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Quantitative High-throughput Single-cell Cytotoxicity Assay For T Cells

Cancer immunotherapy can harness the specificity of  immune response to target and eliminate tumors. Adoptive cell therapy (ACT)  based on the adoptive ...

University of Houston 

&#x63D0;&#x9AD8;&#x75AB;&#x82D7;&#x6548;&#x529B;&#x7684;&#x6218;&#x7565;&#x662F;&#x4ECD;&#x7136;&#x9700;&#x8981;&#xFF0C;&#x5C24;&#x5176;&#x662F;&#x6162;&#x6027;&#x75BE;&#x75C5;&#xFF0C;&#x5305;&#x62EC;&#x4EBA;&#x4F53;&#x514D;&#x75AB;&#x7F3A;&#x9677;&#x75C5;&#x6BD2; (HIV)&#x3002;DNA &#x75AB;&#x82D7;&#x5177;&#x6709;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x4F18;&#x52BF;&#x8D85;&#x8FC7;&#x5E38;&#x89C4;&#x75AB;&#x82D7; &#xFF1B;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;&#x5728;&#x8BB8;&#x591A;&#x6D89;&#x53CA;&#x5927;&#x578B;&#x52A8;&#x7269;&#x7684;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x548C;&#x4E34;&#x5E8A;&#x8BD5;&#x9A8C;&#x5DF2;&#x7ECF;&#x8BC1;&#x660E;&#x4F4E;&#x514D;&#x75AB;&#x6548;&#x679C;&#x3002;&#x82E5;&#x8981;&#x63D0;&#x9AD8; DNA &#x75AB;&#x82D7;&#x7684;&#x514D;&#x75AB;&#x539F;&#x6027;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x8BBE;&#x8BA1;&#x4E86;&#x5229;&#x7528;&#x725B;&#x4E73;&#x5934;&#x72B6;&#x7624;&#x75C5;&#x6BD2; E2 &#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x7ED3;&#x5408;&#x80FD;&#x529B;&#x7684;&#x8D28;&#x7C92;&#x8F7D;&#x4F53;&#x548C;&#x6211;&#x4EEC;&#x7528;&#x7A7F;&#x5B54; (EP) &#x6765;&#x589E;&#x52A0; DNA &#x5438;&#x6536;&#x540E;&#x76AE;&#x5185;&#x6CE8;&#x5C04;&#x63A5;&#x79CD;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x8868;&#x660E;&#xFF0C;&#x975E;&#x4EBA;&#x7075;&#x957F;&#x7C7B;&#x52A8;&#x7269; (NHPs) &#x7684;&#x6297; hiv &#x514D;&#x75AB;&#x4E0E;&#x6539;&#x8FDB;&#x4EBA;&#x5DE5;&#x878D;&#x5408;&#x86CB;&#x767D;&#x7F16;&#x7801;&#x7684; DNA &#x75AB;&#x82D7;&#x8F7D;&#x4F53;&#x7684;&#x9AD8;&#x6548;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x591A;&#x79CD;&#x86CB;&#x767D;&#x7EC4;&#x6210;&#x548C;&#x827E;&#x6ECB;&#x75C5;&#x6BD2; 1 &#x4ECE;&#x9009;&#x5B9A;&#x6297;&#x539F;&#x51B3;&#x5B9A;&#x7C07;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x8868;&#x660E; DNA &#x75AB;&#x82D7;&#x4F20;&#x9012;&#x65B9;&#x6CD5;&#x7ED3;&#x5408;&#x76AE;&#x5185;&#x6CE8;&#x5C04;&#x548C;&#x65E0;&#x521B; EP &#x5927;&#x5927;&#x589E;&#x52A0;&#x8868;&#x76AE;&#xFF0C;&#x9009;&#x62E9;&#x6027;&#x7684;&#x75AB;&#x82D7;&#x6297;&#x539F;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x548C;&#x6211;&#x4EEC;&#x610F;&#x89C1;&#x5F3A;&#x70C8;&#x5EFA;&#x8BAE;&#x53C2;&#x4E0E;&#x7684;&#x6717;&#x683C;&#x6C49;&#x65AF;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x7684;&#x5F3A;&#x5EA6;&#x548C;&#x6297; hiv &#x514D;&#x75AB;&#x53CD;&#x5E94;&#x7684;&#x8D28;&#x91CF;&#x3002;&#x867D;&#x7136;&#x5BF9;&#x75AB;&#x82D7;&#x7684;&#x4F53;&#x6DB2;&#x53CD;&#x5E94;&#x662F;&#x6682;&#x65F6;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x53CD;&#x5E94;&#x662F;&#x6781;&#x4E3A;&#x5F3A;&#x52B2;&#x548C;&#x6301;&#x4E45;&#x7684;&#x9AD8;&#x7EA7;&#x522B;&#x6700;&#x540E;&#x7684;&#x75AB;&#x82D7;&#x523A;&#x6FC0;&#x540E;&#x8D85;&#x8FC7; 2 &#x5E74;&#x3002;&#x514D;&#x75AB;&#x53CD;&#x5E94;&#x7684;&#x7279;&#x70B9;&#x662F;&#x76F8;&#x5F53;&#x5927;&#x6BD4;&#x4F8B;&#x7684; T &#x7EC6;&#x80DE;&#x4EA7;&#x751F;&#x5E72;&#x6270;&#x7D20;&#x548C;&#x767D;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4ECB;&#x7D20;-2 &#x7EC6;&#x80DE;&#x56E0;&#x5B50;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x4E24;&#x4E2A;&#x4E9A;&#x7FA4;&#xFF0C;CD4(+) &#x548C; CD8(+) &#x7684;&#x611F;&#x5E94;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E00;&#x6218;&#x7565;&#x662F;&#x4E00;&#x4E2A;&#x597D;&#x7684;&#x529E;&#x6CD5;&#xFF0C;&#x5728;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x4E2D;&#x63A5;&#x79CD;&#x75AB;&#x82D7;&#x7531;&#x4E8E;&#x5176;&#x9AD8;&#x6548;&#x7387;&#x548C;&#x65B0;&#x5F00;&#x53D1;&#x7684;&#x8BBE;&#x5907;&#x53EF;&#x80FD;&#x7528;&#x4E8E;&#x4EBA;&#x6C11;&#x519B;

&#x6301;&#x4E45;&#x6027;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x514D;&#x75AB;&#x7F3A;&#x9677;&#x75C5;&#x6BD2; DNA &#x75AB;&#x82D7;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x7684;&#x514D;&#x75AB;&#x5E94;&#x7B54;&#x4F20;&#x9001;&#x4E2D;&#x975E;&#x4EBA;&#x7075;&#x957F;&#x7C7B;&#x52A8;&#x7269;&#x7684;&#x76AE;&#x80A4;&#x7A7F;&#x5B54;&#x534F;&#x4F1A;&#x3002;

Strategies to improve vaccine efficacy are still required, especially in the case of chronic infections, including human immunodeficiency virus (HIV). DNA vaccines have potential advantages over conventional vaccines; however, low immunological efficacy has been demonstrated in many experiments involving large animals and in clinical trials. To improve the immunogenicity of DNA vaccines, we have designed a plasmid vector exploiting the binding capacity of the bovine papillomavirus E2 protein and we have used electroporation (EP) to increase DNA uptake after intradermal inoculation. We demonstrated, in nonhuman primates (NHPs), efficient induction of anti-HIV immunity with an improved DNA vaccine vector encoding an artificial fusion protein, consisting of several proteins and selected epitopes from HIV-1. We show that a DNA vaccine delivery method combining intradermal injection and noninvasive EP dramatically increased expression of the vaccine antigen selectively in the epidermis, and our observations strongly suggest the involvement of Langerhans cells in the strength and quality of the anti-HIV immune response. Although the humoral responses to the vaccine were transient, the cellular responses were exceptionally robust and persisted, at high levels, more than 2 years after the last vaccine boost. The immune responses were characterized by the induction of significant proportions of T cells producing both interferon-gamma and interleukin-2 cytokines, in both subpopulations, CD4(+) and CD8(+). This strategy is an attractive approach for vaccination in humans because of its high efficacy and the possible use of newly developed devices for EP.

Persistent immune responses induced by a human immunodeficiency virus DNA vaccine delivered in association with electroporation in the skin of nonhuman primates.

Strat&eacute;gies visant &agrave; am&eacute;liorer l&#39;efficacit&eacute; du vaccin est n&eacute;cessaires, surtout dans le cas des infections chroniques, y compris le virus de l&#39;immunod&eacute;ficience humaine (VIH). Vaccins &agrave; ADN ont des avantages potentiels par rapport aux vaccins conventionnels ; Cependant, faible efficacit&eacute; immunologique a &eacute;t&eacute; d&eacute;montr&eacute;e dans de nombreuses exp&eacute;riences impliquant des animaux de grande taille et dans les essais cliniques. Afin d&#39;am&eacute;liorer l&#39;immunog&eacute;nicit&eacute; des vaccins &agrave; ADN, nous avons con&ccedil;u un vecteur plasmidique, exploitant la capacit&eacute; de liaison de prot&eacute;ines E2 bovine papillomavirus et nous avons utilis&eacute; l&#39;&eacute;lectroporation (EP) pour augmenter l&#39;absorption de l&#39;ADN apr&egrave;s inoculation intradermique. Nous d&eacute;montr&eacute;, dans les primates non-humains (PNH), efficace induction d&#39;une immunit&eacute; anti-VIH avec un vecteur am&eacute;lior&eacute; de vaccin ADN codant pour une prot&eacute;ine de fusion artificielle, compos&eacute; de plusieurs prot&eacute;ines et s&eacute;lectionn&eacute; les &eacute;pitopes du VIH-1. Nous montrons qu&#39;une m&eacute;thode de livraison de vaccin ADN combinant intradermique injection et non invasive EP a consid&eacute;rablement augment&eacute; l&#39;expression de l&#39;antig&egrave;ne vaccinal s&eacute;lectivement dans l&#39;&eacute;piderme, et nos observations sugg&egrave;rent fortement l&#39;implication de cellules de Langerhans dans la force et la qualit&eacute; de la r&eacute;ponse immunitaire anti-VIH. Bien que les r&eacute;ponses humorales au vaccin ont &eacute;t&eacute; transitoires, les r&eacute;ponses cellulaires &eacute;taient exceptionnellement robuste et persistant, &agrave; des niveaux &eacute;lev&eacute;s, plus de 2 ans apr&egrave;s le dernier coup de pouce de vaccin. Les r&eacute;ponses immunitaires ont &eacute;t&eacute; caract&eacute;ris&eacute;s par l&#39;induction d&#39;une proportion importante de cellules T produisant des cytokines fois interf&eacute;ron-gamma et l&#39;interleukine-2, dans les deux sous-populations, CD4 et CD8. Cette strat&eacute;gie est une approche int&eacute;ressante pour la vaccination chez les humains en raison de sa haute efficacit&eacute; et l&#39;utilisation possible des appareils nouvellement d&eacute;velopp&eacute;s pour PE.

Persistantes des r&eacute;ponses immunitaires induites par un vaccin &agrave; ADN virus de l&#39;immunod&eacute;ficience humaine envoy&eacute;es en liaison avec l&#39;&eacute;lectroporation dans la peau de primates non humains.

Strategien zur Verbesserung der Wirksamkeit des Impfstoffes sind noch erforderlich, insbesondere bei chronischen Infektionen, einschlie&szlig;lich Human Immunodeficiency Virus (HIV). DNA-Impfstoffe haben potenzielle Vorteile gegen&uuml;ber konventionellen Impfstoffen; jedoch ist geringe immunologische Wirksamkeit in vielen Experimenten, bei denen gro&szlig;e Tiere und in klinischen Studien nachgewiesen. Um die Immunogenit&auml;t von DNA-Impfstoffen zu verbessern, haben haben wir eine Plasmidvektor ausnutzen das Bindungsverm&ouml;gen von der bovinen Papillomvirus Protein E2 entwickelt und wir Elektroporation (EP), um DNA-Aufnahme zu erh&ouml;hen nach Intradermaler Inokulation. Wir gezeigt haben, in nicht-menschlichen Primaten (NHPs), effiziente Induktion von Anti-HIV-Immunit&auml;t mit eine verbesserte DNA-Impfstoff-Vektor Codierung ein k&uuml;nstliches Schmelzverfahren Protein, bestehend aus mehreren Proteinen und Epitopes von HIV-1 ausgew&auml;hlt. Wir zeigen, dass eine DNA-Impfstoff-&Uuml;bermittlungsmethode kombinieren intradermale Injektion und nicht-invasive EP dramatisch Ausdruck des Antigens Impfstoff selektiv in der Epidermis zugenommen und unsere Beobachtungen die Einbeziehung der Langerhans-Zellen in der St&auml;rke und Qualit&auml;t der Anti-HIV-Immunantwort empfehlen. Obwohl die humoralen Reaktionen auf die Impfung vor&uuml;bergehende waren, waren die zellul&auml;ren Reaktionen au&szlig;ergew&ouml;hnlich robust und beibehaltenen, auf hohem Niveau, mehr als 2 Jahre nach der letzten Impfung-Boost. Die Immunantworten waren gekennzeichnet durch die Induktion von erheblichen Ausma&szlig;en von T-Zellen, die Produktion von Interferon-Gamma und Interleukin-2 Zytokine, in beiden Subpopulationen, CD4(+) und CD8(+). Diese Strategie ist ein attraktiver Ansatz f&uuml;r Impfung beim Menschen wegen seiner hohen Wirksamkeit und den m&ouml;glichen Einsatz von neu entwickelten Ger&auml;te f&uuml;r EP

Persistente Immunantworten durch einen Human-Immunodeficiency-Virus-DNA-Impfstoff induzierten geliefert in Verbindung mit Elektroporation in die Haut der nicht-menschlichen Primaten.

Strategie per migliorare l&#39;efficacia del vaccino sono ancora necessari, soprattutto nel caso di infezioni croniche, tra cui il virus dell&#39;immunodeficienza umana (HIV). Vaccini a DNA sono potenziali vantaggi rispetto ai vaccini convenzionali; Tuttavia, bassa efficacia immunologica &egrave; stata dimostrata in molti esperimenti che coinvolgono grandi animali e in studi clinici. Per migliorare l&#39;immunogenicit&agrave; dei vaccini DNA, abbiamo progettato un vettore plasmidico sfruttando la capacit&agrave; legante di papillomavirus bovino della proteina E2 e abbiamo usato elettroporazione (EP) per aumentare l&#39;assorbimento di DNA dopo l&#39;inoculazione intradermica. Abbiamo dimostrato, in primati non umani (NHPs), efficiente induzione di immunit&agrave; anti-HIV con un migliorato vettoriali di vaccino DNA codifica per una proteina di fusione artificiale, costituito da diverse proteine e selezionato gli epitopi da HIV-1. Vi mostriamo un metodo di consegna vaccino DNA combinando intradermica iniezione e non invasiva EP drammaticamente aumentata espressione dell&#39;antigene del vaccino selettivamente nell&#39;epidermide, che le nostre osservazioni suggeriscono fortemente il coinvolgimento delle cellule di Langerhans, la forza e la qualit&agrave; della risposta immunitaria anti-HIV. Anche se le risposte umorali al vaccino sono stati transitorie, le risposte cellulari erano eccezionalmente robusto e persistente, ad alti livelli, pi&ugrave; di 2 anni dopo l&#39;ultima Spinta di vaccino. Le risposte immunitarie sono state caratterizzate da induzione di proporzioni significative di cellule T che producono citochine sia l&#39;interferone-gamma e interleuchina-2, in entrambe le sottopopolazioni, CD4(+) e cellule. Questa strategia &egrave; un approccio interessante per la vaccinazione negli esseri umani a causa della sua elevata efficacia e l&#39;eventuale uso di dispositivi di nuova concezione per gli EP.

Persistente risposta immunitaria indotta da un vaccino di DNA del virus dell&#39;immunodeficienza umana consegnato in associazione con l&#39;elettroporazione della pelle dei primati.

&#x30EF;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x306E;&#x6709;&#x52B9;&#x6027;&#x3092;&#x5411;&#x4E0A;&#x3055;&#x305B;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x6226;&#x7565;&#x306F;&#x3001;&#x3072;&#x3068;&#x514D;&#x75AB;&#x4E0D;&#x5168;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9; &#xFF08;HIV&#xFF09; &#x306A;&#x3069;&#x7279;&#x306B;&#x6162;&#x6027;&#x611F;&#x67D3;&#x75C7;&#x306E;&#x5834;&#x5408;&#x3001;&#x5FC5;&#x8981;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;DNA &#x30EF;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x306F;&#x3001;&#x5F93;&#x6765;&#x306E;&#x30EF;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x4EE5;&#x4E0A;&#x306E;&#x5229;&#x70B9;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x305F;&#x3060;&#x3057;&#x3001;&#x4F4E;&#x514D;&#x75AB;&#x5B66;&#x7684;&#x52B9;&#x679C;&#x306F;&#x5927;&#x52D5;&#x7269;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x5B9F;&#x9A13;&#x3068;&#x81E8;&#x5E8A;&#x8A66;&#x9A13;&#x3067;&#x5B9F;&#x8A3C;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;DNA &#x30EF;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x306E;&#x514D;&#x75AB;&#x539F;&#x6027;&#x3092;&#x6539;&#x5584;&#x3059;&#x308B;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x30A6;&#x30B7; &#x30D1;&#x30D4;&#x30ED;&#x30FC;&#x30DE; &#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9; E2 &#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306E;&#x7D50;&#x5408;&#x5BB9;&#x91CF;&#x3092;&#x5229;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x30D7;&#x30E9;&#x30B9;&#x30DF;&#x30C3;&#x30C9;&#x306E;&#x30D9;&#x30AF;&#x30C8;&#x30EB;&#x3092;&#x8A2D;&#x8A08;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3057;&#x3001;&#x6211;&#x3005; &#x76AE;&#x63A5;&#x7A2E;&#x5F8C; DNA &#x306E;&#x5438;&#x53CE;&#x3092;&#x9AD8;&#x3081;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x30A8;&#x30EC;&#x30AF;&#x30C8;&#x30ED;&#x30DD;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3; &#xFF08;EP&#xFF09; &#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x3001;&#x30D2;&#x30C8;&#x4EE5;&#x5916;&#x306E;&#x970A;&#x9577; (NHPs) &#x306E;&#x53CD; hiv &#x514D;&#x75AB;&#x3001;&#x4EBA;&#x5DE5;&#x878D;&#x5408;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x3092;&#x7B26;&#x53F7;&#x5316;&#x6539;&#x826F;&#x306E; DNA &#x30EF;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3; &#x30D9;&#x30AF;&#x30C8;&#x30EB;&#x3068;&#x306E;&#x52B9;&#x7387;&#x7684;&#x306A;&#x8A98;&#x5C0E;&#x306E;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x304B;&#x3089;&#x306A;&#x308B;&#x5B9F;&#x8A3C;&#x3057;&#x3001;&#x30A8;&#x30D4;&#x30C8;&#x30FC;&#x30D7; HIV-1 &#x304B;&#x3089;&#x9078;&#x629E;&#x3002;&#x672C;&#x76AE;&#x5185;&#x7D50;&#x5408; DNA &#x30EF;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x306E;&#x914D;&#x4FE1;&#x65B9;&#x6CD5;&#x306E;&#x6CE8;&#x5165;&#x3068;&#x975E;&#x4FB5;&#x8972;&#x7684; EP &#x5287;&#x7684;&#x306B;&#x5897;&#x52A0;&#x3001;&#x8868;&#x76AE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x9078;&#x629E;&#x7684;&#x30EF;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x6297;&#x539F;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x3068;&#x79C1;&#x9054;&#x306E;&#x89B3;&#x5BDF;&#x306F;&#x5F37;&#x304F;&#x53CD; hiv &#x514D;&#x75AB;&#x53CD;&#x5FDC;&#x306E;&#x54C1;&#x8CEA;&#x3068;&#x5F37;&#x5EA6;&#x306E;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B2;&#x30EB;&#x30CF;&#x30F3;&#x30B9;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3092;&#x63D0;&#x6848;&#x3059;&#x308B;. &#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30EF;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x306B;&#x4F53;&#x6DB2;&#x6027;&#x5FDC;&#x7B54;&#x306F;&#x4E00;&#x6642;&#x7684;&#x306A;&#x3082;&#x306E;&#x3067;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3001;&#x9AD8;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3067;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5FDC;&#x7B54;&#x306F;&#x3001;&#x4EE5;&#x4E0A; 2 &#x5E74;&#x5F8C;&#x3001;&#x6700;&#x5F8C;&#x306E;&#x30EF;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3; &#x30D6;&#x30FC;&#x30B9;&#x30C8;&#x306F;&#x3001;&#x975E;&#x5E38;&#x306B;&#x5805;&#x7262;&#x3067;&#x6C38;&#x7D9A;&#x7684;&#x306A;&#x306B;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x514D;&#x75AB;&#x5FDC;&#x7B54;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5272;&#x5408;&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x306E;&#x96C6;&#x56E3;&#x306F;&#x3001;CD4(+) &#x3068;&#x3060;&#x308D;&#x3046;&#x3053;&#x306E;&#x30A4;&#x30F3;&#x30BF;&#x30FC;&#x30D5;&#x30A7;&#x30ED;&#x30F3; &gamma; &#x3068;&#x30A4;&#x30F3;&#x30BF;&#x30FC;&#x30ED;&#x30A4;&#x30AD;&#x30F3; 2 &#x306E;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x30AB;&#x30A4;&#x30F3;&#x7523;&#x751F; T &#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x8A98;&#x5C0E;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x7279;&#x5FB4;&#x3065;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x6226;&#x7565;&#x306F;&#x4EBA;&#x9593;&#x306E;&#x4E88;&#x9632;&#x63A5;&#x7A2E;&#x306E;&#x9B45;&#x529B;&#x7684;&#x306A;&#x30A2;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30C1;&#x306F;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x9AD8;&#x52B9;&#x7387;&#x3068;&#x306E; EP &#x306F;&#x3001;&#x65B0;&#x3057;&#x304F;&#x958B;&#x767A;&#x3057;&#x305F;&#x30C7;&#x30D0;&#x30A4;&#x30B9;&#x306E;&#x53EF;&#x80FD;&#x306A;&#x4F7F;&#x7528;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x3067;&#x3059;&#x3002;

&#x3072;&#x3068;&#x514D;&#x75AB;&#x4E0D;&#x5168;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9; DNA &#x30EF;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x6C38;&#x7D9A;&#x7684;&#x306A;&#x514D;&#x75AB;&#x5FDC;&#x7B54;&#x30A8;&#x30EC;&#x30AF;&#x30C8;&#x30ED;&#x30DD;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x76AE;&#x819A;&#x306E;&#x30D2;&#x30C8;&#x4EE5;&#x5916;&#x306E;&#x970A;&#x9577;&#x985E;&#x3067;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x3092;&#x914D;&#x4FE1;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;

&#xBC31;&#xC2E0; &#xD6A8;&#xB2A5;&#xC744; &#xAC1C;&#xC120; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xC804;&#xB7B5;&#xC740; &#xC5EC;&#xC804;&#xD788; &#xC778;&#xAC04; &#xBA74;&#xC5ED; &#xACB0;&#xD54D; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; (HIV)&#xB97C; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558; &#xC5EC; &#xB9CC;&#xC131; &#xAC10;&#xC5FC;&#xC758; &#xACBD;&#xC6B0; &#xD2B9;&#xD788; &#xD544;&#xC694; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. DNA &#xBC31;&#xC2E0;&#xC5D0;&#xB294; &#xAE30;&#xC874;&#xC758; &#xBC31;&#xC2E0;; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xC801;&#xC778; &#xC774;&#xC810;&#xC774; &#xC788;&#xB2E4; &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, &#xB0AE;&#xC740; &#xBA74;&#xC5ED; &#xD6A8;&#xB2A5; &#xB300;&#xD615; &#xB3D9;&#xBB3C;&#xC744; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558;&#xB294; &#xB9CE;&#xC740; &#xC2E4;&#xD5D8;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC640; &#xC784;&#xC0C1; &#xC2E4;&#xD5D8;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC785;&#xC99D; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. DNA &#xBC31;&#xC2E0;&#xC758; immunogenicity &#xAC1C;&#xC120; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xC545;&#xC6A9; &#xD558;&#xB294; &#xC18C;&#xACFC; &#xC720; &#xB450; &#xC885; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; E2 &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xC6A9;&#xB7C9; &#xD50C;&#xB77C;&#xC2A4; &#xBBF8;&#xB4DC; &#xBCA1;&#xD130; &#xB514;&#xC790;&#xC778; &#xD558; &#xACE0; &#xC6B0;&#xB9AC; &#xD53C;&#xBD80; &#xC811;&#xC885; &#xD6C4; DNA &#xAE00;&#xADC0; &#xC99D;&#xAC00; electroporation (EP)&#xB97C; &#xC774;&#xC6A9; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xC2DC;&#xC5F0;, nonhuman &#xC601;&#xC7A5;&#xB958; (NHPs)&#xC5D0;&#xC11C; &#xC778;&#xACF5; &#xD4E8;&#xC804; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC778;&#xCF54;&#xB529; &#xD5A5;&#xC0C1; &#xB41C; DNA &#xBC31;&#xC2E0; &#xBCA1;&#xD130;&#xC640; anti-HIV &#xBA74;&#xC5ED;&#xC758; &#xD6A8;&#xC728;&#xC801;&#xC778; &#xC720;&#xB3C4; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xAC00;&#xC9C0; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC73C;&#xB85C; &#xAD6C;&#xC131; &#xB41C; &#xBC0F; epitopes V 1&#xC5D0;&#xC11C; &#xC120;&#xD0DD;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xD53C;&#xBD80;&#xB97C; &#xACB0;&#xD569; &#xD558;&#xB294; DNA &#xBC31;&#xC2E0; &#xC804;&#xB2EC; &#xBC29;&#xBC95;&#xC744; &#xBD84;&#xC0AC; &#xBC0F; &#xBE44; &#xCE68; &#xD22C; &#xC801;&#xC778; EP &#xADF9;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC99D;&#xAC00; &#xD45C; &#xD53C;&#xC5D0; &#xC120;&#xD0DD;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xBC31;&#xC2E0; &#xD56D; &#xC6D0; &#xC2DD; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xAD00;&#xCC30;&#xC774; &#xC88B;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; Langerhans &#xC138;&#xD3EC; &#xAC15;&#xB3C4; &#xBC0F; anti-HIV &#xBA74;&#xC5ED; &#xC751;&#xB2F5;&#xC758; &#xD488;&#xC9C8;&#xC5D0;&#xC758; &#xCC38;&#xC5EC; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xBC31;&#xC2E0;&#xC5D0; &#xCCB4;&#xC561; &#xC751;&#xB2F5; &#xACFC;&#xB3C4; &#xD588;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xD734;&#xB300; &#xC804;&#xD654; &#xC751;&#xB2F5; &#xD588;&#xB2E4; &#xB9E4;&#xC6B0; &#xAC15;&#xB825; &#xD558; &#xACE0; &#xC9C0;&#xC18D;, &#xB192;&#xC740; &#xC218;&#xC900;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB9C8;&#xC9C0;&#xB9C9; &#xBC31;&#xC2E0; &#xBD80;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xD6C4; &#xC774;&#xC0C1; 2 &#xB144;. &#xBA74;&#xC5ED; &#xBC18;&#xC751; T &#xC138;&#xD3EC;&#xB97C; &#xC0DD;&#xC0B0; &#xD558;&#xB294; CD4(+)&#xC640; CD8(+) &#xB450; &#xC9D1;&#xB2E8;&#xAC04;&#xC5D0; &#xC778;&#xD130;&#xD398;&#xB860;-&#xAC10;&#xB9C8; &#xBC0F; interleukin-2 cytokines&#xC758; &#xC0C1;&#xB2F9;&#xD55C; &#xBE44;&#xC728;&#xC758; &#xC720;&#xB3C4; &#xC758;&#xD574; &#xD2B9;&#xC9D5; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC774; &#xC804;&#xB7B5;&#xC740; &#xADF8;&#xAC83;&#xC758; &#xB192;&#xC740; &#xD6A8; &#xD5D8; &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xC5D0;&#xD53C;&#xC18C;&#xB4DC;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC0C8;&#xB85C; &#xAC1C;&#xBC1C;&#xB41C; &#xB41C; &#xB514;&#xBC14;&#xC774;&#xC2A4;&#xC758; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xAC00;&#xB2A5;&#xD55C; &#xB54C;&#xBB38;&#xC5D0; &#xC778; &#xAC04;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC608;&#xBC29; &#xC811;&#xC885;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xB9E4;&#xB825;&#xC801;&#xC778; &#xC811;&#xADFC;

&#xC778;&#xAC04; &#xBA74;&#xC5ED; &#xACB0;&#xD54D; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; DNA &#xBC31;&#xC2E0;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC720;&#xB3C4; &#xB41C; &#xC601;&#xAD6C; &#xBA74;&#xC5ED; &#xC751;&#xB2F5; &#xC5F0;&#xAD00; &#xD53C;&#xBD80;&#xC5D0;&#xC11C; electroporation nonhuman &#xC601;&#xC7A5;&#xB958;&#xC758; &#xC804;&#xB2EC;.

Estrategias para mejorar la eficacia de la vacuna son todav&iacute;a necesarias, especialmente en el caso de infecciones cr&oacute;nicas, incluyendo el virus de inmunodeficiencia humana (VIH). Las vacunas de ADN tienen ventajas potenciales sobre las vacunas convencionales; sin embargo, baja eficacia inmunol&oacute;gica ha demostrado en muchos experimentos con animales grandes y en ensayos cl&iacute;nicos. Para mejorar la inmunogenicidad de las vacunas de ADN, hemos dise&ntilde;ado un vector pl&aacute;smido aprovechando la capacidad de uni&oacute;n de los papilomavirus bovinos prote&iacute;na E2 y hemos utilizado electroporaci&oacute;n (EP) para aumentar la participaci&oacute;n de ADN despu&eacute;s de la inoculaci&oacute;n intrad&eacute;rmica. Nos demostr&oacute;, en primates no humanos (NHPs), eficiente inducci&oacute;n de inmunidad contra el VIH con un vector de vacuna de ADN mejorado codificar una prote&iacute;na de fusi&oacute;n artificial, que consta de varias prote&iacute;nas y seleccionado epitopos del VIH-1. Mostramos que un m&eacute;todo de la entrega de la vacuna de ADN combinando intrad&eacute;rmica inyecci&oacute;n y no invasiva EP aumentaron dr&aacute;sticamente la expresi&oacute;n de ant&iacute;geno vacunal selectivamente en la epidermis, y nuestras observaciones sugieren fuertemente la participaci&oacute;n de las c&eacute;lulas de Langerhans en la fuerza y la calidad de la respuesta inmune de anti-VIH. Aunque la respuesta humoral a la vacuna fueron transitoria, las respuestas celulares fueron excepcionalmente robusto y persistente, en altos niveles, m&aacute;s de 2 a&ntilde;os despu&eacute;s del &uacute;ltimo refuerzo de vacuna. Las respuestas inmunes se caracterizaron por la inducci&oacute;n de proporciones significativas de c&eacute;lulas T, produciendo citocinas tanto de interfer&oacute;n-gamma y de interleucina-2, en dos subpoblaciones, CD4 y CD8. Esta estrategia es un enfoque atractivo para la vacunaci&oacute;n en los seres humanos debido a su alta eficacia y el posible uso de dispositivos recientemente desarrollados para EP.

Persistente respuesta inmune inducida por la vacuna de ADN de una virus de inmunodeficiencia humana entregado en asociaci&oacute;n con electroporaci&oacute;n en la piel de primates no humanos.

&#x6811;&#x7A81;&#x72B6;&#x7EC6;&#x80DE; (Dc) &#x53EF;&#x4EE5;&#x542F;&#x52A8;&#x548C;&#x5F62;&#x72B6;&#x8C41;&#x514D;&#x6743;&#x6216;&#x5BB9;&#x5FCD;&#x5BF9;&#x5BBF;&#x4E3B;&#x514D;&#x75AB;&#x53CD;&#x5E94;&#x7684;&#x6297;&#x539F;&#x7279;&#x5F02;&#x6027; CD4(+) T &#x7EC6;&#x80DE;&#x5BF9;&#x5176;&#x5F71;&#x54CD;&#x3002;Lectinlike &#x53D7;&#x4F53;&#x3001; &#x53D7;&#x4F53;&#x76F4;&#x6D41;&#x553E;&#x6DB2; (&#x76F4;&#x6D41;-ASGPR&#xFF09;&#xFF0C;&#x662F;&#x4E00;&#x79CD;&#x5DF2;&#x77E5;&#x7684;&#x6E05;&#x9053;&#x592B;&#x53D7;&#x4F53;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x62A5;&#x544A;&#x9488;&#x5BF9;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x8BAE;&#x4F1A;&#x901A;&#x8FC7;&#x76F4;&#x6D41;-ASGPR&#xFF0C;&#x4F46;&#x4E0D;&#x662F;&#x51DD;&#x96C6;&#x7D20;&#x6837;&#x6C27;&#x5316;&#x4F4E;&#x5BC6;&#x5EA6;&#x8102;&#x86CB;&#x767D;&#x53D7;&#x4F53;&#x6297;&#x539F;&#xFF0C;Dectin-1 &#x6216;&#x7279;&#x5B9A;&#x4E8E; DC &#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x95F4;&#x7C98;&#x9644;&#x5206;&#x5B50; 3 &#x6293;&#x83B7;&#x53D6;&#x6709;&#x5229;&#x4E8E;&#x4EA7;&#x751F;&#x767D;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4ECB;&#x7D20; 10 (IL-10&#xFF09; &#x7684;&#x6297;&#x539F;&#x7279;&#x5F02;&#x6027;&#x6291;&#x5236; CD4(+) T &#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x751F;&#x6210;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x8C03;&#x67E5;&#x7ED3;&#x679C;&#x9002;&#x7528;&#x4E8E;&#x65E2;&#x81EA;&#x6211;&#x548C;&#x5916;&#x56FD;&#x6297;&#x539F;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x53CA;&#x5185;&#x5B58;&#x548C;&#x5929;&#x771F; CD4(+) T &#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;&#x8FD9;&#x79CD; IL-10 &#x751F;&#x4EA7; CD4(+) T &#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x751F;&#x6210;&#x8981;&#x6C42; p38/&#x80DE;&#x5916;&#x4FE1;&#x53F7;&#x8C03;&#x8282;&#x6FC0;&#x9176;&#x78F7;&#x9178;&#x5316;&#x53CA;&#x5728; DCs &#x4E2D;&#x7684;&#x767D;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4ECB;&#x7D20;-10 &#x8BF1;&#x5BFC;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x8FDB;&#x4E00;&#x6B65;&#x8BC1;&#x660E;&#x4E0E;&#x70E4;&#x74F7;&#x6297;-DC-ASGPR &#x5355;&#x514B;&#x9686;&#x6297;&#x4F53;&#x7684;&#x6297;&#x539F;&#x7684;&#x975E;&#x4EBA;&#x7075;&#x957F;&#x7C7B;&#x52A8;&#x7269;&#x7684;&#x514D;&#x75AB;&#x751F;&#x6210;&#x4EA7;&#x751F;&#x767D;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4ECB;&#x7D20;-10 &#x5728;&#x4F53;&#x5185;&#x7684;&#x6297;&#x539F;&#x7279;&#x5F02;&#x6027; CD4(+) T &#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;&#x8FD9;&#x9879;&#x7814;&#x7A76;&#x9488;&#x5BF9;&#x6574;&#x4E2A;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x6297;&#x539F;&#x5411;&#x533A;&#x8BAE;&#x4F1A;&#x901A;&#x8FC7;&#x76F4;&#x6D41; ASGPR &#x6297;&#x539F;&#x7279;&#x5F02;&#x6027; IL-10 &#x751F;&#x4EA7;&#x6291;&#x5236; T &#x7EC6;&#x80DE;&#x5728;&#x4F53;&#x5185;&#x7684;&#x5EFA;&#x7ACB;&#x63D0;&#x4F9B;&#x4E86;&#x65B0;&#x7684;&#x6218;&#x7565;&#x3002;

&#x9488;&#x5BF9;&#x81EA;&#x6211;&#x548C;&#x5916;&#x56FD;&#x6297;&#x539F;&#x7684;&#x6811;&#x7A81;&#x72B6;&#x7EC6;&#x80DE;&#x901A;&#x8FC7;&#x76F4;&#x6D41; ASGPR &#x751F;&#x6210; IL-10 &#x751F;&#x4EA7;&#x6291;&#x5236; CD4 + T &#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;

Dendritic cells (DCs) can initiate and shape host immune responses toward either immunity or tolerance by their effects on antigen-specific CD4(+) T cells. DC-asialoglycoprotein receptor (DC-ASGPR), a lectinlike receptor, is a known scavenger receptor. Here, we report that targeting antigens to human DCs via DC-ASGPR, but not lectin-like oxidized-LDL receptor, Dectin-1, or DC-specific ICAM-3-grabbing nonintegrin favors the generation of antigen-specific suppressive CD4(+) T cells that produce interleukin 10 (IL-10). These findings apply to both self- and foreign antigens, as well as memory and naive CD4(+) T cells. The generation of such IL-10-producing CD4(+) T cells requires p38/extracellular signal-regulated kinase phosphorylation and IL-10 induction in DCs. We further demonstrate that immunization of nonhuman primates with antigens fused to anti-DC-ASGPR monoclonal antibody generates antigen-specific CD4(+) T cells that produce IL-10 in vivo. This study provides a new strategy for the establishment of antigen-specific IL-10-producing suppressive T cells in vivo by targeting whole protein antigens to DCs via DC-ASGPR.

Targeting self- and foreign antigens to dendritic cells via DC-ASGPR generates IL-10-producing suppressive CD4+ T cells.

Les cellules dendritiques (CD) peuvent initier et h6te immunitaire vers l&#39;immunit&eacute; ou la tol&eacute;rance de forme par leurs effets sur les cellules CD4 + T antig&egrave;ne-sp&eacute;cifiques. R&eacute;cepteur des asialoglycoprot&eacute;ines-DC (DC-ASGPR), un r&eacute;cepteur ferait, est un r&eacute;cepteur scavenger connus. Nous rapportons ici que le ciblage des antig&egrave;nes aux contr&ocirc;leurs de domaine humains via DC-ASGPR, mais les r&eacute;cepteurs de type lectine pas oxyd&eacute;-LDL, Dectin-1, ou nonintegrin DC sp&eacute;cifiques ICAM-3-grabbing favorise la g&eacute;n&eacute;ration de l&#39;antig&egrave;ne sp&eacute;cifique suppressives T CD4 + cellules qui produisent l&#39;interleukine 10 (IL-10). Ces conclusions s&#39;appliquent &agrave; l&#39;auto - et antig&egrave;nes &eacute;trangers, tant que les cellules T CD4 + m&eacute;moire et na&iuml;ve. La g&eacute;n&eacute;ration de ces cellules productrices de IL-10 CD4 + T n&eacute;cessite la phosphorylation de p38/extracellulaire signal-regulated kinase et induction de IL-10 dans les PVD. De plus, nous d&eacute;montrons que la vaccination des primates non humains avec des antig&egrave;nes fusionn&eacute;s &agrave; un anticorps monoclonal anti-DC-ASGPR g&eacute;n&egrave;re des cellules CD4 + T antig&egrave;ne-sp&eacute;cifiques qui produisent l&#39;IL-10 in vivo. Cette &eacute;tude fournit une nouvelle strat&eacute;gie pour la cr&eacute;ation d&#39;antig&egrave;ne-sp&eacute;cifiques IL 10-suppressives T cellules productrices in vivo en ciblant les antig&egrave;nes de prot&eacute;ines enti&egrave;res aux contr&ocirc;leurs de domaine par l&#39;interm&eacute;diaire de DC-ASGPR.

Ciblage des antig&egrave;nes &eacute;trangers aux cellules dendritiques via DC-ASGPR et auto - g&eacute;n&egrave;re des cellules productrices d&#39;IL-10 de CD4 + T suppressives.

Dendritische Zellen (DCs) k&ouml;nnen initiieren und Host-Immunantworten gegen Immunit&auml;t oder Toleranz durch ihre Auswirkungen auf die Antigen-spezifische CD4(+) T-Zellen zu gestalten. DC-Asialoglycoprotein-Rezeptor (DC-ASGPR), ein lectinlike-Rezeptor ist ein bekanntes Schnitzeljagd-Rezeptor. Hier berichten wir, dass die Ausrichtung auf Antigene auf menschlichen DCs &uuml;ber DC-ASGPR, aber nicht Lektin-Like oxidiert-LDL-Rezeptor, Dectin-1 oder DC-spezifische ICAM-3-greifen Nonintegrin die Generation der Antigen-spezifische unterdr&uuml;ckende CD4(+) T-Zellen beg&uuml;nstigt, die produzieren Interleukin 10 (IL-10). Diese Feststellungen gelten f&uuml;r sowohl selbst- und fremde Antigene sowie Speicher und naiven CD4(+) T-Zellen. Die Generation solcher IL-10-produzierenden CD4(+) T-Zellen erfordert p38/extrazellul&auml;re Signal-regulierte Kinase Phosphorylierung und IL-10 Induktion in DCs. Weiter zeigen wir, dass die Immunisierung von nicht-menschlichen Primaten mit Antigenen verschmolzen zu Anti-DC-ASGPR monoklonalen Antik&ouml;rpern Antigen-spezifische CD4(+) T-Zellen erzeugt, die IL-10 in-vivo zu produzieren. Diese Studie liefert eine neue Strategie f&uuml;r die Einrichtung der Antigen-spezifische Produktion von IL-10 unterdr&uuml;ckende T-Zellen in vivo durch gezielte ganze Protein-Antigene zu DCs &uuml;ber DC-ASGPR.

Selbst-und fremde Antigene auf dendritische Zellen &uuml;ber DC-ASGPR generiert unterdr&uuml;ckende CD4 + T-Zellen IL-10-produzieren.

Le cellule dendritiche (DCs) possono avviare e forma host risposte immunitarie verso l&#39;immunit&agrave; o tolleranza dai loro effetti sulle cellule CD4(+) T antigene-specifiche. DC-asialoglycoprotein receptor (DC-ASGPR), un recettore lectinlike, &egrave; un recettore scavenger noto. Qui, segnaliamo che targeting antigeni di umana DCs via DC-ASGPR, ma il recettore LDL ossidato non lectin-like, Dectin-1 o nonintegrin DC-specifiche ICAM-3-grabbing favorisce la generazione di cellule soppressive di CD4(+) T antigene-specifiche che producono Interleuchina 10 (IL-10). Questi risultati applicano sia auto - e antigeni estranei, cos&igrave; come le cellule T CD4(+) memoria e ingenuo. La generazione di tali cellule producono IL-10 CD4(+) T richiede la fosforilazione della chinasi segnale-regolata extracellulare/p38 e induzione di IL-10 in DCs. Noi dimostrare ulteriormente che l&#39;immunizzazione di primati con antigeni fusi all&#39;anticorpo monoclonale anti-DC-ASGPR genera le cellule di CD4(+) T antigene-specifici che producono IL-10 in vivo. Questo studio fornisce una nuova strategia per la determinazione dell&#39;antigene-specifica IL 10-soppressive T cellule in vivo di mira gli antigeni della proteina intera a DCs via DC-ASGPR.

Targeting self - e antigeni estranei a cellule dendritiche attraverso DC-ASGPR genera produzione di IL-10 cellule T CD4 + soppressive.

&#x6A39;&#x72B6;&#x7D30;&#x80DE; (Dc) &#x3092;&#x958B;&#x59CB;&#x3057;&#x3001;&#x6297;&#x539F;&#x7279;&#x7570;&#x7684; CD4(+) T &#x7D30;&#x80DE;&#x3078;&#x306E;&#x5F71;&#x97FF;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5BBF;&#x4E3B;&#x514D;&#x75AB;&#x5FDC;&#x7B54;&#x514D;&#x75AB;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x8A31;&#x5BB9;&#x5DEE;&#x3092;&#x5F62;&#x6210;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;DC asialoglycoprotein&#x3001;lectinlike &#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53; (DC ASGPR&#xFF09;&#x3001;&#x77E5;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x30B9;&#x30AB;&#x30D9;&#x30F3; &#x30B8;&#x30E3;&#x30FC;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x6211;&#x3005; &#x4EBA;&#x9593;&#x306E; dc DC ASGPR &#x304C;&#x306A;&#x3044;&#x30EC;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x9178;&#x5316; LDL &#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x6297;&#x539F;&#x3092;&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#x306B;&#x3001;&#x81EA;&#x5DF1;&#x514D;&#x75AB;-1&#x3001;&#x307E;&#x305F;&#x306F; DC &#x56FA;&#x6709; ICAM 3 &#x30B0;&#x30E9;&#x30D6; nonintegrin &#x30FB;&#x652F;&#x6301;&#x30FB; &#x30A4;&#x30F3;&#x30BF;&#x30FC;&#x30ED;&#x30A4;&#x30AD;&#x30F3; 10 (IL-10) &#x3092;&#x751F;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x6297;&#x539F;&#x7279;&#x7570;&#x7684;&#x6291;&#x5236; CD4(+) T &#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x751F;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x30EC;&#x30DD;&#x30FC;&#x30C8;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x8ABF;&#x67FB;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3001;&#x81EA;&#x5DF1;&#x3068;&#x5916;&#x56FD;&#x306E;&#x6297;&#x539F;&#x3068;&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x306B;&#x30E1;&#x30E2;&#x30EA;&#x3068;&#x30CA;&#x30A4;&#x30FC;&#x30D6; CD4(+) T &#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x9069;&#x7528;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x305D;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A; IL 10 &#x751F; CD4(+) T &#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x751F;&#x6210;&#x306B;&#x306F;&#x3001;p38/&#x7D30;&#x80DE;&#x5916;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316;&#x3068; IL-10 DCs &#x306E;&#x8A98;&#x5C0E;&#x304C;&#x5FC5;&#x8981;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x4E88;&#x9632;&#x63A5;&#x7A2E;&#x6297;&#x539F;&#x6297; DC ASGPR &#x30E2;&#x30CE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30FC;&#x30CA;&#x30EB;&#x6297;&#x4F53;&#x306B;&#x878D;&#x5408;&#x3057;&#x305F;&#x30D2;&#x30C8;&#x4EE5;&#x5916;&#x306E;&#x970A;&#x9577;&#x985E;&#x306E; IL-10 &#x751F;&#x4F53;&#x5185;&#x3067;&#x751F;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x6297;&#x539F;&#x7279;&#x7570;&#x7684; CD4(+) T &#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x751F;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3082;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x306F;&#x3001;dc DC ASGPR &#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x306E;&#x5168;&#x4F53;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306E;&#x6297;&#x539F;&#x3092;&#x6A19;&#x7684;&#x3068;&#x3057;&#x3001;&#x6297;&#x539F;&#x7279;&#x7570;&#x7684; IL 10 &#x751F;&#x7523;&#x6291;&#x5236; T &#x7D30;&#x80DE; in vivo &#x3067;&#x306E;&#x78BA;&#x7ACB;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x3001;&#x65B0;&#x305F;&#x306A;&#x6226;&#x7565;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#x306E;&#x81EA;&#x5DF1;&#x3068;&#x5916;&#x56FD;&#x306E;&#x6297;&#x539F;&#x306B;&#x6A39;&#x72B6;&#x7D30;&#x80DE; DC ASGPR IL 10 &#x751F;&#x7523;&#x6291;&#x5236;&#x306E; cd 4 + T &#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x751F;&#x6210;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#xC218;&#xC9C0;&#xC0C1; &#xC138;&#xD3EC; (DCs)&#xB97C; &#xC2DC;&#xC791; &#xD558; &#xACE0; &#xB0B4;&#xC131; &#xB610;&#xB294; &#xB0B4;&#xC131; &#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xBA74;&#xC5ED; &#xBC18;&#xC751; &#xD56D; &#xC6D0; &#xD2B9;&#xC815; CD4(+) T &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xBBF8;&#xCE58;&#xB294; &#xC601;&#xD5A5;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xD615;&#xC131; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. DC asialoglycoprotein &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; (DC-ASGPR), lectinlike &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xB294; &#xC54C;&#xB824;&#xC9C4;&#xB41C; &#xD3D0;&#xD488; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;. &#xC5EC;&#xAE30;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; dc DC-ASGPR, &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xD558;&#xC9C0; lectin &#xAC19;&#xC740; &#xC0B0;&#xD654; LDL &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; &#xD56D; &#xC6D0;&#xC744; &#xB300;&#xC0C1;&#xC73C;&#xB85C; Dectin-1, &#xB610;&#xB294; DC &#xD2B9;&#xC815; ICAM-3-&#xC7A1;&#xB294; nonintegrin &#xD638;&#xC758; &#xC778;&#xD130; &#xB8E8; &#xD0A8; 10 (IL-10)&#xC744; &#xC0DD;&#xC0B0; &#xD558;&#xB294; &#xD56D; &#xC6D0; &#xD2B9;&#xC815; &#xC9C4;&#xC555; CD4(+) T &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC0DD;&#xC131;&#xC744; &#xBCF4;&#xACE0; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xACB0;&#xACFC; &#xBAA8;&#xB450; &#xC790;&#xAE30;-&#xD558; &#xACE0; &#xC678;&#xAD6D; &#xD56D; &#xC6D0;&#xC744;&#xC73C;&#xB85C; &#xBA54;&#xBAA8;&#xB9AC;&#xC640; &#xC21C;&#xC9C4;&#xD55C; CD4(+) T &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xC801;&#xC6A9; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; IL 10 &#xC0DD;&#xC0B0; CD4(+) T &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC0DD;&#xC131; p38/&#xC138;&#xD3EC; &#xC678; &#xC2E0;&#xD638; &#xADDC;&#xC81C; &#xB2C8; &#xC778; &#xC0B0;&#xD654;&#xC640; Dc&#xC5D0;&#xC11C; IL-10 &#xC720;&#xB3C4; &#xD544;&#xC694;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xCD94;&#xAC00; &#xBA74;&#xC5ED; &#xD56D; &#xC6D0; &#xC548;&#xD2F0;-DC-ASGPR &#xB2E8;&#xC77C; &#xD074;&#xB860; &#xD56D; &#xCCB4; &#xC735;&#xD569;&#xC73C;&#xB85C; nonhuman &#xC601;&#xC7A5;&#xB958;&#xC758; IL-10 vivo&#xC5D0;&#xC11C; &#xC0DD;&#xC0B0; &#xD558;&#xB294; &#xD56D; &#xC6D0; &#xD2B9;&#xC815; CD4(+) T &#xC138;&#xD3EC; &#xC0DD;&#xC131; &#xBC29;&#xBC95;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xC804;&#xCCB4; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xD56D; &#xC6D0; DC ASGPR&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; Dc &#xB300;&#xC0C1;&#xC73C;&#xB85C; &#xD56D; &#xC6D0; &#xD2B9;&#xC815; IL 10 &#xC0DD;&#xC0B0; &#xC9C4;&#xC555; T &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; in vivo &#xC124;&#xB9BD;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xC804;&#xB7B5;&#xC744; &#xC81C;&#xACF5; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC790;&#xAE30;-&#xBC0F; DC-ASGPR&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; &#xC218;&#xC9C0;&#xC0C1; &#xC138;&#xD3EC;&#xB97C; &#xC678;&#xAD6D; &#xD56D; &#xC6D0;&#xC744; &#xB300;&#xC0C1;&#xC73C;&#xB85C; IL 10 &#xC0DD;&#xC0B0;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC9C4;&#xC555;&#xC758; CD4 + T &#xC138;&#xD3EC;&#xB97C; &#xC0DD;&#xC131; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Las c&eacute;lulas dendr&iacute;ticas (DCs) pueden iniciar y forma inmunorespuestas anfitri&oacute;n hacia la inmunidad o tolerancia por sus efectos en las c&eacute;lulas de T de CD4 espec&iacute;fica de ant&iacute;geno. Receptor de DC-asialoglicoprote&iacute;na (DC-ASGPR), un receptor lectinlike, es un receptor scavenger conocido. Aqu&iacute;, Divulgamos que atacar ant&iacute;genos humanos DCs v&iacute;a DC-ASGPR, pero no de lectina-como el receptor de LDL oxidada, Dectin-1 o nonintegrin C.C.-espec&iacute;ficos ICAM-3-agarrando favorece la generaci&oacute;n de c&eacute;lulas de T de CD4 ant&iacute;geno-espec&iacute;fica represivas que producen Interleucina 10 (IL-10). Estos resultados se aplican a tanto auto y ant&iacute;genos extra&ntilde;os, como las c&eacute;lulas de T de CD4 de memoria e ingenuas. La generaci&oacute;n de tales c&eacute;lulas de T de CD4 productores de IL-10 requiere fosforilaci&oacute;n de la quinasa regulada por se&ntilde;al extracelular/p38 y la inducci&oacute;n de IL-10 en DCs. Adem&aacute;s, demostramos que la inmunizaci&oacute;n de primates no humanos con ant&iacute;genos fusionados al anticuerpo monoclonal de anti-DC-ASGPR genera c&eacute;lulas de T de CD4 espec&iacute;fica de ant&iacute;geno que producen IL-10 en vivo. Este estudio proporciona una nueva estrategia para el establecimiento de antigen-specific productores de IL-10 PREVENCION c&eacute;lulas T in vivo al dirigirse a los ant&iacute;genos de la prote&iacute;na entera al DCs v&iacute;a DC-ASGPR.

Uno mismo - y ant&iacute;genos extra&ntilde;os a las c&eacute;lulas dendr&iacute;ticas por medio DC-ASGPR genera c&eacute;lulas de CD4 + T supresores productores de IL-10.

&#x96C6;&#x6563;&#x63A7;&#x5236;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x5728;&#x542F;&#x52A8;&#x514D;&#x75AB;&#x5E94;&#x7B54;&#xFF0C;&#x5BFC;&#x81F4;&#x5176;&#x4F7F;&#x7528;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x75AB;&#x82D7;&#x8F7D;&#x4F53;&#x65B9;&#x9762;&#x7684;&#x5173;&#x952E;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x4F46;&#x662F;&#xFF0C;&#x53C2;&#x4E0E;&#x6297;&#x539F;&#x63D0;&#x5448;&#x7684; DC &#x4E9A;&#x7FA4;&#x548C;&#x8BF1;&#x53D1;&#x514D;&#x75AB;&#x53CD;&#x5E94;&#x7684;&#x7C7B;&#x578B;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x5173;&#x7CFB;&#x5F3A;&#x8C03;&#x6307;&#x51FA;&#xFF0C;&#x5FC5;&#x987B;&#x5BF9;&#x533A;&#x8BAE;&#x4F1A;&#x7684;&#x8868;&#x5F81;&#x751F;&#x6210;&#x4F53;&#x5916;&#x3002;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x6765;&#x6E90;&#x88C5;&#x7532;&#x8FD0;&#x5175;&#x8F66;&#x4ECE;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x75AB;&#x82D7;&#x7814;&#x5236;&#x98DF;&#x87F9;&#x7334;&#x6A21;&#x578B;&#x7684;&#x8868;&#x578B;&#x76F8;&#x6BD4;&#x7684;&#x524D;&#x4F53;&#x5185;&#x6D3E;&#x751F;&#x7684; DCs.&#x5355;&#x6838;&#x7EC6;&#x80DE;/&#x5DE8;&#x566C;&#x7EC6;&#x80DE; (BM) &#x9AA8;&#x9AD3;&#x548C;&#x5916;&#x5468;&#x8840;&#x4E2D;&#x5360;&#x4E3B;&#x5BFC;&#x5730;&#x4F4D;&#x3002;&#x9AD3;&#x7EC6;&#x80DE; DCs &#xFF08;mDCs&#xFF09; &#x5728;&#x573A;&#x4E2D;&#x6240;&#x6709;&#x6D4B;&#x8BD5;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x548C;&#x66F4;&#x9AD8;&#x5EA6;&#x6BD4;&#x6D46;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6837; DCs (Pdc) &#x51FA;&#x5E2D;&#x4E86;&#x4F1A;&#x8BAE;&#x3002;&#x5728;&#x4EBA;&#x4F53;&#x76AE;&#x80A4;&#xFF0C;&#x6717;&#x683C;&#x6C49;&#x65AF;&#x7EC6;&#x80DE; (LCs) &#x5C45;&#x4F4F;&#x5728;&#x7315;&#x7334;&#x8868;&#x76AE;&#xFF0C;&#x4E13;&#x95E8;&#x8868;&#x793A; CD11c&#x3001; CD1a &#x548C; langerin (CD207) &#x7684;&#x9AD8;&#x6C34;&#x5E73;&#x3002;&#x5927;&#x591A;&#x6570; DC &#x4E9A;&#x7FA4;&#x88AB;&#x8D4B;&#x4E88; PRRs&#x3002; CD34(+) BM &#x4ECE;&#x751F;&#x6210;&#x7684;&#x533A;&#x8BAE;&#x4F1A;&#x7684;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x7279;&#x5F02;&#x6027;&#x7EC4;&#x5408;&#x4E0E;&#x7EC6;&#x80DE; (CD34 Dc) &#x662F;&#x5F02;&#x6784;&#x7684;&#x8868;&#x578B;&#x3002;CD34 DCs &#x5171;&#x4EAB;&#x5C5E;&#x6027; &#xFF08;&#x5206;&#x5316;&#x548C; PRR&#xFF09;&#xFF0C;&#x771F;&#x76AE;&#x548C;&#x8868;&#x76AE;&#x7684;&#x533A;&#x8BAE;&#x4F1A;&#x3002;&#x7315;&#x7334;&#xFF0C;CD34 DCs &#x6CE8;&#x5165;&#x540E;&#x8868;&#x793A;&#x827E;&#x6ECB;&#x75C5;&#x6BD2; Gag &#x8BF1;&#x5BFC; Gag &#x7279;&#x5B9A; CD4(+) &#x548C; CD8(+) T &#x7EC6;&#x80DE;&#x80FD;&#x4EA7;&#x751F;&#x5E72;&#x6270;&#x7D20; &gamma;&#x3001; &#x80BF;&#x7624;&#x574F;&#x6B7B;&#x56E0;&#x5B50;-&alpha;&#x3001; &#x6309;&#x63ED;&#x4FDD;&#x9669;&#x8BA1;&#x5212;-1&beta; &#x6216;&#x767D;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4ECB;&#x7D20;-2&#x3002;&#x9AD8;&#x54CD;&#x5E94;&#x52A8;&#x7269;&#x7684;&#x591A;&#x529F;&#x80FD; CD8(+) T &#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x6570;&#x91CF;&#x589E;&#x52A0;&#x4E0E;&#x52A0;&#x5F3A;&#x6CE8;&#x5C04;&#x6B21;&#x6570;&#x3002;&#x8FD9;&#x57FA;&#x4E8E;&#x76F4;&#x6D41;&#x7684;&#x75AB;&#x82D7;&#x6218;&#x7565;&#x5F15;&#x8D77;&#x514D;&#x75AB;&#x53CD;&#x5E94;&#x6709;&#x5173;&#x7684;&#x76F4;&#x6D41;&#x5B50;&#x96C6;&#x751F;&#x6210;&#x4F53;&#x5916;&#x3002;

CD34 &#x6811;&#x7A81;&#x72B6;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6269;&#x589E;&#x4E0E;&#x827E;&#x6ECB;&#x75C5;&#x6BD2; Gag &#x57FA;&#x56E0;&#x8F6C;&#x67D3;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x591A;&#x529F;&#x80FD;&#x975E;&#x4EBA;&#x7075;&#x957F;&#x7C7B;&#x52A8;&#x7269;&#x4E2D;&#x7684; T &#x7EC6;&#x80DE;&#x53CD;&#x5E94;&#x3002;

The pivotal role of DCs in initiating immune responses led to their use as vaccine vectors. However, the relationship between DC subsets involved in antigen presentation and the type of elicited immune responses underlined the need for the characterization of the DCs generated in vitro. The phenotypes of tissue-derived APCs from a cynomolgus macaque model for human vaccine development were compared with ex vivo-derived DCs. Monocyte/macrophages predominated in bone marrow (BM) and blood. Myeloid DCs (mDCs) were present in all tested tissues and were more highly represented than plasmacytoid DCs (pDCs). As in human skin, Langerhans cells (LCs) resided exclusively in the macaque epidermis, expressing CD11c, high levels of CD1a and langerin (CD207). Most DC subsets were endowed with tissue-specific combinations of PRRs. DCs generated from CD34(+) BM cells (CD34-DCs) were heterogeneous in phenotype. CD34-DCs shared properties (differentiation and PRR) of dermal and epidermal DCs. After injection into macaques, CD34-DCs expressing HIV-Gag induced Gag-specific CD4(+) and CD8(+) T cells producing IFN-Î³, TNF-Î±, MIP-1Î², or IL-2. In high responding animals, the numbers of polyfunctional CD8(+) T cells increased with the number of booster injections. This DC-based vaccine strategy elicited immune responses relevant to the DC subsets generated in vitro.

CD34-derived dendritic cells transfected ex vivo with HIV-Gag mRNA induce polyfunctional T-cell responses in nonhuman primates.

Le r&ocirc;le essentiel des contr&ocirc;leurs de domaine dans le d&eacute;clenchement des r&eacute;ponses immunitaires ont conduit &agrave; leur utilisation comme vecteurs de vaccins. Cependant, la relation entre les sous-ensembles DC impliqu&eacute;s dans la pr&eacute;sentation des antig&egrave;nes et le type de la r&eacute;ponse immunitaire ont incit&eacute; a soulign&eacute; la n&eacute;cessit&eacute; pour la caract&eacute;risation de la DCs g&eacute;n&eacute;r&eacute;s in vitro. Les ph&eacute;notypes de TTB tissu-d&eacute;riv&eacute;es d&#39;un mod&egrave;le de macaques cynomolgus pour le d&eacute;veloppement de vaccins humains ont &eacute;t&eacute; compar&eacute;s aux anciens DCs. monocytes/macrophages d&eacute;riv&eacute;s vivo ont pr&eacute;domin&eacute; dans la moelle osseuse (BM) et le sang. DCs my&eacute;lo&iuml;des (CAM) &eacute;taient pr&eacute;sents dans tous les tissus test&eacute;s et &eacute;taient plus fortement repr&eacute;sent&eacute;s que plasmacytoides DCs (PDC). Comme dans la peau humaine, Langerhans (LCs) des cellules r&eacute;sident exclusivement dans l&#39;&eacute;piderme de macaque, exprimant CD11c, niveaux &eacute;lev&eacute;s de CD1a et langerin (CD207). La plupart des sous-ensembles DC &eacute;taient dou&eacute;s avec les combinaisons tissu-sp&eacute;cifique du SDRP. DCs g&eacute;n&eacute;r&eacute;s &agrave; partir de BM CD34(+) cellules (CD34-CD) &eacute;taient h&eacute;t&eacute;rog&egrave;nes dans le ph&eacute;notype. CD34-DCs partagent des propri&eacute;t&eacute;s (diff&eacute;renciation et PRR) DCs dermiques et &eacute;pidermiques. Apr&egrave;s injection dans les macaques, CD34-DCs exprimer VIH-Gag induite par des cellules sp&eacute;cifiques Gag CD4 + et CD8 T production d&#39;IFN-&gamma;, TNF-&alpha;, MIP-1&beta; ou IL-2. Chez les animaux &eacute;lev&eacute;s ayant r&eacute;pondu au questionnaire, le nombre de cellules T CD8 polyfonctionnels augmente avec le nombre d&#39;injections de rappel. Ce vaccin DC strat&eacute;gie suscit&eacute; immunitaire r&eacute;ponses pertinentes pour les sous-ensembles DC generated in vitro.

Cellules dendritiques d&eacute;riv&eacute;es CD34 transfect&eacute;es ex vivo avec VIH-Gag ARNm induisent des r&eacute;ponses de lymphocytes de polyfonctionnels chez les primates non humains.

Die zentrale Rolle der DCs b&uuml;rgerrechtlichen Immunantworten f&uuml;hrte zu ihrer Verwendung als Impfstoff Vektoren. Allerdings betont die Beziehung zwischen DC Teilmengen Antigen-Pr&auml;sentation beteiligt und den Typ des Gender Immunantworten f&uuml;r die Charakterisierung der DCS in-vitro generierten. Die Ph&auml;notypen der Gewebe-abgeleitet von APCs aus einem Cynomolgus Macaque Modell f&uuml;r menschliche Impfstoffentwicklung wurden verglichen mit Ex Vivo abgeleitete DCs. Monozyte/Makrophagen in Knochenmark (BM) und Blut vorherrschten. Myeloische DCs (MDC) in allen getesteten Geweben anwesend waren und waren h&ouml;her als Plasmacytoid DCs (pDCs) vertreten. Wie menschliche Haut, Langerhans-Zellen (LCs) ausschlie&szlig;lich in der Epidermis Makaken, residierte in positive CD11c, hohe CD1a und Langerin (CD207). Die meisten DC-Teilmengen wurden ausgestattet mit Gewebe-spezifischen Kombinationen von PRRs. DCs CD34(+) BM erzeugten Zellen (CD34-DCs) waren heterogen Ph&auml;notyp. CD34-DCs gemeinsame Eigenschaften (Differenzierung und PRR) dermalen und epidermalen DCS. Nach der Injektion in Makaken, CD34-DCs Ausdr&uuml;cken HIV-Gag Gag-spezifische CD4(+) und CD8(+) T-Zellen, die Produktion von IFN-&gamma;, TNF-&alpha;, MIP-1&beta; oder Il induziert. Hohe antwortende Tiere erh&ouml;ht die Zahl der multifunktionalen CD8(+) T-Zellen mit der Anzahl der Booster-Injektionen. Diese DC-basierten Impfstoff Strategie entlockt Immunantworten relevant f&uuml;r die DC-bezogenen generiert, in-vitro.

CD34-abgeleitete dendritische Zellen, die ex Vivo mit HIV-Gag mRNA transfected induzieren multifunktionalen T-Zell Reaktionen in nicht-menschlichen Primaten.

Il ruolo di controller di dominio in avvio di risposte immunitarie condotto al loro uso come vettori di vaccino. Tuttavia, il rapporto tra sottoinsiemi DC coinvolti nella presentazione dell&#39;antigene e il tipo di risposta immunitaria raccolse ha sottolineato la necessit&agrave; per la caratterizzazione dei controller di dominio generato in vitro. I fenotipi di APC tessuto-derivate da un modello di macaco cynomolgus per lo sviluppo del vaccino umano sono stati confrontati con ex vivo-derivato DCs. monociti/macrofagi predominavano nel midollo osseo (BM) e nel sangue. DCs mieloide (MDC) erano presenti in tutti i tessuti testati e pi&ugrave; altamente sono stati rappresentati rispetto plasmacytoid DCs (pDCs). Come nella pelle umana, Langerhans cells (LCs) risiedeva esclusivamente nell&#39;epidermide macaco, esprimendo CD11c, alti livelli di CD1a e langerina (CD207). La maggior parte dei sottoinsiemi di DC sono stati dotati con tessuto-specifiche combinazioni di PRRs. DCs generati da BM CD34(+) cellule (CD34-DCs) erano eterogenee nel fenotipo. Propriet&agrave; (differenziazione e PRR) del derma e dell&#39;epidermide DCs condivise CD34-DCs. Dopo iniezione nei macachi, CD34-DCs esprimendo HIV-Gag Gag specifici CD4(+) e cellule T cellule producono IFN-&gamma;, TNF-&alpha;, MIP-1 &beta; o IL-2 indotte. In alti rispondenti animali, i numeri delle cellule cellule T polifunzionale aumentato con il numero di iniezioni di richiamo. Questo vaccino basato su DC strategia ha suscitato risposte immunitarie rilevanti per i sottoinsiemi DC generati in vitro.

Cellule dendritiche derivate CD34 transfected ex vivo con HIV-Gag mRNA inducono risposte delle cellule T polifunzionale in nonhuman primates.

&#x514D;&#x75AB;&#x53CD;&#x5FDC;&#x3092;&#x958B;&#x59CB;&#x3059;&#x308B;&#x3001;&#x6975;&#x3081;&#x3066;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x306E; Dc &#x306E;&#x4F7F;&#x7528;&#x3092;&#x30EF;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x306E;&#x30D9;&#x30AF;&#x30C8;&#x30EB;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x5C0E;&#x3044;&#x305F;&#x3002;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;Dc &#x7279;&#x6027;&#x3092; in vitro &#x751F;&#x6210;&#x306E; DC &#x30B5;&#x30D6;&#x30BB;&#x30C3;&#x30C8; &#x30D7;&#x30EC;&#x30BC;&#x30F3;&#x30C6;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x6297;&#x539F;&#x306E;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3068;&#x8A98;&#x767A;&#x306E;&#x514D;&#x75AB;&#x5FDC;&#x7B54;&#x306E;&#x7A2E;&#x985E;&#x306E;&#x95A2;&#x4FC2;&#x306E;&#x5FC5;&#x8981;&#x6027;&#x3092;&#x5F37;&#x8ABF;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x7D44;&#x7E54;&#x7531;&#x6765; Apc &#x30EF;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x958B;&#x767A;&#x306E;&#x30AB;&#x30CB;&#x30AF;&#x30A4;&#x30B6;&#x30EB; &#x30B5;&#x30EB; &#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x306E;&#x8868;&#x73FE;&#x3068;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3057;&#x305F;&#x751F;&#x4F53;&#x7531;&#x6765; dc &#x5358;&#x7403;/&#x30DE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8;&#x512A;&#x52E2;&#x9AA8;&#x9AC4; (BM) &#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x8840;&#x306E;&#x5143;&#x3002;&#x9AA8;&#x9AC4;&#x6027; Dc (Mdc) &#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306E;&#x30C6;&#x30B9;&#x30C8;&#x7D44;&#x7E54;&#x306B;&#x5B58;&#x5728;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x3057;&#x3001;&#x5F62;&#x8CEA;&#x7D30;&#x80DE;&#x69D8; Dc (Pdc) &#x3088;&#x308A;&#x3082;&#x3063;&#x3068;&#x975E;&#x5E38;&#x306B;&#x8868;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x76AE;&#x819A;&#x3001;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B2;&#x30EB;&#x30CF;&#x30F3;&#x30B9;&#x7D30;&#x80DE; (Lc) &#x6392;&#x4ED6;&#x7684;&#x30B5;&#x30EB;&#x306E;&#x8868;&#x76AE;&#x3067;&#x306F;, &#x5C45;&#x4F4F;&#x3068; CD11c &#x306F; tgf-b &#x3068; langerin (CD207) &#x306E;&#x9AD8;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3092;&#x8868;&#x73FE;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x307B;&#x3068;&#x3093;&#x3069;&#x306E; DC &#x30B5;&#x30D6;&#x30BB;&#x30C3;&#x30C8;&#x304C;&#x6075;&#x307E;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x7D44;&#x7E54;&#x7279;&#x7570;&#x7D44;&#x307F;&#x5408;&#x308F;&#x305B; CD34(+) BM &#x304B;&#x3089;&#x751F;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x305F; PRRs&#x3002; Dc &#x306E;&#x7D30;&#x80DE; (cd34 &#x967D;&#x6027; Dc&#xFF09; &#x8868;&#x73FE;&#x578B;&#x306E;&#x7570;&#x6A5F;&#x7A2E;&#x6DF7;&#x5728;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;Cd34 &#x967D;&#x6027; Dc &#x7279;&#x6027; (&#x5206;&#x5316;&#x3068; PRR) &#x771F;&#x76AE;&#x3068;&#x8868;&#x76AE;&#x306E; Dc &#x306E;&#x5171;&#x6709;&#x3002;&#x30CB;&#x30DB;&#x30F3;&#x30B6;&#x30EB;, cd34 &#x967D;&#x6027; Dc &#x6CE8;&#x5165;&#x5F8C; HIV &#x30AE;&#x30E3;&#x30B0;&#x3092;&#x8868;&#x73FE;&#x3059;&#x308B;&#x8A98;&#x767A;&#x30AE;&#x30E3;&#x30B0;&#x56FA;&#x6709; CD4(+) &#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x3060;&#x308D;&#x3046;&#x3053;&#x306E; T &#x7D30;&#x80DE;&#x306E; IFN-&gamma;&#x3001;TNF-&alpha;&#x3001;MIP il-1 &#x307E;&#x305F;&#x306F; IL-2 &#x3092;&#x751F;&#x7523;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x9AD8;&#x5FDC;&#x7B54;&#x306E;&#x52D5;&#x7269;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x591A;&#x5B98;&#x80FD;&#x6027;&#x3060;&#x308D;&#x3046;&#x3053;&#x306E; T &#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x6570;&#x306F;&#x30D6;&#x30FC;&#x30B9;&#x30BF;&#x30FC;&#x6CE8;&#x5C04;&#x306E;&#x6570;&#x3092;&#x5897;&#x52A0;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x306E; DC &#x306E;&#x30B5;&#x30D6;&#x30BB;&#x30C3;&#x30C8;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x3059;&#x308B; DC &#x30EF;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x8A98;&#x767A;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x6226;&#x7565;&#x306E;&#x514D;&#x75AB;&#x5FDC;&#x7B54;&#x306F; in vitro &#x3067;&#x751F;&#x6210;&#x3002;

Ex vivo HIV &#x30AE;&#x30E3;&#x30B0; mRNA &#x304C;&#x5C0E;&#x5165; CD34 &#x7531;&#x6765;&#x6A39;&#x72B6;&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x3001;&#x30D2;&#x30C8;&#x4EE5;&#x5916;&#x306E;&#x970A;&#x9577;&#x985E;&#x306E;&#x591A;&#x5B98;&#x80FD;&#x6027; T &#x7D30;&#x80DE;&#x53CD;&#x5FDC;&#x3092;&#x8A98;&#x767A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

Dc&#xC758; &#xC911;&#xCD94;&#xC801;&#xC778; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xC2DC;&#xC791; &#xD558;&#xB294; &#xBA74;&#xC5ED; &#xBC18;&#xC751;&#xC5D0; &#xBC31;&#xC2E0; &#xBCA1;&#xD130;&#xB85C; &#xC0AC;&#xC6A9;&#xC744; &#xC8FC;&#xB3C4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, &#xC774;&#xB04C;&#xB824; &#xBA74;&#xC5ED; &#xBC18;&#xC751;&#xC758; &#xC720;&#xD615;&#xACFC; DC &#xD558;&#xC704; &#xD56D; &#xC6D0; &#xD504;&#xB808; &#xC820; &#xD14C;&#xC774; &#xC158;&#xC5D0; &#xCC38;&#xC5EC;&#xC758; &#xAD00;&#xACC4; Dc &#xD2B9;&#xC131; &#xC0DD;&#xC131; &#xCCB4; &#xC678;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD544;&#xC694;&#xB97C; &#xBC11;&#xC904;&#xC774;. &#xC778;&#xAC04; &#xBC31;&#xC2E0; &#xAC1C;&#xBC1C;&#xC744; &#xC704;&#xD55C; cynomolgus &#xC6D0;&#xC22D;&#xC774; &#xBAA8;&#xB378;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC870;&#xC9C1; &#xD30C;&#xC0DD; Apcs&#xC758; &#xACE0;&#xAE30;&#xC5D0; &#xBE44;&#xD574; &#xD588;&#xB2E4; &#xC804; &#xACE8; (BM)&#xACFC; &#xD608;&#xC561;&#xC5D0; predominated vivo &#xD30C;&#xC0DD; &#xB41C; Dc. Monocyte/&#xB300; &#xC2DD; &#xC138;&#xD3EC;. &#xACE8;&#xC218;&#xC131; DCs (mDCs) &#xBAA8;&#xB4E0; &#xC2DC;&#xD5D8; &#xB41C; &#xC870;&#xC9C1;&#xC5D0; &#xC874;&#xC7AC; &#xD588;&#xB2E4; &#xBC0F; plasmacytoid Dc (Pdc) &#xBCF4;&#xB2E4; &#xB354; &#xB192;&#xAC8C; &#xD45C;&#xD604; &#xD588;&#xB2E4;. Langerhans &#xC138;&#xD3EC; (LCs) &#xC6D0;&#xC22D;&#xC774; &#xD45C; &#xD53C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB3C5;&#xC810;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xAC70;&#xC8FC;, &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xD53C;&#xBD80; &#xCC98;&#xB7FC; CD11c, CD1a &#xBC0F; langerin (CD207) &#xB192;&#xC740; &#xC218;&#xC900;&#xC758; &#xD45C;&#xD604;. &#xB300;&#xBD80;&#xBD84;&#xC758; DC &#xD558;&#xC704; &#xC9D1;&#xD569; &#xBD80;&#xC5EC; &#xD588;&#xB2E4; &#xC870;&#xC9C1; &#xD2B9;&#xC815; &#xC870;&#xD569;&#xC758; &#xD638;&#xD761;&#xAE30;. Dc CD34(+) BM&#xC5D0;&#xC11C; &#xC0DD;&#xC131; &#xB41C; &#xC138;&#xD3EC; (CD34-DCs) &#xD588;&#xB2E4; &#xD45C;&#xD604; &#xD615;&#xC5D0; &#xB2E4;&#xB978; &#xC720;&#xD615;&#xC758;. CD34-Dc &#xACF5;&#xC720; &#xC18D;&#xC131; (&#xCC28;&#xBCC4;&#xD654; &#xBC0F; PRR) &#xD53C;&#xBD80;&#xC640; &#xC0C1;&#xD53C; Dc&#xC758;. &#xC6D0;&#xC22D;&#xC774;, CD34-Dc&#xB85C; &#xC8FC;&#xC785; &#xD6C4; IFN-&gamma;, TNF-&alpha;, MIP 1&beta; &#xB610;&#xB294; &#xC77C;&#xB9AC;&#xB178;&#xC774;-2&#xB97C; &#xC0DD;&#xC0B0; &#xD558;&#xB294; &#xAC1C; &#xADF8; &#xD2B9;&#xC815; CD4(+)&#xC640; CD8(+) T &#xC138;&#xD3EC; &#xC720;&#xB3C4; HIV-&#xAC1C; &#xADF8;&#xB97C; &#xD45C;&#xD604;. &#xB192;&#xC740; &#xC751;&#xB2F5; &#xB3D9;&#xBB3C; polyfunctional CD8(+) T &#xC138;&#xD3EC; &#xC218;&#xAC00; &#xBD80;&#xC2A4;&#xD130; &#xC8FC;&#xC0AC; &#xD69F;&#xC218; &#xC99D;&#xAC00;. &#xC774; DC &#xAE30;&#xBC18; &#xBC31;&#xC2E0; &#xC804;&#xB7B5; elicited &#xBA74;&#xC5ED; &#xBC18;&#xC751; &#xAD00;&#xB828; DC &#xD558;&#xC704; &#xC9D1;&#xD569; &#xC0DD;&#xC131; &#xCCB4; &#xC678;.

&#xC5D0;&#xC774;&#xC988;-&#xAC1C; &#xADF8; Mrna&#xC640; &#xBE44;&#xBCF4; &#xC804; &#xD398;&#xB294; CD34 &#xC720;&#xB798; &#xC218;&#xC9C0;&#xC0C1; &#xC138;&#xD3EC; nonhuman &#xC601;&#xC7A5;&#xB958;&#xC5D0;&#xC11C; polyfunctional T &#xC138;&#xD3EC; &#xBC18;&#xC751;&#xC744; &#xC720;&#xB3C4; &#xD55C;&#xB2E4;.

El papel crucial de DCs en la iniciaci&oacute;n de las respuestas inmunitarias conducido a su uso como vectores de vacunas. Sin embargo, la relaci&oacute;n entre subconjuntos de DC involucrados en la presentaci&oacute;n del ant&iacute;geno y el tipo de inmunorespuestas provoc&oacute; subray&oacute; la necesidad para la caracterizaci&oacute;n de los controladores de dominio generados in vitro. Los fenotipos de APC tejido derivado de un modelo de macacos cangrejeros para el desarrollo de vacunas humanas fueron comparados con ex DCs. monocitos/macr&oacute;fagos derivados de vivo predomin&oacute; en sangre y m&eacute;dula &oacute;sea (Mo). DCs mieloides (MDC) estaban presentes en todos los tejidos probados y representaron m&aacute;s altamente que plasmacytoid DCs (PDC). Como en la piel humana, Langerhans c&eacute;lulas (LCs) resid&iacute;an exclusivamente en la epidermis de Macaco, expresando CD11c, altos niveles de CD1a y langerin (CD207). Subconjuntos de DC la mayor&iacute;a fueron dotados con combinaciones de tejidos espec&iacute;ficos de PRRs. DCs generados a partir de CD34(+) BM c&eacute;lulas (CD34-DCs) fueron heterog&eacute;neas en fenotipo. CD34-DCs comparten propiedades (diferenciaci&oacute;n y PRR) de DCs d&eacute;rmicos y epid&eacute;rmicos. Despu&eacute;s de la inyecci&oacute;n en macacos, CD34-DCs expresando VIH-Gag inducida Gag espec&iacute;fico CD4 y CD8 T c&eacute;lulas productoras de IFN-&gamma;, TNF-&alpha;, MIP-1&beta; o IL-2. En altos animales respondieron a esta pregunta, el n&uacute;mero de c&eacute;lulas T CD8 de polifuncional aument&oacute; con el n&uacute;mero de inyecciones de refuerzo. Esta vacuna basada en DC estrategia suscit&oacute; inmunorespuestas pertinentes a los subconjuntos de DC generados in vitro.

C&eacute;lulas dendr&iacute;ticas CD34 transfectadas ex vivo con VIH-Gag mRNA inducen respuestas de c&eacute;lulas T polifuncional en primates no humanos.

Gabrielle Romain

Department of Chemical and Biomolecular Engineering

University of Houston

Quantitative High-throughput Single-cell Cytotoxicity Assay For T Cells

Gabrielle Romain

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University of Houston

Quantitative High-throughput Single-cell Cytotoxicity Assay For T Cells

Department of Chemical and Biomolecular Engineering