Phenotypic and Functional Characterization of Endothelial Colony Forming Cells Derived from Human Umbilical Cord Blood

Longstanding views of new blood vessel formation via angiogenesis, vasculogenesis, and arteriogenesis have been recently reviewed1. The presence of ...

Indiana University School of Medicine

&#x5185;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5F62;&#x6210;&#x4E00;&#x4E2A;&#x534A;&#x900F;&#x7684;&#x5C4F;&#x969C;&#xFF0C;&#x8840;&#x6DB2;&#x5206;&#x5F00;&#x7684;&#x57FA;&#x7840;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x3002;&#x5C4F;&#x969C;&#x529F;&#x80FD;&#x5F88;&#x5927;&#x7A0B;&#x5EA6;&#x4E0A;&#x53D6;&#x51B3;&#x4E8E;&#x5B9A;&#x4E49;&#x7684;&#x9650;&#x5236;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x8FB9;&#x6846;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x548C;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x77E9;&#x9635;&#x7C98;&#x8FDE;&#x3002;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x79CD;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x548C;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x77E9;&#x9635;&#x4E2D;&#x7EE7;&#x662F;&#x4E25;&#x91CD;&#x4F9D;&#x8D56;&#x4E8E;&#x672C;&#x8EAB;&#x5728;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x5185;&#x9075;&#x5B88;&#x7684;&#x6027;&#x8D28;&#x3002;&#x4E8B;&#x5B9E;&#x4E0A;&#xFF0C;&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x7EC6;&#x80DE;&#x9AA8;&#x67B6;&#x53EF;&#x6EE1;&#x8DB3;&#x8FD9;&#x4E00;&#x57FA;&#x672C;&#x804C;&#x80FD;&#xFF0C;&#x63D0;&#x4F9B;&#x4E00;&#x4E2A;&#x5F3A;&#x6709;&#x529B;&#x7684;&#x3001; &#x52A8;&#x6001;&#x7684;&#x80DE;&#x5185;&#x811A;&#x624B;&#x67B6;&#x4E3E;&#x529E;&#x79EF;&#x5206;&#x819C;&#x86CB;&#x767D;&#x4E0E;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x7684;&#x5185;&#x653F;&#xFF0C;&#x5E76;&#x54CD;&#x5E94;&#x73AF;&#x5883;&#x7684;&#x63D0;&#x793A;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x534F;&#x8C03;&#x9002;&#x5F53;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x7684;&#x5F62;&#x72B6;&#x3002;&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x7EC6;&#x80DE;&#x9AA8;&#x67B6;&#x662F;&#x7531;&#x4E09;&#x4E2A;&#x4E0D;&#x540C;&#xFF0C;&#x4F46;&#x4E92;&#x76F8;&#x5173;&#x8FDE;&#x7684;&#x7ED3;&#x6784;&#xFF0C;&#x5305;&#x62EC;&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x4EA4;&#x8054;&#x7684;&#x8840;&#x5F71;&#x819C;&#x9AA8;&#x67B6;&#x3001; &#x76AE;&#x5C42;&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D; rim &#x548C;&#x8089;&#x57FA;&#x4E8E;&#x5E94;&#x529B;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x5185;&#x7EC4;&#x6210;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E00;&#x5BA1;&#x67E5;&#x5730;&#x5740;&#x6BCF;&#x4E2A;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x4E3A;&#x57FA;&#x7840;&#x7684;&#x7ED3;&#x6784;&#xFF0C;&#x5E76;&#x8BA8;&#x8BBA;&#x4E86;&#x63A7;&#x5236;&#x5904;&#x7F6E;&#x7684;&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x5728;&#x4E0D;&#x540C;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8868;&#x578B;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4FE1;&#x53F7;&#x3002;

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Endothelium forms a semi-permeable barrier that separates blood from the underlying tissue. Barrier function is largely determined by cell-cell and cell-matrix adhesions that define the limits of cell borders. Yet, such cell-cell and cell-matrix tethering is critically reliant upon the nature of adherence within the cell itself. Indeed, the actin cytoskeleton fulfills this essential function, to provide a strong, dynamic intracellular scaffold that organizes integral membrane proteins with the cell's interior, and responds to environmental cues to orchestrate appropriate cell shape. The actin cytoskeleton is comprised of three distinct, but inter-related structures, including actin cross-linking of spectrin within the membrane skeleton, the cortical actin rim, and actomyosin-based stress fibers. This review addresses each of these actin-based structures, and discusses cellular signals that control the disposition of actin in different endothelial cell phenotypes.

The actin cytoskeleton in endothelial cell phenotypes.

L&#39;endoth&eacute;lium forme une barri&egrave;re semi-perm&eacute;able qui s&eacute;pare le sang du tissu sous-jacent. Fonction de barri&egrave;re est largement d&eacute;termin&eacute;e par des adh&eacute;rences cellule-cellule et cellule-matrice qui d&eacute;finissent les limites des bordures des cellules. Pourtant, cette cellule-cellule et cellule-matrice attachant est critique d&eacute;pendent de la nature de l&#39;adh&eacute;sion au sein de la cellule elle-m&ecirc;me. En effet, le cytosquelette d&#39;actine s&#39;acquitte de cette fonction essentielle, afin de fournir un &eacute;chafaudage intracellulaire solide et dynamique qui organise des prot&eacute;ines int&eacute;grales de membrane &agrave; l&#39;int&eacute;rieur de la cellule et r&eacute;pond aux signaux environnementaux d&#39;orchestrer la forme de la cellule appropri&eacute;e. Le cytosquelette d&#39;actine est compos&eacute; de trois structures distinctes, mais &eacute;troitement li&eacute;s, y compris l&#39;actine r&eacute;ticulation de la spectrine dans le squelette de la membrane, la jante d&#39;actine corticale et fibres de stress ax&eacute;e sur l&#39;actomyosine. Cette revue traite de chacune de ces structures ax&eacute;es sur l&#39;actine et traite les signaux cellulaires qui contr&ocirc;lent la disposition de l&#39;actine dans les ph&eacute;notypes diff&eacute;rents de cellules endoth&eacute;liales.

Le cytosquelette d&#39;actine dans les ph&eacute;notypes des cellules endoth&eacute;liales.

Endothel bildet eine halbdurchl&auml;ssige Barriere, die das darunterliegende Gewebe Blut trennt. Barrierefunktion richtet sich weitgehend nach Zell-Zell und Zelle-Matrix Adh&auml;sionen, die Zelle Grenzen zu definieren. Doch ist diese Zell-Zell- und Zelle-Matrix Anbindehaltung kritisch auf die Art der Einhaltung der in der Zelle selbst angewiesen. Tats&auml;chlich erf&uuml;llt das Aktin-Zytoskelett diese Hauptfunktion, um eine starke, dynamische intrazellul&auml;re Ger&uuml;st bereitzustellen, die integrale Membranproteine mit der Zelle Interieur organisiert und reagiert auf &ouml;kologische Hinweise der entsprechenden Zelle Form zu orchestrieren. Das Aktin-Zytoskelett besteht aus drei unterschiedlichen, aber miteinander verbundenen Strukturen, einschlie&szlig;lich Aktin Vernetzung der Spektrin innerhalb der Membran-Skelett, die kortikale Aktin-Felge und Actomyosin-basierten Druck-Fasern. Diesen Bericht befasst sich jede dieser Strukturen auf der Grundlage von Aktin und er&ouml;rtert zellul&auml;re Signale, die die Disposition des Aktin in verschiedenen Endothelzellen Ph&auml;notypen zu steuern.

Das Aktin-Zytoskelett in Endothelzellen Ph&auml;notypen.

Endotelio forma una barriera semipermeabile che separa il sangue dal tessuto sottostante. Funzione di barriera &egrave; in gran parte determinato da adesioni cellula-cellula e cellula-matrice che definiscono i limiti dei bordi della cella. Eppure, tale cellula-cellula e cellula-matrice tethering &egrave; criticamente cessante la natura dell&#39;aderenza all&#39;interno della cella stessa. Infatti, il citoscheletro di actina compie questa funzione essenziale, per fornire un&#39;impalcatura intracellulare forte, dinamica che organizza le proteine integrali di membrana con interni della cella e risponde a stimoli ambientali di orchestrare forma cella appropriata. Il citoscheletro di actina &egrave; composto da tre strutture distinte, ma interdipendenti, tra cui l&#39;actina cross-linking di spettrina entro lo scheletro di membrana, il cerchio di actina corticale e fibre actomiosina-based stress. Questa recensione affronta ognuna di queste strutture basate su actina e discute i segnali cellulari che controllano la disposizione di actina in fenotipi differenti delle cellule endoteliali.

Il citoscheletro di actina in fenotipi di cellule endoteliali.

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Endothelium &#xB0B4;&#xBD80; &#xC870;&#xC9C1;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD608;&#xC561;&#xC744; &#xBD84;&#xB9AC; &#xD558;&#xB294; &#xBC18; &#xD22C;&#xACFC;&#xC131; &#xBC29; &#xBCBD;&#xC744; &#xD615;&#xC131; &#xD55C;&#xB2E4;. &#xC7A5;&#xBCBD; &#xAE30;&#xB2A5; &#xC140; &#xD14C;&#xB450;&#xB9AC;&#xC758; &#xD55C;&#xACC4;&#xB97C; &#xC815;&#xC758; &#xD558;&#xB294; &#xC140;&#xACFC; &#xC140; &#xB9E4;&#xD2B8;&#xB9AD;&#xC2A4; &#xC720;&#xCC29;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xC88C;&#xC6B0; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC140; &#xBC0F; &#xC140; &#xB9E4;&#xD2B8;&#xB9AD;&#xC2A4; &#xBC27;&#xC904;&#xB85C; &#xB9E4;&#xB294; &#xC138;&#xD3EC; &#xC790;&#xCCB4; &#xB0B4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC900;&#xC218;&#xC758; &#xC131;&#xACA9;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xBE44;&#xD310;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC758;&#xC874; &#xC774;&#xB2E4;. &#xC2E4;&#xC81C;&#xB85C;, &#xB9D0;&#xB77C; cytoskeleton &#xC140;&#xC758; &#xB0B4;&#xBD80; &#xC815;&#xC218; &#xACC4;&#xC5F4; &#xB9C9; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC744; &#xAD6C;&#xC131; &#xD558; &#xACE0; &#xC801;&#xC808; &#xD55C; &#xC140; &#xBAA8;&#xC591;&#xC744; &#xCDE8;&#xD560; &#xD658;&#xACBD; &#xC2E0;&#xD638;&#xC5D0; &#xC751;&#xB2F5; &#xD558;&#xB294; &#xAC15;&#xB825;&#xD55C; &#xB3D9;&#xC801; &#xC138;&#xD3EC;&#xB0B4; &#xBC1C;&#xD310; &#xC81C;&#xACF5;&#xC774; &#xD544;&#xC218;&#xC801;&#xC778; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC744; &#xC218;&#xD589; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB9D0;&#xB77C; cytoskeleton &#xB9D0;&#xB77C; spectrin &#xB9C9; &#xACE8;&#xACA9;, &#xB300;&#xB1CC; &#xD53C; &#xC9C8;&#xC758; &#xB9D0;&#xB77C; &#xD14C;&#xB450;&#xB9AC; &#xBC0F; actomyosin &#xAE30;&#xBC18; &#xC2A4;&#xD2B8;&#xB808;&#xC2A4; &#xC12C;&#xC720; &#xB0B4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC0C1;&#xD638;&#xB97C; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558; &#xC5EC; 3 &#xAC00;&#xC9C0;, &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xC0C1;&#xD638; &#xAD00;&#xB828;&#xC774; &#xAD6C;&#xC870; &#xAD6C;&#xC131; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xAC80;&#xD1A0; &#xC8FC;&#xC18C;&#xB97C; &#xAC01; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xB9D0;&#xB77C; &#xAE30;&#xBC18; &#xAD6C;&#xC870; &#xBC0F; &#xB2E4;&#xB978; &#xB0B4; &#xD53C; &#xC138;&#xD3EC; &#xACE0;&#xAE30;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB9D0;&#xB77C;&#xC758; &#xCC98;&#xB9AC;&#xB97C; &#xC81C;&#xC5B4; &#xD558;&#xB294; &#xC138;&#xD3EC; &#xC2E0;&#xD638;&#xC5D0; &#xC124;&#xBA85; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xB0B4; &#xD53C; &#xC138;&#xD3EC; &#xACE0;&#xAE30;&#xC5D0; &#xB9D0;&#xB77C; cytoskeleton&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Endotelio forma una barrera semipermeable que separa la sangre del tejido subyacente. Funci&oacute;n de la barrera est&aacute; determinada por adherencias c&eacute;lula-c&eacute;lula y c&eacute;lula-matriz que definen los l&iacute;mites de las fronteras de la c&eacute;lula. Sin embargo, tal c&eacute;lula-c&eacute;lula y c&eacute;lula-matriz tethering es cr&iacute;ticamente dependiente de la naturaleza de la adhesi&oacute;n dentro de la c&eacute;lula. De hecho, el citoesqueleto de actina cumple esta funci&oacute;n esencial, para proporcionar un andamio intracelular fuerte y din&aacute;mico que organiza las prote&iacute;nas de membrana integral con interior de la c&eacute;lula y responde a se&ntilde;ales ambientales orquestar la forma apropiada de la c&eacute;lula. El citoesqueleto de actina se compone de tres estructuras diferentes, pero interrelacionadas, incluyendo la actinia Cross-linking de spectrin en el esqueleto de la membrana, el borde de actina corticales y fibras de estr&eacute;s actomyosin. Esta revisi&oacute;n aborda cada una de estas estructuras basadas en la actina y analiza las se&ntilde;ales celulares que controlan la disposici&oacute;n de la actina en fenotipos diferentes c&eacute;lulas endoteliales.

El citoesqueleto de actina en fenotipos de c&eacute;lulas endoteliales.

&#x53EF;&#x6EB6;&#x6027;&#x817A;&#x82F7;&#x9178;&#x73AF;&#x5316;&#x9176;&#x6BD2;&#x7D20;&#xFF0C;&#x5982;&#x5047;&#x5355;&#x80DE;&#x83CC;&#x94DC;&#x7EFF; exoY&#xFF0C;&#x751F;&#x6210;&#x4E00;&#x4E2A;&#x8425;&#x5730;&#x7684;&#x6C60;&#xFF0C;&#x9000;&#x5200;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x8FB9;&#x6846;&#x3002;&#x4F46;&#x662F;&#xFF0C;&#x4E0D;&#x77E5;&#x9053;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x4E2A;&#x8425;&#x5730;&#x7684;&#x4FE1;&#x53F7;&#x9000;&#x5200;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x8FB9;&#x6846;&#x7684;&#x9AA8;&#x67B6;&#x57FA;&#x7840;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x8BBE;&#x6CD5;&#x786E;&#x5B9A;&#x662F;&#x5426;&#x5D4C;&#x5408;&#x3001; &#x53EF;&#x6EB6;&#x6027;&#x817A;&#x82F7;&#x9178;&#x73AF;&#x5316;&#x9176;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x6211; / II (&#x5357;&#x90E8;&#x975E;&#x6D32;&#x80FD;&#x529B;&#x5021;&#x8BAE;/II) &#x91CD;&#x7EC4;&#x5FAE;&#x7BA1;&#x6216;&#x5916;&#x56F4;&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x3002;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x662F;&#x7A33;&#x5B9A;&#x8F6C;&#x67D3;&#x5FAE;&#x7BA1;&#x7EFF;&#x8272;&#x8367;&#x5149;&#x86CB;&#x767D;&#x6807;&#x8BB0; &alpha;-&#x86CB;&#x767D;&#x6216; &beta;-&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#xFF0C;&#x7136;&#x540E;&#x611F;&#x67D3;&#x817A;&#x75C5;&#x6BD2;&#x8868;&#x8FBE;&#x5357;&#x90E8;&#x975E;&#x6D32;&#x80FD;&#x529B;&#x5021;&#x8BAE;/II&#x3002;&#x773C;&#x538B;&#x5347;&#x9AD8;&#xFF0C;&#x800C;&#x523A;&#x6FC0;&#x7684;&#x6B65;&#x4E4B;&#x9065;&#x8868;&#x793A;&#x8DE8;&#x819C;&#x817A;&#x82F7;&#x73AF;&#x5316;&#x9176;&#x548C;&#x5357;&#x90E8;&#x975E;&#x6D32;&#x80FD;&#x529B;&#x5021;&#x8BAE;/II&#xFF0C;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7275;&#x62C9;&#x4F34;&#x968F;&#x7740;&#x5468;&#x56F4;&#x5FAE;&#x7BA1;&#x7684;&#x91CD;&#x7EC4;&#x3002;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;&#x76AE;&#x5C42;&#x4E1D;-&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D; (f-&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;) &#x6CA1;&#x6709;&#x4E0D;&#x91CD;&#x65B0;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x5230;&#x5E94;&#x529B;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x548C;&#x808C;&#x7403;&#x86CB;&#x767D;&#x8F7B;&#x94FE;-20 &#x78F7;&#x9178;&#x5316;&#x4E0B;&#x8DCC;&#x3002;&#x5F02;&#x4E19;&#x80BE;&#x4E0A;&#x817A;&#x7D20;&#xFF0C;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x5185;&#x6E90;&#x6027;&#x817A;&#x82F7;&#x73AF;&#x5316;&#x9176;&#xFF0C;&#x4F46;&#x4E0D;&#x80FD;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x5357;&#x90E8;&#x975E;&#x6D32;&#x80FD;&#x529B;&#x5021;&#x8BAE;/II&#xFF0C;&#x786E;&#x5B9E;&#x4E0D;&#x4FC3;&#x4F7F;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x5DEE;&#x8DDD;&#x5E76;&#x4E0D;&#x5F71;&#x54CD;&#x5FAE;&#x7BA1;&#x6216; f-&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x4F53;&#x7CFB;&#x7ED3;&#x6784;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x5357;&#x90E8;&#x975E;&#x6D32;&#x80FD;&#x529B;&#x5021;&#x8BAE;/II &#x751F;&#x6210;&#x4E00;&#x4E2A;&#x8425;&#x5730;&#x7684;&#x4FE1;&#x53F7;&#xFF0C;&#x8868;&#x660E;&#x91CD;&#x7EC4;&#x5FAE;&#x7BA1;&#x548C;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x7EC6;&#x80DE;&#x9000;&#x7F29;&#xFF0C;&#x4E0D;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x5E94;&#x529B; f-&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7814;&#x7A76;&#x7ED3;&#x679C;&#x8BF4;&#x660E;&#x5BF9;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x95F4;&#x9699;&#x5F62;&#x6210;&#x53EF;&#x4EE5;&#x6BEB;&#x4E0D; f-&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x5F62;&#x6210;&#x538B;&#x529B;&#xFF0C;&#x5E76;&#x63D0;&#x4F9B;&#x673A;&#x68B0;&#x7684;&#x89C1;&#x89E3;&#x5982;&#x4F55;&#x7EC6;&#x83CC;&#x7684;&#x817A;&#x82F7;&#x9178;&#x73AF;&#x5316;&#x9176;&#x6BD2;&#x7D20;&#x91CD;&#x7EC4;&#x7EC6;&#x80DE;&#x9AA8;&#x67B6;&#x8BF1;&#x4F7F;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x820D;&#x5165;&#x3002;

&#x53EF;&#x6EB6;&#x6027;&#x817A;&#x82F7;&#x9178;&#x73AF;&#x5316;&#x9176;&#x4F9D;&#x8D56;&#x89E3;&#x805A;&#x63ED;&#x793A;&#x5185;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x9000;&#x7F29;&#x7684;&#x65B0;&#x7684;&#x673A;&#x5236;&#x3002;

Soluble adenylyl cyclase toxins, such as Pseudomonas aeruginosa exoY, generate a cAMP pool that retracts cell borders. However, the cytoskeletal basis by which this cAMP signal retracts cell borders is not known. We sought to determine whether activation of chimeric, soluble adenylyl cyclase I/II (sACI/II) reorganizes either microtubules or peripheral actin. Endothelial cells were stably transfected with either green fluorescent protein-labeled alpha-tubulin or beta-actin, and then infected with adenovirus to express sACI/II. Forskolin, which stimulates both the endogenously expressed transmembrane adenylyl cyclases and sACI/II, induced cell retraction accompanied by the reorganization of peripheral microtubules. However, cortical filamentous-actin (f-actin) did not reorganize into stress fibers, and myosin light-chain-20 phosphorylation was decreased. Isoproterenol, which activates endogenous adenylyl cyclases but does not activate sACI/II, did not induce endothelial cell gaps and did not influence microtubule or f-actin architecture. Thus, sACI/II generates a cAMP signal that reorganizes microtubules and induces cell retraction, without inducing f-actin stress fibers. These findings illustrate that endothelial cell gap formation can proceed without f-actin stress fiber formation, and provide mechanistic insight how bacterial adenylyl cyclase toxins reorganize the cytoskeleton to induce cell rounding.

Soluble adenylyl cyclase-dependent microtubule disassembly reveals a novel mechanism of endothelial cell retraction.

Toxines de cyclase soluble ad&eacute;nylyl, tels que Pseudomonas aeruginosa exoY, g&eacute;n&egrave;rent un pool de cAMP qui se r&eacute;tracte les bordures des cellules. Toutefois, la base du cytosquelette par lequel ce signal cAMP r&eacute;tracte des bordures de cellule ne conna&icirc;t pas. Nous avons voulu d&eacute;terminer si activation de chim&eacute;riques, soluble dans l&#39;ad&eacute;nylcyclase je / II (sACI/II) r&eacute;organise les microtubules ou actine p&eacute;riph&eacute;rique. Les cellules endoth&eacute;liales ont &eacute;t&eacute; transfect&eacute;es stablement avec verte fluorescente marqu&eacute; prot&eacute;ine alpha-tubuline ou beta-actine et ensuite infect&eacute;es par l&#39;ad&eacute;novirus pour exprimer la sACI/II. La forskoline, qui stimule les cyclases ad&eacute;nylyl transmembranaire exprim&eacute;e de fa&ccedil;on endog&egrave;ne et sACI/II, induite par la r&eacute;traction cellulaire, accompagn&eacute;e par la r&eacute;organisation des microtubules p&eacute;riph&eacute;riques. Cependant, filamenteux-actine corticale (actine-f) ne pas r&eacute;organiser en fibres de stress, et la phosphorylation de la myosine light-cha&icirc;ne-20 a &eacute;t&eacute; diminu&eacute;e. L&#39;isoprot&eacute;r&eacute;nol, qui active endog&egrave;ne ad&eacute;nylate cyclases mais ne s&#39;active pas sACI/II, n&#39;induit pas de lacunes des cellules endoth&eacute;liales et n&#39;influence pas l&#39;architecture microtubules ou actine-f. Ainsi, sACI/II g&eacute;n&egrave;re un signal de cAMP qui r&eacute;organise les microtubules et induit la r&eacute;traction de la cellule, sans provoquer de fibres de stress d&#39;actine f. Ces constatations illustrent que les cellules endoth&eacute;liales &eacute;cart formation peut proc&eacute;der sans formation de fibres de stress actine f et renseignent m&eacute;caniste des toxines de cyclase ad&eacute;nylyl comment bact&eacute;riennes r&eacute;organiser le cytosquelette pour provoquer l&#39;arrondi de la cellule.

D&eacute;montage ad&eacute;nylcyclase d&eacute;pendant microtubule ad&eacute;nylyl solubles r&eacute;v&egrave;le un nouveau m&eacute;canisme de r&eacute;traction des cellules endoth&eacute;liales.

L&ouml;sliche Fehlfunktion Guanylatcyclase Toxine, wie Pseudomonas Aeruginosa ExoY, generieren einen cAMP Pool, der Zellrahmen zur&uuml;ckzieht. Die Zytoskelett Basis, die mit der dieses cAMP Signal Zellrahmen R&uuml;ckz&uuml;ge ist jedoch nicht bekannt. Wollten wir bestimmen ob Aktivierung von Chim&auml;ren, l&ouml;sliches Fehlfunktion Guanylatcyclase ich / II (sACI/II) reorganisiert Mikrotubuli oder periphere Aktin. Endothelzellen waren stabil transfected mit gr&uuml;n fluoreszierenden Protein-beschriftet Alpha-Tubulin oder Beta-Actin, und dann infiziert mit Adenoviren sACI/II zum Ausdruck zu bringen. Forskolin, die endogen exprimierten Transmembran-Fehlfunktion bearbeitet sowohl die sACI/II stimuliert, induzierte Zelle Retraktion von der Neuordnung der peripheren Mikrotubuli begleitet. Jedoch kortikale filament&ouml;sen-Actin (f-Actin) nicht in Stress-Fasern zu reorganisieren und Phosphorylierung der Myosin-Licht-Kette-20 wurde verringert. Isoproterenol, die endogene membran&auml;rer Adenylylzyklasen aktiviert, sondern aktiviert nicht sACI/II, nicht induzieren Endothelzellen L&uuml;cken und hatten keinen Einfluss auf Microtubule oder f-Actin-Architektur. SACI/II erzeugt so ein cAMP Signal, die Mikrotubuli reorganisiert und induziert Zelle einfahren, ohne damit noch f-Actin-Spannung-Fasern. Diese Ergebnisse zeigen, dass Endothelzellen L&uuml;cke Formation kann ohne f-Actin-Spannung-Faser-Bildung fortfahren und mechanistische wie bakterielle Toxine in erschienen Guanylatcyclase Einblicke Zytoskeletts, Zelle Rundung genau zu reorganisieren.

L&ouml;sliche Fehlfunktion Guanylatcyclase abh&auml;ngigen Microtubule Zerlegung offenbart einen neuen Mechanismus der endothelial Zelle Retraktion.

Tossine di solubile adenil ciclasi, come Pseudomonas aeruginosa exoY, generano una campo piscina che ritrae i bordi della cella. Tuttavia, la base del citoscheletro che questo segnale cAMP si ritrae bordi delle celle non &egrave; noto. Abbiamo cercato di determinare se attivazione di chimerico, solubile adenil ciclasi I / II (sACI/II) riorganizza oppure microtubuli periferico dell&#39;actina. Le cellule endoteliali erano stabile transfected con verde fluorescente con etichetta della proteina alfa-tubulina o beta-actina e quindi infettate con adenovirus esprimere sACI/II. La forskolina, che stimola sia l&#39;adenilil transmembrana espressa in modo endogeno cyclases e sACI/II, indotta da retrazione delle cellule accompagnata dalla riorganizzazione dei microtubuli periferici. Tuttavia, corticale filamentose actina (f-actina) non ha fatto riorganizzare in fibre di stress, e fosforilazione 20-luce-catena della miosina &egrave; stata diminuita. Isoproterenol, che attiva adenilil endogeno cyclases ma non attivare sACI/II, non ha indotto le lacune delle cellule endoteliali e non influenzare la architettura microtubule o f-actina. Cos&igrave;, sACI/II genera un segnale di campeggio che riorganizza i microtubuli e induce la retrazione delle cellule, senza indurre fibre di stress di f-actina. Questi risultati illustrano la formazione di cellule endoteliali spacco pu&ograve; procedere senza formazione di f-actina stress fibra che forniscono informazioni meccanicistiche come batterico tossine di adenil ciclasi riorganizzare il citoscheletro per indurre la cellula di arrotondamento.

Smontaggio di solubile adenilil ciclasi dipendente microtubule rivela un nuovo meccanismo di retrazione delle cellule endoteliali.

&#x30B7;&#x30E5;&#x30FC;&#x30C9;&#x30E2;&#x30CA;&#x30B9;&#x7DD1;&#x81BF;&#x83CC; exoY &#x306A;&#x3069;&#x306E;&#x53EF;&#x6EB6;&#x6027;&#x30A2;&#x30C7;&#x30CB;&#x30EB;&#x9178;&#x30B7;&#x30AF;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x6BD2;&#x7D20;&#x306F;&#x3001;&#x30BB;&#x30EB;&#x306E;&#x7F6B;&#x7DDA;&#x3092;&#x30EA;&#x30C8;&#x30E9;&#x30AF;&#x30C8; &#x30AD;&#x30E3;&#x30F3;&#x30D7; &#x30D7;&#x30FC;&#x30EB;&#x3092;&#x751F;&#x6210;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x305F;&#x3060;&#x3057;&#x3001;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x3053;&#x306E;&#x30AD;&#x30E3;&#x30F3;&#x30D7;&#x306E;&#x4FE1;&#x53F7;&#x30BB;&#x30EB;&#x7F6B;&#x7DDA;&#x30EA;&#x30C8;&#x30E9;&#x30AF;&#x30C8;&#x7D30;&#x80DE;&#x9AA8;&#x683C;&#x306E;&#x57FA;&#x790E;&#x306F;&#x77E5;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x3092;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x3057;&#x3088;&#x3046;&#x3068;&#x3059;&#x308B;&#x304B;&#x3069;&#x3046;&#x304B;&#x30AD;&#x30E1;&#x30E9;, &#x53EF;&#x6EB6;&#x6027;&#x30A2;&#x30C7;&#x30CB;&#x30EA;&#x30EB;&#x30B7;&#x30AF;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x79C1;&#x306F;/(sACI/II) &#x5FAE;&#x5C0F;&#x7BA1;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x672B;&#x68A2;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x518D;&#x7DE8;&#x6210;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x5B89;&#x5B9A;&#x7DD1;&#x8272;&#x86CD;&#x5149;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x6A19;&#x8B58;&#x306E;&#x30A2;&#x30EB;&#x30D5;&#x30A1; &#x30C1;&#x30E5;&#x30FC;&#x30D6;&#x30EA;&#x30F3;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x30D9;&#x30FC;&#x30BF; &#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x3057;&#x3001;[sACI/II &#x3092;&#x8868;&#x73FE;&#x3059;&#x308B;&#x30A2;&#x30C7;&#x30CE; &#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306B;&#x611F;&#x67D3;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x3002;&#x5185;&#x751F;&#x306B;&#x8868;&#x73FE;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x819C;&#x8CAB;&#x901A;&#x30B7;&#x30AF;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x3068; sACI/II &#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x3092;&#x523A;&#x6FC0;&#x3057;&#x3001;&#x30D5;&#x30A9;&#x30EB;&#x30B9;&#x30B3;&#x30EA;&#x30F3;&#x5468;&#x8FBA;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x7BA1;&#x306E;&#x518D;&#x69CB;&#x6210;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x3092;&#x4F34;&#x3046;&#x7D30;&#x80DE;&#x53CE;&#x7E2E;&#x3092;&#x8A98;&#x767A;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;&#x76AE;&#x8CEA;&#x306E;&#x7E4A;&#x7DAD;&#x72B6;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3; (f &#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;) &#x30B9;&#x30C8;&#x30EC;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A1;&#x30A4;&#x30D0;&#x30FC;&#x306B;&#x518D;&#x7DE8;&#x6210;&#x306F;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3067;&#x3057;&#x305F;&#x3057;&#x3001;&#x30DF;&#x30AA;&#x30B7;&#x30F3;&#x306E;&#x5149;&#x30C1;&#x30A7;&#x30FC;&#x30F3; 20 &#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316;&#x304C;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x5185;&#x56E0;&#x6027;&#x30B7;&#x30AF;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x3092;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x306B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x304C;&#x3001;sACI/II &#x306F;&#x767A;&#x52D5;&#x3057;&#x306A;&#x3044;, &#x30A4;&#x30BD;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30EC;&#x30CE;&#x30FC;&#x30EB;&#x5185;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x30AE;&#x30E3;&#x30C3;&#x30D7;&#x306F;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3055;&#x308C;&#x306A;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3057;&#x3001;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x7BA1;&#x307E;&#x305F;&#x306F; f &#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x306E;&#x30A2;&#x30FC;&#x30AD;&#x30C6;&#x30AF;&#x30C1;&#x30E3;&#x306B;&#x5F71;&#x97FF;&#x3057;&#x306A;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;sACI/II &#x306F;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x7BA1;&#x306E;&#x518D;&#x69CB;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x3001;f &#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3; &#x30B9;&#x30C8;&#x30EC;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A1;&#x30A4;&#x30D0;&#x30FC;&#x306E;&#x8A98;&#x5C0E;&#x306A;&#x3057;&#x30BB;&#x30EB;&#x64A4;&#x56DE;&#x3092;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3059;&#x308B; cAMP &#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x3092;&#x751F;&#x6210;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x30AE;&#x30E3;&#x30C3;&#x30D7;&#x5F62;&#x6210;&#x304C; f &#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3; &#x30B9;&#x30C8;&#x30EC;&#x30B9;&#x7E4A;&#x7DAD;&#x5F62;&#x6210;&#x306A;&#x3057;&#x7D9A;&#x884C;&#x3067;&#x304D;&#x3069;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x7D30;&#x83CC;&#x306E;&#x30A2;&#x30C7;&#x30CB;&#x30EB;&#x9178;&#x30B7;&#x30AF;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x6BD2;&#x7D20;&#x306E;&#x6A5F;&#x68B0;&#x7684;&#x306A;&#x6D1E;&#x5BDF;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x8ABF;&#x67FB;&#x7D50;&#x679C;&#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x30BB;&#x30EB;&#x306E;&#x4E38;&#x3081;&#x3092;&#x8A98;&#x767A;&#x3059;&#x308B;&#x7D30;&#x80DE;&#x9AA8;&#x683C;&#x518D;&#x7DE8;&#x6210;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x53EF;&#x6EB6;&#x6027;&#x30A2;&#x30C7;&#x30CB;&#x30EB;&#x9178;&#x30B7;&#x30AF;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x4F9D;&#x5B58;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x7BA1;&#x5206;&#x89E3;&#x5185;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x53CE;&#x7E2E;&#x306E;&#x65B0;&#x898F;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#xB179; &#xB18D; &#xADE0; exoY &#xAC19;&#xC740; &#xC218;&#xC6A9; &#xC131; adenylyl cyclase &#xB3C5; &#xC18C; &#xC0DD;&#xC131; &#xC140; &#xD14C;&#xB450;&#xB9AC; &#xB9AC;&#xD2B8;&#xB799;&#xD2B8; &#xCEA0;&#xD504; &#xC218;&#xC601;&#xC7A5;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;,&#xC774; &#xCEA0;&#xD504; &#xC2E0;&#xD638;&#xB294; &#xC140; &#xD14C;&#xB450;&#xB9AC; &#xB9AC;&#xD2B8;&#xB799;&#xD2B8; cytoskeletal &#xAE30;&#xC900;&#xC73C;&#xB85C; &#xC54C;&#xB824;&#xC838; &#xC788;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xACB0;&#xC815; &#xD558;&#xACE0;&#xC790; &#xC5EC;&#xBD80; chimeric, &#xC218;&#xC6A9; &#xC131; adenylyl cyclase&#xC758; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xB098; microtubules &#xB610;&#xB294; &#xC8FC;&#xBCC0; &#xB9D0;&#xB77C; &#xB2E4;&#xC2DC; &#xAD6C;&#xC131; &#xD558;&#xB294; 2 &#xCC28; (sACI/II) /. &#xB0B4; &#xD53C; &#xC138;&#xD3EC; &#xB179;&#xC0C9; &#xD615;&#xAD11; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xD45C;&#xC2DC; &#xB41C; &#xC54C;&#xD30C;-tubulin &#xB610;&#xB294; &#xBCA0;&#xD0C0; &#xB9D0;&#xB77C; &#xD398; &#xACC4;&#xC18D;&#xC801; &#xC788;&#xC5C8;&#xACE0; sACI/II&#xB97C; &#xD45C;&#xD604; &#xD558;&#xB294; &#xC544; &#xB370; &#xB178; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xC5D0; &#xAC10;&#xC5FC;. Endogenously &#xD45C;&#xD604;&#xB41C; &#xB9C9; &#xD6A1;&#xB2E8; adenylyl cyclases &#xBC0F; sACI/II &#xC790;&#xADF9; Forskolin &#xC720;&#xBC1C; &#xC140; &#xCCA0;&#xD68C; &#xC8FC;&#xBCC0; microtubules &#xAC1C;&#xD3B8; &#xB3D9;&#xD589;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, &#xB300;&#xB1CC; &#xD53C; &#xC9C8;&#xC758; filamentous-&#xB9D0;&#xB77C; (f-&#xB9D0;&#xB77C;) &#xC2A4;&#xD2B8;&#xB808;&#xC2A4; &#xC12C;&#xC720;&#xC5D0; &#xAC1C;&#xD3B8; &#xB418;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC558;&#xB2E4;&#xC640; myosin &#xBE5B;-&#xCCB4;&#xC778;-20 &#xC778; &#xC0B0;&#xD654; &#xAC10;&#xC18C; &#xD588;&#xB2E4;. Isoproterenol &#xC0DD; adenylyl cyclases&#xC744; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; sACI/II&#xC744; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;, &#xB0B4; &#xD53C; &#xC138;&#xD3EC; &#xAC04;&#xACA9;&#xC744; &#xC720;&#xB3C4; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC558;&#xB2E4; &#xACE0; microtubule &#xB610;&#xB294; f &#xB9D0;&#xB77C; &#xC544;&#xD0A4;&#xD14D;&#xCC98;&#xC5D0; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xC8FC;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC558;&#xB2E4;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C;, sACI/II microtubules&#xC5D0;&#xC11C; &#xB2E4;&#xC2DC; &#xAD6C;&#xC131; &#xD558; &#xACE0; f-&#xB9D0;&#xB77C; &#xC2A4;&#xD2B8;&#xB808;&#xC2A4; &#xC12C;&#xC720; &#xC720;&#xB3C4; &#xC5C6;&#xC774; &#xC140; &#xCCA0;&#xD68C;&#xB97C; &#xC720;&#xB3C4; &#xD558;&#xB294; &#xCEA0;&#xD504; &#xC2E0;&#xD638;&#xB97C; &#xC0DD;&#xC131; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xACB0;&#xACFC; &#xC124;&#xBA85; &#xB0B4; &#xD53C; &#xC140; &#xAC2D; &#xD615;&#xC131; &#xC218; f &#xB9D0;&#xB77C; &#xC2A4;&#xD2B8;&#xB808;&#xC2A4; &#xC12C;&#xC720; &#xD615;&#xC131; &#xC5C6;&#xC774; &#xC9C4;&#xD589; &#xD558; &#xACE0; &#xAE30;&#xACC4; &#xB860; &#xC801;&#xC778; &#xD1B5;&#xCC30;&#xB825; &#xC81C;&#xACF5; &#xD558;&#xB294; &#xAC83;&#xC740; &#xC5B4;&#xB5BB;&#xAC8C; &#xC138;&#xADE0; adenylyl cyclase &#xB3C5; &#xC18C; &#xC140; &#xBC18;&#xC62C;&#xB9BC; &#xC720;&#xB3C4; cytoskeleton &#xC7AC;&#xAD6C;&#xC131;.

&#xC218;&#xC6A9; &#xC131; adenylyl cyclase &#xC885;&#xC18D; microtubule &#xD574;&#xCCB4; &#xCCA0;&#xD68C; &#xB0B4; &#xD53C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC900;&#xB2E4;.

Las toxinas de ciclasa soluble adenylyl, como Pseudomonas aeruginosa exoY, generan una campo piscina que se retrae de bordes de celda. Sin embargo, se desconoce la base citoesqueleto por que esta se&ntilde;al de campo retrae bordes de celda. Intentamos determinar si activaci&oacute;n de cyclase del adenylyl quim&eacute;rica, soluble I / II (sACI/II) reorganiza los microt&uacute;bulos o actina perif&eacute;rica. Las c&eacute;lulas endoteliales se estable transfectadas con verde fluorescente marcado con la prote&iacute;na alfa-tubulina o beta-actina y luego infectadas con adenovirus para expresar sACI/II. La forskoline, que estimula la cyclases end&oacute;geno expresado adenylyl transmembrana y el sACI/II, inducida por retracci&oacute;n celular acompa&ntilde;ado por la reorganizaci&oacute;n de microt&uacute;bulos perif&eacute;ricos. Sin embargo, cortical filamentosos-actina (f-actina) no reorganizar en fibras de estr&eacute;s, y disminuy&oacute; la fosforilaci&oacute;n de luz-cadena-20 de miosina. Isoproterenol, que activa cyclases end&oacute;geno adenylyl pero no activan sACI/II, no indujo boquetes de la c&eacute;lula endotelial y no influy&oacute; en la arquitectura de microt&uacute;bulos o f-actina. As&iacute;, sACI/II genera una se&ntilde;al de campo que reorganiza los microt&uacute;bulos e induce la contracci&oacute;n de la c&eacute;lula, sin inducir fibras de estr&eacute;s f-actina. Estos resultados ilustran que formaci&oacute;n del boquete de la c&eacute;lula endotelial puede proceder sin la formaci&oacute;n de la fibra de f-actina estr&eacute;s y proporcionar la penetraci&oacute;n mecanicista c&oacute;mo bacteriana toxinas de adenylyl cyclase reorganizar el citoesqueleto para inducir el redondeo de las c&eacute;lulas.

Desmontaje de microt&uacute;bulos ciclasa-dependiente del adenylyl soluble revela un nuevo mecanismo de retracci&oacute;n de la c&eacute;lula endotelial.

&#x4F53;&#x7D30;&#x80DE;&#x7531;&#x6765;&#x306E;&#x8A98;&#x5C0E;&#x591A;&#x80FD;&#x6027;&#x5E79;&#xFF08;iPS&#xFF09;&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x3001;&#x7D44;&#x7E54;&#x306E;&#x524D;&#x99C6;&#x4F53;&#x306E;&#x65B0;&#x898F;&#x518D;&#x751F;&#x53EF;&#x80FD;&#x30A8;&#x30CD;&#x30EB;&#x30AE;&#x30FC;&#x6E90;&#x3092;&#x8868;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002; iPS&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x96FB;&#x4F4D;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x7CD6;&#x5C3F;&#x75C5;&#x3001;&#x810A;&#x9AC4;&#x640D;&#x50B7;&#x3001;&#x5FC3;&#x81D3;&#x8840;&#x7BA1;&#x75BE;&#x60A3;&#x3001;&#x795E;&#x7D4C;&#x5909;&#x6027;&#x75BE;&#x60A3;&#x306A;&#x3069;&#x306E;&#x75C5;&#x6C17;&#x306E;&#x6CBB;&#x7642;&#x3084;&#x6CBB;&#x7652;&#x3092;&#x4FC3;&#x9032;&#x3057;&#x3001;&#x30D2;&#x30C8;&#x80DA;&#x6027;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x3082;&#x306E;&#x3068;&#x5C11;&#x306A;&#x304F;&#x3068;&#x3082;&#x540C;&#x7B49;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3068;&#x8003;&#x3048;&#x3089;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x304C;&#x3001;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x306A;&#x5229;&#x70B9;&#x3068;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x305D;&#x3046;&#x3067;&#x306A;&#x3051;&#x308C;&#x3070;&#x540C;&#x7A2E;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x30D9;&#x30FC;&#x30B9;&#x306E;&#x6CBB;&#x7642;&#x3092;&#x5236;&#x9650;&#x3059;&#x308B;&#x9069;&#x5FDC;&#x514D;&#x75AB;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3092;&#x56DE;&#x907F;&#x3002;&#x81E8;&#x5E8A;&#x5206;&#x91CE;&#x3067;&#x3053;&#x306E;&#x6280;&#x8853;&#x306E;&#x666E;&#x53CA;&#x306B;&#x969C;&#x5BB3;&#x7269;&#x3092;&#x5F37;&#x8ABF;&#x3057;&#x306A;&#x304C;&#x3089;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x30EC;&#x30D3;&#x30E5;&#x30FC;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x591A;&#x80FD;&#x6027;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3068;&#x5206;&#x5316;&#x3057;&#x305F;&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x751F;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;iPS&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5229;&#x7528;&#x306E;&#x6700;&#x8FD1;&#x306E;&#x9032;&#x6B69;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x8AAC;&#x660E;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x8A98;&#x5C0E;&#x591A;&#x80FD;&#x6027;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#xFF1A;&#x30D7;&#x30E9;&#x30A4;&#x30E0;&#x30BF;&#x30A4;&#x30E0;&#x306E;&#x7528;&#x610F;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x3066;&#x3044;&#x306A;&#x3044;&#xFF1F;

&#x4ECE;&#x4F53;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x591A;&#x80FD;&#x5E72; (iPS) &#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4EE3;&#x8868;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x524D;&#x4F53;&#x65B0;&#x578B;&#x53EF;&#x518D;&#x751F;&#x80FD;&#x6E90;&#x3002;IPS &#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x6F5C;&#x529B;&#x88AB;&#x8BA4;&#x4E3A;&#x662F;&#x81F3;&#x5C11;&#x76F8;&#x5F53;&#x4E8E;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x80DA;&#x80CE;&#x7684;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x4FC3;&#x8FDB;&#x6CBB;&#x7597;&#x6216;&#x6CBB;&#x6108;&#x7684;&#x75BE;&#x75C5;&#xFF0C;&#x5982;&#x7CD6;&#x5C3F;&#x75C5;&#x3001; &#x810A;&#x9AD3;&#x635F;&#x4F24;&#x3001; &#x5FC3;&#x8840;&#x7BA1;&#x75BE;&#x75C5;&#x548C;&#x795E;&#x7ECF;&#x9000;&#x884C;&#x6027;&#x75BE;&#x75C5;&#xFF0C;&#x4F46;&#x6709;&#x53EF;&#x80FD;&#x6DFB;&#x52A0;&#x8EB2;&#x907F;&#x81EA;&#x9002;&#x5E94;&#x7684;&#x514D;&#x75AB;&#x53CD;&#x5E94;&#xFF0C;&#x5426;&#x5219;&#x9650;&#x5236;&#x4E86;&#x540C;&#x79CD;&#x5F02;&#x4F53;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7597;&#x6CD5;&#x7684;&#x597D;&#x5904;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E00;&#x5BA1;&#x67E5;&#x8BA8;&#x8BBA;&#x8BC4;&#x9009;&#x611F;&#x5E94;&#x4E0E;&#x4F7F;&#x7528; iPS &#x7EC6;&#x80DE;&#x4EA7;&#x751F;&#x5206;&#x5316;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x540C;&#x65F6;&#x5F3A;&#x8C03;&#x8DEF;&#x969C;&#x5BF9;&#x8FD9;&#x9879;&#x6280;&#x672F;&#x5728;&#x4E34;&#x5E8A;&#x4E0A;&#x5E7F;&#x6CDB;&#x4F7F;&#x7528;&#x7684;&#x6700;&#x65B0;&#x8FDB;&#x5C55;&#x3002;

&#x8BF1;&#x5BFC;&#x591A;&#x80FD;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF1A; &#x4E0D;&#x5B8C;&#x5168;&#x51C6;&#x5907;&#x9EC4;&#x91D1;&#x65F6;&#x95F4;&#x5417;&#xFF1F;

Inducible pluripotent stem (iPS) cells derived from somatic cells represent a novel renewable source of tissue precursors. The potential of iPS cells is considered to be at least equivalent to that of human embryonic stem cells, facilitating the treatment or cure of diseases such as diabetes mellitus, spinal cord injuries, cardiovascular disease, and neurodegenerative diseases, but with the potential added benefit of evading the adaptive immune response that otherwise limits allogeneic cell-based therapies. This review discusses recent advances in pluripotency induction and the use of iPS cells to produce differentiated cells, while highlighting roadblocks to the widespread use of this technology in the clinical arena.

Inducible pluripotent stem cells: not quite ready for prime time?

Inductibles souches pluripotentes (iPS) des cellules d&#xE9;riv&#xE9;es de cellules somatiques repr&#xE9;sentent une nouvelle source renouvelable de pr&#xE9;curseurs des tissus. Le potentiel des cellules iPS est consid&#xE9;r&#xE9; comme au moins &#xE9;quivalente &#xE0; celle de cellules souches embryonnaires humaines, ce qui facilite le traitement ou la gu&#xE9;rison de maladies comme le diab&#xE8;te sucr&#xE9;, les blessures de la moelle &#xE9;pini&#xE8;re, les maladies cardiovasculaires et les maladies neurod&#xE9;g&#xE9;n&#xE9;ratives, mais avec l&#x26;#39;avantage suppl&#xE9;mentaire de potentiel &#xE9;chapper &#xE0; la r&#xE9;ponse immunitaire adaptative qui limite par ailleurs allog&#xE9;niques des th&#xE9;rapies cellulaires. Cette revue discute des progr&#xE8;s r&#xE9;cents dans l&#x26;#39;induction de pluripotence et l&#x26;#39;utilisation de cellules iPS pour produire des cellules diff&#xE9;renci&#xE9;es, tout en soulignant les obstacles &#xE0; l&#x26;#39;utilisation g&#xE9;n&#xE9;ralis&#xE9;e de cette technologie dans le domaine clinique.

Les cellules souches pluripotentes humaines: inductibles pas encore pr&#xEA;t pour Prime Time?

Durch Induktion pluripotenten Stammzellen (iPS) abgeleitet von somatischen Zellen repr&auml;sentieren eine neuartige erneuerbare Quelle von Gewebe-Vorstufen. Das Potenzial der iPS-Zellen gilt als zumindest gleichwertig, die von menschlichen embryonalen Stammzellen, Erleichterung der Behandlung oder Heilung von Krankheiten wie Diabetes Mellitus, R&uuml;ckenmarksverletzungen, Herz-Kreislauf-Erkrankungen und Neurodegenerative Krankheiten, aber mit dem Potential hinzugef&uuml;gt Vorteil der Umgehung der adaptiven Immunantwort, die ansonsten allogene zellbasierte Therapien begrenzt. Diesen Bericht erl&auml;utert die j&uuml;ngsten Fortschritte in der Pluripotenz Induktion und die Verwendung von iPS-Zellen, differenzierte Zellen zu produzieren, w&auml;hrend Hervorhebung H&uuml;rden f&uuml;r den weit verbreiteten Einsatz dieser Technologie in den klinischen Bereich.

Durch Induktion pluripotenten Stammzellen: nicht ganz bereit f&uuml;r Prime-Time?

Inducibile pluripotenti staminali (iPS) derivati da cellule somatiche rappresentano una fonte rinnovabile romanzo dei precursori del tessuto. Il potenziale delle cellule iPS &egrave; considerato almeno equivalente a quello delle cellule staminali embrionali umane, facilitando il trattamento o la cura di malattie come il diabete mellito, lesioni del midollo spinale, malattie cardiovascolari e malattie neurodegenerative, ma con il potenziale beneficio di eludere la risposta immunitaria adattativa che altrimenti limita terapie basate sulle cellule allogeniche ha aggiunto. Questa recensione discute i recenti progressi nell&#39;induzione di pluripotenza e l&#39;uso di cellule iPS a produrre cellule differenziate, pur evidenziando i blocchi stradali per l&#39;uso diffuso di questa tecnologia in ambito clinico.

Cellule staminali pluripotenti inducibili: non ancora pronto per il primo tempo?

&#xC720;&#xB3C4;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xB9CC;&#xB2A5; &#xC904;&#xAE30; (iPS) &#xC138;&#xD3EC; &#xCCB4;&#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD30C;&#xC0DD; &#xB41C; &#xC870;&#xC9C1;&#xC758; &#xC120;&#xAD6C;&#xC790;&#xC758; &#xC18C;&#xC124; &#xC2E0; &#xC7AC;&#xC0DD; &#xC18C;&#xC2A4;&#xB97C; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0C5;&#xB2C8;&#xB2E4;. IPS &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xB825;&#xC744; &#xCE58;&#xB8CC; &#xB610;&#xB294; &#xB2F9;&#xB1E8;&#xBCD1; mellitus, &#xCC99;&#xC218; &#xBD80;&#xC0C1;, &#xC2EC;&#xD608; &#xAD00; &#xC9C8;&#xD658;, &#xC2E0;&#xACBD; &#xD1F4;&#xD589; &#xC131; &#xC9C8;&#xD658; &#xB4F1; &#xC9C8;&#xBCD1;&#xC758; &#xCE58;&#xB8CC;&#xB97C; &#xC6A9;&#xC774; &#xD558; &#xAC8C; &#xC778;&#xAC04; &#xBC30;&#xC544; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xCD5C;&#xC18C;&#xD55C; &#xB3D9;&#xB4F1;&#xD55C; &#xAC83;&#xC73C;&#xB85C; &#xAC04;&#xC8FC; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xB825;&#xACFC; &#xB2EC;&#xB9AC; &#xC81C;&#xD55C; allogeneic &#xC138;&#xD3EC; &#xAE30;&#xBC18; &#xC694;&#xBC95; &#xC801;&#xC751; &#xBA74;&#xC5ED; &#xBC18;&#xC751;&#xC744; &#xD68C;&#xD53C;&#xC758; &#xD61C;&#xD0DD;&#xC744; &#xCD94;&#xAC00; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xAC80;&#xD1A0; pluripotency &#xC720;&#xB3C4; &#xBC0F; &#xC784;&#xC0C1; &#xBD84;&#xC57C;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC774; &#xAE30;&#xC220; &#xAD11;&#xBC94;&#xC704; &#xD558; &#xAC8C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558;&#xB294; &#xBC29;&#xCC45;&#xC744; &#xAC15;&#xC870; &#xD558;&#xBA74;&#xC11C; &#xCC28;&#xBCC4;&#xD654; &#xB41C; &#xC140;&#xC744; iPS &#xC140;&#xC758; &#xC0AC;&#xC6A9;&#xC758; &#xCD5C;&#xADFC; &#xBC1C;&#xC804;&#xC744; &#xC124;&#xBA85; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC720;&#xB3C4;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xB9CC;&#xB2A5; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC;: &#xD558;&#xC9C0; &#xAF64; &#xD669;&#xAE08; &#xC2DC;&#xAC04;&#xB300;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC900;&#xBE44;&#xAC00;?

Inducibles madre pluripotentes (iPS) a las c&#xE9;lulas derivadas de c&#xE9;lulas som&#xE1;ticas representa una nueva fuente renovable de los precursores de los tejidos. El potencial de las c&#xE9;lulas iPS se considera que es al menos equivalente a la de c&#xE9;lulas madre embrionarias humanas, facilitando el tratamiento o curaci&#xF3;n de enfermedades como la diabetes mellitus, lesiones de m&#xE9;dula espinal, enfermedades cardiovasculares y las enfermedades neurodegenerativas, pero con el potencial beneficio adicional de evadir la respuesta inmune adaptativa que de otra manera limita alog&#xE9;nicos terapias basadas en c&#xE9;lulas. Esta revisi&#xF3;n describe los recientes avances en la inducci&#xF3;n de pluripotencia y la utilizaci&#xF3;n de c&#xE9;lulas iPS para producir c&#xE9;lulas diferenciadas, adem&#xE1;s de destacar los obst&#xE1;culos para el uso generalizado de esta tecnolog&#xED;a en el &#xE1;mbito cl&#xED;nico.

Las c&#xE9;lulas madre pluripotentes inducibles: No absolutamente listo para el prime time?

&#x51B7;&#x51BB;&#x4FDD;&#x5B58;&#x7684;&#x9020;&#x8840;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE; &#xFF08;&#x661F;&#xFF09; &#x548C;&#x9020;&#x8840;&#x7956;&#x7EC6;&#x80DE; (HPCs) &#x662F;&#x810A;&#x9AD3;&#x8840; (CB) &#x94F6;&#x884C;&#x548C;&#x79FB;&#x690D;&#x7684;&#x5173;&#x952E;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x8BC4;&#x4F30;&#x6062;&#x590D;&#x529F;&#x80FD;&#x7684;&#x9AD8;&#x6027;&#x80FD;&#x6DF7;&#x51DD;&#x571F;&#x8FBE; 23.5 &#x5E74;&#x76F8;&#x6BD4; CB &#x5355;&#x4F4D;&#x76F8;&#x540C;&#x7684; prefreeze &#x503C;&#x4E3A;&#x5355;&#x6838;&#x6216;&#x672A;&#x5206;&#x9694;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x6DF1;&#x4F4E;&#x6E29;&#x4FDD;&#x5B58;&#x3002;&#x9AD8;&#x6548;&#x6062;&#x590D; &#xFF08;80%-100%&#xFF09; &#x7C92;&#x7EC6;&#x80DE;-&#x5DE8;&#x566C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x548C;&#x8110;&#x8840;&#x591A;&#x5411;&#x7956;&#xFF0C;&#x663E;&#x7136;&#xFF0C;&#x867D;&#x7136;&#x4E00;&#x4E9B;&#x96C6;&#x5408;&#x4E86;&#x91CD;&#x73B0;&#x4F4E;&#x6062;&#x590D;&#x3002;&#x589E;&#x6B96;&#x6F5C;&#x80FD;&#xFF0C;&#x54CD;&#x5E94;&#x591A;&#x4E2A;&#x7EC6;&#x80DE;&#x56E0;&#x5B50;&#xFF0C;&#x548C; replating &#x7684; HPC &#x6B96;&#x6C11;&#x5730;&#x662F;&#x5E7F;&#x6CDB;&#x7684;&#x3002;CD34(+) &#x7EC6;&#x80DE;&#x5206;&#x79BB;&#x3001; &#x6DF1;&#x4F4E;&#x6E29;&#x4FDD;&#x5B58;&#x8FBE; 21 &#x5E74;&#x7684; CB &#x5728;&#x5C0F;&#x5B66;&#x548C;&#x4E2D;&#x5B66;&#x7684;&#x514D;&#x75AB;&#x7F3A;&#x9677;&#x5C0F;&#x9F20;&#x53CD;&#x6620;&#x7684;&#x957F;&#x671F;&#x91CD;&#x65B0;&#x586B;&#x5145;&#xFF0C;&#x6062;&#x590D;&#x4E86;&#x957F;&#x671F; (&ge; 6 &#x4E2A;&#x6708;) &#x5AC1;&#x63A5;&#x5F0F;&#x80FD;&#x529B;&#x81EA;&#x6211;&#x66F4;&#x65B0;&#x661F;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x6062;&#x590D;&#x529F;&#x80FD;&#x4E0A;&#x6EE1;&#x8DB3; CD4(+) &#x548C; CD8(+) T &#x6DCB;&#x5DF4;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x751F;&#x6210;&#x8868;&#x793A; CB &#x751F;&#x7269;&#x5B66;&#x548C;&#x94F6;&#x884C;&#x4E1A;&#x52A1;&#x76F8;&#x5173;&#x7684;&#x6240;&#x6709; 3 &#x80DA;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8C31;&#x7CFB;&#x4F53;&#x5916;&#x548C;&#x4F53;&#x5185;&#xFF0C;&#x5E76;&#x68C0;&#x6D4B;&#x5230;&#x9AD8;&#x589E;&#x6B96;&#x6027;&#x5185;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x96C6;&#x843D;&#x5F62;&#x6210;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x7ED3;&#x679C;&#x5206;&#x5316;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x591A;&#x80FD;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE; (iPS)&#x3002;

&#x9020;&#x8840;&#x5E72;/&#x7956;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x591A;&#x80FD;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x4E00;&#x4EE3;&#x548C;&#x9694;&#x79BB;&#x7684;&#x5185;&#x76AE;&#x7956;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4ECE; 21 &#x81F3; 23.5 &#x5E74;&#x6DF1;&#x4F4E;&#x6E29;&#x4FDD;&#x5B58;&#x8110;&#x5E26;&#x8840;&#x3002;

Cryopreservation of hematopoietic stem cells (HSCs) and hematopoietic progenitor cells (HPCs) is crucial for cord blood (CB) banking and transplantation. We evaluated recovery of functional HPC cryopreserved as mononuclear or unseparated cells for up to 23.5 years compared with prefreeze values of the same CB units. Highly efficient recovery (80%-100%) was apparent for granulocyte-macrophage and multipotential hematopoietic progenitors, although some collections had reproducible low recovery. Proliferative potential, response to multiple cytokines, and replating of HPC colonies was extensive. CD34(+) cells isolated from CB cryopreserved for up to 21 years had long-term (â‰¥ 6 month) engrafting capability in primary and secondary immunodeficient mice reflecting recovery of long-term repopulating, self-renewing HSCs. We recovered functionally responsive CD4(+) and CD8(+) T lymphocytes, generated induced pluripotent stem (iPS) cells with differentiation representing all 3 germ cell lineages in vitro and in vivo, and detected high proliferative endothelial colony forming cells, results of relevance to CB biology and banking.

Hematopoietic stem/progenitor cells, generation of induced pluripotent stem cells, and isolation of endothelial progenitors from 21- to 23.5-year cryopreserved cord blood.

Cryoconservation des cellules souches h&#xE9;matopo&#xEF;&#xE9;tiques (CSH) et les cellules prog&#xE9;nitrices h&#xE9;matopo&#xEF;&#xE9;tiques (HPC) est crucial pour le sang de cordon (CB) services bancaires et la transplantation. Nous avons &#xE9;valu&#xE9; la r&#xE9;cup&#xE9;ration fonctionnelle du HPC cryoconserv&#xE9;s que les cellules mononucl&#xE9;aires ou non s&#xE9;par&#xE9; pour un maximum de 23,5 ans par rapport aux valeurs de prefreeze les m&#xEA;mes unit&#xE9;s CB. De r&#xE9;cup&#xE9;ration tr&#xE8;s efficace (80% -100%) &#xE9;tait &#xE9;vident pour les granulocytes-macrophages et des prog&#xE9;niteurs h&#xE9;matopo&#xEF;&#xE9;tiques multipotentes, bien que certaines collections ont reproductible faible r&#xE9;cup&#xE9;ration. Potentiel prolif&#xE9;ratif, r&#xE9;ponse &#xE0; des cytokines multiples, et des colonies replacage HPC &#xE9;tait vaste. CD34 (+) des cellules isol&#xE9;es &#xE0; partir de CB cryoconserv&#xE9;s pour un maximum de 21 ans avait &#xE0; long terme (&#x2265; 6 mois) greffer la capacit&#xE9; dans l&#x26;#39;enseignement primaire et secondaire des souris immunod&#xE9;ficientes qui refl&#xE8;te la reprise &#xE0; long terme repeuplement, l&#x26;#39;auto-renouvellement des CSH. Nous avons r&#xE9;cup&#xE9;r&#xE9; fonctionnellement CD4 sensibles (+) et CD8 (+) des lymphocytes T, cellules souches pluripotentes induites g&#xE9;n&#xE9;r&#xE9; (iPS) avec une diff&#xE9;renciation qui repr&#xE9;sente tous les 3 lign&#xE9;es cellulaires germinales in vitro et in vivo, et d&#xE9;tect&#xE9; de prolif&#xE9;ration &#xE9;lev&#xE9; des cellules endoth&#xE9;liales qui forment la colonie, les r&#xE9;sultats de la pertinence &#xE0; la biologie et de la banque CB.

H&#xE9;matopo&#xEF;&#xE9;tiques cellules souches / prog&#xE9;nitrices, la production de cellules souches pluripotentes induites et d&#x26;#39;isolement des prog&#xE9;niteurs endoth&#xE9;liaux de 21 - &#xE0; 23,5 ans de sang de cordon cryoconserv&#xE9;s

Kryokonservierung von h&auml;matopoetischen Stammzellen (HSCs) und h&auml;matopoetischen Vorl&auml;uferzellen (HPCs) ist entscheidend f&uuml;r die Schnur Blut (CB) Bank- und Transplantation. Wir evaluieren die Wiederherstellung des funktionellen HPC kryokonserviert als mononukle&auml;ren oder unstrukturierte Zellen bis zu 23,5 Jahre verglichen mit den prefreeze Werten der gleichen CB-Einheiten. Hoch effiziente R&uuml;ckgewinnung (80-100 %) zeigte sich f&uuml;r Granulozyten-Makrophagen und multipotenzielle h&auml;matopoetischen Vorl&auml;uferzellen, obwohl einige Auflistungen reproduzierbare geringe Erholung hatte. Proliferative Potential, bedingt durch mehrere Zytokine und replating der HPC-Kolonien war umfangreich. CD34(+) Zellen von CB, die bis zu 21 Jahre kryokonserviert isoliert hatte langfristige engrafting (&ge; 6 Monate)-F&auml;higkeit in prim&auml;re und sekund&auml;re immungeschw&auml;chte M&auml;use, die die Wiederherstellung der langfristigen repopulating, selbstverl&auml;ngerndes HSCs. Wir erholt funktional reagieren CD4(+) und CD8(+) T-Lymphozyten, generiert induzierten pluripotenten Stammzellen (iPS) mit Differenzierung, alle 3 Keimzellen &Uuml;bertragungslinien in vitro und in vivo, und erkannte hohe proliferative endothelial Kolonie bilden Zellen, Ergebnisse der Relevanz f&uuml;r CB-Biologie und Banking darstellt.

H&auml;matopoetische Stammzellen/Vorl&auml;uferzellen, kryokonserviert Generation von induzierten pluripotenten Stammzellen und Isolierung von endothelialen Vorl&auml;uferzellen von 21 bis 23,5 Jahre Nabelschnurblut.

Crioconservazione di cellule staminali ematopoietiche (HSCs) e cellule progenitrici ematopoietiche (HPC) &egrave; cruciale per il trapianto e il sangue (CB) cordone bancario. Abbiamo valutato il recupero funzionale HPC criopreservati come cellule mononucleate o selle fino a 23,5 anni rispetto ai valori prefreeze delle stesse unit&agrave; di CB. Recupero altamente efficiente (80-100%) era evidente per granulociti-macrofagi e progenitori ematopoietici multipotenziale, sebbene alcune collezioni avevano recupero basso riproducibile. Potenziale proliferativo, risposta a citochine multiple e replating delle colonie HPC &egrave; stata estesa. CD34(+) cellule isolate da CB criopreservati fino a 21 anni ha avuto la capacit&agrave; di attecchimento (&ge; 6 mesi) a lungo termine in topi immunodeficienti primari e secondari che riflettono il recupero del ripopolamento a lungo termine, direttamente HSCs. Abbiamo recuperato funzionalmente reattivo CD4(+) e cellule T linfociti, generati indotta da cellule pluripotenti staminali (iPS) con differenziazione che rappresentano tutti i 3 risultati lignaggi delle cellule germinali in vitro e in vivo e cellule formanti colonia endoteliali proliferativa elevata riconosciuto, rilevante per la biologia di CB e bancario.

Cellule staminali/progenitrici ematopoietiche, generazione di cellule staminali pluripotenti indotte e l&#39;isolamento dei progenitori endoteliali da 21 a 23,5-anno criopreservati sangue del cordone ombelicale.

&#x9020;&#x8840;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#xFF08;HSC&#xFF09;&#x3068;&#x9020;&#x8840;&#x524D;&#x99C6;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x51CD;&#x7D50;&#x4FDD;&#x5B58;&#x306F;&#x3001;&#xFF08;HPCS&#xFF09;&#x81CD;&#x5E2F;&#x8840;&#xFF08;CB&#xFF09;&#x9280;&#x884C;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x79FB;&#x690D;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x6A5F;&#x80FD;&#x7684;&#x306A;HPC&#x306E;&#x56DE;&#x5FA9;&#x3092;&#x8A55;&#x4FA1;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x540C;&#x3058;CB&#x30E6;&#x30CB;&#x30C3;&#x30C8;&#x306E;prefreeze&#x5024;&#x3068;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3057;&#x3066;23.5&#x5E74;&#x307E;&#x3067;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5358;&#x6838;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x672A;&#x5206;&#x96E2;&#x7D30;&#x80DE;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x51CD;&#x7D50;&#x4FDD;&#x5B58;&#x3002;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x30B3;&#x30EC;&#x30AF;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x304C;&#x3001;&#x518D;&#x73FE;&#x6027;&#x306E;&#x4F4E;&#x3044;&#x56DE;&#x5FA9;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x3082;&#x306E;&#x306E;&#x3001;&#x975E;&#x5E38;&#x306B;&#x52B9;&#x7387;&#x7684;&#x306A;&#x56DE;&#x53CE;&#xFF08;80&#xFF05;-100&#xFF05;&#xFF09;&#x306F;&#x3001;&#x9846;&#x7C92;&#x7403; - &#x30DE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8;&#x3068;&#x591A;&#x80FD;&#x6027;&#x9020;&#x8840;&#x524D;&#x99C6;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x3067;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x3002; HPC&#x30B3;&#x30ED;&#x30CB;&#x30FC;&#x306E;&#x5897;&#x6B96;&#x80FD;&#x306F;&#x3001;&#x8907;&#x6570;&#x306E;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x30AB;&#x30A4;&#x30F3;&#x306B;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3057;&#x3001;&#x64AD;&#x7A2E;&#x306F;&#x5E83;&#x7BC4;&#x56F2;&#x3067;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x3002; 21&#x6B73;&#x307E;&#x3067;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x51CD;&#x7D50;&#x4FDD;&#x5B58;CD34&#xFF08;+&#xFF09;CB&#x304B;&#x3089;&#x5358;&#x96E2;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x3001;&#x9577;&#x671F;&#x7684;&#x306A;&#x518D;&#x5897;&#x6B96;&#x3001;&#x81EA;&#x5DF1;&#x8907;&#x88FD;&#x9020;&#x8840;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x56DE;&#x5FA9;&#x3092;&#x53CD;&#x6620;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x30D7;&#x30E9;&#x30A4;&#x30DE;&#x30EA;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30BB;&#x30AB;&#x30F3;&#x30C0;&#x30EA;&#x514D;&#x75AB;&#x4E0D;&#x5168;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x9577;&#x671F;&#xFF08;&#x2265;6&#x30F6;&#x6708;&#xFF09;&#x79FB;&#x690D;&#x80FD;&#x529B;&#x3092;&#x6301;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x6A5F;&#x80FD;&#x7684;&#x306B;&#x53CD;&#x5FDC;&#x3059;&#x308B;CD4&#xFF08;+&#xFF09;&#x3068;CD8&#xFF08;+&#xFF09;T&#x30EA;&#x30F3;&#x30D1;&#x7403;&#x3092;&#x56DE;&#x53CE;&#x3057;&#x3001;in vitro&#x304A;&#x3088;&#x3073;in vivo&#x3067;&#x5168;3&#x751F;&#x6B96;&#x7D30;&#x80DE;&#x7CFB;&#x7D71;&#x3092;&#x8868;&#x3059;&#x5206;&#x5316;&#x8A98;&#x5C0E;&#x591A;&#x80FD;&#x6027;&#x5E79;&#xFF08;iPS&#xFF09;&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x751F;&#x6210;&#x3057;&#x3001;&#x9AD8;&#x5897;&#x6B96;&#x6027;&#x5185;&#x76AE;&#x30B3;&#x30ED;&#x30CB;&#x30FC;&#x5F62;&#x6210;&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x691C;&#x51FA;&#x3057;&#x3001;&#x95A2;&#x9023;&#x6027;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;CB&#x751F;&#x7269;&#x5B66;&#x3068;&#x9280;&#x884C;&#x3078;&#x3002;

&#x9020;&#x8840;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;/&#x524D;&#x99C6;&#x7D30;&#x80DE;&#x3001;&#x8A98;&#x5C0E;&#x591A;&#x80FD;&#x6027;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x751F;&#x6210;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;21&#x304B;&#x3089;&#x5185;&#x76AE;&#x524D;&#x99C6;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5206;&#x96E2; - &#x301C;23.5&#x5E74;&#x9593;&#x306E;&#x51CD;&#x7D50;&#x4FDD;&#x5B58;&#x81CD;&#x5E2F;&#x8840;

&#xC870; &#xD608; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC; (HSCs) &#xBC0F; &#xC870; &#xD608; &#xC870;&#xC0C1; &#xC138;&#xD3EC; (HPCs) cryopreservation&#xC740; &#xCF54;&#xB4DC; &#xD608;&#xC561; (CB) &#xC740;&#xD589; &#xBC0F; &#xC774;&#xC2DD;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC911;&#xC694; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xCD5C;&#xB300; 23.5 &#xB144; &#xB3D9;&#xC77C;&#xD55C; CB &#xB2E8;&#xC704;&#xC758; prefreeze &#xAC12;&#xC5D0; &#xBE44;&#xD574; &#xC11C; &#xB610;&#xB294; &#xAD6C;&#xBD84; &#xB418;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC740; &#xC140;&#xC73C;&#xB85C; cryopreserved &#xAE30;&#xB2A5; HPC&#xC758; &#xBCF5;&#xAD6C;&#xB97C; &#xD3C9;&#xAC00; &#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB9E4;&#xC6B0; &#xD6A8;&#xC728;&#xC801;&#xC778; &#xBCF5;&#xAD6C; (80%-100%)&#xB294; &#xBE44;&#xB85D; &#xC77C;&#xBD80; &#xCEEC;&#xB809;&#xC158;&#xC744; &#xC7AC;&#xD604;&#xD560; &#xC218; &#xB0AE;&#xC740; &#xBCF5;&#xAD6C; &#xD588;&#xB2E4; granulocyte macrophage&#xC640; multipotential &#xC870; &#xD608; progenitors&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xBA85;&#xBC31;&#xD55C;. &#xC99D;&#xC2DD; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xB825; &#xC5EC;&#xB7EC; cytokines &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; HPC &#xC2DD;&#xBBFC;&#xC9C0;&#xC758; replating&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC751;&#xB2F5; &#xAD11;&#xBC94;&#xC704; &#xD55C; &#xD588;&#xB2E4;. 21 &#xB144; &#xB3D9;&#xC548; cryopreserved CB&#xC5D0;&#xC11C; &#xBD84;&#xB9AC; &#xB41C; CD34(+) &#xC140; &#xC7A5;&#xAE30; (6 &#xAC1C;&#xC6D4; &#xC774;&#xC0C1;) engrafting &#xAE30;&#xB2A5; &#xCC28; &#xBC0F; 2 &#xCC28; immunodeficient &#xC950; &#xC7A5;&#xAE30; &#xB2E4;&#xC2DC; &#xCC44;&#xC6B0;&#xAE30;&#xC758; &#xBCF5;&#xAD6C;&#xB97C; &#xBC18;&#xC601; &#xD588;&#xB2E4; HSCs self-renewing. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xBC18;&#xC751; CD4(+) &#xBCF5;&#xAD6C; &#xBC0F; CD8(+) T &#xB9BC;&#xD504; &#xD1A8;, &#xC0DD;&#xC131; &#xB41C; CB &#xC0DD;&#xBB3C;&#xD559; &#xBC0F; &#xAE08;&#xC735; &#xAD00;&#xB828;&#xC758; &#xBAA8;&#xB4E0; 3 &#xC138;&#xADE0; &#xC138;&#xD3EC; &#xACC4;&#xBCF4; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC678; &#xBC0F; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC870;&#xAC74;, &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xAC10;&#xC9C0; &#xB41C; &#xB192;&#xC740; &#xC99D;&#xC2DD; &#xB0B4; &#xD53C; &#xC2DD;&#xBBFC;&#xC9C0; &#xD615;&#xC131; &#xC138;&#xD3EC;, &#xACB0;&#xACFC; &#xB300;&#xD45C; &#xD558;&#xB294; &#xCC28;&#xBCC4;&#xD654; &#xB41C; pluripotent &#xC904;&#xAE30; (iPS) &#xC138;&#xD3EC;&#xB97C; &#xC720;&#xB3C4;.

&#xC870; &#xD608; &#xC904;&#xAE30;/&#xBFCC;&#xB9AC; &#xC138;&#xD3EC;, &#xC720;&#xB3C4; &#xB9CC;&#xB2A5; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC0DD;&#xC131; &#xBC0F; &#xB0B4; &#xD53C; progenitors&#xC5D0;&#xC11C; 21-23.5-&#xB144;&#xC758; &#xC808;&#xC5F0; &#xCF54;&#xB4DC; &#xD608;&#xC561; cryopreserved.

La criopreservaci&#xF3;n de c&#xE9;lulas madre hematopoy&#xE9;ticas (HSC) y las c&#xE9;lulas progenitoras hematopoy&#xE9;ticas (HPC) es crucial para la sangre del cord&#xF3;n umbilical (CB) y el trasplante de la banca. Se evalu&#xF3; la recuperaci&#xF3;n funcional de HPC criopreservados como c&#xE9;lulas mononucleares o no separada de hasta 23,5 a&#xF1;os en comparaci&#xF3;n con los valores de las unidades prefreeze CB mismos. La recuperaci&#xF3;n de alta eficiencia (80% -100%) fue evidente para los progenitores hematopoy&#xE9;ticos de granulocitos y macr&#xF3;fagos y multipotenciales, aunque algunas colecciones, hubo una recuperaci&#xF3;n baja reproducible. Potencial de proliferaci&#xF3;n, la respuesta a m&#xFA;ltiples citocinas, y replating de las colonias de HPC fue extensa. CD34 (+) las c&#xE9;lulas aisladas de CB criopreservados durante un m&#xE1;ximo de 21 a&#xF1;os hab&#xED;a a largo plazo (&#x2265; 6 meses) la capacidad de injerto en ratones inmunodeficientes primarios y secundarios que reflejan la recuperaci&#xF3;n a largo plazo de repoblamiento, la renovaci&#xF3;n de auto-CMH. Se recuperaron funcionalmente responden CD4 (+) y CD8 (+) linfocitos T, generadas madre pluripotentes inducidas (iPS) con la diferenciaci&#xF3;n de las c&#xE9;lulas que representa los 3 linajes de c&#xE9;lulas germinales in vitro e in vivo, y se detectaron altos c&#xE9;lulas proliferativas endoteliales que forman colonias, los resultados de relevancia a la biolog&#xED;a CB y la banca.

Hematopoy&#xE9;ticas c&#xE9;lulas madre / progenitoras, la generaci&#xF3;n de c&#xE9;lulas madre pluripotentes inducidas, y el aislamiento de c&#xE9;lulas progenitoras endoteliales a partir del 21 - a 23.5 a&#xF1;os de sangre de cord&#xF3;n umbilical criopreservados

Nutan Prasain

Herman B Wells Center for Pediatric Research

Indiana University School of Medicine

Phenotypic and Functional Characterization of Endothelial Colony Forming Cells Derived from Human Umbilical Cord Blood

Nutan Prasain

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Indiana University School of Medicine

Phenotypic and Functional Characterization of Endothelial Colony Forming Cells Derived from Human Umbilical Cord Blood

Herman B Wells Center for Pediatric Research