD574;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xBAA9;&#xD45C;&#xB294; &#xD0C4;&#xC18C; tetrachloride (CCl4)&#xC5D0; noradrenergic &#xC801;&#xAC1C;&#xC2EC;&#xC758; &#xD6A8;&#xACFC; &#xC870;&#xC0AC; &#xD588;&#xB2E4;-&#xC950;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAC04; &#xC12C;&#xC720; &#xC99D;&#xC744; &#xC720;&#xBC1C; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. Ccl4&#xC758; &#xC774;&#xC8FC; &#xC720;&#xB3C4; &#xC81C;&#xC5B4;&#xC5D0; &#xBE44;&#xD574; &#xC12C;&#xC720; &#xC99D;&#xC758; &#xC601;&#xC5ED;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC57D; 5 &#xC99D;&#xAC00;. 6-Hydroxydopamine (OHDA) noradrenergic &#xC12C;&#xC720;&#xB97C; &#xD30C;&#xAD34; &#xD558;&#xB294; &#xB3C5; &#xC18C;&#xC758; &#xCD94;&#xAC00; &#xC12C;&#xC720; &#xC99D; 60% &#xAC10;&#xC18C;. Ccl4&#xC758; 6 &#xC8FC; &#xD6C4; &#xC12C;&#xC720; &#xC99D;&#xC758; &#xC601;&#xC5ED; CCl4 &#xCE58;&#xB8CC; &#xB3D9;&#xBB3C;&#xC5D0; &#xC57D; 30-fold &#xC99D;&#xAC00; &#xD558; &#xACE0; OHDA&#xC640; 36% &#xAC10;&#xC18C; &#xD588;&#xB2E4;. 2 &#xC8FC; OHDA &#xD3D0;&#xC9C0; mRNA &#xC218;&#xC900;&#xC758; &#xB9E4;&#xD2B8;&#xB9AD;&#xC2A4; metalloproteinases-1 (TIMP 1), &#xC138;&#xD3EC; &#xC678; &#xAE30;&#xC9C8; &#xC800;&#xD558;&#xC758; &#xC5B5;&#xC81C;&#xC81C;&#xC758; &#xC870;&#xC9C1; &#xC5B5;&#xC81C;&#xC81C; CCl4 &#xC720;&#xBC1C; &#xC99D;&#xAC00; &#xD558; &#xACE0; &#xADF8;&#xAC83;&#xC740; &#xD06C;&#xAC8C; 6 &#xC8FC; &#xAC10;&#xC18C;. &#xB9C8;&#xC9C0;&#xB9C9;&#xC73C;&#xB85C;, &#xC950;&#xB3C4; &#xBC1B;&#xC740; 2 &#xC8FC; prazosin alpha1 &#xC544;&#xB4DC;&#xB808;&#xB0A0;&#xB9B0; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xC758; &#xAE38; &#xD56D; &#xC81C;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; Ccl4&#xB85C; &#xCE58;&#xB8CC; &#xD558;&#xBA74; &#xC12C;&#xC720; &#xC99D; 83% &#xAC10;&#xC18C; &#xD588;&#xB2E4;. &#xB05D;&#xC73C;&#xB85C;, noradrenergic &#xC12C;&#xC720;&#xC758; &#xD30C;&#xAD34; &#xB610;&#xB294; &#xC801;&#xAC1C;&#xC2EC; alpha1 &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; noradrenergic &#xC2E0;&#xD638; &#xAC04; &#xC12C;&#xC720; &#xC99D;&#xC758; &#xBC1C;&#xC804;&#xC744; &#xC800;&#xD574;. Adrenoreceptor &#xAE38; &#xD56D; &#xC81C;&#xB294; &#xB9E4;&#xC6B0; &#xC0AC;&#xC6B4;&#xB4DC; &#xC548;&#xC804; &#xD504;&#xB85C;&#xD544;, &#xB54C;&#xBB38;&#xC5D0; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC740; &#xB9E4;&#xB825;&#xC801;&#xC778; &#xC57D;&#xBB3C;&#xC744; &#xC904;&#xC774;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xAC04; fibrogenesis&#xB85C; &#xD45C;&#xC2DC; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Noradrenergic &#xC801;&#xAC1C;&#xC2EC;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xC950; &#xAC04; fibrogenesis&#xC758; &#xC800;&#xD574;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

El efecto de la inervaci&oacute;n adren&eacute;rgica o circulaci&oacute;n de catecolaminas en la funci&oacute;n de las c&eacute;lulas del h&iacute;gado fibrog&eacute;nicos es mal entendido. Nuestro objetivo era investigar los efectos del antagonismo noradren&eacute;rgico en tetracloruro de carbono (CCl4)-inducida de la fibrosis hep&aacute;tica en ratas. Dos semanas de CCl4 indujo un aumento de aproximadamente cinco veces en el &aacute;rea de la fibrosis en comparaci&oacute;n con controles. La adici&oacute;n de 6-hydroxydopamine (OHDA), una toxina que destruye las fibras noradren&eacute;rgicas, disminuy&oacute; la fibrosis en un 60%. Despu&eacute;s de 6 semanas de CCl4, el &aacute;rea de fibrosis aumentaron de nivel en animales tratados con CCl4 y disminuy&oacute; en un 36% con OHDA. A las 2 semanas, OHDA derog&oacute; el aumento inducido por CCl4 en nivel de mRNA de inhibidor de tejido de las metaloproteinasas de la matriz-1 (TIMP-1), un inhibidor de la degradaci&oacute;n de la matriz extracelular, y reduce en 6 semanas. Finalmente, cuando las ratas tratadas con CCl4 para prazosin 2 semanas recibidas tambi&eacute;n, un antagonista de los receptores adren&eacute;rgicos alfa 1 fibrosis disminuy&oacute; en un 83%. En conclusi&oacute;n, destrucci&oacute;n de fibras noradren&eacute;rgicas o antagonismo de se&ntilde;alizaci&oacute;n noradren&eacute;rgico a trav&eacute;s de receptores alpha1 inhibe el desarrollo de fibrosis hep&aacute;tica. Porque adrenorreceptor antagonistas tienen un perfil de seguridad muy sano, aparecen como atractivos medicamentos para reducir la fibrog&eacute;nesis hep&aacute;tica.

Inhibici&oacute;n de h&iacute;gado de rata fibrogenesis noradren&eacute;rgico antagonismo.

6 &#x548C; 10&#xFF0C;cDNA &#x5E93;&#x4ECE;&#x53D1;&#x5C55;&#x4E2D;&#x56FD;&#x5BB6;&#x4E0B;&#x4E18;&#x9F20;&#x6807;&#x4EE5;&#x524D;&#x6784;&#x9020;&#x4EA7;&#x540E;&#x5929; (P) &#x4E4B;&#x95F4;&#x3002;P10-P6 &#x4E2D;&#x51CF;&#x53BB;&#x5E93;&#x3001; neuroleukin&#x3001; &#x9499;&#x8C03;&#x7D20;&#x4E00;&#x3001; &#x76AE;&#x5C42;&#x548C; Rho7 &#x786E;&#x5B9A;&#x4E86;&#x3002;&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x7684;&#x76EE;&#x7684;&#x5728;&#x4E8E;&#x5206;&#x6790;&#x5B83;&#x4EEC;&#x7684;&#x5206;&#x5E03;&#xFF0C;mRNA &#x548C;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x6C34;&#x5E73;&#xFF0C;&#x5728;&#x6210;&#x4EBA;&#x548C;&#x9F20;&#x6807;&#x5927;&#x8111;&#x7684;&#x53D1;&#x80B2;&#x3002;&#x6574;&#x4E2A;&#x5927;&#x8111;&#x65F6;&#x7ED3;&#x6784;&#xFF0C;&#x5982;&#x76AE;&#x5C42;&#x3001; &#x6D77;&#x9A6C;&#x3001; &#x5C0F;&#x8111;&#x548C;&#x4E0B;&#x4E18;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x4E30;&#x5BCC;&#x672C;&#x5730;&#x5316;&#x663E;&#x793A;&#x5E7F;&#x6CDB;&#x8868;&#x8FBE;&#x7684;&#x56DB;&#x4E2A;&#x5206;&#x5B50;&#x3002;&#x5176;&#x76F8;&#x5E94;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x6C34;&#x5E73;&#x7684;&#x589E;&#x52A0;&#x8111;&#x53D1;&#x80B2;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x5206;&#x5B50;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#xFF0C;&#x8FD8;&#x8C03;&#x67E5;&#x4E86;&#x5728;&#x6210;&#x4EBA;&#x7684;&#x5927;&#x8111;&#x76AE;&#x8D28;&#x4E2D;&#x7684;&#x673A;&#x68B0;&#x635F;&#x4F24;&#x540E;&#x7684; 2 &#x5468;&#x3002;Neuroleukin &#x548C;&#x76AE;&#x5C42;&#x88AB;&#x53D1;&#x73B0;&#x8981;&#x8868;&#x793A;&#x7684;&#x661F;&#x5F62;&#x80F6;&#x8D28;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x867D;&#x7136;&#x6709;&#x9499;&#x8C03;&#x86CB;&#x767D;&#x548C; Rho7 &#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x5F0F;&#x4E2D;&#x7684;&#x4EFB;&#x4F55;&#x66F4;&#x6539;&#x3002;Neuroleukin&#x3001; &#x9499;&#x8C03;&#x7D20;&#x3001; &#x76AE;&#x5C42;&#x548C; Rho7 &#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x88AB;&#x8BA8;&#x8BBA;&#x5176;&#x4F5C;&#x7528;&#x8303;&#x56F4;&#x5185;&#x7684;&#x5927;&#x8111;&#x6210;&#x719F;&#x548C;&#x8F74;&#x7A81;&#x518D;&#x751F;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x4E2D;&#x3002;

Neuroleukin&#x3001; &#x9499;&#x8C03;&#x7D20;&#x3001; &#x76AE;&#x5C42;&#xFF0C;&#x548C; Rho7/Rnd2 &#x5728;&#x5B8C;&#x597D;&#x548C;&#x53D7;&#x4F24;&#x7684;&#x5C0F;&#x9F20;&#x5927;&#x8111;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x5206;&#x6790;&#x3002;

Subtracted cDNA libraries from the mouse developing inferior colliculus were previously constructed between postnatal day (P) 6 and 10. In the P10-P6 subtracted library, neuroleukin, calmodulin I, cortactin, and Rho7 were identified. The goal of the present study was to analyze their distribution, at the mRNA and protein levels, in both the adult and the developing mouse brain. The four molecules showed a wide expression throughout the brain, with a neuronal-enriched localization in structures such as the cortex, the hippocampus, the cerebellum, and the inferior colliculus. The level of expression of their corresponding mRNAs increased during brain postnatal development. The expression of these molecules was also investigated 2 weeks after a mechanical lesion in the adult cerebral cortex. Neuroleukin and cortactin were found to be expressed by reactive astrocytes, while there were no changes in the expression of calmodulin and Rho7. The expression of neuroleukin, calmodulin, cortactin, and Rho7 is discussed in the context of their putative role in the maturation of the brain and in the axonal regeneration process.

Expression analysis of neuroleukin, calmodulin, cortactin, and Rho7/Rnd2 in the intact and injured mouse brain.

Biblioth&egrave;ques de la souris d&eacute;veloppant colliculus inf&eacute;rieur &eacute;taient auparavant soustraites de cDNA construite entre jour apr&egrave;s la naissance (P) 6 et 10. Le P10-P6 soustrait biblioth&egrave;que, neuroleukin, la calmoduline, qu&#39;i, cortactin et Rho7 ont &eacute;t&eacute; identifi&eacute;s. L&#39;objectif de cette &eacute;tude &eacute;tait d&#39;analyser la distribution, au niveau de l&#39;ARNm et de prot&eacute;ines, en l&#39;adulte et le cerveau en d&eacute;veloppement de la souris. Les quatre mol&eacute;cules ont montr&eacute; une expression large dans tout le cerveau, avec une localisation neuronale enrichi dans des structures telles que le cortex, l&#39;hippocampe, le cervelet et le colliculus inf&eacute;rieur. Le niveau d&#39;expression de leurs ARNm correspondants augmente durant le d&eacute;veloppement postnatal de cerveau. L&#39;expression de ces mol&eacute;cules a &eacute;t&eacute; &eacute;galement &eacute;tudi&eacute;e 2 semaines apr&egrave;s une l&eacute;sion m&eacute;canique dans le cortex c&eacute;r&eacute;bral adulte. Neuroleukin et cortactin ont &eacute;t&eacute; trouv&eacute;s &agrave; &ecirc;tre n&#39;exprim&eacute;es par des astrocytes r&eacute;actifs, alors qu&#39;il y avait aucun changement dans l&#39;expression de la calmoduline et Rho7. L&#39;expression de la neuroleukin, la calmoduline, cortactin et Rho7 est discut&eacute;e dans le cadre de leur r&ocirc;le pr&eacute;sum&eacute; dans la maturation du cerveau et dans le processus de la r&eacute;g&eacute;n&eacute;ration axonale.

Analyse de l&#39;expression de neuroleukin, la calmoduline, cortactin et Rho7/Rnd2 dans le cerveau de souris intactes et les bless&eacute;s.

Expressionsanalyse der neuroleukin, Calmodulin, Cortactin und Rho7/Rnd2 im intakten und verletzten Gehirn der Maus.

Librerie dal mouse sviluppando tubercolo inferiore erano precedentemente sottratto il cDNA costruita tra il giorno postnatale (P) 6 e 10. In P10-P6 sottratto library, neuroleukin, calmodulina, cortactin e Rho7 sono stati identificati. L&#39;obiettivo del presente studio era di analizzare la loro distribuzione, presso i livelli di mRNA e proteine, sia l&#39;adulto che il cervello di topo in via di sviluppo. Le quattro molecole hanno mostrato un&#39;ampia espressione in tutto il cervello, con una localizzazione neuronale arricchito in strutture come la corteccia, l&#39;ippocampo, il cervelletto e il tubercolo inferiore. Il livello di espressione dei loro corrispondenti mRNAs aumentato durante lo sviluppo postnatale del cervello. L&#39;espressione di queste molecole &egrave; stato studiato anche 2 settimane dopo una lesione meccanica nella corteccia cerebrale degli adulti. Neuroleukin e cortactin sono stati trovati essere espressa da astrociti reattivi, mentre ci sono stati cambiamenti nell&#39;espressione della calmodulina e Rho7. L&#39;espressione di neuroleukin, calmodulina, cortactin e Rho7 &egrave; discusso nel contesto del loro ruolo putativo nella maturazione del cervello e del processo di rigenerazione assonale.

Analisi dell&#39;espressione di neuroleukin, calmodulina, cortactin e Rho7/Rnd2 nel cervello del mouse intatto e feriti.

&#x6E1B;&#x7B97; cDNA &#x30E9;&#x30A4;&#x30D6;&#x30E9;&#x30EA;&#x958B;&#x767A;&#x4E0B;&#x4E18;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x304B;&#x3089;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x751F;&#x5F8C;&#x65E5;&#x9593; (P) &#x306F; 6 &#x3068; 10 &#x3092;&#x69CB;&#x7BC9;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;P10 P6 &#x3067;&#x6E1B;&#x7B97;&#x30E9;&#x30A4;&#x30D6;&#x30E9;&#x30EA;&#x3001;neuroleukin&#x3001;&#x30AB;&#x30EB;&#x30E2;&#x30B8;&#x30E5;&#x30EA;&#x30F3;&#x306F;&#x3001;cortactin&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073; Rho7 &#x304C;&#x540C;&#x5B9A;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x306E;&#x76EE;&#x6A19;&#x306F; mRNA &#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306E;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3001;&#x5927;&#x4EBA;&#x3068;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306E;&#x8133;&#x3067;&#x306E;&#x5206;&#x5E03;&#x3092;&#x5206;&#x6790;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3067;&#x3057;&#x305F;&#x3002;4 &#x3064;&#x306E;&#x5206;&#x5B50;&#x8133;&#x795E;&#x7D4C;&#x7D30;&#x80DE;&#x6FC3;&#x7E2E;&#x306E;&#x30ED;&#x30FC;&#x30AB;&#x30E9;&#x30A4;&#x30BA;&#x3001;&#x76AE;&#x8CEA;&#x3001;&#x6D77;&#x99AC;&#x3001;&#x5C0F;&#x8133;&#x3001;&#x4E0B;&#x4E18;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x69CB;&#x9020;&#x3067;&#x5168;&#x4F53;&#x5E83;&#x3044;&#x5F0F;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x305D;&#x306E;&#x5BFE;&#x5FDC;&#x3059;&#x308B; Mrna &#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x8133;&#x751F;&#x5F8C;&#x767A;&#x80B2;&#x4E2D;&#x306B;&#x5897;&#x52A0;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x5206;&#x5B50;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x3082; 2 &#x9031;&#x9593;&#x5F8C;&#x306B;&#x5927;&#x4EBA;&#x306E;&#x5927;&#x8133;&#x76AE;&#x8CEA;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x6A5F;&#x68B0;&#x7684;&#x75C5;&#x5909;&#x3092;&#x8ABF;&#x3079;&#x305F;&#x3002;Neuroleukin &#x3068; cortactin &#x306B;&#x3042;&#x308B;&#x9593;&#x306B;&#x53CD;&#x5FDC;&#x6027;&#x30A2;&#x30B9;&#x30C8;&#x30ED; &#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x30AB;&#x30EB;&#x30E2;&#x30C7;&#x30E5;&#x30EA;&#x30F3;&#x3068; Rho7 &#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x5909;&#x5316;&#x8868;&#x73FE;&#x306A;&#x3057;&#x304C;&#x898B;&#x3064;&#x304B;&#x308A;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30AB;&#x30EB;&#x30E2;&#x30B8;&#x30E5;&#x30EA;&#x30F3;&#x3001;cortactin&#x3001;neuroleukin&#x3001;Rho7 &#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x306F;&#x3001;&#x63A8;&#x5B9A;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x5F79;&#x5272;&#x306E;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C6;&#x30AD;&#x30B9;&#x30C8;&#x3067;&#x8133;&#x306E;&#x6210;&#x719F;&#x3068;&#x8EF8;&#x7D22;&#x518D;&#x751F;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x306B;&#x8AAC;&#x660E;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30AB;&#x30EB;&#x30E2;&#x30B8;&#x30E5;&#x30EA;&#x30F3;&#x3001;cortactin&#x3001;neuroleukin&#x3001;Rho7/Rnd2 &#x305D;&#x306E;&#x307E;&#x307E;&#x3068;&#x8CA0;&#x50B7;&#x8005;&#x306E;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306E;&#x8133;&#x3067;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x89E3;&#x6790;

6 &#xBC0F; 10 &#xBE80;&#xB41C; cDNA &#xB77C;&#xC774;&#xBE0C;&#xB7EC;&#xB9AC;&#xB97C; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xD558;&#xB294; &#xC5F4; &#xB4F1; &#xD55C; colliculus &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xC774;&#xC804;&#xC5D0; &#xC788;&#xC5C8;&#xB358; &#xC0B0; &#xD6C4; &#xD558;&#xB8E8; (P) &#xC0AC;&#xC774; &#xAC74;&#xC124;. P10-P6 &#xB77C;&#xC774;&#xBE0C;&#xB7EC;&#xB9AC;, neuroleukin, calmodulin &#xB098;, cortactin, &#xBC0F; Rho7 &#xD655;&#xC778;&#xC744; &#xBE8D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD604;&#xC7AC;&#xC758; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC758; &#xBAA9;&#xD45C;&#xB294; &#xC131;&#xC778; &#xBC0F; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xB1CC;&#xC758; Mrna&#xC640; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC218;&#xC900;&#xC5D0;&#xC11C; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xBD84;&#xD3EC;&#xB97C; &#xBD84;&#xC11D; &#xD588;&#xB2E4;. 4 &#xAC1C;&#xC758; &#xBD84;&#xC790; &#xB1CC; &#xD53C; &#xC9C8;, &#xD574; &#xB9C8;, &#xC18C; &#xB1CC;, &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xC5F4; &#xB4F1; &#xD55C; colliculus &#xAC19;&#xC740; &#xAD6C;&#xC870;&#xC5D0; &#xC2E0;&#xACBD; &#xB18D;&#xCD95; &#xC9C0;&#xC5ED;&#xD654;&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; &#xD3ED; &#xC2DD;&#xC73C;&#xB85C; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0AC;&#xB2E4;. &#xB1CC; &#xC0B0; &#xD6C4; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xD574;&#xB2F9; Mrnas&#xC758; &#xD45C;&#xD604;&#xC758; &#xC218;&#xC900;&#xC744; &#xC99D;&#xAC00; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xBD84;&#xC790;&#xC758; &#xD45C;&#xD604;&#xC740; &#xC131;&#xC778; &#xB300;&#xB1CC; &#xD53C; &#xC9C8;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAE30;&#xACC4; &#xBCD1; &#xBCC0; &#xD6C4; 2 &#xC8FC; &#xC870;&#xC0AC;&#xB3C4; &#xD588;&#xB2E4;. Neuroleukin &#xBC0F; cortactin &#xB420; &#xD45C;&#xD604; &#xBC18;&#xC751;&#xC131; &#xC774;&#xB2E4; &#xD588;&#xB2E4; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; calmodulin&#xC640; rho7&#xC758; &#xD45C;&#xC815;&#xC5D0; &#xBCC0;&#xD654;&#xAC00; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0AC;&#xB2E4;. Neuroleukin, calmodulin, cortactin, rho7&#xC758; &#xC2DD; &#xB1CC;&#xC758; &#xC131;&#xC219; &#xBC0F; axonal &#xC7AC;&#xC0DD;&#xC131; &#xACFC;&#xC815; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xC0C1; &#xC5ED;&#xD560;&#xC758; &#xB9E5;&#xB77D;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC124;&#xBA85; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Neuroleukin, calmodulin, cortactin, &#xBC0F; Rho7/Rnd2, &#xC628;&#xC804; &#xD558; &#xACE0; &#xBD80;&#xC0C1; &#xC950;&#xC758; &#xB1CC;&#xC5D0;&#xC758; &#xC2DD; &#xBD84;&#xC11D;.

Resta cDNA bibliotecas desde el rat&oacute;n desarrollando col&iacute;culo inferior fueron previamente construida entre d&iacute;a postnatal (P) 6 y 10. En el P10-P6 resta biblioteca, neuroleukin, calmodulina que est&aacute;bamos identificados I, cortactina y Rho7. El objetivo del presente estudio fue analizar su distribuci&oacute;n, en los niveles de mRNA y prote&iacute;na, en tanto el adulto como el cerebro de rat&oacute;n en desarrollo. Las cuatro mol&eacute;culas demostradas una amplia expresi&oacute;n a trav&eacute;s del cerebro, con una localizaci&oacute;n neuronal enriquecida en estructuras como la corteza, el hipocampo, el cerebelo y el col&iacute;culo inferior. El nivel de expresi&oacute;n de los mRNAs correspondientes aument&oacute; durante el desarrollo postnatal del cerebro. La expresi&oacute;n de estas mol&eacute;culas tambi&eacute;n investigaron a 2 semanas despu&eacute;s de una lesi&oacute;n mec&aacute;nica en la corteza cerebral para adultos. Neuroleukin y cortactina fueron encontrados ser no expresadas por astrocitos reactivos, aunque hubo ning&uacute;n cambio en la expresi&oacute;n de la calmodulina y Rho7. La expresi&oacute;n de la calmodulina, neuroleukin, cortactina y Rho7 se discute en el contexto de su supuesto papel en la maduraci&oacute;n del cerebro y en el proceso de regeneraci&oacute;n axonal.

An&aacute;lisis de la expresi&oacute;n de neuroleukin, calmodulina, cortactina y Rho7/Rnd2 en el cerebro de rat&oacute;n intacto y heridos.

&#x867D;&#x7136;&#x53D7;&#x4F24;&#x7684;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x7684;&#x4E0B;&#x4E18; (IC) &#x663E;&#x793A;&#x9C81;&#x68D2;&#x6027;&#x8F74;&#x7A81;&#x4EA7;&#x7269;&#x901A;&#x8FC7;&#x75C5;&#x53D8;&#x7684;&#x90E8;&#x4F4D;&#x5728;&#x4EA7;&#x540E;&#x7B2C;&#x516D;&#x5929; (P6) &#x4F53;&#x5916;&#xFF0C;&#x5E76;&#x6709;&#x80FD;&#x529B; re-innervate &#x5176;&#x76EE;&#x6807;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#xFF0C;&#x4ECE; P10 IC &#x795E;&#x7ECF;&#x7EC6;&#x80DE;&#x635F;&#x4F24;&#x4E0D;&#x80FD;&#x5176;&#x8F74;&#x7A81;&#x518D;&#x751F;&#x6574;&#x4E2A;&#x75C5;&#x53D8;&#x7684;&#x90E8;&#x4F4D;&#x3002;&#x6B64;&#x8F74;&#x7D22;&#x518D;&#x751F;&#x5931;&#x8D25;&#x5F52;&#x548E;&#x4E8E;&#x5206;&#x5B50;&#x8868;&#x8FBE;&#x7684;&#x6291;&#x5236;&#x5185;&#x6E90;&#x6027;&#x7684;&#x7EC4;&#x7EC7;&#xFF0C;&#x5728;&#x53D1;&#x5C55;&#x671F;&#x95F4;&#x7684;&#x589E;&#x52A0;&#x3002;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x7B2C;&#x4E00;&#x6B65;&#x8981;&#x786E;&#x5B9A;&#x8FD9;&#x79CD;&#x6291;&#x5236;&#x4F5C;&#x7528;&#x7684;&#x5206;&#x5B50;&#xFF0C;&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x62A5;&#x544A;&#x7684;&#x5206;&#x79BB;&#x5206;&#x5B50;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x5728; IC &#x5728;&#x5F00;&#x53D1;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x4E2D;&#x3002;&#x4E24;&#x4E2A;&#x65B9;&#x5411; &#xFF08;&#x5411;&#x524D;&#x548C;&#x5411;&#x540E;&#xFF09; &#x6291;&#x5236;&#x6027;&#x6D88;&#x51CF;&#x6742;&#x4EA4; &#xFF08;SSH&#xFF09; &#x5BF9; IC P6 &#x4E0E; P10 &#x9636;&#x6BB5;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x6267;&#x884C;&#x3002;P6 &#x4ECE;&#x4E00;&#x767E;&#x4E2A;&#x83DC;&#x82B1; (P6 P10&#xFF09; &#x548C;&#x4ECE; P10 200 &#x957F;&#x767D; (P10-P6)-&#x51CF;&#x53BB;&#x7684;&#x56FE;&#x4E66;&#x9986;&#x88AB;&#x968F;&#x673A;&#x6D4B;&#x5E8F;&#x3002;&#x5E8F;&#x957F;&#x767D;&#x6591;&#x70B9;&#x7B5B;&#x67E5;&#x53D1;&#x73B0;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x6269;&#x589E;&#x7684;&#x5927;&#x591A;&#x6570;&#x5728;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x5404;&#x81EA;&#x7684;&#x53D1;&#x5C55;&#x9636;&#x6BB5;&#x7684;&#x5DEE;&#x5F02;&#x8868;&#x8FBE;&#x3002;&#x7136;&#x540E;&#xFF0C;&#x987A;&#x5E8F;&#x65E0;&#x6027;&#x7CFB;&#x5206;&#x6790;&#x8868;&#x660E; P6 &#x8BE5;&#x5E93;&#x9AD8;&#x5EA6;&#x6D53;&#x7F29;&#x7684;&#x8868;&#x793A;&#x65E9;&#x5728;&#x53D1;&#x5C55;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x5982; GAP43 &#x6216;&#x6CE2;&#x5F62;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x5206;&#x5B50;&#x3002;&#x76F8;&#x6BD4;&#x4E4B;&#x4E0B;&#xFF0C;P10 &#x5E93;&#x6240;&#x8F7D;&#x4E3B;&#x8981;&#x8868;&#x793A;&#x5728;&#x4EE5;&#x540E;&#x9636;&#x6BB5;&#x53D1;&#x5C55;&#x7684;&#x4E2D;&#x67A2;&#x795E;&#x7ECF;&#x7CFB;&#x7EDF;&#xFF0C;&#x5982;&#x9AD3;&#x9798;&#x76F8;&#x5173;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x5206;&#x5B50;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E; SSH &#x662F;&#x5DEE;&#x5F02;&#x786E;&#x5B9A;&#x9002;&#x5F53;&#x7684;&#x65B9;&#x6CD5;&#x8868;&#x8FBE;&#x57FA;&#x56E0;&#x5728;&#x53D1;&#x5C55;&#x4E2D;&#x56FD;&#x5BB6;&#x7684; IC&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7ED3;&#x679C;&#x4E3A;&#x5904;&#x7406;&#x6240;&#x6D89;&#x53CA;&#x7684; IC &#x53D1;&#x5C55;&#x4E4B;&#x524D;&#x548C;&#x521D;&#x671F;&#x7684;&#x8046;&#x8BAF;&#xFF0C;&#x5176;&#x4E2D;&#x53EF;&#x80FD;&#x6D89;&#x53CA;&#x7684;&#x8F74;&#x7A81;&#x4EA7;&#x7269;&#x673A;&#x5236;&#x7684;&#x4E00;&#x4E9B;&#x5206;&#x5B50;&#x7684;&#x8FDB;&#x4E00;&#x6B65;&#x7814;&#x7A76;&#x63D0;&#x4F9B;&#x4E86;&#x57FA;&#x7840;&#x3002;

&#x53D1;&#x5C55;&#x4E2D;&#x56FD;&#x5BB6;&#x9F20;&#x6807;&#x4E0B;&#x4E18;&#x5DEE;&#x5F02;&#x8868;&#x8FBE;&#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x9274;&#x5B9A;&#x3002;

Although injured neurons of inferior colliculus (IC) display a robust axonal outgrowth through a lesion site at postnatal day six (P6) in vitro, and are capable to re-innervate their target cells, injured neurons from P10 IC are unable to regenerate their axons across the lesion site. This axonal regenerative failure has been attributed to an increase of expression of inhibitory molecules in endogenous tissue, during development. As a first step to identify such inhibitory molecules, the present study reports the isolation of molecules differentially expressed in the IC during development. A two-directional (forward and backward) suppression subtractive hybridization (SSH) was performed on IC tissue between P6 and P10 stages. One hundred cDNAs from P6 (P6-P10) and 200 cDNAs from P10 (P10-P6)-subtracted libraries were randomly sequenced. A dot-blot screening of sequenced cDNAs revealed the differential expression for the majority of these cDNAs at their respective developmental stage. Then, the analysis of sequenced clones showed that P6 library was highly enriched in molecules expressed early in the development, such as GAP43 or vimentin proteins. By contrast, the P10 library contained mostly molecules expressed at later stages of development in the central nervous system, such as myelin-related proteins. Our results show that SSH is a suitable method for identifying differentially expressed genes in the developing IC. In addition, these results provide a foundation for further studies dealing with molecules involved in the IC development before and at the onset of hearing, some of which being probably involved in the axonal outgrowth mechanism.

Identification of differentially expressed genes in the developing mouse inferior colliculus.

Bien que bless&eacute;s neurones du colliculus inf&eacute;rieur (IC) affichent une robuste axonale croissance gr&acirc;ce &agrave; un site de la l&eacute;sion au 21e jour 6 (P6) in vitro et sont capables de re-innervate leurs cellules cibles, des neurones l&eacute;s&eacute;s de P10 IC sont incapables de se r&eacute;g&eacute;n&eacute;rer leurs axones dans le site de la l&eacute;sion. Cet &eacute;chec de r&eacute;g&eacute;n&eacute;ration axonal a &eacute;t&eacute; attribu&eacute; &agrave; une augmentation de l&#39;expression de mol&eacute;cules inhibitrices dans le tissu endog&egrave;ne, au cours du d&eacute;veloppement. Dans un premier temps d&#39;identifier ces mol&eacute;cules inhibitrices, la pr&eacute;sente &eacute;tude l&#39;isolement des mol&eacute;cules diff&eacute;rentiellement exprim&eacute;s dans l&#39;IC au cours de l&#39;&eacute;laboration de rapports. Une hybridation soustractive bidirectionnelle (avant et arri&egrave;re) suppression (SSH) a &eacute;t&eacute; r&eacute;alis&eacute;e sur les tissus IC entre les stades P6 et P10. Une centaine des ADNc de P6 (P6-P10) et 200 ADNc de P10 (P10-P6)-biblioth&egrave;ques soustraites ont &eacute;t&eacute; s&eacute;quenc&eacute;s au hasard. Une projection de dot-blot du cDNA s&eacute;quenc&eacute; r&eacute;v&egrave;le l&#39;expression diff&eacute;rentielle de la majorit&eacute; de ces ADNc &agrave; leur stade de d&eacute;veloppement respectif. Puis, l&#39;analyse des clones s&eacute;quenc&eacute;s ont montr&eacute; que la biblioth&egrave;que P6 a &eacute;t&eacute; fortement enrichie en mol&eacute;cules exprim&eacute;es au d&eacute;but de la mise au point, telles que des prot&eacute;ines GAP43 de vimentine. En revanche, la biblioth&egrave;que de P10 contenait principalement des mol&eacute;cules exprim&eacute;es lors des &eacute;tapes ult&eacute;rieures du d&eacute;veloppement dans le syst&egrave;me nerveux central, tels que les prot&eacute;ines li&eacute;es &agrave; la my&eacute;line. Nos r&eacute;sultats montrent que le SSH est une m&eacute;thode appropri&eacute;e pour identifier de fa&ccedil;on diff&eacute;rentielle g&egrave;nes exprim&eacute;s dans l&#39;IC en voie de d&eacute;veloppement. En outre, ces r&eacute;sultats constituent une base pour d&#39;autres &eacute;tudes traitant des mol&eacute;cules impliqu&eacute;es dans le d&eacute;veloppement de l&#39;IC avant et au d&eacute;but de l&#39;audience, certains qui sont probablement impliqu&eacute;s dans le m&eacute;canisme de la croissance axonale.

Identification de g&egrave;nes diff&eacute;rentiellement exprim&eacute;s dans le colliculus inf&eacute;rieur souris en voie de d&eacute;veloppement.

Identifizierung von differentiell exprimierten Gene in sich entwickelnden Maus Colliculus inferior.

Anche se infortunati neuroni del tubercolo inferiore (IC) visualizzare un robusto assonale escrescenza attraverso un sito di lesione al giorno postnatale sei (P6) in vitro e sono in grado di re-innervate le loro cellule bersaglio, neuroni feriti da P10 IC sono in grado di rigenerare i loro assoni attraverso il sito di lesione. Questo fallimento rigenerativo assonale &egrave; stato attribuito ad un aumento dell&#39;espressione delle molecole inibitorie nel tessuto endogena, durante lo sviluppo. Come primo passo per identificare tali molecole inibitorie, il presente studio rapporti all&#39;isolamento di molecole differenzialmente espressi IC durante lo sviluppo. Un&#39;ibridazione sottrattiva bi-direzionale (avanti e indietro) soppressione (SSH) &egrave; stata eseguita su tessuto IC tra fasi P6 e P10. Cento cDNAs da P6 (P6-P10) e 200 cDNAs da P10 (P10-P6)-librerie sottratto casualmente sono state sequenziate. Una proiezione di dot-blot dei cDNAs sequenziata hanno rivelato l&#39;espressione differenziale per la maggior parte di questi cDNAs loro rispettiva fase evolutiva. Quindi, l&#39;analisi dei cloni sequenziati ha mostrato che quello Biblioteca P6 &egrave; stato altamente arricchito in molecole espresse all&#39;inizio nello sviluppo, come le proteine GAP43 o vimentina. Al contrario, la biblioteca di P10 conteneva principalmente molecole espresse nelle fasi successive di sviluppo nel sistema nervoso centrale, quali le proteine mieliniche-relative. I nostri risultati mostrano che SSH &egrave; un metodo adatto per identificare differenzialmente espressi geni IC in via di sviluppo. Inoltre, questi risultati forniscono un fondamento per ulteriori studi trattano molecole coinvolte nello sviluppo IC prima e all&#39;inizio dell&#39;udienza, alcuni dei quali probabilmente coinvolti nel meccanismo di crescita assonale.

Identificazione di geni differenzialmente espressi nella sviluppo tubercolo inferiore del mouse.

&#x4E0B;&#x4E18; (IC) &#x306E;&#x8CA0;&#x50B7;&#x3057;&#x305F;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x306E;&#x5805;&#x7262;&#x306A;&#x8EF8;&#x7D22;&#x4F38;&#x9577;&#x751F;&#x5F8C;&#x65E5; 6 &#x75C5;&#x5909;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x3092;&#x901A;&#x3058;&#x3066; (P6) in vitro &#x3067;&#x8868;&#x793A;&#x3057;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x6A19;&#x7684;&#x7D30;&#x80DE;&#x3092; re-innervate &#x3059;&#x308B;&#x80FD;&#x529B;&#x304C;&#x3042;&#x308B;&#x304C;&#x3001;&#x8CA0;&#x50B7;&#x3057;&#x305F;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3; P10 IC &#x304B;&#x3089;&#x306F;&#x305D;&#x306E;&#x8EF8;&#x7D22;&#x75C5;&#x5909;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x5168;&#x4F53;&#x3092;&#x518D;&#x751F;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x8EF8;&#x7D22;&#x518D;&#x751F;&#x969C;&#x5BB3;&#x306F;&#x767A;&#x9054;&#x306B;&#x5185;&#x56E0;&#x6027;&#x7D44;&#x7E54;&#x963B;&#x5BB3;&#x5206;&#x5B50;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x306E;&#x5897;&#x52A0;&#x306B;&#x8D77;&#x56E0;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x963B;&#x5BB3;&#x5206;&#x5B50;&#x3092;&#x8B58;&#x5225;&#x3059;&#x308B;&#x6700;&#x521D;&#x306E;&#x30B9;&#x30C6;&#x30C3;&#x30D7;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x30EC;&#x30DD;&#x30FC;&#x30C8;&#x5206;&#x96E2;&#x5206;&#x5B50;&#x306E;&#x7279;&#x7570;&#x7684;&#x306B; IC &#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x4E2D;&#x306B;&#x8868;&#x73FE;&#x3002;2 &#x65B9;&#x5411; (&#x524D;&#x5F8C;) &#x6291;&#x5236;&#x5DEE;&#x3057;&#x5F15;&#x304D;&#x30CF;&#x30A4;&#x30D6;&#x30EA;&#x30C0;&#x30A4;&#x30BC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3; (SSH) IC &#x7D44;&#x7E54; P6 &#x3068; P10 &#x306E;&#x6BB5;&#x968E;&#x306E;&#x9593;&#x306B;&#x5B9F;&#x884C;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x767E; Cdna P6 &#xFF08;P6 P10&#xFF09; &#x3068; 200 &#x306E; Cdna P10 &#x304B;&#x3089; (P10 P6&#xFF09;-&#x6E1B;&#x7B97;&#x30E9;&#x30A4;&#x30D6;&#x30E9;&#x30EA; &#x30E9;&#x30F3;&#x30C0;&#x30E0;&#x306B;&#x5869;&#x57FA;&#x914D;&#x5217;&#x3092;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30B7;&#x30FC;&#x30B1;&#x30F3;&#x30B9;&#x3055;&#x308C;&#x305F; Cdna &#x306E;&#x30C9;&#x30C3;&#x30C8; &#x30FB; &#x30D6;&#x30ED;&#x30C3;&#x30C8; &#x30B9;&#x30AF;&#x30EA;&#x30FC;&#x30CB;&#x30F3;&#x30B0;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E; Cdna &#x306E;&#x5927;&#x591A;&#x6570;&#x306E;&#x5DEE;&#x52D5;&#x5F0F;&#x5F7C;&#x3089;&#x305D;&#x308C;&#x305E;&#x308C;&#x306E;&#x767A;&#x9054;&#x6BB5;&#x968E;&#x3067;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x305D;&#x306E;&#x5F8C;&#x3001;&#x305D;&#x306E; P6 &#x30E9;&#x30A4;&#x30D6;&#x30E9;&#x30EA; GAP43 &#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x30D3;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C1;&#x30F3; &#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306A;&#x3069;&#x3001;&#x958B;&#x767A;&#x306E;&#x521D;&#x671F;&#x306B;&#x767A;&#x73FE;&#x5206;&#x5B50;&#x306E;&#x975E;&#x5E38;&#x306B;&#x8C4A;&#x304B;&#x306B;&#x306A;&#x3063;&#x305F;&#x30B7;&#x30FC;&#x30B1;&#x30F3;&#x30B9;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30AF;&#x30ED;&#x30FC;&#x30F3;&#x306E;&#x89E3;&#x6790;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x5BFE;&#x7167;&#x7684;&#x306B;&#x3001;P10 &#x30E9;&#x30A4;&#x30D6;&#x30E9;&#x30EA;&#x306B;&#x4E2D;&#x67A2;&#x795E;&#x7D4C;&#x7CFB;&#x306E;&#x30DF;&#x30A8;&#x30EA;&#x30F3;&#x95A2;&#x9023;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x7B49;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x306E;&#x5F8C;&#x306E;&#x6BB5;&#x968E;&#x3067;&#x767A;&#x73FE;&#x5206;&#x5B50;&#x4E3B;&#x306B;&#x542B;&#x307E;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;SSH &#x304C;&#x767A;&#x5C55;&#x9014;&#x4E0A;&#x306E; IC &#x3067;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x7279;&#x7570;&#x7684;&#x8B58;&#x5225;&#x306B;&#x9069;&#x3057;&#x305F;&#x624B;&#x6CD5;&#x304C;&#x8868;&#x73FE;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x793A;&#x5506;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x57FA;&#x790E; IC &#x958B;&#x767A;&#x524D;&#x306B;&#x3001;&#x3068;&#x805E;&#x3044;&#x3066;&#x3001;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x304A;&#x305D;&#x3089;&#x304F;&#x8EF8;&#x7D22;&#x4F38;&#x9577;&#x306E;&#x6A5F;&#x69CB;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x306E;&#x767A;&#x75C7;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3059;&#x308B;&#x5206;&#x5B50;&#x304C;&#x6271;&#x3063;&#x3066;&#x3055;&#x3089;&#x306A;&#x308B;&#x7814;&#x7A76;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x767A;&#x5C55;&#x9014;&#x4E0A;&#x306E;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x4E0B;&#x4E18;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x767A;&#x73FE;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x540C;&#x5B9A;

&#xC5F4; &#xB4F1; colliculus (IC)&#xC758; &#xBD80;&#xC0C1;&#xB41C; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC138;&#xD3EC;&#xB294; &#xAC15;&#xB825;&#xD55C; axonal &#xD30C;&#xC0DD;&#xBB3C; &#xCD9C;&#xC0DD; &#xD6C4; &#xD558;&#xB8E8; 6 &#xBCD1; &#xBCC0; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; (P6) &#xCCB4; &#xC678;, &#xD45C;&#xC2DC; &#xD558; &#xACE0; &#xB300;&#xC0C1; &#xC140; re-innervate &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;, &#xBE44;&#xB85D; P10 IC&#xC5D0;&#xC11C; &#xBD80; &#xC0C1;&#xB2F9;&#xD55C; &#xC2E0;&#xACBD; &#xBCD1; &#xBCC0; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; &#xC790;&#xC2E0;&#xC758; axons&#xC744; &#xB2E4;&#xC2DC; &#xC0DD;&#xC131;&#xD560; &#xC218; &#xC5C6;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. Axonal &#xC7AC;&#xC0DD; &#xC2E4;&#xD328;&#xAC00; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xC0DD; &#xC870;&#xC9C1; &#xC5B5;&#xC81C; &#xBD84;&#xC790;&#xC758; &#xD45C;&#xD604; &#xC99D;&#xAC00;&#xC5D0; &#xAE30;&#xC778; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC5B5;&#xC81C; &#xBD84;&#xC790; &#xC2DD;&#xBCC4;&#xC5D0; &#xCCAB;&#xAC78;&#xC74C;&#xC73C;&#xB85C; &#xD604;&#xC7AC; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xBCF4;&#xACE0;&#xC11C; &#xBD84;&#xC790;&#xC758; &#xBD84;&#xB9AC; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; IC&#xC5D0; &#xCC28;&#xB3D9; &#xD45C;&#xD604;. &#xB450; &#xBC29;&#xD5A5; (&#xC55E;&#xB4A4;&#xB85C;) &#xC5B5;&#xC81C; &#xAC10;&#xBC95; &#xAD50; &#xC7A1; (SSH) IC &#xC870;&#xC9C1; P6 P10 &#xB2E8;&#xACC4; &#xC0AC;&#xC774; &#xC218;&#xD589; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. P6&#xC5D0;&#xC11C; 100 cDNAs (P6-P10)&#xACFC; p10&#xC5D0;&#xC11C; 200 cDNAs (P10-P6)-&#xBE80;&#xB41C; &#xB77C;&#xC774;&#xBE0C;&#xB7EC;&#xB9AC; &#xC21C;&#xC11C;&#xAC00; &#xBB34;&#xC791;&#xC704;&#xB85C; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC810; &#xC624; &#xC810; &#xC2EC;&#xC0AC; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4; &#xB41C; Cdnas&#xC758; &#xAC01; &#xBC1C;&#xB2EC; &#xB2E8;&#xACC4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; Cdnas&#xC758; &#xB300;&#xBD80;&#xBD84;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xCC28;&#xB3D9; &#xC2DD;&#xC744; &#xACF5;&#xAC1C; &#xD588;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7F0; &#xB2E4;&#xC74C; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4; &#xB41C; &#xD074;&#xB860;&#xC758; &#xBD84;&#xC11D; P6 &#xB77C;&#xC774;&#xBE0C;&#xB7EC;&#xB9AC;&#xB294; &#xB192;&#xC740; &#xBD84;&#xC790; GAP43 &#xB610;&#xB294; vimentin &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xB4F1; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xCD08;&#xAE30;&#xC5D0; &#xD45C;&#xD604;&#xC5D0; &#xD48D;&#xBD80; &#xD558; &#xAC8C; &#xBCF4;&#xC600;&#xB2E4;. &#xB300;&#xC870;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C;, P10 &#xB77C;&#xC774;&#xBE0C;&#xB7EC;&#xB9AC;&#xAC00; &#xD3EC;&#xD568; &#xC8FC;&#xB85C; &#xBD84;&#xC790; &#xC911;&#xC559; &#xC2E0; &#xACBD;&#xACC4; &#xAD00;&#xB828; myelin &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xB4F1; &#xAC1C;&#xBC1C;&#xC758; &#xB098;&#xC911; &#xB2E8;&#xACC4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD45C;&#xD604;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xACB0;&#xACFC; SSH &#xCC28;&#xB3D9; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xD558;&#xB294; &#xB370; &#xC801;&#xD569; &#xD55C; &#xBC29;&#xBC95;&#xC744; &#xAC1C;&#xBC1C; IC&#xC5D0;&#xC11C; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xD45C;&#xD604;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C;, &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xACB0;&#xACFC; &#xC804;&#xACFC; &#xC544;&#xB9C8;&#xC5D0; &#xCC38;&#xC5EC; &#xC911;&#xC778; axonal &#xD30C;&#xC0DD;&#xBB3C; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC758; &#xC77C;&#xBD80;&#xB97C; &#xB4E3;&#xACE0;&#xC758; &#xBC1C;&#xBCD1;&#xC5D0; IC &#xAC1C;&#xBC1C;&#xC5D0; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xBD84;&#xC790;&#xB97C; &#xB2E4;&#xB8E8;&#xB294; &#xCD94;&#xAC00; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xB97C; &#xC704;&#xD55C; &#xAE30;&#xCD08;&#xB97C; &#xC81C;&#xACF5; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xAC1C;&#xBC1C; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xC5F4; &#xB4F1; colliculus &#xCC28;&#xB3D9; &#xD45C;&#xD604;&#xB41C; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xC2DD;&#xBCC4;.

Aunque lesionadas las neuronas del col&iacute;culo inferior (IC) Mostrar una robusta axonal consecuencia a trav&eacute;s de un sitio de la lesi&oacute;n en d&iacute;a postnatal seis (P6) in vitro y son capaces de re-innervate sus c&eacute;lulas diana, lesionadas neuronas de IC P10 son incapaces de regenerar sus axones a trav&eacute;s del sitio de la lesi&oacute;n. Este fracaso de regeneraci&oacute;n axonal ha sido atribuida a un aumento de la expresi&oacute;n de mol&eacute;culas inhibidoras en tejido end&oacute;geno, durante el desarrollo. Como un primer paso para identificar tales mol&eacute;culas inhibidoras, el actual estudio divulga el aislamiento de mol&eacute;culas expresadas diferencialmente en el IC durante el desarrollo. Un Hibridaci&oacute;n Sustractiva bidireccional (delantero y posterior) supresi&oacute;n (SSH) fue realizado en tejido de IC entre etapas P6 y P10. Cien cDNAs de P6 (P6-P10) y 200 cDNAs de P10 (P10-P6)-resta bibliotecas fueron ordenadas al azar. Una proyecci&oacute;n de dot-blot de cDNAs secuenciado revel&oacute; la expresi&oacute;n diferencial para la mayor&iacute;a de estos cDNAs en su etapa de desarrollo respectivo. Entonces, el an&aacute;lisis de secuenciadas clones mostr&oacute; que eso Biblioteca P6 fue altamente enriquecido en mol&eacute;culas expresadas temprano en el desarrollo, como las prote&iacute;nas GAP43 o vimentina. Por el contrario, la biblioteca P10 conten&iacute;a principalmente mol&eacute;culas expresadas en estadios avanzados de desarrollo en el sistema nervioso central, tales como prote&iacute;nas relacionadas con la mielina. Nuestros resultados muestran que SSH es un m&eacute;todo adecuado para identificar diferencialmente expresa genes en el desarrollo de la IC. Adem&aacute;s, estos resultados proporcionan una base para continuar sus estudios con mol&eacute;culas implicadas en el desarrollo de IC antes y en el inicio de la audiencia, algunos de los que estar probablemente involucrado en el mecanismo de extensi&oacute;n axonal.

Identificaci&oacute;n de genes expresados diferencialmente en el col&iacute;culo inferior de rat&oacute;n en desarrollo.

Src &#x5BB6;&#x65CF;&#x916A;&#x6C28;&#x9178;&#x6FC0;&#x9176;&#x662F;&#x91CD;&#x8981;&#x4FE1;&#x53F7;&#x4E2D;&#x795E;&#x7ECF;&#x7EC6;&#x80DE;&#x751F;&#x957F;&#x9525;&#x3001; &#x9176;&#x548C;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x6709;&#x7275;&#x8FDE;&#x8F74;&#x7A81;&#x7684;&#x6307;&#x5BFC; &#xFF1B;&#x4F46;&#x662F;&#xFF0C;&#x8BE6;&#x7EC6;&#x7684;&#x672C;&#x5730;&#x5316;&#x3001; &#x8D29;&#x8FD0;&#x548C; Src &#x6FC0;&#x9176;&#x7684;&#x6D3B;&#x751F;&#x957F;&#x9525;&#x7EC6;&#x80DE;&#x529F;&#x80FD;&#x90FD;&#x4E0D;&#x6E05;&#x695A;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x514B;&#x9686;&#x4E86;&#x4E24;&#x79CD;&#x65B0;&#x578B;&#x6D77;&#x5154; Src &#x6FC0;&#x9176;&#xFF0C;&#x79F0;&#x4E3A; Src1 &#x548C; Src2&#xFF0C;&#x548C;&#x6211;&#x4EEC;&#x6309;&#x6D3B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6210;&#x50CF;&#x6280;&#x672F;&#x3001; &#x514D;&#x75AB;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5316;&#x5B66;&#x6280;&#x672F;&#x548C;&#x5206;&#x998F;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x663E;&#x793A;&#x5176;&#x534F;&#x4F1A;&#x4E0E;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8D28;&#x819C;&#x548C;&#x5FAE;&#x7BA1;&#x9AA8;&#x67B6;&#x4E2D;&#x751F;&#x957F;&#x9525;&#x3002;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x7684; Src2 &#x88AB;&#x6D53;&#x7F29;&#x7684;&#x4F8B;&#x8BC1;&#x7684;&#x63D0;&#x793A;&#x3002;&#x6709;&#x8DA3;&#x7684;&#x662F;&#xFF0C;Src2 &#x589E;&#x5F3A;&#x7EFF;&#x8272;&#x8367;&#x5149;&#x86CB;&#x767D;&#x6297;&#x4F53;&#x9633;&#x6027;&#x4F53;&#x819C;&#x548C; tubulovesicular &#x7ED3;&#x6784;&#x7ECF;&#x8FC7;&#x4ECB;&#x5BFC;&#x5FAE;&#x7BA1;&#x7684;&#x8FD0;&#x52A8;&#xFF0C;&#x4E14;&#x4E2D;&#x592E;&#x57DF;&#x4E2D;&#x53CC;&#x5411;&#x4E3B;&#x8981;&#x9006;&#x884C;&#x5728;&#x5916;&#x56F4;&#x7684;&#x57DF;&#x4E2D;&#x3002;&#x8981;&#x8FDB;&#x4E00;&#x6B65;&#x6D4B;&#x8BD5;&#x4E2D;&#x8D29;&#x5356;&#x751F;&#x957F;&#x9525;&#x7684; Src &#x7684;&#x5FAE;&#x7BA1;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#xFF0C;nocodazole &#x6216;&#x957F;&#x6625;&#x82B1;&#x78B1;&#x6CBB;&#x7597;&#xFF0C;&#x7ED3;&#x679C;&#x4E2D;&#x6240;&#x6709;&#x751F;&#x957F;&#x9525;&#x57DF; Src2 &#x7EC6;&#x80DE;&#x819C;&#x6C34;&#x5E73;&#x589E;&#x52A0;&#x8D2B;&#x5FAE;&#x7BA1;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x6570;&#x636E;&#x8868;&#x660E;&#xFF0C;&#x5FAE;&#x7BA1;&#x901A;&#x8FC7;&#x8C03;&#x89E3;&#x9006;&#x884C;&#x56DE;&#x6536;&#x7684; endocytosed Src&#x3002; &#x8868;&#x8FBE;&#x8F83;&#x957F;&#x7684;&#x4F8B;&#x8BC1;&#x4E00;&#x6D3B;&#x52A8;&#x7A81;&#x51FA;&#x4ECE;&#x8F83;&#x5C0F;&#x7684;&#x751F;&#x957F;&#x9525;&#x7684; Src2 &#x7ED3;&#x679C;&#x7275;&#x8FDE; Src2 &#x4E2D;&#x63A7;&#x5236;&#x5927;&#x5C0F;&#x7684;&#x4F8B;&#x8BC1;&#x548C;&#x5E72;&#x9884;&#x8C03;&#x8282;&#x6D3B;&#x52A8; Src &#x5728;&#x7EC6;&#x80DE;&#x819C;&#x7A33;&#x6001;&#x6C34;&#x5E73;&#x3002;

&#x5FAE;&#x7BA1;&#x4ECB;&#x5BFC; Src &#x916A;&#x6C28;&#x9178;&#x6FC0;&#x9176;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x751F;&#x957F;&#x9525;&#x8D29;&#x5356;&#x3002;

Src family tyrosine kinases are important signaling enzymes in the neuronal growth cone, and they have been implicated in axon guidance; however, the detailed localization, trafficking, and cellular functions of Src kinases in live growth cones are unclear. Here, we cloned two novel Aplysia Src kinases, termed Src1 and Src2, and we show their association with both the plasma membrane and the microtubule cytoskeleton in the growth cone by live cell imaging, immunocytochemistry, and cell fractionation. Activated Src2 is enriched in filopodia tips. Interestingly, Src2-enhanced green fluorescent protein-positive endocytic vesicles and tubulovesicular structures undergo microtubule-mediated movements that are bidirectional in the central domain and mainly retrograde in the peripheral domain. To further test the role of microtubules in Src trafficking in the growth cone, microtubules were depleted with either nocodazole or vinblastine treatment, resulting in an increase in Src2 plasma membrane levels in all growth cone domains. Our data suggest that microtubules regulate the steady-state level of active Src at the plasma membrane by mediating retrograde recycling of endocytosed Src. Expression of constitutively active Src2 results in longer filopodia that protrude from smaller growth cones, implicating Src2 in controlling the size of filopodia and lamellipodia.

Microtubule-mediated Src tyrosine kinase trafficking in neuronal growth cones.

Tyrosine kinases Src de la famille sont importants enzymes de signalisation dans le c&#xF4;ne de croissance neuronale, et ils ont &#xE9;t&#xE9; impliqu&#xE9;s dans le guidage axonal, mais la localisation d&#xE9;taill&#xE9;e, le trafic et les fonctions cellulaires de kinases Src dans les c&#xF4;nes de croissance en direct ne sont pas claires. Ici, nous avons clon&#xE9; deux nouveaux aplysie kinases Src, appel&#xE9; SRC1 et SRC2, et nous montrons leur association &#xE0; la fois avec la membrane plasmique et le cytosquelette de microtubules dans le c&#xF4;ne de croissance par imagerie des cellules vivantes, immunocytochimie, et le fractionnement cellulaire. Activated SRC2 est enrichi en conseils filopodes. Fait int&#xE9;ressant, SRC2-am&#xE9;lior&#xE9;s fluorescente verte v&#xE9;sicules d&#x26;#39;endocytose des prot&#xE9;ines positif et des structures tubulo subissent les microtubules m&#xE9;diation mouvements qui sont bidirectionnel dans le domaine central et surtout r&#xE9;trograde dans le domaine p&#xE9;riph&#xE9;rique. Pour tester davantage le r&#xF4;le des microtubules dans le trafic de Src dans le c&#xF4;ne de croissance, les microtubules ont &#xE9;t&#xE9; &#xE9;puis&#xE9;s soit avec le nocodazole ou le traitement vinblastine, r&#xE9;sultant en une augmentation des niveaux de SRC2 la membrane plasmique dans tous les domaines c&#xF4;ne de croissance. Nos donn&#xE9;es sugg&#xE8;rent que les microtubules de r&#xE9;guler le niveau de l&#x26;#39;&#xE9;tat d&#x26;#39;&#xE9;quilibre Src active &#xE0; la membrane plasmique par la m&#xE9;diation de recyclage r&#xE9;trograde de endocytose Src. Expression de constitutivement actif SRC2 entra&#xEE;ne plus filopodes qui font saillie &#xE0; partir de c&#xF4;nes de croissance plus petites, impliquant SRC2 &#xE0; contr&#xF4;ler la taille de filopodes et lamellipodes.

Microtubules induite par le trafic tyrosine kinase Src dans les c&#xF4;nes de croissance neuronaux

Src Familie Tyrosin-Kinasen sind wichtige Enzyme in der neuronaler Wachstumskegel signalisieren und sie haben im Axon Guidance; impliziert worden die genaue Lokalisierung, Menschenhandel und Zellfunktionen des Src-Kinasen in Leben Wachstum Zapfen sind jedoch unklar. Hier wir geklont zwei neuartige Aplysia Src-Kinasen, genannt Src1 und Src2, und wir zeigen ihrer Verbindung mit der Plasmamembran und Microtubule Zytoskeletts in dem Wachstumskegel von live Cell Imaging, Immunzytochemie und Zelle Fraktionierung. Aktivierte Src2 ist in Filopodium-Tipps angereichert. Interessanterweise werden Src2 erh&ouml;hter gr&uuml;n fluoreszierende Protein-Positive endocytic Bl&auml;schen und Tubulovesicular Strukturen Microtubule-vermittelten Bewegungen, die sind bidirektional in der zentralen Dom&auml;ne und vor allem in der Peripherie Dom&auml;ne retrograde, unterzogen. Um die Rolle der Mikrotubuli in Src den Wachstumskegel Menschenhandel weiter zu testen, wurden Mikrotubuli mit entweder Nocodazole oder Vinblastin Aufbringung auf eine Zunahme der Src2 Plasmamembran Ebenen in allen Wachstum Kegel Dom&auml;nen ersch&ouml;pft. Unsere Daten zeigen, dass Mikrotubuli der station&auml;ren Ebene aktiv src an die Plasmamembran regulieren durch Vermittlung retrograde recycling von Endocytosed Src. Ausdruck der konstitutiv aktive Src2-Ergebnisse in l&auml;ngeren Filopodium, die aus kleinere Zapfen mit Wachstum herauszuragen Nicht&uuml;bernahme von Src2 bei der Kontrolle der Gr&ouml;&szlig;e der Filopodium und Lamellipodium.

Microtubule-vermittelte Src-Tyrosinkinase Menschenhandel neuronale Wachstum Zapfen.

Src famiglia tirosina chinasi sono importanti enzimi nel cono di crescita neuronale, di segnalazione e sono stati implicati nel Consiglio dell&#39;assone; Tuttavia, la localizzazione dettagliata, traffico e funzioni cellulari della chinasi Src nei coni di crescita dal vivo sono poco chiare. Qui, abbiamo clonato due chinasi di Aplysia Src romanzo, definite Src1 e Src2, e mostriamo loro associazione con la membrana del plasma e del citoscheletro dei microtubuli nel cono di crescita da live cell imaging, immunocitochimica e frazionamento delle cellule. Src2 attivato &egrave; arricchito in filopodia suggerimenti. &Egrave; interessante notare che, enhanced Src2 verde fluorescente proteina-positivi endocitico vescicole e delle strutture tubulovesicular subiscono movimenti microtubule-mediata che sono bidirezionali nel dominio centrale e retrogrado, principalmente nel dominio periferico. Per testare ulteriormente il ruolo dei microtubuli in Src tratta il cono di crescita, microtubuli sono stati esauriti con trattamento nocodazole o la vinblastina, risultanti in un aumento dei livelli di Src2 membrana plasmatica in tutti i domini di cono di crescita. I nostri dati suggeriscono che microtubuli regolano il livello di steady-state di Src attivi presso la membrana plasmatica di mediazione retrograda riciclaggio di endocytosed Src. espressione dei risultati di Src2 costitutivamente attivi in filopodia pi&ugrave; lungo che sporgono da piccoli coni di crescita, implicando Src2 nel controllo delle dimensioni di filopodia e lamellipodia.

Microtubule-mediata Src tirosina chinasi traffico nei coni di crescita neuronale.

Src&#x30D5;&#x30A1;&#x30DF;&#x30EA;&#x30FC;&#x30C1;&#x30ED;&#x30B7;&#x30F3;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x306F;&#x3001;&#x795E;&#x7D4C;&#x6210;&#x9577;&#x5186;&#x9310;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x9175;&#x7D20;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x3089;&#x306F;&#x8EF8;&#x7D22;&#x30AC;&#x30A4;&#x30C0;&#x30F3;&#x30B9;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x304C;&#x3001;&#x8A73;&#x7D30;&#x306A;&#x5C40;&#x5728;&#x3001;&#x4EBA;&#x8EAB;&#x58F2;&#x8CB7;&#x3001;&#x30E9;&#x30A4;&#x30D6;&#x6210;&#x9577;&#x5186;&#x9310;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;Src&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306F;&#x4E0D;&#x660E;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x4E8C;&#x3064;&#x306E;&#x65B0;&#x3057;&#x3044;&#x30A2;&#x30E1;&#x30D5;&#x30E9;&#x30B7;Src&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x3092;&#x30AF;&#x30ED;&#x30FC;&#x30CB;&#x30F3;&#x30B0;&#x3057;&#x3001;src1&#x304A;&#x3088;&#x3073;src2&#x3068;&#x547C;&#x3070;&#x308C;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x751F;&#x7D30;&#x80DE;&#x30A4;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B8;&#x30F3;&#x30B0;&#x3001;&#x514D;&#x75AB;&#x7D30;&#x80DE;&#x5316;&#x5B66;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x5206;&#x753B;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x6210;&#x9577;&#x5186;&#x9310;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x819C;&#x3068;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x7BA1;&#x7D30;&#x80DE;&#x9AA8;&#x683C;&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x3068;&#x306E;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;SRC2&#x306F;&#x3001;&#x7CF8;&#x72B6;&#x4EEE;&#x8DB3;&#x306E;&#x5148;&#x7AEF;&#x306B;&#x6FC3;&#x7E2E;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x8208;&#x5473;&#x6DF1;&#x3044;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3001;src2&#x306E;&#x5F37;&#x5316;&#x7DD1;&#x8272;&#x86CD;&#x5149;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x967D;&#x6027;&#x306E;&#x30A8;&#x30F3;&#x30C9;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x5C0F;&#x80DE;&#x3068;tubulovesicular&#x69CB;&#x9020;&#x306F;&#x3001;&#x4E2D;&#x592E;&#x306E;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x306E;&#x53CC;&#x65B9;&#x5411;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x5468;&#x8FBA;&#x9818;&#x57DF;&#x3067;&#x4E3B;&#x306B;&#x9006;&#x884C;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x7BA1;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x305F;&#x52D5;&#x304D;&#x3092;&#x53D7;&#x3051;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306A;&#x308B;&#x6210;&#x9577;&#x5186;&#x9310;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;Src&#x306E;&#x58F2;&#x8CB7;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x7BA1;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x30C6;&#x30B9;&#x30C8;&#x3059;&#x308B;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x7BA1;&#x306F;&#x3001;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306E;&#x6210;&#x9577;&#x5186;&#x9310;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x306E;SRC2&#x7D30;&#x80DE;&#x819C;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x306E;&#x5897;&#x52A0;&#x3092;&#x3082;&#x305F;&#x3089;&#x3057;&#x3001;&#x30CE;&#x30B3;&#x30C0;&#x30BE;&#x30FC;&#x30EB;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x30D3;&#x30F3;&#x30D6;&#x30E9;&#x30B9;&#x30C1;&#x30F3;&#x51E6;&#x7406;&#x306E;&#x3044;&#x305A;&#x308C;&#x304B;&#x3067;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306E;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x306F;&#x3001;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x7BA1;&#x306F;&#x3001;&#x30A8;&#x30F3;&#x30C9;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;Src&#x306E;&#x9006;&#x884C;&#x30EA;&#x30B5;&#x30A4;&#x30AF;&#x30EB;&#x3092;&#x4EF2;&#x4ECB;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x7D30;&#x80DE;&#x819C;&#x3067;&#x6D3B;&#x6027;Src&#x306E;&#x5B9A;&#x5E38;&#x72B6;&#x614B;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x304A;&#x52E7;&#x3081;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x7CF8;&#x72B6;&#x4EEE;&#x8DB3;&#x3084;&#x8449;&#x72B6;&#x4EEE;&#x8DB3;&#x306E;&#x30B5;&#x30A4;&#x30BA;&#x3092;&#x5236;&#x5FA1;&#x3059;&#x308B;&#x306B;SRC2&#x306E;&#x304C;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3057;&#x3001;&#x5C0F;&#x3055;&#x304F;&#x6210;&#x9577;&#x5186;&#x9310;&#x304B;&#x3089;&#x7A81;&#x51FA;&#x9577;&#x3044;&#x7CF8;&#x72B6;&#x4EEE;&#x8DB3;&#x306E;&#x6052;&#x5E38;&#x7684;&#x6D3B;&#x6027;src2&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306E;&#x8868;&#x73FE;&#x3002;

&#x795E;&#x7D4C;&#x6210;&#x9577;&#x5186;&#x9310;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x7BA1;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x305F;Src&#x30C1;&#x30ED;&#x30B7;&#x30F3;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E;&#x4EBA;&#x8EAB;&#x58F2;&#x8CB7;

Src &#xAC00;&#xC871; tyrosine kinases&#xB294; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC131;&#xC7A5; &#xC6D0;&#xBFD4;&#xC5D0; &#xD6A8;&#xC18C;&#xB97C; &#xC2E0;&#xD638; &#xBC0F; &#xCD95; &#xC0AD; &#xC9C0;&#xCE68;;&#xC5D0; &#xC5F0;&#xB8E8; &#xB418;&#xC5B4; &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, &#xC138;&#xBD80; &#xC9C0;&#xC5ED;&#xD654;, &#xC778;&#xC2E0; &#xB9E4;&#xB9E4;, &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xB77C;&#xC774;&#xBE0C; &#xC131;&#xC7A5; &#xC6D0;&#xBFD4;&#xC5D0;&#xC11C; Src kinases&#xC758; &#xC138;&#xD3EC; &#xAE30;&#xB2A5; &#xBA85;&#xD655; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; Src1 &#xBC0F; s r c 2, &#xB418; &#xB098; &#xB450; &#xC18C;&#xC124; Aplysia Src kinases&#xC744; &#xBCF5;&#xC81C; &#xD558; &#xACE0; &#xB77C;&#xC774;&#xBE0C; &#xC138;&#xD3EC; &#xC774;&#xBBF8;&#xC9D5;, immunocytochemistry, &#xBC0F; &#xC138;&#xD3EC; &#xBD84;&#xBCC4; &#xBC95;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC131;&#xC7A5; &#xC6D0;&#xBFD4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD50C;&#xB77C;&#xC988;&#xB9C8; &#xBA64;&#xBE0C;&#xB808;&#xC778;&#xACFC; microtubule cytoskeleton&#xC640; &#xD568;&#xAED8; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xD611;&#xD68C;&#xB97C; &#xC0B4;&#xD3B4;&#xBCF4;&#xACA0;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xB41C; Src2 filopodia &#xD301;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD48D;&#xC131; &#xD558; &#xAC8C;. &#xD765;&#xBBF8;&#xB86D;&#xAC8C;&#xB3C4;, Src2 &#xAC15;&#xD654; &#xB41C; &#xB179;&#xC0C9; &#xD615;&#xAD11; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC591;&#xC131; endocytic &#xC18C;&#xD3EC; &#xBC0F; tubulovesicular &#xAD6C;&#xC870;&#xB294; &#xC911;&#xC559; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC591;&#xBC29;&#xD5A5; &#xBC0F; &#xC8FC;&#xB85C; &#xC8FC;&#xBCC0; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778;&#xC5D0; &#xC5ED;&#xD589; &#xD558;&#xB294; microtubule &#xC911;&#xC7AC; &#xC6C0;&#xC9C1;&#xC784;&#xC744; &#xBC1B; &#xB2E4;. Microtubules &#xC5ED;&#xD560; Src &#xC131;&#xC7A5; &#xC6D0;&#xBFD4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC778;&#xC2E0; &#xB9E4;&#xB9E4;&#xC5D0; &#xCD94;&#xAC00; &#xD14C;&#xC2A4;&#xD2B8;&#xB97C; microtubules nocodazole &#xB610;&#xB294; vinblastine &#xCE58;&#xB8CC;, &#xBAA8;&#xB4E0; &#xC131;&#xC7A5; &#xC6D0;&#xBFD4; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778; Src2 &#xD50C;&#xB77C;&#xC988;&#xB9C8; &#xBA64;&#xBE0C;&#xB808;&#xC778; &#xB808;&#xBCA8; &#xC99D;&#xAC00;&#xC5D0; &#xB530;&#xB978; &#xACE0;&#xAC08; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xB370;&#xC774;&#xD130; microtubules endocytosed Src. &#xC791;&#xC740; &#xC131;&#xC7A5; &#xC6D0;&#xBFD4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB0B4; &#xB2E4; &#xD558;&#xB294; &#xB354; &#xAE34; filopodia constitutively &#xD65C;&#xC131; Src2 &#xACB0;&#xACFC;&#xC758; &#xC2DD; Src2 filopodia &#xBC0F; lamellipodia&#xC758; &#xD06C;&#xAE30; &#xC870;&#xC808;&#xC5D0; &#xC5F0;&#xB8E8;&#xC758; &#xC5ED;&#xD589; &#xC7AC;&#xD65C;&#xC6A9;&#xC744; &#xC911;&#xC7AC; &#xD558; &#xC5EC; &#xC6D0;&#xD615;&#xC9C8; &#xB9C9;&#xC5D0; &#xD65C;&#xC131; Src&#xC758; &#xC548;&#xC815; &#xC0C1;&#xD0DC; &#xC218;&#xC900;&#xC744; &#xC870;&#xC808; &#xD558;&#xC2DC;&#xAE30; &#xBC14;&#xB78D;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Microtubule &#xC911;&#xC7AC; Src tyrosine kinase &#xC2E0;&#xACBD; &#xC131;&#xC7A5; &#xC6D0;&#xBFD4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC778;&#xC2E0; &#xB9E4;&#xB9E4;.

Src tirosina quinasas de la familia son importantes enzimas de se&#xF1;alizaci&#xF3;n en el cono de crecimiento neuronal, y que han sido implicados en el direccionamiento del ax&#xF3;n, sin embargo, la localizaci&#xF3;n detallada, el tr&#xE1;fico y las funciones celulares de las quinasas Src en los conos de crecimiento en vivo no son claras. En este caso, hemos clonado dos nuevos Aplysia quinasas Src, denominado SRC1 y Src2, y nos muestran su asociaci&#xF3;n tanto con la membrana plasm&#xE1;tica y los microt&#xFA;bulos del citoesqueleto en el cono de crecimiento por im&#xE1;genes de c&#xE9;lulas vivas, inmunocitoqu&#xED;mica y fraccionamiento de la c&#xE9;lula. Activado Src2 se enriquece en las puntas de filopodios. Curiosamente, Src2 mejorados con ves&#xED;culas verdes fluorescentes de la prote&#xED;na-positivo endoc&#xED;tica y estructuras tubulovesicular someterse a los microt&#xFA;bulos mediada por los movimientos que son bidireccionales en el &#xE1;mbito central y sobre todo retroceso en el &#xE1;mbito perif&#xE9;rico. Para probar a&#xFA;n m&#xE1;s el papel de los microt&#xFA;bulos en el tr&#xE1;fico de Src en el cono de crecimiento, los microt&#xFA;bulos se agotaron, ya sea con o tratamiento nocodazole vinblastina, resultando en un aumento en los niveles de Src2 la membrana plasm&#xE1;tica en todos los &#xE1;mbitos de crecimiento del cono. Nuestros datos sugieren que los microt&#xFA;bulos regular el nivel de estado estacionario de Src activa en la membrana plasm&#xE1;tica por mediaci&#xF3;n de reciclaje retr&#xF3;grado de endocitosis Src. Expresi&#xF3;n de constitutivamente activos SRC2 resultados en ya filopodios que sobresalen de los conos de crecimiento m&#xE1;s peque&#xF1;as, que implican a Src2 en el control del tama&#xF1;o de filopodios y lamellipodia.

Microt&#xFA;bulos mediada por Src trata de la tirosina quinasa de los conos de crecimiento neuronal

&#x5C0F;&#x86CB;&#x767D; otospiralin &#x6700;&#x521D;&#x5DF2;&#x88AB;&#x786E;&#x5B9A;&#x4E3A;&#x5185;&#x8033;&#x7684;&#x7279;&#x5B9A;&#x5206;&#x5B50;&#x3002;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;&#x4EE4;&#x4EBA;&#x4FE1;&#x670D;&#x7684;&#x8BC1;&#x636E;&#x4ECE;&#x9AD8;&#x901A;&#x91CF;&#x6D4B;&#x5E8F;&#x9879;&#x76EE;&#x7684;&#x5EFA;&#x8BAE;&#xFF0C;otospiralin &#x53EF;&#x80FD;&#x8868;&#x793A;&#x5728;&#x4E2D;&#x67A2;&#x795E;&#x7ECF;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x4E2D;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x6D4B;&#x8BD5;&#x4E86;&#x8FD9;&#x4E00;&#x5047;&#x8BBE;&#x4F7F;&#x7528;&#x7ED3;&#x5408;&#x5206;&#x5B50;&#x751F;&#x7269;&#x5B66;&#x3001; &#x514D;&#x75AB;&#x5B66;&#x3001; &#x548C;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x5B66;&#x6280;&#x672F;&#xFF0C;&#x5E76;&#x53D1;&#x73B0;&#x8BE5; otospiralin &#x8868;&#x793A;&#x5728;&#x5C0F;&#x9F20;&#x4E2D;&#x67A2;&#x795E;&#x7ECF;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x7684;&#x8BB8;&#x591A;&#x5730;&#x533A;&#x3002;&#x539F;&#x4F4D;&#x6742;&#x4EA4;&#x548C;&#x514D;&#x75AB;&#x7EC4;&#x5316;&#x663E;&#x793A;&#xFF0C;otospiralin &#x4EE5;&#x5E7F;&#x6CDB;&#x8868;&#x793A;&#x7684;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4F53;&#x548C;&#x795E;&#x7ECF;&#x80F6;&#x8D28;&#x3002;&#x5927;&#x8111;&#x76AE;&#x8D28;&#x8D85;&#x5FAE;&#x7ED3;&#x6784;&#x89C2;&#x5BDF;&#x4F4D;&#x4E8E;&#x5C0F;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x5728;&#x9760;&#x8FD1; perikarya &#x4E2D;&#x7684;&#x819C;&#x6027;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5668;&#x7684;&#x795E;&#x7ECF;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x7A81;&#x89E6;&#x819C;&#x5185;, &#x9762;&#x548C;&#x661F;&#x5F62;&#x80F6;&#x8D28;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x4E2D;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7ED3;&#x679C;&#x90FD;&#x540C;&#x610F;&#x9884;&#x6D4B;&#x663E;&#x793A;&#x5355;&#x4E2A; N &#x7EC8;&#x7AEF;&#x8DE8;&#x819C;&#x87BA;&#x65CB;&#x57DF;&#x8DDF; C &#x603B;&#x7AD9;&#x80DE;&#x6D46;&#x5C3E;&#x5230;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x7684;&#x7ED3;&#x6784;&#x3002;&#x6709;&#x8DA3;&#x7684;&#x662F;&#xFF0C;&#x5728;&#x5927;&#x8111;&#x76AE;&#x5C42;&#xFF0C;&#x673A;&#x68B0;&#x5916;&#x4F24;&#x540E; 2 &#x5468; otospiralin &#x8868;&#x8FBE;&#x589E;&#x52A0;&#x5728;&#x661F;&#x5F62;&#x80F6;&#x8D28;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4F4D;&#x4E8E;&#x5185;&#x9644;&#x8FD1;&#x7AD9;&#x70B9;&#x7684;&#x635F;&#x4F24;&#xFF0C;&#x4F46;&#x4E0D;&#x662F;&#x5728;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x3002;&#x96C6;&#x4F53;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x89C2;&#x5BDF;&#x8868;&#x660E;&#xFF0C;otospiralin &#x53EF;&#x80FD;&#x53C2;&#x4E0E;&#x4FE1;&#x53F7;&#x901A;&#x8DEF;&#xFF0C;&#x5E76;&#x53EF;&#x5728;&#x4E2D;&#x67A2;&#x795E;&#x7ECF;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x635F;&#x4F24;&#x540E;&#x7684;&#x4FEE;&#x590D;&#x673A;&#x5236;&#x53D1;&#x6325;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;

Otospiralin &#x5185;&#x8033;&#x662F;&#x7279;&#x5B9A;&#x5417;&#xFF1F;&#x5728;&#x5C0F;&#x9F20;&#x8111;&#x4E2D;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x7684;&#x8BC1;&#x636E;&#x3002;

The small protein otospiralin has initially been identified as an inner ear specific molecule. However, compelling evidence from high throughput sequencing projects suggested that otospiralin is likely expressed in the central nervous system. Here, we tested this hypothesis using a combination of molecular biology, immunological, and histological techniques, and found that otospiralin is expressed in numerous regions of the central nervous system in mouse. In situ hybridization and immunohistochemistry revealed that otospiralin is widely expressed in neuronal cell bodies and glia. Ultrastructural observations in the cerebral cortex located the small protein in close proximity to membranous organelles in perikarya, the inner face of post-synaptic neuronal membranes, and in astrocytic processes. These results are in agreement with the predicted structure of the protein which revealed a single N-terminal transmembrane helix domain followed by a C-terminus cytosolic tail. Interestingly, 2 weeks after a mechanical trauma in the cerebral cortex, otospiralin expression increased in reactive astrocytes located within the vicinity of the site of injury, but not in neurons. Collectively, our observations suggest that otospiralin is possibly involved in signaling pathways, and could play a role in repair mechanisms subsequent to an injury in the central nervous system.

Is otospiralin inner ear specific? Evidence for its expression in mouse brain.

L&#39;otospiralin de la petite prot&eacute;ine a initialement &eacute;t&eacute; identifi&eacute;e comme une mol&eacute;cule sp&eacute;cifique de l&#39;oreille interne. Cependant, obligeant les preuves provenant des projets de s&eacute;quen&ccedil;age &agrave; haut d&eacute;bit a sugg&eacute;r&eacute; qu&#39;otospiralin est sans doute exprim&eacute; dans le syst&egrave;me nerveux central. Ici, nous avons test&eacute; cette hypoth&egrave;se en utilisant une combinaison de techniques histologiques et de biologie mol&eacute;culaire, immunologique et a conclu qu&#39;otospiralin est exprim&eacute; dans de nombreuses r&eacute;gions du syst&egrave;me nerveux central chez la souris. Immunohistochimie et hybridation in situ a r&eacute;v&eacute;l&eacute; qu&#39;otospiralin est largement exprim&eacute; dans les corps cellulaires neuronales et gliales. Observations ultrastructurales dans le cortex c&eacute;r&eacute;bral situ&eacute; la petite prot&eacute;ine &agrave; proximit&eacute; des organites membraneuses dans le p&eacute;ricaryon, la face interne des membranes neuronales post-synaptiques et dans les processus astrocytaires. Ces r&eacute;sultats sont en accord avec la structure pr&eacute;dite de la prot&eacute;ine qui a r&eacute;v&eacute;l&eacute; un domaine N-terminal h&eacute;lices transmembranaires suivi d&#39;une queue cytosolique de l&#39;extr&eacute;mit&eacute; C-terminale. Fait int&eacute;ressant, 2 semaines apr&egrave;s un traumatisme m&eacute;canique dans le cortex c&eacute;r&eacute;bral, l&#39;expression otospiralin augment&eacute; dans les astrocytes r&eacute;actifs situ&eacute;s &agrave; proximit&eacute; de l&#39;endroit de la blessure, mais pas dans les neurones. Collectivement, nos observations sugg&egrave;rent qu&#39;otospiralin est probablement impliqu&eacute; dans les voies de signalisation et pourrait jouer un r&ocirc;le dans les m&eacute;canismes de r&eacute;paration suite &agrave; une l&eacute;sion du syst&egrave;me nerveux central.

Oreille interne otospiralin est sp&eacute;cifique ? Preuve de son expression dans le cerveau de souris.

Das kleine Protein-Otospiralin wurde zun&auml;chst als ein Innenohr-spezifischen Molek&uuml;l identifiziert. Jedoch schlug &uuml;berzeugender Beweis von Hochdurchsatz-Sequenzierung-Projekten die Otospiralin wahrscheinlich in das zentrale Nervensystem ausgedr&uuml;ckt wird. Hier haben wir getestet, diese Hypothese mit einer Kombination der Molekularbiologie, immunologische, und histologische Techniken, und fand, dass dieser Otospiralin in zahlreichen Regionen des zentralen Nervensystems in Maus ausgedr&uuml;ckt wird. In situ-Hybridisierung und Immunhistochemie ergab, dass die Otospiralin weit in neuronalen Zelle K&ouml;rper und Glia ausgedr&uuml;ckt wird. Ultrastrukturelle Beobachtungen in der Hirnrinde liegt das kleine Protein, in unmittelbarer N&auml;he zum membran&ouml;se Organellen in Perikarya, die Innenseite der post-synaptic neuronalen Membranen und astrozytische Prozesse. Diese Ergebnisse sind im Einvernehmen mit der vorhergesagten Struktur des Proteins die eine N-terminalen Transmembran-Helix Dom&auml;ne gefolgt von einem Carboxyl-Terminus Zytosolische Schwanz offenbart. Interessanterweise erh&ouml;ht 2 Wochen nach einem mechanischen Trauma in der Hirnrinde, Otospiralin Ausdruck in reaktiven Astrozyten befindet sich in der N&auml;he des Standortes der Verletzung, aber nicht in Neuronen. Gemeinsam schlagen unsere Beobachtungen dieser Otospiralin Signalisierung Wege m&ouml;glicherweise beteiligt ist, und k&ouml;nnte eine Rolle in Reparaturmechanismen im Anschluss an eine Verletzung des zentralen Nervensystems.

Ist Otospiralin Innenohr spezifisch? Beweis f&uuml;r seinen Ausdruck im Gehirn der Maus.

Il otospiralin piccola proteina &egrave; stata identificata inizialmente come una molecola specifica dell&#39;orecchio interno. Tuttavia, prove da progetti di sequenziamento high throughput suggerito che otospiralin probabilmente &egrave; espressa nel sistema nervoso centrale. Qui, abbiamo testato questa ipotesi utilizzando una combinazione di tecniche istologiche e biologia molecolare, immunologico e trovato che otospiralin &egrave; espressa in numerose regioni del sistema nervoso centrale in mouse. Immunoistochimica ed ibridazione in situ ha rivelato che otospiralin &egrave; ampiamente espressa nei corpi cellulari neuronali e glia. Osservazioni ultrastrutturali nella corteccia cerebrale si trovano la piccola proteina in prossimit&agrave; di membranous organelli in perikarya, la faccia interna delle membrane dei neuroni e nei processi astrocitari. Questi risultati sono in accordo con la struttura della proteina che ha rivelato un singolo dominio transmembrana elica N-terminale seguito da una coda citosolica C-terminale prevista. &Egrave; interessante notare, 2 settimane dopo un trauma meccanico nella corteccia cerebrale, otospiralin espressione aumentata negli astrociti reattivi che si trova nelle vicinanze del sito della ferita, ma non nei neuroni. Collettivamente, le nostre osservazioni suggeriscono che otospiralin &egrave; eventualmente coinvolti nelle vie di segnalazione e potrebbe giocare un ruolo nei meccanismi di riparazione a seguito di una lesione del sistema nervoso centrale.

Otospiralin inner ear &egrave; specifico? Prove per la sua espressione nel cervello del mouse.

&#x5C0F;&#x3055;&#x306A;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA; otospiralin &#x306F;&#x5F53;&#x521D;&#x3001;&#x5185;&#x8033;&#x306E;&#x7279;&#x5B9A;&#x306E;&#x5206;&#x5B50;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x8B58;&#x5225;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;&#x8A3C;&#x62E0;&#x9AD8;&#x30B9;&#x30EB;&#x30FC;&#x30D7;&#x30C3;&#x30C8; &#x30B7;&#x30FC;&#x30B1;&#x30F3;&#x30B9; &#x30D7;&#x30ED;&#x30B8;&#x30A7;&#x30AF;&#x30C8;&#x304B;&#x3089;&#x305D;&#x306E; otospiralin &#x306F;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x4E2D;&#x67A2;&#x795E;&#x7D4C;&#x7CFB;&#x3067;&#x8868;&#x73FE;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x63D0;&#x6848;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x5206;&#x5B50;&#x751F;&#x7269;&#x5B66;&#x3001;&#x514D;&#x75AB;&#x5B66;&#x7684;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x7D44;&#x7E54;&#x5B66;&#x7684;&#x6280;&#x8853;&#x306E;&#x7D44;&#x307F;&#x5408;&#x308F;&#x305B;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x305D;&#x306E; otospiralin &#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306E;&#x4E2D;&#x67A2;&#x795E;&#x7D4C;&#x7CFB;&#x306E;&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x5730;&#x57DF;&#x3067;&#x8868;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x304C;&#x898B;&#x3064;&#x304B;&#x308A;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3053;&#x306E;&#x4EEE;&#x8AAC;&#x3092;&#x30C6;&#x30B9;&#x30C8;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;In situ &#x30CF;&#x30A4;&#x30D6;&#x30EA;&#x30C0;&#x30A4;&#x30BC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x514D;&#x75AB;&#x7D44;&#x7E54;&#x5316;&#x5B66;&#x795E;&#x7D4C;&#x7D30;&#x80DE;&#x4F53;&#x3068;&#x30B0;&#x30EA;&#x30A2;&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;&#x305D;&#x306E; otospiralin &#x3092;&#x5E83;&#x304F;&#x8868;&#x73FE;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x5927;&#x8133;&#x76AE;&#x8CEA;&#x306B;&#x95A2;&#x3059;&#x308B;&#x5FAE;&#x7D30;&#x69CB;&#x9020;&#x89B3;&#x5BDF;&#x5C0F;&#x3055;&#x306A;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306B;&#x8FD1;&#x63A5;&#x3059;&#x308B;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x5C0F;&#x5668;&#x5B98;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x3001;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x795E;&#x7D4C;&#x7D30;&#x80DE;&#x819C;&#x306E;&#x5185;&#x5074;&#x9762;&#x3068;&#x30A2;&#x30B9;&#x30C8;&#x30ED; &#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x3067;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F; C &#x672B;&#x7AEF;&#x306E;&#x30BE;&#x30EB;&#x6027;&#x7D30;&#x80DE;&#x8CEA;&#x30C6;&#x30FC;&#x30EB;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x7D9A;&#x304F;&#x5358;&#x4E00;&#x306E; N &#x672B;&#x7AEF;&#x819C;&#x8CAB;&#x901A;&#x30D8;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9; &#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x305F;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x4E88;&#x6E2C;&#x69CB;&#x9020;&#x3068;&#x4E00;&#x81F4;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x8208;&#x5473;&#x6DF1;&#x3044;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3001;&#x5927;&#x8133;&#x76AE;&#x8CEA;&#x306E;&#x6A5F;&#x68B0;&#x7684;&#x5916;&#x50B7;&#x5F8C; 2 &#x9031;&#x9593; otospiralin &#x5F0F;&#x5897;&#x52A0;&#x3057;&#x305F;&#x50B7;&#x5BB3;&#x306E;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x306E;&#x8FD1;&#x304F;&#x5185;&#x53CD;&#x5FDC;&#x6027;&#x30A2;&#x30B9;&#x30C8;&#x30ED; &#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x304C;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x3002;&#x4EE5;&#x4E0B;&#x3001;&#x7DCF;&#x79F0;&#x3057;&#x3066;&#x6211;&#x3005; &#x306E;&#x89B3;&#x6E2C;&#x306F;&#x3001;&#x305D;&#x306E; otospiralin &#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x30D1;&#x30B9;&#x306E;&#x95A2;&#x4E0E;&#x306E;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x3067;&#x3001;&#x4E2D;&#x67A2;&#x795E;&#x7D4C;&#x7CFB;&#x306E;&#x640D;&#x50B7;&#x5F8C;&#x4FEE;&#x5FA9;&#x6A5F;&#x69CB;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x679C;&#x305F;&#x3059;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x304A;&#x52E7;&#x3081;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x5185;&#x8033; otospiralin &#x7279;&#x5B9A;&#x3067;&#x3059;&#x304B;&#xFF1F;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x8133;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x305D;&#x306E;&#x8868;&#x73FE;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x8A3C;&#x62E0;&#x3002;

&#xC791;&#xC740; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; otospiralin &#xCC98;&#xC74C; &#xB0B4;&#xAC00; &#xD2B9;&#xC815; &#xBD84;&#xC790; &#xBC1C;&#xACAC; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, &#xACBD;&#xC7C1;&#xB825; &#xB192;&#xC740; &#xCC98;&#xB9AC;&#xB7C9; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2F1; &#xD504;&#xB85C;&#xC81D;&#xD2B8;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC99D;&#xAC70;&#xB294; otospiralin &#xAC00;&#xB2A5;&#xC131;&#xC774; &#xC911;&#xC559; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC870;&#xC9C1; &#xB2E8;&#xC704;&#xB85C; &#xC81C;&#xC548; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30;, &#xBD84;&#xC790; &#xC0DD;&#xBB3C;&#xD559;, &#xBA74;&#xC5ED;&#xD559;, &#xC870;&#xC9C1;&#xD559; &#xBC29;&#xBC95;&#xC758; &#xC870;&#xD569;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xD574;&#xB2F9; otospiralin &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4;&#xC5D0; &#xC911;&#xC559; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC758; &#xC218;&#xB9CE;&#xC740; &#xC9C0;&#xC5ED; &#xB2E8;&#xC704;&#xB85C; &#xBC1C;&#xACAC;&#xC774; &#xAC00;&#xC124;&#xC744; &#xD14C;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC81C;&#xC790;&#xB9AC; &#xAD50; &#xC7A1; &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xAE30;&#xC220; &#xADF8; otospiralin&#xC740; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC2DC;&#xCCB4; &#xBC0F; &#xBA85;&#xACFC; &#xB2E8;&#xC704;&#xB85C; &#xAD11;&#xBC94;&#xC704; &#xD558; &#xAC8C; &#xACF5;&#xAC1C; &#xD588;&#xB2E4;. &#xB300;&#xB1CC; &#xD53C; &#xC9C8;&#xC5D0;&#xC11C; ultrastructural &#xAD00;&#xCE21; &#xC704;&#xCE58; &#xAC00;&#xAE4C;&#xC774;&#xC5D0; perikarya, &#xC561;&#xCCB4;&#xB85C; organelles post-synaptic &#xC2E0;&#xACBD; &#xC138;&#xD3EC; &#xB9C9;&#xC758; &#xB0B4;&#xBD80; &#xC5BC;&#xAD74; &#xD558;&#xBA70; astrocytic &#xD504;&#xB85C;&#xC138;&#xC2A4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC791;&#xC740; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xACB0;&#xACFC; &#xB2E8;&#xC77C; N-&#xD130;&#xBBF8;&#xB110; &#xB9C9; &#xD6A1;&#xB2E8; &#xB098;&#xC120; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778; &#xB4A4;&#xC5D0; C-&#xB9D0;&#xB2E8; cytosolic &#xAF2C;&#xB9AC;&#xB294; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xC608;&#xCE21; &#xB41C; &#xAD6C;&#xC870;&#xC640; &#xC77C;&#xCE58; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD765;&#xBBF8;&#xB86D;&#xAC8C;&#xB3C4;, &#xB300;&#xB1CC; &#xD53C; &#xC9C8;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAE30;&#xACC4;&#xC801; &#xC678;&#xC0C1; &#xD6C4; 2 &#xC8FC; otospiralin &#xC2DD; &#xC99D;&#xAC00; &#xBD80;&#xC0C1; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8; &#xBD80;&#xADFC; &#xB0B4;&#xC5D0; &#xC788;&#xB294; &#xBC18;&#xC751;&#xC131; &#xC774;&#xB2E4; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xC2E0;&#xACBD;. &#xC9D1;&#xB2E8;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xAD00;&#xCC30; &#xADF8; otospiralin &#xC2E0;&#xD638; &#xACBD;&#xB85C;&#xC5D0; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xAC00;&#xB2A5; &#xD558; &#xAC8C; &#xCC38;&#xC5EC; &#xD558; &#xACE0; &#xC911;&#xC559; &#xC2E0;&#xACBD; &#xACC4;&#xD1B5;&#xC5D0; &#xBD80;&#xC0C1; &#xD6C4;&#xC18D; &#xBCF5;&#xAD6C; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xAC83;&#xC774; &#xC88B;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Otospiralin &#xB0B4;&#xAC00;? &#xC950;&#xC758; &#xB1CC;&#xC5D0; &#xADF8; &#xD45C;&#xD604;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC99D;&#xAC70;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

La peque&ntilde;a prote&iacute;na otospiralin se ha identificado inicialmente como una mol&eacute;cula espec&iacute;fica del o&iacute;do interno. Sin embargo, prueba de proyectos de secuenciaci&oacute;n de alto rendimiento convincente sugiere otospiralin es probable que se expresa en el sistema nervioso central. Aqu&iacute;, hemos probado esta hip&oacute;tesis usando una combinaci&oacute;n de la biolog&iacute;a molecular, inmunol&oacute;gico y t&eacute;cnicas histol&oacute;gicas y encontr&oacute; que otospiralin se expresa en numerosas regiones del sistema nervioso central en rat&oacute;n. Inmunohistoqu&iacute;mica e hibridaci&oacute;n in situ revelaron que otospiralin se expresa ampliamente en los cuerpos celulares neuronales y gliales. Observaciones ultraestructurales en la corteza cerebral encuentra la peque&ntilde;a prote&iacute;na en proximidad cercana a los organelos membranosos en perikarya, la cara interna de las membranas neuronales postsin&aacute;pticos y en los procesos astroc&iacute;ticos. Estos resultados concuerdan con la estructura prevista de la prote&iacute;na que revel&oacute; un &uacute;nico dominio de h&eacute;lice transmembrana de N-terminal, seguido por una cola citos&oacute;lica c-terminal. Curiosamente, dos semanas despu&eacute;s de un trauma mec&aacute;nico en la corteza cerebral, otospiralin expresi&oacute;n aument&oacute; en astrocitos reactivos situados en las proximidades del sitio de la lesi&oacute;n, pero no en las neuronas. Colectivamente, nuestras observaciones sugieren otospiralin est&aacute; posiblemente involucrado en v&iacute;as de se&ntilde;alizaci&oacute;n y podr&iacute;a desempe&ntilde;ar un papel en los mecanismos de reparaci&oacute;n tras una lesi&oacute;n en el sistema nervioso central.

&iquest;Es otospiralin o&iacute;do espec&iacute;fico? Evidencia de su expresi&oacute;n en cerebro de rat&oacute;n.

IgCAMs &#x548C;&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x7EC6;&#x80DE;&#x9AA8;&#x67B6;&#x5728;&#x795E;&#x7ECF;&#x7EC6;&#x80DE;&#x751F;&#x957F;&#x9525;&#x52A8;&#x529B;&#x548C;&#x6307;&#x5BFC;&#x4E2D;&#x53D1;&#x6325;&#x5173;&#x952E;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x4F46;&#x662F;&#xFF0C;&#x4E0D;&#x6E05;&#x695A;&#x5982;&#x4F55; IgCAM &#x53D7;&#x4F53;&#x6362;&#x80FD;&#x5668;&#x4ECE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8D28;&#x819C;&#x7684;&#x4FE1;&#x53F7;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x8BF1;&#x4F7F;&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x91CD;&#x5851;&#x3002;&#x4EE5;&#x5F80;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x8868;&#x660E;&#x5730;&#x65B9;&#x805A;&#x7C7B;&#x548C;&#x56FA;&#x5B9A;&#x5316;&#x7684; apCAM&#xFF0C;&#x6D77;&#x5154;&#x540C;&#x7CFB;&#x7269;&#x7684;&#x795E;&#x7ECF;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7C98;&#x9644;&#x5206;&#x5B50;&#xFF0C;&#x8BF1;&#x4F7F; Src &#x6FC0;&#x9176;&#x6D3B;&#x6027;&#x548C;&#x517B;&#x6B96;&#x6D77;&#x5154;&#x888B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x751F;&#x957F;&#x9525;&#x7684; F-&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x805A;&#x5408;&#x5916;&#x56F4;&#x7684;&#x57DF;&#x4E2D;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x60F3;&#x8981;&#x6D4B;&#x8BD5;&#x662F;&#x5426; Src &#x6FC0;&#x9176;&#x57FA;&#x677F;&#x548C;&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x8C03;&#x8282;&#x76AE;&#x5C42;&#x53EF;&#x80FD;&#x662F; Src &#x6D3B;&#x6027;&#x4E0E;&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x5927;&#x4F1A;&#x671F;&#x95F4; apCAM &#x4ECB;&#x5BFC;&#x751F;&#x957F;&#x9525;&#x6307;&#x5BFC;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x5206;&#x5B50;&#x8054;&#x7CFB;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x514B;&#x9686;&#x6D77;&#x5154;&#x76AE;&#x5C42;&#x548C;&#x663E;&#x793A;&#x5B83;&#x662F;&#x5728;&#x4E2D;&#x67A2;&#x795E;&#x7ECF;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x4E2D;&#x4E30;&#x5BCC;&#x3002;&#x751F;&#x957F;&#x9525;&#x7EC4;&#x5316;&#x67D3;&#x8272;&#x663E;&#x793A;&#x76AE;&#x5C42;&#x4E0E; F-&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x5728; filopodial &#x5305;&#x4E2D;&#x548C;&#x5E72;&#x9884;&#x7684;&#x524D;&#x6CBF;&#x5F3A;&#x5171;&#x7684;&#x5B9A;&#x4F4D;&#x3002;&#x7EC6;&#x80DE;&#x9AA8;&#x67B6;&#x7684;&#x6444;&#x52A8;&#x8868;&#x793A;&#x76AE;&#x5C42;&#x5206;&#x5E03;&#x5F88;&#x5927;&#x7A0B;&#x5EA6;&#x4E0A;&#x53D6;&#x51B3;&#x4E8E;&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x4E1D;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x79EF;&#x6781; Src colocalized &#x4E0E;&#x76AE;&#x5C42;&#x533A;&#x57DF;&#x7684;&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x5927;&#x4F1A;&#xFF0C;&#x5305;&#x62EC;&#x524D;&#x7F18;&#x548C;&#x4F8B;&#x8BC1;&#x7684;&#x63D0;&#x793A;&#x3002;&#x6700;&#x540E;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x6CE8;&#x610F;&#x5230;&#xFF0C;&#x76AE;&#x5C42;&#xFF0C;&#x50CF; F-&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x4ECB;&#x5BFC;&#x751F;&#x957F;&#x9525;&#x6307;&#x5BFC; apCAM &#x7C98;&#x9644;&#x7F51;&#x7AD9;&#x672C;&#x5730;&#x5316;&#x3002;&#x603B;&#x4E4B;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x6570;&#x636E;&#x8868;&#x660E;&#xFF0C;&#x76AE;&#x5C42;&#x662F;&#x8C03;&#x89E3;&#x5458;&#x7684; IgCAM &#x89E6;&#x53D1;&#x7684;&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x5927;&#x4F1A;&#x53C2;&#x4E0E;&#x751F;&#x957F;&#x9525;&#x52A8;&#x529B;&#x548C;&#x6307;&#x5BFC;&#x3002;

&#x76AE;&#x5C42;&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D; filopodial &#x4E0E; colocalizes &#x548C; IgCAM &#x7C98;&#x9644;&#x5730;&#x76D8;&#x5728;&#x6D77;&#x5154;&#x751F;&#x957F;&#x9525;&#x7D2F;&#x79EF;&#x3002;

Both IgCAMs and the actin cytoskeleton play critical roles in neuronal growth cone motility and guidance. However, it is unclear how IgCAM receptors transduce signals from the plasma membrane to induce actin remodeling. Previous studies have shown that local clustering and immobilization of apCAM, the Aplysia homolog of NCAM, induces Src kinase activity and F-actin polymerization in the peripheral domain of cultured Aplysia bag cell growth cones. Therefore, we wanted to test whether the Src kinase substrate and actin regulator cortactin could be a molecular link between Src activity and actin assembly during apCAM-mediated growth cone guidance. Here, we cloned Aplysia cortactin and showed that it is abundant in the nervous system. Immunostaining of growth cones revealed a strong colocalization of cortactin with F-actin in filopodial bundles and at the leading edge of lamellipodia. Perturbation of the cytoskeleton indicated that cortactin distribution largely depends on actin filaments. Furthermore, active Src colocalized with cortactin in regions of actin assembly, including leading edge and filopodia tips. Finally, we observed that cortactin, like F-actin, localizes to apCAM adhesion sites mediating growth cone guidance. Altogether, these data suggest that cortactin is a mediator of IgCAM-triggered actin assembly involved in growth cone motility and guidance.

Cortactin colocalizes with filopodial actin and accumulates at IgCAM adhesion sites in Aplysia growth cones.

Les deux IgCAMs et le cytosquelette d&#x26;#39;actine jouent un r&#xF4;le crucial dans la motilit&#xE9; du c&#xF4;ne de croissance neuronale et d&#x26;#39;orientation. Toutefois, il n&#x26;#39;est pas clair comment les r&#xE9;cepteurs IgCAM transduire des signaux de la membrane plasmique pour induire remodelage de l&#x26;#39;actine. Des &#xE9;tudes ant&#xE9;rieures ont montr&#xE9; que le regroupement local et l&#x26;#39;immobilisation de APCAM, l&#x26;#39;homologue de l&#x26;#39;aplysie NCAM, induit l&#x26;#39;activit&#xE9; kinase Src et F-polym&#xE9;risation de l&#x26;#39;actine dans le domaine de la culture p&#xE9;riph&#xE9;rique c&#xF4;nes de croissance chez l&#x26;#39;aplysie sac de cellules. Par cons&#xE9;quent, nous avons voulu tester si le substrat de kinase Src et cortactine r&#xE9;gulateur de l&#x26;#39;actine pourrait &#xEA;tre un lien mol&#xE9;culaire entre l&#x26;#39;activit&#xE9; de Src et l&#x26;#39;assemblage d&#x26;#39;actine au cours APCAM m&#xE9;di&#xE9;e par l&#x26;#39;orientation des c&#xF4;nes de croissance. Ici, nous avons clon&#xE9; l&#x26;#39;aplysie cortactine et a montr&#xE9; qu&#x26;#39;il est abondante dans le syst&#xE8;me nerveux. Immunomarquage des c&#xF4;nes de croissance a r&#xE9;v&#xE9;l&#xE9; une colocalisation forte de la cortactine avec F-actine en faisceaux filopodial et &#xE0; la fine pointe de lamellipodes. Perturbation du cytosquelette a indiqu&#xE9; que la distribution cortactine d&#xE9;pend en grande partie des filaments d&#x26;#39;actine. En outre, active Src colocalis&#xE9;s avec cortactine dans les r&#xE9;gions de l&#x26;#39;assemblage d&#x26;#39;actine, y compris de pointe et des conseils filopodes. Enfin, nous avons observ&#xE9; que cortactine, comme F-actine, se localise dans APCAM sites d&#x26;#39;adh&#xE9;sion de m&#xE9;diation d&#x26;#39;orientation des c&#xF4;nes de croissance. Au total, ces donn&#xE9;es sugg&#xE8;rent que cortactine est un m&#xE9;diateur de IgCAM d&#xE9;clench&#xE9;e par assemblage d&#x26;#39;actine impliqu&#xE9;s dans la motilit&#xE9; du c&#xF4;ne de croissance et d&#x26;#39;orientation.

Cortactine co-localise avec l&#x26;#39;actine Filopodial et s&#x26;#39;accumulent dans les Adh&#xE9;rence IgCAM dans les c&#xF4;nes de croissance chez l&#x26;#39;aplysie

Sowohl IgCAMs als auch das Aktin-Zytoskelett spielen wichtige Rollen in neuronale Wachstum Kegel Motilit&auml;t und Anleitung. Es ist jedoch unklar, wie die IgCAM Rezeptoren Signale von der Plasmamembran Aktin Umbau veranlassen zur&uuml;ckwirken. Fr&uuml;here Studien zeigten, dass lokale clustering und Immobilisierung von ApCAM, der Aplysia Homolog von NCAM, induziert Src-Kinase-Aktivit&auml;t und F-Actin Polymerisierung im peripheren Bereich des kultivierten Aplysia Tasche Zelle Wachstum Zapfen. Daher wollten wir testen, ob die Src Kinase Substrat und Actin Regler Cortactin eine molekulare Verbindung zwischen Src-Aktivit&auml;t und Aktin-Assembly w&auml;hrend der ApCAM-vermittelte Wachstum Kegel Anleitung sein k&ouml;nnte. Hier wir Aplysia Cortactin geklont und zeigte, dass es reichlich im Nervensystem ist. Immunf&auml;rbung von Wachstum Kegel ergab eine starke Kolokalisation von Cortactin mit F-Actin in Filopodial b&uuml;ndeln und an die Spitze der Lamellipodium. St&ouml;rung des Zytoskeletts zeigten, dass Cortactin Verteilung von Aktin-Filamenten weitgehend abh&auml;ngig ist. Dar&uuml;ber hinaus colocalized aktive Src mit Cortactin in Regionen der Aktin-Assembly, einschlie&szlig;lich Vorderkante und Filopodium Tipps. Schlie&szlig;lich beobachten wir, dass Cortactin, wie F-Actin, ApCAM Adh&auml;sion Websites Vermittlung Wachstum Kegel F&uuml;hrung lokalisiert. Insgesamt deuten diese Daten, dass Cortactin ein Vermittler von IgCAM ausgel&ouml;ste Aktin Versammlung Wachstum Kegel Motilit&auml;t und Anleitung beteiligt.

Cortactin colocalizes mit Filopodial-Aktin und sammelt IgCAM Adh&auml;sion Standorten in Aplysia Wachstum Zapfen.

Sia IgCAMs e il citoscheletro di actina svolgono un ruolo critico nella guida e crescita neuronale cono motilit&agrave;. Tuttavia, non &egrave; chiaro come IgCAM recettori trasducono segnali dalla membrana del plasma per indurre il rimodellamento dell&#39;actina. Studi precedenti hanno mostrato che cluster locali e l&#39;immobilizzazione della apCAM, l&#39;omologo di Aplysia di NCAM, induce l&#39;attivit&agrave; della chinasi Src e F-actina polimerizzazione nel dominio periferico dei coni di crescita di cellule di borsa Aplysia colte. Pertanto, abbiamo voluto verificare se la Src chinasi substrato e actina regolatore cortactin potrebbe essere un legame molecolare tra attivit&agrave; Src e assemblaggio dell&#39;actina durante la guida di cono di crescita apCAM-mediata. Qui, abbiamo clonato Aplysia cortactin e ha mostrato che &egrave; abbondante nel sistema nervoso. Immunocolorazione dei coni di crescita hanno rivelato una forte presenza di cortactin con F-actina in fasci di filopodial e all&#39;avanguardia di lamellipodia. Perturbazione del citoscheletro indicato che cortactin distribuzione dipende in gran parte da filamenti di actina. Inoltre, attivo Src colocalized con cortactin nelle regioni dell&#39;Assemblea dell&#39;actina, compresi suggerimenti filopodia e leading edge. Infine, abbiamo osservato che cortactin, come F-actina, localizza ai siti di adesione apCAM mediazione orientamento cono di crescita. Complessivamente, questi dati suggeriscono che cortactin &egrave; un mediatore di assemblaggio dell&#39;actina innescato IgCAM coinvolto nella guida e crescita cono motilit&agrave;.

Cortactin colocalizza con filopodial actina e si accumula in siti di adesione IgCAM nei coni di crescita di Aplysia.

IgCAMs&#x3068;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x7D30;&#x80DE;&#x9AA8;&#x683C;&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x306F;&#x3001;&#x795E;&#x7D4C;&#x6210;&#x9577;&#x5186;&#x9310;&#x306E;&#x904B;&#x52D5;&#x6027;&#x3068;&#x6307;&#x5C0E;&#x306B;&#x304A;&#x3044;&#x3066;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x679C;&#x305F;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x306F;IgCAM&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306F;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x306E;&#x30EA;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x3092;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3059;&#x308B;&#x7D30;&#x80DE;&#x819C;&#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x4FE1;&#x53F7;&#x3092;&#x4F1D;&#x9054;&#x3059;&#x308B;&#x65B9;&#x6CD5;&#x306F;&#x4E0D;&#x660E;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x4EE5;&#x524D;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x306F;apCAM&#x3001;NCAM&#x306E;&#x30A2;&#x30E1;&#x30D5;&#x30E9;&#x30B7;&#x306E;&#x30DB;&#x30E2;&#x30ED;&#x30B0;&#x306E;&#x30ED;&#x30FC;&#x30AB;&#x30EB;&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9;&#x30BF;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x3068;&#x56FA;&#x5B9A;&#x5316;&#x57F9;&#x990A;&#x30A2;&#x30E1;&#x30D5;&#x30E9;&#x30B7;&#x30D0;&#x30C3;&#x30B0;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x6210;&#x9577;&#x5186;&#x9310;&#x306E;&#x5468;&#x8FBA;&#x9818;&#x57DF;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;Src&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x6D3B;&#x6027;&#x304A;&#x3088;&#x3073;F-&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x306E;&#x91CD;&#x5408;&#x3092;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;Src&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x57FA;&#x8CEA;&#x3068;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x30EC;&#x30AE;&#x30E5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30BF;cortactin&#x304C;apCAM&#x5A92;&#x4ECB;&#x6210;&#x9577;&#x5186;&#x9310;&#x30AC;&#x30A4;&#x30C0;&#x30F3;&#x30B9;&#x6642;&#x306B;Src&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x3068;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x306E;&#x30A2;&#x30BB;&#x30F3;&#x30D6;&#x30EA;&#x9593;&#x306E;&#x5206;&#x5B50;&#x30EA;&#x30F3;&#x30AF;&#x306B;&#x306A;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x304B;&#x3069;&#x3046;&#x304B;&#x3092;&#x30C6;&#x30B9;&#x30C8;&#x3057;&#x305F;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x30A2;&#x30E1;&#x30D5;&#x30E9;&#x30B7;cortactin&#x3092;&#x30AF;&#x30ED;&#x30FC;&#x30CB;&#x30F3;&#x30B0;&#x3057;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x304C;&#x795E;&#x7D4C;&#x7CFB;&#x306B;&#x8C4A;&#x5BCC;&#x306B;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6210;&#x9577;&#x5186;&#x9310;&#x306E;&#x514D;&#x75AB;&#x67D3;&#x8272;&#x3067;&#x306F;&#x3001;filopodial&#x30D0;&#x30F3;&#x30C9;&#x30EB;&#x5185;&#x306E;F-&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x3068;&#x3057;&#x3001;&#x8449;&#x72B6;&#x4EEE;&#x8DB3;&#x306E;&#x5148;&#x7AEF;&#x3067;cortactin&#x306E;&#x5F37;&#x3044;&#x5C40;&#x5728;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x7D30;&#x80DE;&#x9AA8;&#x683C;&#x306E;&#x6442;&#x52D5;&#x306F;&#x3001;cortactin&#x5206;&#x5E03;&#x306F;&#x3001;&#x4E3B;&#x306B;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x30D5;&#x30A3;&#x30E9;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#x306B;&#x4F9D;&#x5B58;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x306A;Src&#x306F;&#x6700;&#x5148;&#x7AEF;&#x3068;&#x7CF8;&#x72B6;&#x4EEE;&#x8DB3;&#x306E;&#x5148;&#x7AEF;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x30A2;&#x30BB;&#x30F3;&#x30D6;&#x30EA;&#x306E;&#x5730;&#x57DF;&#x3067;&#x306F;&#x3001;cortactin&#x3068;&#x5171;&#x5C40;&#x5728;&#x3002;&#x6700;&#x5F8C;&#x306B;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;cortactin&#x306F;&#x3001;F-&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x3001;&#x6210;&#x9577;&#x5186;&#x9310;&#x30AC;&#x30A4;&#x30C0;&#x30F3;&#x30B9;&#x3092;&#x5A92;&#x4ECB;&#x3059;&#x308B;&#x63A5;&#x7740;&#x90E8;&#x4F4D;&#x3092;apCAM&#x306B;&#x5C40;&#x5728;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x5B8C;&#x5168;&#x306B;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x306F;&#x3001;cortactin&#x306F;&#x3001;&#x6210;&#x9577;&#x5186;&#x9310;&#x306E;&#x904B;&#x52D5;&#x6027;&#x3084;&#x6307;&#x5C0E;&#x306B;&#x95A2;&#x308F;&#x308B;IgCAM&#x30C8;&#x30EA;&#x30AC;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x30A2;&#x30BB;&#x30F3;&#x30D6;&#x30EA;&#x306E;&#x30E1;&#x30C7;&#x30A3;&#x30A8;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;

Cortactin&#x306F;Filopodial&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x3068;&#x5171;&#x5C40;&#x5728;&#x3059;&#x308B;&#x3068;&#x30A2;&#x30E1;&#x30D5;&#x30E9;&#x30B7;&#x306E;&#x6210;&#x9577;&#x5186;&#x9310;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;IgCAM&#x63A5;&#x7740;&#x90E8;&#x4F4D;&#x306B;&#x84C4;&#x7A4D;&#x3059;&#x308B;

Igcams&#xC640; &#xB9D0;&#xB77C; cytoskeleton &#xC2E0;&#xACBD; &#xC131;&#xC7A5; &#xC6D0;&#xBFD4; &#xC6B4;&#xB3D9; &#xC131; &#xBC0F; &#xC9C0;&#xB3C4;&#xC5D0; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xC7AC;&#xC0DD;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, &#xADF8;&#xAC83; &#xC544;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xBD84;&#xBA85; &#xC5B4;&#xB5BB;&#xAC8C; IgCAM &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; transduce &#xB9D0;&#xB77C; &#xB9AC; &#xBAA8;&#xB378;&#xB9C1; &#xC720;&#xB3C4; &#xD50C;&#xB77C;&#xC988;&#xB9C8; &#xB9C9;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC2E0;&#xD638;. &#xC774;&#xC804; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xB85C;&#xCEEC; &#xD074;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xD130;&#xB9C1; &#xBC0F; apCAM, &#xBCF4;&#xC548;, Aplysia &#xCCB4; immobilization Src &#xD0A4; &#xB2C8; &#xC544; &#xC81C; &#xD65C;&#xB3D9; &#xBC0F; &#xAD50;&#xC591;&#xB41C; Aplysia &#xAC00;&#xBC29; &#xC140; &#xC131;&#xC7A5; &#xC6D0;&#xBFD4;&#xC758; &#xC8FC;&#xBCC0; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778;&#xC758; F-&#xB9D0;&#xB77C; &#xD569; &#xC720;&#xB3C4; &#xAC83;&#xC73C;&#xB85C; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0AC;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; Src &#xB2C8; &#xAE30;&#xD310; &#xBC0F; &#xB9D0;&#xB77C; &#xB808; &#xADE4; &#xB808;&#xC774; &#xD130; cortactin Src &#xD65C;&#xB3D9;&#xACFC; apCAM &#xC911;&#xC7AC; &#xC131;&#xC7A5; &#xC6D0;&#xBFD4; &#xC9C0;&#xB3C4; &#xB9D0;&#xB77C; &#xC5B4;&#xC148;&#xBE14;&#xB9AC; &#xC0AC;&#xC774;&#xC758; &#xBD84;&#xC790; &#xB9C1;&#xD06C; &#xB420; &#xC218; &#xC788;&#xB294;&#xC9C0; &#xC5EC;&#xBD80;&#xB97C; &#xD14C;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xC2F6; &#xC5C8; &#xC5B4; &#xC694;. &#xC5EC;&#xAE30;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; Aplysia cortactin &#xBCF5;&#xC81C; &#xBC0F; &#xC2E0; &#xACBD;&#xACC4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD48D;&#xBD80;&#xD55C;&#xC740; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC8FC;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xC131;&#xC7A5; &#xC6D0;&#xBFD4;&#xC758; Immunostaining F &#xB9D0;&#xB77C; filopodial &#xBC88;&#xB4E4; &#xBC0F; lamellipodia&#xC758; &#xCCA8;&#xB2E8;&#xC5D0;&#xC11C; cortactin&#xC758; &#xAC15;&#xB825;&#xD55C; colocalization&#xC744; &#xACF5;&#xAC1C; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC12D; &#xB3D9; &#xB41C; cytoskeleton&#xC758; &#xD45C;&#xC2DC; cortactin &#xBC30;&#xD3EC; &#xD06C;&#xAC8C; &#xB9D0;&#xB77C; &#xD544; &#xB77C; &#xBA58; &#xD2B8;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xB2E4;&#xB985;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C;, &#xD65C;&#xC131; Src &#xB9D0;&#xB77C; &#xC5B4;&#xC148;&#xBE14;&#xB9AC;, &#xCCA8;&#xB2E8; filopodia &#xD301; &#xB4F1;&#xC758; &#xC9C0;&#xC5ED;&#xC5D0;&#xC11C; cortactin&#xC640; colocalized. &#xB9C8;&#xC9C0;&#xB9C9;&#xC73C;&#xB85C;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xAD00;&#xCC30; F &#xB9D0;&#xB77C; &#xCC98;&#xB7FC; &#xADF8; cortactin apCAM &#xC811;&#xCC29; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8; &#xC131;&#xC7A5; &#xC6D0;&#xBFD4; &#xC9C0;&#xCE68;&#xC744; &#xC911;&#xC7AC; localizes. &#xBAA8;&#xB450;, &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xB370;&#xC774;&#xD130;&#xB294; cortactin IgCAM &#xD2B8;&#xB9AC;&#xAC70; &#xB9D0;&#xB77C; &#xC5B4;&#xC148;&#xBE14;&#xB9AC; &#xC131;&#xC7A5; &#xC6D0;&#xBFD4; &#xC6B4;&#xB3D9; &#xC131; &#xBC0F; &#xC9C0;&#xB3C4;&#xC5D0; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C;&#xC758; &#xC911;&#xC7AC;&#xC790;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xAC83;&#xC774; &#xC88B;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Cortactin filopodial &#xB9D0;&#xB77C;&#xC640; colocalizes &#xBC0F; IgCAM &#xC811;&#xCC29; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8; Aplysia &#xC131;&#xC7A5; &#xC6D0;&#xBFD4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xCD95;&#xC801;.

Ambos IgCAMs y el citoesqueleto de actina desempe&#xF1;an un papel cr&#xED;tico en la motilidad cono de crecimiento neuronal y la orientaci&#xF3;n. Sin embargo, no est&#xE1; claro c&#xF3;mo los receptores IgCAM transducci&#xF3;n de se&#xF1;ales desde la membrana plasm&#xE1;tica para inducir la remodelaci&#xF3;n de la actina. Estudios anteriores han demostrado que la agrupaci&#xF3;n local y la inmovilizaci&#xF3;n de APCAM, el hom&#xF3;logo de NCAM Aplysia, induce la actividad de quinasa Src y polimerizaci&#xF3;n F-actina en el dominio perif&#xE9;rica de conos cultivadas bolsa Aplysia crecimiento de las c&#xE9;lulas. Por lo tanto, quisimos comprobar si el sustrato de quinasa Src y cortactin regulador de la actina podr&#xED;a ser un v&#xED;nculo molecular entre la actividad de Src y montaje de actina durante APCAM mediada por la orientaci&#xF3;n cono de crecimiento. En este caso, hemos clonado Aplysia cortactin y demostr&#xF3; que es abundante en el sistema nervioso. La inmunotinci&#xF3;n de los conos de crecimiento mostr&#xF3; una fuerte colocalizaci&#xF3;n de cortactin con F-actina en haces filopodial y en el borde de ataque de lamellipodia. La perturbaci&#xF3;n del citoesqueleto indica que la distribuci&#xF3;n de cortactin depende en gran medida los filamentos de actina. Adem&#xE1;s, activa Src colocalized con cortactin en las regiones de reuni&#xF3;n, incluyendo la actina borde de ataque y consejos filopodios. Por &#xFA;ltimo, se observ&#xF3; que cortactin, al igual que la F-actina, se localiza en APCAM sitios de adhesi&#xF3;n que median orientaci&#xF3;n cono de crecimiento. En conjunto, estos datos sugieren que cortactin es un mediador de IgCAM activada por la Asamblea de actina participan en la motilidad cono de crecimiento y orientaci&#xF3;n.

Cortactin colocalizes con la actina filopodial y se acumula en sitios de adhesi&#xF3;n IgCAM en los conos de crecimiento Aplysia

&#x963F;&#x5C14;&#x8328;&#x6D77;&#x9ED8;&#x75C5; (AD) &#x7684;&#x8BCA;&#x65AD;&#x4E3B;&#x8981;&#x4F9D;&#x9760;&#x4E34;&#x5E8A;&#x6807;&#x51C6;&#x7684;&#x53EF;&#x80FD;&#x4E0E;&#x53EF;&#x80FD;&#x7684; AD NINCDS ADRDRA &#x6240;&#x5B9A;&#x4E49;&#x3002;&#x5916;&#x5730;&#x62FC;&#x547D;&#x7F3A;&#x4E4F;&#x7684;&#x751F;&#x7269;&#x6807;&#x8BB0;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x534F;&#x52A9; AD &#x8BCA;&#x65AD;&#x4E0E;&#x6CBB;&#x7597;&#x6548;&#x679C;&#x7684;&#x6838;&#x67E5;&#x3002;&#x6839;&#x636E;&#x5206;&#x5B50;&#x548C;&#x751F;&#x5316;&#x6807;&#x5FD7;&#x7269;&#x7684;&#x963F;&#x5C14;&#x8328;&#x6D77;&#x9ED8;&#x6C0F;&#x75C5;&#xFF0C;&#x624D;&#x6709;&#x8D44;&#x683C;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x751F;&#x7269;&#x6807;&#x5FD7;&#x7269;&#x95EE;&#x9898;&#x793A;&#x4F8B;&#x5FC5;&#x987B;&#x575A;&#x6301;&#x67D0;&#x4E9B;&#x57FA;&#x672C;&#x8981;&#x6C42;&#xFF0C;&#x5DE5;&#x4F5C;&#x7EC4;&#x7684;&#x534F;&#x5546;&#x4E00;&#x81F4;&#x610F;&#x89C1;&#x62A5;&#x544A;&#x5305;&#x62EC;&#x7684;&#x80FD;&#x529B;&#xFF1A; &#x53CD;&#x6620; AD &#x75C5;&#x7406;&#x548C;&#x533A;&#x5206;&#x5B83;&#x4ECE;&#x5176;&#x4ED6;&#x75F4;&#x5446;&#x75C7; 80%&#x654F;&#x611F;&#x6027; &#xFF1B;&#x662F;&#x53EF;&#x9760;&#x7684;&#x548C;&#x53EF;&#x91CD;&#x73B0; &#xFF1B;&#x5F88;&#x5BB9;&#x6613;&#x5730;&#x6267;&#x884C;&#x548C;&#x5206;&#x6790; &#xFF1B;&#x4ECD;&#x7136;&#x76F8;&#x5BF9;&#x4FBF;&#x5B9C;&#x3002;Beta secretases &#x662F;&#x5728; AD &#x53D1;&#x75C5;&#x4E2D;&#x7684;&#x5173;&#x952E;&#x9176;&#x3002;&#x9274;&#x4E8E;&#x5176;&#x4E3B;&#x8981;&#x4F5C;&#x7528;&#x662F;&#x8111; amyloidogenesis &#x548C;&#x5176;&#x65E0;&#x5904;&#x4E0D;&#x5728;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x5F0F;&#xFF0C;&#x5176;&#x4E2D;&#x4E00;&#x4E2A;&#x53EF;&#x8003;&#x8651;&#x6D4B;&#x91CF;&#x5916;&#x56F4; BACE1 &#x6C34;&#x5E73;&#x548C;&#x6D3B;&#x6027;&#x751F;&#x7269;&#x6807;&#x5FD7;&#x7269;&#x7684;&#x5E7F;&#x544A;&#xFF0C;&#x5982;&#x6267;&#x884C;&#x8111;&#x548C;&#x8111;&#x810A;&#x6DB2;&#x4E2D;&#x3002;&#x4F46;&#x662F;&#xFF0C;&#x5F88;&#x5C11;&#x4EBA;&#x4E86;&#x89E3;&#x5916;&#x56F4;&#x548C;&#x5916;&#x56F4; BACE1 &#x662F;&#x5426;&#x662F;&#x5728; AD &#x53D1;&#x75C5;&#x673A;&#x5236;&#x4E2D;&#x6240;&#x6D89;&#x53CA;&#x6216;&#x955C;&#x50CF; AD &#x8FDB;&#x5C55;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x4EFB;&#x4F55;&#x8C03;&#x67E5;&#x7684;&#x4E0D;&#x91CD;&#x70B9;&#x76D1;&#x6D4B;&#x5468;&#x8FB9; BACE1 BACE1 &#x6291;&#x5236;&#x5242;&#x7684;&#x6548;&#x7387;&#x8BC4;&#x4F30;&#x4E34;&#x5E8A;&#x8BD5;&#x9A8C;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x4E2D;&#x7684;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x3002;&#x95EE;&#x9898;&#x7684;&#x90E8;&#x5206;&#x539F;&#x56E0;&#x53EF;&#x80FD;&#x88AB;&#x7531;&#x4E8E;&#x7F3A;&#x4E4F;&#x654F;&#x611F;&#x7684;&#x5206;&#x5B50;&#x5DE5;&#x5177;&#x662F;&#x7EDD;&#x5BF9;&#x5FC5;&#x8981;&#x7684;&#x4F7F;&#x7528; BACE1 &#x4F5C;&#x4E3A;&#x751F;&#x7269;&#x6807;&#x8BB0;&#x7269;&#x3002;&#x8FD9;&#x9879;&#x68C0;&#x8BA8;&#x6211;&#x4EEC;&#x8BC4;&#x4F30;&#x8FDB;&#x5C55;&#x548C;&#x5F00;&#x53D1; BACE1 &#x4F5C;&#x4E3A;&#x751F;&#x7269;&#x6807;&#x8BB0;&#x7269;&#x7684;&#x5E7F;&#x544A;&#x5728;&#x4E0D;&#x540C;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x4E2D;&#x7684;&#x53EF;&#x884C;&#x6027;&#x3002;

&#x4F5C;&#x4E3A;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x751F;&#x7269;&#x6807;&#x5FD7;&#x7269;&#x963F;&#x5C14;&#x8328;&#x6D77;&#x9ED8;&#x75C5; BACE1&#x3002;

The diagnosis of Alzheimer's disease (AD) relies principally on clinical criteria for probable and possible AD as defined by the NINCDS-ADRDRA. The field is desperately lacking of biological markers to assist with AD diagnosis and verification of treatment efficacy. According to the Consensus Report of the Working Group on Molecular and Biochemical Markers of Alzheimer's Disease, in order to qualify as a biomarker the sample in question must adhere to certain basic requirements, including the ability to: reflect AD pathology and differentiate it from other dementia with an 80% sensitivity; be reliable and reproducible; be easy to perform and analyze; remain relatively inexpensive. Beta secretases are crucial enzymes in the pathogenesis of AD. Given its primary role in brain amyloidogenesis and its ubiquitous expression, one may consider measuring peripheral BACE1 levels and activity as biomarkers of AD, like performed in the brain and cerebrospinal fluid. However, very little is known about the periphery and whether peripheral BACE1 is involved in AD pathogenesis or mirrors AD progression. Moreover, no investigation has focused on the possibility of monitoring peripheral BACE1 to assess the efficiency of BACE1 inhibitors during the course of clinical trials. Part of the problem may be attributed to the lack of sensitive molecular tools which are absolutely necessary to use BACE1 as a biomarker. In this review we evaluate the progress and feasibility of developing BACE1 as a biomarker for AD in different tissues.

BACE1 as a potential biomarker for Alzheimer's disease.

Le diagnostic de la maladie d&#39;Alzheimer (ma) s&#39;appuie principalement sur des crit&egrave;res cliniques pour AD probable et possible, tel que d&eacute;fini par le NINCDS-ADRDRA. Le domaine manque d&eacute;sesp&eacute;r&eacute;ment de marqueurs biologiques pour aider &agrave; la v&eacute;rification de l&#39;efficacit&eacute; du traitement et de diagnostic AD. Selon le rapport de Consensus du groupe de travail sur mol&eacute;culaire et maladie d&#39;Alzheimer de la des marqueurs biochimique, afin de se qualifier comme un biomarqueur de l&#39;&eacute;chantillon en question doit se conformer &agrave; certaines exigences de base, notamment la possibilit&eacute; de : refl&eacute;ter la pathologie de la ma et les diff&eacute;rencier des autres formes de d&eacute;mence avec une sensibilit&eacute; de 80 % ; fiable et reproductible ; faciles &agrave; effectuer et les analyser ; restent relativement peu co&ucirc;teux. Secr&eacute;tases b&ecirc;ta sont des enzymes essentiels dans la pathogen&egrave;se de la ma. Compte tenu de son r&ocirc;le principal dans la mol&eacute;cule du cerveau et de son expression omnipr&eacute;sente, on peut consid&eacute;rer les niveaux BACE1 p&eacute;riph&eacute;riques de mesure et d&#39;activit&eacute; comme biomarqueurs de l&#39;AD, effectu&eacute;e dans le cerveau et le liquide c&eacute;phalo-rachidien. Cependant, tr&egrave;s peu est connu sur la p&eacute;riph&eacute;rie ainsi que les p&eacute;riph&eacute;riques BACE1 est impliqu&eacute; dans la pathog&eacute;nie de l&#39;AD ou refl&egrave;te la progression de l&#39;AD. En outre, aucune &eacute;tude n&#39;a port&eacute; sur la possibilit&eacute; de contr&ocirc;ler les p&eacute;riph&eacute;riques BACE1 afin d&#39;&eacute;valuer l&#39;efficacit&eacute; des inhibiteurs de la BACE1 au cours des essais cliniques. Une partie du probl&egrave;me peut &ecirc;tre attribu&eacute;e &agrave; l&#39;absence de sensibles outils mol&eacute;culaires qui sont absolument n&eacute;cessaires pour utiliser BACE1 comme biomarqueur. Dans cette revue, nous &eacute;valuons le progr&egrave;s et la faisabilit&eacute; d&#39;am&eacute;nager BACE1 comme biomarqueur pour publicit&eacute; dans diff&eacute;rents tissus.

BACE1 comme biomarqueur potentiel pour la maladie d&#39;Alzheimer.

Die Diagnose der Alzheimer-Krankheit (AD) st&uuml;tzt sich haupts&auml;chlich auf klinische Kriterien f&uuml;r wahrscheinlich und m&ouml;glich Anzeige gem&auml;&szlig; der NINCDS-ADRDRA. Das Feld fehlt dringend biologische Marker, mit AD-Diagnose und &Uuml;berpr&uuml;fung der Wirksamkeit der Behandlung zu unterst&uuml;tzen. Laut dem Konsens-Bericht der Arbeitsgruppe f&uuml;r Molekulare und biochemische Marker der Alzheimer-Krankheit, um sich zu qualifizieren, als Biomarker die betreffende Probe bestimmte Grundvoraussetzungen erf&uuml;llen muss, einschlie&szlig;lich der F&auml;higkeit,: reflektieren AD Pathologie und unterscheiden es von anderen Demenz mit einer Sensitivit&auml;t von 80 %; verl&auml;sslich und reproduzierbar sein; einfach sein, ausf&uuml;hren und analysieren; bleiben Sie relativ preiswert. Beta-Sekretasen sind wichtige Enzyme in der Pathogenese von AD. Ihre prim&auml;re Rolle im Gehirn Amyloidogenesis und seinen allgegenw&auml;rtigen Ausdruck gegeben, kann man pr&uuml;fen, Messung der periphere BACE1 Ebenen und Aktivit&auml;t als Biomarker der Anzeige, wie ausgef&uuml;hrt, im Gehirn und im Liquor cerebrospinalis. Jedoch ist sehr wenig bekannt &uuml;ber die Peripherie und ob periphere BACE1 AD Pathogenese beteiligt ist oder Spiegel AD Fortschreiten. Dar&uuml;ber hinaus konzentriert sich keine Untersuchung auf die M&ouml;glichkeit der Kontrolle der peripheren BACE1 um die Effizienz von BACE1 Inhibitoren im Verlauf der klinischen Studien zu beurteilen. Teil des Problems kann der Mangel an sensiblen molekularen Instrumente zugeschrieben werden die absolut notwendigen BACE1 als Biomarker verwenden. In diesem Bericht bewerten wir den Fortschritt und die Machbarkeit BACE1 als Biomarker f&uuml;r Anzeige in verschiedenen Geweben zu entwickeln.

BACE1 als potenzielle Biomarker f&uuml;r Alzheimer-Krankheit.

La diagnosi della malattia di Alzheimer (AD) si basa principalmente su criteri clinici per annuncio probabile e possibile come definito dal NINCDS-ADRDRA. Il campo &egrave; disperatamente privo dei marcatori biologici per aiutare con la diagnosi di AD e verifica dell&#39;efficacia del trattamento. Secondo il Consensus Report del gruppo di lavoro su molecolare e malattia di Alzheimer di marcatori biochimica, al fine di qualificarsi come un biomarker il campione in questione dovr&agrave; essere conformi a determinati requisiti di base, compresa la possibilit&agrave; di: riflettere patologia annuncio e differenziarlo da altre demenza con una sensibilit&agrave; del 80%; essere affidabile e riproducibile; essere facile da eseguire e analizzare; rimangono relativamente poco costoso. Secretases beta sono enzimi cruciali nella patogenesi dell&#39;annuncio. Dato il suo ruolo primario nel cervello amyloidogenesis e la sua espressione onnipresente, si pu&ograve; considerare misurazione dei livelli di BACE1 periferici e attivit&agrave; come biomarcatori di annuncio, eseguita nel cervello e nel fluido cerebrospinale. Tuttavia, molto poco si sa circa la periferia e periferici BACE1 &egrave; coinvolto nella patogenesi di annuncio o specchi progressione AD. Inoltre, nessuna indagine &egrave; concentrata sulla possibilit&agrave; di monitoraggio periferico BACE1 per valutare l&#39;efficacia degli inibitori BACE1 durante il corso degli studi clinici. Parte del problema pu&ograve; essere attribuito alla mancanza di sensibili strumenti molecolari che sono assolutamente necessarie per utilizzare BACE1 come un biomarker. In questa recensione abbiamo valutare il progresso e la fattibilit&agrave; di sviluppo BACE1 come un biomarker per annuncio in diversi tessuti.

BACE1 come un potenziale biomarcatore per il morbo di Alzheimer.

&#x30A2;&#x30EB;&#x30C4;&#x30CF;&#x30A4;&#x30DE;&#x30FC;&#x75C5; (AD) &#x306E;&#x8A3A;&#x65AD;&#x306E;&#x81E8;&#x5E8A;&#x57FA;&#x6E96;&#x4E3B;&#x306E;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x3068;&#x53EF;&#x80FD;&#x306A;&#x5E83;&#x544A;&#x306E; NINCDS ADRDRA &#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5B9A;&#x7FA9;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x306B;&#x4F9D;&#x5B58;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30D5;&#x30A3;&#x30FC;&#x30EB;&#x30C9;&#x306F;&#x3001;&#x5FC5;&#x6B7B;&#x306B; AD &#x306E;&#x8A3A;&#x65AD;&#x3068;&#x6CBB;&#x7642;&#x52B9;&#x679C;&#x306E;&#x691C;&#x8A3C;&#x3092;&#x652F;&#x63F4;&#x3059;&#x308B;&#x751F;&#x7269;&#x5B66;&#x7684;&#x30DE;&#x30FC;&#x30AB;&#x30FC;&#x306E;&#x6B20;&#x3051;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5206;&#x5B50;&#x751F;&#x7269;&#x5B66;&#x3068;&#x751F;&#x5316;&#x5B66;&#x7684;&#x30DE;&#x30FC;&#x30AB;&#x30FC;&#x306E;&#x30A2;&#x30EB;&#x30C4;&#x30CF;&#x30A4;&#x30DE;&#x30FC;&#x306E;&#x75BE;&#x60A3;&#x30D0;&#x30A4;&#x30AA; &#x30DE;&#x30FC;&#x30AB;&#x30FC;&#x554F;&#x984C;&#x306E;&#x30B5;&#x30F3;&#x30D7;&#x30EB;&#x306F;&#x3001;&#x7279;&#x5B9A;&#x306E;&#x57FA;&#x672C;&#x7684;&#x306A;&#x8981;&#x4EF6;&#x306B;&#x5F93;&#x3046;&#x5FC5;&#x8981;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x4FEE;&#x98FE;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;&#x30EF;&#x30FC;&#x30AD;&#x30F3;&#x30B0; &#x30B0;&#x30EB;&#x30FC;&#x30D7;&#x306E;&#x30B3;&#x30F3;&#x30BB;&#x30F3;&#x30B5;&#x30B9;&#x306E;&#x5831;&#x544A;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x3068;&#x80FD;&#x529B;&#x3092;&#x542B;&#x3080;: AD &#x75C5;&#x7406;&#x5B66;&#x3092;&#x53CD;&#x6620;&#x3057;&#x3001;&#x4ED6;&#x306E;&#x75F4;&#x5446;&#x3068; 80 &#xFF05; &#x306E;&#x611F;&#x5EA6;; &#x304B;&#x3089;&#x305D;&#x308C;&#x3092;&#x533A;&#x5225;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x4FE1;&#x983C;&#x6027;&#x304C;&#x9AD8;&#x304F;&#x3001;&#x518D;&#x73FE;&#x6027;&#x306E;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;;&#x5B9F;&#x884C;&#x3057;&#x3001;&#x5206;&#x6790;&#x3092;&#x7C21;&#x5358;&#x306B;&#x3059;&#x308B;;&#x6BD4;&#x8F03;&#x7684;&#x5B89;&#x4FA1;&#x306A;&#x307E;&#x307E;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x30D9;&#x30FC;&#x30BF; secretases AD &#x306E;&#x75C5;&#x614B;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x9175;&#x7D20;&#x3067;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x305D;&#x306E;&#x8133;&#x30A2;&#x30DF;&#x30ED;&#x30A4;&#x30C9;&#x7DDA;&#x7DAD;&#x5F62;&#x6210;&#x3068;&#x305D;&#x306E;&#x30E6;&#x30D3;&#x30AD;&#x30BF;&#x30B9;&#x8868;&#x73FE;&#x3067;&#x4E3B;&#x8981;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x8003;&#x3048;&#x308B;&#x3068;&#x3001;1 &#x3064;&#x672B;&#x68A2; BACE1 &#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3092;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x691C;&#x8A0E;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3057;&#x3001;&#x30D0;&#x30A4;&#x30AA; &#x30DE;&#x30FC;&#x30AB;&#x30FC;&#x306E;&#x5E83;&#x544A;&#x3001;&#x597D;&#x304D;&#x306A;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x3001;&#x8133;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x9AC4;&#x6DB2;&#x3067;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D3;&#x30C6;&#x30A3;&#x3092;&#x5B9F;&#x884C;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;&#x307B;&#x3068;&#x3093;&#x3069;&#x5468;&#x8FBA;&#x3068;&#x672B;&#x68A2; BACE1 AD &#x306E;&#x767A;&#x75C7;&#x306B;&#x95A2;&#x308F;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x304B;&#x3069;&#x3046;&#x304B;&#x3001;&#x307E;&#x305F;&#x306F; AD &#x306E;&#x9032;&#x884C;&#x3092;&#x30DF;&#x30E9;&#x30FC;&#x304B;&#x3069;&#x3046;&#x304B;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x77E5;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x307E;&#x305F;&#x3001;&#x8ABF;&#x67FB;&#x52B9;&#x7387; BACE1 &#x963B;&#x5BB3;&#x5264;&#x306E;&#x81E8;&#x5E8A;&#x8A66;&#x9A13;&#x306E;&#x904E;&#x7A0B;&#x3092;&#x8A55;&#x4FA1;&#x3059;&#x308B;&#x672B;&#x68A2; BACE1 &#x30E2;&#x30CB;&#x30BF;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x306E;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x306B;&#x96C6;&#x4E2D;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x306A;&#x3044;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x554F;&#x984C;&#x306E;&#x4E00;&#x90E8;&#x306F; BACE1 &#x30DE;&#x30FC;&#x30AB;&#x30FC;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x4F7F;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306F;&#x7D76;&#x5BFE;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x3067;&#x3059;&#x6A5F;&#x5BC6;&#x306E;&#x5206;&#x5B50;&#x30C4;&#x30FC;&#x30EB;&#x306E;&#x6B20;&#x5982;&#x306B;&#x8D77;&#x56E0;&#x3059;&#x308B;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x30EC;&#x30D3;&#x30E5;&#x30FC;&#x3067;&#x9032;&#x6B69;&#x3068; BACE1 &#x30D0;&#x30A4;&#x30AA; &#x30DE;&#x30FC;&#x30AB;&#x30FC;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x306E;&#x5E83;&#x544A;&#x306E;&#x3055;&#x307E;&#x3056;&#x307E;&#x306A;&#x7D44;&#x7E54;&#x3067;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x306E;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x3092;&#x8A55;&#x4FA1;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30A2;&#x30EB;&#x30C4;&#x30CF;&#x30A4;&#x30DE;&#x30FC;&#x75C5;&#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x306A;&#x30D0;&#x30A4;&#x30AA; &#x30DE;&#x30FC;&#x30AB;&#x30FC;&#x3068;&#x3057;&#x3066; BACE1&#x3002;

&#xC54C; &#xCE20; &#xD558;&#xC774; &#xBA38; &#xBCD1; (AD)&#xC758; &#xC9C4;&#xB2E8; &#xAC00;&#xB2A5;&#xC131; &#xBC0F; &#xAC00;&#xB2A5;&#xD55C; &#xAD11;&#xACE0;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; NINCDS ADRDRA&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC815;&#xC758; &#xB41C; &#xB300;&#xB85C; &#xC784;&#xC0C1; &#xAE30;&#xC900;&#xC5D0; &#xC8FC;&#xB85C; &#xC758;&#xC874; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD544;&#xB4DC;&#xB294; &#xD544;&#xC0AC;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xAD11;&#xACE0; &#xC9C4;&#xB2E8; &#xBC0F; &#xCE58;&#xB8CC; &#xD6A8;&#xB2A5;&#xC758; &#xD655;&#xC778;&#xC744; &#xB3D5;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xC0DD;&#xBB3C; &#xD559;&#xC801; &#xB9C8;&#xCEE4; &#xBD80;&#xC871; &#xD558;&#xB2E4;. &#xB2A5;&#xB825;&#xC744; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558; &#xC5EC; &#xBD84;&#xC790; &#xBC0F; biomarker &#xC0D8;&#xD50C; &#xBB38;&#xC81C;&#xC758; &#xD2B9;&#xC815; &#xAE30;&#xBCF8;&#xC801;&#xC778; &#xC694;&#xAD6C; &#xC0AC;&#xD56D;&#xC744; &#xC900;&#xC218; &#xD574;&#xC57C; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;&#xC73C;&#xB85C; &#xC790;&#xACA9;&#xC744; &#xC8FC;&#xAE30; &#xC704;&#xD558;&#xC5EC; &#xC0DD; &#xD654; &#xD655; &#xC801;&#xC778; &#xB9C8;&#xCEE4;&#xC5D0;&#xC758; Alzheimer&#xC758; &#xC9C8;&#xBCD1;&#xC5D0; &#xC791;&#xC5C5; &#xADF8;&#xB8F9;&#xC758; &#xD569;&#xC758; &#xBCF4;&#xACE0;&#xC11C;: &#xAD11;&#xACE0; &#xBCD1; &#xB9AC;&#xB97C; &#xBC18;&#xC601; &#xD558; &#xACE0; &#xB2E4;&#xB978; &#xCE58; &#xB9E4; 80% &#xAC10;&#xB3C4;;&#xC640; &#xCC28;&#xBCC4;&#xD654; &#xC548;&#xC815;&#xC801;&#xC774; &#xACE0; &#xC7AC;&#xD604;; &#xC27D;&#xAC8C; &#xC218;&#xD589; &#xD558; &#xACE0; &#xBD84;&#xC11D; &#xD558; &#xACE0;; &#xC0C1;&#xB300;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC800;&#xB834; &#xD55C; &#xC720;&#xC9C0;. &#xBCA0;&#xD0C0; secretases &#xAD11;&#xACE0; &#xBCD1; &#xC778;&#xC5D0; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xD6A8;&#xC18C;&#xB294;. &#xB1CC; amyloidogenesis&#xC640;&#xC758; &#xC720;&#xBE44; &#xCFFC;&#xD130; &#xC2A4; &#xC2DD;&#xC758; &#xAE30;&#xBCF8; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xAC10;&#xC548;&#xD560; &#xB54C;, &#xD558;&#xB098; &#xC8FC;&#xBCC0; BACE1 &#xB808;&#xBCA8; &#xCE21;&#xC815; &#xACE0;&#xB824;&#xD560; &#xC218; &#xBC0F; &#xD65C;&#xB3D9; &#xB1CC; &#xBC0F; &#xC911;&#xCD94; &#xC2E0; &#xACBD;&#xACC4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC218;&#xD589; &#xD558;&#xB294; &#xAD11;&#xACE0;, &#xC0DD;&#xCCB4; &#xCC98;&#xB7FC;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, &#xC544;&#xC8FC; &#xC791;&#xC740; &#xC8FC;&#xBCC0; &#xBC0F; &#xC8FC;&#xBCC0; BACE1 &#xAD11;&#xACE0; &#xBCD1; &#xC778;&#xC5D0; &#xAD00;&#xC5EC; &#xB610;&#xB294; &#xAC70;&#xC6B8; &#xAD11;&#xACE0; &#xC9C4;&#xD589;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC54C;&#xB824;&#xC838; &#xC788;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C;, &#xC544;&#xB2C8; &#xC870;&#xC0AC;&#xB294; &#xC784;&#xC0C1; &#xC2DC;&#xD5D8; &#xACFC;&#xC815; &#xC911; BACE1 &#xC5B5;&#xC81C;&#xC81C;&#xC758; &#xD6A8;&#xC728;&#xC131;&#xC744; &#xD3C9;&#xAC00; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xC8FC;&#xBCC0; BACE1 &#xBAA8;&#xB2C8;&#xD130;&#xB9C1;&#xC758; &#xAC00;&#xB2A5;&#xC131;&#xC5D0; &#xC9D1;&#xC911; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC808;&#xB300;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; BACE1 &#xD55C; biomarker&#xB85C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558;&#xB294; &#xB370; &#xD544;&#xC694;&#xD55C; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xBD84;&#xC790; &#xB3C4;&#xAD6C; &#xBD80;&#xC871; &#xBB38;&#xC81C;&#xAC00; &#xD45C;&#xC2DC; &#xB420; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xB9AC;&#xBDF0;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC6B0;&#xB9AC; &#xC9C4;&#xBCF4;&#xC640; &#xB2E4;&#xB978; &#xC870;&#xC9C1;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xAD11;&#xACE0; &#xD55C; biomarker&#xB85C; BACE1 &#xAC1C;&#xBC1C;&#xC758; &#xD0C0;&#xB2F9;&#xC131;&#xC744; &#xD3C9;&#xAC00; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC54C; &#xCE20; &#xD558;&#xC774; &#xBA38; &#xBCD1;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xC801;&#xC778; biomarker&#xB85C; BACE1.

El diagn&oacute;stico de enfermedad de Alzheimer (EA) se basa principalmente en criterios cl&iacute;nicos para anuncio probable y posible seg&uacute;n lo definido por el NINCDS-ADRDRA. El campo est&aacute; careciendo desesperadamente de marcadores biol&oacute;gicos para ayudar con el diagn&oacute;stico de AD y verificaci&oacute;n de la eficacia del tratamiento. Seg&uacute;n el informe de consenso del grupo de trabajo sobre Molecular y enfermedad bioqu&iacute;mica marcadores de enfermedad de Alzheimer, para calificar como un biomarcador de la muestra en cuesti&oacute;n debe cumplir con ciertos requisitos b&aacute;sicos, incluyendo la capacidad de: reflejar patolog&iacute;a AD y diferenciarla de otras demencias con una sensibilidad del 80%; ser fiables y reproducibles; ser f&aacute;cil de realizar y analizar; siguen siendo relativamente barato. Beta secretases son enzimas cruciales en la patog&eacute;nesis de la EA. Dado su papel principal en cerebro ciclooxigenasa y su expresi&oacute;n ubicua, uno puede considerar medir los niveles perif&eacute;ricos de BACE1 y actividad como biomarcadores de anuncio, realizado en el cerebro y el l&iacute;quido cerebroespinal. Sin embargo, muy poco se sabe sobre la periferia y si BACE1 perif&eacute;rica est&aacute; implicado en la patogenesia de AD o refleja la progresi&oacute;n de la AD. Por otra parte, ninguna investigaci&oacute;n se ha centrado en la posibilidad de monitoreo BACE1 perif&eacute;rica para evaluar la eficacia de los inhibidores BACE1 durante el curso de los ensayos cl&iacute;nicos. Parte del problema puede atribuirse a la falta de herramientas moleculares sensibles que son absolutamente necesarios para utilizar BACE1 como un biomarcador. En esta revisi&oacute;n se eval&uacute;an el progreso y la viabilidad de desarrollar BACE1 como un biomarcador para el anuncio en diferentes tejidos.

BACE1 como un potencial biomarcador para la enfermedad de Alzheimer.

&#x5929;&#x51AC;&#x6C28;&#x9178;&#x86CB;&#x767D;&#x9176; BACE1 &#x662F;&#x901F;&#x7387;&#x9650;&#x5236;&#x9176;&#x5728;&#x5408;&#x6210;&#x6DC0;&#x7C89;&#x6837; beta &#x7248;&#xFF0C;&#x5728;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x5927;&#x8111;&#x4E2D;&#x7684;&#x79EF;&#x7D2F;&#x662F;&#x963F;&#x5C14;&#x8328;&#x6D77;&#x9ED8;&#x75C5; (AD) &#x7684;&#x4E00;&#x4E2A;&#x7279;&#x70B9;&#x3002;BACE1 &#x5DF2;&#x88AB;&#x63D0;&#x8BAE;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x4E00;&#x4E2A;&#x4EE3;&#x7406;&#x9879;&#x6807;&#x8BB0;&#x7684;&#x5E7F;&#x544A; &#xFF1B;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;&#x62A5;&#x544A;&#x4E86;&#x5F88;&#x5C11;&#x7684; BACE1 &#x514D;&#x75AB;&#x3002;&#x5728;&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x4E2D;&#x6211;&#x4EEC;&#x5DF2;&#x7B5B;&#x67E5;&#x5341; BACE1 &#x6297;&#x4F53;&#x7684;&#x514D;&#x75AB;&#x5370;&#x8FF9;&#x548C;&#x51E0;&#x4E2A;&#x6297;&#x4F53;&#x5BF9;&#x5236;&#x5B9A;&#x65B0;&#x7684; BACE1 &#x5939;&#x5FC3;&#x9176;&#x8054;&#x514D;&#x75AB;&#x5438;&#x9644;&#x8BD5;&#x9A8C;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x786E;&#x5B9A;&#x663E;&#x793A;&#x5C0F;&#x80CC;&#x666F;&#x3001; &#x91CD;&#x73B0;&#x6027;&#x597D;&#x7684;&#x4E00;&#x5BF9;&#x3002;&#x51E0;&#x79CD;&#x7A00;&#x91CA;&#x7F13;&#x51B2;&#x533A;&#x548C;&#x6837;&#x54C1;&#x53D8;&#x6027;&#x65B9;&#x6CD5;&#x88AB;&#x8BD5;&#x56FE;&#x6355;&#x6349;&#x4E4B;&#x524D;&#x90E8;&#x5206;&#x5C55;&#x5F00; BACE1&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x53D1;&#x73B0;&#x5728;&#x5371;&#x91CD;&#x8DDF; 10 &#x5206;&#x949F;&#x5B75;&#x5316;&#x5728; 50 &deg; C &#x7684; PBS &#x7A00;&#x91CA;&#x7684;&#x6027;&#x80FD;&#x6D4B;&#x5B9A;&#x3002;&#x6700;&#x540E;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x6210;&#x529F;&#x5730;&#x8861;&#x91CF;&#x5728;&#x51E0;&#x4EBA;&#x7684;&#x5927;&#x8111;&#x548C;&#x8840;&#x5C0F;&#x677F;&#x88C2;&#x89E3;&#x4EE5;&#x53CA;&#x8840;&#x6D46;&#x53CA;&#x8111;&#x810A;&#x6DB2; AD BACE1 &#x6C34;&#x5E73;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x9884;&#x8BA1;&#x8FD9;&#x79CD;&#x6D4B;&#x5B9A;&#x65B9;&#x6CD5;&#x5C06;&#x5960;&#x5B9A;&#x57FA;&#x7840;&#xFF0C;&#x51C6;&#x786E;&#x5730;&#x6D4B;&#x91CF;&#x4EBA;&#x4F53;&#x7EC4;&#x7EC7;&#xFF0C;&#x5728;&#x4E0D;&#x4E45;&#x7684;&#x5C06;&#x6765;&#x53EF;&#x4EE5;&#x4FC3;&#x8FDB; AD &#x7684;&#x5206;&#x5B50;&#x8BCA;&#x65AD; BACE1 &#x6C34;&#x5E73;&#x3002;

&#x7279;&#x5B9A;&#x7684;&#x9176;&#x8054;&#x514D;&#x75AB;&#x5438;&#x9644;&#x6CD5;&#x6765;&#x8861;&#x91CF; BACE1 &#x6C34;&#x5E73;&#x5728;&#x4EBA;&#x4F53;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x4E2D;&#x7684;&#x53D1;&#x5C55;&#x3002;

The aspartyl protease BACE1 is the rate limiting enzyme in the synthesis of amyloid beta, which accumulation in the human brain is a hallmark of Alzheimer's disease (AD). BACE1 has been proposed as a surrogate marker of AD; however, very few BACE1 immunoassays have been reported. In the present study we have screened ten BACE1 antibodies by Western blot and several antibody pairs to develop a new BACE1 sandwich ELISA procedure. We identified one pair that showed little background and good reproducibility. Several dilution buffers and sample denaturation methods were tried to partially unfold BACE1 before capture. We found that dilution in PBS followed by 10 min incubation at 50Â°C critically improves the performance of the assay. Finally, we successfully measured BACE1 levels in a few human brain and platelet lysates as well as in plasma and AD CSF. We anticipate that this assay will lay the ground to accurately measure BACE1 levels in human tissues, which could facilitate the molecular diagnosis of AD in the near future.

Development of a specific ELISA to measure BACE1 levels in human tissues.

Les prot&eacute;ases aspartyl BACE1 est le taux limitant l&#39;enzyme dans la synth&egrave;se de la prot&eacute;ine b&ecirc;ta-amylo&iuml;de, dont l&#39;accumulation dans le cerveau humain est une caract&eacute;ristique de la maladie d&#39;Alzheimer (ma). BACE1 a &eacute;t&eacute; propos&eacute;e comme marqueur d&#39;AD ; Cependant, tr&egrave;s peu BACE1 tests immunologiques ont &eacute;t&eacute; signal&eacute;s. Dans la pr&eacute;sente &eacute;tude, nous avons projet&eacute; dix BACE1 anticorps par Western blot et plusieurs paires d&#39;anticorps pour d&eacute;velopper un nouveau sandwich de BACE1 proc&eacute;dure ELISA. Nous avons identifi&eacute; une paire qui a montr&eacute; peu de fond et de bonne reproductibilit&eacute;. Plusieurs tampons de dilution et les m&eacute;thodes de d&eacute;naturation des &eacute;chantillons ont &eacute;t&eacute; jug&eacute;s &agrave; partiellement se d&eacute;rouler BACE1 avant la capture. Nous avons trouv&eacute; que la dilution dans du PBS critique suivie d&#39;incubation de 10 min &agrave; 50 &deg; C am&eacute;liore la performance du test. Enfin, nous avons mesur&eacute; avec succ&egrave;s des niveaux de BACE1 dans quelques cerveau humain et les lysats de plaquettes ainsi que dans le plasma et le LCR de l&#39;AD. Nous pr&eacute;voyons que ce dosage posera au sol pour mesurer avec pr&eacute;cision les niveaux de BACE1 dans les tissus humains, ce qui pourraient faciliter le diagnostic mol&eacute;culaire de l&#39;AD dans un proche avenir.

D&eacute;veloppement d&#39;un ELISA sp&eacute;cifique pour mesurer les niveaux de la BACE1 dans les tissus humains.

Die Aspartyl-Protease BACE1 ergibt sich die Beschr&auml;nkung Enzym bei der Synthese von Amyloid-Beta, welche Akkumulation im menschlichen Gehirn ein Markenzeichen der Alzheimer-Krankheit (AD ist). BACE1 wurde als ein Surrogat-Marker der AD vorgeschlagen; Allerdings wurden nur sehr wenige BACE1 Immunoassays berichtet. Wir haben zehn BACE1 Antik&ouml;rper durch Westernblot und mehrere Antik&ouml;rper-Paare eine neue BACE1 Sandwich ELISA-Verfahren zu entwickeln, in der vorliegenden Studie zu sehen. Wir haben ein paar, das wenig Hintergrund und gute Reproduzierbarkeit zeigte identifiziert. Mehrere Puffer Verd&uuml;nnung und Denaturierung Beispielmethoden wurden versucht, teilweise BACE1 vor der Erfassung zu entfalten. Wir fanden, dass die Verd&uuml;nnung in PBS, gefolgt von 10 min Inkubation bei 50 &deg; C kritisch verbessert die Leistung des Assays. Schlie&szlig;lich messen wir erfolgreich BACE1 Ebenen in ein paar menschliche Gehirn und Thrombozyten Lysates ebenso wie in Plasma und AD-CSF. Wir erwarten, dass diese Probe den Boden legen werden um BACE1 Ebenen in menschlichen Geweben, die die Molekulare Diagnostik der AD in naher Zukunft erleichtern k&ouml;nnte, genau zu messen.

Entwicklung einer spezifischen ELISA BACE1 Ebenen in menschlichen Geweben messen.

Le proteasi aspartyl BACE1 &egrave; il rate limiting enzima nella sintesi di beta amiloide, quali l&#39;accumulo nel cervello umano &egrave; un segno distintivo della malattia di Alzheimer (AD). BACE1 &egrave; stato proposto come marker surrogato di annuncio; Tuttavia, sono stati riportati pochissimi BACE1 immunoassays. Nel presente studio abbiamo abbiamo proiettato dieci BACE1 anticorpi da diverse coppie di anticorpo per sviluppare un nuovo sandwich BACE1 procedura ELISA e Western blot. Abbiamo individuato una coppia che ha mostrato poco sfondo e buona riproducibilit&agrave;. Diversi tamponi di diluizione e campione denaturazione metodi furono processati a svolgersi parzialmente BACE1 prima della cattura. Abbiamo trovato che la diluizione in PBS seguita da 10 min di incubazione a 50 &deg; C criticamente migliora le prestazioni del dosaggio. Infine, abbiamo misurato con successo BACE1 livelli in un paio di cervello umano e lisati piastrinica cos&igrave; come nel plasma e AD CSF. Anticipiamo che questo dosaggio getter&agrave; la terra per misurare con precisione BACE1 livelli nei tessuti umani, che potrebbero facilitare la diagnosi molecolare di annuncio nel prossimo futuro.

Sviluppo di un ELISA specifico per misurare i livelli di BACE1 nei tessuti umani.

&#x30A2;&#x30B9;&#x30D1;&#x30EB;&#x30C1;&#x30EB; &#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A2;&#x30FC;&#x30BC; BACE1 &#x30EC;&#x30FC;&#x30C8;&#x30EA; &#x30DF;&#x30C3;&#x30C8;&#x3069;&#x306E;&#x84C4;&#x7A4D;&#x4EBA;&#x9593;&#x306E;&#x8133;&#x306E;&#x30A2;&#x30EB;&#x30C4;&#x30CF;&#x30A4;&#x30DE;&#x30FC;&#x75C5; (AD) &#x306E;&#x8A8D;&#x523B;&#x6975;&#x5370;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x30A2;&#x30DF;&#x30ED;&#x30A4;&#x30C9;&#x306E;&#x30D9;&#x30FC;&#x30BF;&#x306E;&#x5408;&#x6210;&#x9175;&#x7D20;&#x3067;&#x3059;&#x3002;BACE1 &#x304C; AD &#x306E;&#x30B5;&#x30ED;&#x30B2;&#x30FC;&#x30C8; &#x30DE;&#x30FC;&#x30AB;&#x30FC;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x63D0;&#x6848;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;;&#x305F;&#x3060;&#x3057;&#x3001;&#x975E;&#x5E38;&#x306B;&#x5C11;&#x6570;&#x306E; BACE1 &#x30A4;&#x30E0;&#x30CE;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x304C;&#x5831;&#x544A;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x306F;&#x897F;&#x90E8;&#x306E;&#x3057;&#x307F;&#x3068;&#x65B0;&#x3057;&#x3044; BACE1 &#x30B5;&#x30F3;&#x30C9;&#x30A4;&#x30C3;&#x30C1; ELISA &#x306E;&#x624B;&#x9806;&#x3092;&#x958B;&#x767A;&#x3059;&#x308B;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x6297;&#x4F53;&#x30DA;&#x30A2;&#x306B;&#x3088;&#x308B; 10 BACE1 &#x6297;&#x4F53;&#x3092;&#x4E0A;&#x6620;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5C11;&#x3057;&#x306E;&#x80CC;&#x666F;&#x3068;&#x826F;&#x3044;&#x518D;&#x73FE;&#x6027;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F; 1 &#x3064;&#x306E;&#x30DA;&#x30A2;&#x3092;&#x8B58;&#x5225;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x5E0C;&#x91C8;&#x30D0;&#x30C3;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30B5;&#x30F3;&#x30D7;&#x30EB;&#x5909;&#x6027;&#x30E1;&#x30BD;&#x30C3;&#x30C9;&#x90E8;&#x5206;&#x7684; BACE1 &#x30AD;&#x30E3;&#x30D7;&#x30C1;&#x30E3;&#x524D;&#x306B;&#x5C55;&#x958B;&#x3057;&#x3088;&#x3046;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x3001;50 &#x2103; &#x3067; 10 &#x5206;&#x306E;&#x5B75;&#x5316;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x6279;&#x5224;&#x7684;&#x306B;&#x7D9A;&#x3044;&#x3066; PBS &#x3067;&#x5E0C;&#x91C8;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x306E;&#x30D1;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30DE;&#x30F3;&#x30B9;&#x304C;&#x5411;&#x4E0A;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x767A;&#x898B;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6700;&#x5F8C;&#x306B;&#x3001;&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x6B63;&#x5E38;&#x306B;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x4EBA;&#x9593;&#x306E;&#x8133;&#x3068;&#x8840;&#x6F3F;&#x304A;&#x3088;&#x3073; CSF &#x5E83;&#x544A;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x3001;&#x8840;&#x5C0F;&#x677F; lysates BACE1 &#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3092;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4; BACE1 &#x5E83;&#x544A;&#x306E;&#x5206;&#x5B50;&#x8A3A;&#x65AD;&#x3001;&#x8FD1;&#x3044;&#x5C06;&#x6765;&#x4FC3;&#x9032;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x4EBA;&#x9593;&#x306E;&#x7D44;&#x7E54;&#x306E;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3092;&#x6B63;&#x78BA;&#x306B;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x3059;&#x308B;&#x5730;&#x9762;&#x3092;&#x7523;&#x3080;&#x3067;&#x3057;&#x3087;&#x3046;&#x898B;&#x8FBC;&#x3093;&#x3067;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x3072;&#x3068;&#x81D3;&#x5668;&#x4E2D; BACE1 &#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3092;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x7279;&#x5B9A;&#x306E; ELISA &#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x3002;

Aspartyl protease BACE1 &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xB450;&#xB1CC;&#xC5D0;&#xB294; &#xCD95;&#xC801;&#xC740; &#xC54C; &#xCE20; &#xD558;&#xC774; &#xBA38; &#xBCD1; (AD) &#xAC01; &#xC778; &#xB179;&#xB9D0; &#xCCB4; &#xBCA0;&#xD0C0;&#xC758; &#xD569;&#xC131; &#xD6A8;&#xC18C;&#xB97C; &#xC81C;&#xD55C; &#xD558;&#xB294; &#xC18D;&#xB3C4;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xAD11;&#xACE0;;&#xC758; &#xB300;&#xB9AC; &#xB9C8;&#xCEE4;&#xB85C; BACE1 &#xC81C;&#xC548; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, &#xC544;&#xC8FC; &#xBA87;&#xBA87; BACE1 immunoassays &#xBCF4;&#xACE0; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD604;&#xC7AC;&#xC758; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0; &#xC6B0;&#xB9AC; &#xC11C;&#xCABD; &#xC624; &#xC810; &#xBC0F; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xAC00;&#xC9C0; &#xD56D; &#xCCB4; &#xC30D; &#xC0C8; BACE1 &#xC0CC;&#xB4DC;&#xC704;&#xCE58; ELISA &#xC808;&#xCC28;&#xB97C; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xD558; &#xC5EC; 10 BACE1 &#xD56D; &#xCCB4; &#xC0C1;&#xC601; &#xC788;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC791;&#xC740; &#xBC30;&#xACBD; &#xC88B;&#xC740; &#xC7AC;&#xD604;&#xC131;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xD55C; &#xC30D; &#xBC1C;&#xACAC;. &#xC5EC;&#xB7EC; &#xD76C;&#xC11D; &#xBC84;&#xD37C; &#xBC0F; &#xC0D8;&#xD50C; &#xBCC0;&#xC131; &#xBC29;&#xBC95;&#xC744; &#xBD80;&#xBD84;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xCEA1;&#xCC98; &#xC804;&#xC5D0; BACE1 &#xC804;&#xAC1C; &#xD558; &#xB824; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xBE44;&#xD310;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; 50 &deg; C&#xC5D0;&#xC11C; 10 &#xBD84; &#xBD80; &#xD654; &#xB4A4; PBS&#xC5D0; &#xD76C;&#xC11D; &#xD558;&#xBA74; &#xBD84;&#xC11D; &#xACB0;&#xACFC;&#xC758; &#xC131;&#xB2A5;&#xC774; &#xD5A5;&#xC0C1; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xBC1C;&#xACAC;. &#xB9C8;&#xC9C0;&#xB9C9;&#xC73C;&#xB85C;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC131;&#xACF5;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xBA87; &#xAC00;&#xC9C0; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xB450;&#xB1CC;&#xC640; &#xD50C;&#xB77C;&#xC988;&#xB9C8;&#xC640; &#xAD11;&#xACE0; CSF &#xBFD0;&#xB9CC; &#xC544;&#xB2C8;&#xB77C; &#xD608;&#xC18C;&#xD310; lysates BACE1 &#xC218;&#xC900; &#xCE21;&#xC815;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294;&#xC774; &#xBD84;&#xC11D; &#xACB0;&#xACFC; &#xC815;&#xD655; &#xD558; &#xAC8C; &#xAC00;&#xAE4C;&#xC6B4; &#xC7A5;&#xB798;&#xC5D0; &#xAD11;&#xACE0;&#xC758; &#xBD84;&#xC790; &#xC9C4;&#xB2E8; &#xCD09;&#xC9C4; &#xC218; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xC870;&#xC9C1;&#xC5D0; BACE1 &#xC218;&#xC900;&#xC744; &#xCE21;&#xC815; &#xD558; &#xB545;&#xC744; &#xB204;&#xC6CC; &#xAC83;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xC608;&#xC0C1;.

&#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xC870;&#xC9C1;&#xC5D0; BACE1 &#xC218;&#xC900;&#xC744; &#xCE21;&#xC815; &#xD558;&#xB294; &#xD2B9;&#xC815; ELISA &#xAC1C;&#xBC1C;.

La aspartil proteasa BACE1 es la tasa de limitaci&oacute;n de la enzima en la s&iacute;ntesis de beta amiloide, que la acumulaci&oacute;n en el cerebro humano es un sello de la enfermedad de Alzheimer (EA). BACE1 ha sido propuesto como un marcador de sustituto de AD; sin embargo, se han reportado muy pocos BACE1 inmunoensayos. En el presente estudio hemos defendimos a diez BACE1 anticuerpos por Western blot y varios pares de anticuerpo para desarrollar un nuevo s&aacute;ndwich BACE1 procedimiento de ELISA. Identificamos un par que mostr&oacute; poco fondo y buena reproducibilidad. Varios b&uacute;feres de diluci&oacute;n y m&eacute;todos de desnaturalizaci&oacute;n de muestra fueron juzgados revelar parcialmente BACE1 antes de captura. Encontramos que la diluci&oacute;n en PBS seguido de incubaci&oacute;n de 10 min a 50 &deg; C cr&iacute;ticamente mejora el rendimiento del ensayo. Por &uacute;ltimo, medimos con &eacute;xito BACE1 niveles en unos cerebro humano y lisados de plaquetas as&iacute; como en plasma y CSF AD. Anticipamos que este ensayo sentar&aacute; el suelo para medir con precisi&oacute;n los niveles BACE1 en tejidos humanos, lo que podr&iacute;an facilitar el diagn&oacute;stico molecular de AD en un futuro pr&oacute;ximo.

Boris Decourt

Department of Biological Sciences

Purdue University

Neuronal Cell Cultures from Aplysia for High-Resolution Imaging of Growth Cones