use-epiairway-model-for-characterizing-long-term-host-pathogen

Use of the EpiAirway Model for Characterizing Long-term Host-pathogen Interactions

Nontypeable Haemophilus influenzae  (NTHi) are human-adapted Gram-negative bacteria that can cause recurrent and chronic infections of the respiratory ...

Mercer University School of Medicine

El uso de la serie LEXA-base del sistema para identificar interacciones prote&#xED;na-prote&#xED;na en Vivo

&#x4F7F;&#x7528;&#x57FA;&#x4E8E; LexA &#x7684;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x6765;&#x8BC6;&#x522B;&#x4F53;&#x5185;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;-&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;

Use of LexA-based system to identify protein-protein interactions in vivo.

L&#x26;#39;utilisation de LexA-based System pour identifier les interactions prot&#xE9;ine-prot&#xE9;ine in Vivo

Verwendung von LexA-basiertes System, um Protein-Protein-Wechselwirkungen in vivo zu identifizieren.

Uso del sistema per identificare le interazioni proteina-proteina in vivo LexA.

in vivo&#x3067;&#x306E;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA; - &#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3092;&#x8B58;&#x5225;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;LexA&#x30D9;&#x30FC;&#x30B9;&#x306E;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x306E;&#x5229;&#x7528;

Vivo&#xC5D0;&#xC11C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC744; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; LexA &#xAE30;&#xBC18; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC758; &#xC0AC;&#xC6A9;.

&#x52A0;&#x4E0A;&#x7EFC;&#x5408;&#x8BA1;&#x7B97;&#x6280;&#x672F;&#x7684;&#x9AD8;&#x541E;&#x5410;&#x91CF;&#x5206;&#x6790;&#x5DE5;&#x5177;&#x4E2D;&#x7684;&#x4E8B;&#x6001;&#x53D1;&#x5C55;&#x5DF2;&#x542F;&#x7528;&#x751F;&#x7269;&#x7814;&#x7A76;&#x8FBE;&#x5230;&#x65B0;&#x6C34;&#x5E73;&#x3002;&#x5927;&#x91CF;&#x7684;&#x591A;&#x79CD;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x6570;&#x636E;&#x7C7B;&#x578B;&#x5173;&#x8054;&#x5230;&#x673A;&#x4F53;&#x529F;&#x80FD;&#x7684;&#x7C98;&#x6027;&#x6A21;&#x578B;&#x7684;&#x80FD;&#x529B;&#x4EA7;&#x751F;&#x4E86;&#x751F;&#x7269;&#x8C03;&#x67E5;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x7684;&#x65B0;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3002;&#x521B;&#x5EFA;&#x4E00;&#x4E2A;&#x65B0;&#x7684;&#x8D22;&#x56E2;&#x62DF;&#x8C03;&#x67E5;&#x5355;&#x4E00;&#x7684;&#x751F;&#x7269;&#x5229;&#x7528;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x5168;&#x9762;&#x7684;&#x529E;&#x6CD5;&#x3002;&#x6D41;&#x611F;&#x55DC;&#x8840;&#x6746;&#x83CC;&#x8D22;&#x56E2; (HIC) &#x5C06;&#x7531;&#x4E94;&#x4E2A;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x5BA4;&#xFF0C;&#x6BCF;&#x4E2A;&#x63D0;&#x4F9B;&#x5355;&#x72EC;&#x548C;&#x4E92;&#x8865;&#x65B9;&#x9762;&#x7684;&#x4E13;&#x95E8;&#x77E5;&#x8BC6;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x6D41;&#x611F;&#x55DC;&#x8840;&#x6746;&#x83CC; (HI) &#x7EC4;&#x6210;&#x3002;5 &#x5E74;&#x7814;&#x7A76;&#x62DF;&#x5236;&#x5B9A;&#x8FDE;&#x8D2F;&#x6A21;&#x578B;&#x7684;&#x559C;&#xFF0C;&#x90FD;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x4E00;&#x4E2A;&#x72EC;&#x7ACB;&#x7684;&#x6709;&#x673A;&#x4F53;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x53CA;&#x66F4;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x662F;&#xFF0C;&#x662F;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x7684;&#x75C5;&#x539F;&#x4F53;&#x3002;&#x589E;&#x957F;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x6761;&#x4EF6;&#x8DDF;&#x7684;&#x7279;&#x5F02;&#x6027;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x3001; &#x4EE3;&#x8C22;&#x3001; &#x548C;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x7EC4;&#x5B66;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x5C06;&#x7ED3;&#x5408;&#x8D77;&#x6765;&#xFF0C;&#x5E76;&#x901A;&#x8FC7;&#x8BA1;&#x7B97;&#x548C;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x5206;&#x6790;&#xFF0C;&#x5F62;&#x6210;&#x52A8;&#x6001;&#x548C;&#x9884;&#x6D4B;&#x6A21;&#x578B;&#x7684;&#x559C;&#x548C;&#x5176;&#x54CD;&#x5E94;&#x7684;&#x96C6;&#x6210;&#x3002;&#x6570;&#x636E;&#x4ECE; HIC &#x5C06;&#x5141;&#x8BB8;&#x7EC6;&#x80DE;&#x884C;&#x4E3A;&#x3001; &#x75C5;&#x539F;&#x5BBF;&#x4E3B;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3001; &#x7EC6;&#x83CC;&#x611F;&#x67D3;&#xFF0C;&#x66F4;&#x597D;&#x5730;&#x7406;&#x89E3;&#x548C;&#x672A;&#x6765;&#x7684;&#x79D1;&#x5B66;&#x52AA;&#x529B;&#x4E3A;&#x5176;&#x4ED6;&#x75C5;&#x539F;&#x4F53;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x63D0;&#x4F9B;&#x4E00;&#x4E2A;&#x6A21;&#x677F;&#x3002;

H.&#x6D41;&#x611F;&#x8D22;&#x56E2;&#xFF1A; H.&#x6D41;&#x611F;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x7684;&#x7EFC;&#x5408;&#x7814;&#x7A76;&#x3002;

Developments in high-throughput analysis tools coupled with integrative computational techniques have enabled biological studies to reach new levels. The ability to correlate large volumes of diverse data types into cohesive models of organism function has spawned a new systematic approach to biological investigation. The creation of a new consortium has been proposed to investigate a single organism utilizing these comprehensive approaches. The Haemophilus influenzae Consortium (HIC) would be comprised of five laboratories, each providing separate and complementary areas of expertise in the study of Haemophilus influenzae (HI). The 5-year study proposes to develop coherent models of HI, both as a stand-alone organism, and more importantly, as a human pathogen. Studies in growth condition specificity followed by genomic, metabolic, and proteomic experimentation will be combined and integrated through computational and experimental analyses to form dynamic and predictive models of HI and its responses. Data from the HIC will allow greater understanding of cellular behavior, pathogen-host interactions, bacterial infection, and provide future scientific endeavors with a template for studies of other pathogens.

H. influenzae Consortium: integrative study of H. influenzae-human interactions.

L&#x26;#39;&#xE9;volution des outils d&#x26;#39;analyse &#xE0; haut d&#xE9;bit coupl&#xE9;s avec int&#xE9;gration des techniques de calcul ont permis des &#xE9;tudes biologiques pour atteindre de nouveaux niveaux. La capacit&#xE9; &#xE0; corr&#xE9;ler de grands volumes de types de donn&#xE9;es diverses dans les mod&#xE8;les de la coh&#xE9;sion de la fonction organisme a donn&#xE9; naissance &#xE0; une nouvelle approche syst&#xE9;matique pour l&#x26;#39;investigation biologique. La cr&#xE9;ation d&#x26;#39;un nouveau consortium a &#xE9;t&#xE9; propos&#xE9; d&#x26;#39;&#xE9;tudier un seul organisme l&#x26;#39;utilisation de ces approches globales. Le Consortium Haemophilus influenzae (HIC) serait compos&#xE9; de cinq laboratoires, chacun fournissant des zones distinctes et compl&#xE9;mentaires d&#x26;#39;expertise dans l&#x26;#39;&#xE9;tude de Haemophilus influenzae (HI). L&#x26;#39;&#xE9;tude de 5 ans se propose de d&#xE9;velopper des mod&#xE8;les coh&#xE9;rents de HI, &#xE0; la fois comme un organisme autonome, et plus important encore, comme un agent pathog&#xE8;ne humain. Des &#xE9;tudes de sp&#xE9;cificit&#xE9; des conditions de croissance suivie par la g&#xE9;nomique, m&#xE9;tabolique, la prot&#xE9;omique et de l&#x26;#39;exp&#xE9;rimentation seront combin&#xE9;s et int&#xE9;gr&#xE9;s gr&#xE2;ce &#xE0; des analyses computationnelles et exp&#xE9;rimentales pour former des mod&#xE8;les dynamiques et pr&#xE9;dictive de HI et ses r&#xE9;ponses. Les donn&#xE9;es de l&#x26;#39;HIC permettra une plus grande compr&#xE9;hension du comportement cellulaire, les interactions h&#xF4;te-pathog&#xE8;ne, l&#x26;#39;infection bact&#xE9;rienne, et de fournir les futurs projets scientifiques avec un mod&#xE8;le pour les &#xE9;tudes d&#x26;#39;autres agents pathog&#xE8;nes.

H. influenzae Consortium: &#xE9;tude int&#xE9;grative de H. influenzae de l&#x26;#39;homme-Interactions

H. influenzae Konsortium: integrative Studie von H. influenzae-Mensch-Interaktionen.

Sviluppi in strumenti di analisi di alto-rendimento accoppiati con tecniche computazionali integrativi hanno permesso studi biologici di raggiungere nuovi livelli. La capacit&agrave; di correlare i grandi volumi dei tipi di dati diversi in modelli coesive della funzione di organismo ha generato un nuovo approccio sistematico alla ricerca biologica. &Egrave; stata proposta la creazione di un nuovo consorzio per indagare su un singolo organismo che utilizzano questi approcci completi. L&#39;Haemophilus influenzae Consortium (HIC) sarebbe composta da cinque laboratori, ciascuno fornendo distinte e complementari aree di competenza nello studio dell&#39;Haemophilus influenzae (HI). Lo studio di 5 anni si propone di sviluppare modelli coerenti di HI, sia come un organismo autonomo e ancora pi&ugrave; importante, come un agente patogeno umano. Studi in crescita condizionano specificit&agrave; seguita da genomico, metabolica, e proteomic sperimentazione sar&agrave; combinati e integrati attraverso analisi computazionale e sperimentale a formare modelli predittivi e dinamiche di HI e le sue risposte. Dati da HIC permetter&agrave; una maggiore comprensione del comportamento cellulare, interazioni ospite-patogeno, infezione batterica e fornire futuri sforzi scientifici con un modello per gli studi di altri agenti patogeni.

H. influenzae Consorzio: studio integrativo delle interazioni di H. influenzae-umani.

&#x7D71;&#x5408;&#x7684;&#x306A;&#x8A08;&#x7B97;&#x624B;&#x6CD5;&#x3068;&#x76F8;&#x307E;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x30CF;&#x30A4;&#x30B9;&#x30EB;&#x30FC;&#x30D7;&#x30C3;&#x30C8;&#x89E3;&#x6790;&#x30C4;&#x30FC;&#x30EB;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x304C;&#x65B0;&#x305F;&#x306A;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x306B;&#x5230;&#x9054;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x751F;&#x7269;&#x5B66;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x3092;&#x6709;&#x52B9;&#x306B;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x751F;&#x7269;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306E;&#x51DD;&#x96C6;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x306B;&#x591A;&#x69D8;&#x306A;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#xB7;&#x30BF;&#x30A4;&#x30D7;&#x306E;&#x5927;&#x5BB9;&#x91CF;&#x3092;&#x76F8;&#x4E92;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306F;&#x3001;&#x751F;&#x7269;&#x5B66;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x3078;&#x306E;&#x65B0;&#x3057;&#x3044;&#x4F53;&#x7CFB;&#x7684;&#x306A;&#x30A2;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30C1;&#x3092;&#x751F;&#x307F;&#x51FA;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x65B0;&#x3057;&#x3044;&#x30B3;&#x30F3;&#x30BD;&#x30FC;&#x30B7;&#x30A2;&#x30E0;&#x306E;&#x4F5C;&#x6210;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x5305;&#x62EC;&#x7684;&#x306A;&#x30A2;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30C1;&#x3092;&#x5229;&#x7528;&#x3057;&#x3001;&#x5358;&#x4E00;&#x306E;&#x751F;&#x7269;&#x3092;&#x8ABF;&#x67FB;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x63D0;&#x6848;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x30A4;&#x30F3;&#x30D5;&#x30EB;&#x30A8;&#x30F3;&#x30B6;&#x30B3;&#x30F3;&#x30BD;&#x30FC;&#x30B7;&#x30A2;&#x30E0;&#xFF08;HIC&#xFF09;&#x306F;5&#x5BA4;&#x3001;&#x30A4;&#x30F3;&#x30D5;&#x30EB;&#x30A8;&#x30F3;&#x30B6;&#xFF08;HI&#xFF09;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x306F;&#x5C02;&#x9580;&#x306E;&#x72EC;&#x7ACB;&#x3057;&#x305F;&#x76F8;&#x88DC;&#x7684;&#x306A;&#x9818;&#x57DF;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3059;&#x308B;&#x5404;&#x3067;&#x69CB;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002; 5&#x5E74;&#x9593;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x306F;&#x3001;&#x30D2;&#x30C8;&#x75C5;&#x539F;&#x4F53;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x3053;&#x3068;&#x306F;&#x3001;&#x30B9;&#x30BF;&#x30F3;&#x30C9;&#x30A2;&#x30ED;&#x30F3;&#x306E;&#x751F;&#x7269;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x30CF;&#x30EF;&#x30A4;&#x306E;&#x9996;&#x5C3E;&#x4E00;&#x8CAB;&#x3057;&#x305F;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x3092;&#x958B;&#x767A;&#x3057;&#x3001;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x63D0;&#x6848;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x3001;&#x4EE3;&#x8B1D;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30AA;&#x30DF;&#x30AF;&#x30B9;&#x5B9F;&#x9A13;&#x306B;&#x7D9A;&#x3044;&#x3066;&#x6210;&#x9577;&#x6761;&#x4EF6;&#x306E;&#x7279;&#x7570;&#x6027;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x3092;&#x7D44;&#x307F;&#x5408;&#x308F;&#x305B;&#x3066;HI&#x3068;&#x305D;&#x306E;&#x5FDC;&#x7B54;&#x306E;&#x30C0;&#x30A4;&#x30CA;&#x30DF;&#x30C3;&#x30AF;&#x306A;&#x4E88;&#x6E2C;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x3092;&#x5F62;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;&#x8A08;&#x7B97;&#x3068;&#x5B9F;&#x9A13;&#x89E3;&#x6790;&#x3092;&#x901A;&#x3058;&#x3066;&#x7D71;&#x5408;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002; HIC&#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x306F;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x6319;&#x52D5;&#x306E;&#x3088;&#x308A;&#x6DF1;&#x3044;&#x7406;&#x89E3;&#x3001;&#x75C5;&#x539F;&#x4F53; - &#x5BBF;&#x4E3B;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3001;&#x7D30;&#x83CC;&#x611F;&#x67D3;&#x3092;&#x8A31;&#x53EF;&#x3057;&#x3001;&#x4ED6;&#x306E;&#x75C5;&#x539F;&#x4F53;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x30C6;&#x30F3;&#x30D7;&#x30EC;&#x30FC;&#x30C8;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x5C06;&#x6765;&#x306E;&#x79D1;&#x5B66;&#x7684;&#x306A;&#x52AA;&#x529B;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

H. influenzae&#x306E;&#x30B3;&#x30F3;&#x30BD;&#x30FC;&#x30B7;&#x30A2;&#x30E0;&#xFF1A;H. influenzae&#x306E;&#x30D2;&#x30C8;&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x306E;&#x7D71;&#x5408;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;

&#xB192;&#xC740; &#xCC98;&#xB9AC;&#xB7C9; &#xBD84;&#xC11D; &#xB3C4;&#xAD6C;&#xC758; &#xD1B5;&#xD569; &#xC804;&#xC0B0; &#xAE30;&#xC220;&#xC744; &#xD568;&#xAED8; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xC218;&#xC900;&#xC5D0; &#xB3C4;&#xB2EC; &#xD558;&#xB294; &#xC0DD;&#xBB3C; &#xD559;&#xC801; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xB97C; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC751;&#xC9D1;&#xB825; &#xBAA8;&#xB378; &#xC720;&#xAE30; &#xCCB4; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC73C;&#xB85C; &#xB300;&#xC6A9;&#xB7C9;&#xC758; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xB370;&#xC774;&#xD130; &#xD615;&#xC2DD;&#xC744; &#xC5F0;&#xAD00; &#xC2DC;&#xD0AC; &#xC218; &#xC0DD;&#xBB3C; &#xC870;&#xC0AC;&#xC5D0; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xCCB4;&#xACC4;&#xC801;&#xC778; &#xC811;&#xADFC;&#xC744; &#xC591;&#xC0B0; &#xD558;&#xACE0;&#xC788;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xD3EC;&#xAD04;&#xC801;&#xC778; &#xC811;&#xADFC; &#xBC29;&#xC2DD;&#xC744; &#xD65C;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xB2E8;&#xC77C; &#xC720;&#xAE30; &#xCCB4;&#xB97C; &#xC870;&#xC0AC; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xCEE8;&#xC18C;&#xC2DC;&#xC5C4;&#xC758; &#xC0DD;&#xC131; &#xC81C;&#xC548; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. Haemophilus &#xD568;&#xAED8; &#xCEE8;&#xC18C;&#xC2DC;&#xC5C4; (HIC) 5 &#xC2E4;&#xD5D8;&#xC2E4;, &#xAC1C;&#xBCC4;&#xC801;&#xC774; &#xACE0; &#xC0C1;&#xD638; &#xBCF4;&#xC644;&#xC801;&#xC778; Haemophilus &#xD615; (&#xD558;&#xC774;)&#xC758; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC804;&#xBB38; &#xBD84;&#xC57C;&#xB97C; &#xC81C;&#xACF5; &#xD558; &#xACE0; &#xAC01;&#xAC01;&#xC758; &#xAD6C;&#xC131; &#xB41C; &#xAC83;. 5 &#xB144; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xC81C;&#xC548; &#xB3C5;&#xB9BD; &#xC2E4;&#xD589;&#xD615; &#xC720;&#xAE30; &#xCCB4;&#xB85C;&#xC640; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xBCD1;&#xC6D0; &#xCCB4;&#xB85C; &#xC11C; &#xB354; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xAC83;&#xC740;,&#xC774;&#xC758; &#xC77C;&#xAD00; &#xB41C; &#xBAA8;&#xB378;&#xC744; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC131;&#xC7A5;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xC870;&#xAC74; &#xB4A4;&#xC5D0; &#xD2B9;&#xC774;&#xC131; &#xAC8C;&#xB188;, &#xC2E0;&#xC9C4; &#xB300;&#xC0AC;, &#xBC0F; proteomic &#xC2E4;&#xD5D8;&#xC744; &#xACB0;&#xD569; &#xD558; &#xACE0; &#xC548;&#xB155; &#xBC0F; &#xC751;&#xB2F5;&#xC758; &#xB3D9;&#xC801;&#xC774; &#xACE0; &#xC608;&#xCE21; &#xBAA8;&#xB378;&#xC744; &#xD615;&#xC131; &#xD558;&#xB294; &#xACC4;&#xC0B0; &#xBC0F; &#xC2E4;&#xD5D8; &#xBD84;&#xC11D;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xD1B5;&#xD569; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB370;&#xC774;&#xD130;&#xB294; HIC&#xC5D0;&#xC11C; &#xC140;&#xB8F0;&#xB7EC; &#xB3D9;&#xC791;, &#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xBCD1;&#xC6D0; &#xCCB4; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;, &#xC138;&#xADE0; &#xAC10;&#xC5FC;&#xC758; &#xB354; &#xD070; &#xC774;&#xD574;&#xB97C; &#xD5C8;&#xC6A9; &#xD558; &#xACE0; &#xB2E4;&#xB978; &#xBCD1;&#xC6D0; &#xADE0;&#xC758; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD15C;&#xD50C;&#xB9BF;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xBBF8;&#xB798;&#xC758; &#xACFC;&#xD559;&#xC801; &#xB178;&#xB825;&#xC744; &#xC81C;&#xACF5; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

8. &#xD568;&#xAED8; &#xCEE8;&#xC18C;&#xC2DC;&#xC5C4;: H. &#xD615; &#xC778;&#xAC04; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC758; &#xD1B5;&#xD569; &#xC5F0;&#xAD6C;.

Los avances en las herramientas de an&#xE1;lisis de alto rendimiento junto con la integraci&#xF3;n de t&#xE9;cnicas computacionales han permitido estudios biol&#xF3;gicos para alcanzar nuevos niveles. La posibilidad de correlacionar grandes vol&#xFA;menes de diversos tipos de datos en los modelos de cohesi&#xF3;n de la funci&#xF3;n de organismo ha generado un nuevo enfoque sistem&#xE1;tico para la investigaci&#xF3;n biol&#xF3;gica. La creaci&#xF3;n de un nuevo consorcio se ha propuesto para investigar un solo organismo la utilizaci&#xF3;n de estos enfoques integrales. El Haemophilus influenzae Consorcio (HIC) se compone de cinco laboratorios, cada uno proporcionando &#xE1;reas distintas y complementarias de experiencia en el estudio de Haemophilus influenzae (HI). El estudio de 5 a&#xF1;os se propone desarrollar modelos coherentes de HI, tanto como un organismo independiente, y lo m&#xE1;s importante, como un pat&#xF3;geno humano. Los estudios realizados en la especificidad de crecimiento seguida por condici&#xF3;n de gen&#xF3;mica, metab&#xF3;licas, prote&#xF3;mica y la experimentaci&#xF3;n se combinan e integran a trav&#xE9;s de an&#xE1;lisis computacionales y experimentales para formar los modelos din&#xE1;micos y predictivos de HI y sus respuestas. Los datos de la HIC permitir&#xE1; una mayor comprensi&#xF3;n del comportamiento celular, las interacciones hu&#xE9;sped-pat&#xF3;geno, la infecci&#xF3;n bacteriana, y proporcionar a los futuros esfuerzos cient&#xED;ficos con una plantilla para los estudios de otros pat&#xF3;genos.

H. Influenzae Consorcio: Estudio Integral de H. influenzae-humanos Interacciones

&#x6D41;&#x611F;&#x55DC;&#x8840;&#x6746;&#x83CC;&#x662F;&#x4EBA;&#x4F53;&#x9002;&#x5E94;&#x7684; commensal &#x548C;&#x75C5;&#x539F;&#xFF0C;&#x53EF;&#x80FD;&#x4F1A;&#x5BFC;&#x81F4;&#x7C98;&#x819C;&#x611F;&#x67D3;&#x9F3B;&#x7AA6;&#x708E;&#x3001; &#x4E2D;&#x8033;&#x708E;&#x3001; &#x652F;&#x6C14;&#x7BA1;&#x708E;&#x7B49;&#x3002;Bacteraemia &#x548C;&#x8111;&#x819C;&#x708E;&#xFF0C;&#x4E5F;&#x4F1A;&#x5BFC;&#x81F4;&#x67D0;&#x4E9B;&#x83CC;&#x682A;&#x3002;&#x4E34;&#x5E8A;&#x5206;&#x79BB;&#x662F;&#x57FA;&#x56E0;&#x5F02;&#x6784;&#x7684;&#x5F80;&#x5F80;&#x662F;&#x987D;&#x6297;&#x5230;&#x6807;&#x51C6;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x64CD;&#x7EB5;&#x3002;H.&#x6D41;&#x611F;&#x5E94;&#x53D8; Rd KW20 &#x5386;&#x6765;&#x88AB;&#x89C6;&#x4E3A;&#x65E0;&#x81F4;&#x75C5;&#x529B;&#xFF0C;&#x56E0;&#x4E3A;&#x5B83;&#x5728;&#x52A8;&#x7269;&#x7684;&#x8840;&#x6DB2;&#x4E2D;&#x6709;&#x4E00;&#x4E2A;&#x6D3B;&#x4E0D;&#x662F;&#x5F88;&#x5BB9;&#x6613;&#x88AB;&#x6B63;&#x5E38;&#x6210;&#x4EBA;&#x8840;&#x6E05;&#x548C;&#x6740;&#x5BB3;&#x4E0D;&#x80FD;&#x5F81;&#x670D;&#x7684;&#x5E7C;&#x9F20;&#x9F3B;&#x54BD;&#x3002;&#x8FD9;&#x9879;&#x7814;&#x7A76;&#x7684;&#x76EE;&#x7684;&#x662F;&#x786E;&#x5B9A;&#x662F;&#x5426;&#x53EF;&#x4EE5;&#x5728;&#x67D0;&#x4E9B;&#x611F;&#x67D3;&#x6A21;&#x578B;&#x4E2D;&#x4F7F;&#x7528; Rd KW20&#x3002;&#x5B83;&#x662F;&#x793A; Rd KW20 &#x80FD;&#x5165;&#x4FB5;&#x8FD9;&#x682A;&#x67D0;&#x4E9B;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x682A;&#x957F;&#x5927;&#x6210;&#x4EBA;&#x5355;&#x5206;&#x5B50;&#x819C;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x6216;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x5DEE;&#x5F02;&#x5316;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5728;&#x6C14;&#x6DB2;&#x754C;&#x9762;&#x4E0A;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;Rd KW20 &#x80FD;&#x5165;&#x4FB5;&#x5355;&#x5C42;&#x6C38;&#x751F;&#x5316;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x5927;&#x8111;&#x5FAE;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;&#x6700;&#x540E;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x682A;&#x53EF;&#x4EE5;&#x590D;&#x5236;&#xFF0C;&#x5E76;&#x5728;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x652F;&#x6C14;&#x7BA1;&#x5F02;&#x79CD;&#x79FB;&#x690D;&#x5B58;&#x6D3B;&#x8FBE; 3 &#x5468;&#x3002;Rd KW20 &#x7684;&#x5B8C;&#x6574;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x5E8F;&#x5217;&#x4E5F;&#x53EF;&#x5F88;&#x5BB9;&#x6613;&#x8FDB;&#x884C;&#x9057;&#x4F20;&#x64CD;&#x7EB5;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x5C5E;&#x6027;&#xFF0C;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x62A5;&#x544A;&#x7684;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E;&#x8FD9;&#x682A;&#x4E34;&#x5E8A;&#x5206;&#x79BB;&#x7528;&#x4E8E; H.&#x6746;&#x83CC;&#x81F4;&#x75C5;&#x529B;&#x8C03;&#x67E5;&#x53EF;&#x884C;&#x7684;&#x66FF;&#x4EE3;&#x529E;&#x6CD5;&#x3002;

&#x6D41;&#x611F;&#x55DC;&#x8840;&#x6746;&#x83CC; Rd KW20 &#x5177;&#x6709;&#x6BD2;&#x5C5E;&#x6027;&#x3002;

Haemophilus influenzae is a human-adapted commensal and pathogen that can cause mucosal infections such as sinusitis, otitis media and bronchitis. Certain strains also cause bacteraemia and meningitis. Clinical isolates are genetically heterogeneous and are often recalcitrant to standard genetic manipulation. H. influenzae strain Rd KW20 has traditionally been considered avirulent, since it does not survive in the bloodstream of animals, is readily killed by normal adult human sera and cannot colonize the nasopharynx of infant rats. The purpose of this study was to determine whether Rd KW20 could be used in certain infection models. It is shown here that strain Rd KW20 can invade certain human epithelial cell lines grown either as monolayers or as differentiated epithelium at the air-liquid interface. In addition, Rd KW20 can invade a monolayer of immortalized human brain microvascular endothelial cells. Finally, this strain can replicate and survive in human bronchial xenografts for up to 3 weeks. The complete genomic sequence of Rd KW20 is available and it is readily amenable to genetic manipulation. These properties and the results reported here indicate that this strain is a viable alternative to the use of clinical isolates for the investigation of H. influenzae virulence.

Haemophilus influenzae Rd KW20 has virulence properties.

Haemophilus influenzae est un agent pathog&#xE8;ne humain adapt&#xE9; commensal et qui peut causer des infections des muqueuses telles que la sinusite, l&#x26;#39;otite moyenne et la bronchite. Certaines souches &#xE9;galement provoquer une bact&#xE9;ri&#xE9;mie et la m&#xE9;ningite. Isolats cliniques sont g&#xE9;n&#xE9;tiquement h&#xE9;t&#xE9;rog&#xE8;nes et sont souvent r&#xE9;calcitrants &#xE0; la manipulation g&#xE9;n&#xE9;tique standard. H. influenzae Rd souche KW20 a traditionnellement &#xE9;t&#xE9; consid&#xE9;r&#xE9; comme avirulent, car il ne survit pas dans le sang des animaux, est facilement tu&#xE9; par des s&#xE9;rums humain adulte normal et ne peut pas coloniser le nasopharynx de jeunes rats. Le but de cette &#xE9;tude &#xE9;tait de d&#xE9;terminer si Rd KW20 pourrait &#xEA;tre utilis&#xE9; dans les mod&#xE8;les d&#x26;#39;infection de certains. Il est montr&#xE9; ici que la souche Rd KW20 peut envahir certaines lign&#xE9;es cellulaires humaines &#xE9;pith&#xE9;liales cultiv&#xE9;es soit sous forme de monocouches ou &#xE9;pith&#xE9;lium diff&#xE9;renci&#xE9; &#xE0; l&#x26;#39;interface air-liquide. En outre, Rd KW20 peut envahir une monocouche de cellules humaines immortalis&#xE9;es microvasculaires du cerveau endoth&#xE9;liales. Enfin, cette souche peut se reproduire et survivre dans l&#x26;#39;homme x&#xE9;nogreffes bronchiques pour un maximum de 3 semaines. La s&#xE9;quence g&#xE9;nomique compl&#xE8;te de Rd KW20 est disponible et il est susceptible d&#x26;#39;&#xEA;tre r&#xE9;duits &#xE0; la manipulation g&#xE9;n&#xE9;tique. Ces propri&#xE9;t&#xE9;s et les r&#xE9;sultats pr&#xE9;sent&#xE9;s ici indiquent que cette souche est une alternative viable &#xE0; l&#x26;#39;utilisation des isolats cliniques de l&#x26;#39;enqu&#xEA;te de H. influenzae virulence.

Haemophilus influenzae Rd KW20 Propri&#xE9;t&#xE9;s de la virulence

Haemophilus influenzae Rd KW20 hat Virulenzeigenschaften.

Haemophilus influenzae &egrave; un commensale umano-adattato e l&#39;agente patogeno che pu&ograve; causare infezioni delle mucose quali otite media, sinusite e bronchite. Alcuni ceppi anche causano utilizzata e meningite. Isolati clinici sono geneticamente eterogenei e spesso sono recalcitranti alla manipolazione genetica standard. H. influenzae ceppo che Rd KW20 &egrave; tradizionalmente considerato avirulente, poich&eacute; esso non sopravvive nel sangue degli animali, &egrave; prontamente ucciso da sieri umani adulti normali e non pu&ograve; colonizzare il nasofaringe dei ratti neonati. Lo scopo di questo studio era di determinare se Rd KW20 potrebbe essere utilizzato in alcuni modelli di infezione. Si &egrave; mostrato qui quel ceppo che Rd KW20 pu&ograve; invadere certe linee di cellule epiteliali umane coltivata sia come monostrati o come differenziata epitelio all&#39;interfaccia aria-liquido. Inoltre, Rd KW20 pu&ograve; invadere un monostrato di cellule endoteliali Microvascolari immortalata cervello umano. Infine, questo ceppo pu&ograve; replicare e sopravvivere in xenotrapianti bronchiale umani fino a 3 settimane. La sequenza genomica completa di Rd KW20 &egrave; disponibile ed &egrave; facilmente suscettibile di manipolazione genetica. Queste propriet&agrave; e i risultati qui riportati indicano che questo ceppo &egrave; una valida alternativa all&#39;uso degli isolati clinici per l&#39;indagine di virulenza di H. influenzae.

Haemophilus influenzae Rd KW20 ha propriet&agrave; di virulenza.

&#x30A4;&#x30F3;&#x30D5;&#x30EB;&#x30A8;&#x30F3;&#x30B6;&#x83CC;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x526F;&#x9F3B;&#x8154;&#x708E;&#x3001;&#x4E2D;&#x8033;&#x708E;&#x3084;&#x6C17;&#x7BA1;&#x652F;&#x708E;&#x306A;&#x3069;&#x306E;&#x7C98;&#x819C;&#x306E;&#x611F;&#x67D3;&#x75C7;&#x3092;&#x5F15;&#x304D;&#x8D77;&#x3053;&#x3059;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x4EBA;&#x9593;&#x306B;&#x9069;&#x5408;&#x3057;&#x305F;&#x5171;&#x751F;&#x53CA;&#x3073;&#x75C5;&#x539F;&#x4F53;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x7279;&#x5B9A;&#x306E;&#x682A;&#x306F;&#x307E;&#x305F;&#x3001;&#x83CC;&#x8840;&#x75C7;&#x3084;&#x9AC4;&#x819C;&#x708E;&#x3092;&#x5F15;&#x304D;&#x8D77;&#x3053;&#x3059;&#x3002;&#x81E8;&#x5E8A;&#x5206;&#x96E2;&#x682A;&#x306F;&#x907A;&#x4F1D;&#x7684;&#x306B;&#x7570;&#x8CEA;&#x3067;&#x3042;&#x308A;&#x3001;&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x5834;&#x5408;&#x3001;&#x6A19;&#x6E96;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x64CD;&#x4F5C;&#x306B;&#x53CD;&#x6297;&#x7684;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002; H. influenzae&#x306E;&#x6B6A;&#x307F;&#x8DEF;KW20&#x306F;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x304C;&#x52D5;&#x7269;&#x306E;&#x8840;&#x6D41;&#x306E;&#x4E2D;&#x3067;&#x751F;&#x304D;&#x6B8B;&#x308B;&#x306A;&#x3044;&#x306E;&#x3067;&#x3001;&#x4F1D;&#x7D71;&#x7684;&#x306B;&#x3001;&#x7121;&#x6BD2;&#x3068;&#x8003;&#x3048;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x304D;&#x305F;&#x5BB9;&#x6613;&#x306B;&#x6B63;&#x5E38;&#x306A;&#x6210;&#x4EBA;&#x306E;&#x30D2;&#x30C8;&#x8840;&#x6E05;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x6BBA;&#x5BB3;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x304A;&#x308A;&#x3001;&#x4E73;&#x5150;&#x30E9;&#x30C3;&#x30C8;&#x306E;&#x9F3B;&#x54BD;&#x982D;&#x3092;&#x690D;&#x6C11;&#x5730;&#x5316;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306F;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x306E;&#x76EE;&#x7684;&#x306F;&#x3001;Rd KW20&#x306F;&#x3001;&#x7279;&#x5B9A;&#x306E;&#x611F;&#x67D3;&#x75C7;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x3067;&#x4F7F;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x304B;&#x3069;&#x3046;&#x304B;&#x3092;&#x5224;&#x65AD;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3067;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x305D;&#x308C;&#x306F;&#x6B6A;&#x307F;&#x8DEF;KW20&#x306F;&#x3001;&#x7A7A;&#x6C17; - &#x6DB2;&#x4F53;&#x754C;&#x9762;&#x3067;&#x306E;&#x5358;&#x5C64;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x5206;&#x5316;&#x3057;&#x305F;&#x4E0A;&#x76AE;&#x306E;&#x3044;&#x305A;&#x308C;&#x304B;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x6210;&#x9577;&#x3057;&#x305F;&#x7279;&#x5B9A;&#x306E;&#x30D2;&#x30C8;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x4FB5;&#x5165;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x3053;&#x3053;&#x306B;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;Rd&#x306F;KW20&#x306F;&#x3001;&#x4E0D;&#x6B7B;&#x5316;&#x30D2;&#x30C8;&#x8133;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5358;&#x5C64;&#x306B;&#x4FB5;&#x5165;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6700;&#x5F8C;&#x306B;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x682A;&#x306F;&#x3001;&#x8907;&#x88FD;&#x3057;&#x3001;3&#x9031;&#x9593;&#x307E;&#x3067;&#x306E;&#x30D2;&#x30C8;&#x6C17;&#x7BA1;&#x652F;&#x79FB;&#x690D;&#x306E;&#x4E2D;&#x3067;&#x751F;&#x304D;&#x6B8B;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x8DEF;KW20&#x306E;&#x5B8C;&#x5168;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x914D;&#x5217;&#x304C;&#x5229;&#x7528;&#x53EF;&#x80FD;&#x3067;&#x3042;&#x308A;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x306F;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x64CD;&#x4F5C;&#x304C;&#x5BB9;&#x6613;&#x306B;&#x9069;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30D1;&#x30C6;&#x30A3;&#x3068;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x682A;&#x306F;H. influenzae&#x306E;&#x75C5;&#x539F;&#x6027;&#x306E;&#x8ABF;&#x67FB;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x81E8;&#x5E8A;&#x5206;&#x96E2;&#x682A;&#x306E;&#x4F7F;&#x7528;&#x306B;&#x4EE3;&#x308F;&#x308B;&#x6709;&#x529B;&#x306A;&#x4EE3;&#x66FF;&#x54C1;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x5831;&#x544A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;

&#x30A4;&#x30F3;&#x30D5;&#x30EB;&#x30A8;&#x30F3;&#x30B6;&#x8DEF;KW20&#x306F;&#x3001;&#x75C5;&#x539F;&#x6027;&#x7279;&#x6027;&#x3092;&#x6709;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;

Haemophilus &#xD615; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xC801;&#xC751; &#xACF5;&#xC0DD; &#xBC0F; &#xCD95; &#xB18D; &#xC99D;, &#xC911;&#xC774;&#xC5FC;, &#xAE30;&#xAD00;&#xC9C0;&#xC5FC; &#xB4F1; &#xC810; &#xB9C9; &#xAC10;&#xC5FC;&#xC744; &#xC77C;&#xC73C;&#xD0AC; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xBCD1;&#xC6D0; &#xCCB4; &#xC774;&#xB2E4;. &#xD2B9;&#xC815; &#xAE34;&#xC7A5; &#xB610;&#xD55C; bacteraemia &#xBC0F; &#xC218; &#xB9C9; &#xC5FC;&#xC744; &#xC77C;&#xC73C;&#xD0AC;. &#xC784;&#xC0C1; &#xBD84;&#xB9AC;&#xB294; &#xC720;&#xC804;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xB2E4;&#xB978; &#xC720;&#xD615;&#xC758; &#xACE0; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xC870;&#xC791;, &#xD45C;&#xC900; &#xC800;&#xD56D; &#xB9CE;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. H. &#xD615; &#xC2A4;&#xD2B8;&#xB808;&#xC778; Rd kw20&#xB294; &#xC804;&#xD1B5;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xAC04;&#xC8FC; &#xB418;&#xC5B4; avirulent, &#xB3D9;&#xBB3C;&#xC758; &#xD608;&#xC561;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC0DD;&#xC874; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xC774;&#xD6C4; &#xC27D;&#xAC8C; &#xC815;&#xC0C1;&#xC801;&#xC778; &#xC131;&#xC778; &#xC778;&#xAC04; &#xC138;&#xB77C; &#xD558; &#xC5EC; &#xC0B4;&#xD574;&#xC640; &#xC720;&#xC544; &#xC950; nasopharynx &#xC2DD;&#xBBFC;&#xC9C0; &#xC218; &#xC5C6;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC758; &#xBAA9;&#xC801;&#xC740; &#xD2B9;&#xC815; &#xAC10;&#xC5FC; &#xBAA8;&#xB378; Rd KW20 &#xC0AC;&#xC6A9;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB294;&#xC9C0; &#xC5EC;&#xBD80;&#xB97C; &#xD655;&#xC778; &#xD588;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xAC83;&#xC740; &#xC5EC;&#xAE30;&#xC5D0; &#xD45C;&#xC2DC; &#xB41C; Rd KW20 &#xCE68;&#xC785;&#xD560; &#xC218; &#xADF8; &#xBD80;&#xB2F4; &#xD2B9;&#xC815; &#xC778;&#xAC04; &#xC0C1;&#xD53C; &#xC138;&#xD3EC; &#xB77C;&#xC778; &#xACF5;&#xAE30; &#xC561;&#xCCB4; &#xC778;&#xD130;&#xD398;&#xC774;&#xC2A4;&#xC5D0;&#xC11C; monolayers&#xB85C;&#xB3C4; &#xC7AC;&#xBC30; &#xB610;&#xB294;&#xC73C;&#xB85C; &#xCC28;&#xBCC4;&#xD654; &#xB41C; &#xC0C1;&#xD53C;. &#xB610;&#xD55C;, Rd KW20 &#xBD88;&#xBA78; &#xD558; &#xAC8C; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xB450;&#xB1CC; microvascular &#xB0B4; &#xD53C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xB2E8;&#xCE35;&#xC744; &#xCE68;&#xC785;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB2E4;. &#xB9C8;&#xC9C0;&#xB9C9;&#xC73C;&#xB85C;,&#xC774; &#xAE34;&#xC7A5; &#xBCF5;&#xC81C; &#xD558; &#xACE0; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xAE30;&#xAD00;&#xC9C0; xenografts&#xC5D0;&#xC11C; &#xCD5C;&#xB300; 3 &#xC8FC; &#xB3D9;&#xC548; &#xC0B4;&#xC544;&#xB0A8;&#xC744; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. Rd kw20&#xC758; &#xC644;&#xC804; &#xD55C; &#xAC8C;&#xB188; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4; &#xAC00;&#xB2A5; &#xD558;&#xBA70; &#xADF8;&#xAC83;&#xC740; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xC870;&#xC791;&#xC5D0; &#xC27D;&#xAC8C; &#xC21C;&#xC885;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC18D;&#xC131; &#xBC0F; &#xC5EC;&#xAE30;&#xC5D0; &#xBCF4;&#xACE0; &#xB41C; &#xACB0;&#xACFC;&#xC774; &#xAE34;&#xC7A5; H. &#xD615; &#xB3C5;&#xC131;&#xC758; &#xC870;&#xC0AC;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC784;&#xC0C1; &#xACA9;&#xB9AC; &#xC0AC;&#xC6A9;&#xC5D0; &#xB300;&#xC548; &#xC784;&#xC744; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0C5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Haemophilus &#xD615; Rd KW20 &#xB3C5;&#xC131; &#xC18D;&#xC131;&#xC774; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Haemophilus influenzae es un pat&#xF3;geno humano adaptado al comensal y que puede causar infecciones de las mucosas, tales como sinusitis, otitis media y bronquitis. Ciertas cepas tambi&#xE9;n pueden causar bacteremia y la meningitis. Aislados cl&#xED;nicos son gen&#xE9;ticamente heterog&#xE9;neo y con frecuencia son recalcitrantes a la manipulaci&#xF3;n gen&#xE9;tica est&#xE1;ndar. H. influenzae cepa Rd. KW20 tradicionalmente se ha considerado avirulento, ya que no sobreviven en el torrente sangu&#xED;neo de los animales, es f&#xE1;cilmente muerto por sueros adulto humano normal y no pueden colonizar la nasofaringe de cr&#xED;as de rata. El prop&#xF3;sito de este estudio fue determinar si Rd. KW20 podr&#xED;an ser utilizados en ciertos modelos de infecci&#xF3;n. Se muestra aqu&#xED; que la cepa Rd. KW20 pueden invadir ciertas l&#xED;neas celulares humanas epiteliales cultivadas, ya sea como monocapas o como epitelio diferenciado en la interfase aire-l&#xED;quido. Adem&#xE1;s, Rd KW20 puede invadir una monocapa de c&#xE9;lulas cerebrales humanas inmortalizadas endoteliales microvasculares. Por &#xFA;ltimo, esta variedad puede replicarse y sobrevivir en humanos xenoinjertos bronquiales durante un m&#xE1;ximo de 3 semanas. La secuencia gen&#xF3;mica completa de Rd KW20 est&#xE1; disponible y es f&#xE1;cilmente susceptible a la manipulaci&#xF3;n gen&#xE9;tica. Estas propiedades y los resultados aqu&#xED; presentados indican que esta cepa es una alternativa viable a la utilizaci&#xF3;n de los aislados cl&#xED;nicos para la investigaci&#xF3;n de H. influenzae virulencia.

Haemophilus Influenzae Rd. KW20 Tiene propiedades de virulencia

&#x5316;&#x5B66;&#x6210;&#x5206;&#x786E;&#x5B9A;&#x7684;&#x5A92;&#x4ECB;&#xFF0C;&#x652F;&#x6301;&#x5C01;&#x88C5;&#x7684;&#x8FD9;&#x4E24;&#x4E2A;&#x589E;&#x957F;&#x548C;&#x4E0D;&#x53EF;&#x6D41;&#x611F;&#x55DC;&#x8840;&#x6746;&#x83CC;&#x83CC;&#x682A;&#x5728;&#x53D1;&#x9175;&#x6DB2;&#x7684;&#x5BC6;&#x5EA6;&#x662F; &gt; = 10(9) CFU/ml &#x6216;&#x5728;&#x743C;&#x8102;&#x677F;&#x4E0A;&#x63CF;&#x8FF0;&#x3002;&#x4E34;&#x5E8A;&#x5206;&#x79BB;&#x7684;&#x5E73;&#x5747;&#x53D1;&#x7535;&#x65F6;&#x95F4;&#x662F;&#x5C0F;&#x7EC4;&#x7684;&#x5728;&#x4E30;&#x5BCC;&#x3001; &#x5316;&#x5B66;&#x5B9A;&#x4E49;&#x5A92;&#x4F53; (&#x8111;&#x5FC3;&#x8F93;&#x6DB2;&#x53D1;&#x9175;&#x6DB2;&#x8865;&#x5145;&#x4E0E;&#x8840;&#x7EA2;&#x7D20;&#x548C; beta NAD) &#x5AB2;&#x7F8E;&#x7684;&#x3002;

&#x5316;&#x5B66;&#x5B9A;&#x4E49;&#x4E3A;&#x6D41;&#x611F;&#x55DC;&#x8840;&#x6746;&#x83CC;&#x682A;&#x751F;&#x957F;&#x4ECB;&#x8D28;&#x3002;

A chemically defined medium that supports the growth of both encapsulated and nontypeable Haemophilus influenzae strains in broth to densities that are >/= 10(9) CFU/ml or on agar plates is described. The mean generation time of a panel of clinical isolates was comparable to that in rich, chemically undefined media (brain-heart infusion broth supplemented with heme and beta-NAD).

Chemically defined media for growth of Haemophilus influenzae strains.

Un milieu chimiquement d&#xE9;fini qui favorise la croissance &#xE0; la fois encapsul&#xE9;es et non typable souches de Haemophilus influenzae dans un bouillon &#xE0; des densit&#xE9;s qui sont&#x26;gt; / = 10 (9) UFC / ml ou sur des plaques d&#x26;#39;agar est d&#xE9;crite. Le temps moyen de g&#xE9;n&#xE9;ration d&#x26;#39;un panel d&#x26;#39;isolats cliniques &#xE9;tait comparable &#xE0; celle dans les pays riches, les milieux chimiquement d&#xE9;finis (bouillon d&#x26;#39;infusion cerveau-c&#x153;ur compl&#xE9;t&#xE9;e par l&#x26;#39;h&#xE8;me et le b&#xEA;ta-NAD).

Milieux chimiquement d&#xE9;finis pour la croissance de Haemophilus influenzae de souches

Chemisch definierte Medien f&#xFC;r das Wachstum von Haemophilus influenzae-St&#xE4;mmen.

Un mezzo chimicamente definito che supporta la crescita di entrambi incapsulati e nontypeable ceppi di Haemophilus influenzae in brodo di densit&agrave; che sono &amp;gt; / = arrecavano CFU/ml o su piastre di agar &egrave; descritto. Il tempo di generazione medio di un pannello di isolati clinici era paragonabile a quella ricca, chimicamente definita media (brodo di infusione cuore-cervello supplementato con eme e beta-NAD).

Chimicamente definita media per la crescita di ceppi di Haemophilus influenzae.

&#x26;gt; / = 10&#xFF08;9&#xFF09;CFU / ml&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x5BD2;&#x5929;&#x30D7;&#x30EC;&#x30FC;&#x30C8;&#x4E0A;&#x306B;&#x3042;&#x308B;&#x5BC6;&#x5EA6;&#x306B;&#x57F9;&#x990A;&#x6DB2;&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x306E;&#x30AB;&#x30D7;&#x30BB;&#x30EB;&#x5316;&#x3068;&#x5206;&#x985E;&#x4E0D;&#x53EF;&#x80FD;&#x306A;&#x30A4;&#x30F3;&#x30D5;&#x30EB;&#x30A8;&#x30F3;&#x30B6;&#x682A;&#x306E;&#x6210;&#x9577;&#x3092;&#x30B5;&#x30DD;&#x30FC;&#x30C8;&#x3057;&#x3066;&#x5316;&#x5B66;&#x7684;&#x306B;&#x5B9A;&#x7FA9;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x5A92;&#x4F53;&#x304C;&#x8A18;&#x8F09;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x81E8;&#x5E8A;&#x5206;&#x96E2;&#x682A;&#x306E;&#x30D1;&#x30CD;&#x30EB;&#x306E;&#x5E73;&#x5747;&#x4E16;&#x4EE3;&#x6642;&#x9593;&#x306F;&#x3001;&#x8C4A;&#x5BCC;&#x306A;&#x3001;&#x5316;&#x5B66;&#x7684;&#x306B;&#x672A;&#x5B9A;&#x7FA9;&#x306E;&#x30E1;&#x30C7;&#x30A3;&#x30A2;&#xFF08;&#x30D8;&#x30E0;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x3B2;-NAD&#x3092;&#x6DFB;&#x52A0;&#x3057;&#x305F;&#x30D6;&#x30EC;&#x30A4;&#x30F3;&#x30CF;&#x30FC;&#x30C8;&#x30A4;&#x30F3;&#x30D5;&#x30E5;&#x30FC;&#x30B8;&#x30E7;&#x30F3;&#x30D6;&#x30A4;&#x30E8;&#x30F3;&#xFF09;&#x3067;&#x540C;&#x7B49;&#x3067;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x3002;

&#x30A4;&#x30F3;&#x30D5;&#x30EB;&#x30A8;&#x30F3;&#x30B6;&#x682A;&#x306E;&#x6210;&#x9577;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x5316;&#x5B66;&#x7684;&#x306B;&#x5B9A;&#x7FA9;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30E1;&#x30C7;&#x30A3;&#x30A2;

&#xAD6D;&#xBB3C;&#xC740; &#xBC00;&#xB3C4;&#xB97C; &#xBAA8;&#xB450; &#xCEA1;&#xC290;&#xD654;&#xC758; &#xC131;&#xC7A5; &#xBC0F; nontypeable Haemophilus &#xD615; &#xAE34;&#xC7A5;&#xC5D0;&#xC11C;&#xB294; &#xD654;&#xD559;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC815;&#xC758; &#xB41C; &#xB9E4;&#xCCB4; &amp;gt; / 10(9) CFU/ml = &#xB610;&#xB294; &#xD55C; &#xCC9C; &#xBC30;&#xC9C0;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC124;&#xBA85; &#xD558;&#xB294;. &#xC784;&#xC0C1; &#xACA9;&#xB9AC; &#xD328;&#xB110;&#xC758; &#xD3C9;&#xADE0; &#xC138;&#xB300; &#xC2DC;&#xAC04;&#xC774; &#xD48D;&#xBD80; &#xD558; &#xACE0;, &#xD654;&#xD559;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC815;&#xC758; &#xB418;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC740; &#xBBF8;&#xB514;&#xC5B4; (&#xB1CC;-&#xC2EC;&#xC7A5; &#xC8FC;&#xC785; &#xAD6D;&#xBB3C; heme&#xACFC; &#xBCA0;&#xD0C0;-NAD &#xBCF4;&#xC644;)&#xC5D0; &#xBE44;&#xAD50; &#xD588;&#xB2E4;.

&#xD654;&#xD559;&#xC801; Haemophilus &#xD615; &#xC885;&#xC790;&#xC758; &#xC131;&#xC7A5; &#xC704;&#xD55C; &#xBBF8;&#xB514;&#xC5B4; &#xC815;&#xC758;.

Un medio qu&#xED;micamente definido que apoya el crecimiento de cepas influenzae no tipificable tanto encapsulados y Haemophilus en caldo de densidades que se&#x26;gt; / = 10 (9) UFC / ml o en placas de agar se describen. El tiempo de generaci&#xF3;n media de un panel de aislados cl&#xED;nicos fue comparable a la que en medios ricos, qu&#xED;micamente definidos (cerebro-coraz&#xF3;n caldo de infusi&#xF3;n suplementado con NAD hemo y beta-).

Medios qu&#xED;micamente definidos para el crecimiento de cepas de Haemophilus influenzae

K1 &#x80F6;&#x56CA;&#x662F;&#x5FC5;&#x4E0D;&#x53EF;&#x5C11;&#x7684;&#x6BD2;&#x529B;&#x682A;&#x5927;&#x80A0;&#x57C3;&#x5E0C;&#x6C0F;&#x5927;&#x80A0;&#x6746;&#x83CC;&#xFF0C;&#x5BFC;&#x81F4;&#x65B0;&#x751F;&#x513F;&#x8111;&#x819C;&#x708E;&#x7684;&#x51B3;&#x5B9A;&#x56E0;&#x7D20;&#x3002;&#x751F;&#x7269;&#x5408;&#x6210;&#x548C;&#x8FD0;&#x8F93;&#x7684;&#x80F6;&#x56CA;&#xFF0C;alpha &#x8FBE;&#x5230; 2.8 &#x94FE;&#x63A5;&#x7684;&#x805A;&#x5408;&#x7269;&#x7684;&#x553E;&#x6DB2;&#x9178;&#xFF0C;&#x5149;&#x542F;&#x793E; 17 kb &#x57FA;&#x56E0;&#x7C07;&#x7684;&#x7F16;&#x7801;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5220;&#x9664; neuC&#xFF0C;&#x5377;&#x5165;&#x553E;&#x6DB2;&#x9178;&#x5408;&#x6210;&#xFF0C;&#x4ECE; EV36&#xFF0C;K-12-K1 &#x6742;&#x4EA4;&#xFF0C;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x7684;&#x7B49;&#x4F4D;&#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x4EA4;&#x6362; K1 &#x57FA;&#x56E0;&#x3002;&#x5916;&#x90E8;&#x6DFB;&#x52A0;&#x7684;&#x553E;&#x6DB2;&#x9178;&#x8FD8;&#x539F;&#x80F6;&#x56CA;&#x8868;&#x8FBE;&#x5230;&#x5220;&#x9664;&#x5E94;&#x53D8; &#xFF08;DeltaneuC&#xFF09;&#xFF0C;&#x8BC1;&#x5B9E; NeuC &#x553E;&#x6DB2;&#x9178;&#x5408;&#x6210;&#x7684;&#x5FC5;&#x8981;&#x6761;&#x4EF6;&#x3002;NeuC &#x663E;&#x793A;&#x76F8;&#x4F3C;&#x7684; UDP-N-&#x4E59;&#x9170;&#x8461;&#x8404;&#x7CD6; (&#x5E38;&#x6CF0;) 2 epimerases &#x4ECE;&#x539F;&#x6838;&#x751F;&#x7269;&#x548C;&#x771F;&#x6838;&#x751F;&#x7269;&#x7684;&#x63A8;&#x5BFC;&#x7684;&#x6C28;&#x57FA;&#x9178;&#x5E8F;&#x5217;&#x3002;NeuC &#x540C;&#x6E90;&#x7269;&#x4E09;&#x3001; &#x94FE;&#x7403;&#x83CC;&#x8840;&#x6E05;&#x578B;&#x8865;&#x5145;&#x4E86; DeltaneuC&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x514B;&#x9686;&#x6210;&#x5185;&#x542B;&#x8868;&#x8FBE;&#x8F7D;&#x4F53;&#xFF0C;&#x4FBF;&#x4E8E;&#x5206;&#x79BB;&#x7EAF;&#x5316;&#x7684; neuC &#x57FA;&#x56E0;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x8868;&#x660E;&#x7EB8;&#x8272;&#x8C31;&#x7EAF;&#x5316;&#x7684; neuC &#x57FA;&#x56E0;&#x4EA7;&#x7269;&#x50AC;&#x5316;&#x5F62;&#x6210; acetamidoglucal [2-14 C] &#x548C; [N-(14) C] &#x4ECE; UDP-[(14) C] &#x5E38;&#x6CF0; acetylmannosamine (ManNAc)&#x3002;&#x8D28;&#x5B50;&#x548C;&#x78F7;&#x6838;&#x78C1;&#x5171;&#x632F;&#x6CE2;&#x8C31;&#x5206;&#x6790;&#x8BC1;&#x5B9E;&#x4E86;&#x4E0E;&#x76F8;&#x5E94;&#x7248;&#x672C;&#x7684; UDP &#x5F62;&#x6210;&#x7684;&#x53CD;&#x5E94;&#x4E2D;&#x95F4;&#x4F53; 2-acetamidoglucal&#x3002;NeuC &#x4E0D;&#x80FD;&#x4F7F;&#x7528;&#x5E38;&#x6CF0;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x57FA;&#x6750;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x6570;&#x636E;&#x8868;&#x660E;&#xFF0C;neuC &#x5C06;&#x7F16;&#x7801;&#x5DEE;&#x5411;&#x5F02;&#x6784;&#x9176;&#x50AC;&#x5316; 2 acetamidoglucal &#x4E2D;&#x95F4;&#x901A;&#x8FC7; UDP &#x5E38;&#x6CF0;&#x4ECE; ManNAc &#x7684;&#x5F62;&#x6210;&#x3002;&#x610F;&#x5916;&#x7684;&#x91CA;&#x653E;&#x7684;&#x4E2D;&#x95F4; glucal &#x548C; ManNAc &#x5F62;&#x6210;&#x53EF;&#x80FD;&#x7387;&#x6781;&#x4F4E;&#x662F;&#x9020;&#x6210;&#x7684;&#x4F53;&#x5916;&#x6D4B;&#x5B9A;&#x6761;&#x4EF6;&#xFF0C;&#x5176;&#x4E2D;&#x7684;&#x4E00;&#x4E2A;&#x5173;&#x952E;&#x8C03;&#x63A7;&#x5206;&#x5B50;&#x6216;&#x86CB;&#x767D;&#x662F;&#x7F3A;&#x5E2D;&#x3002;

NeuC &#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x5927;&#x80A0;&#x57C3;&#x5E0C;&#x6C0F;&#x5927;&#x80A0;&#x6746;&#x83CC; K1 &#x662F; UDP N-&#x4E59;&#x9170;&#x8461;&#x8404;&#x7CD6; 2 &#x5F02;&#x6784;&#x3002;

The K1 capsule is an essential virulence determinant of Escherichia coli strains that cause meningitis in neonates. Biosynthesis and transport of the capsule, an alpha-2,8-linked polymer of sialic acid, are encoded by the 17-kb kps gene cluster. We deleted neuC, a K1 gene implicated in sialic acid synthesis, from the chromosome of EV36, a K-12-K1 hybrid, by allelic exchange. Exogenously added sialic acid restored capsule expression to the deletion strain (DeltaneuC), confirming that NeuC is necessary for sialic acid synthesis. The deduced amino acid sequence of NeuC showed similarities to those of UDP-N-acetylglucosamine (GlcNAc) 2-epimerases from both prokaryotes and eukaryotes. The NeuC homologue from serotype III Streptococcus agalactiae complements DeltaneuC. We cloned the neuC gene into an intein expression vector to facilitate purification. We demonstrated by paper chromatography that the purified neuC gene product catalyzed the formation of [2-(14)C]acetamidoglucal and [N-(14)C]acetylmannosamine (ManNAc) from UDP-[(14)C]GlcNAc. The formation of reaction intermediate 2-acetamidoglucal with the concomitant release of UDP was confirmed by proton and phosphorus nuclear magnetic resonance spectroscopy. NeuC could not use GlcNAc as a substrate. These data suggest that neuC encodes an epimerase that catalyzes the formation of ManNAc from UDP-GlcNAc via a 2-acetamidoglucal intermediate. The unexpected release of the glucal intermediate and the extremely low rate of ManNAc formation likely were a result of the in vitro assay conditions, in which a key regulatory molecule or protein was absent.

The NeuC protein of Escherichia coli K1 is a UDP N-acetylglucosamine 2-epimerase.

La capsule K1 est un facteur de virulence essentiel de souches d&#x26;#39;Escherichia coli qui causent la m&#xE9;ningite du nouveau-n&#xE9;. Biosynth&#xE8;se et le transport de la capsule, un polym&#xE8;re d&#x26;#39;alpha-2 ,8-li&#xE9; d&#x26;#39;acide sialique, sont cod&#xE9;s par le p&#xF4;le de 17 kb du g&#xE8;ne kps. On supprim&#xE9; neuC, un g&#xE8;ne impliqu&#xE9; dans la synth&#xE8;se K1 acide sialique, &#xE0; partir du chromosome d&#x26;#39;EV36, un hybride K-12-K1, par &#xE9;change all&#xE9;lique. Exog&#xE8;ne d&#x26;#39;acide sialique ajout&#xE9; restaur&#xE9; l&#x26;#39;expression capsule &#xE0; la souche suppression (DeltaneuC), confirmant que NeuC est n&#xE9;cessaire pour la synth&#xE8;se de l&#x26;#39;acide sialique. La s&#xE9;quence d&#x26;#39;acides amin&#xE9;s d&#xE9;duite de NeuC montr&#xE9; des similitudes avec ceux de l&#x26;#39;UDP-N-ac&#xE9;tylglucosamine (GlcNAc) 2-&#xE9;pim&#xE9;rases de fois chez les procaryotes et les eucaryotes. L&#x26;#39;homologue de NeuC s&#xE9;rotype III de Streptococcus agalactiae compl&#xE8;te DeltaneuC. Nous avons clon&#xE9; le g&#xE8;ne neuC dans un vecteur d&#x26;#39;expression int&#xE9;ine pour faciliter la purification. On a d&#xE9;montr&#xE9; par chromatographie sur papier ce que le produit purifi&#xE9; g&#xE8;ne catalys&#xE9;e neuC la formation de [2 - (14) C] et acetamidoglucal [N-(14) C] ac&#xE9;tylmannosamine (ManNAc) de l&#x26;#39;UDP-[(14) C] GlcNAc. La formation de r&#xE9;action interm&#xE9;diaire 2-acetamidoglucal avec la sortie concomitante de l&#x26;#39;UDP a &#xE9;t&#xE9; confirm&#xE9; par protons et du phosphore spectroscopie de r&#xE9;sonance magn&#xE9;tique nucl&#xE9;aire. NeuC peut pas utiliser en tant que substrat GlcNAc. Ces donn&#xE9;es sugg&#xE8;rent que neuC code une &#xE9;pim&#xE9;rase qui catalyse la formation de ManNAc de l&#x26;#39;UDP-GlcNAc via un interm&#xE9;diaire 2-acetamidoglucal. La lib&#xE9;ration inattendue de l&#x26;#39;glucal interm&#xE9;diaire et le taux extr&#xEA;mement faible de la formation ManNAc &#xE9;taient probablement &#xE0; la suite de l&#x26;#39;essai in vitro dans des conditions dans lesquelles une mol&#xE9;cule cl&#xE9; de r&#xE9;glementation ou de la prot&#xE9;ine &#xE9;tait absente.

La prot&#xE9;ine NeuC d&#x26;#39;Escherichia coli K1 est un UDP N-ac&#xE9;tylglucosamine 2-&#xE9;pim&#xE9;rase

Die NeuC Protein von Escherichia coli K1 ist ein UDP-N-Acetylglucosamin-2-Epimerase.

La capsula K1 &egrave; un determinante essenziale virulenza dei ceppi di coli Escherichia che causano meningite nei neonati. Biosintesi e trasporto della capsula, un polimero di acido sialico, legata all&#39;alfa-2,8 sono codificati dal cluster di gene kps 17-kb. Abbiamo eliminato neuC, un K1 gene implicato nella sintesi di acido sialico, sul cromosoma di EV36, un ibrido di K1-K-12, da exchange allelica. Esogenicamente aggiunto acido sialico restaurato capsula espressione per lo sforzo di eliminazione (DeltaneuC), confermando che NeuC &egrave; necessaria per la sintesi di acido sialico. La sequenza aminoacidica dedotta NeuC ha mostrato analogie a quelle della UDP-N-acetilglucosamina (GlcNAc) 2-epimerases da sia procarioti ed eucarioti. L&#39;omologo NeuC dal sierotipo III Streptococcus agalactiae complementi DeltaneuC. Abbiamo clonato il gene neuC in un vettore di espressione intein per facilitare la purificazione. Abbiamo dimostrato di cromatografia su carta che il prodotto del gene neuC purificato catalizzata la formazione di acetamidoglucal [2-14 C] e [N-(14) C] acetylmannosamine (ManNAc) da [(14) C] UDP-GlcNAc. La formazione di reazione intermedia 2-acetamidoglucal con il concomitante rilascio di UDP &egrave; stata confermata dalla spettroscopia di risonanza magnetica nucleare protonica e fosforo. NeuC potrebbe non utilizzare GlcNAc come substrato. Questi dati suggeriscono che neuC codifica un epimarasi che catalizza la formazione di ManNAc da UDP-GlcNAc tramite un intermedio 2-acetamidoglucal. Il rilascio imprevisto del glucal intermedio e il tasso estremamente basso di ManNAc formazione probabilmente erano un risultato delle condizioni di analisi in vitro, in cui una molecola chiave regolamentare o proteina era assente.

La proteina NeuC di Escherichia coli K1 &egrave; un 2-epimarasi UDP-N-acetilglucosammina.

K1&#x30AB;&#x30D7;&#x30BB;&#x30EB;&#x306F;&#x3001;&#x65B0;&#x751F;&#x5150;&#x306E;&#x9AC4;&#x819C;&#x708E;&#x3092;&#x5F15;&#x304D;&#x8D77;&#x3053;&#x3059;&#x5927;&#x8178;&#x83CC;&#x682A;&#x306E;&#x672C;&#x8CEA;&#x7684;&#x306A;&#x75C5;&#x539F;&#x6027;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x56E0;&#x5B50;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x30AB;&#x30D7;&#x30BB;&#x30EB;&#x306E;&#x5408;&#x6210;&#x3068;&#x8F38;&#x9001;&#x3001;&#x30B7;&#x30A2;&#x30EB;&#x9178;&#x306E;&#x3B1;-2 ,8-&#x30EA;&#x30F3;&#x30AF;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30DD;&#x30EA;&#x30DE;&#x30FC;&#x306F;&#x3001;17&#x30AD;&#x30ED;&#x30D0;&#x30A4;&#x30C8;KPS&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9;&#x30BF;&#x30FC;&#x306B;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C9;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x5BFE;&#x7ACB;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x4EA4;&#x63DB;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;neuC&#x3001;EV36&#x306E;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x304B;&#x3089;&#x3001;&#x30B7;&#x30A2;&#x30EB;&#x9178;&#x306E;&#x5408;&#x6210;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3059;&#x308B;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;K1&#x3001;K-12-K1&#x306E;&#x30CF;&#x30A4;&#x30D6;&#x30EA;&#x30C3;&#x30C9;&#x3092;&#x3001;&#x524A;&#x9664;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5916;&#x56E0;&#x7684;&#x306B;&#x6DFB;&#x52A0;&#x30B7;&#x30A2;&#x30EB;&#x9178;&#x306F;&#x3001;NeuC&#x306F;&#x3001;&#x30B7;&#x30A2;&#x30EB;&#x9178;&#x306E;&#x5408;&#x6210;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x78BA;&#x8A8D;&#x3057;&#x3001;&#x6B20;&#x5931;&#x682A;&#xFF08;DeltaneuC&#xFF09;&#x306B;&#x30AB;&#x30D7;&#x30BB;&#x30EB;&#x5F0F;&#x3092;&#x5FA9;&#x5143;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002; NeuC&#x306E;&#x63A8;&#x5B9A;&#x30A2;&#x30DF;&#x30CE;&#x9178;&#x914D;&#x5217;&#x306F;&#x3001;UDP-N-&#x30A2;&#x30BB;&#x30C1;&#x30EB;&#x30B0;&#x30EB;&#x30B3;&#x30B5;&#x30DF;&#x30F3;&#xFF08;GlcNAc&#xFF09;&#x539F;&#x6838;&#x751F;&#x7269;&#x3068;&#x771F;&#x6838;&#x751F;&#x7269;&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x304B;&#x3089;2-&#x30A8;&#x30D4;&#x30E1;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E;&#x3082;&#x306E;&#x306B;&#x985E;&#x4F3C;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x3002;&#x8840;&#x6E05;&#x578B;III&#x9023;&#x9396;&#x7403;&#x83CC;agalactiae&#x304B;&#x3089;NeuC&#x30DB;&#x30E2;&#x30ED;&#x30B0;&#x306F;DeltaneuC&#x88DC;&#x5B8C;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x7CBE;&#x88FD;&#x3092;&#x5BB9;&#x6613;&#x306B;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C6;&#x30A4;&#x30F3;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x30D9;&#x30AF;&#x30BF;&#x30FC;&#x306B;neuC&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x3092;&#x30AF;&#x30ED;&#x30FC;&#x30CB;&#x30F3;&#x30B0;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x7CBE;&#x88FD;neuC&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x7523;&#x7269;&#x306E;&#x5F62;&#x6210;&#x3092;&#x89E6;&#x5A92;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x30DA;&#x30FC;&#x30D1;&#x30FC;&#x30AF;&#x30ED;&#x30DE;&#x30C8;&#x30B0;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30FC;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5B9F;&#x8A3C; - &#x304B;&#x3089;&#x306E;UDP-[14 C] GlcNAc&#x306E;2&#xFF08;14&#xFF09;C] acetamidoglucal&#x3068;[N-&#xFF08;14&#xFF09;C]&#x30A2;&#x30BB;&#x30C1;&#x30EB;&#x30DE;&#x30F3;&#x30CE;&#x30B5;&#x30DF;&#x30F3;&#xFF08;ManNAc&#x306F;&#xFF09; UDP&#x306E;&#x540C;&#x6642;&#x30EA;&#x30EA;&#x30FC;&#x30B9;&#x3057;&#x305F;2 acetamidoglucal&#x53CD;&#x5FDC;&#x4E2D;&#x9593;&#x4F53;&#x306E;&#x5F62;&#x6210;&#x306F;&#x3001;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C8;&#x30F3;&#x3068;&#x30EA;&#x30F3;&#x6838;&#x78C1;&#x6C17;&#x5171;&#x9CF4;&#x5206;&#x5149;&#x6CD5;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x78BA;&#x8A8D;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3002; NeuC&#x306F;&#x3001;&#x57FA;&#x8CEA;&#x3068;&#x3057;&#x3066;GlcNAc&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3067;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x306F;neuC&#x306F;2 acetamidoglucal&#x4E2D;&#x9593;&#x4F53;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;UDP-GlcNAc&#x304B;&#x3089;ManNAc&#x306E;&#x5F62;&#x6210;&#x3092;&#x89E6;&#x5A92;&#x3059;&#x308B;&#x30A8;&#x30D4;&#x30E1;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x3092;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C9;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002; glucal&#x4E2D;&#x9593;&#x304A;&#x3088;&#x3073;ManNAc&#x306E;&#x5F62;&#x6210;&#x306E;&#x975E;&#x5E38;&#x306B;&#x4F4E;&#x91D1;&#x5229;&#x306E;&#x4E88;&#x60F3;&#x5916;&#x306E;&#x30EA;&#x30EA;&#x30FC;&#x30B9;&#x306F;&#x3001;&#x304A;&#x305D;&#x3089;&#x304F;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x5206;&#x5B50;&#x3084;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x304C;&#x5B58;&#x5728;&#x3055;&#x308C;&#x305F;in vitro&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x6761;&#x4EF6;&#x3067;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x3067;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x3002;

&#x5927;&#x8178;&#x83CC;K1&#x306E;NeuC&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306F;UDP N-&#x30A2;&#x30BB;&#x30C1;&#x30EB;&#x30B0;&#x30EB;&#x30B3;&#x30B5;&#x30DF;&#x30F3;2  - &#x30A8;&#x30D4;&#x30E1;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x3067;&#x3059;&#x3002;

K1 &#xCEA1;&#xC290;&#xC740; &#xC2E0;&#xC0DD;&#xC544; &#xC218; &#xB9C9; &#xC5FC;&#xC744; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD558;&#xB294; &#xBCD1;&#xC6D0; &#xC131; &#xB300;&#xC7A5;&#xADE0; &#xBCC0;&#xC885;&#xC744; &#xACB0;&#xC815; &#xD558;&#xB294; &#xD544;&#xC218;&#xC801;&#xC778; &#xB3C5;&#xC131;. &#xC0DD; &#xD569;&#xC131; &#xBC0F; &#xC804;&#xC1A1; sialic &#xC0B0;&#xC758; &#xC54C;&#xD30C;-2, 8-&#xC5F0;&#xACB0; &#xB41C; &#xACE0;&#xBD84;&#xC790; &#xCEA1;&#xC290;&#xC758; 17 kb kps &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xD074;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xD130;&#xB85C; &#xC778;&#xCF54;&#xB529;&#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC; &#xC0AD;&#xC81C; neuC, K1 &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xAD50;&#xD658;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; EV36, K-12-K1 &#xD558;&#xC774;&#xBE0C;&#xB9AC;&#xB4DC; &#xC5FC;&#xC0C9;&#xCCB4;&#xC5D0;&#xC11C; sialic &#xC0B0; &#xD569;&#xC131;&#xC5D0; &#xC5F0;&#xB8E8;. Exogenously &#xCD94;&#xAC00; sialic &#xC0B0; &#xC0AD;&#xC81C; &#xC2A4;&#xD2B8;&#xB808;&#xC778; (DeltaneuC), &#xCEA1;&#xC290; &#xC2DD; NeuC sialic &#xC0B0; &#xD569;&#xC131;&#xC5D0; &#xD544;&#xC694; &#xD558;&#xB2E4;&#xC744; &#xD655;&#xC778; &#xBCF5;&#xC6D0;. NeuC &#xCD94;&#xB860;&#xB41C; &#xC544;&#xBBF8;&#xB178;&#xC0B0; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4; prokaryotes&#xC640; &#xC9C4;&#xD575;&#xC0DD;&#xBB3C;&#xC5D0;&#xC11C; UDP-N-acetylglucosamine (GlcNAc) 2-epimerases&#xC758; &#xC720;&#xC0AC;&#xC131;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC8FC;&#xC5C8;&#xB2E4;. NeuC homologue serotype III &#xC5F0;&#xC1C4; &#xC0C1; &#xAD6C; &#xADE0; agalactiae&#xC5D0;&#xC11C;&#xC5D0;&#xC11C; Deltaneuc&#xB97C; &#xBCF4;&#xC644;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC; &#xC815;&#xD654;&#xB97C; &#xCD09;&#xC9C4; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD558;&#xC5EC; intein &#xC2DD; &#xBCA1;&#xD130;&#xC5D0; neuC &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xB97C; &#xBCF5;&#xC81C; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC885;&#xC774; &#xD06C;&#xB85C;&#xB9C8;&#xD1A0;&#xADF8;&#xB798;&#xD53C;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC21C;&#xD654; neuC &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xC81C;&#xD488; [2-(14) C] acetamidoglucal [N-(14) C] acetylmannosamine (ManNAc) UDP-[(14) C] Glcnac&#xC5D0;&#xC11C;&#xC758; &#xD615;&#xC131; &#xCD09;&#xB9E4; &#xC2DC;&#xC5F0; &#xD588;&#xB2E4;. UDP&#xC758; &#xBD80;&#xC218;&#xC801;&#xC778; &#xCD9C;&#xC2DC;&#xC640; &#xD568;&#xAED8; &#xBC18;&#xC751; &#xC911;&#xAC04; 2-acetamidoglucal&#xC758; &#xD615;&#xC131;&#xC73C;&#xB85C; &#xC591;&#xC131;&#xC790;&#xC640; &#xC778; &#xD575; &#xC790;&#xAE30; &#xACF5;&#xBA85; &#xBD84;&#xAD11;&#xD559;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xD655;&#xC778; &#xB410;&#xB2E4;. Neuc&#xB294; &#xAE30;&#xD310;&#xC73C;&#xB85C; Glcnac&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9;&#xD560; &#xC218; &#xC5C6;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xB370;&#xC774;&#xD130;&#xB294; neuC &#xC778;&#xCF54;&#xB529;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4; catalyzes 2 acetamidoglucal &#xC911;&#xAE09; &#xD1B5;&#xD574; UDP-Glcnac&#xC5D0;&#xC11C; Mannac&#xC758; &#xB300;&#xD615; epimerase &#xAC83;&#xC774; &#xC88B;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC608;&#xAE30;&#xCE58; &#xC54A;&#xC740; &#xC911;&#xAC04; glucal &#xCD9C;&#xC2DC; &#xBC0F; ManNAc &#xD615;&#xC131; &#xAC00;&#xB2A5;&#xC131;&#xC774; &#xB9E4;&#xC6B0; &#xB0AE;&#xC740; &#xC18D;&#xB3C4; &#xD588;&#xB2E4; &#xACB0;&#xACFC;&#xB294; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC678;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC2DC;&#xD5D8; &#xC870;&#xAC74;&#xC758; &#xD575;&#xC2EC; &#xADDC;&#xC81C; &#xBD84;&#xC790; &#xB610;&#xB294; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xACB0; &#xC11D; &#xD588;&#xB2E4;.

&#xB300;&#xC7A5;&#xADE0; K1 NeuC &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC740; UDP N-acetylglucosamine 2-epimerase.

La c&#xE1;psula de K1 es un determinante esencial de la virulencia de cepas de Escherichia coli que causan la meningitis en los reci&#xE9;n nacidos. La bios&#xED;ntesis y el transporte de la c&#xE1;psula, un pol&#xED;mero de alfa-2 ,8-ligado de &#xE1;cido si&#xE1;lico, son codificadas por el grupo de genes 17-kb kbps. Se suprime neuC, un gen implicado en la s&#xED;ntesis de K1 &#xE1;cido si&#xE1;lico, desde el cromosoma de EV36, un h&#xED;brido K-12-K1, por intercambio al&#xE9;lico. Ex&#xF3;genamente &#xE1;cido si&#xE1;lico a&#xF1;adido restaurado expresi&#xF3;n c&#xE1;psula con la cepa de deleci&#xF3;n (DeltaneuC), confirmando que NeuC es necesario para la s&#xED;ntesis de &#xE1;cido si&#xE1;lico. La secuencia de amino&#xE1;cidos deducida de NeuC mostraron similitudes con las de la UDP-N-acetilglucosamina (GlcNAc) 2-epimerases de procariotas y eucariotas. El hom&#xF3;logo NeuC del serotipo III Streptococcus agalactiae complementa DeltaneuC. Hemos clonado el gen neuC en un vector de expresi&#xF3;n intein para facilitar la purificaci&#xF3;n. Hemos demostrado por cromatograf&#xED;a en papel que el producto purificado neuC gen cataliz&#xF3; la formaci&#xF3;n de [2 - C (14)] acetamidoglucal y [N-C (14)] acetylmannosamine (ManNAc) a partir de UDP-[C (14)] GlcNAc. La formaci&#xF3;n de reacci&#xF3;n intermedio 2-acetamidoglucal con la liberaci&#xF3;n concomitante de la UDP fue confirmada por prot&#xF3;n y f&#xF3;sforo espectroscopia de resonancia magn&#xE9;tica nuclear. NeuC no pod&#xED;a utilizar GlcNAc como un sustrato. Estos datos sugieren que codifica una neuC epimerasa que cataliza la formaci&#xF3;n de ManNAc de la UDP-GlcNAc a trav&#xE9;s de un intermedio 2-acetamidoglucal. La liberaci&#xF3;n inesperada de la glucal intermedia y la tasa extremadamente baja de la formaci&#xF3;n de ManNAc probable que fueron el resultado del ensayo en condiciones in vitro, en el que una mol&#xE9;cula clave en la regulaci&#xF3;n o la prote&#xED;na estuvo ausente.

La Prote&#xED;na NeuC de Escherichia Coli K1 es una UDP N-acetilglucosamina 2-epimerasa

&#x8DE8;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x7A81;&#x53D8;&#x7684;&#x4E92;&#x8865;&#x53EF;&#x4EE5;&#x5F15;&#x5165;&#x7684; episomal &#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x62F7;&#x8D1D;&#x6570;&#x7684;&#x9879;&#x76EE;&#x3002;&#x4E00;&#x79CD;&#x89E3;&#x51B3;&#x65B9;&#x6848;&#x662F;&#x4E3A;&#x4E86;&#x7814;&#x7A76;&#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x793A;&#x5728;&#x72EC;&#x8054;&#x4F53;&#x5185;&#x4E00;&#x4E2A;&#x5F02;&#x4F4D;&#x7AD9;&#x70B9;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5DF2;&#x8BBE;&#x8BA1;&#x5E76;&#x5EFA;&#x9020;&#x4E00;&#x4E2A;&#x5411;&#x91CF;&#xFF0C;&#x5141;&#x8BB8;&#x8FDB;&#x5165;&#x6D41;&#x611F;&#x55DC;&#x8840;&#x6746;&#x83CC; Rd KW20 &#x67D3;&#x8272;&#x4F53; (HI1018) &#x4E2D;&#x7684;&#x5E27;&#x8F6C;&#x79FB; IS1016 V6 &#x86CB;&#x767D;&#x7F16;&#x7801;&#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x540C;&#x6E90;&#x91CD;&#x7EC4;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E2A;&#x7F51;&#x7AD9;&#x662F;&#x7684;&#x4F4D;&#x7F6E; &gt; &#x6216; = 35 kilobase &#x80F6;&#x56CA;&#x8F68;&#x8FF9;&#x4E2D;&#x5C01;&#x88C5;&#x7684;&#x7C7B;&#x578B; b &#x548C; d &#x7684;&#x83CC;&#x682A;&#x3002;&#x6B64;&#x8F68;&#x8FF9;&#x4E2D;&#x4E0D;&#x5B58;&#x5728;&#x4E0D;&#x53EF; Rd KW20 &#x5E94;&#x53D8;&#xFF0C;&#x4ECE;&#x800C;&#x4F7F;&#x5F02;&#x4F4D;&#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x7684; homologously &#x5230; HI1018 &#x91CD;&#x7EC4;&#x65E0;&#x6781;&#x5730;&#x7684;&#x5F71;&#x54CD;&#x3002;

&#x7279;&#x5B9A;&#x7684;&#x6D41;&#x611F;&#x55DC;&#x8840;&#x6746;&#x83CC;&#x4E0D;&#x53EF;&#x5F02;&#x4F4D;&#x4F20;&#x9012;&#x8F7D;&#x4F53;&#x7684;&#x6784;&#x5EFA;&#x3002;

Complementation of chromosomal mutations in trans can introduce artifacts due to the number of episomal copies of the gene in question. One solution is to study the gene expressed at a single ectopic site in cis. We have designed and constructed a vector that allows homologous recombination into a gene encoding a frame-shifted IS1016-V6 protein in the Haemophilus influenzae Rd KW20 chromosome (HI1018). This site is the location of the > or = 35 kilobase capsule locus in encapsulated type b and d strains. This locus is not present in the nontypeable Rd KW20 strain, thus allowing ectopic expression of genes homologously recombined into HI1018 without polar effects.

Construction of a nontypeable Haemophilus influenzae-specific ectopic delivery vector.

La compl&#xE9;mentation des mutations chromosomiques dans les trans peuvent introduire des artefacts dus au nombre de copies &#xE9;pisomiques du g&#xE8;ne en question. Une solution consiste &#xE0; &#xE9;tudier le g&#xE8;ne exprim&#xE9; dans un seul site extra-ut&#xE9;rine en cis. Nous avons con&#xE7;u et construit un vecteur qui permet une recombinaison homologue dans un g&#xE8;ne codant pour une trame d&#xE9;cal&#xE9;e IS1016-V6 prot&#xE9;ine dans le chromosome de Haemophilus influenzae Rd KW20 (HI1018). Ce site est le lieu de l&#x26;#39;&#x26;gt; ou = 35 locus capsule kilobase de type encapsul&#xE9; b et d souches. Ce locus n&#x26;#39;est pas pr&#xE9;sent dans la souche non typable Rd KW20, permettant ainsi l&#x26;#39;expression ectopique de g&#xE8;nes recombin&#xE9;s dans homologue HI1018 sans effets polaires.

Construction d&#x26;#39;un Haemophilus influenzae non typable sp&#xE9;cifique Vecteur de livraison extra-ut&#xE9;rine

Bau einer nontypeable Haemophilus influenzae-spezifische Auslieferung ektopische Vektor.

Complementazione di mutazioni cromosomiche in trans pu&ograve; introdurre artefatti a causa del numero di episomal copie del gene in questione. Una soluzione &egrave; di studiare il gene espresso in un unico sito ectopico in cis. Abbiamo progettato e costruito un vettore che permette la ricombinazione omologa in un gene che codifica per una proteina di IS1016-V6 telaio-spostato nel cromosoma Haemophilus influenzae Rd KW20 (HI1018). Questo sito &egrave; la posizione dei &amp;gt; o = 35 kilobase locus capsula incapsulato tipo b e d ceppi. Questo locus non &egrave; presente nel ceppo nontypeable Rd KW20, permettendo cos&igrave; l&#39;espressione ectopica di geni homologously ricombinati in HI1018 senza effetti polari.

Costruzione di un vettore di consegna ectopica nontypeable Haemophilus influenzae-specifici.

&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x306E;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x7A81;&#x7136;&#x5909;&#x7570;&#x306E;&#x76F8;&#x88DC;&#x6027;&#x306F;&#x3001;&#x554F;&#x984C;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x30A8;&#x30D4;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0;&#x306E;&#x30B3;&#x30D4;&#x30FC;&#x6570;&#x306B;&#x8D77;&#x56E0;&#x3059;&#x308B;&#x30A2;&#x30FC;&#x30C1;&#x30D5;&#x30A1;&#x30AF;&#x30C8;&#x3092;&#x5C0E;&#x5165;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3064;&#x306E;&#x30BD;&#x30EA;&#x30E5;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306F;&#x3001;&#x30B7;&#x30B9;&#x306E;&#x5358;&#x4E00;&#x306E;&#x7570;&#x6240;&#x6027;&#x90E8;&#x4F4D;&#x3067;&#x767A;&#x73FE;&#x3059;&#x308B;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x3092;&#x7814;&#x7A76;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x30A4;&#x30F3;&#x30D5;&#x30EB;&#x30A8;&#x30F3;&#x30B6;&#x83CC;&#x8DEF;KW20&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#xFF08;HI1018&#xFF09;&#x306E;&#x30D5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30E0;&#x30B7;&#x30D5;&#x30C8;IS1016-V6&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3092;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C9;&#x3059;&#x308B;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306B;&#x76F8;&#x540C;&#x7D44;&#x63DB;&#x3048;&#x3092;&#x53EF;&#x80FD;&#x306B;&#x3059;&#x308B;&#x30D9;&#x30AF;&#x30C8;&#x30EB;&#x3092;&#x8A2D;&#x8A08;&#x3057;&#x3001;&#x69CB;&#x7BC9;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x5BC6;&#x9589;&#x578B;B&#x3068;D&#x7CFB;&#x7D71;&#x306E;&#x26;gt;&#x307E;&#x305F;&#x306F;= 35&#x30AD;&#x30ED;&#x30D9;&#x30FC;&#x30B9;&#x306E;&#x30AB;&#x30D7;&#x30BB;&#x30EB;&#x5EA7;&#x306E;&#x5834;&#x6240;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x8ECC;&#x8DE1;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x76F8;&#x540C;&#x6975;&#x6027;&#x306E;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x53D7;&#x3051;&#x305A;HI1018&#x306B;&#x7D44;&#x63DB;&#x3048;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x7570;&#x6240;&#x6027;&#x767A;&#x73FE;&#x3092;&#x53EF;&#x80FD;&#x306B;&#x3059;&#x308B;&#x3001;&#x5206;&#x985E;&#x4E0D;&#x53EF;&#x80FD;&#x306A;&#x8DEF;KW20&#x682A;&#x306B;&#x306F;&#x5B58;&#x5728;&#x3057;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;

&#x5206;&#x985E;&#x4E0D;&#x53EF;&#x80FD;&#x306A;&#x30A4;&#x30F3;&#x30D5;&#x30EB;&#x30A8;&#x30F3;&#x30B6;&#x83CC;&#x7279;&#x6709;&#x306E;&#x7570;&#x6240;&#x6027;&#x9001;&#x9054;&#x30D9;&#x30AF;&#x30BF;&#x30FC;&#x306E;&#x69CB;&#x7BC9;

&#xD2B8;&#xB79C;&#xC2A4;&#xC5D0; &#xC5FC;&#xC0C9;&#xCCB4; &#xBCC0;&#xC774;&#xC758; &#xBCF4;&#xC644;&#xC131; &#xBB38;&#xC81C;&#xC758; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; episomal &#xB9E4;&#xC218; &#xC778; &#xC720;&#xBB3C;&#xC744; &#xC18C;&#xAC1C; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD558;&#xB098;&#xC758; &#xC194;&#xB8E8;&#xC158;&#xC740; &#xB2E8;&#xC77C; &#xC18C;&#xC131; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8; cis&#xC5D0;&#xC11C; &#xD45C;&#xD604; &#xD558;&#xB294; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xB97C; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xD558;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xC124;&#xACC4; &#xD558; &#xACE0; &#xAC74;&#xC124; &#xD5C8;&#xC6A9; &#xC778;&#xCF54;&#xB529; Haemophilus &#xD615; Rd KW20 &#xC5FC;&#xC0C9;&#xCCB4; (HI1018)&#xC5D0;&#xC11C; &#xD504;&#xB808;&#xC784; &#xC774;&#xB3D9; IS1016 V6 &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC5D0; &#xB3D9;&#xC885; &#xC7AC;&#xC870;&#xD569; &#xBCA1;&#xD130;. &#xC774; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;&#xB294;&#xC758; &#xC704;&#xCE58;&#xB294; &amp;gt; &#xB610;&#xB294; &#xCEA1;&#xC290;&#xD654; &#xC720;&#xD615; b &#xBC0F; d &#xAE34;&#xC7A5;&#xC5D0; 35 kilobase &#xCEA1;&#xC290; &#xB85C;&#xCEE4; &#xC2A4; =. &#xC774; &#xB85C;&#xCEE4; &#xC2A4; &#xD3F4;&#xB77C; &#xD6A8;&#xACFC; &#xC5C6;&#xC774; hi1018&#xB85C; &#xC62E;&#xAE30;&#xB294; homologously &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xC18C;&#xC131; &#xD45C;&#xD604; &#xB418;&#xBBC0;&#xB85C; nontypeable Rd KW20 &#xC2A4;&#xD2B8;&#xB808;&#xC778;&#xC5D0; &#xC874;&#xC7AC; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Nontypeable Haemophilus &#xD615; &#xD2B9;&#xC815; &#xC18C;&#xC131; &#xBC30;&#xB2EC; &#xBCA1;&#xD130;&#xC758; &#xAC74;&#xC124;.

La complementaci&#xF3;n de mutaciones cromos&#xF3;micas en trans pueden introducir artefactos debido al n&#xFA;mero de copias de episomales el gen en cuesti&#xF3;n. Una soluci&#xF3;n es estudiar el gen se expresa en un solo sitio ect&#xF3;pico en cis. Hemos dise&#xF1;ado y construido un vector que permite la recombinaci&#xF3;n hom&#xF3;loga en un gen que codifica un marco desplazado IS1016-V6 de prote&#xED;nas en el cromosoma Haemophilus influenzae Rd. KW20 (HI1018). Este sitio es la ubicaci&#xF3;n de la&#x26;gt; o = 35 locus de la c&#xE1;psula en el tipo de encapsulado kilobases b y d cepas. Este locus no est&#xE1; presente en la cepa no tipificable Rd. KW20, permitiendo as&#xED; que la expresi&#xF3;n ect&#xF3;pica de genes recombinado hom&#xF3;logamente en HI1018 sin efectos polares.

Construcci&#xF3;n de una Haemophilus influenzae no tipificable espec&#xED;fico de Vector de entrega ect&#xF3;pico

Certain strains of an obligate parasite of the human upper respiratory tract, nontypeable Haemophilus influenzae (NTHi), can cause invasive diseases such as septicemia and meningitis, as well as chronic mucosal infections such as otitis media. To do this, the organism must invade and survive within both epithelial and endothelial cells. We have identified a facilitator of NTHi survival inside human cells, virulence-associated protein D (vapDHi, encoded by gene HI0450). Both vapDHi and a flanking gene, HI0451, exhibit the genetic and physical characteristics of a toxin/antitoxin (TA) locus, with VapDHi serving as the toxin moiety and HI0451 as the antitoxin. We propose the name VapXHi for the HI0451 antitoxin protein. Originally identified on plasmids, TA loci have been found on the chromosomes of a number of bacterial pathogens, and have been implicated in the control of translation during stressful conditions. Translation arrest would enhance survival within human cells and facilitate persistent or chronic mucosal infections.

Identification and characterization of a nontypeable Haemophilus influenzae putative toxin-antitoxin locus.

&#x4FB5;&#x88AD;&#x6027;&#x75BE;&#x75C5;&#xFF0C;&#x5982;&#x8D25;&#x8840;&#x75C7;&#x3001; &#x8111;&#x819C;&#x708E;&#x3001; &#x4EE5;&#x53CA;&#x6162;&#x6027;&#x7C98;&#x819C;&#x611F;&#x67D3;&#x4E2D;&#x8033;&#x708E;&#x7B49;&#xFF0C;&#x53EF;&#x80FD;&#x4F1A;&#x5BFC;&#x81F4;&#x67D0;&#x4E9B;&#x682A;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x4E0A;&#x547C;&#x5438;&#x9053;&#xFF0C;&#x4E0D;&#x53EF;&#x6D41;&#x611F;&#x55DC;&#x8840;&#x6746;&#x83CC; &#xFF08;&#x5E02;&#x5357;&#x5929;&#x6D77;&#x4E00;&#xFF09;&#xFF0C;&#x9884;&#x7559;&#x5BC4;&#x751F;&#x866B;&#x3002;&#x82E5;&#x8981;&#x6267;&#x884C;&#x6B64;&#x64CD;&#x4F5C;&#xFF0C;&#x6709;&#x673A;&#x4F53;&#x5FC5;&#x987B;&#x4FB5;&#x5165;&#xFF0C;&#x5E76;&#x5728;&#x4E0A;&#x76AE;&#x548C;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5185;&#x751F;&#x5B58;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5DF2;&#x786E;&#x5B9A;&#x5E02;&#x5357;&#x5929;&#x6D77;&#x4E00;&#x751F;&#x5B58;&#x5728;&#x4EBA;&#x4F53;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5185;&#x6BD2;&#x529B;&#x76F8;&#x5173;&#x86CB;&#x767D; D &#xFF08;vapDHi&#xFF0C;HI0450 &#x57FA;&#x56E0;&#x7F16;&#x7801;&#xFF09; &#x7684;&#x4E3B;&#x6301;&#x4EBA;&#x3002;VapDHi &#x548C;&#x4FA7;&#x7FFC;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#xFF0C;HI0451&#xFF0C;VapDHi &#x4F5C;&#x4E3A;&#x6BD2;&#x7D20;&#x548C;&#x6297;&#x6BD2;&#x7D20;&#x4F5C;&#x4E3A; HI0451 &#x4E0E;&#x5C55;&#x54C1;&#x6BD2;&#x7D20;/&#x6297;&#x6BD2;&#x7D20; (TA) &#x7684;&#x8F68;&#x8FF9;&#x7684;&#x9057;&#x4F20;&#x548C;&#x7269;&#x7406;&#x7279;&#x6027;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5EFA;&#x8BAE;&#x7684;&#x540D;&#x79F0; VapXHi HI0451 &#x6297;&#x6BD2;&#x7D20;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x3002;&#x6700;&#x521D;&#x786E;&#x5B9A;&#x7684;&#x8D28;&#x7C92;&#xFF0C;TA &#x5EA7;&#x4F4D;&#x6570;&#x76EE;&#x7684;&#x7EC6;&#x83CC;&#x6027;&#x75C5;&#x539F;&#x4F53;&#x3001; &#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x4E0A;&#x88AB;&#x53D1;&#x73B0;&#xFF0C;&#x6709;&#x7275;&#x8FDE;&#x7684;&#x7FFB;&#x8BD1;&#x671F;&#x95F4;&#x538B;&#x529B;&#x6761;&#x4EF6;&#x63A7;&#x5236;&#x3002;&#x7FFB;&#x8BD1;&#x902E;&#x6355;&#x5C06;&#x52A0;&#x5F3A;&#x5728;&#x4EBA;&#x4F53;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5185;&#x7684;&#x751F;&#x5B58;&#x548C;&#x4FC3;&#x8FDB;&#x6301;&#x7EED;&#x6027;&#x6216;&#x6162;&#x6027;&#x9ECF;&#x819C;&#x611F;&#x67D3;&#x3002;

&#x8BC6;&#x522B;&#x548C;&#x4E0D;&#x53EF;&#x6D41;&#x611F;&#x55DC;&#x8840;&#x6746;&#x83CC;&#x5047;&#x5B9A; toxin-antitoxin &#x8F68;&#x8FF9;&#x7684;&#x8868;&#x5F81;&#x3002;

Certaines souches d&#x26;#39;un parasite obligatoire des voies respiratoires sup&#xE9;rieures humaines, Haemophilus influenzae non typable (NTHi), peut provoquer des maladies invasives telles que la septic&#xE9;mie et la m&#xE9;ningite, ainsi que les infections chroniques de la muqueuse comme l&#x26;#39;otite moyenne. Pour ce faire, l&#x26;#39;organisme doit envahir et survivre dans les deux cellules &#xE9;pith&#xE9;liales et endoth&#xE9;liales. Nous avons identifi&#xE9; un facilitateur de la survie NTHi l&#x26;#39;int&#xE9;rieur des cellules humaines, la prot&#xE9;ine associ&#xE9;e &#xE0; la virulence D (vapDHi, cod&#xE9;e par le g&#xE8;ne HI0450). Les deux vapDHi et un g&#xE8;ne d&#x26;#39;accompagnement, HI0451, pr&#xE9;sentent les caract&#xE9;ristiques g&#xE9;n&#xE9;tiques et physiques d&#x26;#39;une toxine / antitoxine (TA) locus, avec VapDHi si&#xE9;geant en tant que fragment de toxine et HI0451 que l&#x26;#39;antitoxine. Nous proposons la VapXHi nom pour la prot&#xE9;ine HI0451 antitoxine. A l&#x26;#39;origine identifi&#xE9; sur des plasmides, des loci d&#x26;#39;assistance technique ont &#xE9;t&#xE9; trouv&#xE9;s sur les chromosomes d&#x26;#39;un certain nombre d&#x26;#39;agents pathog&#xE8;nes bact&#xE9;riens, et ont &#xE9;t&#xE9; impliqu&#xE9;s dans le contr&#xF4;le de la traduction dans des conditions stressantes. Traduction arrestation serait d&#x26;#39;am&#xE9;liorer la survie dans les cellules humaines et de faciliter persistantes ou chroniques des infections des muqueuses.

Identification et caract&#xE9;risation d&#x26;#39;un non typable d&#x26;#39;Haemophilus influenzae putatif toxine-antitoxine Locus

Identifizierung und Charakterisierung eines nontypeable Haemophilus influenzae putative Toxin-Antitoxin-Locus.

Alcuni ceppi di un parassita obbligato del tratto respiratorio superiore umano, nontypeable Haemophilus influenzae (NTHi), possono causare malattie invasive come meningite e la setticemia, cos&igrave; come infezioni croniche delle mucose quali otite media. Per fare questo, l&#39;organismo deve invadere e sopravvivere all&#39;interno delle cellule epiteliali ed endoteliali. Abbiamo individuato un facilitatore di sopravvivenza NTHi all&#39;interno delle cellule umane, virulenza-associated protein D (vapDHi, codificata dal gene HI0450). VapDHi sia un gene fiancheggianti, HI0451, esibiscono le caratteristiche genetiche e fisiche di un locus di tossina/antitossina (TA), con VapDHi che serve come il gruppo funzionale di tossina e HI0451 come l&#39;antitossina. Proponiamo il nome VapXHi per la proteina di antitossina HI0451. Originariamente identificato su plasmidi, TA loci sono stati trovati sui cromosomi di un certo numero di agenti patogeni batterici e sono stati implicati nel controllo della traduzione durante condizioni di stress. Traduzione arresto potrebbe migliorare la sopravvivenza all&#39;interno di cellule umane e facilitare infezioni persistenti o croniche della mucosa.

Identificazione e caratterizzazione di un locus nontypeable Haemophilus influenzae putativo toxin-antitoxin.

&#x4EBA;&#x9593;&#x306E;&#x4E0A;&#x6C17;&#x9053;&#x306E;&#x5ACC;&#x6C17;&#x5BC4;&#x751F;&#x866B;&#x306E;&#x7279;&#x5B9A;&#x306E;&#x83CC;&#x682A;&#x3001;&#x5206;&#x985E;&#x4E0D;&#x53EF;&#x80FD;&#x306A;&#x30A4;&#x30F3;&#x30D5;&#x30EB;&#x30A8;&#x30F3;&#x30B6;&#x83CC;&#xFF08;NTHi&#xFF09;&#x306F;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x6557;&#x8840;&#x75C7;&#x3084;&#x9AC4;&#x819C;&#x708E;&#x306A;&#x3069;&#x306E;&#x4FB5;&#x8972;&#x6027;&#x75BE;&#x60A3;&#x3001;&#x306A;&#x3089;&#x3073;&#x306B;&#x305D;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x4E2D;&#x8033;&#x708E;&#x306A;&#x3069;&#x306E;&#x6162;&#x6027;&#x7C98;&#x819C;&#x306E;&#x611F;&#x67D3;&#x75C7;&#x3092;&#x5F15;&#x304D;&#x8D77;&#x3053;&#x3059;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3092;&#x884C;&#x3046;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x751F;&#x7269;&#x304C;&#x4FB5;&#x5165;&#x3057;&#x3001;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x3068;&#x5185;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x3067;&#x4E57;&#x308A;&#x5207;&#x3089;&#x306A;&#x3051;&#x308C;&#x3070;&#x306A;&#x308A;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x30D2;&#x30C8;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x3001;&#x75C5;&#x539F;&#x6027;&#x95A2;&#x9023;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;D&#xFF08;vapDHi&#x3001;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;HI0450&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C9;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#xFF09;&#x5185;&#x306E;NTHi&#x306E;&#x751F;&#x5B58;&#x306E;&#x30D5;&#x30A1;&#x30B7;&#x30EA;&#x30C6;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x3092;&#x540C;&#x5B9A;&#x3057;&#x305F;&#x3002; vapDHi&#x3068;&#x96A3;&#x63A5;&#x3059;&#x308B;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x3001;HI0451&#x3001;&#x4E21;&#x65B9;&#x3068;&#x3082;VapDHi&#x306F;&#x3001;&#x6297;&#x6BD2;&#x7D20;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x6BD2;&#x7D20;&#x90E8;&#x5206;&#x304A;&#x3088;&#x3073;HI0451&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x3067;&#x3001;&#x6BD2;&#x7D20;/&#x6297;&#x6BD2;&#x7D20;&#xFF08;TA&#xFF09;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x5EA7;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x7684;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x7269;&#x7406;&#x7684;&#x7279;&#x6027;&#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;HI0451&#x6297;&#x6BD2;&#x7D20;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x540D;&#x524D;VapXHi&#x3092;&#x63D0;&#x6848;&#x3059;&#x308B;&#x3002;&#x3082;&#x3068;&#x3082;&#x3068;&#x306E;&#x30D7;&#x30E9;&#x30B9;&#x30DF;&#x30C9;&#x4E0A;&#x306B;&#x540C;&#x5B9A;&#x3055;&#x308C;&#x3001;TA&#x5EA7;&#x306F;&#x3001;&#x7D30;&#x83CC;&#x6027;&#x75C5;&#x539F;&#x4F53;&#x306E;&#x6570;&#x306E;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x3067;&#x767A;&#x898B;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x304A;&#x308A;&#x3001;&#x30B9;&#x30C8;&#x30EC;&#x30B9;&#x306E;&#x591A;&#x3044;&#x6761;&#x4EF6;&#x4E0B;&#x3067;&#x306E;&#x7FFB;&#x8A33;&#x5236;&#x5FA1;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x7FFB;&#x8A33;&#x306E;&#x902E;&#x6355;&#x306F;&#x3001;&#x30D2;&#x30C8;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x3067;&#x306E;&#x751F;&#x5B58;&#x7387;&#x3092;&#x5411;&#x4E0A;&#x3055;&#x305B;&#x3001;&#x6301;&#x7D9A;&#x6027;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x6162;&#x6027;&#x306E;&#x7C98;&#x819C;&#x611F;&#x67D3;&#x3092;&#x4FC3;&#x9032;&#x3059;&#x308B;&#x3067;&#x3042;&#x308D;&#x3046;&#x3002;

&#x5206;&#x985E;&#x4E0D;&#x53EF;&#x80FD;&#x306A;&#x30A4;&#x30F3;&#x30D5;&#x30EB;&#x30A8;&#x30F3;&#x30B6;&#x83CC;&#x3068;&#x63A8;&#x5B9A;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x6BD2;&#x7D20;&#x6297;&#x6BD2;&#x7D20;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x5EA7;&#x306E;&#x540C;&#x5B9A;&#x3068;&#x30AD;&#x30E3;&#x30E9;&#x30AF;&#x30BF;&#x30EA;&#x30BC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;

&#xD2B9;&#xC815; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xC0C1;&#xBD80; &#xD638;&#xD761; &#xAE30;&#xAD00;, nontypeable Haemophilus &#xD615; (NTHi)&#xC758; &#xC758;&#xBB34; &#xAE30;&#xC0DD;&#xCDA9;&#xC758; &#xBCC0;&#xC885; &#xC218; &#xB9C9; &#xC5FC;, &#xD328; &#xD608; &#xC99D; &#xB4F1; &#xCE68; &#xC724; &#xC131; &#xC9C8;&#xD658; &#xBFD0;&#xB9CC; &#xC544;&#xB2C8;&#xB77C; &#xC911;&#xC774;&#xC5FC; &#xB4F1; &#xB9CC;&#xC131; &#xC810; &#xB9C9; &#xAC10;&#xC5FC;&#xC744; &#xC77C;&#xC73C;&#xD0AC; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xC720;&#xAE30; &#xCCB4;&#xB97C; &#xCE68;&#xB7B5; &#xD558; &#xACE0; &#xC0C1;&#xD53C; &#xBC0F; &#xB0B4; &#xD53C; &#xC138;&#xD3EC; &#xB0B4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC0DD;&#xC874; &#xD574;&#xC57C; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xC138;&#xD3EC; &#xC548;&#xC5D0; NTHi &#xC0DD;&#xC874; &#xB3C5;&#xC131; &#xAD00;&#xB828; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; D (vapDHi, HI0450 &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xBD80;&#xD638;&#xD654;)&#xC758; &#xAE30;&#xD68D;&#xC790;&#xB97C; &#xD655;&#xC778; &#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. VapDHi &#xBC0F; flanking &#xC720;&#xC804;&#xC790;, HI0451, VapDHi &#xB3C5; &#xC18C; moiety&#xB294; antitoxin&#xC73C;&#xB85C; hi0451&#xC73C;&#xB85C; &#xBD09;&#xC0AC;&#xC640; &#xB3C5; &#xC18C;/antitoxin (TA) &#xB85C;&#xCEE4; &#xC2A4;&#xC758; &#xC720;&#xC804;&#xACFC; &#xBB3C;&#xB9AC;&#xC801; &#xD2B9;&#xC131;&#xC744; &#xC804;&#xC2DC;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; HI0451 antitoxin &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC774;&#xB984; Vapxhi&#xC744; &#xC81C;&#xC548;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6D0;&#xB798; &#xD50C;&#xB77C;&#xC2A4; &#xBBF8;&#xB4DC;&#xC5D0; &#xC2DD;&#xBCC4;, TA loci &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xC138;&#xADE0;&#xC131; &#xBCD1;&#xC6D0; &#xCCB4;&#xC758; &#xC5FC;&#xC0C9;&#xCCB4;&#xC5D0; &#xBC1C;&#xACAC; &#xD558; &#xACE0; &#xC2A4;&#xD2B8;&#xB808;&#xC2A4;&#xAC00; &#xB9CE;&#xC740; &#xC870;&#xAC74; &#xC911; &#xBC88;&#xC5ED;&#xC758; &#xC81C;&#xC5B4;&#xC5D0; &#xC5F0;&#xB8E8; &#xB418;&#xC5B4;. &#xBC88;&#xC5ED; &#xCCB4;&#xD3EC; &#xC778;&#xAC04; &#xC138;&#xD3EC; &#xB0B4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC0DD;&#xC874;&#xC744; &#xD5A5;&#xC0C1; &#xC2DC;&#xD0AC; &#xAC83; &#xC774;&#xBA70; &#xC601;&#xAD6C; &#xB610;&#xB294; &#xB9CC;&#xC131; &#xC810; &#xB9C9; &#xAC10;&#xC5FC;&#xC744; &#xCD09;&#xC9C4;.

&#xC2DD;&#xBCC4; &#xBC0F; nontypeable Haemophilus &#xD615; &#xC0C1; toxin-antitoxin &#xB85C;&#xCEE4; &#xC2A4;&#xC758;.

Ciertas cepas de un par&#xE1;sito obligado del tracto respiratorio superior humano, Haemophilus influenzae no tipificable (NTHi), pueden causar enfermedades invasivas, como la septicemia y la meningitis, as&#xED; como infecciones cr&#xF3;nicas mucosas como otitis media. Para ello, el organismo debe invadir y sobrevivir dentro de las dos c&#xE9;lulas epiteliales y endoteliales. Hemos identificado un facilitador de la supervivencia NTHi dentro de las c&#xE9;lulas humanas, la virulencia asociada a la prote&#xED;na D (vapDHi, codificada por el gen HI0450). Tanto vapDHi y un gen de acompa&#xF1;amiento, HI0451, posean las caracter&#xED;sticas gen&#xE9;ticas y f&#xED;sicas de una toxina / antitoxina (TA), el locus, con VapDHi sirviendo como el resto de toxina y HI0451 como la antitoxina. Proponemos la VapXHi nombre para la prote&#xED;na de la antitoxina HI0451. Originalmente identificado en pl&#xE1;smidos, los loci TA se han encontrado en los cromosomas de un n&#xFA;mero de pat&#xF3;genos bacterianos, y han sido implicados en el control de la traducci&#xF3;n durante condiciones de estr&#xE9;s. Arresto traducci&#xF3;n ser&#xED;a aumentar la supervivencia en las c&#xE9;lulas humanas y facilitar las infecciones de la mucosa persistente o cr&#xF3;nica.

Identificaci&#xF3;n y caracterizaci&#xF3;n de una Haemophilus Influenzae no tipificable putativo toxina-antitoxina Locus

&#x8981;&#x6DF1;&#x5165;&#x4E86;&#x89E3; luxSHi &#x75BE;&#x75C5;&#x53D1;&#x75C5;&#x673A;&#x5236;&#x4E2D;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x706D;&#x6D3B;&#x8FD9;&#x51E0;&#x4E2A;&#x975E;&#x8BE5;&#x952E;&#x6D41;&#x611F;&#x55DC;&#x8840;&#x6746;&#x83CC;&#x5206;&#x79BB;&#x4E0E;&#x8010;&#x836F;&#x6027;&#x5361;&#x5E26;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x3002;&#x805A;&#x5408;&#x9176;&#x94FE;&#x53CD;&#x5E94;&#x548C;&#x5BF9;&#x6BCF;&#x4E00;&#x682A;&#x5728;&#x5357;&#x90E8;&#x6C61;&#x70B9;&#x5206;&#x6790;&#x8BC1;&#x5B9E;&#x57FA;&#x56E0;&#x5931;&#x6D3B;&#x3002;&#x4ECE; luxSHi &#x7A81;&#x53D8;&#x4F53;&#x6587;&#x5316;&#x6EE4;&#x6DB2;&#x6240;&#x8F7D;&#x514B;&#x9686; 2 (AI-2) &#x6D3B;&#x6027;&#x6BD4;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x83CC;&#x682A;&#x4F7F;&#x7528;&#x5F27;&#x83CC;&#x7EF4;&#x6C0F; BB170 &#x751F;&#x7269;&#x6D4B;&#x5B9A;&#x7684;&#x51CF;&#x5C11;&#x7684;&#x91CF;&#x3002;&#x6587;&#x5316;&#x5E9F;&#x6DB2;&#x5927;&#x80A0;&#x57C3;&#x5E0C;&#x6C0F;&#x5927;&#x80A0;&#x6746;&#x83CC;&#x5E94;&#x53D8; DH5alpha &#x8868;&#x793A;&#x5305;&#x542B; 350-fold &#x66F4;&#x591A;&#x514B;&#x9686;&#x7684; luxSHi AI-2 &#x6D3B;&#x6027;&#x6BCF;&#x4E2A;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6BD4;&#x5927;&#x80A0;&#x6746;&#x83CC; DH5alpha &#x5305;&#x542B;&#x5355;&#x72EC;&#x7684;&#x5411;&#x91CF;&#x3002;&#x589E;&#x957F;&#x7387;&#x5728;&#x51E0;&#x79CD;&#x6DB2;&#x4F53;&#x4ECB;&#x8D28;&#x548C;&#x901A;&#x5BB5;&#x7684;&#x589E;&#x957F;&#x540E;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5BC6;&#x5EA6;&#x5DEE;&#x522B;&#x4E0D;&#x5927;&#xFF0C;&#x7236;&#x6BCD;&#x548C; luxSHi &#x7A81;&#x53D8;&#x4F53;&#x4E4B;&#x95F4;&#x3002;&#x4E24;&#x4E2A;&#x4E34;&#x5E8A; H.&#x6746;&#x83CC;&#x548C;&#x5176; luxSHi &#x7A81;&#x53D8;&#x4F53;&#x6D41;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x4E2D;&#x4EA7;&#x751F;&#x5B8C;&#x5168;&#x76F8;&#x540C;&#x7684;&#x751F;&#x7269;&#x819C;&#x3002;LuxSHi &#x57FA;&#x56E0;&#x7A81;&#x53D8;&#xFF0C;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x7236;&#x6BCD;&#x4E0E;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5165;&#x4FB5;&#x662F;&#x4F9D;&#x8D56;&#x5E94;&#x53D8;&#x7684;&#x548C;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x7C7B;&#x578B;&#x76F8;&#x5173;&#xFF0C;&#x4F46; luxSHi &#x7A81;&#x53D8;&#x4F53;&#x503E;&#x5411;&#x4E8E;&#x66F4;&#x5177;&#x4FB5;&#x7565;&#x6027;&#x3002;LuxSHi &#x7A81;&#x53D8;&#x6027;&#x4E2D;&#x8033;&#x708E;&#x9694;&#x79BB;&#x3001; &#x5E94;&#x53D8; R3157 &#x4F3C;&#x4E4E;&#x66F4;&#x4E3A;&#x6076;&#x6BD2;&#x7684;&#x4E2D;&#x8033;&#x708E;&#x7070;&#x9F20;&#x6A21;&#x578B;&#x4E2D;&#xFF1A; &#x6709;&#x66F4;&#x591A;&#x7684;&#x7EC6;&#x83CC;&#x5728;&#x4E2D;&#x8033;&#x3001; &#x66F4;&#x5927;&#x7684;&#x708E;&#x75C7;&#x53CD;&#x5E94;&#x548C;&#x66F4;&#x591A;&#x7684;&#x676F;&#x72B6;&#x7EC6;&#x80DE;&#x589E;&#x751F;&#x63A5;&#x79CD;&#x540E; 10 &#x5929;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5F97;&#x51FA;&#x7684;&#x7ED3;&#x8BBA; H.&#x6D41;&#x611F;&#x540C;&#x7CFB;&#x7269;&#x7684; luxS &#x8C03;&#x8282;&#x67D0;&#x4E9B;&#x6BD2;&#x529B;&#x6027;&#x72B6;&#x3002;

&#x6D41;&#x611F;&#x55DC;&#x8840;&#x6746;&#x83CC; luxS &#x7A81;&#x53D8;&#x4F53;&#x5F62;&#x6210;&#x751F;&#x7269;&#x819C;&#xFF0C;&#x5E76;&#x589E;&#x52A0;&#x4E86;&#x6BD2;&#x529B;&#x3002;

To gain insight into the role of luxSHi in disease pathogenesis, we inactivated that gene in several non-typeable Haemophilus influenzae isolates with an antibiotic resistance cassette. Gene inactivation was confirmed by PCR and by Southern blot analysis in each strain. Culture filtrates from luxSHi mutants contained a decreased amount of autoinducer-2 (AI-2) activity in comparison to the wild-type isolates using the Vibrio harveyi BB170 bioassay. Culture filtrates from Escherichia coli strain DH5alpha expressing a cloned luxSHi contained 350-fold more AI-2 activity per cell than E. coli DH5alpha containing the vector alone. The growth rate in several liquid media, and the cell density after overnight growth were not significantly different between the parents and the luxSHi mutants. Two clinical H. influenzae and their luxSHi mutants produced an identical biofilm in a flow system. Invasion of human cells by the luxSHi mutants, in comparison to the wild-type parents was strain-dependent, and cell type-dependent, but the luxSHi mutants tended to be more invasive. The luxSHi mutant of an otitis media isolate, strain R3157 appeared more virulent in the chinchilla model of otitis media: there were more bacteria in the middle ear, a greater inflammatory response and more goblet cell hyperplasia 10 days after the inoculation. We conclude that the H. influenzae homologue of luxS modulates certain virulence traits.

Haemophilus influenzae luxS mutants form a biofilm and have increased virulence.

Pour mieux comprendre le r&#xF4;le de luxSHi dans la pathogen&#xE8;se des maladies, nous inactiv&#xE9; ce g&#xE8;ne dans plusieurs non-typable d&#x26;#39;Haemophilus influenzae isole avec une cassette de r&#xE9;sistance aux antibiotiques. L&#x26;#39;inactivation de g&#xE8;nes a &#xE9;t&#xE9; confirm&#xE9;e par PCR et par analyse par transfert de Southern de chaque souche. Filtrats de cultures de mutants luxSHi contient une quantit&#xE9; r&#xE9;duite de autoinducteur-2 (IA-2) d&#x26;#39;activit&#xE9; par rapport aux isolats de type sauvage &#xE0; l&#x26;#39;aide du Vibrio harveyi BB170 essai biologique. Filtrats de culture de Escherichia coli DH5alpha souche exprimant un clone luxSHi contenait 350 fois plus d&#x26;#39;activit&#xE9; AI-2 par cellule que les E. coli contenant DH5alpha le vecteur seul. Le taux de croissance dans plusieurs milieux liquides, et la densit&#xE9; cellulaire apr&#xE8;s une croissance durant la nuit n&#x26;#39;&#xE9;taient pas significativement diff&#xE9;rentes entre les parents et les mutants luxSHi. Deux cliniques de H. influenzae et de leurs mutants luxSHi produit un biofilm identiques dans un syst&#xE8;me d&#x26;#39;&#xE9;coulement. Invasion des cellules humaines par les mutants luxSHi, en comparaison avec les parents de type sauvage a &#xE9;t&#xE9; souche-d&#xE9;pendante, et la cellule d&#xE9;pendant du type, mais les mutants luxSHi tendance &#xE0; &#xEA;tre plus invasive. Le mutant de luxSHi une otite moyenne isoler, souche plus virulente est apparu R3157 dans le mod&#xE8;le chinchilla de l&#x26;#39;otite moyenne: il y avait plus de bact&#xE9;ries dans l&#x26;#39;oreille moyenne, une plus grande r&#xE9;ponse inflammatoire et plus hyperplasie des cellules caliciformes 10 jours apr&#xE8;s l&#x26;#39;inoculation. Nous concluons que l&#x26;#39;homologue H. influenzae de luxS module caract&#xE9;ristiques de virulence de certains.

Haemophilus influenzae de mutants Luxs former un biofilm et ont augment&#xE9; la virulence

Haemophilus influenzae luxS Mutanten bilden einen Biofilm und weisen eine erh&#xF6;hte Virulenz.

Per comprendere il ruolo di luxSHi nella patogenesi della malattia, abbiamo inattivato quel gene in parecchi non digitabile Haemophilus influenzae isolati con una cassetta di resistenza agli antibiotici. Inattivazione del gene &egrave; stata confermata mediante PCR e analisi Southern blot in ogni ceppo. Cultura filtrati da mutanti luxSHi contenevano una quantit&agrave; ridotta di autoinducer-2 (IA-2) attivit&agrave; rispetto al wild-type isolati utilizzando l&#39;analisi biologica di Vibrio harveyi BB170. Culture filtrates da Escherichia coli ceppo DH5alpha esprimendo un luxSHi clonato contenute 350-fold pi&ugrave; IA-2 attivit&agrave; per ogni cella di e. coli DH5alpha contenente il vettore da solo. Il tasso di crescita in media liquidi diversi e la densit&agrave; delle cellule dopo la crescita durante la notte non erano significativamente differenti tra i genitori e i mutanti di luxSHi. Due clinici H. influenzae e loro mutanti luxSHi prodotto un biofilm identici in un sistema di flusso. Invasione di cellule umane di mutanti luxSHi, rispetto al wild-type genitori era dipendente dal ceppo, e dipendente dal tipo di cella, ma i mutanti luxSHi tendevano ad essere pi&ugrave; invasivi. Isolare il mutante luxSHi di un&#39;otite media, ceppo R3157 &egrave; apparso pi&ugrave; virulento nel modello di cincill&agrave; di otite media: c&#39;erano pi&ugrave; batteri nell&#39;orecchio medio, una maggiore risposta infiammatoria e iperplasia delle cellule del calice pi&ugrave; 10 giorni dopo l&#39;inoculazione. Possiamo concludere che l&#39;omologo di influenzae H. di luxS modula alcuni tratti di virulenza.

Haemophilus influenzae luxS mutanti formano un biofilm e hanno aumentato la virulenza.

&#x75BE;&#x60A3;&#x306E;&#x75C5;&#x56E0;&#x306B;luxSHi&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x3078;&#x306E;&#x6D1E;&#x5BDF;&#x3092;&#x5F97;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x975E;&#x5165;&#x529B;&#x53EF;&#x80FD;&#x306A;&#x30A4;&#x30F3;&#x30D5;&#x30EB;&#x30A8;&#x30F3;&#x30B6;&#x83CC;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x304C;&#x6297;&#x751F;&#x7269;&#x8CEA;&#x8010;&#x6027;&#x30AB;&#x30BB;&#x30C3;&#x30C8;&#x3068;&#x5206;&#x96E2;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x4E0D;&#x6D3B;&#x5316;&#x3002;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x4E0D;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x306F;&#x3001;PCR&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x3001;&#x5404;&#x682A;&#x306E;&#x30B5;&#x30B6;&#x30F3;&#x30D6;&#x30ED;&#x30C3;&#x30C8;&#x5206;&#x6790;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x78BA;&#x8A8D;&#x3057;&#x305F;&#x3002; luxSHi&#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x304B;&#x3089;&#x57F9;&#x990A;&#x6FFE;&#x6DB2;&#x306F;&#x3001;&#x30D3;&#x30D6;&#x30EA;&#x30AA;harveyi BB170&#x30D0;&#x30A4;&#x30AA;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x3066;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x83CC;&#x682A;&#x3068;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x30AA;&#x30FC;&#x30C8;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C7;&#x30E5;&#x30FC;&#x30B5;&#x30FC;2&#xFF08;AI-2&#xFF09;&#x6D3B;&#x6027;&#x306E;&#x6E1B;&#x5C11;&#x91CF;&#x304C;&#x542B;&#x307E;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30AF;&#x30ED;&#x30FC;&#x30F3;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x305F;luxSHi&#x3092;&#x767A;&#x73FE;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x5927;&#x8178;&#x83CC;&#x682A;DH5alpha&#x304B;&#x3089;&#x57F9;&#x990A;&#x308D;&#x6DB2;&#x306F;350&#x500D;&#x4EE5;&#x4E0A;&#x304C;&#x542B;&#x307E;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;AI-2&#x306E;&#x5927;&#x8178;&#x83CC;&#x3088;&#x308A;&#x3082;&#x7D30;&#x80DE;&#x3042;&#x305F;&#x308A;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x306F;&#x30D9;&#x30AF;&#x30BF;&#x30FC;&#x306E;&#x307F;&#x3092;&#x542B;&#x3080;DH5alpha&#x3002;&#x4E00;&#x6669;&#x5897;&#x6B96;&#x3057;&#x305F;&#x5F8C;&#x3001;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x6DB2;&#x4F53;&#x57F9;&#x5730;&#x3067;&#x306E;&#x6210;&#x9577;&#x7387;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x7D30;&#x80DE;&#x5BC6;&#x5EA6;&#x306F;&#x3001;&#x4E21;&#x89AA;&#x3068;luxSHi&#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x306E;&#x9593;&#x306B;&#x6709;&#x610F;&#x5DEE;&#x306F;&#x8A8D;&#x3081;&#x3089;&#x308C;&#x306A;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x3064;&#x306E;&#x81E8;&#x5E8A;H.&#x30A4;&#x30F3;&#x30D5;&#x30EB;&#x30A8;&#x30F3;&#x30B6;&#x3068;&#x305D;&#x306E;luxSHi&#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x306F;&#x3001;&#x30D5;&#x30ED;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x3067;&#x540C;&#x4E00;&#x306E;&#x30D5;&#x30A3;&#x30EB;&#x30E0;&#x3092;&#x4F5C;&#x308A;&#x51FA;&#x3057;&#x305F;&#x3002; luxSHi&#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x30D2;&#x30C8;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x6D78;&#x6F64;&#x306F;&#x3001;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x306E;&#x89AA;&#x306B;&#x6BD4;&#x3079;&#x3066;&#x6B6A;&#x307F;&#x4F9D;&#x5B58;&#x6027;&#x3067;&#x3042;&#x308A;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x7A2E;&#x985E;&#x306B;&#x4F9D;&#x5B58;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x304C;&#x3001;luxSHi&#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x306F;&#x3001;&#x3088;&#x308A;&#x4FB5;&#x8972;&#x7684;&#x306A;&#x50BE;&#x5411;&#x306B;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x4E2D;&#x8033;&#x708E;&#x306E;luxSHi&#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x304C;&#x5206;&#x96E2;&#x3057;&#x3001;&#x83CC;&#x682A;R3157&#x306F;&#x3001;&#x4E2D;&#x8033;&#x708E;&#x306E;&#x30C1;&#x30F3;&#x30C1;&#x30E9;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x3067;&#x306F;&#x3088;&#x308A;&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x6BD2;&#x6027;&#x304C;&#x767B;&#x5834;&#xFF1A;&#x4E2D;&#x8033;&#x306E;&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x7D30;&#x83CC;&#x306F;&#x3001;10&#x65E5;&#x3001;&#x63A5;&#x7A2E;&#x5F8C;&#x3088;&#x308A;&#x708E;&#x75C7;&#x53CD;&#x5FDC;&#x3068;&#x676F;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x904E;&#x5F62;&#x6210;&#x304C;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;luxS&#x306E;H. influenzae&#x306E;&#x540C;&#x65CF;&#x4F53;&#x306F;&#x3001;&#x7279;&#x5B9A;&#x306E;&#x75C5;&#x539F;&#x6027;&#x306E;&#x5F62;&#x8CEA;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3059;&#x308B;&#x3068;&#x7D50;&#x8AD6;&#x4ED8;&#x3051;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;

&#x30A4;&#x30F3;&#x30D5;&#x30EB;&#x30A8;&#x30F3;&#x30B6;LuxS&#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x306F;&#x3001;&#x30D0;&#x30A4;&#x30AA;&#x30D5;&#x30A3;&#x30EB;&#x30E0;&#x3092;&#x5F62;&#x6210;&#x3057;&#x3001;&#x75C5;&#x539F;&#x6027;&#x3092;&#x5897;&#x52A0;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;

&#xC9C8;&#xD658; &#xBCD1; &#xC778;&#xC5D0; Luxshi&#xC758; &#xC5ED;&#xD560;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD1B5;&#xCC30;&#xB825;&#xC744; &#xC5BB;&#xC73C;&#xB824;&#xBA74;, &#xC6B0;&#xB9AC; inactivated &#xD56D;&#xC0DD;&#xC81C; &#xC800;&#xD56D; &#xCE74;&#xC138;&#xD2B8; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xBE44; typeable Haemophilus &#xD615; &#xACA9;&#xB9AC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xADF8; &#xC720;&#xC804;&#xC790;. &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xBE44;&#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xB294; PCR&#xC5D0; &#xC758;&#xD574;, &#xAC01; &#xBCC0;&#xD615;&#xC5D0; &#xB0A8;&#xBD80; &#xC624; &#xC810; &#xBD84;&#xC11D;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xD655;&#xC778; &#xD588;&#xB2E4;. &#xBB38;&#xD654; filtrates luxSHi &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBE0C;&#xB9AC; harveyi BB170 bioassay&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xC57C;&#xC0DD;-&#xD0C0;&#xC785; &#xACA9;&#xB9AC;&#xC5D0; &#xBE44;&#xD574; autoinducer-2 (AI-2) &#xD65C;&#xB3D9;&#xC758; &#xAC10;&#xC18C; &#xAE08;&#xC561;&#xC744; &#xD3EC;&#xD568; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xBB38;&#xD654; &#xBCD1;&#xC6D0; &#xC131; &#xB300;&#xC7A5;&#xADE0; &#xC2A4;&#xD2B8;&#xB808;&#xC778; DH5alpha &#xBCF5;&#xC81C; &#xB41C; luxSHi 350-fold &#xB354; &#xD3EC;&#xD568; &#xB41C; &#xD45C;&#xD604; AI 2 &#xD65C;&#xB3D9; &#xD63C;&#xC790; &#xBCA1;&#xD130;&#xB97C; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558;&#xB294; &#xB300;&#xC7A5;&#xADE0; DH5alpha &#xBCF4;&#xB2E4; &#xC140; &#xB2F9;&#xC5D0;&#xC11C; filtrates. &#xC5EC;&#xB7EC; &#xAC00;&#xC9C0; &#xC561;&#xCCB4; &#xC5B8;&#xB860;&#xACFC; &#xD558;&#xB8FB;&#xBC24; &#xC131;&#xC7A5; &#xD6C4; &#xC140; &#xBC00;&#xB3C4; &#xC131;&#xC7A5; &#xC18D;&#xB3C4; &#xBD80;&#xBAA8;&#xC640; luxSHi &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xC0AC;&#xC774; &#xD06C;&#xAC8C; &#xB2E4;&#xB978; &#xC544;&#xB2C8;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xB450; &#xC784;&#xC0C1; H. &#xD615; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; luxSHi &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xD750;&#xB984; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC5D0; &#xB3D9;&#xC77C;&#xD55C; biofilm&#xC744; &#xC0DD;&#xC0B0;. &#xC57C;&#xC0DD;-&#xD0C0;&#xC785; &#xBD80;&#xBAA8;&#xC5D0; &#xBE44;&#xD574; luxSHi &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xC758;&#xD574; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xCE68;&#xACF5; &#xC2A4;&#xD2B8;&#xB808;&#xC778; &#xC885;&#xC18D; &#xB418;&#xC5C8;&#xACE0; &#xC140; &#xD615;&#xC2DD;&#xC774; &#xC885;&#xC18D;, &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; luxSHi &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xACBD;&#xD5A5;&#xC774; &#xB354; &#xB9CE;&#xC740; &#xCE68;&#xB7B5;. &#xC911;&#xC774;&#xC5FC;&#xC758; luxSHi &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xCCB4; &#xBD84;&#xB9AC;, &#xBCC0;&#xD615; R3157 &#xB4F1;&#xC7A5; &#xC911;&#xC774;&#xC5FC;&#xC758; &#xCE5C; &#xCE60; &#xB77C; &#xBAA8;&#xB378;&#xC5D0; &#xB354; &#xB9CE;&#xC740; &#xC545;&#xC131;: &#xAC70;&#xAE30;&#xC5D0; &#xB354; &#xB9CE;&#xC740; &#xBC15;&#xD14C;&#xB9AC;&#xC544; &#xAC00;&#xC6B4;&#xB370; &#xADC0;, &#xD070; &#xC5FC;&#xC99D; &#xBC18;&#xC751;&#xC744; &#xB354; &#xC794; &#xC138;&#xD3EC; &#xC99D;&#xC2DD;&#xC5D0;&#xB294; &#xC811;&#xC885; &#xD6C4; 10 &#xC77C;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; Luxs&#xC758; &#xD5E4; &#xD615; homologue &#xD2B9;&#xC815; &#xB3C5;&#xC131; &#xD2B9;&#xC131; &#xBCC0;&#xC870; &#xACB0;&#xB860;.

Haemophilus &#xD615; luxS &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; biofilm&#xC744; &#xD615;&#xC131; &#xD558; &#xACE0; &#xB3C5;&#xC131;&#xC744; &#xC99D;&#xAC00;.

Para profundizar en el papel de luxSHi en la patog&#xE9;nesis de la enfermedad, que inactiva el gen en varios no tipificables de Haemophilus influenzae aislados con un casete de resistencia a los antibi&#xF3;ticos. Inactivaci&#xF3;n del gen fue confirmada por PCR y por an&#xE1;lisis de Southern blot en cada cepa. Filtrados de cultivo de mutantes luxSHi conten&#xED;a una cantidad disminuida de autoinductora-2 (IA-2) la actividad en comparaci&#xF3;n con las cepas de tipo salvaje utilizando el bioensayo de Vibrio harveyi BB170. Filtrados de cultivo de Escherichia coli cepa DH5alpha que expresan una clonado luxSHi conten&#xED;a 350-veces m&#xE1;s AI-2 actividad por c&#xE9;lula de E. coli DH5alpha que contiene el vector solo. La tasa de crecimiento en varios medios l&#xED;quidos, y la densidad de las c&#xE9;lulas despu&#xE9;s de un crecimiento noche a la ma&#xF1;ana no fueron significativamente diferentes entre los padres y los mutantes luxSHi. Dos cl&#xED;nica H. influenzae y sus mutantes luxSHi producido una biopel&#xED;cula id&#xE9;ntica en un sistema de flujo. La invasi&#xF3;n de las c&#xE9;lulas humanas por los mutantes luxSHi, en comparaci&#xF3;n con los padres de tipo salvaje fue cepa-dependiente, y el tipo de c&#xE9;lulas dependientes, pero los mutantes luxSHi tend&#xED;an a ser m&#xE1;s invasivo. El mutante luxSHi de una otitis media aislar la cepa R3157 parec&#xED;a m&#xE1;s virulento en el modelo de chinchilla de la otitis media: hay m&#xE1;s bacterias en el o&#xED;do medio, una mayor respuesta inflamatoria y m&#xE1;s hiperplasia de c&#xE9;lulas caliciformes 10 d&#xED;as despu&#xE9;s de la inoculaci&#xF3;n. Llegamos a la conclusi&#xF3;n de que el hom&#xF3;logo de H. influenzae de luxS modula ciertos rasgos de virulencia.

Haemophilus Influenzae LuxS mutantes forman un biofilm y han aumentado la virulencia

&#x4E0D;&#x53EF;&#x6D41;&#x611F;&#x55DC;&#x8840;&#x6746;&#x83CC; &#xFF08;&#x5E02;&#x5357;&#x5929;&#x6D77;&#x4E00;&#xFF09; &#x751F;&#x7269;&#x4F53;&#x662F;&#x9884;&#x7559;&#x5BC4;&#x751F;&#x866B;&#x7684;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x4E0A;&#x547C;&#x5438;&#x9053;&#xFF0C;&#x53EF;&#x4EE5;&#x4F5C;&#x4E3A; commensals &#x6216;&#x75C5;&#x539F;&#x4F53;&#x5B58;&#x5728;&#x3002;Toxin-antitoxin (TA) &#x57FA;&#x56E0;&#x4F4D;&#x70B9;&#x662F;&#x9AD8;&#x5EA6;&#x4FDD;&#x5B88;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x5BF9;&#x6BD2;&#x7D20;&#x548C;&#x6297;&#x6BD2;&#x7D20;&#x7684;&#x7ED3;&#x6784;&#x5BF9;&#x5176;&#x8FDB;&#x884C;&#x7F16;&#x7801;&#x3002;&#x5230;&#x76EE;&#x524D;&#x4E3A;&#x6B62;&#xFF0C;&#x5DF2;&#x786E;&#x5B9A;&#x4E86;&#x4E03;&#x4E2A; TA &#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x5BB6;&#x65CF;&#x548C;&#x5E02;&#x5357;&#x5929;&#x6D77;&#x4E00;&#x5E26;&#x6709;&#x4E24;&#x4E2A;&#x7B49;&#x4F4D;&#x57FA;&#x56E0;&#x7684; vapBC &#x5BB6;&#x5EAD;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x6709;&#x7279;&#x70B9;&#x7684;&#x529F;&#x80FD;&#x4E4B;&#x4E00;&#x7684;&#x5E02;&#x5357;&#x5929;&#x6D77;&#x4E00;&#x7B49;&#x4F4D;&#x57FA;&#x56E0;&#xFF0C;vapBC-1&#x3002;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x4E24;&#x4E2A;&#x5E02;&#x5357;&#x5929;&#x6D77;&#x4E00;&#x4E34;&#x5E8A;&#x5206;&#x79BB;&#xFF0C;&#x64CD;&#x7EB5;&#x5B50;&#x8F6C;&#x5F55;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x5BF9;&#x548C;&#x542F;&#x52A8;&#x5B50;&#x878D;&#x5408;&#x5411;&#x6587;&#x5316;&#x5BC6;&#x5EA6;&#x663E;&#x793A;&#x6210;&#x53CD;&#x6BD4;&#x5173;&#x7CFB;&#x3002;VapB-1 &#x6297;&#x6BD2;&#x7D20;&#x7A97;&#x4F53; homomultimers &#x5728;&#x4F53;&#x5916;&#x548C;&#x4F53;&#x5185;&#x3002;&#x6388;&#x4E88;&#x5BF9;&#x5927;&#x80A0;&#x57C3;&#x5E0C;&#x6C0F;&#x5927;&#x80A0;&#x6746;&#x83CC;&#x8868;&#x8FBE;&#x682A;&#x751F;&#x957F;&#x7684;&#x6291;&#x5236;&#x4F5C;&#x7528;&#x53CA;&#x968F;&#x5176;&#x540C;&#x6E90;&#x6297;&#x6BD2;&#x7D20;&#x514B;&#x9686;&#x65F6;&#xFF0C;&#x53EA;&#x6210;&#x529F;&#x5730;&#x7EAF;&#x5316;&#x8868;&#x8FBE;&#x7684;&#x6BD2;&#x7D20; VapC-1&#x3002;&#x4F7F;&#x7528;&#x4ECE;&#x5927;&#x80A0;&#x6746;&#x83CC;&#x548C;&#x5E02;&#x5357;&#x5929;&#x6D77;&#x4E00;&#x5B64;&#x7ACB;&#x7684;&#x603B; RNA&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x663E;&#x793A;&#x7B2C;&#x4E00;&#x6B21; VapC-1 &#x662F;&#x6838;&#x7CD6;&#x6838;&#x9178;&#x514D;&#x8D39; RNA &#x4E0A;&#x5904;&#x4E8E;&#x6D3B;&#x52A8;&#x72B6;&#x6001;&#xFF0C;&#x4F46;&#x4E0D;&#x4F1A;&#x964D;&#x4F4E; DNA &#x4F53;&#x5916;&#x3002;&#x5728;&#x5E9F;&#x9664;&#x7684;&#x6BD2;&#x7D20;&#x6D3B;&#x6027;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x590D;&#x5408;&#x7269;&#x7684;&#x5F62;&#x6210;&#x51C0;&#x5316;&#x6BD2;&#x7D20;&#x548C;&#x6297;&#x6BD2;&#x7D20;&#x4E00;&#x8D77;&#x7ED3;&#x679C; preincubation&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5F97;&#x51FA;&#x7684;&#x7ED3;&#x8BBA;&#x7684;&#x5E02;&#x5357;&#x5929;&#x6D77;&#x4E00; vapBC-1 &#x57FA;&#x56E0;&#x5BF9;&#x51FD;&#x6570;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x53E4;&#x5178;&#x7684; TA &#x8F68;&#x8FF9;&#x548C;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x7684; VapC-1 &#x6838;&#x7CD6;&#x6838;&#x9178;&#x9176;&#x901A;&#x8FC7; mRNA &#x5288;&#x88C2;&#x7684;&#x673A;&#x5236;&#x5BFC;&#x81F4;&#x751F;&#x957F;&#x7684;&#x6291;&#x5236;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;

VapC-1 &#x4E0D;&#x53EF;&#x6D41;&#x611F;&#x55DC;&#x8840;&#x6746;&#x83CC;&#x662F;&#x6838;&#x7CD6;&#x6838;&#x9178;&#x9176;&#x3002;

Nontypeable Haemophilus influenzae (NTHi) organisms are obligate parasites of the human upper respiratory tract that can exist as commensals or pathogens. Toxin-antitoxin (TA) loci are highly conserved gene pairs that encode both a toxin and antitoxin moiety. Seven TA gene families have been identified to date, and NTHi carries two alleles of the vapBC family. Here, we have characterized the function of one of the NTHi alleles, vapBC-1. The gene pair is transcribed as an operon in two NTHi clinical isolates, and promoter fusions display an inverse relationship to culture density. The antitoxin VapB-1 forms homomultimers both in vitro and in vivo. The expression of the toxin VapC-1 conferred growth inhibition to an Escherichia coli expression strain and was successfully purified only when cloned in tandem with its cognate antitoxin. Using total RNA isolated from both E. coli and NTHi, we show for the first time that VapC-1 is an RNase that is active on free RNA but does not degrade DNA in vitro. Preincubation of the purified toxin and antitoxin together results in the formation of a protein complex that abrogates the activity of the toxin. We conclude that the NTHi vapBC-1 gene pair functions as a classical TA locus and that the induction of VapC-1 RNase activity leads to growth inhibition via the mechanism of mRNA cleavage.

VapC-1 of nontypeable Haemophilus influenzae is a ribonuclease.

Haemophilus influenzae (non typable NTHi) organismes sont des parasites obligatoires de l&#x26;#39;appareil respiratoire sup&#xE9;rieur humain qui peut exister en tant que commensaux ou pathog&#xE8;nes. Toxine-antitoxine (TA) loci sont hautement conserv&#xE9;es paires de g&#xE8;nes qui codent &#xE0; la fois une toxine et le groupement d&#x26;#39;antitoxine. Sept familles de g&#xE8;nes ont &#xE9;t&#xE9; identifi&#xE9;s TA &#xE0; ce jour, et NTHi porteur de deux all&#xE8;les de la famille vapBC. Ici, nous avons caract&#xE9;ris&#xE9; la fonction de l&#x26;#39;un des all&#xE8;les NTHi, vapBC-1. La paire de g&#xE8;nes est transcrite en un op&#xE9;ron dans des isolats cliniques NTHi deux, et des fusions promoteur afficher une relation inverse entre la densit&#xE9; de la culture. Le antitoxine VAPB-1 formes homomultim&#xE8;res la fois in vitro et in vivo. L&#x26;#39;expression de la toxine Vapc-1 conf&#xE8;re inhibition de la croissance &#xE0; une souche d&#x26;#39;expression de Escherichia coli et a &#xE9;t&#xE9; purifi&#xE9; avec succ&#xE8;s seulement quand clon&#xE9; en tandem avec son antitoxine apparent&#xE9;. Utilisation de l&#x26;#39;ARN total isol&#xE9; de E. coli et les deux NTHi, nous montrons pour la premi&#xE8;re fois que Vapc-1 est une RNase qui est active sur l&#x26;#39;ARN libres, mais ne se d&#xE9;grade pas l&#x26;#39;ADN in vitro. La pr&#xE9;incubation des r&#xE9;sultats toxine purifi&#xE9;e et de l&#x26;#39;antitoxine ensemble dans la formation d&#x26;#39;un complexe prot&#xE9;ique qui abroge l&#x26;#39;activit&#xE9; de la toxine. Nous concluons que les NTHi vapBC-1 fonctions paire de g&#xE8;nes en tant que locus classique TA et que l&#x26;#39;induction de Vapc-1 activit&#xE9; RNase conduit &#xE0; l&#x26;#39;inhibition de la croissance par le biais du m&#xE9;canisme de clivage d&#x26;#39;ARNm.

Vapc-1 de Haemophilus influenzae non typable est une ribonucl&#xE9;ase

Nontypeable Haemophilus Influenzae (NTHi) Organismen sind obligate Parasiten des menschlichen oberen Atemwege, die als Commensals oder Krankheitserreger vorhanden ist. Toxin-Antitoxin (TA) Loci sind stark konservierten gen-Paare, die ein Toxin und Antitoxin Moiety zu codieren. Sieben TA gen Familien wurden bisher identifiziert und NTHi tr&auml;gt zwei Allele aus der Familie der VapBC. Hier haben wir die Funktion eines der Allele NTHi charakterisiert VapBC-1. Das Gen-Paar wird als ein Operon in zwei NTHi klinische Isolate transkribiert und Projekttr&auml;ger Fusionen eine inverse Beziehung f&uuml;r Kultur Dichte anzeigen. Das Antitoxin VapB-1 bildet Homomultimers in vitro und in vivo. Der Ausdruck des Toxins VapC-1 &uuml;bertragenen Wachstum Hemmung zu einem Escherichia-coli-Ausdruck-Stamm und wurde erfolgreich gereinigt, nur dann, wenn im Tandem mit seinen Verwandten Antitoxin geklont. Mit Gesamt-RNA aus E. Coli und NTHi isoliert, zeigen wir zum ersten Mal, dass VapC-1 eine RNase, die auf freie RNA aktiv ist, aber nicht DNA in vitro abgebaut. Preincubation des gereinigten Toxin und Antitoxin zusammen ergibt die Bildung eines Proteins Komplex, das die Aktivit&auml;t des Toxins hebt. Wir schlie&szlig;en, dass das NTHi-VapBC-1-Gen-Paar als ein klassischer TA-Locus fungiert und die Induktion von VapC-1 RNase Aktivit&auml;t zu Wachstum Hemmung &uuml;ber den Mechanismus der mRNA Spaltung f&uuml;hrt.

VapC-1 der Nontypeable Haemophilus Influenzae ist eine Ribonuklease.

Nontypeable Haemophilus influenzae (NTHi) gli organismi sono obligate parassiti del tratto respiratorio superiore umano che pu&ograve; esistere come commensali o agenti patogeni. Loci Toxin-antitoxin (TA) sono coppie di gene altamente conservato che codificano moiety sia una tossina e l&#39;antitossina. Sono state identificate sette famiglie di gene TA data e NTHi trasporta due alleli della famiglia vapBC. Qui, noi abbiamo caratterizzato la funzione di uno degli alleli NTHi, vapBC-1. La coppia di gene &egrave; trascritto come un operone in due isolati clinici NTHi e fusioni promotore visualizzare una relazione inversa alla densit&agrave; della cultura. L&#39;antitossina VapB-1 forma homomultimers sia in vitro che in vivo. L&#39;espressione della tossina VapC-1 conferito inibizione della crescita di un ceppo di Escherichia coli espressione ed &egrave; stato purificato con successo solo quando clonato in tandem con sue cognata antitossina. Utilizzo di RNA totale isolato da e. coli sia NTHi, mostriamo per la prima volta che VapC-1 &egrave; una RNasi che &egrave; attivo su RNA libero ma non degradano il DNA in vitro. Preincubazione dei purificati tossina e l&#39;antitossina risultati insieme alla formazione di un complesso proteico che abroga l&#39;attivit&agrave; della tossina. Possiamo concludere che la coppia di vapBC-1 gene NTHi funziona come un classico locus TA e che l&#39;induzione di attivit&agrave; RNasi VapC-1 porta ad una inibizione della crescita attraverso il meccanismo della scissione di mRNA.

VapC-1 di nontypeable Haemophilus influenzae &egrave; una ribonucleasi.

&#x5206;&#x985E;&#x4E0D;&#x53EF;&#x80FD;&#x306A;&#x30A4;&#x30F3;&#x30D5;&#x30EB;&#x30A8;&#x30F3;&#x30B6;&#x83CC;&#xFF08;NTHi&#xFF09;&#x306E;&#x751F;&#x7269;&#x304C;&#x5171;&#x751F;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x75C5;&#x539F;&#x4F53;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x5B58;&#x5728;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x4EBA;&#x9593;&#x306E;&#x4E0A;&#x6C17;&#x9053;&#x306E;&#x5ACC;&#x6C17;&#x5BC4;&#x751F;&#x866B;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x6BD2;&#x7D20;&#x6297;&#x6BD2;&#x7D20;&#xFF08;TA&#xFF09;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x5EA7;&#x306F;&#x3001;&#x975E;&#x5E38;&#x306B;&#x6BD2;&#x7D20;&#x3068;&#x6297;&#x6BD2;&#x7D20;&#x306E;&#x90E8;&#x5206;&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x3092;&#x30A8;&#x30F3;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C9;&#x3059;&#x308B;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x30DA;&#x30A2;&#x304C;&#x4FDD;&#x5B58;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x30BB;&#x30D6;&#x30F3;TA&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x30D5;&#x30A1;&#x30DF;&#x30EA;&#x30FC;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x307E;&#x3067;&#x306B;&#x540C;&#x5B9A;&#x3057;&#x3001;NTHi&#x306F;vapBC&#x30D5;&#x30A1;&#x30DF;&#x30EA;&#x30FC;&#x306E;2&#x3064;&#x306E;&#x5BFE;&#x7ACB;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x3092;&#x904B;&#x3076;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;vapBC-1&#x3001;NTHi&#x306E;&#x5BFE;&#x7ACB;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;1&#x3064;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3092;&#x7279;&#x5FB4;&#x4ED8;&#x3051;&#x305F;&#x3002;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x30DA;&#x30A2;&#x304C;2 NTHi&#x81E8;&#x5E8A;&#x5206;&#x96E2;&#x682A;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30AA;&#x30DA;&#x30ED;&#x30F3;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x8EE2;&#x5199;&#x3001;&#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x3068;&#x306E;&#x878D;&#x5408;&#x306F;&#x3001;&#x57F9;&#x990A;&#x5BC6;&#x5EA6;&#x306B;&#x53CD;&#x6BD4;&#x4F8B;&#x306E;&#x95A2;&#x4FC2;&#x3092;&#x8868;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002; in vitro&#x304A;&#x3088;&#x3073;in vivo&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;homomultimers&#x6297;&#x6BD2;&#x7D20;VapB-1&#x5F62;&#x3002;&#x6BD2;&#x7D20;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;VAPC-1&#x5927;&#x8178;&#x83CC;&#x767A;&#x73FE;&#x682A;&#x306B;&#x6210;&#x9577;&#x963B;&#x5BB3;&#x3092;&#x6388;&#x4E0E;&#x3057;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x540C;&#x65CF;&#x306E;&#x6297;&#x6BD2;&#x7D20;&#x3068;&#x306E;&#x30BF;&#x30F3;&#x30C7;&#x30E0;&#x306B;&#x30AF;&#x30ED;&#x30FC;&#x30CB;&#x30F3;&#x30B0;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3068;&#x304D;&#x306B;&#x306E;&#x307F;&#x6B63;&#x5E38;&#x306B;&#x7CBE;&#x88FD;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x5927;&#x8178;&#x83CC;&#x53CA;&#x3073;NTHi&#x4E21;&#x65B9;&#x304B;&#x3089;&#x5358;&#x96E2;&#x3057;&#x305F;&#x5168;RNA&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;VAPC-1&#x306F;&#x30D5;&#x30EA;&#x30FC;RNA&#x4E0A;&#x3067;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x304C;&#x3001;in vitro&#x3067;DNA&#x3092;&#x52A3;&#x5316;&#x3055;&#x305B;&#x306A;&#x3044;&#x30A2;&#x30FC;&#x30BC;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x521D;&#x3081;&#x3066;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x7CBE;&#x88FD;&#x3057;&#x305F;&#x6BD2;&#x7D20;&#x3068;&#x6297;&#x6BD2;&#x7D20;&#x306E;&#x30D7;&#x30EC;&#x30A4;&#x30F3;&#x30AD;&#x30E5;&#x30D9;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306F;&#x3001;&#x4E00;&#x7DD2;&#x306B;&#x6BD2;&#x7D20;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x3092;abrogates&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x8907;&#x5408;&#x4F53;&#x306E;&#x5F62;&#x6210;&#x3092;&#x3082;&#x305F;&#x3089;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x53E4;&#x5178;&#x7684;&#x306A;TA&#x306E;&#x8ECC;&#x8DE1;&#x306A;&#x3069;&#x3068;VAPC-1 RNase&#x6D3B;&#x6027;&#x306E;&#x8A98;&#x5C0E;&#x304C;mRNA&#x306E;&#x958B;&#x88C2;&#x306E;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x5897;&#x6B96;&#x963B;&#x5BB3;&#x306B;&#x3064;&#x306A;&#x304C;&#x308B;&#x3053;&#x3068;NTHi vapBC-1&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x30DA;&#x30A2;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3068;&#x7D50;&#x8AD6;&#x4ED8;&#x3051;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;

&#x5206;&#x985E;&#x4E0D;&#x53EF;&#x80FD;&#x306A;&#x30A4;&#x30F3;&#x30D5;&#x30EB;&#x30A8;&#x30F3;&#x30B6;&#x83CC;&#x306E;VAPC-1&#x30EA;&#x30DC;&#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30A2;&#x30FC;&#x30BC;&#x3067;&#x3059;&#x3002;

Nontypeable Haemophilus &#xD615; (NTHi) &#xC0DD;&#xBB3C;&#xC740; &#xACF5;&#xC0DD; &#xB610;&#xB294; &#xBCD1;&#xC6D0; &#xADE0;&#xC73C;&#xB85C; &#xC874;&#xC7AC;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xC0C1;&#xBD80; &#xD638;&#xD761; &#xAE30;&#xAD00; &#xC758;&#xBB34; &#xAE30;&#xC0DD;&#xCDA9;. Toxin-antitoxin (TA) loci&#xB294; &#xC778;&#xCF54;&#xB529;&#xD558;&#xB294; &#xB3C5; &#xC18C; &#xBC0F; antitoxin moiety &#xACE0;&#xB3C4;&#xB85C; &#xBCF4;&#xC874;&#xB41C; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xC30D;. 7 &#xB530; &#xC9C4; &#xAC00;&#xC871; &#xB0A0;&#xC9DC;, &#xD655;&#xC778; &#xB41C; &#xACE0; NTHi vapBC &#xAC00;&#xC871;&#xC758; &#xB450; &#xB300;&#xB9BD;. &#xC5EC;&#xAE30;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; NTHi &#xB300;&#xB9BD; &#xC911; &#xD558;&#xB098;&#xC758; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC744; &#xD2B9;&#xC9D5; &#xC788;&#xB2E4; vapBC-1. &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xC30D; &#xB450; NTHi &#xC784;&#xC0C1; &#xACA9;&#xB9AC;&#xC5D0; &#xC624; &#xD398;&#xB860;&#xC73C;&#xB85C; &#xBCC0;&#xD558;&#xAC8C; &#xD558; &#xACE0; &#xBC1C;&#xAE30;&#xC778; fusions &#xBB38;&#xD654; &#xBC00;&#xB3C4;&#xC5D0; &#xBC18;&#xBE44;&#xB840; &#xAD00;&#xACC4;&#xB97C; &#xD45C;&#xC2DC; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. Antitoxin VapB-1 homomultimers &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC678; &#xBC0F; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC870;&#xAC74; &#xD615;&#xC131;. &#xB3C5; &#xC18C; VapC 1 &#xC2DD; Escherichia&#xC758; &#xB300;&#xC7A5;&#xADE0; &#xC2DD; &#xC2A4;&#xD2B8;&#xB808;&#xC778; &#xC131;&#xC7A5; &#xC800;&#xD574;&#xB97C; &#xC218; &#xC5EC; &#xD558; &#xACE0; &#xADF8; &#xB3D9;&#xC871; antitoxin &#xD568;&#xAED8;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBCF5;&#xC81C; &#xD558;&#xB294; &#xACBD;&#xC6B0;&#xC5D0; &#xC131;&#xACF5;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC21C;&#xD654; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. VapC 1&#xC740; &#xBB34;&#xB8CC; RNA&#xC5D0; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xB418;&#xC5B4; &#xC788;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xCCB4; &#xC678; DNA&#xB97C; &#xC800;&#xD558; &#xB418;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; Rnase&#xC744; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xCC98;&#xC74C;&#xC73C;&#xB85C; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xB300;&#xC7A5;&#xADE0;&#xACFC; Nthi&#xC5D0;&#xC11C; &#xBD84;&#xB9AC; &#xB41C; &#xCD1D; RNA&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9;. &#xB3C5; &#xC18C;&#xC758; &#xD65C;&#xB3D9; &#xB418;&#xC5B4;&#xC788;&#xB294; &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xD615;&#xC131;&#xC5D0; &#xC21C;&#xD654; &#xB3C5; &#xC18C; &#xBC0F; antitoxin &#xD568;&#xAED8; &#xACB0;&#xACFC;&#xC758; preincubation. &#xC6B0;&#xB9AC; &#xACB0;&#xB860; NTHi vapBC-1 &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xC30D;&#xC774; &#xACE0;&#xC804; &#xB530; &#xB85C;&#xCEE4; &#xC2A4;&#xB3C4; &#xAE30;&#xB2A5;&#xACFC; VapC 1 RNase &#xD65C;&#xB3D9; &#xC720;&#xB3C4; mRNA &#xBD84;&#xC5F4;&#xC758; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xC131;&#xC7A5; &#xC800;&#xD574; &#xB9AC;&#xB4DC;.

Nontypeable Haemophilus &#xD615;&#xC758; VapC-1&#xB294; ribonuclease &#xC774;&#xB2E4;.

Haemophilus influenzae no tipificable (NTHi) los organismos son par&#xE1;sitos obligados del tracto respiratorio humano superior que puede existir como comensales o pat&#xF3;genos. Toxina-antitoxina (TA) loci est&#xE1;n muy conservadas pares de genes que codifican tanto una toxina y la antitoxina resto. Siete familias de genes de asistencia t&#xE9;cnica han sido identificados hasta la fecha, y NTHi lleva dos alelos de la familia vapBC. Aqu&#xED;, hemos caracterizado la funci&#xF3;n de uno de los alelos NTHI, vapBC-1. El par de genes se transcriben como un oper&#xF3;n en dos aislamientos cl&#xED;nicos NTHi, y fusiones de promotor de mostrar una relaci&#xF3;n inversa a la densidad de la cultura. La antitoxina VAPB-1 forma homomultimers tanto in vitro como in vivo. La expresi&#xF3;n de la toxina-1 VapC confiere la inhibici&#xF3;n del crecimiento de una cepa de expresi&#xF3;n de Escherichia coli y se purific&#xF3; con &#xE9;xito s&#xF3;lo cuando se clona en t&#xE1;ndem con su antitoxina cognado. El uso de ARN total aislado de E. coli y NTHi, se muestra por la primera vez que VapC-1 es una RNasa que es activa en el ARN libres pero no se degrada el ADN in vitro. La preincubaci&#xF3;n de los resultados purificados toxina y antitoxina juntos en la formaci&#xF3;n de un complejo prote&#xED;nico que anula la actividad de la toxina. Llegamos a la conclusi&#xF3;n de que los NTHi vapBC-1 funciones de los genes de pares como un cl&#xE1;sico lugar de asistencia t&#xE9;cnica y que la inducci&#xF3;n de VapC-1 actividad RNasa conduce a la inhibici&#xF3;n del crecimiento a trav&#xE9;s del mecanismo de escisi&#xF3;n del ARNm.

VapC-1 de Haemophilus influenzae no tipificable es una ribonucleasa

&#x5FAE;&#x8840;&#x7BA1;&#x6E17;&#x6F0F;&#x53D7;&#x521B;&#x4F24;&#x671F;&#x95F4;&#x7275;&#x8FDE;&#x591A;&#x5668;&#x5B98;&#x529F;&#x80FD;&#x969C;&#x788D;&#x7684;&#x53D1;&#x75C5;&#x673A;&#x5236;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x3002;&#x4EE5;&#x524D;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x8868;&#x660E;&#x808C;&#x7403;&#x86CB;&#x767D;&#x8F7B;&#x94FE; (MLC) &#x78F7;&#x9178;&#x5316;&#x5F15;&#x53D1;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x6536;&#x7F29;&#x5FAE;&#x8840;&#x7BA1;&#x901A;&#x900F;&#x6027;&#x589E;&#x9AD8;&#x7684;&#x53D1;&#x5C55;&#x4E2D;&#x7684;&#x53C2;&#x4E0E;&#x3002;&#x808C;&#x7403;&#x86CB;&#x767D;&#x8F7B;&#x94FE;&#x6FC0;&#x9176; (MLCK) MLC &#x78F7;&#x9178;&#x5316;&#x72B6;&#x6001; &#xFF1B; &#x63A7;&#x5236;&#x4E2D;&#x7684;&#x5173;&#x952E;&#x4F5C;&#x7528;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x5B83;&#x8BA4;&#x4E3A;&#x8C03;&#x5236;&#x901A;&#x8FC7;&#x8C03;&#x63A7;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5185;&#x6536;&#x7F29;&#x673A;&#x68B0;&#x5C4F;&#x969C;&#x529F;&#x80FD;&#x3002;&#x8FD9;&#x9879;&#x7814;&#x7A76;&#x7684;&#x76EE;&#x7684;&#x662F;&#x8FDB;&#x4E00;&#x6B65;&#x8C03;&#x67E5;&#x5185;&#x76AE;&#x635F;&#x4F24;&#x673A;&#x5236;&#x7684; MLC &#x4F9D;&#x8D56;&#x5C4F;&#x969C;&#x4E2D;&#x70E7;&#x4F24;&#xFF0C;&#x4FA7;&#x91CD;&#x4E8E; MLCK (MLCK-210&#xFF09;&#xFF0C;&#x6700;&#x8FD1;&#x5DF2;&#x88AB;&#x786E;&#x5B9A;&#x4E3A;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x8868;&#x8FBE;&#x7684;&#x4E3B;&#x8981;&#x9F3B;&#x606F;&#x8089;&#x957F;&#x9F3B;&#x606F;&#x8089;&#x3002;MLCK 210 &#x6572;&#x9664;&#x5C0F;&#x9F20;&#x6A21;&#x578B;&#x53D7;&#x5230; 25%&#x5168;&#x8EAB;&#x8868;&#x9762;&#x9762;&#x79EF;&#x4E09;&#x5EA6;&#x70EB;&#x4F24;&#x3002;&#x80A0;&#x7CFB;&#x819C;&#x5FAE;&#x5FAA;&#x73AF;&#x6709;&#x4EBA;&#x4F7F;&#x7528;&#x6D3B;&#x4F53;&#x663E;&#x5FAE;&#x955C;&#xFF0C;&#x53CA;&#x5FAE;&#x8840;&#x7BA1;&#x901A;&#x900F;&#x6027;&#x901A;&#x8FC7;&#x6D4B;&#x91CF;&#x7684;&#x8367;&#x5149;&#x7D20;&#x5F02;&#x786B;&#x6C30;&#x9178;&#x916F;-&#x767D;&#x86CB;&#x767D; transvenular &#x901A;&#x91CF;&#x8BC4;&#x4F30;&#x3002;&#x5728;&#x53E6;&#x4E00;&#x9879;&#x5B9E;&#x9A8C;&#xFF0C;&#x4F53;&#x5185;&#x80A0;&#x7CFB;&#x819C;&#x6DB2;&#x538B;&#x7535;&#x5BFC;&#x7387; (Lp) &#x662F;&#x4F7F;&#x7528;&#x4FEE;&#x6539;&#x540E;&#x7684;&#x5170;&#x8FEA;&#x65AF;&#x6280;&#x672F;&#x6765;&#x8861;&#x91CF;&#x7684;&#x3002;&#x4F24;&#x5BB3;&#x9020;&#x6210;&#x6DF1;&#x523B;&#x7684;&#x5FAE;&#x8840;&#x7BA1;&#x6E17;&#x6F0F;&#x6240;&#x793A;&#x4E8C;&#x6298;&#x589E;&#x52A0;&#x767D;&#x86CB;&#x767D;&#x901A;&#x91CF;&#x53CA;&#x5E74;&#x5229;&#x5728; Lp &#x7684;&#x65E9;&#x671F;&#x9636;&#x6BB5;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x662F;&#x5728; 24 &#x5C0F;&#x65F6;&#x5185;&#x76F8;&#x5173;&#x6B7B;&#x4EA1;&#x7387;&#x5F88;&#x9AD8;&#x3002;MLCK-210-&#x7F3A;&#x9677;&#x5C0F;&#x9F20;&#x4E0E;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x63A7;&#x5236;&#x76F8;&#x6BD4;&#xFF0C;&#x663E;&#x793A;&#x5177;&#x6709;&#x5927;&#x5927;&#x51CF;&#x6BD2;&#x5FAE;&#x8840;&#x7BA1;&#x901A;&#x900F;&#x6027;&#x589E;&#x9AD8;&#x767D;&#x86CB;&#x767D;&#x53CA;&#x6D41;&#x4F53;&#x54CD;&#x5E94;&#x5927;&#x5927;&#x6539;&#x5584;&#x7684;&#x751F;&#x5B58;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7ED3;&#x679C;&#x5728;&#x8C03;&#x89E3;&#x70E7;&#x4F24;&#x540E;&#x5FAE;&#x8840;&#x7BA1;&#x5C4F;&#x969C;&#x635F;&#x4F24;&#x63D0;&#x4F9B;&#x76F4;&#x63A5;&#x8BC1;&#x636E; MLCK 210 &#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#xFF0C;&#x5E76;&#x9A8C;&#x8BC1; MLCK 210 &#x4F5C;&#x4E3A;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x6CBB;&#x7597;&#x9776;&#x70B9;&#x6CBB;&#x7597;&#x70E7;&#x4F24;&#x6C34;&#x80BF;&#x3002;

&#x957F;&#x65F6;&#x95F4;&#x94FE;&#x808C;&#x7403;&#x86CB;&#x767D;&#x8F7B;&#x94FE;&#x6FC0;&#x9176; (MLCK-210) &#x671F;&#x95F4;&#x4E25;&#x91CD;&#x70E7;&#x4F24;&#x7684;&#x5FAE;&#x8840;&#x7BA1;&#x901A;&#x900F;&#x6027;&#x589E;&#x9AD8;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;

Microvascular leakage has been implicated in the pathogenesis of multiple organ dysfunction during trauma. Previous studies suggest the involvement of myosin light chain (MLC) phosphorylation-triggered endothelial contraction in the development of microvascular hyperpermeability. Myosin light chain kinase (MLCK) plays a key role in the control of MLC-phosphorylation status; thus, it is thought to modulate barrier function through its regulation of intracellular contractile machinery. The aim of this study was to further investigate the endothelial mechanism of MLC-dependent barrier injury in burns, focusing on the long isoform of MLCK (MLCK-210) that has recently been identified as the predominant isoform expressed in vascular endothelial cells. An MLCK-210 knockout mouse model was subjected to third-degree scald burn covering 25% total body surface area. The mesenteric microcirculation was observed using intravital microscopy, and the microvascular permeability was assessed by measuring the transvenular flux of fluorescein isothiocyanate-albumin. In a separate experiment, in vivo mesenteric hydraulic conductivity (Lp) was measured using the modified Landis technique. The injury caused a profound microvascular leakage, as indicated by a 2-fold increase in albumin flux and 4-fold increase in Lp at the early stages, which was associated with a high mortality within the 24-h period. Compared with wild-type control, the MLCK-210-deficient mice displayed a significantly improved survival with a greatly attenuated microvascular hyperpermeability response to albumin and fluid. These results provide direct evidence for a role of MLCK-210 in mediating burn-induced microvascular barrier injury and validate MLCK-210 as a potential therapeutic target in the treatment of burn edema.

A role for long chain myosin light chain kinase (MLCK-210) in microvascular hyperpermeability during severe burns.

Fuite microvasculaire a &#xE9;t&#xE9; impliqu&#xE9;e dans la pathogen&#xE8;se de la dysfonction d&#x26;#39;organes multiples pendant le traumatisme. Des &#xE9;tudes ant&#xE9;rieures sugg&#xE8;rent l&#x26;#39;implication de la cha&#xEE;ne l&#xE9;g&#xE8;re de la myosine (MLC) la phosphorylation d&#xE9;clench&#xE9;e par la contraction endoth&#xE9;liale dans le d&#xE9;veloppement de l&#x26;#39;hyperperm&#xE9;abilit&#xE9; microvasculaire. Kinase cha&#xEE;ne l&#xE9;g&#xE8;re de myosine (MLCK) joue un r&#xF4;le cl&#xE9; dans le contr&#xF4;le du MLC-phosphorylation du statut, donc, il est pens&#xE9; pour moduler la fonction de barri&#xE8;re par le biais de son r&#xE8;glement de machinerie contractile intracellulaire. Le but de cette &#xE9;tude &#xE9;tait d&#x26;#39;examiner davantage le m&#xE9;canisme de blessure endoth&#xE9;liale barri&#xE8;re MLC-d&#xE9;pendante des br&#xFB;lures, en se concentrant sur l&#x26;#39;isoforme longue MLCK (MLCK-210) qui a r&#xE9;cemment &#xE9;t&#xE9; identifi&#xE9; comme l&#x26;#39;isoforme pr&#xE9;dominante exprim&#xE9;e dans les cellules endoth&#xE9;liales vasculaires. Un mod&#xE8;le MLCK-210 KO de la souris a &#xE9;t&#xE9; soumis &#xE0; au troisi&#xE8;me degr&#xE9; br&#xFB;lure br&#xFB;ler couvrant 25% de la superficie totale de la surface du corps. La microcirculation m&#xE9;sent&#xE9;rique a &#xE9;t&#xE9; observ&#xE9;e en utilisant la microscopie intravitale, et de la perm&#xE9;abilit&#xE9; microvasculaire a &#xE9;t&#xE9; &#xE9;valu&#xE9;e en mesurant le flux transvenular de l&#x26;#39;isothiocyanate de fluoresc&#xE9;ine albumine. Dans une exp&#xE9;rience distincte, dans m&#xE9;sent&#xE9;rique in vivo la conductivit&#xE9; hydraulique (Lp) a &#xE9;t&#xE9; mesur&#xE9;e en utilisant la technique modifi&#xE9;e Landis. Le pr&#xE9;judice caus&#xE9; une fuite microvasculaire profonde, comme indiqu&#xE9; par une augmentation de 2 fois dans le flux d&#x26;#39;albumine et 4 fois plus dans Lp d&#xE8;s les premiers stades, ce qui a &#xE9;t&#xE9; associ&#xE9;e &#xE0; une mortalit&#xE9; &#xE9;lev&#xE9;e dans le d&#xE9;lai de 24 h. Compar&#xE9; avec le type sauvage de contr&#xF4;le, les souris MLCK-210-d&#xE9;ficientes affich&#xE9; une survie significativement am&#xE9;lior&#xE9;e avec une r&#xE9;ponse hyperperm&#xE9;abilit&#xE9; microvasculaire fortement att&#xE9;nu&#xE9; &#xE0; l&#x26;#39;albumine et fluide. Ces r&#xE9;sultats fournissent une preuve directe d&#x26;#39;un r&#xF4;le de MLCK-210 dans la m&#xE9;diation de br&#xFB;lure provoqu&#xE9;e par des blessures barri&#xE8;re microvasculaire et valider MLCK-210 en tant que cible th&#xE9;rapeutique potentielle dans le traitement de l&#x26;#39;oed&#xE8;me br&#xFB;lure.

Un r&#xF4;le pour la myosine kinase des cha&#xEE;nes l&#xE9;g&#xE8;res &#xE0; longue cha&#xEE;ne (MLCK-210) dans l&#x26;#39;hyperperm&#xE9;abilit&#xE9; microvasculaire Pendant Br&#xFB;lures graves

Mikrovaskul&auml;re Leckage hat bei der Entstehung von mehreren Organ Dysfunktion w&auml;hrend Trauma verwickelt. Fr&uuml;here Studien legen nahe, die Einbeziehung der Myosin-Leichtketten (MLC) ausgel&ouml;ste Phosphorylierung endothelial Kontraktion in der Entwicklung der mikrovaskul&auml;re Hyperpermeability. Myosin-Leichtketten-Kinase (MLCK) spielt eine Schl&uuml;sselrolle bei der Kontrolle der MLC-Phosphorylierung Status; So ist es vermutlich Barrierefunktion durch seine Verordnung von intrazellul&auml;ren KONTRAKTILER Maschinen zu modulieren. Ziel dieser Studie war, weiter zu untersuchen den endothelialen Mechanismus der MLC-abh&auml;ngige Barrier Sch&auml;digung Verbrennungen, konzentriert sich auf die lange Isoform von MLCK (MLCK-210), die vor kurzem als die vorherrschende Isoform, ausgedr&uuml;ckt in den vaskul&auml;ren endothelialen Zellen identifiziert wurde. Ein MLCK-210-Knockout-Maus-Modell wurde dritten Grades verbr&uuml;hen brennen mit 25 % total Body Gesamtfl&auml;che unterzogen. Mesenterica Mikrozirkulation wurde mit intravital-Mikroskopie beobachtet, und die mikrovaskul&auml;re Permeabilit&auml;t wurde ermittelt durch Messung des Transvenular-Fluss von Fluoreszein-Isothiocyanat-Albumin. In einem separaten Experiment wurde in-vivo mesenterica hydraulischen Leitf&auml;higkeit (Lp) mit die ver&auml;nderte Landis-Technik gemessen. Den Schaden verursacht hat eine tief greifende mikrovaskul&auml;re Leckage, wie angegeben durch eine 2-fold Zunahme der Albumin-Flussmittel und 4fach gefaltete Lp in den fr&uuml;hen Stadien, die innerhalb der 24-h-Frist mit einer hohen Mortalit&auml;t verbunden war. Im Vergleich zu Wildtyp-Steuerelement, die MLCK-210-defizienten M&auml;usen angezeigt eine deutlich verbesserte &uuml;berleben mit einer stark abgeschw&auml;chten mikrovaskul&auml;re Hyperpermeability Antwort auf Albumin und Fl&uuml;ssigkeit. Diese Ergebnisse bieten direkte Beweise f&uuml;r eine Rolle der MLCK-210 bei der Vermittlung von mikrovaskul&auml;re Barrier brennen-induzierte Sch&auml;digung und validieren Sie MLCK-210 als m&ouml;gliche therapeutische Ziel in der Behandlung von brennen &Ouml;dem.

Eine Rolle f&uuml;r lange Kette Myosin leichte Kette Kinase (MLCK-210) in mikrovaskul&auml;re Hyperpermeability bei schweren Verbrennungen.

Perdite microvascolare sono stata implicata nella patogenesi della disfunzione di organo multiple durante il trauma. Studi precedenti suggeriscono il coinvolgimento di miosina catena leggera (MLC) attivata da fosforilazione endoteliali contrazione nello sviluppo dell&#39;iperpermeabilit&agrave; microvascolare. Chinasi di catena leggera della miosina (MLCK) svolge un ruolo chiave nel controllo dello status di MLC-fosforilazione; cos&igrave;, si pensa che modulano la funzione di barriera attraverso il suo regolamento del macchinario contrattile intracellulare. Lo scopo di questo studio era di indagare ulteriormente il meccanismo endoteliale di lesioni barriera MLC-dipendente nelle ustioni, concentrandosi sull&#39;isoforma lunga di MLCK (MLCK-210) che recentemente &egrave; stata identificata come l&#39;isoforma predominante espressa nelle cellule endoteliali vascolari. Un modello del mouse di knockout MLCK-210 &egrave; stato sottoposto a bruciare ustione di terzo grado che copre il 25% dell&#39;area superficiale totale del corpo. La microcircolazione mesenterica &egrave; stata osservata tramite microscopia intravital, e la permeabilit&agrave; microvascolare &egrave; stata valutata misurando il flusso transvenular di fluoresceina isotiocianato-albumina. In un esperimento separato, conducibilit&agrave; idraulica mesenterica in vivo (Lp) &egrave; stata misurata utilizzando la tecnica modificata di Landis. Il pregiudizio causato una profonda perdita microvascolare, come indicato da un aumento di 2 volte nel flusso di albumina e aumento di 4 volte in Lp nelle fasi iniziali, che &egrave; stato associato con un alto tasso di mortalit&agrave; entro il periodo di 24 ore. Rispetto al wild-type controllo, i topi MLCK-210-carenti visualizzata una sopravvivenza significativamente migliorata con una risposta notevolmente attenuato iperpermeabilit&agrave; microvascolare di albumina e fluido. Questi risultati forniscono la prova diretta di un ruolo di MLCK-210 nella mediazione della lesione indotta da ustione microvascolare barriera e convalidare MLCK-210 come un potenziale bersaglio terapeutico nel trattamento dell&#39;edema di ustione.

Un ruolo per la lunga catena della miosina catena leggera chinasi (MLCK-210) nell&#39;iperpermeabilit&agrave; microvascolare durante gravi ustioni.

&#x5FAE;&#x5C0F;&#x8840;&#x7BA1;&#x306E;&#x6F0F;&#x308C;&#x306F;&#x5916;&#x50B7;&#x6642;&#x306B;&#x591A;&#x81D3;&#x5668;&#x4E0D;&#x5168;&#x306E;&#x75C5;&#x614B;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x307E;&#x3067;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x30DF;&#x30AA;&#x30B7;&#x30F3;&#x8EFD;&#x9396;&#xFF08;MLC&#xFF09;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x8840;&#x7BA1;&#x900F;&#x904E;&#x6027;&#x4EA2;&#x9032;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316;&#x30C8;&#x30EA;&#x30AC;&#x30FC;&#x5185;&#x76AE;&#x53CE;&#x7E2E;&#x306E;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x30DF;&#x30AA;&#x30B7;&#x30F3;&#x8EFD;&#x9396;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#xFF08;MLCK&#xFF09;&#x306F;MLC&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316;&#x72B6;&#x614B;&#x306E;&#x5236;&#x5FA1;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x679C;&#x305F;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3001;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x306F;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x53CE;&#x7E2E;&#x6A5F;&#x69CB;&#x306E;&#x305D;&#x306E;&#x30EC;&#x30AE;&#x30E5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x30D0;&#x30EA;&#x30A2;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3059;&#x308B;&#x3068;&#x8003;&#x3048;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x306E;&#x76EE;&#x7684;&#x306F;&#x3001;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x6700;&#x8FD1;&#x3067;&#x306F;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x767A;&#x73FE;&#x3057;&#x3066;&#x4E3B;&#x8981;&#x306A;&#x30A2;&#x30A4;&#x30BD;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x540C;&#x5B9A;&#x3055;&#x308C;&#x305F;MLCK&#x306E;&#x9577;&#x3044;&#x30A2;&#x30A4;&#x30BD;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;&#xFF08;MLCK-210&#xFF09;&#x306B;&#x7126;&#x70B9;&#x3092;&#x5F53;&#x3066;&#x3001;&#x3084;&#x3051;&#x3069;&#x306E;MLC-&#x4F9D;&#x5B58;&#x6027;&#x306E;&#x969C;&#x58C1;&#x640D;&#x50B7;&#x5185;&#x76AE;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002; MLCK-210&#x30CE;&#x30C3;&#x30AF;&#x30A2;&#x30A6;&#x30C8;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x306F;&#x3001;&#x30B5;&#x30FC;&#x30C9;&#x5EA6;&#x71B1;&#x50B7;&#x304C;25&#xFF05;&#x3001;&#x7DCF;&#x4F53;&#x8868;&#x9762;&#x7A4D;&#x3092;&#x30AB;&#x30D0;&#x30FC;&#x3057;&#x3066;&#x713C;&#x304F;&#x306B;&#x4F9B;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x8178;&#x9593;&#x819C;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x5FAA;&#x74B0;&#x3092;&#x751F;&#x4F53;&#x9855;&#x5FAE;&#x93E1;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x3066;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3057;&#x3001;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x8840;&#x7BA1;&#x306E;&#x900F;&#x904E;&#x6027;&#x306F;&#x3001;&#x30D5;&#x30EB;&#x30AA;&#x30EC;&#x30BB;&#x30A4;&#x30F3;&#x30A4;&#x30BD;&#x30C1;&#x30AA;&#x30B7;&#x30A2;&#x30CD;&#x30FC;&#x30C8;&#x30A2;&#x30EB;&#x30D6;&#x30DF;&#x30F3;&#x306E;transvenular&#x30D5;&#x30E9;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x3092;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x8A55;&#x4FA1;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x5225;&#x306E;&#x5B9F;&#x9A13;&#x3067;&#x306F;&#x3001;in vivo&#x3067;&#x306E;&#x8178;&#x9593;&#x819C;&#x306E;&#x900F;&#x6C34;&#x4FC2;&#x6570;&#xFF08;LP&#xFF09;&#x304C;&#x5909;&#x66F4;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30E9;&#x30F3;&#x30C7;&#x30A3;&#x30B9;&#x6280;&#x8853;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x3066;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30A2;&#x30EB;&#x30D6;&#x30DF;&#x30F3;&#x30D5;&#x30E9;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x306E;2&#x500D;&#x306B;&#x5897;&#x52A0;&#x3057;&#x3001;24&#x6642;&#x9593;&#x671F;&#x9593;&#x5185;&#x306B;&#x9AD8;&#x3044;&#x6B7B;&#x4EA1;&#x7387;&#x3068;&#x95A2;&#x9023;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x521D;&#x671F;&#x6BB5;&#x968E;&#x3067;LP&#x306E;4&#x500D;&#x306E;&#x5897;&#x52A0;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x640D;&#x50B7;&#x306F;&#x3001;&#x6DF1;&#x9060;&#x306A;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x8840;&#x7BA1;&#x306E;&#x6F0F;&#x308C;&#x304C;&#x767A;&#x751F;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x5BFE;&#x7167;&#x3068;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3057;&#x3066;&#x3001;MLCK-210-&#x6B20;&#x640D;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306F;&#x30A2;&#x30EB;&#x30D6;&#x30DF;&#x30F3;&#x3068;&#x6D41;&#x4F53;&#x306E;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x8840;&#x7BA1;&#x900F;&#x904E;&#x6027;&#x4EA2;&#x9032;&#x5927;&#x5E45;&#x306B;&#x6E1B;&#x8870;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3092;&#x6709;&#x610F;&#x306B;&#x751F;&#x5B58;&#x7387;&#x306E;&#x6539;&#x5584;&#x304C;&#x8868;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3001;&#x30D0;&#x30FC;&#x30F3;&#x30A4;&#x30F3;&#x8A98;&#x767A;&#x8840;&#x7BA1;&#x58C1;&#x306E;&#x640D;&#x50B7;&#x3092;&#x5A92;&#x4ECB;MLCK-210&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x76F4;&#x63A5;&#x7684;&#x306A;&#x8A3C;&#x62E0;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x3001;&#x706B;&#x50B7;&#x6D6E;&#x816B;&#x306E;&#x6CBB;&#x7642;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x306A;&#x6CBB;&#x7642;&#x6A19;&#x7684;&#x3068;&#x3057;&#x3066;MLCK-210&#x691C;&#x8A3C;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x91CD;&#x5EA6;&#x306E;&#x706B;&#x50B7;&#x306E;&#x9593;&#x306B;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x8840;&#x7BA1;&#x900F;&#x904E;&#x6027;&#x4EA2;&#x9032;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x9577;&#x9396;&#x30DF;&#x30AA;&#x30B7;&#x30F3;&#x8EFD;&#x9396;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#xFF08;MLCK-210&#xFF09;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;

Microvascular &#xB204;&#xC124; &#xC678;&#xC0C1; &#xC911; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xC7A5;&#xAE30; &#xBD80;&#xC804;&#xC758; &#xBCD1; &#xC778;&#xC5D0; &#xC5F0;&#xB8E8; &#xB418;&#xC5B4;&#xC788;&#xB2E4;. &#xC774;&#xC804; &#xC5F0;&#xAD6C; myosin &#xBE5B; &#xCCB4;&#xC778; (MLC) &#xC778; &#xC0B0;&#xD654; &#xD2B8;&#xB9AC;&#xAC70; &#xB0B4; &#xD53C; &#xC218;&#xCD95; microvascular hyperpermeability&#xC758; &#xAC1C;&#xBC1C;&#xC5D0;&#xC758; &#xCC38;&#xC5EC;&#xB97C; &#xAD8C;&#xD574; &#xB4DC;&#xB9BD;&#xB2C8;&#xB2E4;. MLC-&#xC778; &#xC0B0;&#xD654; &#xC0C1;&#xD0DC;; &#xC81C;&#xC5B4;&#xC5D0;&#xC11C; myosin &#xBE5B; &#xCCB4;&#xC778; &#xD0A4; &#xB2C8; &#xC544; &#xC81C; (MLCK)&#xC740; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC5ED;&#xD560; &#xB530;&#xB77C;&#xC11C;, &#xC138;&#xD3EC;&#xB0B4; &#xC218;&#xCD95; &#xAE30;&#xACC4;&#xB294; &#xB808; &#xADE4; &#xB808;&#xC774; &#xC158;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xC7A5;&#xBCBD; &#xAE30;&#xB2A5; &#xBCC0;&#xC870; &#xC0DD;&#xAC01; &#xB41C;&#xB2E4;. &#xC774; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC758; &#xBAA9;&#xD45C;&#xB294; &#xB354; &#xC774;&#xC0C1; &#xD654;&#xC0C1;, &#xD608;&#xAD00; &#xB0B4; &#xD53C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD45C;&#xD604; &#xD558;&#xB294; &#xC8FC;&#xB41C; isoform&#xC73C;&#xB85C; &#xCD5C;&#xADFC; &#xD655;&#xC778; (MLCK-210) MLCK&#xC758; &#xAE34; isoform&#xC5D0; &#xCD08;&#xC810;&#xC744; &#xB9DE;&#xCD94;&#xACE0;&#xC5D0; MLC &#xC885;&#xC18D; &#xC7A5;&#xBCBD; &#xBD80;&#xC0C1;&#xC758; &#xB0B4; &#xD53C; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC744; &#xC870;&#xC0AC; &#xD588;&#xB2E4;. MLCK-210 &#xB179;&#xC544;&#xC6C3; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xBAA8;&#xB378;&#xC740; 3&#xB3C4; scald &#xAD7D;&#xAE30; 25% &#xCD1D; &#xC2E0;&#xCCB4; &#xD45C;&#xBA74;&#xC801; &#xCDE8;&#xC7AC;&#xC758; &#xB300;&#xC0C1;. Intravital &#xD604;&#xBBF8;&#xACBD; &#xAC80;&#xC0AC; &#xBC95;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; mesenteric &#xBBF8;&#xC138; &#xD608;&#xAD00;&#xC744; &#xAD00;&#xCC30; &#xD558; &#xACE0; microvascular &#xCE68;&#xD22C;&#xC131; fluorescein isothiocyanate-&#xC54C; &#xBD80; &#xBBFC; transvenular &#xC720;&#xB7C9;&#xC744; &#xCE21;&#xC815; &#xD558; &#xC5EC; &#xD3C9;&#xAC00; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xBCC4;&#xB3C4; &#xC2E4;&#xD5D8;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC870;&#xAC74; mesenteric &#xC720;&#xC555; &#xC804;&#xB3C4;&#xB3C4; (Lp) &#xC218;&#xC815;&#xB41C; &#xB79C;&#xB514; &#xC2A4; &#xAE30;&#xC220;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xCE21;&#xC815; &#xD588;&#xB2E4;. &#xBD80;&#xC0C1; &#xC774;&#xC5C8;&#xB358; 24 &#xC2DC;&#xAC04; &#xAE30;&#xAC04; &#xB0B4;&#xC5D0; &#xB192;&#xC740; &#xC0AC;&#xB9DD;&#xB960;&#xACFC; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xC54C; &#xBD80; &#xBBFC; &#xC720;&#xB3D9;&#xC801;&#xC5D0;&#xC11C; 2-fold &#xC99D;&#xAC00; &#xBC0F; &#xCD08;&#xAE30; &#xB2E8;&#xACC4;&#xC5D0;&#xC11C; Lp 4-fold &#xC99D;&#xAC00; &#xC758;&#xD574; &#xD45C;&#xC2DC; &#xB41C; &#xB300;&#xB85C; &#xAE4A;&#xC740; microvascular &#xB204;&#xC124;&#xC744; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC57C;&#xC0DD;-&#xD0C0;&#xC785; &#xCEE8;&#xD2B8;&#xB864;&#xC5D0; &#xBE44;&#xD574;, MLCK 210 &#xBD88;&#xCDA9;&#xBD84; &#xD55C; &#xC950; &#xC54C; &#xBD80; &#xBBFC; &#xBC0F; &#xC720;&#xCCB4;&#xB294; &#xD06C;&#xAC8C; &#xAC10;&#xC1E0; microvascular hyperpermeability &#xC751;&#xB2F5;&#xC744; &#xD06C;&#xAC8C; &#xD5A5;&#xC0C1; &#xB41C; &#xC0DD;&#xC874; &#xD45C;&#xC2DC;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xACB0;&#xACFC; &#xC911;&#xC7AC; microvascular &#xC7A5;&#xBCBD; &#xD654;&#xC0C1; &#xC720;&#xBC1C; &#xBD80;&#xC0C1;&#xC5D0;&#xC11C; MLCK-210&#xC758; &#xC5ED;&#xD560;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC9C1;&#xC811;&#xC801;&#xC778; &#xC99D;&#xAC70;&#xB97C; &#xC81C;&#xACF5; &#xD558; &#xACE0; &#xD654;&#xC0C1; &#xBD80; &#xC885; &#xCE58;&#xB8CC;&#xC5D0; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xC801;&#xC778; &#xCE58;&#xB8CC; &#xB300;&#xC0C1;&#xC73C;&#xB85C; MLCK-210&#xC758; &#xC720;&#xD6A8;&#xC131;&#xC744; &#xAC80;&#xC0AC;.

&#xAE34; &#xCCB4;&#xC778; myosin &#xBE5B; &#xCCB4;&#xC778; &#xD0A4; (MLCK-210) &#xC2EC;&#xAC01;&#xD55C; &#xD654;&#xC0C1; &#xB3D9;&#xC548; microvascular hyperpermeability&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC5ED;&#xD560;.

Fugas microvascular se ha implicado en la patog&#xE9;nesis de la disfunci&#xF3;n m&#xFA;ltiple de &#xF3;rganos durante el trauma. Estudios previos sugieren que la participaci&#xF3;n de la cadena ligera de la miosina (MLC), activado por la fosforilaci&#xF3;n de la contracci&#xF3;n del endotelio en el desarrollo de la hiperpermeabilidad microvascular. La miosina quinasa de cadena ligera (MLCK) juega un papel clave en el control del estado de MLC-fosforilaci&#xF3;n, por lo que se cree que modulan la funci&#xF3;n de barrera a trav&#xE9;s de su regulaci&#xF3;n de la maquinaria contr&#xE1;ctil intracelular. El objetivo de este estudio fue investigar m&#xE1;s a fondo el mecanismo de la lesi&#xF3;n endotelial barrera de CTM-dependiente de la quema, se centra en la isoforma larga de MLCK (MLCK-210) que recientemente ha sido identificado como la isoforma predominante se expresa en las c&#xE9;lulas endoteliales vasculares. Un modelo de octavos de final MLCK-210 de rat&#xF3;n fue sometido a tercer grado escaldaduras cubriendo el 25% de &#xE1;rea de superficie corporal total. La microcirculaci&#xF3;n mesent&#xE9;rica se observ&#xF3; utilizando microscop&#xED;a intravital, y la permeabilidad microvascular se evalu&#xF3; midiendo el flujo transvenular de isotiocianato de fluoresce&#xED;na-alb&#xFA;mina. En un experimento separado, en mesent&#xE9;rica in vivo conductividad hidr&#xE1;ulica (Lp) se midi&#xF3; utilizando la t&#xE9;cnica modificada de Landis. El da&#xF1;o causado una fuga microvascular profunda, como lo indica un aumento de 2 veces en el flujo de la alb&#xFA;mina y aumento de 4 veces en el Lp en las primeras etapas, que se asoci&#xF3; con una alta mortalidad en el per&#xED;odo de 24 h. En comparaci&#xF3;n con los de tipo salvaje de control, los ratones MLCK-210-deficientes muestran una supervivencia significativamente mejor con una respuesta atenuada en gran medida la hiperpermeabilidad microvascular a la alb&#xFA;mina y el fluido. Estos resultados proporcionan pruebas directas de un papel de MLCK-210 en la mediaci&#xF3;n de la lesi&#xF3;n inducida por quemadura de la barrera microvascular y validar MLCK-210 como una posible diana terap&#xE9;utica en el tratamiento del edema quemadura.

Dayle A. Daines

Division of Basic Medical Sciences

Mercer University School of Medicine

Use of the EpiAirway Model for Characterizing Long-term Host-pathogen Interactions