method-for-isolation-identification-mrnas-micrornas-protein

Method for the Isolation and Identification of mRNAs, microRNAs and Protein Components of Ribonucleoprotein Complexes from Cell Extracts using RIP-Chip

As a result of the development of high-throughput sequencing and efficient microarray analysis, global gene expression analysis has become an easy and ...

University of Missouri

&#x868A;&#x866B;&#x53EE;&#x54AC;&#x8FC7;&#x654F;&#x75C7;&#x60A3;&#x8005;&#x7684;&#x5E93;&#x868A;&#x5026;&#x553E;&#x6DB2;&#x86CB;&#x767D; IgE &#x7ED1;&#x5B9A;&#x8FC7;&#x654F;&#x539F;&#x68C0;&#x6D4B;&#x5206;&#x6790;&#x3002;

Analysis of IgE-binding allergens in Culex quinquefasciatus saliva protein in mosquito bite allergic patients.

Analyse des allerg&egrave;nes IgE liant &agrave; Culex quinquefasciatus salive prot&eacute;ine dans chez les patients allergiques de la piq&ucirc;re de moustique.

Analyse der IgE-Bindung Allergene in Culex Quinquefasciatus Speichel Protein in Moskito Bissen allergischen Patienten.

Analisi di allergeni IgE-leganti in proteina di saliva Culex quinquefasciatus in pazienti allergici morso di zanzara.

&#x30A4;&#x30A8;&#x30AB; &#x30CD;&#x30C3;&#x30BF;&#x30A4;&#x30A4;&#x30A8;&#x30AB;&#x553E;&#x6DB2;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x868A;&#x54AC;&#x50B7;&#x30A2;&#x30EC;&#x30EB;&#x30AE;&#x30FC;&#x60A3;&#x8005; IgE &#x7D50;&#x5408;&#x30A2;&#x30EC;&#x30EB;&#x30B2;&#x30F3;&#x306E;&#x5206;&#x6790;&#x3002;

Culex quinquefasciatus &#xD0C0; &#xC561; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xBAA8;&#xAE30; &#xBB3C;&#xB9B0; &#xC54C;&#xB808;&#xB974;&#xAE30; &#xD658;&#xC790;&#xC758; IgE &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xC54C;&#xB808;&#xB974;&#xAE30; &#xC99D;&#xC0C1;&#xC758; &#xBD84;&#xC11D;.

An&aacute;lisis de alergenos IgE-obligatorias en prote&iacute;na de saliva Culex quinquefasciatus en pacientes al&eacute;rgicos de la picadura de mosquito.

&#x4ECE;&#x6CF0;&#x56FD;&#x66FC;&#x8C37;&#xFF0C;&#x7CAA;&#x7531;&#x7CAA;&#x4FBF;&#x68C0;&#x67E5;&#x786E;&#x5B9A;&#x611F;&#x67D3; 213 &#x95E8;&#x8BCA;&#x7684;&#x533B;&#x9662;&#x8BB0;&#x5F55;&#x8FFD;&#x6EAF;&#x5BA1;&#x67E5;&#x4E86;&#x5F52;&#x56E0;&#x4E8E;&#x827E;&#x6ECB;&#x75C5;&#x6BD2;&#x60A3;&#x8005;&#xFF0C;&#x90A3;&#x4E9B;&#x60A3;&#x6709;&#x6162;&#x6027;&#x75BE;&#x75C5;&#xFF0C;&#x90A3;&#x4E9B;&#x4F7F;&#x7528;&#x514D;&#x75AB;&#x6291;&#x5236;&#x5242;&#x836F;&#x7269;&#x548C;&#x76F8;&#x5BF9;&#x5065;&#x5EB7;&#x79D1;&#x76EE;&#x7684;&#x4E0D;&#x540C;&#x4E34;&#x5E8A;&#x6F14;&#x793A;&#x6587;&#x7A3F;&#x3002;&#x4E3A;&#x7231;&#x6ECB;&#x75C5;&#x5E26;&#x83CC;&#x8005; &#xFF0F; &#x60A3;&#x8005;&#x95FD;&#x5317;&#x9996;&#xFF0C;&#x6700;&#x5E38;&#x89C1;&#x7684;&#x75C7;&#x72B6;&#x662F;&#x6162;&#x6027;&#x8179;&#x6CFB;&#x3001; &#x53D1;&#x70ED;&#x3001; &#x6301;&#x7EED;&#x54B3;&#x55FD;&#x548C;&#x4F53;&#x91CD;&#x51CF;&#x8F7B;&#xFF0C;&#x4F46;&#x53EA;&#x6709;&#x524D;&#x4E09;&#x4E2A;&#x75C7;&#x72B6;&#x90FD;&#x5F88;&#x660E;&#x663E;&#x4E0D;&#x540C;&#x4E8E;&#x5176;&#x4ED6;&#x514D;&#x75AB;&#x635F;&#x5BB3;&#x5BBF;&#x4E3B;&#x3002;&#x95FD;&#x5317;&#x9996;&#x5065;&#x5EB7;&#x60A3;&#x8005;&#xFF0C;&#x6025;&#x6027;&#x8179;&#x6CFB;&#x548C;&#x8179;&#x75DB;&#x662F;&#x6700;&#x5E38;&#x89C1;&#x7684;&#x75C7;&#x72B6;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x5916;&#x5468;&#x8840;&#x55DC;&#x9178;&#x6027;&#x7C92;&#x7EC6;&#x80DE;&#x767D;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8BA1;&#x6570;&#x662F;&#x663E;&#x8457;&#x964D;&#x4F4E; (P = 0.004) &#x4E2D;&#x7684;&#x827E;&#x6ECB;&#x75C5;&#x60A3;&#x8005;&#x6BD4;&#x4EFB;&#x4F55;&#x5176;&#x4ED6;&#x5B50;&#x96C6;&#x3002;&#x6240;&#x6709;&#x7C7B;&#x522B;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x7537;&#x6027;&#x90FD;&#x6BD4;&#x5973;&#x6027;&#x66F4;&#x5E38;&#x89C1;&#x3002;&#x867D;&#x7136;&#x6240;&#x6709;&#x79D1;&#x76EE;&#x7684;&#x5E73;&#x5747;&#x5E74;&#x9F84;&#x662F; 48.3+/-16.4 &#x5E74;&#xFF0C;&#x6BD4;&#x5176;&#x4ED6;&#x7EC4;&#x4E2D;&#x5C06;&#x6709;&#x6162;&#x6027;&#x75C5;&#x95FD;&#x5317;&#x9996;&#x60A3;&#x8005;&#x663E;&#x8457;&#x8F83;&#x65E7;&#x7684; (+ /-13.5 &#x5E74; 56.8)&#x3002;&#x8FD9;&#x9879;&#x7814;&#x7A76;&#x53EF;&#x80FD;&#x4F1A;&#x5EFA;&#x8BAE;&#x8BE5;&#x95FD;&#x5317;&#x9996;&#x5E38;&#x89C1;&#x7684;&#x8001;&#x5E74;&#x7537;&#x6027;&#xFF0C;&#x548C;&#x4E3A; S.&#x7EBF;&#x866B;&#x611F;&#x67D3;&#x98CE;&#x9669;&#x6700;&#x5927;&#x7684;&#x75C5;&#x4EBA;&#x662F;&#x7231;&#x6ECB;&#x75C5;&#x5E26;&#x83CC;&#x8005; &#xFF0F; &#x60A3;&#x8005;&#x3002;&#x8FD9;&#x662F;&#x80A0;&#x9053;&#x95FD;&#x5317;&#x9996;&#x4E0D;&#x540C;&#x7FA4;&#x4F53;&#x7684;&#x514D;&#x75AB;&#x529F;&#x80FD;&#x53D7;&#x635F;&#x60A3;&#x8005;&#x7684;&#x4E0D;&#x540C;&#x4E34;&#x5E8A;&#x8868;&#x73B0;&#x7684;&#x7B2C;&#x4E00;&#x6B21;&#x62A5;&#x544A;&#x3002;

&#x514D;&#x75AB;&#x7EC4;&#x7684;&#x80A0;&#x9053;&#x95FD;&#x5317;&#x9996;&#x6F14;&#x793A;&#x6587;&#x7A3F;&#x4E2D;&#x7684;&#x5DEE;&#x5F02;&#x3002;

&#xBC29;&#xCF55;, &#xD0DC;&#xAD6D;, &#xB300;&#xBCC0; &#xAC80;&#xC0AC;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xACB0;&#xC815; &#xB41C; &#xB300;&#xB85C; Strongyloides stercoralis&#xC5D0; &#xAC10;&#xC5FC;&#xC5D0;&#xC11C; 213 &#xC678;&#xB798;&#xC758; &#xBCD1;&#xC6D0; &#xAE30;&#xB85D;&#xC740; &#xD658;&#xC790;&#xC5D0; &#xAC8C; &#xC5D0;&#xC774;&#xC988;, &#xB9CC;&#xC131; &#xC9C8;&#xD658;&#xACFC; &#xADF8; &#xAE30;&#xC804; &#xB9C8;&#xC57D;&#xACFC; &#xC0C1;&#xB300;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xAC74;&#xAC15; &#xD55C; &#xACFC;&#xBAA9;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558;&#xB294; &#xC0AC;&#xB78C;&#xB4E4; &#xAD00;&#xCC30; &#xC791;&#xC6A9;&#xC758; &#xB2E4;&#xB978; &#xC784;&#xC0C1; &#xD504;&#xB808; &#xC820; &#xD14C;&#xC774; &#xC158;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC18C;&#xAE09; &#xC870;&#xC0AC; &#xD588;&#xB2E4;. Strongyloidiasis&#xC640; &#xC5D0;&#xC774;&#xC988; &#xD658;&#xC790;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xAC00;&#xC7A5; &#xC77C;&#xBC18;&#xC801;&#xC778; &#xC99D;&#xC0C1;&#xC740; &#xB9CC;&#xC131; &#xC124;&#xC0AC;, &#xBC1C;&#xC5F4;, &#xC9C0;&#xC18D;&#xC801;&#xC778; &#xAE30;&#xCE68; &#xBC0F; &#xC190;&#xC2E4; &#xBB34;&#xAC8C;, &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xB2E8;&#xC9C0; &#xCC98;&#xC74C; &#xC138; &#xAC1C;&#xC758; &#xC99D;&#xC0C1;&#xC740; &#xB2E4;&#xB978; immunocompromised &#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8;&#xC640;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD06C;&#xAC8C; &#xB2E4;&#xB985;&#xB2C8;&#xB2E4;. Strongyloidiasis&#xC640; &#xD568;&#xAED8; &#xAC74;&#xAC15; &#xD55C; &#xD658;&#xC790;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xAE09;&#xC131; &#xC124;&#xC0AC;&#xC640; &#xBCF5; &#xBD80; &#xD1B5;&#xC99D;&#xC758; &#xAC00;&#xC7A5; &#xBE48;&#xBC88;&#xD55C; &#xC99D;&#xC0C1; &#xD588;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C;, &#xC8FC;&#xBCC0; &#xD638; &#xD608; &#xD69F;&#xC218;&#xB294; &#xD604;&#xC800;&#xD788; &#xB0AE;&#xC740; (P = 0.004) &#xB2E4;&#xB978; &#xD558;&#xC704; &#xC9D1;&#xD569;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBCF4;&#xB2E4; &#xC5D0;&#xC774;&#xC988; &#xD658;&#xC790;&#xC5D0;. &#xB0A8;&#xC131; &#xBAA8;&#xB4E0; &#xBD80;&#xBB38;&#xC5D0; &#xAC78;&#xCCD0; &#xC5EC;&#xC131; &#xBCF4;&#xB2E4; &#xB354; &#xC77C;&#xBC18;&#xC801; &#xC774;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xBAA8;&#xB4E0; &#xACFC;&#xBAA9;&#xC758; &#xD3C9;&#xADE0; &#xB098;&#xC774; 48.3+/-16.4 &#xB144; &#xB3D9;&#xC548; &#xB9CC;&#xC131; &#xC9C8;&#xD658; strongyloidiasis &#xD658;&#xC790;&#xB294; &#xB2E4;&#xB978; &#xADF8;&#xB8F9;&#xC5D0; &#xBE44;&#xD574; &#xD604;&#xC800; &#xD558; &#xAC8C; &#xB354; &#xC624;&#xB798; &#xB41C; (13.5 &#xB144; + 56.8) &#xC788;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xBCF8;&#xC774; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC81C;&#xC548;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xADF8; strongyloidiasis&#xC740; &#xC77C;&#xBC18;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC131;&#xC778; &#xB0A8;&#xC131;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC1C;&#xACAC; &#xD558; &#xACE0; &#xBBF8; stercoralis &#xAC10;&#xC5FC;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC704;&#xD5D8;&#xC774; &#xAC00;&#xC7A5; &#xD658;&#xC790;&#xB294; HIV &#xD658;&#xC790;. &#xC774;&#xAC83;&#xC740; &#xC7A5;&#xC560;&#xC778; &#xBA74;&#xC5ED; &#xD658;&#xC790; &#xB4E4;&#xC758; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xADF8;&#xB8F9;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC7A5; strongyloidiasis&#xC758; &#xB2E4;&#xB978; &#xC784;&#xC0C1; &#xD504;&#xB808; &#xC820; &#xD14C;&#xC774; &#xC158;&#xC758; &#xCCAB; &#xBC88;&#xC9F8; &#xBCF4;&#xACE0;&#xC11C;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Immunocompromised &#xADF8;&#xB8F9; &#xC7A5; strongyloidiasis&#xC758; &#xD504;&#xB808; &#xC820; &#xD14C;&#xC774; &#xC158;&#xC758; &#xCC28;&#xC774;.

The hospital records of 213 outpatients from Bangkok, Thailand, infected with Strongyloides stercoralis as determined by stool inspections were examined retrospectively for the different clinical presentations ascribed to patients with HIV, those with chronic illness, those who used immunosuppressant drugs and relatively healthy subjects. For HIV patients with strongyloidiasis, the most common symptoms were chronic diarrhea, fever, persistent coughing and loss of weight, but only the first three symptoms were significantly different from other immunocompromised hosts. For healthy patients with strongyloidiasis, acute diarrhea and abdominal pain were the most frequent symptoms. Moreover, the peripheral eosinophil blood count was significantly lower (P=0.004) in the HIV patients than in any of the other subsets. Males were more common than females across all categories. While the average age of all subjects was 48.3+/-16.4 years, the strongyloidiasis patients with chronic illness were significantly older (56.8+/-13.5 years) than those in the other groups. This study may suggest that strongyloidiasis is commonly found in geriatric males, and that the patients most at risk for S. stercoralis infection are HIV patients. This is the first report of the different clinical presentations of intestinal strongyloidiasis in various groups of patients with impaired immunity.

Immunocompromised group differences in the presentation of intestinal strongyloidiasis.

Les dossiers de l&#39;h&ocirc;pital de 213 patients ambulatoires de Bangkok (Tha&iuml;lande), infect&eacute;es par Strongyloides stercoralis tel que d&eacute;termin&eacute; par les inspections de selles ont &eacute;t&eacute; examin&eacute;s a posteriori pour les diff&eacute;rentes pr&eacute;sentations cliniques attribu&eacute;es aux patients atteints de VIH, celles souffrant de maladies chroniques, ceux qui ont utilis&eacute; des m&eacute;dicaments immunosuppresseurs et des sujets relativement en bonne sant&eacute;. Pour les patients VIH avec strongylo&iuml;dose, les sympt&ocirc;mes les plus courants sont la diarrh&eacute;e chronique, fi&egrave;vre, toux persistante et perte de poids, mais seulement les trois premiers sympt&ocirc;mes &eacute;taient significativement diff&eacute;rents des autres h&ocirc;tes immunod&eacute;prim&eacute;s. Pour les patients en bonne sant&eacute; avec la strongylo&iuml;dose, douleurs abdominales et diarrh&eacute;e aigu&euml; &eacute;taient des sympt&ocirc;mes les plus fr&eacute;quents. En outre, la num&eacute;ration formule sanguine p&eacute;riph&eacute;rique &eacute;osinophile est significativement plus faible (P = 0,004) chez les patients VIH que dans aucune des autres sous-ensembles. Les hommes &eacute;taient plus fr&eacute;quents que chez les femmes dans toutes les cat&eacute;gories. Alors que l&#39;&acirc;ge moyen de tous les sujets &eacute;tait de 48.3+/-16.4 ans, strongylo&iuml;dose patients souffrant de maladies chroniques &eacute;taient significativement plus &acirc;g&eacute;s (56,8 +/-13,5 ans) que celles des autres groupes. Cette &eacute;tude peut sugg&eacute;rer que strongylo&iuml;dose trouve couramment chez les m&acirc;les g&eacute;riatriques, et que les patients plus &agrave; risque d&#39;infection &agrave; S. stercoralis sont patients atteints du VIH. Il s&#39;agit du premier rapport des diff&eacute;rentes pr&eacute;sentations cliniques de strongylo&iuml;dose intestinale dans divers groupes de patients dont l&#39;immunit&eacute; alt&eacute;r&eacute;e.

Diff&eacute;rences de groupe immunod&eacute;prim&eacute;s dans la pr&eacute;sentation de la strongylo&iuml;dose intestinale.

Die Krankenhaus-Datens&auml;tze von 213 ambulant aus Bangkok, Thailand, infiziert mit Zwergfadenw&uuml;rmern Strongyloides, festgelegt durch Hocker Inspektionen wurden r&uuml;ckwirkend untersucht, f&uuml;r die verschiedenen klinischen Pr&auml;sentationen zugeschrieben Patienten mit HIV, chronische Krankheit, wer Immunsuppressiva und relativ gesunden Probanden verwendet. F&uuml;r HIV-Patienten mit Strongyloidiasis die h&auml;ufigsten Symptome sind chronischer Durchfall, Fieber, anhaltende Husten und Gewichtsverlust, aber nur die ersten drei Symptome waren wesentlich von anderen immungeschw&auml;chten Gastgeber. Bei gesunden Patienten mit Strongyloidiasis waren akuten Durchfall und Bauchschmerzen die h&auml;ufigsten Symptome. Dar&uuml;ber hinaus die peripheren Eosinophil Blutbild deutlich niedriger war (P = 0,004) in der HIV-Patienten als in jedem anderen Untergruppen. In allen Kategorien waren M&auml;nner h&auml;ufiger als Frauen. W&auml;hrend das Durchschnittsalter aller Fachgebiete 48.3+/-16.4 Jahre war, waren die Strongyloidiasis Patienten mit chronischen Krankheiten deutlich &auml;lter (56,8 +/-13,5 Jahre) als in den anderen Gruppen. Diese Studie kann vorschlagen, dass Strongyloidiasis findet sich h&auml;ufig in geriatrischen M&auml;nner, und dass die Patienten am meisten gef&auml;hrdeten f&uuml;r S. Zwergfadenw&uuml;rmern Infektion HIV-Patienten. Dies ist der erste Bericht der verschiedenen klinischen Pr&auml;sentationen der intestinale Strongyloidiasis in verschiedene Gruppen von Patienten mit gest&ouml;rter Immunit&auml;t.

Immungeschw&auml;chten Gruppe Unterschiede in der Darstellung des intestinale Strongyloidiasis.

Record di 213 pazienti ambulatoriali da Bangkok, Thailandia, infettato da Strongyloides stercoralis come determinato dalle ispezioni sgabello ospedale sono stati esaminati retrospettivamente per le diverse presentazioni cliniche ascritte a pazienti con HIV, quelli con malattie croniche, coloro che hanno utilizzato farmaci immunosoppressori e soggetti relativamente sani. Per pazienti affetti da HIV con strongyloidiasis, i sintomi pi&ugrave; comuni sono diarrea cronica, febbre, persistente tosse e perdita di peso, ma solo i primi tre sintomi erano significativamente differenti da altri ospiti immunocompromessi. Per i pazienti sani con strongyloidiasis, diarrea acuta e dolori addominali sono i sintomi pi&ugrave; frequenti. Inoltre, l&#39;emocromo eosinofili periferico era significativamente inferiore (P = 0,004) nei pazienti HIV rispetto in tutti gli altri sottoinsiemi. I maschi erano pi&ugrave; comuni rispetto alle femmine in tutte le categorie. Mentre l&#39;et&agrave; media di tutti i soggetti &egrave; stato 48.3+/-16.4 anni, pazienti con malattia cronica strongyloidiasis erano significativamente pi&ugrave; anziani (56.8 + 13,5 anni) rispetto a quelli degli altri gruppi. Questo studio pu&ograve; suggerire che strongyloidiasis si trova comunemente nei maschi geriatrici, e che i pazienti pi&ugrave; a rischio per l&#39;infezione da S. stercoralis sono pazienti affetti da HIV. Questo &egrave; il primo rapporto delle diverse presentazioni cliniche di strongyloidiasis intestinale in vari gruppi di pazienti con immunit&agrave; compromessa.

Differenze di gruppo immunocompromessi nella presentazione di strongyloidiasis intestinale.

&#x30D0;&#x30F3;&#x30B3;&#x30AF;&#x3001;&#x30BF;&#x30A4;&#x3001;&#x4FBF;&#x691C;&#x67FB;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x7DDA;&#x866B;&#x306B;&#x611F;&#x67D3;&#x304B;&#x3089; 213 &#x5916;&#x6765;&#x60A3;&#x8005;&#x306E;&#x75C5;&#x9662;&#x306E;&#x8A18;&#x9332;&#x30EC;&#x30C8;&#x30ED;&#x30B9;&#x30DA;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x306B;&#x306B;&#x3088;&#x308B; HIV &#x60A3;&#x8005;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x6162;&#x6027;&#x75BE;&#x60A3;&#x3092;&#x6301;&#x3064;&#x4EBA;&#x306E;&#x514D;&#x75AB;&#x6291;&#x5236;&#x85AC;&#x3068;&#x6BD4;&#x8F03;&#x7684;&#x5065;&#x5EB7;&#x306A;&#x88AB;&#x9A13;&#x8005;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x751F;&#x5F97;&#x7684;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x81E8;&#x5E8A;&#x30D7;&#x30EC;&#x30BC;&#x30F3;&#x30C6;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x8ABF;&#x3079;&#x305F;&#x3002;&#x7CDE;&#x7DDA;&#x866B;&#x75C7; hiv &#x611F;&#x67D3;&#x60A3;&#x8005;&#x306F;&#x3001;&#x6700;&#x3082;&#x4E00;&#x822C;&#x7684;&#x306A;&#x75C7;&#x72B6;&#x306F;&#x3001;&#x6162;&#x6027;&#x4E0B;&#x75E2;&#x3001;&#x767A;&#x71B1;&#x3001;&#x6C38;&#x7D9A;&#x7684;&#x306A;&#x54B3;&#x3001;&#x91CD;&#x91CF;&#x306E;&#x640D;&#x5931;&#x3060;&#x3063;&#x305F;&#x304C;&#x3001;&#x306E;&#x307F;&#x6700;&#x521D;&#x306E; 3 &#x3064;&#x306E;&#x75C7;&#x72B6;&#x306F;&#x4ED6;&#x306E;&#x514D;&#x75AB;&#x4E0D;&#x5168;&#x306E;&#x30DB;&#x30B9;&#x30C8;&#x304B;&#x3089;&#x5927;&#x5E45;&#x306B;&#x7570;&#x306A;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x3002;&#x7CDE;&#x7DDA;&#x866B;&#x75C7;&#x306E;&#x5065;&#x5EB7;&#x306A;&#x60A3;&#x8005;&#x306E;&#x6025;&#x6027;&#x4E0B;&#x75E2;&#x3068;&#x8179;&#x75DB;&#x6700;&#x3082;&#x983B;&#x7E41;&#x306A;&#x75C7;&#x72B6;&#x3060;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x307E;&#x305F;, &#x672B;&#x68A2;&#x597D;&#x9178;&#x7403;&#x306E;&#x8840;&#x6DB2;&#x6570;&#x306F;&#x6709;&#x610F;&#x306B;&#x4F4E;&#x304B;&#x3063;&#x305F; &#xFF08;P p=0.004) &#x3088;&#x308A;&#x3082; HIV &#x60A3;&#x8005;&#x3001;&#x4ED6;&#x306E;&#x30B5;&#x30D6;&#x30BB;&#x30C3;&#x30C8;&#x306E;&#x3044;&#x305A;&#x308C;&#x304B;&#x3067;&#x3002;&#x7537;&#x6027;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306E;&#x30AB;&#x30C6;&#x30B4;&#x30EA;&#x306B;&#x308F;&#x305F;&#x308B;&#x5973;&#x6027;&#x3088;&#x308A;&#x3082;&#x3088;&#x308A;&#x4E00;&#x822C;&#x7684;&#x3067;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306E;&#x79D1;&#x76EE;&#x306E;&#x5E73;&#x5747;&#x5E74;&#x9F62; 48.3+/-16.4 &#x6B73;&#x9593;&#x3001;&#x7CDE;&#x7DDA;&#x866B;&#x75C7;&#x60A3;&#x8005;&#x306E;&#x6162;&#x6027;&#x7684;&#x306A;&#x75C5;&#x6C17;&#x306F;&#x3001;&#x5927;&#x5E45;&#x306B;&#x53E4;&#x3044; (56.8 13.5 &#x6B73; +/-) &#x306E;&#x4ED6;&#x306E;&#x7FA4;&#x3088;&#x308A;&#x3060;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x304C;&#x63D0;&#x6848;&#x3059;&#x308B;&#x304B;&#x3082;&#x3057;&#x308C;&#x306A;&#x3044;&#x305D;&#x306E;&#x7CDE;&#x7DDA;&#x866B;&#x75C7;&#x306F;&#x4E00;&#x822C;&#x7684;&#x306B;&#x9AD8;&#x9F62;&#x8005;&#x306E;&#x7537;&#x6027;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x767A;&#x898B;&#x3057;&#x3001;&#x4E00;&#x756A; S. &#x6210;&#x4EBA;&#x611F;&#x67D3;&#x30EA;&#x30B9;&#x30AF;&#x60A3;&#x8005; HIV &#x60A3;&#x8005;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x306F;&#x3001;&#x8178;&#x5185;&#x306E;&#x7DDA;&#x866B;&#x514D;&#x75AB;&#x6A5F;&#x80FD;&#x304C;&#x4F4E;&#x4E0B;&#x60A3;&#x8005;&#x306E;&#x69D8;&#x3005; &#x306A;&#x30B0;&#x30EB;&#x30FC;&#x30D7;&#x3067;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x81E8;&#x5E8A;&#x30D7;&#x30EC;&#x30BC;&#x30F3;&#x30C6;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306E;&#x6700;&#x521D;&#x306E;&#x5831;&#x544A;&#x3067;&#x3059;&#x3002;

&#x8178;&#x7CDE;&#x7DDA;&#x866B;&#x75C7;&#x306E;&#x30D7;&#x30EC;&#x30BC;&#x30F3;&#x30C6;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306E;&#x514D;&#x75AB;&#x4E0D;&#x5168;&#x306E;&#x96C6;&#x56E3;&#x5DEE;&#x3002;

Los registros del hospital de 213 pacientes ambulatorios de Bangkok, Tailandia, infectados por Strongyloides stercoralis seg&uacute;n lo determinado por las inspecciones de taburete examinaron retrospectivamente para las diferentes presentaciones cl&iacute;nicas adscritas a los pacientes con VIH, personas con enfermedades cr&oacute;nicas, quienes utilizan medicamentos inmunosupresores y relativamente sanos. Para los pacientes de VIH con estrongiloidiasis, los s&iacute;ntomas m&aacute;s comunes son diarrea cr&oacute;nica, fiebre, tos persistente y p&eacute;rdida de peso, pero s&oacute;lo los tres primeros s&iacute;ntomas fueron significativamente diferentes de otros hospedadores inmunocomprometidos. Para los pacientes sanos con estrongiloidiasis, dolor abdominal y diarrea aguda fueron los s&iacute;ntomas m&aacute;s frecuentes. Por otra parte, la cuenta de sangre perif&eacute;rica de eosin&oacute;filo fue significativamente menor (P = 0, 004) en los pacientes de VIH que en cualquiera de los otros subconjuntos. Los hombres fueron m&aacute;s frecuentes que las hembras en todas las categor&iacute;as. Mientras que la edad promedio de todos los temas fue 48.3+/-16.4 a&ntilde;os, los estrongiloidiasis en pacientes con enfermedades cr&oacute;nicas fueron significativamente mayores (56.8 +/-13.5 a&ntilde;os) que en los otros grupos. Este estudio puede sugerir que estrongiloidiasis se encuentran com&uacute;nmente en los varones geri&aacute;tricos, y que los pacientes m&aacute;s en riesgo de infecci&oacute;n de S. stercoralis son pacientes de VIH. Este es el primer informe de las diferentes presentaciones cl&iacute;nicas de estrongiloidiasis intestinal en varios grupos de pacientes con inmunidad deteriorada.

Diferencias de grupos inmunocomprometidos en la presentaci&oacute;n de estrongiloidiasis intestinal.

Der Apicomplexan Parasiten Cryptosporidium ist eine bedeutende Ursache von Durchfallerkrankungen Krankheit weltweit. Zuvor berichteten wir, dass eine Cryptosporidium Parvum Subtilisin-wie Serin-Protease-Aktivit&auml;t mit Furin-Typ Spezifit&auml;t Splei&szlig;ungen gp40/15, ein Glykoprotein, das spaltet verarbeitet wird, in gp40 und gp15, die bei der Vermittlung von Infektion der Wirtszellen verwickelt sind. Weder der Enzyme(s) verantwortlich f&uuml;r die Protease-Aktivit&auml;t im C. Parvum Lysates, noch diejenigen, die gp40/15 zu verarbeiten sind bekannt. Es gibt keine Furin oder andere proprotein-Konvertase-Gene in das Genom von C. Parvum. Ein Gen, das f&uuml;r CpSUB1, ist ein Subtilisin-&auml;hnlichen Serinproteasen jedoch vorhanden. In dieser Studie genomische Sequenz CpSUB1 geklont und ausgedr&uuml;ckt und die rekombinante prodomain gereinigt. Reverse Transkriptase-PCR-Analyse von RNA aus C. Parvum-infizierten HCT-8 Zellen ergab, dass im gesamten Infektion in-vitro-CpSUB1 ausgedr&uuml;ckt wird. Immunoblots offenbarte Antiserum zu den rekombinanten CpSUB1 prodomain zwei gro&szlig;e Bands, von etwa 64 kDa und etwa 48 kDa, C. Parvum Lysates und Proteine &quot;Schuppen&quot;, w&auml;hrend Excystation. Immunofluoreszenz Proben reagierte das Antiserum mit der apikalen Region Sporozoites und Merozoiten. Die rekombinanten prodomain gehemmt Protease-Aktivit&auml;t und die Verarbeitung von rekombinanten gp40/15 von C. Parvum Lysates aber nicht von Furin. Da Prodomains oft selektive Inhibitoren ihre Verwandten Enzyme sind, diese Ergebnisse weisen darauf hin, dass CpSUB1 m&ouml;glicherweise ein aussichtsreicher Kandidat f&uuml;r die Protease-Aktivit&auml;t im C. Parvum und f&uuml;r die Verarbeitung von gp40/15. Wichtig ist, hemmte die rekombinante prodomain C. Parvum Infektion der HCT-8 Zellen. Diese Studien zeigen, dass CpSUB1 spielt eine bedeutende Rolle in der Infektion der Wirtszellen durch den Parasiten und schlagen vor, da&szlig; dieses Enzyms als Ziel f&uuml;r Intervention dienen kann.

Rolle des CpSUB1, eine Protease Subtilisin-wie Cryptosporidium Parvum Infektion in-vitro.

Apicomplexan &#x5BC4;&#x751F;&#x866B;&#x5B62;&#x5B50;&#x662F;&#x8179;&#x6CFB;&#x75BE;&#x75C5;&#x5728;&#x4E16;&#x754C;&#x5404;&#x5730;&#x7684;&#x4E00;&#x4E2A;&#x91CD;&#x8981;&#x539F;&#x56E0;&#x3002;&#x4EE5;&#x524D;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x66FE;&#x62A5;&#x9053;&#x9690;&#x5B62;&#x5B50;&#x866B;&#x5B62;&#x5B50;&#x67AF;&#x8349;&#x6746;&#x83CC;&#x4E1D;&#x6C28;&#x9178;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#x6D3B;&#x6027;&#x4E0E;&#x5F17;&#x6797;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#x578B;&#x7279;&#x5F02;&#x6027;&#x88C2; gp40/15&#xFF0C;proteolytically &#x52A0;&#x5DE5;&#x6210; gp40 &#x548C; gp15&#xFF0C;&#x5176;&#x4E2D;&#x6240;&#x6D89;&#x53CA;&#x7684;&#x8C03;&#x89E3;&#x611F;&#x67D3;&#x5BBF;&#x4E3B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x7CD6;&#x86CB;&#x767D;&#x3002;&#x8D1F;&#x8D23; C.&#x5B62;&#x5B50;&#x88C2;&#x89E3;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#x6D3B;&#x6027; enzyme(s) &#x65E2;&#x90A3;&#x4E9B;&#x5904;&#x7406; gp40/15 &#x662F;&#x5DF2;&#x77E5;&#x7684;&#x3002;&#x6709;&#x6CA1;&#x6709;&#x5F17;&#x6797;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#x6216;&#x5176;&#x4ED6;&#x7EC6;&#x83CC;&#x6027; convertase &#x57FA;&#x56E0; C.&#x5B62;&#x5B50;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x4E2D;&#x3002;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;&#x57FA;&#x56E0;&#x7F16;&#x7801; CpSUB1&#xFF0C;&#x67AF;&#x8349;&#x6746;&#x83CC;&#x4E1D;&#x6C28;&#x9178;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#xFF0C;&#x662F;&#x672C;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x9879;&#x7814;&#x7A76;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x514B;&#x9686;&#x7684; CpSUB1 &#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x5E8F;&#x5217;&#x548C;&#x8868;&#x793A;&#x548C;&#x51C0;&#x5316; prodomain &#x91CD;&#x7EC4;&#x3002;C.&#x5B62;&#x5B50;&#x611F;&#x67D3;&#x5C0F;&#x8D29;&#x4E8B;&#x52A1;&#x961F; 8 &#x7EC6;&#x80DE; RNA &#x9006;&#x8F6C;&#x5F55;&#x805A;&#x5408;&#x9176;&#x94FE;&#x53CD;&#x5E94;&#x5206;&#x6790;&#x663E;&#x793A; CpSUB1 &#x8868;&#x793A;&#x6574;&#x4E2A;&#x4F53;&#x5916;&#x611F;&#x67D3;&#x3002;&#x5728; immunoblots&#xFF0C;prodomain &#x7684;&#x91CD;&#x7EC4; CpSUB1 &#x6297;&#x8840;&#x6E05;&#x900F;&#x9732;&#x4E24;&#x4E2A;&#x4E3B;&#x8981;&#x7684;&#x4E50;&#x961F;&#xFF0C;&#x5927;&#x7EA6; 64 kDa &#x548C;&#x5927;&#x7EA6; 48 kDa&#xFF0C;C.&#x5B62;&#x5B50;&#x88C2;&#x89E3;&#x548C;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&quot;&#x5927;&#x68DA;&quot;&#x5728; excystation &#x671F;&#x95F4;&#x3002;&#x514D;&#x75AB;&#x8367;&#x5149;&#x6CD5;&#x68C0;&#x6D4B;&#x6297;&#x8840;&#x6E05;&#x53CD;&#x5E94;&#x4E0E;&#x6839;&#x5C16;&#x7684;&#x866B;&#x5B50;&#x548C; merozoites &#x533A;&#x57DF;&#x3002;&#x91CD;&#x7EC4; prodomain &#x6291;&#x5236;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#x6D3B;&#x6027;&#x548C;&#x91CD;&#x7EC4; gp40/15 C.&#x5B62;&#x5B50;&#x88C2;&#x89E3;&#x800C;&#x4E0D;&#x662F;&#x7531;&#x5F17;&#x6797;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#x5904;&#x7406;&#x3002;&#x7531;&#x4E8E; prodomains &#x901A;&#x5E38;&#x7684;&#x53CA;&#x5176;&#x540C;&#x6E90;&#x9176;&#x9009;&#x62E9;&#x6027;&#x6291;&#x5236;&#x5242;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E; CpSUB1 &#x53EF;&#x80FD;&#x662F;&#x6709;&#x53EF;&#x80FD;&#x7684;&#x5019;&#x9009;&#x8005;&#xFF0C;&#x5BF9;&#x4E8E; C.&#x5B62;&#x5B50;&#x4E2D;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#x6D3B;&#x6027;&#x548C;&#x5904;&#x7406;&#x7684; gp40/15&#x3002;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x662F;&#xFF0C;prodomain &#x91CD;&#x7EC4;&#x6291;&#x5236;&#x5C0F;&#x8D29;&#x4E8B;&#x52A1;&#x961F; 8 &#x7EC6;&#x80DE; C.&#x5B62;&#x5B50;&#x7684;&#x611F;&#x67D3;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7814;&#x7A76;&#x8868;&#x660E;&#xFF0C;CpSUB1 &#x7684;&#x5BC4;&#x751F;&#x866B;&#x611F;&#x67D3;&#x7684;&#x5BBF;&#x4E3B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x8D77;&#x7740;&#x91CD;&#x8981;&#x4F5C;&#x7528;&#xFF0C;&#x5E76;&#x8868;&#x660E;&#x8FD9;&#x79CD;&#x9176;&#x53EF;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x5E72;&#x9884;&#x7684;&#x76EE;&#x6807;&#x3002;

CpSUB1&#xFF0C;&#x67AF;&#x8349;&#x6746;&#x83CC;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#xFF0C;&#x5728;&#x4F53;&#x5916;&#x7684;&#x9690;&#x5B62;&#x5B50;&#x866B;&#x611F;&#x67D3;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;

The apicomplexan parasite Cryptosporidium is a significant cause of diarrheal disease worldwide. Previously, we reported that a Cryptosporidium parvum subtilisin-like serine protease activity with furin-type specificity cleaves gp40/15, a glycoprotein that is proteolytically processed into gp40 and gp15, which are implicated in mediating infection of host cells. Neither the enzyme(s) responsible for the protease activity in C. parvum lysates nor those that process gp40/15 are known. There are no furin or other proprotein convertase genes in the C. parvum genome. However, a gene encoding CpSUB1, a subtilisin-like serine protease, is present. In this study, we cloned the CpSUB1 genomic sequence and expressed and purified the recombinant prodomain. Reverse transcriptase PCR analysis of RNA from C. parvum-infected HCT-8 cells revealed that CpSUB1 is expressed throughout infection in vitro. In immunoblots, antiserum to the recombinant CpSUB1 prodomain revealed two major bands, of approximately 64 kDa and approximately 48 kDa, for C. parvum lysates and proteins "shed" during excystation. In immunofluorescence assays, the antiserum reacted with the apical region of sporozoites and merozoites. The recombinant prodomain inhibited protease activity and processing of recombinant gp40/15 by C. parvum lysates but not by furin. Since prodomains are often selective inhibitors of their cognate enzymes, these results suggest that CpSUB1 may be a likely candidate for the protease activity in C. parvum and for processing of gp40/15. Importantly, the recombinant prodomain inhibited C. parvum infection of HCT-8 cells. These studies indicate that CpSUB1 plays a significant role in infection of host cells by the parasite and suggest that this enzyme may serve as a target for intervention.

Role of CpSUB1, a subtilisin-like protease, in Cryptosporidium parvum infection in vitro.

APICOMPLEXES parasite Cryptosporidium est une cause importante de diarrh&eacute;e dans le monde entier. Auparavant, nous avons signal&eacute; qu&#39;une activit&eacute; de la prot&eacute;ase Cryptosporidium parvum subtilisine s&eacute;rine avec sp&eacute;cificit&eacute; furin-type fend gp40/15, une glycoprot&eacute;ine qui est transform&eacute;e clivage prot&eacute;olytique de gp40 et gp15, qui sont impliqu&eacute;s dans la m&eacute;diation de l&#39;infection des cellules h&ocirc;tes. On sait que ni les enzymes responsables de l&#39;activit&eacute; de la prot&eacute;ase dans les lysats de c. parvum, ni celles qui traitent de gp40/15. Il n&#39;y a aucun furine ou autres proprot&eacute;ine convertase g&egrave;nes dans le g&eacute;nome de c. parvum. Cependant, un g&egrave;ne codant pour la CpSUB1, une prot&eacute;ase de s&eacute;rine de subtilisine, est pr&eacute;sent. Dans cette &eacute;tude, nous clon&eacute; la s&eacute;quence g&eacute;nomique CpSUB1 et exprim&eacute; et purifi&eacute; le recombinant prodomain. Analyse PCR transcriptase inverse de l&#39;ARN des cellules de HCT-8 c. parvum infect&eacute;s a r&eacute;v&eacute;l&eacute; que CpSUB1 est exprim&eacute;e tout au long de l&#39;infection in vitro. Dans l&#39;immuno-blot, antis&eacute;rum &agrave; la recombinaison CpSUB1 prodomain a r&eacute;v&eacute;l&eacute; deux bandes principales, d&#39;environ 64 kDa et environ 48 kDa, pour c. parvum lysats et prot&eacute;ines &laquo; baraque &raquo; au cours de l&#39;excystation. Dans des tests d&#39;immunofluorescence, l&#39;antis&eacute;rum r&eacute;agit avec la r&eacute;gion apicale de sporozo&iuml;tes et les m&eacute;rozo&iuml;tes. Le recombinant prodomain inhibe l&#39;activit&eacute; prot&eacute;ase et traitement des recombinants gp40/15 par c. parvum lysats mais non par la furine. Puisque les prodomains sont souvent des inhibiteurs s&eacute;lectifs de leurs enzymes apparent&eacute;es, ces r&eacute;sultats sugg&egrave;rent que la CpSUB1 peut &ecirc;tre un candidat probable pour l&#39;activit&eacute; de la prot&eacute;ase chez c. parvum et pour le traitement de gp40/15. Ce qui est important, la recombinaison prodomain inhib&eacute; l&#39;infection de c. parvum de HCT-8 cellules. Ces &eacute;tudes indiquent que la CpSUB1 joue un r&ocirc;le significatif dans l&#39;infection des cellules de l&#39;h&ocirc;te par le parasite et sugg&egrave;rent que cette enzyme peut-&ecirc;tre constituer une cible pour l&#39;intervention.

R&ocirc;le de CpSUB1, une prot&eacute;ase de subtilisine, Cryptosporidium parvum infection in vitro.

Il parassita Apicomplexa Cryptosporidium &egrave; una significativa causa di malattie diarroiche in tutto il mondo. In precedenza, abbiamo segnalato che un&#39;attivit&agrave; di Cryptosporidium parvum subtilisina-come serina proteasi, con specificit&agrave; furin-tipo fende gp40/15, una glicoproteina che proteoliticamente viene trasformata in gp40 e gp15, che sono implicati nella mediazione della infezione delle cellule ospiti. Il responsabile dell&#39;attivit&agrave; di proteasi nei lisati di c. parvum enzyme(s) n&eacute; coloro che elaborano gp40/15 sono noti. Non ci sono nessun furin o altri geni convertasi proprotein del genoma di c. parvum. Tuttavia, un gene che codifica per CpSUB1, una subtilisina-come serina proteasi, &egrave; presente. In questo studio, abbiamo clonato la sequenza genomica CpSUB1 ed espresso e purificato il ricombinante prodomain. Reverse transcriptase PCR analisi di RNA da c. parvum-HCT-8 cellule infette ha rivelato che CpSUB1 &egrave; espresso nel corso di infezione in vitro. In immunoblots, antisiero il ricombinante CpSUB1 prodomain ha rivelato due importanti bande musicali, di circa 64 kDa e circa 48 kDa, c. parvum lisati e proteine &quot;capannone&quot; durante excystation. Nei saggi di immunofluorescenza, l&#39;antisiero ha reagito con la regione apicale di sporozoiti e merozoiti. L&#39;attivit&agrave; proteasica inibito prodomain ricombinante e l&#39;elaborazione di ricombinante gp40/15 da c. parvum lysates ma non da furin. Dal prodomains sono spesso inibitori selettivi dei loro enzimi cognate, questi risultati suggeriscono che la CpSUB1 pu&ograve; essere un probabile candidato per l&#39;attivit&agrave; di proteasi in c. parvum e per l&#39;elaborazione di gp40/15. Soprattutto, il ricombinante prodomain inibito infezione da c. parvum di HCT-8 cellule. Questi studi indicano che CpSUB1 un ruolo significativo nell&#39;infezione delle cellule ospiti dal parassita e suggeriscono che questo enzima pu&ograve; servire come una destinazione per l&#39;intervento.

Ruolo di CpSUB1, una proteasi subtilisina-come, in infezione da Cryptosporidium parvum in vitro.

Apicomplexan &#x5BC4;&#x751F;&#x866B;&#x30AF;&#x30EA;&#x30D7;&#x30C8;&#x30B9;&#x30DD;&#x30EA;&#x30B8;&#x30A6;&#x30E0;&#x4E0B;&#x75E2;&#x6027;&#x75BE;&#x60A3;&#x3001;&#x4E16;&#x754C;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x539F;&#x56E0;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x4EE5;&#x524D;&#x306F;&#x3001;&#x30AF;&#x30EA;&#x30D7;&#x30C8;&#x30B9;&#x30DD;&#x30EA;&#x30B8;&#x30A6;&#x30E0;&#x306E;&#x30AA;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C8; &#x30B5;&#x30C1;&#x30E9;&#x30A4;&#x30B7;&#x30F3;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x30BB;&#x30EA;&#x30F3; &#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A2;&#x30FC;&#x30BC;&#x6D3B;&#x6027;&#x306F;&#x98A8;&#x9234;&#x578B;&#x7279;&#x7570; gp40/15 &#x5E74;&#x751F; gp40 &#x3068; gp15&#x3001;&#x5BBF;&#x4E3B;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x4F1D;&#x67D3;&#x3092;&#x5A92;&#x4ECB;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x306B;&#x51E6;&#x7406;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x7CD6;&#x86CB;&#x767D;&#x3092;&#x5207;&#x65AD;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x5831;&#x544A;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;C. &#x30D5;&#x30ED;&#x30AD;&#x30E5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3; lysates &#x4E2D;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A2;&#x30FC;&#x30BC;&#x6D3B;&#x6027;&#x306E;&#x8CAC;&#x4EFB;&#x306E;&#x3053;&#x3068;&#x3082; gp40/15 &#x3092;&#x52A0;&#x5DE5;&#x304C;&#x77E5;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3044;&#x3044;&#x3048;&#x98A8;&#x9234;&#x307E;&#x305F;&#x306F; dapi &#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x306E;&#x4ED6;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8EE2;&#x63DB;&#x9175;&#x7D20;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x305F;&#x3060;&#x3057;&#x3001;CpSUB1 &#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x30B5;&#x30C1;&#x30E9;&#x30A4;&#x30B7;&#x30F3;&#x69D8;&#x30BB;&#x30EA;&#x30F3;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A2;&#x30FC;&#x30BC;&#x304C;&#x5B58;&#x5728;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x306F; CpSUB1 &#x306E;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x914D;&#x5217;&#x3092;&#x30AF;&#x30ED;&#x30FC;&#x30F3;&#x5316;&#x3057;&#x8868;&#x73FE;&#x3057;&#x3001;prodomain &#x306E;&#x7D44;&#x63DB;&#x3048;&#x3092;&#x7CBE;&#x88FD;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;C. &#x30AF;&#x30EA;&#x30D7;&#x30C8;&#x30B9;&#x30DD;&#x30EA;&#x30B8;&#x30A6;&#x30E0;&#x611F;&#x67D3; HCT 8 &#x7D30;&#x80DE;&#x304B;&#x3089;&#x306E; RNA &#x306E;&#x9006;&#x8EE2;&#x5199; PCR &#x89E3;&#x6790; CpSUB1 in vitro &#x611F;&#x67D3;&#x3092;&#x901A;&#x3057;&#x3066;&#x8868;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;Immunoblots &#x3067;&#x7D04; 64 kDa &#x3068; C. &#x306E;&#x30AA;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C8; lysates &#x3084;&#x300C;&#x8131;&#x7A40;&#x6642;&#x306B;&#x65BC;&#x3051;&#x308B;&#x30B9;&#x30DD;&#x30ED;&#x30BE;&#x30A4;&#x30C8;&#x4E2D;&#x306B;&#x6D41;&#x3059;&#x300C;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306E;&#x304A;&#x3088;&#x305D; 48 kDa &#x306E; 2 &#x3064;&#x306E;&#x4E3B;&#x8981;&#x306A;&#x30D0;&#x30F3;&#x30C9;&#x6297;&#x8840;&#x6E05; prodomain &#x7D44;&#x63DB;&#x3048; CpSUB1 &#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x86CD;&#x5149;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x3067;&#x6297;&#x8840;&#x6E05;&#x30B9;&#x30DD;&#x30ED;&#x30BE;&#x30A4;&#x30C8;&#x3068;&#x30E1;&#x30ED;&#x30BE;&#x30A4;&#x30C8;&#x306E;&#x6839;&#x5C16;&#x90E8;&#x3067;&#x53CD;&#x5FDC;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x7D44;&#x63DB;&#x3048; prodomain &#x6291;&#x5236;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A2;&#x30FC;&#x30BC;&#x6D3B;&#x6027;&#x3068;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x7D44;&#x63DB;&#x3048; gp40/15 dapi lysates &#x3067;&#x306F;&#x306A;&#x3044;&#x98A8;&#x9234;&#x306E;&#x51E6;&#x7406;&#x3002;Prodomains &#x306F;&#x3001;&#x3057;&#x3070;&#x3057;&#x3070;&#x3001;&#x540C;&#x7A2E;&#x306E;&#x9175;&#x7D20;&#x306E;&#x963B;&#x5BB3;&#x5264;&#x3067;&#x3059;&#x306E;&#x3067;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x304B;&#x3089; CpSUB1 dapi &#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A2;&#x30FC;&#x30BC;&#x6D3B;&#x6027;&#x3068;&#x51E6;&#x7406; gp40/15 &#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x6709;&#x529B;&#x5019;&#x88DC;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x793A;&#x5506;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x306F;&#x3001;prodomain &#x306E;&#x7D44;&#x63DB;&#x3048; C. &#x30AF;&#x30EA;&#x30D7;&#x30C8;&#x30B9;&#x30DD;&#x30EA;&#x30B8;&#x30A6;&#x30E0;&#x611F;&#x67D3; HCT 8 &#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x6291;&#x5236;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x306F; CpSUB1 &#x5BC4;&#x751F;&#x866B;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5BBF;&#x4E3B;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x4F1D;&#x67D3;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x679C;&#x305F;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x3053;&#x306E;&#x9175;&#x7D20;&#x306E;&#x4ECB;&#x5165;&#x306E;&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x5F79;&#x7ACB;&#x3064;&#x304B;&#x3082;&#x3057;&#x308C;&#x306A;&#x3044;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

CpSUB1&#x3001;&#x30AF;&#x30EA;&#x30D7;&#x30C8;&#x30B9;&#x30DD;&#x30EA;&#x30B8;&#x30A6;&#x30E0;&#x306E;&#x30AA;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C8;&#x611F;&#x67D3;&#x306E; in vitro &#x3067;&#x306E;&#x30B5;&#x30C1;&#x30E9;&#x30A4;&#x30B7;&#x30F3;&#x69D8;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A2;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x3002;

Apicomplexan &#xAE30;&#xC0DD;&#xCDA9; &#xC6C0;&#xC744; diarrheal &#xC9C8;&#xBCD1; &#xC804;&#xC138;&#xACC4;&#xC758; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC6D0;&#xC778;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xC804;&#xC5D0;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; furin &#xD615;&#xC73C;&#xB85C; &#xC6C0;&#xC744; parvum subtilisin &#xCC98;&#xB7FC; &#xB5A0;&#xB4E4;&#xACE0; protease &#xD65C;&#xB3D9; gp40/15, proteolytically gp40 &#xBC0F; gp15, &#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xAC10;&#xC5FC;&#xC744; &#xC911;&#xC7AC;&#xC5D0; &#xC5F0;&#xB8E8;&#xB85C; &#xCC98;&#xB9AC; &#xB418;&#xB294; &#xB2F9;&#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC55E; &#xBCF4;&#xB3C4; &#xD588;&#xB2E4;. Enzyme(s) C. parvum lysates &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xCC45;&#xC784;&#xC774; &#xC5C6;&#xC73C;&#xBA70; gp40/15 &#xCC98;&#xB9AC;&#xB294;&#xC73C;&#xB85C; &#xC54C;&#xB824;&#xC838; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC544;&#xB2C8; furin &#xB610;&#xB294; &#xB2E4;&#xB978; proprotein convertase &#xC720;&#xC804;&#xC790; C. parvum &#xAC8C;&#xB188;&#xC5D0; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, &#xC720;&#xC804;&#xC790; CpSUB1 &#xC778;&#xCF54;&#xB529;, subtilisin &#xCC98;&#xB7FC; &#xB5A0;&#xB4E4;&#xACE0; protease &#xC874;&#xC7AC; &#xC774;&#xB2E4;. &#xC774; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD45C;&#xD604; &#xB418; &#xACE0; &#xC7AC;&#xC870;&#xD569; prodomain &#xC815;&#xD654; CpSUB1 &#xAC8C;&#xB188; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4;&#xB97C; &#xBCF5;&#xC81C; &#xC6B0;&#xB9AC;. C. parvum &#xAC10;&#xC5FC; &#xB41C; HCT-8 &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; RNA&#xC758; &#xC5ED;&#xC804;&#xC0AC; PCR &#xBD84;&#xC11D; &#xACF5;&#xAC1C; CpSUB1 &#xAC10;&#xC5FC; &#xCCB4; &#xC678;&#xC5D0; &#xAC78;&#xCCD0; &#xD45C;&#xD604; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. Immunoblots, prodomain &#xC7AC;&#xC870;&#xD569; CpSUB1 &#xD558; &#xC6D0;&#xC73C;&#xB85C; &#xC57D; 64 kDa &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; excystation &#xB3D9;&#xC548; &quot;&#xCC3D; &#xACE0;&quot;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; C. parvum lysates &#xC57D; 48 Kda&#xC758; &#xB450; &#xC8FC;&#xC694; &#xBC34;&#xB4DC;&#xB97C; &#xACF5;&#xAC1C; &#xD588;&#xB2E4;. &#xBA74;&#xC5ED; &#xD615;&#xAD11; &#xBD84;&#xC11D; &#xC2E4;&#xD5D8;, &#xACE0; &#xC6D0;&#xC73C;&#xB85C; sporozoites&#xC640; merozoites&#xC758; &#xAF2D;&#xB300;&#xAE30; &#xC9C0;&#xC5ED; &#xBC18;&#xC751;. Prodomain &#xC7AC;&#xC870;&#xD569; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xD65C;&#xB3D9; &#xBC0F; &#xC7AC;&#xC870;&#xD569; gp40/15&#xC758; &#xCC98;&#xB9AC; furin &#xC544;&#xB2C8;&#xB77C; C. parvum lysates&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC800;&#xD574;. Prodomains &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xB3D9;&#xC871; &#xD6A8;&#xC18C;&#xC758; &#xC120;&#xD0DD;&#xC801; &#xC5B5;&#xC81C;&#xC81C; &#xC790;&#xC8FC; &#xB54C;&#xBB38;&#xC5D0;, &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xACB0;&#xACFC; CpSUB1 gp40/15&#xC758; &#xCC98;&#xB9AC;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; C. parvum protease &#xD65C;&#xB3D9;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xAC00;&#xB2A5;&#xC131;&#xC774; &#xD6C4;&#xBCF4; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xC88B;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xAC83;&#xC740;, prodomain &#xC7AC;&#xC870;&#xD569; HCT 8 &#xC140;&#xC758; C. parvum &#xAC10;&#xC5FC; &#xC800;&#xD574;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0C5;&#xB2C8;&#xB2E4; CpSUB1 &#xAE30;&#xC0DD;&#xCDA9;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xAC10;&#xC5FC;&#xC5D0; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xB2F4;&#xB2F9; &#xD558; &#xACE0;&#xC774; &#xD6A8;&#xC18C;&#xC758; &#xAC1C;&#xC785;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xB300;&#xC0C1;&#xC73C;&#xB85C; &#xC81C;&#xACF5;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB2E4;&#xB294; &#xAC83;&#xC774; &#xC88B;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

CpSUB1, &#xC6C0; parvum &#xAC10;&#xC5FC; &#xCCB4; &#xC678;&#xC5D0;&#xC11C; subtilisin &#xAC19;&#xC740; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xC5ED;&#xD560;.

El par&aacute;sito apicomplejo Cryptosporidium es una causa importante de enfermedad diarreica en todo el mundo. Previamente, inform&oacute; que una actividad de proteasa de serina subtilisin-como de Cryptosporidium parvum con especificidad de tipo furin hiende gp40/15, una glicoprote&iacute;na que proteolytically son transformada en gp40 y gp15, que est&aacute;n implicados en la mediaci&oacute;n de la infecci&oacute;n de las c&eacute;lulas del hu&eacute;sped. Se conocen ni la enzyme(s) responsable de la actividad de la proteasa en lisados de C. parvum ni aquellos que procesan gp40/15. Hay no furin u otros convertasa proprote&iacute;na genes en el genoma de C. parvum. Sin embargo, un gen que codifica CpSUB1, una proteasa de serina subtilisin-como, est&aacute; presente. En este estudio, hab&iacute;a clonado de la secuencia gen&oacute;mica de CpSUB1 y expresado y hab&iacute;a purificado la recombinante prodomain. An&aacute;lisis por PCR transcriptasa reversa de ARN de C. parvum infectados HCT-8 c&eacute;lulas revelaron que CpSUB1 se expresa a trav&eacute;s de infecci&oacute;n in vitro. En immunoblots, antisuero para el CpSUB1 recombinante prodomain revel&oacute; dos bandas principales, de aproximadamente 64 kDa y aproximadamente 48 kDa, C. parvum lisados y prote&iacute;nas &quot;vertiente&quot; durante excystation. En los ensayos de inmunofluorescencia, el antisuero reaccion&oacute; con la regi&oacute;n apical de los Esporozo&iacute;tos y merozo&iacute;tos. La actividad de la proteasa recombinante de inhibici&oacute;n prodomain y procesamiento de recombinantes gp40/15 por C. parvum lisados pero no por furin. Puesto que prodomains a menudo son los inhibidores selectivos de sus enzimas cognados, estos resultados sugieren que el CpSUB1 puede ser un candidato probable para la actividad de la proteasa en C. parvum y para el procesamiento de gp40/15. Importantemente, la recombinante prodomain inhibe la infecci&oacute;n por C. parvum de HCT-8 c&eacute;lulas. Estos estudios indican que la CpSUB1 juega un papel importante en la infecci&oacute;n de las c&eacute;lulas del hu&eacute;sped por el par&aacute;sito y sugieren que esta enzima puede servir como un destino para la intervenci&oacute;n.

Patsharaporn Techasintana

Molecular Microbiology and Immunology,
Department of Surgery

University of Missouri

Method for the Isolation and Identification of mRNAs, microRNAs and Protein Components of Ribonucleoprotein Complexes from Cell Extracts using RIP-Chip

Patsharaporn Techasintana

.css-o250i3{font-size:18px;font-family:Open Sans,sans-serif;line-height:21.6px;}Molecular Microbiology and Immunology,Department of Surgery

University of Missouri

Method for the Isolation and Identification of mRNAs, microRNAs and Protein Components of Ribonucleoprotein Complexes from Cell Extracts using RIP-Chip

Molecular Microbiology and Immunology,
Department of Surgery