Antigens Protected Functional Red Blood Cells By The Membrane Grafting Of Compact Hyperbranched Polyglycerols

Red blood cell (RBC) transfusion is vital for the treatment of a number of acute and chronic medical problems such as thalassemia major and sickle cell ...

University of British Columbia 

&#x4E3A;&#x4E86;&#x6F84;&#x6E05;&#x4E0E;&#x8840;&#x6DB2;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8102;&#x8D28;&#x4F53;&#x7684;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x9879;&#x7814;&#x7A76;&#x5BA1;&#x67E5;&#x8303;&#x56F4;&#x7684;&#x9762;&#x524D;&#x5728;&#x7F13;&#x51B2;&#x533A;&#x6216;&#x8840;&#x6D46; &#xFF1B; &#x51C0;&#x5316;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x8840;&#x6DB2;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6210;&#x5206;&#x8102;&#x8D28;&#x4F53;&#x7684;&#x884C;&#x4E3A;&#x6216;&#x5168;&#x8840;&#xFF0C;&#x6216;&#x5728;&#x5C0F;&#x9F20;&#x4F53;&#x5185;&#x3002;&#x8102;&#x8D28;&#x4F53;&#xFF0C;&#x6807;&#x8BB0;&#x7528;&#x4EB2;&#x6C34;&#x7684;&#x8367;&#x5149;&#xFF0C;&#x7FA7;&#x57FA;&#x8367;&#x5149;&#x7D20; (CF)&#xFF0C;&#x6216;&#x7528;&#x819C;&#x6263;&#x62BC; R18 &#x6216; FITC &#x6807;&#x8BB0;&#x7684;&#x78F7;&#x8102;&#xFF0C;&#x559C;&#x5FE7;&#x53C2;&#x534A;&#x7684;&#x8840;&#x6DB2;&#x7EC6;&#x80DE;&#x548C;&#x8840;&#x6DB2;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4EBA;&#x53E3;&#x4E2D; fluorochromes &#x7684;&#x5916;&#x89C2;&#x7531;&#x6D41;&#x5F0F;&#x7EC6;&#x80DE;&#x672F;&#x76D1;&#x6D4B;&#x3002;&#x4E0D;&#x8BBA;&#x6210;&#x5206;&#xFF0C;&#x6709;&#x6216;&#x6CA1;&#x6709; poly(ethylene glycol)&#xFF0C;&#x6240;&#x6709;&#x7C7B;&#x578B;&#x7684;&#x8102;&#x8D28;&#x4F53;&#x90FD;&#x53D1;&#x73B0;&#x8FC5;&#x901F;&#x548C;&#x5242;&#x91CF;&#x4F9D;&#x8D56;&#x6027;&#x4E0E;&#x7EA2;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3001; &#x767D;&#x7EC6;&#x80DE;&#x548C;&#x8840;&#x5C0F;&#x677F;&#xFF0C;&#x5728;&#x4F53;&#x5916;&#x548C;&#x4F53;&#x5185;&#x8FDB;&#x884C;&#x4EA4;&#x4E92;&#x3002;&#x53D1;&#x751F;&#x8FD9;&#x540C;&#x6837;&#x5B58;&#x5728;&#x548C;&#x7F3A;&#x4E4F;&#x8840;&#x6D46;&#x86CB;&#x767D;&#x548C;&#x529F;&#x80FD;&#x9176;&#x6805;&#xFF0C;&#x5EFA;&#x8BAE;&#x4E3B;&#x8981;&#x8868;&#x9762;&#x7684;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x662F; opsonization &#x72EC;&#x7ACB;&#x548C;&#x4E0E;&#x8102;&#x8D28;&#x4F53;&#x8840;&#x6DB2;&#x7EC6;&#x80DE;&#x878D;&#x5408;&#x662F;&#x4E00;&#x81F4;&#x7684;&#x3002;

&#x8102;&#x8D28;&#x4F53;&#x548C;&#x8840;&#x6DB2;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF1A; &#x6D41;&#x52A8;&#x6D41;&#x5F0F;&#x7EC6;&#x80DE;&#x672F;&#x7814;&#x7A76;&#x3002;

To clarify the interactions of liposomes with blood cells, this study examined the behaviour of liposomes of a range of compositions in the presence of purified human blood cells in buffer or plasma; or in whole blood, or in mice in vivo. Liposomes, labeled with the hydrophilic fluorochrome, carboxy fluorescein (CF), or with membrane-sequestering R18 or FITC-labeled phospholipids, were mixed with blood cells and the appearance of the fluorochromes in the blood cell population was monitored by flow cytometry. Irrespective of composition, with or without poly(ethylene glycol), all types of liposomes were found to interact rapidly and dose-dependently with red cells, leukocytes and platelets, both in vitro and in vivo. This took place equally in the presence and the absence of plasma proteins and functional enzyme cascades, suggesting that the prime facie interaction is opsonization-independent and is consistent with liposome-blood cell fusion.

Liposomes and blood cells: a flow cytometric study.

Afin de clarifier les interactions des liposomes avec les cellules du sang, cette &eacute;tude examine le comportement des liposomes d&#39;un &eacute;ventail de compositions en pr&eacute;sence des cellules sanguines humaines purifi&eacute;es en m&eacute;moire tampon ou plasma ; ou dans le sang entier, ou chez les souris in vivo. Liposomes, &eacute;tiquet&eacute;s avec le fluorochrome hydrophile, fluoresc&eacute;ine carboxy (CF), ou s&eacute;questration membrane R18 ou phospholipides marqu&eacute;s FITC, ont &eacute;t&eacute; m&eacute;lang&eacute;s avec des cellules sanguines et l&#39;apparition des fluorochromes dans la population de cellules sanguines a &eacute;t&eacute; suivie par cytom&eacute;trie en flux. Quelle que soit la composition, avec ou sans poly(ethylene glycol), tous les types de liposomes ont &eacute;t&eacute; trouv&eacute;s d&#39;interagir rapidement et de mani&egrave;re dose-d&eacute;pendante avec des &eacute;rythrocytes, des leucocytes et des plaquettes, in vitro et in vivo. Cela a eu lieu &eacute;galement en pr&eacute;sence et en l&#39;absence de prot&eacute;ines plasmatiques et les cascades d&#39;enzyme fonctionnelle, sugg&eacute;rant que l&#39;interaction de prime facie est ind&eacute;pendant de l&#39;opsonisation et concorde avec la fusion de cellules de sang de liposomes.

Liposomes et cellules sanguines : une &eacute;tude de cytom&eacute;trie en flux de flux.

Die Interaktionen von Liposomen mit Blutzellen zu kl&auml;ren, untersucht diese Studie des Verhaltens von Liposomen eine Reihe von Kompositionen in Anwesenheit von gereinigtem menschliche Blutzellen in Puffer oder Plasma; in Vollblut oder bei M&auml;usen in-vivo. Liposomen, beschriftet mit der hydrophilen Fluorochrom, Carboxy Fluoreszein (CF), oder mit Membran-Sequestrierung R18 oder FITC-beschrifteten Phospholipide, vermischt mit Blutzellen und die Darstellung der Fluorochrom in der Blutk&ouml;rperchen Bev&ouml;lkerung wurde durch Durchflusszytometrie &uuml;berwacht. Unabh&auml;ngig von der Zusammensetzung, mit oder ohne Poly(ethylene glycol) fanden sich alle Arten von Liposomen, um rasch und Dosis-Abh&auml;ngigkeit mit Erythrozyten, Leukozyten und Thrombozyten, in vitro und in vivo zu interagieren. Dies geschah ebenso in die Anwesenheit und Abwesenheit von Plasmaproteine und funktionale Enzym-Kaskaden, darauf hindeutet, dass die vorrangige Facie-Interaktion Opsonization unabh&auml;ngig ist und steht im Einklang mit Liposomen-Blut Zellfusion.

Liposomen und Blutzellen: eine flie&szlig;en Cytometric Studie.

Per chiarire le interazioni dei liposomi con le cellule del sangue, questo studio ha esaminato il comportamento di liposomi di una gamma di composizioni in presenza di cellule del sangue umane purificate nel buffer o plasma; o nel sangue intero, o nel topo in vivo. Liposomi, etichettati con il fluorocromo idrofilo, carbossi fluorescina (CF), o con membrana-sequestrante R18 o marcato con FITC fosfolipidi, sono stati mescolati con le cellule del sangue e l&#39;aspetto dei fluorocromi nella popolazione delle cellule del sangue &egrave; stato monitorato tramite flusso cytometry. A prescindere dalla composizione, con o senza poly(ethylene glycol), tutti i tipi di liposomi sono stati trovati per interagire rapidamente e dose-dipendente con eritrociti, leucociti e piastrine sia in vitro che in vivo. Questo avveniva ugualmente in presenza ed assenza di enzima funzionale cascate, suggerendo che l&#39;interazione prima facie &egrave; opsonizzazione-indipendente ed &egrave; coerenza con la fusione cellulare liposoma-sangue e proteine plasmatiche.

Liposomi e le cellule del sangue: uno studio di cytometric di flusso.

&#x8840;&#x6DB2;&#x7D30;&#x80DE;&#x3068;&#x30EA;&#x30DD;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0;&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3092;&#x660E;&#x78BA;&#x306B;&#x3059;&#x308B;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x30D0;&#x30C3;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x30D7;&#x30E9;&#x30BA;&#x30DE;&#x7CBE;&#x88FD;&#x3072;&#x3068;&#x8840;&#x6DB2;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5B58;&#x5728;&#x4E0B;&#x3067;&#x306E;&#x7D44;&#x6210;&#x7269;&#x306E;&#x7BC4;&#x56F2;&#x306E;&#x30EA;&#x30DD;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0;&#x306E;&#x6319;&#x52D5;&#x3092;&#x691C;&#x8A0E;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x5168;&#x8840;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9; in vivo&#x3002;&#x89AA;&#x6C34;&#x6027;&#x306E;&#x87A2;&#x5149;&#x8272;&#x7D20;&#x3001;&#x30AB;&#x30EB;&#x30DC;&#x30AD;&#x30B7; &#x30D5;&#x30EB;&#x30AA;&#x30EC;&#x30BB;&#x30A4;&#x30F3; (CF) &#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x819C;&#x9694;&#x96E2; R18 &#x3084;&#x30EA;&#x30F3;&#x8102;&#x8CEA;&#x3001;FITC &#x6A19;&#x8B58;&#x6A19;&#x8B58;&#x30EA;&#x30DD;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0;&#x8840;&#x7D30;&#x80DE;&#x3068;&#x6DF7;&#x5408;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3001;&#x8840;&#x30BB;&#x30EB;&#x4EBA;&#x53E3;&#x306E;&#x87A2;&#x5149;&#x8272;&#x7D20;&#x306E;&#x5916;&#x89B3;&#x30D5;&#x30ED;&#x30FC;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x30E1;&#x30C8;&#x30EA;&#x30FC;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x76E3;&#x8996;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x7D44;&#x6210;&#x3001;poly(ethylene glycol) &#x306E;&#x6709;&#x7121;&#x306B;&#x95A2;&#x4FC2;&#x306A;&#x304F;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x578B;&#x30EA;&#x30DD;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0;&#x306E;&#x8D64;&#x8840;&#x7403;&#x3001;&#x767D;&#x8840;&#x7403;&#x3001;&#x8840;&#x5C0F;&#x677F;&#x3001;in vitro &#x304A;&#x3088;&#x3073; in vivo &#x3067;&#x6025;&#x901F;&#x306B;&#x7528;&#x91CF;&#x4F9D;&#x5B58;&#x7684;&#x306B;&#x5BFE;&#x8A71;&#x3059;&#x308B;&#x304C;&#x898B;&#x3064;&#x304B;&#x308A;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3067;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x306F;&#x3001;&#x5B58;&#x5728;&#x3068;&#x8840;&#x6F3F;&#x86CB;&#x767D;&#x3068;&#x30D7;&#x30E9;&#x30A4;&#x30E0;&#x4E00;&#x5FDC;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x304C;&#x30AA;&#x30D7;&#x30BD;&#x30CB;&#x30F3;&#x5316;&#x306B;&#x4F9D;&#x5B58;&#x3057;&#x306A;&#x3044;&#x3057;&#x3001;&#x30EA;&#x30DD;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0;&#x8840;&#x6DB2;&#x7D30;&#x80DE;&#x878D;&#x5408;&#x3068;&#x4E00;&#x8CAB;&#x6027;&#x306E;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x30D5;&#x30A1;&#x30F3;&#x30AF;&#x30B7;&#x30E7;&#x30CA;&#x30EB;&#x9175;&#x7D20;&#x30AB;&#x30B9;&#x30B1;&#x30FC;&#x30C9;&#x306E;&#x4E0D;&#x5728;&#x3067;&#x5747;&#x7B49;&#x306B;&#x884C;&#x308F;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;

&#x30EA;&#x30DD;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0;&#x3068;&#x8840;&#x6DB2;&#x7D30;&#x80DE;: &#x6D41;&#x308C;&#x30D5;&#x30ED;&#x30FC;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x30E1;&#x30C8;&#x30EA;&#x30FC;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x7814;&#x7A76;&#x3002;

&#xD53C; &#xC140; &#xB9AC; &#xC0C1;&#xD638;&#xB97C; &#xBA85;&#xD655; &#xD558; &#xAC8C;&#xC774; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xC870;&#xC0AC; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xBC84;&#xD37C; &#xB610;&#xB294; &#xD50C;&#xB77C;&#xC988;&#xB9C8;; &#xC21C;&#xD654; &#xB41C; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xD608;&#xC561; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC874;&#xC7AC;&#xB294; &#xC791;&#xACE1;&#xC758; &#xB9AC;&#xC758; &#xD589;&#xB3D9; &#xC804;&#xCCB4; &#xD608;&#xC561; &#xB610;&#xB294; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC870;&#xAC74;. &#xCE5C;&#xC218;&#xC131; &#xD615;&#xAD11; &#xC0C9;&#xC18C;, carboxy fluorescein (CF), &#xB610;&#xB294; &#xB9C9; sequestering R18 &#xB610;&#xB294; FITC &#xD45C;&#xC2DC; &#xB41C; &#xC778;&#xC9C0;&#xC9C8; &#xB9AC; &#xD608;&#xC561; &#xC138;&#xD3EC;&#xC640; &#xD63C;&#xD569; &#xD588;&#xB2E4; &#xBC0F; &#xD608;&#xC561; &#xC138;&#xD3EC; &#xC778;&#xAD6C;&#xC5D0; &#xC788;&#xB294; &#xD615;&#xAD11;&#xC758; &#xBAA8;&#xC591;&#xC744; cytometry&#xB85C; &#xBAA8;&#xB2C8;&#xD130;&#xB9C1; &#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC870;&#xC131;, poly(ethylene glycol), &#xC720;&#xBB34;&#xC5D0; &#xAD00;&#xACC4; &#xC5C6;&#xC774; &#xBAA8;&#xB4E0; &#xC885;&#xB958;&#xC758; &#xB9AC;&#xB294; &#xBD89;&#xC740; &#xC138;&#xD3EC;, &#xBC31;&#xD608;&#xAD6C;&#xC640; &#xD608;&#xC18C;&#xD310;, &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC678; &#xBC0F; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC870;&#xAC74; &#xC2E0;&#xC18D; &#xD558; &#xACE0; &#xBCF5;&#xC6A9;&#xB7C9;&#xC5D0; &#xB3C5;&#xB9BD;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC791;&#xC6A9;&#xC744; &#xBC1C;&#xACAC; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC774; &#xC874;&#xC7AC; &#xD558; &#xACE0; &#xD50C;&#xB77C;&#xC988;&#xB9C8; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xACFC; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC131; &#xD6A8;&#xC18C; &#xACC4;&#xACE1;, &#xC81C;&#xC548; &#xD558;&#xB294; &#xC8FC;&#xC694;&#xD55C; facie &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; opsonization &#xB3C5;&#xB9BD;&#xC801; &#xC774;&#xBA70; liposome &#xD608;&#xC561; &#xC138;&#xD3EC; &#xC735;&#xD569;&#xACFC; &#xC77C;&#xCE58;&#xC758; &#xBD80;&#xC7AC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB3D9;&#xB4F1; &#xD558; &#xAC8C; &#xAC1C;&#xCD5C;&#xB97C; &#xD588;&#xB2E4;.

&#xB9AC; &#xBC0F; &#xD608;&#xC561; &#xC138;&#xD3EC;: &#xD750;&#xB984; cytometric &#xC5F0;&#xAD6C;.

Para aclarar las interacciones de liposomas con las c&eacute;lulas de la sangre, este estudio examin&oacute; el comportamiento de liposomas de una variedad de composiciones en presencia de c&eacute;lulas de sangre humanas purificadas en b&uacute;fer o plasma; en sangre entera, o en ratones in vivo. Liposomas, etiquetados con el fluorocromo hidrof&iacute;lico, carboxy fluoresce&iacute;na (CF), o con R18 secuestradoras de membrana o marcado con FITC fosfol&iacute;pidos, se mezclaron con las c&eacute;lulas de la sangre y la aparici&oacute;n de los fluorocromos en la poblaci&oacute;n de c&eacute;lulas sangu&iacute;neas se control&oacute; mediante citometr&iacute;a de flujo. Independientemente de su composici&oacute;n, con o sin poly(ethylene glycol), se encontraron todo tipo de liposomas para interactuar r&aacute;pidamente y dosis-dependiente con eritrocitos, leucocitos y plaquetas, tanto in vitro como in vivo. Esto tuvo lugar igualmente en la presencia y la ausencia de prote&iacute;nas plasm&aacute;ticas y cascadas de la enzima funcional, lo que sugiere que la interacci&oacute;n de la prima facie es independiente de la opsonizaci&oacute;n y es consistente con la fusi&oacute;n de la c&eacute;lula de sangre liposoma.

Liposomas y c&eacute;lulas de la sangre: un estudio de la citometr&iacute;a de flujo.

&#x6211;&#x4EEC;&#x7814;&#x7A76;&#x4E86;&#x8702;&#x6BD2;&#xFF0C;&#x63D0;&#x53D6;&#x8702;&#x6BD2;&#xFF0C;&#x4F7F;&#x7528;&#x4E09;&#x4E2A;&#x72EC;&#x7ACB;&#x548C;&#x4E92;&#x8865;&#x7684;&#x529E;&#x6CD5;&#x7684;&#x8102;&#x8D28;&#x819C;&#x8F85;&#x52A9;&#x4E24;&#x4EB2;&#x6027;&#x591A;&#x80BD;&#x7684;&#x5438;&#x9644;&#x52A8;&#x529B;&#x5B66;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x63A2;&#x6D4B;&#x6781;&#x6027;&#x540E;&#x80BD;&#x7684; 19Trp &#x7684;&#x7EA6;&#x675F;&#x529B;&#xFF0C;(ii) &#x63D2;&#x5165;&#x6B64;&#x819C;&#x7684; apolar &#x6838;&#x5FC3;&#x4E2D;&#x7684;&#x6B8B;&#x7559;&#x91CF;&#x3001; &#x6D4B;&#x91CF; 19Trp-&#x8367;&#x5149;&#x731D;&#x706D;&#x7684;&#x6EB4;&#x539F;&#x5B50;&#x8102;&#x8D28;&#x9170;&#x57FA;&#x94FE;&#xFF0C;&#x53CA; (iii) &#x6298;&#x53E0;&#x80BD;&#xFF0C;&#x9644;&#x52A0;&#x7684;&#x5706;&#x4E8C;&#x8272; (CD) (i) &#x7684;&#x53D8;&#x5316;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x62A5;&#x544A;&#x7684;&#x80BD;&#x7684;&#x963F;&#x5C14;&#x6CD5;&#x87BA;&#x65CB;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x5176;&#x6298;&#x53E0;&#x63D2;&#x5165;&#x7D27;&#x8026;&#x5408;&#x3002;&#x5BF9;&#x4E8E;&#x6240;&#x6709;&#x8C03;&#x67E5;&#x7684;&#x819C;&#x7CFB;&#x7EDF; (&#x542B;&#x80C6;&#x56FA;&#x9187;&#x3001; &#x542B; phosphoglycerol&#xFF0C;&#x548C;&#x7EAF;&#x5375;&#x78F7;&#x8102;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x53CC;&#x5C42;&#xFF09;&#xFF0C;19Trp &#x7684;&#x6781;&#x6027;&#x7684;&#x51CF;&#x5C11;&#x88AB;&#x53D1;&#x73B0;&#x8981;&#x660E;&#x663E;&#x5FEB;&#x4E8E;&#x4E2D;&#x87BA;&#x65CB;&#x8702;&#x6BD2;&#x7D20;&#x542B;&#x91CF;&#x589E;&#x52A0;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x4ECE;&#x52A8;&#x529B;&#x5B66;&#x7684;&#x89D2;&#x5EA6;&#x6765;&#x770B;&#xFF0C;&#x963F;&#x5C14;&#x6CD5;&#x87BA;&#x65CB;&#x7684;&#x5F62;&#x6210;&#x662F;&#x8702;&#x6BD2;&#x80BD;&#x63D2;&#x5165;&#x7684;&#x7ED3;&#x679C;&#x3002;&#x8702;&#x6BD2;&#x7D20;&#x6298;&#x53E0;&#x7387;&#x88AB;&#x53D1;&#x73B0;&#x53D7;&#x5230;&#x7684;&#x53CC;&#x5C42;&#x8102;&#x8D28;&#x6210;&#x5206;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5EFA;&#x8BAE;&#x8FD9;&#x5B9E;&#x73B0;&#x7531;&#x52A8;&#x529B;&#x5B66;&#x7684;&#x63D2;&#x5165;&#x8C03;&#x5236;&#x3002;&#x8FD9;&#x9879;&#x7814;&#x7A76;&#x62A5;&#x544A;&#x86CB;&#x767D;&#x6E17;&#x900F;&#x548C;&#x6298;&#x53E0;&#xFF0C;&#x5728;&#x4E00;&#x822C;&#x7684;&#x819C;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x6298;&#x53E0;&#x8BA1;&#x5212;&#x65F6;&#x5FC5;&#x987B;&#x8003;&#x8651;&#x7684;&#x4E92;&#x8FDE;&#x4E4B;&#x95F4;&#x5B58;&#x5728;&#x8026;&#x5408;&#x7684;&#x4E00;&#x4E2A;&#x660E;&#x663E;&#x7684;&#x4F8B;&#x5B50;&#x3002;

&#x91C7;&#x53D6;&#x534F;&#x8C03;&#x4E00;&#x81F4;&#x7684;&#x63D2;&#x5165;&#x548C;&#x8702;&#x6BD2;&#x80BD;&#x7684;&#x53CC;&#x5C42;&#x6298;&#x53E0;&#x7684;&#x52A8;&#x529B;&#x5B66;&#x7684;&#x8102;&#x8D28;&#x6210;&#x5206;&#x7684;&#x5F71;&#x54CD;&#x3002;

We have examined the kinetics of the adsorption of melittin, a secondary amphipathic peptide extracted from bee venom, on lipid membranes using three independent and complementary approaches. We probed (i) the change in the polarity of the 19Trp of the peptide upon binding, (ii) the insertion of this residue in the apolar core of the membrane, measuring the 19Trp-fluorescence quenching by bromine atoms attached on lipid acyl chains, and (iii) the folding of the peptide, by circular dichroism (CD). We report a tight coupling of the insertion of the peptide with its folding as an alpha-helix. For all the investigated membrane systems (cholesterol-containing, phosphoglycerol-containing, and pure phosphocholine bilayers), the decrease in the polarity of 19Trp was found to be significantly faster than the increase in the helical content of melittin. Therefore, from a kinetics point of view, the formation of the alpha-helix is a consequence of the insertion of melittin. The rate of melittin folding was found to be influenced by the lipid composition of the bilayer and we propose that this was achieved by the modulation of the kinetics of insertion. The study reports a clear example of the coupling existing between protein penetration and folding, an interconnection that must be considered in the general scheme of membrane protein folding.

Influence of the lipid composition on the kinetics of concerted insertion and folding of melittin in bilayers.

Melittin, 3 &#xAC1C;&#xC758; &#xB3C5;&#xB9BD;&#xC801;&#xC774; &#xACE0; &#xC0C1;&#xD638; &#xBCF4;&#xC644;&#xC801;&#xC778; &#xC811;&#xADFC;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xC9C0;&#xC9C8; &#xB9C9;&#xC5D0; &#xBC8C; &#xB3C5;&#xC5D0;&#xC11C; &#xCD94;&#xCD9C;&#xD55C; &#xBCF4;&#xC870; amphipathic &#xD3A9; &#xD2F0; &#xB4DC;&#xC758; &#xD761;&#xCC29; &#xC18D;&#xB3C4; &#xB860;&#xC744; &#xC0B4;&#xD3B4;&#xBCF4;&#xC558;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC; &#xC870;&#xC0AC; (i) &#xBC14;&#xC778;&#xB529;, (ii) &#xB9C9;&#xC758; apolar &#xCF54;&#xC5B4;&#xC5D0;&#xC774; &#xCC0C; &#xAEBC;&#xC774; &#xAE30;&#xC758; &#xC0BD;&#xC785;, &#xBE0C;&#xB86C; &#xC6D0;&#xC790; &#xC6D0;&#xD615; &#xC591;&#xC0C9;&#xC131; (CD)&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC9C0;&#xC9C8; acyl &#xCCB4;&#xC778; &#xBC0F; (iii) &#xD3A9; &#xD2F0; &#xB4DC;, &#xC811;&#xB294;&#xC5D0; &#xC5F0;&#xACB0; &#xD558; &#xC5EC; &#xD01C;&#xCE6D; 19Trp &#xD615;&#xAD11; &#xCE21;&#xC815; &#xC2DC; &#xD3A9; &#xD2F0; &#xB4DC; 19trp&#xC758; &#xADF9;&#xC131;&#xC5D0; &#xBCC0;&#xD654;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC54C;&#xD30C; &#xB098;&#xC120;&#xC73C;&#xB85C; &#xC811;&#xB294; &#xD3A9; &#xD2F0; &#xB4DC; &#xC0BD;&#xC785; &#xAF49; &#xCEE4;&#xD50C;&#xB9C1;&#xC744; &#xBCF4;&#xACE0; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xBAA8;&#xB4E0; &#xC870;&#xC0AC; &#xBA64;&#xBE0C;&#xB808;&#xC778; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C; (&#xCF5C;&#xB808;&#xC2A4;&#xD14C;&#xB864;&#xC774; &#xD3EC;&#xD568; &#xB41C; phosphoglycerol&#xC744; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558; &#xACE0; &#xC21C;&#xC218;&#xD55C; phosphocholine bilayers), 19trp&#xC758; &#xADF9;&#xC131;&#xC5D0; &#xAC10;&#xC18C; melittin &#xD5EC;&#xB9AC;&#xCEEC; &#xCF58;&#xD150;&#xCE20; &#xC99D;&#xAC00; &#xBCF4;&#xB2E4; &#xD6E8;&#xC52C; &#xBE60;&#xB97C; &#xBC1C;&#xACAC; &#xB410;&#xB2E4;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C;, &#xC18D;&#xB3C4; &#xB860; &#xAD00;&#xC810;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC54C;&#xD30C;-&#xD5EC;&#xB9AD;&#xC2A4; &#xD615;&#xC131; melittin &#xC0BD;&#xC785;&#xC758; &#xACB0;&#xACFC; &#xC774;&#xB2E4;. Melittin &#xC811;&#xB294;&#xC758; &#xC18D;&#xB3C4; bilayer &#xC9C0;&#xC9C8; &#xAD6C;&#xC131;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xBC1C;&#xACAC; &#xD558; &#xACE0; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xC81C;&#xC548; &#xD558;&#xB294;&#xC774; &#xC0BD;&#xC785;&#xC758; &#xC18D;&#xB3C4; &#xB860; &#xBCC0;&#xC870;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xB2EC;&#xC131; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC5F0;&#xAD6C;&#xB294; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xCE68;&#xD22C; &#xD558; &#xACE0; &#xC811;&#xB294;, &#xB9C9; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC811;&#xAE30;&#xC758; &#xC77C;&#xBC18;&#xC801;&#xC778; &#xACC4;&#xD68D;&#xC5D0;&#xC11C; &#xACE0;&#xB824; &#xB418;&#xC5B4;&#xC57C; &#xD558;&#xB294; &#xC0C1;&#xD638; &#xAC04;&#xC758; &#xAE30;&#xC874; &#xCEE4;&#xD50C;&#xB9C1;&#xC758; &#xBA85;&#xD655;&#xD55C; &#xC608;&#xB97C; &#xBCF4;&#xACE0; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC77C;&#xCE58; &#xB41C; &#xC0BD;&#xC785; &#xBC0F; bilayers&#xC5D0;&#xC11C; melittin&#xC758; &#xC811;&#xB294; &#xC18D;&#xB3C4; &#xB860;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC9C0;&#xC9C8; &#xC870;&#xC131;&#xC758; &#xC601;&#xD5A5;.

Nous avons &eacute;tudi&eacute; la cin&eacute;tique de l&#39;adsorption de la melittine, un peptide amphipathiques secondaire extrait de venin d&#39;abeille, sur les membranes lipidiques selon trois approches ind&eacute;pendantes et compl&eacute;mentaires. Nous avons sond&eacute; (i) les changements dans la polarit&eacute; de la 19Trp du peptide sur liaison, (ii) l&#39;insertion de ce r&eacute;sidu dans le c&oelig;ur apolaire de la membrane, la 19Trp-extinction de la fluorescence par des atomes de brome li&eacute;s sur des cha&icirc;nes acyles lipidique et (iii) le pliage du peptide, par dichro&iuml;sme circulaire (CD) &agrave; mesurer. Nous rapportons un couplage &eacute;troit de l&#39;insertion du peptide avec son pliage comme une h&eacute;lice alpha. Tous le mauvais syst&egrave;mes de membranes (bicouches phosphocholine contenant du cholest&eacute;rol, contenant phosphoglycerol et pure), la diminution de la polarit&eacute; du 19Trp s&#39;est av&eacute;r&eacute;e significativement plus rapide que l&#39;augmentation de la teneur h&eacute;lico&iuml;dale de la melittine. Par cons&eacute;quent, d&#39;un point de vue de cin&eacute;tique, la formation de l&#39;h&eacute;lice alpha est une cons&eacute;quence de l&#39;insertion de la melittine. Le taux de la m&eacute;littine pliage s&#39;est av&eacute;r&eacute; &ecirc;tre influenc&eacute;e par la composition lipidique de la bicouche et nous proposons que cela a &eacute;t&eacute; r&eacute;alis&eacute; par la modulation de la cin&eacute;tique d&#39;insertion. L&#39;&eacute;tude rapporte un exemple clair de l&#39;accouplement entre la p&eacute;n&eacute;tration de la prot&eacute;ine et pliage, une interconnexion qui doit &ecirc;tre consid&eacute;r&eacute;e dans le r&eacute;gime g&eacute;n&eacute;ral de repliement des prot&eacute;ines membranaires.

Influence de la composition lipidique sur la cin&eacute;tique d&#39;insertion concert&eacute;e et le pliage de la melittine dans les bicouches.

Die Kinetik der Adsorption von Melittin, eine sekund&auml;re AMPHIPHILE Peptid aus Bienengift auf Lipidmembranen mit drei unabh&auml;ngige und komplement&auml;re Ans&auml;tzen extrahiert haben wir gepr&uuml;ft. Wir &uuml;berpr&uuml;ften (i) die &Auml;nderung der Polarit&auml;t der 19Trp des Peptids auf binding, (Ii) die Einf&uuml;gung dieser R&uuml;ckstand im apolaren Kern der Membran, Messung der 19Trp-Fluoreszenz abschrecken von Brom-Atome klebten Lipid Acil Ketten und (Iii) die Faltung des Peptids, von Circulardichroismus (CD). Wir berichten eine enge Kopplung der Einf&uuml;gung des Peptids mit ihre Falten als eine &alpha;-Helix. F&uuml;r alle untersuchten Membransysteme (Cholesterin-haltige Phosphoglycerol-haltigen und reine Phosphocholine Doppelschichten) der R&uuml;ckgang der Polarit&auml;t der 19Trp erwies sich deutlich schneller als der Anstieg der spiralf&ouml;rmigen Inhalt Melittin. Daher aus Sicht der Kinetik ist die Bildung der &alpha;-Helix eine Folge der Einf&uuml;gung des Melittin. Die Rate der Melittin Faltung wurde festgestellt, dass von der Lipid der Bilayer beeinflusst werden, und wir schlagen vor, dies durch die Modulation Kinetics Einf&uuml;gung erreicht wurde. Die Studie berichtet ein klares Beispiel f&uuml;r die Kopplung zwischen Protein eindringen und Falten, eine Verbindung, die in das allgemeine Schema der Membrane Protein-Falte ber&uuml;cksichtigt werden m&uuml;ssen.

Einfluss der Lipid Zusammensetzung auf die Kinetik der konzertierten einlegen und Faltung der Melittin in Doppelschichten.

Abbiamo esaminato la cinetica di adsorbimento di melittin, un peptide di amphipathic secondaria Estratto dal veleno d&#39;api, su membrane lipidiche utilizzando tre approcci indipendenti e complementari. Abbiamo sondato (i) il cambiamento di polarit&agrave; del 19Trp del peptide su vincolante, (ii) l&#39;inserimento di questo residuo nel nucleo della membrana apolari, misurare la fluorescenza 19Trp tempra da atomi di bromo su lipidi acil catene e (iii) la piegatura del peptide, associati di Dicroismo circolare (CD). Riportiamo un accoppiamento stretto dell&#39;inserimento del peptide con relativo pieghevole come un&#39;alfa-elica. Per tutti l&#39;indagato sistemi a membrana (bilayer contenenti colesterolo, contenenti phosphoglycerol e puro fosfocolina), la diminuzione della polarit&agrave; del 19Trp &egrave; stata trovata per essere significativamente pi&ugrave; veloce rispetto all&#39;aumento nel contenuto di melittin elicoidale. Pertanto, da un punto di vista di cinetica, la formazione dell&#39;alfa-elica &egrave; una conseguenza dell&#39;inserimento di melittin. Il tasso di melittin pieghevole &egrave; stato trovato per essere influenzato dalla composizione del doppio strato lipidico e proponiamo che questo &egrave; stato ottenuto grazie alla modulazione della cinetica di inserimento. Lo studio riporta un chiaro esempio del giunto esistente tra proteina penetrazione e pieghevole, un&#39;interconnessione che dovr&agrave; essere considerata nello schema generale delle membrane protein folding.

Influenza della composizione dei lipidi sulla cinetica di inserimento concertato e pieghevole di melittin nel bilayer.

&#x30E1;&#x30EA;&#x30C1;&#x30F3;&#x3001;3 &#x3064;&#x306E;&#x72EC;&#x7ACB;&#x3057;&#x305F;&#x3068;&#x76F8;&#x88DC;&#x7684;&#x306A;&#x30A2;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30C1;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x305F;&#x8102;&#x8CEA;&#x4E8C;&#x91CD;&#x819C;&#x306E;&#x8702;&#x306E;&#x6BD2;&#x304B;&#x3089;&#x62BD;&#x51FA;&#x3057;&#x305F;&#x30BB;&#x30AB;&#x30F3;&#x30C0;&#x30EA;&#x4E21;&#x89AA;&#x5A92;&#x6027;&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C9;&#x306E;&#x5438;&#x7740;&#x306E;&#x901F;&#x5EA6;&#x8AD6;&#x3092;&#x691C;&#x8A0E;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x3001;(i) (ii) &#x3053;&#x306E;&#x6B8B;&#x819C;&#x306E;&#x8D77;&#x6E90;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x306E;&#x30B3;&#x30A2;&#x306E;&#x633F;&#x5165;&#x306E;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x3001;&#x8102;&#x8CEA;&#x306E;&#x30A2;&#x30B7;&#x30EB;&#x9396;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073; &#xFF08;iii&#xFF09; &#x306E;&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C9;&#x306E;&#x6298;&#x308A;&#x7573;&#x307F;&#x4E8C;&#x8272; &#xFF08;CD&#xFF09; &#x3092;&#x6DFB;&#x4ED8;&#x81ED;&#x7D20;&#x539F;&#x5B50;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x713C;&#x5165;&#x308C; 19Trp &#x86CD;&#x5149;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x6642;&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C9; 19Trp &#x306E;&#x6975;&#x6027;&#x5909;&#x5316;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30D6;&#x3002;&Alpha; &#x30D8;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x3068;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30EB;&#x30C7;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B0;&#x53CD;&#x5FDC;&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C9;&#x306E;&#x633F;&#x5165;&#x306E;&#x5BC6;&#x7D50;&#x5408;&#x3092;&#x5831;&#x544A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306E;&#x8ABF;&#x67FB;&#x306E;&#x819C;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x306E; (&#x30B3;&#x30EC;&#x30B9;&#x30C6;&#x30ED;&#x30FC;&#x30EB;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x3001;&#x30D5;&#x30A9;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A1;&#x30C1;&#x30B8;&#x30EB;&#x30B0;&#x30EA;&#x30BB;&#x30ED;&#x30FC;&#x30EB;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x3001;&#x7D14;&#x7C8B;&#x306A; phosphocholine &#x7A4D;&#x5C64;&#x819C;&#xFF09;&#x3001;19Trp &#x306E;&#x6975;&#x6027;&#x306E;&#x6E1B;&#x5C11;&#x30D8;&#x30EA;&#x30AB;&#x30EB; &#x30B3;&#x30F3;&#x30C6;&#x30F3;&#x30C4; &#x30E1;&#x30EA;&#x30C1;&#x30F3;&#x306E;&#x5897;&#x52A0;&#x3088;&#x308A;&#x3082;&#x5927;&#x5E45;&#x306B;&#x77ED;&#x7E2E;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x308F;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x53CD;&#x5FDC;&#x901F;&#x5EA6;&#x8AD6;&#x306E;&#x89B3;&#x70B9;&#x304B;&#x3089;&#x306E; &alpha; &#x30D8;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x5F62;&#x6210;&#x30E1;&#x30EA;&#x30C1;&#x30F3;&#x306E;&#x633F;&#x5165;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x30E1;&#x30EA;&#x30C1;&#x30F3;&#x306E;&#x6298;&#x308A;&#x7573;&#x307F;&#x306E;&#x30EC;&#x30FC;&#x30C8;&#x4E8C;&#x91CD;&#x819C;&#x306E;&#x8102;&#x8CEA;&#x7D44;&#x6210;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x53CA;&#x307C;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x308F;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x633F;&#x5165;&#x306E;&#x30AD;&#x30CD;&#x30C6;&#x30A3;&#x30AF;&#x30B9;&#x306E;&#x5909;&#x8ABF;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x9054;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x63D0;&#x6848;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x7814;&#x7A76;&#x306F;&#x3001;&#x65E2;&#x5B58;&#x306E;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306E;&#x6D78;&#x900F;&#x3068;&#x6298;&#x308A;&#x7573;&#x307F;&#x3001;&#x819C;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30EB;&#x30C7;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B0;&#x306E;&#x4E00;&#x822C;&#x7684;&#x306A;&#x65B9;&#x5F0F;&#x3067;&#x8003;&#x616E;&#x3059;&#x308B;&#x5FC5;&#x8981;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x914D;&#x7DDA;&#x9593;&#x7D50;&#x5408;&#x306E;&#x660E;&#x78BA;&#x306A;&#x4F8B;&#x5831;&#x544A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x5354;&#x8ABF;&#x633F;&#x5165;&#x3068;&#x7A4D;&#x5C64;&#x819C;&#x4E2D;&#x30E1;&#x30EA;&#x30C1;&#x30F3;&#x306E;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30EB;&#x30C7;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B0;&#x306E;&#x901F;&#x5EA6;&#x8AD6;&#x306E;&#x8102;&#x8CEA;&#x7D44;&#x6210;&#x306E;&#x5F71;&#x97FF;

Hemos examinado la cin&eacute;tica de la adsorci&oacute;n de melitina, un p&eacute;ptido de secundaria anfip&aacute;ticos extra&iacute;do del veneno de la abeja, en membranas lip&iacute;dicas usando tres enfoques independientes y complementarios. Hemos probado (i) el cambio en la polaridad de la 19Trp del p&eacute;ptido sobre vinculante, (ii) la inserci&oacute;n de este residuo en el n&uacute;cleo de apolar de la membrana, la medici&oacute;n de la 19Trp-fluorescencia Temple por &aacute;tomos de bromo Unidos en cadenas de acil de l&iacute;pidos y (iii) el plegamiento del p&eacute;ptido, por dicro&iacute;smo circular (CD). Divulgamos un acoplamiento apretado de la inserci&oacute;n del p&eacute;ptido con su plegado como una h&eacute;lice alfa. Para todos los investigados sistemas de membranas (que contienen colesterol, que contienen phosphoglycerol y puro fosfocolina bicapas), la disminuci&oacute;n de la polaridad del 19Trp result&oacute; para ser significativamente m&aacute;s r&aacute;pido que el aumento en el contenido helicoidal de melitina. Por lo tanto, desde un punto de vista de la cin&eacute;tica, la formaci&oacute;n de la h&eacute;lice alfa es una consecuencia de la inserci&oacute;n de melitina. La tasa de melitina plegable fue encontrada para ser influenciado por la composici&oacute;n de l&iacute;pidos de la bicapa y proponemos que esto se logr&oacute; mediante la modulaci&oacute;n de la cin&eacute;tica de inserci&oacute;n. El estudio reporta un claro ejemplo del acoplamiento entre la penetraci&oacute;n de la prote&iacute;na y plegable, una interconexi&oacute;n que debe considerarse en el esquema general de plegamiento de la prote&iacute;na de membrana.

Influencia de la composici&oacute;n de l&iacute;pidos en la cin&eacute;tica de inserci&oacute;n concertada y plegamiento de melitina en bicapas.

&#x5E38;&#x89C4;&#x6297;&#x8840;&#x6813;&#x836F;&#x7269;&#x53D1;&#x73B0;&#x9700;&#x8981;&#x6D4B;&#x8BD5;&#x7684;&#x5927;&#x91CF;&#x836F;&#x7269;&#x5019;&#x9009;&#x4EBA;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7528;&#x8BA1;&#x7B97;&#x673A;&#x8F85;&#x52A9;&#x751F;&#x7269;&#x5927;&#x5206;&#x5B50;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x8BC4;&#x4F30; (MIAX) &#x6765;&#x9009;&#x62E9;&#x6297;&#x8840;&#x6813;&#x5F62;&#x6210;&#x7684;&#x5206;&#x5B50;&#xFF0C;&#x6A21;&#x4EFF;&#x548C;&#x56E0;&#x6B64;&#x963B;&#x6B62;&#x8840;&#x5C0F;&#x677F; GPIb &#x7ED1;&#x5B9A;&#x5230;&#x8840;&#x53CB;&#x75C5;&#x56E0;&#x5B50; &#xFF08;vWf&#xFF09;&#xFF0C;&#x5728;&#x8840;&#x6813;&#x5F62;&#x6210;&#x7684;&#x65E9;&#x671F;&#x6B65;&#x9AA4;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7504;&#x522B;&#x968F;&#x673A;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x8840;&#x53CB;&#x75C5; 15 mer D &#x6C28;&#x57FA;&#x9178;&#x9178;&#x6027;&#x591A;&#x80BD;&#x7684;&#x6570;&#x7EC4;&#x3002;&#x80BD;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x6570;&#x636E;&#x5E93;&#x4E2D;&#x7684;&#x5E8F;&#x5217;&#x6BD4;&#x8F83;&#x63A8;&#x65AD;&#x7684; 4 &#x540D;&#x5019;&#x9009;&#x4EBA;&#x7684;&#x7ED3;&#x6784;&#xFF0C;&#x4ECE; L &#x5230; D &#x6784;&#x8C61;&#x548C;&#x5206;&#x5B50;&#x52A8;&#x529B;&#x5B66; (MD) &#x51B3;&#x5B9A;&#x7684;&#x90A3;&#x4E9B;&#x8F6C;&#x6362;&#x6700;&#x5927;&#x529B;&#x7A33;&#x5B9A;&#x3002;&#x901A;&#x8FC7; MIAX&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x63A8;&#x5BFC;&#x51FA;&#x6C28;&#x57FA;&#x9178;&#x548C;&#x5206;&#x5B50;&#x95F4;&#x6C22;&#x952E; GPIb vWf &#x4EA4;&#x4E92;&#x754C;&#x9762;&#x505A;&#x51FA;&#x8D21;&#x732E;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x505C;&#x9760;&#x5230;&#x7845;&#x8FDB;&#x884C;&#x672C;&#x5730;&#x5316;&#x5176;&#x7ED3;&#x5408;&#x4F4D;&#x70B9;&#x548C;&#x7531;&#x6B64;&#x800C;&#x53EF;&#x80FD;&#x4E3A;&#x9632;&#x6B62; GPIb &#x8840;&#x53CB;&#x75C5;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5728;&#x8840;&#x53CB;&#x75C5;&#x80BD;&#x3002;Ristocetin &#x53D1;&#x8D77;&#x7684;&#x8840;&#x5C0F;&#x677F;&#x51DD;&#x96C6;&#x6291;&#x5236;&#x4F53;&#x5916;&#x8BC1;&#x5B9E;&#x80BD;&#x529F;&#x80FD;&#x548C;&#x6297;&#x8840;&#x6813;&#x7684;&#x53D1;&#x5C55;&#xFF0C;&#x4ECE;&#x800C;&#x9A8C;&#x8BC1;&#x8FD9;&#x79CD;&#x65B0;&#x836F;&#x7269;&#x53D1;&#x73B0;&#x7684;&#x65B9;&#x6CD5;&#x9002;&#x5408;&#x3002;

&#x6297;&#x8840;&#x6813;&#x80BD;&#x76EE;&#x6807;&#x8840;&#x53CB;&#x75C5;&#x56E0;&#x5B50; (vWf) &mdash; &mdash; GPIb &#x6574;&#x5408;&#x7D20;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x7684;&#x5408;&#x7406;&#x8BBE;&#x8BA1;&#x3002;

Conventional antithrombotic drug discovery requires testing of large numbers of drug candidates. We used computer-aided macromolecular interaction assessment (MIAX) to select antithrombotic molecules that mimic and therefore block platelet GPIb's binding to von Willebrand factor (vWf), an early step in thrombus formation. We screened a random array of 15-mer D-amino acid peptides for binding vWf. Structures of 4 candidate peptides were inferred by comparison to sequences in protein databases, conversion from the L to D conformations and molecular dynamics (MD) determinations of those most energetically stable. By MIAX, we deduced the amino acids and intermolecular hydrogen bonds contributing to the GPIb-vWf interaction interface. We docked the peptides onto vWf in silico to localize their binding sites and consequent potential for preventing GPIb-vWf binding. In vitro inhibition of ristocetin-initiated platelet agglutination confirmed peptide function and suitability for antithrombotic development, thereby validating this novel approach to drug discovery.

Rational design of antithrombotic peptides to target the von Willebrand factor (vWf)--GPIb integrin interaction.

La d&eacute;couverte de m&eacute;dicaments antithrombotiques conventionnelles exige tester un grand nombre de candidats-m&eacute;dicaments. Nous avons utilis&eacute; &eacute;valuation assist&eacute;e par ordinateur des interactions macromol&eacute;culaires (MIAX) pour s&eacute;lectionner les mol&eacute;cules antithrombotiques qui imitent et donc bloquent liaison de plaquettaires GPIb au facteur von Willebrand (vWf), une premi&egrave;re &eacute;tape dans la formation du thrombus. Nous avons projet&eacute; un tableau al&eacute;atoire de 15-mer D-amino acides peptides pour liaison vWf. Structures du candidat 4 peptides ont &eacute;t&eacute; d&eacute;duites par comparaison aux s&eacute;quences dans les bases de donn&eacute;es de prot&eacute;ine, conversion de la L en conformations D et les d&eacute;terminations de la dynamique mol&eacute;culaire (DM) de celles plus &eacute;nerg&eacute;tiquement stables. Par MIAX, nous avons d&eacute;duit les acides amin&eacute;s et des liaisons hydrog&egrave;ne intermol&eacute;culaires qui contribuent &agrave; l&#39;interface d&#39;interaction GPIb-vWf. Nous avons ancr&eacute; les peptides sur vWf in silico de localiser leurs sites de fixation et le potentiel qui en d&eacute;coule pour emp&ecirc;cher la liaison GPIb-vWf. Inhibition in vitro de l&#39;agglutination plaquettaire ristoc&eacute;tine-initi&eacute; confirm&eacute; fonction de peptide et l&#39;aptitude au d&eacute;veloppement antithrombotique, validant ainsi cette nouvelle approche &agrave; la d&eacute;couverte de m&eacute;dicaments.

Conception rationnelle de peptides antithrombotiques pour cibler le facteur von Willebrand (vWf)--interaction de l&#39;int&eacute;grine GPIb.

Konventionelle antithrombotischen Drogeentdeckung erfordert Testen einer gro&szlig;en Anzahl von Arzneimittelkandidaten. Wir haben Computer aided Makromolekulare Interaktionen Bewertung (SCAPPI) antithrombotischen Molek&uuml;le ausw&auml;hlen, die zu imitieren und somit blockieren Thrombozyten GPIb-Bindung von-Willebrand-Faktor (vWf), erster Schritt diese Thrombus-Bildung. Wir sehen eine zuf&auml;llige Auswahl an 15-Mer D-Aminos&auml;uren saure Peptide f&uuml;r die Bindung von vWf. Strukturen der 4 Kandidaten, die Peptide im Vergleich zu Sequenzen in Proteindatenbanken abgeleitet wurden, Konvertierung von der L D Konformationen und Molekulardynamik (MD)-Ermittlungen von denen am meisten energetisch stabil. Von SCAPPI abgeleitet wir die Aminos&auml;uren und intermolekulare Wasserstoffbr&uuml;ckenbindungen, die einen Beitrag zu den GPIb-vWf-Interaktion-Schnittstelle. Wir angedockt Peptide auf vWf in Silico lokalisieren ihre Bindungsstellen und damit verbundene Potenzial zur Vermeidung von GPIb-vWf-Bindung. In-vitro Hemmung der Thrombozyten Ristocetin initiierte Agglutination Peptid-Funktion und Eignung f&uuml;r antithrombotische Entwicklung, damit &uuml;berpr&uuml;fen dieses neuartige Konzept der Arzneimittelentdeckung best&auml;tigt.

Rationales Design von antithrombotischen Peptiden den von-Willebrand-Faktor (vWf)--GPIb-Integrin-Interaktion als Ziel.

Scoperta di nuovi farmaci antitrombotici convenzionali richiede test di un gran numero di candidati farmaci. Abbiamo usato valutazione computerizzata interazione macromolecolare (MIAX) per selezionare antitrombotici molecole che mimano e quindi bloccano l&#39;associazione di piastrinica GPIb al fattore di von Willebrand (vWf), un passaggio precoce nella formazione di trombi. Abbiamo proiettato una matrice casuale di mer 15 D-amino acidi peptidi per associazione vWf. Strutture di 4 candidati peptidi sono state dedotte in confronto alle sequenze di basi di dati della proteina, la conversione da L a conformazioni D e determinazioni di dinamica molecolare (MD) di quelli pi&ugrave; energeticamente stabili. Da MIAX, abbiamo dedotto gli amminoacidi e legami idrogeno intermolecolari contribuendo all&#39;interfaccia GPIb-vWf interazione. Abbiamo ancorato i peptidi sul vWf in silico per localizzare i siti di legame e conseguente potenziale per prevenire l&#39;associazione GPIb-vWf. In vitro inibizione dell&#39;agglutinazione piastrinica avviata dalla ristocetina confermato la funzione del peptide e idoneit&agrave; per sviluppo antitrombotico, convalidando quindi questo nuovo approccio alla scoperta della droga.

Design razionale dei peptidi antitrombotici per indirizzare il fattore di von Willebrand (vWf) - interazione integrina GPIb.

&#x5F93;&#x6765;&#x306E;&#x6297;&#x8840;&#x6813;&#x85AC;&#x306E;&#x767A;&#x898B;&#x306F;&#x3001;&#x65B0;&#x85AC;&#x5019;&#x88DC;&#x306E;&#x591A;&#x6570;&#x306E;&#x30C6;&#x30B9;&#x30C8;&#x304C;&#x5FC5;&#x8981;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x30B3;&#x30F3;&#x30D4;&#x30E5;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x63F4;&#x7528;&#x9AD8;&#x5206;&#x5B50;&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x8A55;&#x4FA1; (MIAX) &#x3092;&#x6A21;&#x5023;&#x3057;&#x3001;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x8840;&#x5C0F;&#x677F; GPIb &#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C7;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B0; &#x30D6;&#x30ED;&#x30C3;&#x30AF;&#x6297;&#x8840;&#x6813;&#x306E;&#x5206;&#x5B50;&#x3092;&#x9078;&#x629E;&#x3059;&#x308B;&#x306E;&#x306B;&#x30D5;&#x30A9;&#x30F3;&#x30F4;&#x30A3;&#x30EC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30F3;&#x30C9;&#x56E0;&#x5B50; &#xFF08;vWf&#xFF09;&#x3001;&#x8840;&#x6813;&#x5F62;&#x6210;&#x306E;&#x521D;&#x671F;&#x6BB5;&#x968E;&#x306B;&#x4F7F;&#x7528;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306F; 15 mer D-&#x30A2;&#x30DF;&#x30CE;&#x9178;&#x306E;&#x9178;&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C9;&#x7D50;&#x5408; vWf &#x306E;&#x30E9;&#x30F3;&#x30C0;&#x30E0;&#x306A;&#x914D;&#x5217;&#x3092;&#x4E0A;&#x6620;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x69CB;&#x9020;&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C9;&#x6BD4;&#x8F03;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x30D9;&#x30FC;&#x30B9;&#x306E;&#x30B7;&#x30FC;&#x30B1;&#x30F3;&#x30B9;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x63A8;&#x5BDF;&#x3055;&#x308C;&#x305F; 4 &#x5019;&#x88DC;&#x306E;&#x3067;&#x3001;L &#x304B;&#x3089; D &#x30B3;&#x30F3;&#x30D5;&#x30A9;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3068;&#x5206;&#x5B50;&#x52D5;&#x529B;&#x5B66; (MD) &#x306E;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x306E;&#x305D;&#x308C;&#x3089;&#x3078;&#x306E;&#x5909;&#x63DB;&#x3092;&#x6700;&#x3082;&#x7CBE;&#x529B;&#x7684;&#x306B;&#x5B89;&#x5B9A;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;MIAX &#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x30A2;&#x30DF;&#x30CE;&#x9178;&#x3068;&#x5206;&#x5B50;&#x9593;&#x6C34;&#x7D20;&#x7D50;&#x5408;&#x306E; GPIb vWf &#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x306E;&#x30A4;&#x30F3;&#x30BF;&#x30FC;&#x30D5;&#x30A7;&#x30A4;&#x30B9;&#x3078;&#x306E;&#x8CA2;&#x732E;&#x3092;&#x63A8;&#x8AD6;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x305D;&#x306E;&#x7D50;&#x5408;&#x90E8;&#x4F4D;&#x3084; GPIb vWf &#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C7;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B0;&#x3092;&#x9632;&#x6B62;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x3092;&#x30ED;&#x30FC;&#x30AB;&#x30E9;&#x30A4;&#x30BA;&#x3059;&#x308B;&#x30A4;&#x30F3;&#x30B7;&#x30EA;&#x30B3; vWf &#x306B;&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C9; &#x30C9;&#x30C3;&#x30AD;&#x30F3;&#x30B0;&#x3002;&#x30EA;&#x30B9;&#x30C8;&#x30BB;&#x30C1;&#x30F3;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x8840;&#x5C0F;&#x677F;&#x51DD;&#x96C6;&#x53CD;&#x5FDC;&#x306E; in vitro &#x963B;&#x5BB3;&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C9;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3068;&#x305D;&#x308C;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5275;&#x85AC;&#x306B;&#x3053;&#x306E;&#x5C0F;&#x8AAC;&#x306E;&#x30A2;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30C1;&#x3092;&#x691C;&#x8A3C;&#x3001;&#x6297;&#x8840;&#x6813;&#x6027;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x9069;&#x6027;&#x3092;&#x78BA;&#x8A8D;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;

Von Willebrand &#x56E0;&#x5B50; &#xFF08;vWf&#xFF09;--GPIb &#x30A4;&#x30F3;&#x30C6;&#x30B0;&#x30EA;&#x30F3;&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3092;&#x5BFE;&#x8C61;&#x306B;&#x6297;&#x8840;&#x6813;&#x6027;&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C9;&#x306E;&#x7406;&#x6027;&#x7684;&#x306A;&#x30C7;&#x30B6;&#x30A4;&#x30F3;&#x306F;&#x3002;

&#xAE30;&#xC874;&#xC758; antithrombotic &#xC57D;&#xBB3C; &#xBC1C;&#xACAC; &#xB9C8;&#xC57D; &#xD6C4;&#xBCF4;&#xC790;&#xC758; &#xB2E4; &#xC218;&#xC758; &#xD14C;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xD544;&#xC694; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. Von Willebrand &#xC778;&#xC790; (vWf) &#xD608;&#xC804; &#xD615;&#xC131;&#xC758; &#xCD08;&#xAE30; &#xB2E8;&#xACC4;&#xB97C; &#xC120;&#xD0DD; antithrombotic &#xBD84;&#xC790;&#xB97C; &#xBAA8;&#xBC29; &#xD558; &#xACE0; &#xB530;&#xB77C;&#xC11C; &#xD608;&#xC18C;&#xD310; GPIb &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xCC28;&#xB2E8; &#xC804;&#xC0B0; &#xACE0;&#xBD84;&#xC790; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; &#xD3C9;&#xAC00; (MIAX)&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC; &#xC0C1;&#xC601; &#xD3A9; &#xD2F0; 15-&#xBA54; &#xB974; &#xB514; &#xC544;&#xBBF8;&#xB178; &#xC0B0; &#xB4DC;&#xC758; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; Vwf&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC784;&#xC758;&#xC758; &#xBC30;&#xC5F4;. 4 &#xD6C4;&#xBCF4; &#xD3A9; &#xD2F0; &#xB4DC; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xB370;&#xC774;&#xD130;&#xBCA0;&#xC774;&#xC2A4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4;&#xB97C; &#xBE44;&#xAD50; &#xD558; &#xC5EC; &#xC720;&#xCD94; &#xB41C;&#xC758; &#xAD6C;&#xC870;, L D conformations &#xBC0F; &#xADF8;&#xC758; &#xBD84;&#xC790; &#xC5ED;&#xD559; (MD) &#xACB0;&#xC815;&#xC744; &#xBCC0;&#xD658; &#xAC00;&#xC7A5; &#xC815;&#xB825;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC548;&#xC815;. MIAX, &#xD558; &#xC5EC; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC544;&#xBBF8;&#xB178;&#xC0B0; &#xBC0F; GPIb vWf &#xC0C1;&#xD638;&#xC791;&#xC6A9; &#xC778;&#xD130;&#xD398;&#xC774;&#xC2A4;&#xC5D0; &#xAE30;&#xC5EC; intermolecular &#xC218;&#xC18C; &#xCC44;&#xAD8C; &#xCD94;&#xB860;. &#xC6B0;&#xB9AC; &#xB3C4;&#xD0B9; silico &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8; &#xBC0F; GPIb vWf &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xBC29;&#xC9C0; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD55C; &#xD544;&#xC5F0;&#xC801;&#xC778; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xB825; &#xC9C0;&#xC5ED;&#xD654;&#xC5D0; Vwf&#xC5D0; &#xD3A9; &#xD2F0; &#xB4DC;. Ristocetin &#xC2DC;&#xC791; &#xD608;&#xC18C;&#xD310; &#xC735;&#xD569; &#xB4E4;&#xC758; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC678;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC800;&#xD574; &#xD3A9;&#xD0C0;&#xC774;&#xB4DC; &#xD568;&#xC218; antithrombotic &#xAC1C;&#xBC1C;, &#xB530;&#xB77C;&#xC11C; &#xC57D;&#xBB3C; &#xBC1C;&#xACAC;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xC811;&#xADFC; &#xBC29;&#xC2DD;&#xC744;&#xC774; &#xC720;&#xD6A8;&#xC131; &#xAC80;&#xC0AC;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC801;&#xD569;&#xC131; &#xD655;&#xC778; &#xD588;&#xB2E4;.

&#xB300;&#xC0C1;&#xC73C;&#xB85C; &#xD3F0; Willebrand &#xC778;&#xC790; (vWf)-GPIb integrin &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; antithrombotic &#xD3A9; &#xD2F0; &#xB4DC;&#xC758; &#xD569;&#xB9AC;&#xC801;&#xC778; &#xB514;&#xC790;&#xC778;.

Descubrimiento de f&aacute;rmacos antitromb&oacute;ticos convencional requiere pruebas de un gran n&uacute;mero de f&aacute;rmacos candidatos. Utilizamos evaluaci&oacute;n de interacci&oacute;n macromolecular asistido por ordenador (MIAX) para seleccionar mol&eacute;culas antitromb&oacute;ticas que imitan y por lo tanto bloquean la Uni&oacute;n de plaquetas GPIb para factor de von Willebrand (vWf), un primer paso en la formaci&oacute;n del trombo. Defendimos una selecci&oacute;n al azar de 15-mer D-amino &aacute;cidos p&eacute;ptidos para atar vWf. Estructuras del candidato 4 p&eacute;ptidos fueron inferidas en comparaci&oacute;n a las secuencias de bases de datos de prote&iacute;nas, conversi&oacute;n de la L en conformaciones D y determinaciones de din&aacute;mica molecular (MD) de aquellos m&aacute;s energ&eacute;ticamente estable. Por MIAX, hemos deducido los amino&aacute;cidos y los enlaces de hidr&oacute;geno intermoleculares contribuyendo a la interfaz de interacci&oacute;n GPIb-vWf. Acopl&oacute; los p&eacute;ptidos en vWf in silico para localizar sus sitios de Uni&oacute;n y la consiguiente potencial para prevenir GPIb-vWf vinculante. Inhibici&oacute;n in vitro de la aglutinaci&oacute;n de plaquetas Iniciado por ristocetina confirm&oacute; funci&oacute;n del p&eacute;ptido y conveniencia para el desarrollo antitromb&oacute;tico, validando as&iacute; este nuevo enfoque para el descubrimiento de f&aacute;rmacos.

Dise&ntilde;o racional de p&eacute;ptidos antitromb&oacute;ticos apuntar el factor de von Willebrand (vWf)--GPIb integrina interacci&oacute;n.

&#x5927;&#x5206;&#x5B50;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8868;&#x9762;&#x6539;&#x6027;&#x6280;&#x672F;&#x5728;&#x5404;&#x79CD;&#x751F;&#x7269;&#x533B;&#x5B66;&#x5E94;&#x7528;&#x4E2D;&#x663E;&#x793A;&#x5DE8;&#x5927;&#x7684;&#x5B9E;&#x7528;&#x7A0B;&#x5E8F;&#x3002;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;&#x4E00;&#x4E2A;&#x4E3B;&#x8981;&#x7684;&#x7F3A;&#x70B9;&#x6D89;&#x53CA;&#x4E0E;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8868;&#x9762;&#x7684;&#x4EB2;&#x6C34;&#x6027;&#x5927;&#x5206;&#x5B50;&#x5DEE;&#x5173;&#x8054;&#x6240;&#x9020;&#x6210;&#x7684;&#x6548;&#x7387;&#x4F4E;&#x4E0B;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8868;&#x9762;&#x6539;&#x6027;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x63CF;&#x8FF0;&#x4E86;&#x4F7F;&#x7528;&#x4E1A;&#x7ECF;&quot;&#x6DFB;&#x52A0;&#x5242;&quot;&#x5927;&#x5206;&#x5B50;&#x8C03;&#x8282;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8868;&#x9762;&#x65E0;&#x529F;&#x3001; &#x4EB2;&#x6C34;&#x5927;&#x5206;&#x5B50;&#x7684;&#x5AC1;&#x63A5;&#x6548;&#x7387;&#x7684;&#x65B0;&#x578B;&#x3001; &#x9AD8;&#x6548;&#x3001; &#x548C;&#x901A;&#x7528;&#x6218;&#x7565;&#x3002;10 &#x500D;&#x8FBE;&#x7684;&#x7A7A;&#x524D;&#x589E;&#x5F3A;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8868;&#x9762;&#x4FEE;&#x9970;&#x89C2;&#x5BDF;&#x5230;&#x5404;&#x79CD;&#x6D53;&#x5EA6;&#x7684;&#x4E00;&#x4E2A;&#x5408;&#x9002;&#x7684;&quot;&#x52A0;&#x6CD5;&quot;&#x805A;&#x5408;&#x7269;&#x5728;&#x573A;&quot;&#x65E0;&#x529F;&quot;&#x9AD8;&#x5206;&#x5B50;&#x5E38;&#x6570;&#x548C;&#x4F4E;&#x6D53;&#x5EA6;&#x3002;&#x8FD9;&#x65B9;&#x9762;&#x7684;&#x91CD;&#x8981;&#x6027;&#x63D0;&#x9AD8;&#x4E86;&#x6548;&#x7387;&#x548C;&#x6240;&#x6D89;&#x53CA;&#x7684;&#x53EF;&#x80FD;&#x673A;&#x5236;&#x8FDB;&#x884C;&#x8BA8;&#x8BBA;&#x3002;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x517C;&#x5BB9;&#x6280;&#x672F;&#x4F53;&#x73B0;&#x7684;&#x56DB;&#x4E2A;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x7C7B;&#x578B; &mdash; &mdash; (RBC) &#x7EA2;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3001; &#x767D;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3001; &#x8840;&#x5C0F;&#x677F;&#x3001; Jurkat &#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;&#x53D1;&#x5C55;&#x7684; RhD &#x7A7A;&#x7EA2;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7EA2;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8868;&#x9762;&#x6297;&#x539F;&#x589E;&#x5F3A;&#x4F2A;&#x88C5;&#xFF0C;&#x8DB3;&#x4EE5;&#x8BC1;&#x660E;&#x5AC1;&#x63A5;&#x5230;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8868;&#x9762;&#x805A;&#x5408;&#x7269;&#x6D53;&#x7684;&#x6EB6;&#x6DB2;&#x4E2D;&#x5927;&#x5206;&#x5B50;&#x7684;&#x5B9E;&#x9645;&#x5E94;&#x7528;&#x3002;&#x539F;&#x5219;&#x4E0A;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x4E2A;&#x6280;&#x5DE7;&#x53EF;&#x4EE5;&#x9002;&#x5E94;&#x5404;&#x79CD;&#x9AD8;&#x5206;&#x5B50;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x548C;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x7C7B;&#x578B;&#xFF0C;&#x5982;&#x6839;&#x636E;&#x6D3B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6280;&#x672F;&#x7684;&#x751F;&#x7269;&#x533B;&#x5B66;&#x5E94;&#x7528;&#x7684;&#x5DE8;&#x5927;&#x6F5C;&#x529B;&#x3002;

&#x589E;&#x5F3A;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8868;&#x9762;&#x805A;&#x5408;&#x7269;&#x63A5;&#x679D;&#x96C6;&#x4E2D;&#x548C;&#x4E1A;&#x7ECF;&#x6C34;&#x6027;&#x805A;&#x5408;&#x7269;&#x6EB6;&#x6DB2;&#x4E2D;&#x3002;

Macromolecular cell surface modification techniques have shown tremendous utility in various biomedical applications. However, a major drawback concerns inefficient cell surface modification caused by the poor association of hydrophilic macromolecules with cell surfaces. Here, a novel, highly efficient, and universal strategy in which nonreactive "additive" macromolecules are used to modulate the grafting efficiency of cell surface reactive, hydrophilic macromolecules is described. Unprecedented enhanced cell surface modifications by up to 10-fold were observed when various concentrations of a suitable "additive" polymer was present with a constant and low concentration of a "reactive" macromolecule. The importance of this increased efficiency and the possible mechanisms involved are discussed. The cell compatible technique is demonstrated in the case of four different cell types--red blood cells (RBC), leukocytes, platelets, and Jurkat cells. A practical application of grafting macromolecules to cell surfaces in concentrated polymer solutions is demonstrated by the enhanced camouflage of RBC surface antigens for the development of RhD null RBC. In principle, the technique can be adapted to various macromolecular systems and cell types, with significant potential for biomedical applications such as live cell based technologies.

Enhanced cell surface polymer grafting in concentrated and nonreactive aqueous polymer solutions.

Des techniques de modification de surface cellulaire macromol&eacute;culaires ont montr&eacute; une utilit&eacute; &eacute;norme dans diverses applications biom&eacute;dicales. Cependant, un inconv&eacute;nient majeur porte modification de surface cellulaire inefficace caus&eacute;e par l&#39;association les pauvre avec surfaces cellulaires des macromol&eacute;cules hydrophiles. Ici, une strat&eacute;gie nouvelle, tr&egrave;s efficace et universelle dans lequel non-r&eacute;actif macromol&eacute;cules &laquo; additifs &raquo; sont utilis&eacute;s pour moduler l&#39;efficacit&eacute; greffage des macromol&eacute;cules de r&eacute;actif, hydrophile surface cellulaire est d&eacute;crite. Modifications de surface cellulaire am&eacute;lior&eacute;e sans pr&eacute;c&eacute;dent de jusqu&#39;&agrave; 10 fois ont &eacute;t&eacute; observ&eacute;es lorsque diff&eacute;rentes concentrations d&#39;un polym&egrave;re &laquo; additif &raquo; appropri&eacute; &eacute;tait pr&eacute;sent avec une concentration constante et basse d&#39;une macromol&eacute;cule &laquo; r&eacute;active &raquo;. L&#39;importance de cette accro&icirc;tre l&#39;efficacit&eacute; et les possibles m&eacute;canismes impliqu&eacute;s sont discut&eacute;s. La technique compatible de cellule est d&eacute;montr&eacute;e dans le cas de quatre diff&eacute;rents types de cellules--cellules Jurkat, des leucocytes, des plaquettes et des globules rouges (RBC). Une application pratique du greffage de macromol&eacute;cules &agrave; la surface des cellules dans des solutions concentr&eacute;es de polym&egrave;re est d&eacute;montr&eacute;e par le camouflage am&eacute;lior&eacute; des antig&egrave;nes de surface de RBC pour le d&eacute;veloppement de RhD RBC null. En principe, la technique peut &ecirc;tre adapt&eacute;e &agrave; divers syst&egrave;mes macromol&eacute;culaires et types de cellules, avec un potentiel important pour des applications biom&eacute;dicales telles que les technologies de base de cellules vivantes.

Cellule renforc&eacute;e surface polym&egrave;re greffage dans des solutions de polym&egrave;res aqueux concentr&eacute; et non r&eacute;actif.

Makromolekulare Zelle Oberfl&auml;chenmodifizierung Techniken haben enorme Dienstprogramm in verschiedenen biomedizinische Anwendungen gezeigt. Ein gro&szlig;er Nachteil betrifft jedoch ineffizient Zelle Oberfl&auml;chenmodifizierung durch schlechte hydrophile Makromolek&uuml;le mit Zelle Oberfl&auml;chen verursacht. Hier ist eine neuartige, hoch effiziente und universale-Strategie in der Antik&ouml;rper &quot;additive&quot; Makromolek&uuml;le verwendet werden, um die Unterlagsreben Effizienz der Zelle Oberfl&auml;che reaktives, hydrophile Makromolek&uuml;le zu modulieren beschrieben. Beispiellose verst&auml;rkte Zelle Oberfl&auml;che Modifikationen von bis zu wurden 10-fache beobachtet, wenn verschiedene Konzentrationen eines geeigneten &quot;additive&quot; Polymers mit einer Konstante und niedrige Konzentration von einem &quot;reaktiven&quot; Makromolek&uuml;l anwesend war. Die Bedeutung dieses h&ouml;here Effizienz und die m&ouml;glichen Mechanismen diskutiert. Die Zelle-kompatibel-Technik zeigt sich bei vier verschiedenen Zelltypen--Erythrozyten (RBC), Leukozyten, Thrombozyten und Jurkat-Zellen. Eine praktische Anwendung der Pfropfen Makromolek&uuml;le auf Zelle Oberfl&auml;chen in konzentrierte Polymerl&ouml;sungen zeigt die verbesserte Tarnung der RBC OBERFL&Auml;CHENANTIGENE f&uuml;r die Entwicklung der RhD null RBC. Im Prinzip kann die Technik verschiedene Makromolekulare Systeme und Zelltypen, mit Potenzial f&uuml;r Biomedizinische Anwendungen wie live zellbasierte Technologien angepasst.

Verst&auml;rkte Zelle Oberfl&auml;che Polymer Pfropfen in konzentrierter und Antik&ouml;rper w&auml;ssrige Polymerl&ouml;sungen.

Tecniche di modificazione superficiale macromolecolare delle cellule hanno dimostrato enorme utilit&agrave; in varie applicazioni biomediche. Tuttavia, un grave inconveniente riguarda la modificazione superficiale cella inefficiente causati dall&#39;associazione povero idrofili macromolecole con le superfici delle cellule. Qui, una strategia di romanzo, altamente efficiente e universale in cui macromolecole &quot;additivi&quot; non reattivi sono utilizzati per modulare l&#39;efficienza della superficie macromolecole reattiva, idrofilo cellula innesto &egrave; descritto. Modifiche superficie cellulare avanzata senza precedenti da fino a 10 volte sono state osservate quando varie concentrazioni di polimero adatto &quot;additivo&quot; era presente con una concentrazione bassa e costante di una macromolecola &quot;reattiva&quot;. L&#39;importanza di questa maggiore efficienza e vengono discussi i possibili meccanismi coinvolti. La cella compatibile con tecnica &egrave; dimostrata nel caso di quattro diversi tipi di cellule - cellule Jurkat, leucociti, piastrine e globuli rossi (RBC). Un&#39;applicazione pratica di innesto macromolecole per le superfici delle cellule nelle soluzioni di polimeri concentrati dimostra il camuffamento avanzato degli antigeni di superfici RBC per lo sviluppo di RhD null RBC. In linea di principio, la tecnica pu&ograve; essere adattata ai vari sistemi macromolecolari e tipi di cellule, con notevoli potenzialit&agrave; per applicazioni biomediche quali tecnologie live cella basata.

Cella maggiore superficie polimerica innesto nelle soluzioni di polimeri acquosa concentrata e non reattivo.

&#x9AD8;&#x5206;&#x5B50;&#x7D30;&#x80DE;&#x8868;&#x9762;&#x6539;&#x8CEA;&#x6280;&#x8853;&#x9014;&#x65B9;&#x3082;&#x306A;&#x3044;&#x30E6;&#x30FC;&#x30C6;&#x30A3;&#x30EA;&#x30C6;&#x30A3;&#x306F;&#x3055;&#x307E;&#x3056;&#x307E;&#x306A;&#x751F;&#x7269;&#x533B;&#x5B66;&#x30A2;&#x30D7;&#x30EA;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3067;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x305F;&#x3060;&#x3057;&#x3001;&#x4E3B;&#x306A;&#x6B20;&#x70B9;&#x306F;&#x7D30;&#x80DE;&#x8868;&#x9762;&#x3068;&#x89AA;&#x6C34;&#x6027;&#x9AD8;&#x5206;&#x5B50;&#x306E;&#x8CA7;&#x3057;&#x3044;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5F15;&#x304D;&#x8D77;&#x3053;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x975E;&#x52B9;&#x7387;&#x306A;&#x7D30;&#x80DE;&#x8868;&#x9762;&#x6539;&#x8CEA;&#x3092;&#x61F8;&#x5FF5;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x8868;&#x9762;&#x306E;&#x53CD;&#x5FDC;&#x6027;&#x3001;&#x89AA;&#x6C34;&#x6027;&#x9AD8;&#x5206;&#x5B50;&#x306E;&#x63A5;&#x6728;&#x52B9;&#x7387;&#x3092;&#x5909;&#x8ABF;&#x3059;&#x308B;&#x53CD;&#x5FDC;&#x300C;&#x6DFB;&#x52A0;&#x5264;&#x300D;&#x9AD8;&#x5206;&#x5B50;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3001;&#x5C0F;&#x8AAC;&#x3001;&#x9AD8;&#x52B9;&#x7387;&#x3001;&#x666E;&#x904D;&#x7684;&#x306A;&#x6226;&#x7565;&#x3092;&#x8AAC;&#x660E;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x524D;&#x4F8B;&#x306E;&#x306A;&#x3044;&#x62E1;&#x5F35;&#x30BB;&#x30EB;&#x8868;&#x9762;&#x6539;&#x8CEA;&#x306E;&#x6700;&#x5927; 10 &#x500D;&#x306B;&#x9069;&#x3057;&#x305F;&#x300C;&#x6DFB;&#x52A0;&#x5264;&#x300D;&#x30DD;&#x30EA;&#x30DE;&#x30FC;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x3060;&#x3063;&#x305F;&#x300C;&#x5B88;&#x308A;&#x300D;&#x9AD8;&#x5206;&#x5B50;&#x306E;&#x5B9A;&#x6570;&#x3068;&#x4F4E;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x3067;&#x5B58;&#x5728;&#x3092;&#x8A8D;&#x3081;&#x305F;.&#x3053;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x6027;&#x52B9;&#x7387;&#x306E;&#x5411;&#x4E0A;&#x3057;&#x3001;&#x95A2;&#x4E0E;&#x306E;&#x53EF;&#x80FD;&#x306A;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x3092;&#x8AAC;&#x660E;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30BB;&#x30EB;&#x306E;&#x4E92;&#x63DB;&#x6027;&#x6280;&#x8853;&#x3092;&#x5834;&#x5408; 4 &#x3064;&#x306E;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x30BB;&#x30EB; &#x30BF;&#x30A4;&#x30D7;--&#x5B9F;&#x8A3C; Jurkat &#x7D30;&#x80DE;&#x3001;&#x8840;&#x5C0F;&#x677F;&#x3001;&#x767D;&#x8840;&#x7403;&#x3001;&#x8D64;&#x8840;&#x7403; (RBC)&#x3002;&#x9AD8;&#x5206;&#x5B50;&#x6FC3;&#x539A;&#x9AD8;&#x5206;&#x5B50;&#x6EB6;&#x6DB2;&#x4E2D;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x8868;&#x9762;&#x306B;&#x30B0;&#x30E9;&#x30D5;&#x30C8;&#x306E;&#x5B9F;&#x7528;&#x7684;&#x306A;&#x30A2;&#x30D7;&#x30EA;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306F;&#x3001;&#x8D64;&#x8840;&#x7403;&#x8868;&#x9762;&#x6297;&#x539F; RhD null RBC &#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x5F37;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x507D;&#x88C5;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x539F;&#x5247;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x6280;&#x8853;&#x306F;&#x69D8;&#x3005; &#x306A;&#x9AD8;&#x5206;&#x5B50;&#x7CFB;&#x3068;&#x5927;&#x304D;&#x306A;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x3092;&#x79D8;&#x3081;&#x305F;&#x4F53;&#x7528;&#x306B;&#x57FA;&#x3065;&#x3044;&#x3066;&#x30E9;&#x30A4;&#x30D6;&#x306E;&#x30BB;&#x30EB;&#x6280;&#x8853;&#x306A;&#x3069;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x7A2E;&#x985E;&#x306B;&#x9069;&#x5FDC;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30BB;&#x30EB;&#x306F;&#x3001;&#x96C6;&#x4E2D;&#x3068;&#x53CD;&#x5FDC;&#x9AD8;&#x5206;&#x5B50;&#x6EB6;&#x6DB2;&#x306E;&#x8868;&#x9762;&#x9AD8;&#x5206;&#x5B50;&#x3092;&#x30B0;&#x30E9;&#x30D5;&#x30C8;&#x3092;&#x5F37;&#x5316;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;

&#xACE0;&#xBD84;&#xC790; &#xC140; &#xD45C;&#xBA74; &#xCC98;&#xB9AC; &#xAE30;&#xBC95;&#xC73C;&#xB85C; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xC0DD;&#xBA85; &#xC758;&#xD559; &#xC5B4;&#xD50C;&#xB9AC;&#xCF00;&#xC774;&#xC158;&#xC5D0; &#xC5C4;&#xCCAD;&#xB09C; &#xC720;&#xD2F8;&#xB9AC;&#xD2F0;&#xB97C; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0AC;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, &#xC8FC;&#xC694; &#xB2E8;&#xC810;&#xC740; &#xBE44;&#xD6A8;&#xC728;&#xC801;&#xC778; &#xC140; &#xD45C;&#xBA74; &#xAC1C; &#xC9C8; &#xC138;&#xD3EC; &#xD45C;&#xBA74; &#xCE5C;&#xC218;&#xC131; &#xACE0;&#xBD84;&#xC790;&#xC758; &#xBD88; &#xC30D; &#xD55C; &#xD611;&#xD68C;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xC6B0;&#xB824;. &#xC5EC;&#xAE30;, nonreactive &quot;&#xCCA8;&#xAC00;&#xC81C;&quot; &#xACE0;&#xBD84;&#xC790; &#xC140; &#xD45C;&#xBA74; &#xBC18;&#xC751;&#xC131;, &#xCE5C;&#xC218;&#xC131; &#xACE0;&#xBD84;&#xC790;&#xC758; &#xC811;&#xBAA9; &#xD6A8;&#xC728; &#xBCC0;&#xC870;&#xC5D0; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xB418;&#xB294; &#xC18C;&#xC124;, &#xB9E4;&#xC6B0; &#xD6A8;&#xC728;&#xC801;&#xC774; &#xACE0; &#xBCF4;&#xD3B8;&#xC801;&#xC778; &#xC804;&#xB7B5;&#xC744; &#xC124;&#xBA85; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC804;&#xB840; &#xC5C6;&#xB294; &#xD5A5;&#xC0C1; &#xB41C; &#xC140; &#xD45C;&#xBA74; &#xC218;&#xC815; &#xD558; &#xC5EC; &#xCD5C;&#xB300; 10 &#xBC30; &#xC801;&#xD569; &quot;&#xCCA8;&#xAC00;&#xC81C;&quot; &#xD3F4;&#xB9AC;&#xBA38;&#xC758; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xB18D;&#xB3C4;&#xC758; &quot;&#xBC18;&#xC751;&quot; &#xACE0;&#xBD84;&#xC790; &#xC77C;&#xC815; &#xD558; &#xACE0; &#xB0AE;&#xC740; &#xB18D;&#xB3C4;&#xB85C; &#xC874;&#xC7AC; &#xD588;&#xB2E4; &#xAD00;&#xCC30; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC774; &#xC911;&#xC694;&#xC131; &#xD6A8;&#xC728;&#xC131; &#xC99D;&#xAC00; &#xBC0F; &#xCC38;&#xC5EC; &#xAC00;&#xB2A5;&#xD55C; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC5D0; &#xB300;&#xD574;&#xC11C;&#xB294; &#xC124;&#xBA85;. &#xC140; &#xD638;&#xD658; &#xAE30;&#xC220;&#xC740; 4 &#xAC1C;&#xC758; &#xC11C;&#xB85C; &#xB2E4;&#xB978; &#xC138;&#xD3EC; &#xC720;&#xD615;-&#xC758; &#xACBD;&#xC6B0; &#xC2DC;&#xC5F0; &#xC801;&#xD608;&#xAD6C; (RBC), &#xBC31;&#xD608;&#xAD6C;, &#xD608;&#xC18C;&#xD310;, &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; Jurkat &#xC138;&#xD3EC;. RBC &#xC9C0;&#xC0C1; &#xD56D; &#xC6D0; RhD null RBC&#xC758; &#xAC1C;&#xBC1C;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD5A5;&#xC0C1; &#xB41C; &#xC704;&#xC7A5; &#xD558; &#xC5EC; &#xC811;&#xBAA9; &#xC9D1;&#xC911;&#xB41C; &#xD3F4;&#xB9AC;&#xBA38; &#xC194;&#xB8E8;&#xC158;&#xC5D0; &#xC140; &#xD45C;&#xBA74;&#xC5D0; &#xACE0;&#xBD84;&#xC790;&#xC758; &#xC2E4;&#xC6A9;&#xC801;&#xC778; &#xC751;&#xC6A9; &#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB7A8;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6D0;&#xCE59;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C;,&#xC774; &#xAE30;&#xC220;&#xC740; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xACE0;&#xBD84;&#xC790; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C; &#xBC0F; &#xB77C;&#xC774;&#xBE0C; &#xC140; &#xAE30;&#xBC18; &#xAE30;&#xC220;&#xACFC; &#xAC19;&#xC740; &#xC0DD;&#xBA85; &#xC758;&#xD559; &#xC5B4;&#xD50C;&#xB9AC;&#xCF00;&#xC774;&#xC158;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC0C1;&#xB2F9;&#xD55C; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xB825;&#xC744; &#xAC00;&#xC9C4; &#xC140; &#xD615;&#xC2DD;&#xC744; &#xC801;&#xC6A9;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xD5A5;&#xC0C1; &#xB41C; &#xC140; &#xD3F4;&#xB9AC;&#xBA38; &#xD45C;&#xBA74;&#xC5D0; &#xC9D1;&#xC911; &#xD558; &#xACE0; nonreactive &#xC218;&#xC131; &#xD3F4;&#xB9AC;&#xBA38; &#xC194;&#xB8E8;&#xC158; &#xC811;&#xBAA9;.

T&eacute;cnicas de modificaci&oacute;n superficial macromoleculares de la c&eacute;lula han demostrado gran utilidad en diversas aplicaciones biom&eacute;dicas. Sin embargo, un gran inconveniente refiere a modificaci&oacute;n superficial de la c&eacute;lula ineficiente causada por la mala Asociaci&oacute;n de macromol&eacute;culas hidrof&iacute;licas con las superficies de la c&eacute;lula. Aqu&iacute; se describe una estrategia novedosa, altamente eficiente y universal en que macromol&eacute;culas &quot;aditivos&quot; no reactivas se utilizan para modular la eficiencia injertaba de macromol&eacute;culas reactivo, hidrof&iacute;lico superficie celular. Modificaciones superficiales de c&eacute;lula mejorada sin precedentes por hasta diez veces fueron observadas cuando varias concentraciones de un pol&iacute;mero &quot;aditivo&quot; conveniente estuvo presente con una concentraci&oacute;n constante y baja de una macromol&eacute;cula &quot;reactiva&quot;. La importancia de este aumento de la eficiencia y se discuten los posibles mecanismos implicados. La t&eacute;cnica compatible celular se demuestra en el caso de cuatro diferentes tipos de c&eacute;lulas: gl&oacute;bulos rojos (RBC), leucocitos, plaquetas y c&eacute;lulas Jurkat. Una aplicaci&oacute;n pr&aacute;ctica del injerto macromol&eacute;culas a las superficies de la c&eacute;lula en soluciones concentradas de pol&iacute;mero es demostrada por el camuflaje mejorado de ant&iacute;genos de superficie de RBC para el desarrollo de RBC nulo RhD. En principio, la t&eacute;cnica puede adaptarse a diferentes sistemas macromoleculares y tipos de la c&eacute;lula, con un gran potencial para aplicaciones biom&eacute;dicas tales como tecnolog&iacute;as basado en vivo de la c&eacute;lula.

C&eacute;lula mayor superficie pol&iacute;mero injerto en soluciones de pol&iacute;meros acuosa concentrada y no reactivo.

&#x4EB2;&#x6C34;&#x6027;&#x805A;&#x5408;&#x7269;&#x6216;&#x751F;&#x7269;&#x5236;&#x836F;&#x5171;&#x4EF7;&#x952E;&#x9644;&#x4EF6;&#x8868;&#x9762;&#x7684;&#x7EA2;&#x8840;&#x7EC6;&#x80DE; (&#x7EA2;&#x7EC6;&#x80DE;) &#x4EE5;&#x524D;&#x5DF2;&#x7ECF;&#x663E;&#x793A;&#x4E3A;&#x4E00;&#x7CFB;&#x5217;&#x5E94;&#x7528;&#x7A0B;&#x5E8F;&#x76F8;&#x5BF9;&#x517C;&#x5BB9;&#x53CA;&#x6709;&#x6548;&#x7684;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x63CF;&#x8FF0;&#x4E86;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8868;&#x9762;&#x5AC1;&#x63A5;&#x4E0E;&#x8D85;&#x652F;&#x548C;&#x591A;&#x529F;&#x80FD;&#x9AD8;&#x5206;&#x5B50;&#x7684;&#x7B2C;&#x4E00;&#x4E2A;&#x793A;&#x4F8B;&#x3002;&#x4E00;&#x7CFB;&#x5217; (3 kDa 101 kDa&#xFF09; &#x7684;&#x81F4;&#x5BC6;&#x7684;&#x7403;&#x72B6;&#xFF0C;&#x548C;&#x8840;&#x517C;&#x5BB9;&#x8D85;&#x652F;&#x6298;&#x5149;&#x7387; (HPG) &#x662F;&#x5408;&#x6210;&#x548C;&#x5B98;&#x80FD;&#x4E0E;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8868;&#x9762;&#x65E0;&#x529F;&#xFF0C;succinimidyl &#x4E01;&#x4E8C;&#x9178;&#x7EC4; &#xFF08;&#x6BCF;&#x805A;&#x5408;&#x7269; 1 12 &#x7EC4;&#xFF09;&#x3002;&#x968F;&#x540E;&#xFF0C;&#x9759;&#x88AB;&#x5AC1;&#x63A5;&#x5230;&#x7EA2;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x800C;&#x4F7F;&#x7528;&#x7269;&#x7406;&#x8868;&#x5F81;&#x6280;&#x672F;&#x5982;&#x6C34;&#x7684;&#x4E24;&#x76F8;&#x5206;&#x533A;&#x548C;&#x7C92;&#x5B50;&#x7535;&#x6CF3;&#x5206;&#x6790;&#x3002;&#x5B83;&#x88AB;&#x53D1;&#x73B0;&#x5AC1;&#x63A5;&#x7684;&#x7A0B;&#x5EA6;&#x52A0;&#x5F3A;&#x4E86;&#x65E0;&#x529F;&#x7EC4;&#x6BCF;&#x9759;&#xFF0C;&#x9759;&#x7684;&#x6570;&#x76EE;&#x8D8A;&#x6765;&#x8D8A;&#x591A;&#x9759;&#x5206;&#x5B50;&#x91CF;&#x6D53;&#x5EA6;&#x548C;&#x53CD;&#x5E94;&#x65F6;&#x95F4;&#x3002;&#x826F;&#x597D;&#x7684;&#x4F53;&#x5916;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6D3B;&#x6027;-&#x6309;&#x8861;&#x91CF;&#x8102;&#x8D28;&#x8FC7;&#x6C27;&#x5316;&#x3001; &#x8840;&#x7EA2;&#x86CB;&#x767D;&#x6C27;&#x5316;&#x3001; &#x7EC6;&#x80DE;&#x6EB6;&#x89E3;&#x3001; &#x6E17;&#x900F;&#x8106;&#x6027;&#x3001; &#x7A33;&#x5B9A;&#x7684;&#x65B0;&#x9C9C;&#x8840;&#x6E05;&#x548C;&#x805A;&#x5408;&#x884C;&#x4E3A;-&#x6709;&#x4EBA;&#x6307;&#x51FA;&#x5AC1;&#x63A5;&#x6D53;&#x5EA6;&#x8FBE; 4.8 &#x6BEB;&#x7C73;&#x3002;&#x9759;&#x7684;&#x591A;&#x529F;&#x80FD;&#x65B9;&#x9762;&#x5F3A;&#x8C03;&#x4E86;&#x4EE5;&#x4E0B;&#x610F;&#x89C1;&#xFF1A; &#x4F7F;&#x7528;&#x8367;&#x5149;&#x6807;&#x8BB0;-d (&#x5355;&#x514B;&#x9686;) &#x6297;&#x4F53;&#x548C;&#x6D41;&#x5F0F;&#x7EC6;&#x80DE;&#x672F;&#xFF0C;&#x5927;&#x5927;&#x9759;&#x5AC1;&#x63A5;&#x540E;&#x51CF;&#x5C11;&#x7684;&#x6052;&#x6CB3;&#x7334; (RhD) &#x7EC6;&#x80DE;&#x8868;&#x9762;&#x7684;&#x6297;&#x539F;&#x68C0;&#x6D4B;&#x3002;&#x7B2C;&#x4E8C;&#xFF0C;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x4F7F;&#x7528; HPG &#x4F5C;&#x4E3A;&#x591A;&#x529F;&#x80FD;&#x7684;&#x6295;&#x9012;&#x4EE3;&#x7406;&#x8BC1;&#x660E;&#x4E86;&#x5C06;&#x8367;&#x5149;&#x6807;&#x8BB0;&#x9644;&#x52A0;&#x5230;&#x901A;&#x8FC7;&#x5AC1;&#x63A5;&#x524D;&#x53EF;&#x964D;&#x89E3;&#x8054;&#x7CFB;&#x9759;&#x3002;

&#x7EA2;&#x8840;&#x7EC6;&#x80DE;&#x819C;&#x5AC1;&#x63A5;&#x7684;&#x591A;&#x529F;&#x80FD;&#x8D85;&#x652F;&#x6298;&#x5149;&#x7387;&#x3002;

The covalent attachment of hydrophilic polymers or biopharmaceuticals to the surface of red blood cells (RBCs) has previously been shown as a relatively compatible and effective method for a range of applications. Here, the first example of cell-surface grafting with a hyperbranched and multi-functional macromolecule is described. A range (3 kDa-101 kDa) of dense, globular, and blood compatible hyperbranched polyglycerols (HPG) were synthesized and functionalized with cell-surface reactive, succinimidyl succinate groups (1-12 groups per polymer). Subsequently, HPG was grafted to the RBCs, which were analyzed using physical characterization techniques such as aqueous two-phase partitioning and particle electrophoresis. It was found that the extent of grafting was enhanced by increasing HPG molecular weight, the number of reactive groups per HPG, HPG concentration, and reaction time. Good in vitro cell viability - as measured by lipid peroxidation, hemoglobin oxidation, cell lysis, osmotic fragility, stability in fresh serum and aggregation behavior - was observed for grafting concentrations up to 4.8 mm. The multi-functional aspect of HPG is highlighted by the following observations: using fluorescein-labeled Anti-D (monoclonal) antibody and flow cytometry, the detection of cell-surface Rhesus (RhD) antigens were significantly reduced upon HPG grafting. Secondly, the potential for using HPG as a multi-functional, delivery agent was demonstrated by attaching fluorescent markers to the HPG via degradable linkages prior to grafting.

Red blood cell membrane grafting of multi-functional hyperbranched polyglycerols.

A d&eacute;j&agrave; d&eacute;montr&eacute; l&#39;attachement covalent des polym&egrave;res hydrophiles ou produits biopharmaceutiques &agrave; la surface des globules rouges (h&eacute;maties) comme une m&eacute;thode efficace et relativement compatible pour un &eacute;ventail d&#39;applications. Ici, le premier exemple de greffe de cellule-surface avec une hyper-ramifi&eacute;s et une macromol&eacute;cule multifonctionnel est d&eacute;crite. Une gamme (3 101-kDa kDa) de dense, globulaires, et sang hyperbranched compatible polyglyc&eacute;rols (HPG) ont &eacute;t&eacute; synth&eacute;tis&eacute;s et fonctionnalis&eacute;s avec des surface cellulaire, succinimidyl succinate groupes r&eacute;actifs (1-12 groupes par polym&egrave;re). Par la suite, HPG s&#39;est greff&eacute;e &agrave; des globules rouges, qui ont &eacute;t&eacute; analys&eacute;s en utilisant des techniques de caract&eacute;risation physique telles que l&#39;&eacute;lectrophor&egrave;se de partitionnement et de particules en deux phases aqueuse. Il a &eacute;t&eacute; constat&eacute; que l&#39;ampleur de la greffe a &eacute;t&eacute; am&eacute;lior&eacute; par le poids mol&eacute;culaire du croissant HPG, le nombre de groupes r&eacute;actifs par HPG, HPG, de concentration et de temps de r&eacute;action. Viabilit&eacute; cellulaire in vitro bon - telle que mesur&eacute;e par la peroxydation lipidique, oxydation de l&#39;h&eacute;moglobine, lyse cellulaire, fragilit&eacute; osmotique, stabilit&eacute; dans le s&eacute;rum frais et le comportement d&#39;agr&eacute;gation - a &eacute;t&eacute; observ&eacute;e pour les greffes des concentrations jusqu&#39;&agrave; 4,8 mm. L&#39;aspect multifonctionnel de HPG est mis en &eacute;vidence par les observations suivantes : en utilisant des anticorps (anticorps monoclonaux) anti-d marqu&eacute; &agrave; la fluoresc&eacute;ine et cytom&eacute;trie en flux, la d&eacute;tection des antig&egrave;nes de surface cellulaire rh&eacute;sus (RhD) ont &eacute;t&eacute; significativement r&eacute;duits &agrave; HPG greffage. Deuxi&egrave;mement, la possibilit&eacute; d&#39;utiliser HPG comme agent de livraison multi-fonctions, a &eacute;t&eacute; d&eacute;montr&eacute;e en attachant des marqueurs fluorescents &agrave; la HPG par l&#39;interm&eacute;diaire de liens d&eacute;gradables avant la greffe.

Globules rouges membrane greffage de polyglyc&eacute;rols hyperbranched multifonctionnel.

Die kovalente Anlage hydrophile Polymere oder Biopharmazeutika auf der Oberfl&auml;che der roten Blutzellen (RBCs) wurde zuvor als relativ kompatibel und wirksame Methode f&uuml;r vielf&auml;ltige Einsatzbereiche gezeigt. Hier ist das erste Beispiel der Zelloberfl&auml;che Pfropfen mit Hyperbranched und multifunktionale Makromolek&uuml;l beschrieben. Eine Reihe (3 kDa-101 kDa) von Dichte, kugelige und Blut kompatibel Hyperbranched Polyglycerols (HPG) wurden synthetisiert und funktionalisierten mit Zelloberfl&auml;che reaktive, Succinimidyl Succinat Gruppen (1-12 Gruppen pro Polymer). HPG wurde anschlie&szlig;end an die tropfenf&ouml;rmigen veredelt die analysiert wurden mit physikalischen Charakterisierung Techniken wie w&auml;&szlig;rige zweiphasige Partitionierung und Partikel-Elektrophorese. Ergab, dass das Ausma&szlig; der Pfropfen durch zunehmende HPG Molekulargewicht, die Anzahl der reaktiven Gruppen pro HPG, HPG verst&auml;rkt wurde Konzentration und Reaktionszeit. Gute in-vitro Zellviabilit&auml;t - gemessen durch Lipidperoxidation, H&auml;moglobin-Oxidation, Zellenzerst&ouml;rung, osmotische Fragilit&auml;t, Stabilit&auml;t in frischem Serum und Aggregationsverhalten - wurde beobachtet, Unterlagsreben Konzentrationen bis zu 4,8 mm. Der multifunktionale Aspekt der HPG ist durch folgenden Beobachtungen hervorgehoben: mit Fluoreszein-markierten Anti-D (monoklonale) Antik&ouml;rper und Durchflusszytometrie, die Erkennung der Zelloberfl&auml;che Rhesus (RhD) Antigene wurden deutlich nach HPG Pfropfen reduziert. Zweitens zeigte sich das Potenzial f&uuml;r die Verwendung von HPG als multifunktionale, Lieferung Agent durch Anf&uuml;gen von fluoreszierenden Marker an der HPG &uuml;ber abbaubare Verbindungen vor dem Pfropfen.

Roter Blutk&ouml;rperchen Membran Pfropfen von multifunktionalen Hyperbranched Polyglycerols.

Il collegamento covalente di polimeri idrofili o biopharmaceuticals alla superficie delle cellule rosse del sangue (globuli rossi) &egrave; stato dimostrato in precedenza come un metodo relativamente compatibile ed efficace per una vasta gamma di applicazioni. Qui, il primo esempio di superficie cellulare innesto con un hyperbranched e multifunzionale macromolecola &egrave; descritto. Una gamma (3 kDa-101 kDa) di densa, globulare, e sangue compatibile hyperbranched polyglycerols (HPG) sono stati sintetizzati e funzionalizzato con gruppi di succinato succinimidil reattivi, superficie cellulare (1-12 gruppi per polimero). Successivamente, HPG &egrave; stata innestata a globuli rossi, che sono stati analizzati con tecniche di caratterizzazione fisica come acquosa elettroforesi del partizionamento e particella a due fasi. Si &egrave; constatato che la misura di innesto fu accresciuta dalla crescente HPG peso molecolare, il numero di gruppi reattivi per HPG, HPG concentrazione e tempo di reazione. Buona attuabilit&agrave; in vitro - misurato dalla perossidazione lipidica, ossidazione dell&#39;emoglobina, lisi delle cellule, fragilit&agrave; osmotica, stabilit&agrave; nel siero fresco e il comportamento di aggregazione - come &egrave; stato osservato per innesto concentrazioni fino a 4,8 mm. L&#39;aspetto multifunzionale di HPG &egrave; evidenziata dalle seguenti osservazioni: utilizzando l&#39;anticorpo (monoclonale) anti-d marcato con fluoresceina e citometria a flusso, il rilevamento degli antigeni di superficie cellulare Rhesus (RhD) sono sensibilmente ridotti all&#39;innesto HPG. In secondo luogo, &egrave; stato dimostrato il potenziale per usando HPG come un agente di recapito multifunzionali, associando marcatori fluorescenti per HPG tramite collegamenti degradabili prima dell&#39;innesto.

Red blood cell membrana innesto di polyglycerols hyperbranched multifunzionale.

&#x89AA;&#x6C34;&#x6027;&#x30DD;&#x30EA;&#x30DE;&#x30FC;&#x3084;&#x30D0;&#x30A4;&#x30AA;&#x533B;&#x85AC;&#x54C1;&#x306E;&#x30AD;&#x30E3;&#x30E9;&#x30AF;&#x30BF;&#x30EA;&#x30BC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x8D64;&#x8840;&#x7403; &#xFF08;&#x8D64;&#x8840;&#x7403;&#xFF09; &#x306E;&#x8868;&#x9762;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x4EE5;&#x524D;&#x306F;&#x7BC4;&#x56F2;&#x306E;&#x30A2;&#x30D7;&#x30EA;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306E;&#x6BD4;&#x8F03;&#x7684;&#x4E92;&#x63DB;&#x6027;&#x306E;&#x3042;&#x308B;&#x3001;&#x52B9;&#x679C;&#x7684;&#x306A;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x8868;&#x9762;&#x30B3;&#x30A2;&#x30B7;&#x30A7;&#x30EB;&#x3068;&#x591A;&#x6A5F;&#x80FD;&#x9AD8;&#x5206;&#x5B50;&#x3092;&#x30B0;&#x30E9;&#x30D5;&#x30C8;&#x306E;&#x6700;&#x521D;&#x306E;&#x4F8B;&#x3092;&#x8AAC;&#x660E;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x9AD8;&#x5BC6;&#x5EA6;&#x3001;&#x7403;&#x72B6;&#x306E;&#x7BC4;&#x56F2; (3 kDa 101 kDa) &#x3068;&#x8840;&#x4E92;&#x63DB;&#x6027;&#x30B3;&#x30A2;&#x30B7;&#x30A7;&#x30EB; polyglycerols &#xFF08;HPG &#x5408;&#x6210;&#x3057;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x8868;&#x9762;&#x53CD;&#x5FDC;&#x8A66;&#x9A13;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x30B3;&#x30CF;&#x30AF;&#x9178;&#x30B0;&#x30EB;&#x30FC;&#x30D7; (&#x30DD;&#x30EA;&#x30DE;&#x30FC;&#x3042;&#x305F;&#x308A; 1 12 &#x30B0;&#x30EB;&#x30FC;&#x30D7;) &#x3068;&#x5B98;&#x80FD;&#x57FA;&#x5316;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x305D;&#x306E;&#x5F8C;&#x3001;HPG &#x6C34;&#x6027;&#x4E8C;&#x76F8;&#x306E;&#x30D1;&#x30FC;&#x30C6;&#x30A3;&#x30B7;&#x30E7;&#x30CB;&#x30F3;&#x30B0;&#x3068;&#x7C92;&#x5B50;&#x96FB;&#x6C17;&#x6CF3;&#x52D5;&#x306A;&#x3069;&#x306E;&#x7269;&#x7406;&#x7684;&#x30AD;&#x30E3;&#x30E9;&#x30AF;&#x30BF;&#x30EA;&#x30BC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x6280;&#x8853;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x5206;&#x6790;&#x3057;&#x305F;&#x8D64;&#x8840;&#x7403;&#x306B;&#x79FB;&#x690D;&#x3057;&#x305F;&#x3068;&#x3053;&#x308D;&#x3002;&#x63A5;&#x6728;&#x306E;&#x7A0B;&#x5EA6;&#x5897;&#x52A0; HPG &#x5206;&#x5B50;&#x91CF;&#x3001;HPG HPG &#x3042;&#x305F;&#x308A;&#x53CD;&#x5FDC;&#x30B0;&#x30EB;&#x30FC;&#x30D7;&#x306E;&#x6570;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x4FC3;&#x9032;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x308F;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x3068;&#x53CD;&#x5FDC;&#x6642;&#x9593;&#x3002;&#x826F;&#x3044; in vitro &#x7D30;&#x80DE;&#x751F;&#x5B58;&#x7387; - &#x8102;&#x8CEA;&#x904E;&#x9178;&#x5316;&#x3001;&#x30D8;&#x30E2;&#x30B0;&#x30ED;&#x30D3;&#x30F3;&#x306E;&#x9178;&#x5316;&#x3001;&#x30BB;&#x30EB;&#x63DB;&#x6563;&#x3001;&#x6D78;&#x900F;&#x5727;&#x8106;&#x5F31;&#x6027;&#x3001;&#x5B89;&#x5B9A;&#x6027;&#x306E;&#x65B0;&#x9BAE;&#x306A;&#x8840;&#x6E05;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x96C6;&#x8A08;&#x52D5;&#x4F5C; - &#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x306E;&#x79FB;&#x690D;&#x306E;&#x305F;&#x3081; 4.8 mm &#x307E;&#x3067;&#x3002;HPG &#x306E;&#x591A;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306E;&#x5074;&#x9762;&#x306F;&#x4EE5;&#x4E0B;&#x306E;&#x89B3;&#x6E2C;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5F37;&#x8ABF;&#x8868;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;: &#x30D5;&#x30EB;&#x30AA;&#x30EC;&#x30BB;&#x30A4;&#x30F3;&#x6A19;&#x8B58;&#x6297;&#x30E2;&#x30CE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30FC;&#x30CA;&#x30EB;&#x6297;&#x4F53;&#x3068;&#x30D5;&#x30ED;&#x30FC;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x30E1;&#x30C8;&#x30EA;&#x30FC;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x30BB;&#x30EB;&#x8868;&#x9762;&#x30A2;&#x30AB;&#x30B2;&#x30B6;&#x30EB; (RhD) &#x6297;&#x539F;&#x306E;&#x691C;&#x51FA;&#x6709;&#x610F;&#x306B;&#x5C0F;&#x3055;&#x304F; HPG &#x79FB;&#x690D;&#x6642;&#x306B;&#x3002;&#x7B2C;&#x4E8C;&#x306B;&#x3001;HPG &#x591A;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3001;&#x914D;&#x4FE1;&#x30A8;&#x30FC;&#x30B8;&#x30A7;&#x30F3;&#x30C8;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x306E;&#x4F7F;&#x7528;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x306F;&#x79FB;&#x690D;&#x524D;&#x5206;&#x89E3;&#x306E;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B8;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066; HPG &#x306B;&#x86CD;&#x5149;&#x30DE;&#x30FC;&#x30AB;&#x30FC;&#x3092;&#x4ED8;&#x3051;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;

&#x8D64;&#x8840;&#x7403;&#x819C;&#x591A;&#x6A5F;&#x80FD;&#x30B3;&#x30A2;&#x30B7;&#x30A7;&#x30EB; polyglycerols &#x306E;&#x79FB;&#x690D;&#x3002;

&#xC801;&#xD608;&#xAD6C; (Rbc)&#xC758; &#xD45C;&#xBA74;&#xC5D0; &#xCE5C;&#xC218;&#xC131; &#xACE0;&#xBD84;&#xC790; &#xB098; &#xBC14;&#xC774;&#xC624;&#xC758; &#xACF5;&#xC720; &#xCCA8;&#xBD80; &#xD30C;&#xC77C; &#xC774;&#xC804;&#xC5D0; &#xC751;&#xC6A9; &#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB7A8;&#xC758; &#xBC94;&#xC704;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC0C1;&#xB300;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xD638;&#xD658; &#xD558; &#xACE0; &#xD6A8;&#xACFC;&#xC801;&#xC778; &#xBC29;&#xBC95;&#xC73C;&#xB85C; &#xBCF4;&#xC600;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30;, &#xC138;&#xD3EC; &#xD45C;&#xBA74; hyperbranched &#xBC0F; &#xB2E4;&#xAE30;&#xB2A5; &#xACE0;&#xBD84;&#xC790;&#xC640; &#xC811;&#xBAA9; &#xD558;&#xB294; &#xCCAB; &#xBC88;&#xC9F8; &#xC608;&#xC81C;&#xB294; &#xC124;&#xBA85; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xBC00;&#xB3C4;, &#xAD6C;&#xD615;&#xC758; &#xBC94;&#xC704; (3 kDa 101 kDa) &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xD53C; &#xD638;&#xD658; hyperbranched polyglycerols (HPG)&#xC744; &#xD569;&#xC131; &#xC138;&#xD3EC; &#xD45C;&#xBA74; &#xBC18;&#xC751;&#xC131;, succinimidyl &#xD638;&#xBC15; &#xADF8;&#xB8F9; (&#xD3F4;&#xB9AC;&#xBA38; &#xB2F9; 1-12 &#xADF8;&#xB8F9;) functionalized. &#xADF8; &#xD6C4;, HPG &#xC218;&#xC131; 2 &#xB2E8;&#xACC4; &#xBD84;&#xD560; &#xBC0F; &#xC785;&#xC790; &#xC804;&#xAE30; &#xC774;&#xB3D9; &#xBC95; &#xB4F1; &#xBB3C;&#xB9AC;&#xC801; &#xD2B9;&#xC131; &#xBD84;&#xC11D; &#xAE30;&#xC220;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xBD84;&#xC11D; &#xD588;&#xB2E4; Rbc&#xB97C; &#xD22C;&#xC785; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC811;&#xBAA9;&#xC758; &#xBC94;&#xC704; &#xC99D;&#xAC00; HPG &#xBD84;&#xC790;&#xB7C9;, HPG HPG &#xB2F9; &#xBC18;&#xC751; &#xADF8;&#xB8F9;&#xC758; &#xC218;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xD5A5;&#xC0C1; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xBC1C;&#xACAC; &#xB18D;&#xB3C4; &#xBC0F; &#xBC18;&#xC751; &#xC2DC;&#xAC04;. &#xC88B;&#xC740; &#xCCB4; &#xC678; &#xC138;&#xD3EC; &#xC0DD;&#xC874; &#xB2A5;&#xB825;-&#xC9C0;&#xC9C8; &#xACFC;&#xC0B0;&#xD654;, &#xD5E4;&#xBAA8;&#xAE00;&#xB85C;&#xBE48; &#xC0B0;&#xD654;, &#xC138;&#xD3EC; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC6A9; &#xD574;, &#xC0BC; &#xD22C; &#xCDE8;&#xC57D;&#xC131;, &#xC2E0;&#xC120;&#xD55C; &#xD608; &#xCCAD; &#xBC0F; &#xC9D1;&#xACC4; &#xB3D9;&#xC791;-&#xC548;&#xC815;&#xC131;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xCE21;&#xC815; &#xB41C; &#xB18D;&#xB3C4; &#xC811;&#xBAA9; &#xD558;&#xB294; &#xAC83;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xAD00;&#xCC30; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4; &#xCD5C;&#xB300; 4.8 m m. HPG &#xB2E4;&#xAE30;&#xB2A5; &#xCE21;&#xBA74; &#xB2E4;&#xC74C; &#xAD00;&#xCC30;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xAC15;&#xC870; &#xD45C;&#xC2DC; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;: cytometry (&#xB2E8;&#xC77C; &#xD074;&#xB85C; &#xB110;) &#xD56D; &#xCCB4; Anti-D fluorescein &#xD45C;&#xC2DC;&#xC5D0; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC;, &#xC138;&#xD3EC; &#xD45C;&#xBA74; &#xBD89;&#xC740; &#xD138; (RhD) &#xD56D; &#xC6D0; &#xAC80;&#xCD9C; HPG &#xC811;&#xBAA9;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xD06C;&#xAC8C; &#xAC10;&#xC18C; &#xD588;&#xB2E4;. &#xB458;&#xC9F8;, &#xB2E4;&#xAE30;&#xB2A5;, &#xBC30;&#xB2EC; &#xC5D0;&#xC774;&#xC804;&#xD2B8; HPG &#xC0AC;&#xC6A9;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xB825; &#xD615;&#xAD11; &#xD45C;&#xC2DD; HPG &#xC811;&#xBAA9; &#xC804;&#xC5D0; &#xD574; &#xC131; &#xAD00;&#xACC4;&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; &#xC5F0;&#xACB0; &#xD558; &#xC5EC; &#xC2DC;&#xC5F0; &#xD588;&#xB2E4;.

&#xC801;&#xD608;&#xAD6C; &#xB9C9; &#xB2E4;&#xAE30;&#xB2A5; hyperbranched polyglycerols&#xC758; &#xC811;&#xBAA9;.

El accesorio covalente de pol&iacute;meros hidr&oacute;filos o productos biofarmac&eacute;uticos a la superficie de los gl&oacute;bulos rojos (gr) se ha demostrado previamente como un m&eacute;todo relativamente compatible y eficaz para una variedad de aplicaciones. Aqu&iacute; se describe el primer ejemplo de superficie celular injerto con hiper-ramificados y multifuncional de la macromol&eacute;cula. Una gama (3 kDa-101 kDa) de denso, globulares, y sangre compatible hiper-ramificados polyglycerols (HPG) fueron sintetizados y funcionalizados con grupos de succinato reactivos, de succinimidyl en superficie de la c&eacute;lula (1-12 grupos por pol&iacute;mero). Posteriormente, el HPG se injert&oacute; a los gl&oacute;bulos rojos, que fueron analizados utilizando t&eacute;cnicas de caracterizaci&oacute;n f&iacute;sica como electroforesis de particionado y part&iacute;culas dos fases acuosa. Se constat&oacute; que la medida del injerto fue acompa&ntilde;ada de mayor peso molecular que HPG, el n&uacute;mero de grupos reactivos por HPG, HPG, concentraci&oacute;n y tiempo de reacci&oacute;n. Viabilidad celular in vitro buena - medida por la peroxidaci&oacute;n lip&iacute;dica, oxidaci&oacute;n de la hemoglobina, lisis celular, fragilidad osm&oacute;tica, estabilidad en suero fresco y comportamiento de agregaci&oacute;n - observ&oacute; para injertar las concentraciones de hasta 4,8 mm. El aspecto multifuncional de HPG se destaca por las siguientes observaciones: utilizando el anticuerpo (monoclonal) anti-d marcado con fluoresce&iacute;na y citometr&iacute;a de flujo, la detecci&oacute;n de ant&iacute;genos de superficie celular Rhesus (RhD) se redujeron significativamente en injerto de HPG. En segundo lugar, el potencial para usar HPG como un agente de entrega de m&uacute;ltiples funciones, fue demostrado por colocar marcadores fluorescentes para el HPG mediante v&iacute;nculos degradables antes del injerto.

Gl&oacute;bulos rojos membrana injerto de polyglycerols de m&uacute;ltiples funciones hiper-ramificados.

&#x8D85;&#x652F;&#x5316;&#x805A;&#x7518;&#x6CB9; (HPG) &#x5AC1;&#x63A5;&#x7EA2;&#x8840;&#x7EC6;&#x80DE; (&#x7EA2;&#x7EC6;&#x80DE;) &#x7684;&#x4F53;&#x5185;&#x5FAA;&#x73AF;&#x5728;&#x5C0F;&#x9F20;&#x4E2D;&#x8FDB;&#x884C;&#x4E86;&#x8C03;&#x67E5;&#x3002;&#x9759;&#x5206;&#x5B50;&#x63A5;&#x679D;&#x6BCF;&#x7EA2;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x6570;&#x91CF;&#x88AB;&#x8861;&#x91CF;&#x4F7F;&#x7528;&#x6C1A;&#x6807;&#x8BB0;&#x7684;&#x4E0D;&#x540C;&#x5206;&#x5B50;&#x91CF; &#xFF1B; HPGs ((3) H HPG)&#x4ECE; 1 &times; 10(5) 2 &times; 10(6) &#x5206;&#x5B50;&#x7EA2;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6BCF;&#x5230;&#x4E0D;&#x7B49;&#x7684;&#x503C;&#x3002;&#x9759;&#x5AC1;&#x63A5;&#x7EA2;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x7279;&#x70B9;&#x662F;&#x4F53;&#x5916;&#x6D4B;&#x91CF;&#x7684;&#x7535;&#x6CF3;&#x3001; &#x8865;&#x4F53;&#x4ECB;&#x5BFC;&#x7684;&#x6EB6;&#x89E3;&#x548C;&#x6E17;&#x900F;&#x8106;&#x6027;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x7ED3;&#x679C;&#x663E;&#x793A;&#xFF0C;&#x7EA2;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7EA2;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6BCF; 1.5 &times; 10(5) HPG &#x5206;&#x5B50;&#x63A5;&#x679D;&#x5177;&#x6709;&#x5206;&#x5B50;&#x91CF; 20 &#x548C; 60 kDa &#x5177;&#x6709;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x7279;&#x6027;&#x7684;&#x63A7;&#x5236;&#x7EA2;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;&#x9759;&#x5AC1;&#x63A5;&#x7EA2;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x4F53;&#x5185;&#x6D41;&#x901A;&#x662F;&#x5C3E;&#x5F92;&#x7136;&#x6CE8;&#x5C04;&#x7684;&#x5C0F;&#x9F20; (3) H HPG60K &#x7EA2;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7528;&#x6765;&#x8861;&#x91CF;&#x7684;&#x3002;&#x5B64;&#x7ACB;&#x7684;&#x7EA2;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3001; &#x5168;&#x8840;&#x3001; &#x8840;&#x6D46;&#x3001; &#x4E0D;&#x540C;&#x5668;&#x5B98;&#x3001; &#x5C3F;&#x6DB2;&#x548C;&#x7CAA;&#x4FBF;&#x7684;&#x653E;&#x5C04;&#x6027;&#x8BC4;&#x4F30;&#x5728;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x65F6;&#x95F4;&#x95F4;&#x9694;&#x3002;(3) &#x90E8;&#x5206; H-HPG60K-&#x7EA2;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x5E78;&#x5B58;&#x4E0B;&#x6765;&#x7684;&#x5C0F;&#x9F20; (52%) &#x7684;&#x7B2C;&#x4E00;&#x5929;&#x7559;&#x5728; 50 &#x5929;&#x7684;&#x5FAA;&#x73AF;&#x3002;&#x809D;&#x548C;&#x813E;&#x4EE5;&#x5916;&#x7684;&#x5176;&#x4ED6;&#x5668;&#x5B98;&#x4E2D;&#x6700;&#x5C0F;&#x7684;&#x79EF;&#x7D2F;&#x653E;&#x5C04;&#x6027;&#x6709;&#x4EBA;&#x5EFA;&#x8BAE;&#x4FEE;&#x6539;&#x7EA2;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3002; &#x52A8;&#x7269;&#x7684;&#x6B63;&#x5E38;&#x901A;&#x5173;&#x673A;&#x5236;&#x83B7;&#x5F97;&#x6B63;&#x5E38;&#x91CD;&#x91CF;&#x548C;&#x6CA1;&#x6709;&#x5C38;&#x68C0;&#x5206;&#x6790;&#x4E2D;&#x89C2;&#x5BDF;&#x5230;&#x7684;&#x5F02;&#x5E38;&#x3002;&#x901A;&#x8FC7;&#x6BD4;&#x8F83; (3) H-HPG60K-&#x7EA2;&#x7EC6;&#x80DE;&#x548C;&#x5BB6;&#x5EAD; 26 &#x8102;&#x8D28;&#x819C;&#x8367;&#x5149;&#x6807;&#x8BB0;&#x6807;&#x6709; HPG60K &#x7684;&#x6E05;&#x5173;&#x7387;&#x8BC4;&#x4F30;&#x4E86;&#x7EA2;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E0E;&#x9759;&#x4E4B;&#x95F4;&#x916F;&#x9170;&#x80FA;&#x94FE;&#x63A5;&#x5668;&#x7684;&#x7A33;&#x5B9A;&#x6027;-&#x7EA2;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3002; HPG &#x4FEE;&#x6539;&#x7EA2;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7ED3;&#x5408;&#x6811;&#x7A81;&#x72B6;&#x805A;&#x5408;&#x7269;&#x548C;&#x7EA2;&#x7EC6;&#x80DE;&#x548C;&#x5177;&#x6709;&#x826F;&#x597D;&#x524D;&#x666F;&#x7684;&#x5168;&#x8EAB;&#x7ED9;&#x836F;&#x7684;&#x8BB8;&#x591A;&#x4F18;&#x70B9;&#x548C;&#x5176;&#x4ED6;&#x5E94;&#x7528;&#x7A0B;&#x5E8F;&#x7684;&#x529F;&#x80FD;&#x7684;&#x7EA2;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;

&#x4F53;&#x5185;&#x5FAA;&#x73AF;&#x3001; &#x95F4;&#x9699;&#x548C;&#x4F53;&#x5185;&#x5206;&#x5E03;&#x7684;&#x805A;&#x7518;&#x6CB9;&#x916F;&#x63A5;&#x679D;&#x529F;&#x80FD;&#x6027;&#x7EA2;&#x8840;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;

The in vivo circulation of hyperbranched polyglycerol (HPG) grafted red blood cells (RBCs) was investigated in mice. The number of HPG molecules grafted per RBC was measured using tritium labeled HPGs ((3)H-HPG) of different molecular weights; the values ranged from 1 Ã— 10(5) to 2 Ã— 10(6) molecules per RBC. HPG-grafted RBCs were characterized in vitro by measuring the electrophoretic mobility, complement mediated lysis, and osmotic fragility. Our results show that RBCs grafted with 1.5 Ã— 10(5) HPG molecules per RBC having molecular weights 20 and 60 kDa have similar characteristics as that of control RBCs. The in vivo circulation of HPG-grafted RBCs was measured by a tail vain injection of (3)H-HPG60K-RBC in mice. The radioactivity of isolated RBCs, whole blood, plasma, different organs, urine and feces was evaluated at different time intervals. The portion of (3)H-HPG60K-RBC that survived the first day in mice (52%) remained in circulation for 50 days. Minimal accumulation radioactivity in organs other than liver and spleen was observed suggesting the normal clearance mechanism of modified RBCs. Animals gained normal weights and no abnormalities observed in necropsy analysis. The stability of the ester-amide linker between the RBC and HPG was evaluated by comparing the clearance rate of (3)H-HPG60K-RBC and PKH-26 lipid fluorescent membrane marker labeled HPG60K-RBCs. HPG modified RBCs combine the many advantages of a dendritic polymer and RBCs, and hold great promise in systemic drug delivery and other applications of functional RBC.

InÂ vivo circulation, clearance, and biodistribution of polyglycerol grafted functional red blood cells.

La circulation in vivo de hyperbranched POLYRICINOL&Eacute;ATE (HPG) greff&eacute; globules rouges (h&eacute;maties) a &eacute;t&eacute; &eacute;tudi&eacute;e chez la souris. Le nombre de mol&eacute;cules HPG greff&eacute;s par RBC a &eacute;t&eacute; mesur&eacute; &agrave; l&#39;aide de tritium &eacute;tiquet&eacute; HPGs (3 H-HPG) de diff&eacute;rents poids mol&eacute;culaires ; les valeurs varies de 1 &times; 10 5 &agrave; 2 &times; 10 6 mol&eacute;cules par RBC. HPG-greff&eacute;s les globules rouges ont &eacute;t&eacute; caract&eacute;ris&eacute;s in vitro en mesurant la mobilit&eacute; &eacute;lectrophor&eacute;tique, compl&eacute;ment m&eacute;di&eacute;e par Lyse et fragilit&eacute; osmotique. Nos r&eacute;sultats montrent que RBCs greff&eacute;es avec 1,5 &times; 10 5 mol&eacute;cules HPG par RBC ayant des poids mol&eacute;culaires de 20 et 60 kDa ont des caract&eacute;ristiques similaires, comme celle du contr&ocirc;le de globules rouges. La circulation in vivo des globules rouges greff&eacute;es HPG a &eacute;t&eacute; mesur&eacute;e par une injection de vain de queue de H-HPG60K-RBC (3) chez la souris. La radioactivit&eacute; des globules rouges isol&eacute;s, sang total, plasma, diff&eacute;rents organes, urine et les f&egrave;ces a &eacute;t&eacute; &eacute;valu&eacute;e &agrave; intervalles de temps diff&eacute;rents. La partie de (3) H-HPG60K-RBC qui ont surv&eacute;cu le premier jour chez les souris (52 %) &eacute;taient toujours en circulation pendant 50 jours. Radioactivit&eacute; accumulation minimale dans les organes autres que le foie et la rate a &eacute;t&eacute; observ&eacute;e en sugg&eacute;rant que le m&eacute;canisme de clairance normale de RBCs. animaux modifi&eacute;s acquise de poids normales et aucune anomalie observ&eacute;e dans l&#39;analyse de l&#39;autopsie. La stabilit&eacute; de l&#39;&eacute;diteur de liens ester-amide entre la RBC et HPG a &eacute;t&eacute; &eacute;valu&eacute;e en comparant le taux de clearance de (3) H-HPG60K-RBC PKH-26 lipides membranaires fluorescents marqueur et &eacute;tiquet&eacute; HPG60K-HPG RBCs. modifi&eacute;e RBCs combine les nombreux avantages d&#39;un polym&egrave;re dendritique et globules rouges et cale tr&egrave;s prometteur dans l&#39;administration de m&eacute;dicaments syst&eacute;miques et d&#39;autres applications de RBC fonctionnelle.

Circulation in vivo, de d&eacute;douanement et de biodistribution de POLYGLYC&Eacute;ROL greff&eacute;s fonctionnelles de globules rouges.

Die in-vivo Verbreitung von Hyperbranched Polyglycerin (HPG) veredelt Rote Blutzellen (RBCs) wurde bei M&auml;usen untersucht. Die Anzahl der HPG-Molek&uuml;le pro RBC veredelt wurde gemessen mit Tritium beschriftete HPGs ((3) H-HPG) der unterschiedlichen Molekulargewichte; die Werte reichten von 1 &times; 10 Abs&auml;tze 5 bis 2 &times; 10 6 Molek&uuml;le pro RBC. HPG-veredelt tropfenf&ouml;rmigen wurden durch Messung der elektrophoretischen Mobilit&auml;t, Erg&auml;nzung vermittelte Lyse und osmotische Fragilit&auml;t in-vitro gekennzeichnet. Unsere Ergebnisse zeigen, dass tropfenf&ouml;rmigen veredelt mit 1,5 &times; 10 Absatz 5 HPG Molek&uuml;le pro RBC mit Molmassen 20 und 60 kDa, die &auml;hnliche Merkmale wie die des Steuerelements tropfenf&ouml;rmigen aufweisen. Die in-vivo Zirkulation der tropfenf&ouml;rmigen HPG-veredelt wurde durch einen Schwanz vergeblich Injektion von H-HPG60K-RBC (3) bei M&auml;usen gemessen. Die Radioaktivit&auml;t der isolierten tropfenf&ouml;rmigen, Vollblut, Plasma, verschiedene Organe, Urin und Kot wurde in verschiedenen Zeitintervallen evaluiert. Der Teil des (3) blieb H-HPG60K-RBC, die den ersten Tag bei M&auml;usen (52 %) &uuml;berlebt im Umlauf f&uuml;r 50 Tage. Minimale Ansammlung Radioaktivit&auml;t in den Organen als Leber und Milz wurde beobachtet, was darauf hindeutet, dass der normale Lagerluft-Mechanismus der ver&auml;nderte tropfenf&ouml;rmigen. Tiere normalen Gewichte und keine Fehlbildungen beobachtet in Autopsie-Analyse gewonnen. Die Stabilit&auml;t der Ester-Amid-Linker zwischen der RBC und HPG wurde durch den Vergleich der Abschlussquote (3) H-HPG60K-RBC und PKH-26 Lipid fluoreszierende Membran Marker beschriftet HPG60K ausgewertet-tropfenf&ouml;rmigen. HPG ge&auml;ndert tropfenf&ouml;rmigen kombinieren, die vielen Vorteile einer dendritischen Polymer tropfenf&ouml;rmigen und halten viel versprechend in systemische Medikamentenabgabe und anderen Anwendungen der funktionalen RBC.

In-vivo-Zirkulation, Abfertigung und Bioverteilung von Polyglycerin veredelt funktionsf&auml;hige rote Blutk&ouml;rperchen.

La circolazione in vivo di hyperbranched poliglicerina (HPG) innestato cellule rosse del sangue (globuli rossi) &egrave; stata studiata nei topi. Il numero di molecole HPG innestate per RBC &egrave; stato misurato usando tritio etichettato HPGs ((3) H-HPG) di diversi pesi molecolari; i valori variavano da 5 &times; 1 a 2 &times; 10 molecole per RBC. HPG-innestate globuli rossi sono stati caratterizzati in vitro misurando la mobilit&agrave; elettroforetica, Lisi complemento mediata e fragilit&agrave; osmotica. I nostri risultati mostrano che innestati con 1,5 &times; 5 molecole di HPG per RBC globuli rossi avendo pesi molecolari 20 e 60 kDa hanno caratteristiche simili a quello di controllo globuli rossi. La circolazione in vivo di globuli rossi HPG-innestate &egrave; stata misurata mediante iniezione invano coda di H-HPG60K-RBC (3) nei topi. La radioattivit&agrave; dei globuli rossi isolati, sangue intero, plasma, organi diversi, urina e feci &egrave; stata valutata a intervalli di tempo diversi. La porzione di (3) H-HPG60K-RBC che sopravvissero al primo giorno nei topi (52%) &egrave; rimasto in circolazione per 50 giorni. Radioattivit&agrave; minimo accumulo in organi diversi da fegato e milza &egrave; stato osservato che suggerisce che il meccanismo di gioco normale di animali modificati globuli rossi. guadagnato peso normale e senza anomalie osservate nell&#39;analisi esame necroscopico. La stabilit&agrave; del linker ammide estere tra il RBC e HPG &egrave; stata valutata confrontando il tasso di clearance di (3) H-HPG60K-RBC e PKH-26 lipido membrana fluorescente marcatore etichettati HPG60K-RBCs. HPG modificato globuli rossi combinano i numerosi vantaggi di un polimero dendritico e globuli rossi e grande promessa di tenere nella somministrazione sistemica e altre applicazioni di RBC funzionale.

Circolazione in vivo, sdoganamento e biodistribuzione di poliglicerina innestate funzionale globuli rossi.

&#x30B3;&#x30A2;&#x30B7;&#x30A7;&#x30EB;&#x63A5;&#x304E;&#x6728;&#x30DD;&#x30EA;&#x30B0;&#x30EA;&#x30BB;&#x30EA;&#x30F3; &#xFF08;HPG &#x8D64;&#x8840;&#x7403; &#xFF08;&#x8D64;&#x8840;&#x7403;&#xFF09; &#x306E;&#x751F;&#x4F53;&#x5185;&#x5FAA;&#x74B0;&#x3092;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x3067;&#x8ABF;&#x3079;&#x305F;&#x3002;RBC &#x3042;&#x305F;&#x308A;&#x63A5;&#x304E;&#x6728; HPG &#x5206;&#x5B50;&#x6570;&#x30C8;&#x30EA;&#x30C1;&#x30A6;&#x30E0; HPGs &#x306E;&#x30E9;&#x30D9;&#x30EB;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x3057;&#x305F; ((3) H HPG) &#x306E;&#x5206;&#x5B50;&#x91CF;&#x306E;&#x7570;&#x306A;&#x308B;;&#x5024; 2 &times; 10(6) &#x5206;&#x5B50; RBC &#x3042;&#x305F;&#x308A; 1 &times; 10 (5) &#x304B;&#x3089;&#x3067;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x3002;HPG &#x63A5;&#x304E;&#x6728;&#x8D64;&#x8840;&#x7403;&#x6D78;&#x900F;&#x5727;&#x8106;&#x5F31;&#x6027;&#x3001;&#x5A92;&#x4ECB;&#x88DC;&#x6570;&#x63DB;&#x6563;&#x3001;&#x96FB;&#x6C17;&#x6CF3;&#x52D5;&#x79FB;&#x52D5;&#x5EA6;&#x3092;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066; in vitro &#x3067;&#x7279;&#x5FB4;&#x3065;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x79C1;&#x305F;&#x3061;&#x306E;&#x7D50;&#x679C; RBC &#x3042;&#x305F;&#x308A; 1.5 &times; 10 (5) HPG &#x5206;&#x5B50;&#x3068;&#x63A5;&#x304E;&#x6728;&#x8D64;&#x8840;&#x7403;&#x5206;&#x5B50;&#x91CF; 20 &#x3068; 60 kDa &#x304C;&#x5BFE;&#x7167;&#x8D64;&#x8840;&#x7403;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x540C;&#x3058;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x7279;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3059;.HPG &#x63A5;&#x304E;&#x6728;&#x8D64;&#x8840;&#x7403;&#x306E;&#x751F;&#x4F53;&#x5185;&#x5FAA;&#x74B0;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9; (3) H HPG60K &#x8D64;&#x8840;&#x7403;&#x306E;&#x5C3E;&#x7121;&#x99C4;&#x6CE8;&#x5165;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x5B64;&#x7ACB;&#x3057;&#x305F;&#x8D64;&#x8840;&#x7403;&#x5168;&#x8840;&#x3001;&#x8840;&#x6F3F;&#x3001;&#x5225;&#x306E;&#x81D3;&#x5668;&#x3001;&#x5C3F;&#x3001;&#x7CDE;&#x306E;&#x653E;&#x5C04;&#x80FD;&#x306F;&#x3001;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x6642;&#x9593;&#x9593;&#x9694;&#x3067;&#x8A55;&#x4FA1;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;(3) &#x306E;&#x90E8;&#x5206; H-HPG60K-RBC &#x30DE;&#x30A6;&#x30B9; (52%) &#x306E;&#x6700;&#x521D;&#x306E;&#x65E5;&#x3092;&#x751F;&#x304D;&#x5EF6;&#x3073;&#x305F;&#x5FAA;&#x74B0;&#x306E; 50 &#x65E5;&#x9593;&#x6B8B;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x6700;&#x5C0F;&#x9650;&#x306E;&#x84C4;&#x7A4D;&#x653E;&#x5C04;&#x80FD;&#x809D;&#x81D3;&#x3068;&#x813E;&#x81D3;&#x4EE5;&#x5916;&#x306E;&#x81D3;&#x5668;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x901A;&#x5E38;&#x306E;&#x91CD;&#x307F;&#x3068;&#x5256;&#x691C;&#x89E3;&#x6790;&#x3067;&#x89B3;&#x6E2C;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x7570;&#x5E38;&#x7121;&#x3057;&#x6539;&#x5909;&#x8D64;&#x8840;&#x7403;&#x3002; &#x52D5;&#x7269;&#x306E;&#x6B63;&#x5E38;&#x306A;&#x30AF;&#x30EA;&#x30A2;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x6A5F;&#x69CB;&#x3092;&#x5F97;&#x305F;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30A8;&#x30B9;&#x30C6;&#x30EB; &#x30FB; &#x30A2;&#x30DF;&#x30C9; &#x30EA;&#x30F3;&#x30AB;&#x30FC; RBC &#x3068; HPG &#x9593;&#x306E;&#x5B89;&#x5B9A;&#x6027; HPG60K &#x30E9;&#x30D9;&#x30EB; &#xFF08;3&#xFF09; H HPG60K &#x8D64;&#x8840;&#x7403;&#x3068; PKH 26 &#x8102;&#x8CEA;&#x86CD;&#x5149;&#x819C;&#x30DE;&#x30FC;&#x30AB;&#x30FC;&#x306E;&#x30AF;&#x30EA;&#x30A2;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x7387;&#x3092;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x8A55;&#x4FA1;&#x3055;&#x308C;&#x305F;-&#x8D64;&#x8840;&#x7403;&#x3002; HPG &#x6A39;&#x72B6;&#x9AD8;&#x5206;&#x5B50;&#x3068;&#x8D64;&#x8840;&#x7403;&#x3001;&#x3068;&#x5168;&#x8EAB;&#x6027;&#x30C9;&#x30E9;&#x30C3;&#x30B0;&#x30C7;&#x30EA;&#x30D0;&#x30EA;&#x30FC;&#x3067;&#x30DB;&#x30FC;&#x30EB;&#x30C9;&#x5049;&#x5927;&#x306A;&#x7D04;&#x675F;&#x306E;&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x5229;&#x70B9;&#x3068;&#x4ED6;&#x306E;&#x30A2;&#x30D7;&#x30EA;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306E; RBC &#x306E;&#x8D64;&#x8840;&#x7403;&#x7D50;&#x5408;&#x3092;&#x5909;&#x66F4;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x751F;&#x4F53;&#x5185;&#x5FAA;&#x74B0;&#x3001;&#x30AF;&#x30EA;&#x30A2;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x4F53;&#x5185;&#x30DD;&#x30EA;&#x30B0;&#x30EA;&#x30BB;&#x30EA;&#x30F3;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x7684;&#x306A;&#x8D64;&#x306E;&#x8840;&#x6DB2;&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x79FB;&#x690D;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;

Hyperbranched polyglycerol (HPG) &#xD22C;&#xC785; &#xC801;&#xD608;&#xAD6C; (Rbc)&#xC758; in vivo &#xC21C;&#xD658; &#xC0DD;&#xC950;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC870;&#xC0AC; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xD2B8; &#xB9AC;&#xD2AC;&#xC758; &#xB2E4;&#xB978; &#xBD84;&#xC790; &#xBB34;&#xAC8C;; HPGs ((3) H HPG) &#xD45C;&#xC2DC;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xC99D;&#xAD8C; &#xB2F9; &#xD22C;&#xC785; HPG &#xBD84;&#xC790;&#xC758; &#xC218;&#xB97C; &#xCE21;&#xC815; &#xD588;&#xB2E4; &#xAC12; 1 &times; 10(5)&#xC5D0;&#xC11C; RBC &#xB2F9; 2 &times; &#xC2DC;&#xBBFC;&#xAD8C;&#xC774; &#xBD84;&#xC790;&#xC5D0; &#xBC30;&#xC5F4; &#xD588;&#xB2E4;. Rbc HPG &#xD22C;&#xC785; &#xD588;&#xB2E4; &#xC804;&#xAE30; &#xC774;&#xB3D9; &#xAE30;&#xB3D9;&#xC131;, &#xBCF4;&#xC644; &#xC911;&#xC7AC; lysis &#xC0BC; &#xD22C; &#xCDE8;&#xC57D;&#xC131;&#xC744; &#xCE21;&#xC815; &#xD558; &#xC5EC; &#xCCB4; &#xC678; &#xD2B9;&#xC9D5;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xACB0;&#xACFC; Rbc &#xC99D;&#xAD8C; &#xB2F9; 1.5 &times; 10(5) HPG &#xBD84;&#xC790;&#xC640; &#xD22C;&#xC785; &#xBD84;&#xC790; &#xBB34;&#xAC8C; 20 &#xBC0F; 60 kDa &#xC81C;&#xC5B4; Rbc&#xC640; &#xBE44;&#xC2B7;&#xD55C; &#xD2B9;&#xC131;&#xC744;&#xAC00;&#xC9C0;&#xACE0; &#xD558;&#xB294; &#xB370;. HPG &#xD22C;&#xC785; Rbc&#xC758; in vivo &#xC21C;&#xD658; (3) RBC &#xB144; H-HPG60K-&#xC950;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC758; &#xAF2C;&#xB9AC; &#xD5DB;&#xB41C; &#xC8FC;&#xC785; &#xD558; &#xC5EC; &#xCE21;&#xC815; &#xD588;&#xB2E4;. &#xACA9;&#xB9AC; &#xB41C; Rbc, &#xC804;&#xCCB4; &#xD608;&#xC561;, &#xD50C;&#xB77C;&#xC2A4;&#xB9C8;, &#xB2E4;&#xB978; &#xC7A5;&#xAE30;, &#xC18C;&#xBCC0;&#xACFC; &#xB300;&#xBCC0;&#xC758; &#xBC29;&#xC0AC;&#xB2A5; &#xB2E4;&#xB978; &#xC2DC;&#xAC04; &#xAC04;&#xACA9;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xD3C9;&#xAC00; &#xBC1B;&#xC558;&#xB2E4;. (3) &#xBD80;&#xBD84; H-HPG60K-RBC &#xC0B4;&#xC544;&#xB0A8;&#xC740; &#xC0DD;&#xC950; (52%)&#xC5D0;&#xC11C; &#xCCAB; &#xB0A0; 50 &#xC77C; &#xB3D9;&#xC548; &#xC21C;&#xD658;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB0A8;&#xC544; &#xC788;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xAC04; &#xBC0F; &#xBE44;&#xC7A5; &#xC774;&#xC678;&#xC758; &#xC7A5;&#xAE30;&#xC5D0; &#xCD5C;&#xC18C;&#xD55C;&#xC758; &#xB204;&#xC801; &#xBC29;&#xC0AC;&#xB2A5; &#xC81C;&#xC548; &#xD558;&#xB294; &#xC218;&#xC815;&#xB41C; &#xB41C; Rbc. &#xB3D9;&#xBB3C;&#xC758; &#xC815;&#xC0C1;&#xC801;&#xC778; &#xD1B5;&#xAD00; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998; &#xC5BB;&#xC740; &#xC77C;&#xBC18; &#xBB34;&#xAC8C;&#xC640; &#xAC80; &#xBD84;&#xC11D;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAD00;&#xCC30; &#xB41C; &#xC544;&#xBB34; &#xC774;&#xC0C1;&#xC774; &#xAD00;&#xCC30; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. RBC&#xC640; HPG &#xC0AC;&#xC774;&#xC758; &#xC5D0;&#xC2A4;&#xD14C; &#xB974;-&#xC544; &#xBBF8;&#xB4DC; &#xB9C1;&#xCEE4;&#xC758; &#xC548;&#xC815;&#xC131; HPG60K &#xBD84;&#xB958;&#xC758; H-HPG60K-RBC&#xC640; PKH 26 &#xC9C0;&#xC9C8; &#xD615;&#xAD11; &#xB9C9; &#xD45C;&#xC2DD; (3) &#xD5C8;&#xAC00; &#xC728;&#xC744; &#xBE44;&#xAD50; &#xD558; &#xC5EC; &#xD3C9;&#xAC00; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;-Rbc. HPG Rbc &#xACB0;&#xD569; &#xC218;&#xC815; &#xC218;&#xC9C0;&#xC0C1; &#xD3F4;&#xB9AC;&#xBA38;&#xC640; Rbc, &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xCCB4;&#xACC4;&#xC801;&#xC778; &#xC57D;&#xBB3C; &#xC804;&#xB2EC;&#xC5D0; &#xBCF4;&#xB958; &#xC704;&#xB300;&#xD55C; &#xC57D;&#xC18D;&#xC758; &#xB9CE;&#xC740; &#xC7A5;&#xC810;&#xACFC; &#xAE30;&#xB2A5; RBC&#xC758; &#xB2E4;&#xB978; &#xC751;&#xC6A9; &#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB7A8;.

Vivo&#xC5D0;&#xC11C; &#xC21C;&#xD658;, &#xD074;&#xB9AC;&#xC5B4;&#xB7F0;&#xC2A4; &#xBC0F; polyglycerol&#xC758; biodistribution &#xAE30;&#xB2A5; &#xBD89;&#xC740; &#xD608;&#xC561; &#xC138;&#xD3EC;&#xB97C; &#xD22C;&#xC785;.

La circulaci&oacute;n en vivo de hiper-ramificados poliglicerol (HPG) injertado de eritrocitos (gl&oacute;bulos rojos) fue investigada en ratones. El n&uacute;mero de mol&eacute;culas HPG injertado por RBC se midi&oacute; con tritio con la etiqueta HPGs (3 H-HPG) de diferentes pesos moleculares; los valores oscilaron entre 1 &times; 10 y 2 &times; 10 (6) mol&eacute;culas por RBC. HPG-injertado RBCs caracterizaron in vitro mediante la medici&oacute;n de la movilidad electrofor&eacute;tica, lisis de complemento mediado y fragilidad osm&oacute;tica. Nuestros resultados muestran que RBCs injertados con 1,5 &times; 10 mol&eacute;culas HPG por RBC con pesos moleculares 20 y 60 kDa poseen caracter&iacute;sticas similares como la de control de los gl&oacute;bulos rojos. La circulaci&oacute;n en vivo de gl&oacute;bulos rojos HPG-injertado se midi&oacute; mediante una inyecci&oacute;n de cola in&uacute;til de H-HPG60K-RBC (3) en ratones. La radiactividad de hemat&iacute;es aislados, sangre entera, plasma, &oacute;rganos diferentes, orina y heces fue evaluada en distintos intervalos de tiempo. La porci&oacute;n de (3) H-HPG60K-RBC que sobrevivi&oacute; el primer d&iacute;a en ratones (52%) se mantuvo en circulaci&oacute;n por 50 d&iacute;as. Radiactividad m&iacute;nima acumulaci&oacute;n en &oacute;rganos distintos de h&iacute;gado y bazo se observ&oacute; sugiriendo que el mecanismo de separaci&oacute;n normal de animales modificados RBCs. ganado pesos normales y ninguna anormalidad observada en el an&aacute;lisis de la necropsia. La estabilidad del vinculador de &eacute;ster-amida entre el RBC y HPG se evalu&oacute; comparando la tasa de aclaramiento de (3) H-HPG60K-RBC y PKH-26 l&iacute;pido membrana fluorescente marcador etiquetado HPG60K-gr. HPG modificado los gl&oacute;bulos rojos se combinan las ventajas de un pol&iacute;mero dendr&iacute;tico y gl&oacute;bulos rojos y espera gran promesa en el suministro de medicamentos sist&eacute;micos y otras aplicaciones de RBC funcional.

Circulaci&oacute;n en vivo, separaci&oacute;n y biodistribuci&oacute;n de poliglicerol injertan gl&oacute;bulos funcionales rojos.

&#x8D85;&#x652F;&#x5316;&#x805A;&#x7518;&#x6CB9; (HPG) &#x548C;&#x805A;&#x4E59;&#x4E8C;&#x9187; (PEG) &#x805A;&#x5408;&#x7269;&#x6EB6;&#x6DB2;&#x4E2D;&#x7684;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x6C34;&#x52A8;&#x529B;&#x5927;&#x5C0F;&#x88AB;&#x5AC1;&#x63A5;&#x5230;&#x7EA2;&#x8840;&#x7EC6;&#x80DE; &#xFF08;&#x7EA2;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF09;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x8C03;&#x67E5;&#x7684;&#x805A;&#x5408;&#x7269;&#x4F53;&#x7CFB;&#x7ED3;&#x6784;&#x4E0A;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7ED3;&#x6784;&#x548C;&#x529F;&#x80FD;&#x7684;&#x5F71;&#x54CD;&#x3002;&#x805A;&#x5408;&#x7269;&#x7684;&#x6D41;&#x4F53;&#x52A8;&#x529B;&#x5927;&#x5C0F;&#x662F;&#x4ECE;&#x6D4B;&#x5B9A;&#x8109;&#x51B2;&#x7684;&#x573A;&#x68AF;&#x5EA6;&#x6838;&#x78C1;&#x5171;&#x632F;&#x7684;&#x6269;&#x6563;&#x7CFB;&#x6570;&#x8BA1;&#x7B97;&#x7684;&#x3002;&#x9759;&#x548C; PEG &#x6C34;&#x5316;&#x7684;&#x5DEE;&#x522B;&#x626B;&#x63CF;&#x91CF;&#x70ED;&#x6CD5;&#x5206;&#x6790;&#x786E;&#x5B9A;&#x3002;&#x7EA2;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7EBF;&#x6027;&#x805A;&#x4E59;&#x4E8C;&#x9187;&#x63A5;&#x679D;&#x4E86;&#x9759;&#x5AC1;&#x63A5;&#x7EA2;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3002; &#x5AC1;&#x63A5;&#x7684;&#x7EA2;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8868;&#x660E;&#x591A;&#x9AD8;&#x7684;&#x7535;&#x6CF3;&#x8C03;&#x52A8;&#x503C;&#x6BD4;&#x6302;&#x5728;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x5AC1;&#x63A5;&#x6D53;&#x5EA6;&#x548C;&#x6C34;&#x52A8;&#x529B;&#x7684;&#x5927;&#x5C0F;&#x6307;&#x793A;&#x7684;&#x9AD8;&#x5206;&#x5B50;&#x6392;&#x65A5;&#x5C42;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8868;&#x9762;&#x7ED3;&#x6784;&#x7684;&#x5DEE;&#x5F02;&#x5AC1;&#x63A5;&#x7684;&#x7EA2;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x9759;&#x5951;&#x7EA6; &#x300B; &#x76F8;&#x6BD4;&#x7684;&#x4E0D;&#x540C;&#x5C5E;&#x6027;&#x3002;PEG &#x5AC1;&#x63A5;&#x5F71;&#x54CD;&#x66F4;&#x5927;&#x7A0B;&#x5EA6;&#x6BD4;&#x9759;&#x819C;&#x7684;&#x53D8;&#x5F62;&#x5C5E;&#x6027;&#x3002;&#x5AC1;&#x63A5;&#x7684;&#x7EA2;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8865;&#x4F53;&#x4ECB;&#x5BFC;&#x7684;&#x6EB6;&#x89E3;&#x662F;&#x805A;&#x5408;&#x7269;&#x7684;&#x4F9D;&#x8D56;&#x4E8E;&#x7C7B;&#x578B;&#xFF0C;&#x63A5;&#x679D;&#x6D53;&#x5EA6;&#x548C;&#x5206;&#x5B50;&#x5927;&#x5C0F;&#x7684;&#x5AC1;&#x63A5;&#x94FE;&#x3002;&#x9AD8;&#x5206;&#x5B50;&#x91CF;&#x548C;&#x79FB;&#x690D;&#x7269;&#x6D53;&#x5EA6;&#x5728;&#x9759;&#x548C; PEG &#x89E6;&#x53D1;&#x8865;&#x4F53;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x3002;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x7A0B;&#x5EA6;&#x8F83;&#x9AD8;&#xFF0C;&#x5177;&#x6709;&#x9759;&#x53EF;&#x80FD;&#x7684;&#x539F;&#x56E0;&#x662F;&#x5F88;&#x591A;&#x7F9F;&#x57FA;&#x6BCF;&#x4E2A;&#x5206;&#x5B50;&#x7684;&#x5B58;&#x5728;&#x3002;&#x9759;&#x5AC1;&#x63A5;&#x8868;&#x660E; CD47 &#x81EA;&#x6211;&#x86CB;&#x767D;&#x6027;&#x660E;&#x663E;&#x9AD8;&#x4E8E;&#x7EA7;&#x522B;&#x6BD4;&#x6302;&#x5728;&#x6240;&#x6709;&#x5AC1;&#x63A5;&#x6D53;&#x5EA6;&#x548C;&#x5206;&#x5B50;&#x5927;&#x5C0F;&#x7684;&#x5AC1;&#x63A5;&#x7684;&#x7EA2;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7EA2;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;&#x805A;&#x4E59;&#x4E8C;&#x9187;&#x63A5;&#x679D;&#x805A;&#x5408;&#x7269;&#x63D0;&#x4F9B;&#xFF0C;&#x4E00;&#x822C;&#x60C5;&#x51B5;&#x4E0B;&#xFF0C;&#x66F4;&#x597D;&#x5730;&#x5C4F;&#x853D;&#x548C;&#x4FDD;&#x62A4; ABO &#x548C;&#x6B21;&#x8981;&#x6297;&#x539F;&#x6297;&#x4F53;&#x8BC6;&#x522B;&#x6BD4;&#x9759;&#x805A;&#x5408;&#x7269;&#xFF0C;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;&#x4ECE;&#x7D27;&#x51D1;&#x7684; HPGs &#x63D0;&#x4F9B;&#x66F4;&#x591A;&#x4FDD;&#x62A4;&#x67D0;&#x4E9B;&#x6297;&#x539F;&#x7684;&#x7EA2;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8868;&#x9762;&#x4E0A;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x6570;&#x636E;&#x663E;&#x793A;&#x9759; 20 kDa &#x548C; HPG 60 kDa &#x5AC1;&#x63A5;&#x7EA2;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5C55;&#x51FA;&#x66F4;&#x5AB2;&#x7F8E;&#x672C;&#x673A;&#x7684;&#x7EA2;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6BD4;&#x6302; 5 kDa &#x7684;&#x5C5E;&#x6027;&#x5E76;&#x6302; 10 kDa &#x5AC1;&#x63A5;&#x7EA2;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x6C34;&#x52A8;&#x529B;&#x5927;&#x5C0F;&#x76F8;&#x5F53;&#x3002;&#x8FD9;&#x9879;&#x7814;&#x7A76;&#x8868;&#x660E;&#x5728;&#x6CBB;&#x7597;&#x7684;&#x4F20;&#x9012;&#x5E94;&#x7528;&#x7A0B;&#x5E8F;&#x7684;&#x529F;&#x80FD;&#x7EA2;&#x7EC6;&#x80DE;&#x751F;&#x6210;&#x5C0F;&#x7D27;&#x51D1;&#x805A;&#x5408;&#x7269;&#x5982;&#x9759; 20 kDa &#x6709;&#x66F4;&#x5927;&#x7684;&#x6F5C;&#x529B;&#x3002;&#x4E2D;&#x95F4;&#x4E2D;&#x5C0F;&#x578B;&#x7684;&#x805A;&#x5408;&#x7269; &#xFF08;&#x805A;&#x4E59;&#x4E8C;&#x9187;&#x6216; HPG&#xFF09; &#x663E;&#x793A;&#x51FA;&#x66F4;&#x5927;&#x7684;&#x6297;&#x539F;&#x4F2A;&#x88C5;&#x5728;&#x5AC1;&#x63A5;&#x6D53;&#x5EA6;&#x8F83;&#x4F4E;&#x8F93;&#x8840;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x666E;&#x904D;&#x7684;&#x7EA2;&#x8272;&#x8840;&#x4F9B;&#x4F53;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x5177;&#x6709;&#x5DE8;&#x5927;&#x7684;&#x6F5C;&#x529B;&#x3002;

&#x805A;&#x5408;&#x7269;&#x4F53;&#x7CFB;&#x7ED3;&#x6784;&#x5F71;&#x54CD;&#x6297;&#x539F;&#x4F2A;&#x88C5;&#x3001; CD47 &#x4FDD;&#x62A4;&#x548C;&#x8865;&#x5145;&#x4ECB;&#x5BFC;&#x8868;&#x9762;&#x5AC1;&#x63A5;&#x7EA2;&#x8840;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x6EB6;&#x89E3;&#x3002;

Hyperbranched polyglycerol (HPG) and polyethylene glycol (PEG) polymers with similar hydrodynamic sizes in solution were grafted to red blood cells (RBCs) to investigate the impact of polymer architecture on the cell structure and function. The hydrodynamic sizes of polymers were calculated from the diffusion coefficients measured by pulsed field gradient NMR. The hydration of the HPG and PEG was determined by differential scanning calorimetry analyses. RBCs grafted with linear PEG had different properties compared to the compact HPG grafted RBCs. HPG grafted RBCs showed much higher electrophoretic mobility values than PEG grafted RBCs at similar grafting concentrations and hydrodynamic sizes indicating differences in the structure of the polymer exclusion layer on the cell surface. PEG grafting impacted the deformation properties of the membrane to a greater degree than HPG. The complement mediated lysis of the grafted RBCs was dependent on the type of polymer, grafting concentration and molecular size of grafted chains. At higher molecular weights and graft concentrations both HPG and PEG triggered complement activation. The magnitude of activation was higher with HPG possibly due to the presence of many hydroxyl groups per molecule. HPG grafted RBCs showed significantly higher levels of CD47 self-protein accessibility than PEG grafted RBCs at all grafting concentrations and molecular sizes. PEG grafted polymers provided, in general, a better shielding and protection to ABO and minor antigens from antibody recognition than HPG polymers, however, the compact HPGs provided greater protection of certain antigens on the RBC surface. Our data showed that HPG 20 kDa and HPG 60 kDa grafted RBCs exhibited properties that are more comparable to the native RBC than PEG 5 kDa and PEG 10 kDa grafted RBCs of comparable hydrodynamic sizes. The study shows that small compact polymers such as HPG 20 kDa have a greater potential in the generation of functional RBC for therapeutic delivery applications. The intermediate sized polymers (PEG or HPG) which showed greater antigen camouflage at lower grafting concentrations have significant potential in transfusion as universal red blood donor cells.

Influence of polymer architecture on antigens camouflage, CD47 protection and complement mediated lysis of surface grafted red blood cells.

Hyperbranched POLYRICINOL&Eacute;ATE (HPG) et les polym&egrave;res de poly&eacute;thyl&egrave;ne glycol (PEG) avec des tailles hydrodynamiques similaires en solution ont &eacute;t&eacute; greff&eacute;s aux globules rouges (h&eacute;maties) d&#39;&eacute;tudier l&#39;impact de l&#39;architecture de polym&egrave;re sur la structure cellulaire et la fonction. Les tailles hydrodynamiques des polym&egrave;res ont &eacute;t&eacute; calcul&eacute;es &agrave; partir les coefficients de diffusion mesur&eacute;s par RMN du gradient de champ puls&eacute;. L&#39;hydratation du HPG et PEG a &eacute;t&eacute; d&eacute;termin&eacute;e par des analyses de calorim&eacute;trie &agrave; balayage diff&eacute;rentiel. Globules rouges greff&eacute;es avec PEG lin&eacute;aire avaient des propri&eacute;t&eacute;s diff&eacute;rentes par rapport &agrave; la compact que HPG greff&eacute;s RBCs. HPG RBCs greff&eacute;es ont montr&eacute; que des valeurs beaucoup plus grande mobilit&eacute; &eacute;lectrophor&eacute;tique que PEG RBCs greff&eacute;s &agrave; des concentrations similaires de greffage et hydrodynamiques tailles indiquant des diff&eacute;rences dans la structure de la couche d&#39;exclusion de polym&egrave;res sur la surface de la cellule. PEG greffage impact&eacute; les propri&eacute;t&eacute;s de d&eacute;formation de la membrane &agrave; un degr&eacute; sup&eacute;rieur &agrave; HPG. La lyse de compl&eacute;ment par l&#39;interm&eacute;diaire de la SCFR greff&eacute;es &eacute;tait d&eacute;pendante du type de polym&egrave;re, greffage de concentration et la taille mol&eacute;culaire des cha&icirc;nes greff&eacute;es. &Agrave; un poids mol&eacute;culaire plus &eacute;lev&eacute; et les concentrations de greffon fois HPG et PEG d&eacute;clenchement activation du compl&eacute;ment. L&#39;amplitude d&#39;activation &eacute;tait plus &eacute;lev&eacute; avec HPG, peut-&ecirc;tre en raison de la pr&eacute;sence de nombreux groupements hydroxyles par mol&eacute;cule. HPG greff&eacute;s les globules rouges ont montr&eacute; des niveaux significativement plus &eacute;lev&eacute;s d&#39;accessibilit&eacute; self-prot&eacute;ine CD47 que PEG greff&eacute;es RBCs greffage &agrave; toutes les concentrations et les tailles mol&eacute;culaires. PEG greff&eacute;s polym&egrave;res pr&eacute;vus, en g&eacute;n&eacute;ral, un meilleur blindage et la protection d&#39;ABO et antig&egrave;nes mineurs de reconnaissance des anticorps que les polym&egrave;res HPG, cependant, les compacts HPGs fourni une protection accrue de certains antig&egrave;nes sur la surface de la RBC. Nos r&eacute;sultats ont montr&eacute; que HPG 20 kDa et HPG 60 kDa greff&eacute; RBCs expose les propri&eacute;t&eacute;s qui ne sont plus comparables &agrave; la RBC native que PEG 5 kDa et PEG 10 kDa greff&eacute;s RBCs de tailles comparables de l&#39;hydrodynamiques. L&#39;&eacute;tude montre que les petits polym&egrave;res compacts comme HPG 20 kDa ont un plus grand potentiel dans la g&eacute;n&eacute;ration de RBC fonctionnel pour des applications th&eacute;rapeutiques de livraison. Les polym&egrave;res tailles interm&eacute;diaires (PEG ou HPG) qui a montr&eacute; le camouflage d&#39;antig&egrave;ne sup&eacute;rieure &agrave; des concentrations plus faibles de greffage ont un potentiel important en transfusion comme cellules de donneur de sang rouge universelle.

Influence de l&#39;architecture de polym&egrave;re sur le camouflage des antig&egrave;nes, CD47 protection et compl&eacute;ment m&eacute;di&eacute;e par la lyse de la surfaces des globules rouges greff&eacute;es.

Hyperbranched Polyglycerin (HPG) und Polyethylenglykol (PEG)-Polymere mit &auml;hnlichen hydrodynamischen Gr&ouml;&szlig;en in L&ouml;sung waren, Rote Blutzellen (RBCs) zur Untersuchung der Auswirkungen der Polymer-Architektur auf die Zellenstruktur und Funktion veredelt. Die hydrodynamischen Gr&ouml;&szlig;en der Polymere wurden aus den Diffusionskoeffizienten durch gepulste Feld gradient NMR gemessen berechnet. Die Hydratation der HPG und PEG wurde durch differenzielle Scan Kalorimetrie-Analysen bestimmt. Tropfenf&ouml;rmigen veredelt mit Lineare PEG hatte unterschiedliche Eigenschaften im Vergleich zu kompakten, die HPG tropfenf&ouml;rmigen. HPG Aufgepfropfte tropfenf&ouml;rmigen zeigte veredelt, viel h&ouml;here elektrophoretische Mobilit&auml;t Werte als Aufgepfropfte tropfenf&ouml;rmigen bei &auml;hnlichen Unterlagsreben Konzentrationen und hydrodynamischen Gr&ouml;&szlig;en angibt, Unterschiede in der Struktur der Ausgrenzung Polymerschicht auf der Zelloberfl&auml;che PEG. PEG Pfropfen beeinflusst die Eigenschaften der Verformung der Membran verst&auml;rkt als HPG. Die Erg&auml;nzung vermittelte Lyse des die Aufgepfropfte tropfenf&ouml;rmigen war abh&auml;ngig vom Typ des Polymers, Pfropfen, Konzentration und molekularer Gr&ouml;&szlig;e der Aufgepfropfte Ketten. Am h&ouml;heren Molmassen und Transplantat Konzentrationen ausgel&ouml;st HPG und PEG Komplement-Aktivierung. Das Ausma&szlig; der Aktivierung lag mit HPG m&ouml;glicherweise durch das Vorhandensein von vielen Hydroxylgruppen pro Molek&uuml;l. HPG veredelt tropfenf&ouml;rmigen zeigten deutlich h&ouml;here Zugriffsebenen CD47 selbst-Protein als Aufgepfropfte tropfenf&ouml;rmigen &uuml;berhaupt Pfropfen Konzentrationen und molekularen Gr&ouml;&szlig;en PEG. PEG veredelt Polymere zur Verf&uuml;gung gestellt, im Allgemeinen eine bessere Abschirmung und Schutz f&uuml;r ABO und kleinere Antigene Antik&ouml;rper Anerkennung als HPG Polymere, jedoch die kompakte HPGs vorgesehene gr&ouml;&szlig;eren Schutz bestimmter Antigene auf der RBC-Oberfl&auml;che. Unsere Daten zeigten, dass HPG 20 kDa und HPG 60 kDa tropfenf&ouml;rmigen veredelt ausgestellt Eigenschaften mehr vergleichbar mit den Ureinwohnern RBC als PEG 5 kDa und PEG 10 kDa veredelt tropfenf&ouml;rmigen vergleichbare hydrodynamischen Gr&ouml;&szlig;en. Die Studie zeigt, dass kleine kompakte Polymere wie HPG 20 kDa ein gr&ouml;&szlig;eres Potenzial in der Generation der funktionalen RBC f&uuml;r therapeutische Lieferung Anwendungen. Die mittlere Gr&ouml;&szlig;e Polymere (PEG oder HPG) die gr&ouml;&szlig;ere Antigen-Tarnung bei niedrigeren Unterlagsreben Konzentrationen zeigte haben erhebliches Potenzial Transfusion als universelle rote Blutk&ouml;rperchen Spender.

Einfluss der Polymer-Architektur auf Antigene Camouflage, CD47 Schutz und Erg&auml;nzung vermittelte Zerst&ouml;rung der Oberfl&auml;che Aufgepfropfte roten Blutk&ouml;rperchen.

Hyperbranched poliglicerina (HPG) e polimeri di polietilenglicole (PEG) con dimensioni simili idrodinamici in soluzione sono state innestate su cellule rosse del sangue (globuli rossi) per indagare l&#39;impatto dell&#39;architettura del polimero sulla struttura delle cellule e la funzione. Le dimensioni idrodinamiche dei polimeri sono state calcolate dai coefficienti di diffusione misurati dal campo pulsato gradiente NMR. L&#39;idratazione del HPG e PEG &egrave; stata determinata mediante analisi di calorimetria scansione differenziale. Globuli rossi innestati con PEG lineare avevano propriet&agrave; diverse rispetto al compact che HPG innestate RBCs. HPG innestati globuli rossi ha mostrato che molto pi&ugrave; elevata mobilit&agrave; elettroforetica valori di PEG globuli rossi innestati a simili concentrazioni di innesti e grandezze idrodinamiche che indica le differenze nella struttura dello strato polimerico esclusione sulla superficie delle cellule. PEG innesto influenzato le propriet&agrave; di deformazione della membrana in misura maggiore rispetto a HPG. Il complemento mediata lisi dei globuli rossi innestati era dipendente dal tipo di polimero, innesto concentrazione e formato molecolare di catene innestate. A pi&ugrave; elevato peso molecolare e concentrazioni di innesto sia HPG e PEG attivato attivazione del complemento. La grandezza di attivazione era superiore con HPG dovute probabilmente alla presenza di molti gruppi ossidrilici per molecola. HPG innestate globuli rossi hanno mostrati livelli significativamente pi&ugrave; elevati di CD47 self-proteina accessibilit&agrave; pi&ugrave; globuli rossi innestati a tutti l&#39;innesto dimensioni molecolari e concentrazioni di PEG. PEG innestate polimeri forniti, in generale, una migliore schermatura e protezione di ABO e antigeni minori dal riconoscimento dell&#39;anticorpo di polimeri HPG, tuttavia, il HPGs compatto fornito una maggiore protezione di alcuni antigeni sulla superficie RBC. I nostri dati hanno mostrati che HPG 20 kDa e HPG 60 kDa innestate globuli rossi espone propriet&agrave; che sono pi&ugrave; paragonabili a RBC nativo di PEG 5 kDa e PEG 10 kDa innestate globuli rossi di dimensioni comparabili idrodinamici. Lo studio dimostra che piccoli compatti polimeri quali HPG 20 kDa hanno un maggiore potenziale nella generazione di RBC funzionale per le applicazioni terapeutiche di consegna. Polimeri dimensioni intermedi (PEG o HPG) che ha mostrato maggiore camouflage antigene a concentrazioni inferiori di innesto hanno potenziale significativo nelle trasfusioni come le cellule del donatore universale rosso sangue.

Influenza dell&#39;architettura del polimero su antigeni camuffamento, CD47 protezione e complemento mediata lisi dei globuli rossi innestati superficiale.

&#x30B3;&#x30A2;&#x30B7;&#x30A7;&#x30EB; &#x30DD;&#x30EA;&#x30B0;&#x30EA;&#x30BB;&#x30EA;&#x30F3; &#xFF08;HPG &#x3068;&#x30DD;&#x30EA;&#x30A8;&#x30C1;&#x30EC;&#x30F3;&#x30B0; &#x30EA;&#x30B3;&#x30FC;&#x30EB; (PEG) &#x30DD;&#x30EA;&#x30DE;&#x30FC;&#x6EB6;&#x6DB2;&#x4E2D;&#x306E;&#x985E;&#x4F3C;&#x306E;&#x6D41;&#x4F53;&#x30B5;&#x30A4;&#x30BA;&#x3068;&#x8D64;&#x8840;&#x7403; &#xFF08;&#x8D64;&#x8840;&#x7403;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x69CB;&#x9020;&#x3068;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x9AD8;&#x5206;&#x5B50;&#x30A2;&#x30FC;&#x30AD;&#x30C6;&#x30AF;&#x30C1;&#x30E3;&#x306E;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x8ABF;&#x67FB;&#x3059;&#x308B;&#xFF09; &#x306B;&#x63A5;&#x6728;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x9AD8;&#x5206;&#x5B50;&#x6D41;&#x4F53;&#x306E;&#x30B5;&#x30A4;&#x30BA;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x30D1;&#x30EB;&#x30B9;&#x78C1;&#x5834;&#x52FE;&#x914D; NMR &#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x62E1;&#x6563;&#x4FC2;&#x6570;&#x304B;&#x3089;&#x8A08;&#x7B97;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;HPG &#x304A;&#x3088;&#x3073; PEG &#x306E;&#x6C34;&#x548C;&#x5DEE;&#x5206;&#x8D70;&#x67FB;&#x71B1;&#x91CF;&#x5206;&#x6790;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x7DDA;&#x5F62;&#x30DA;&#x30B0;&#x3092;&#x63A5;&#x304E;&#x6728;&#x8D64;&#x8840;&#x7403; HPG &#x8D64;&#x8840;&#x7403;&#x3002; HPG &#x304F;&#x3089;&#x3044;&#x9AD8;&#x3044;&#x96FB;&#x6C17;&#x6CF3;&#x52D5;&#x5EA6;&#x306E;&#x5024;&#x63A5;&#x304E;&#x6728;&#x8D64;&#x8840;&#x7403;&#x3068;&#x540C;&#x69D8;&#x306E;&#x63A5;&#x6728;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x3068;&#x7D30;&#x80DE;&#x8868;&#x9762;&#x4E0A;&#x306E;&#x9AD8;&#x5206;&#x5B50;&#x9664;&#x5916;&#x5C64;&#x306E;&#x69CB;&#x9020;&#x306E;&#x9055;&#x3044;&#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x6D41;&#x4F53;&#x30B5;&#x30A4;&#x30BA;&#x3067;&#x30DA;&#x30B0;&#x3082;&#x63A5;&#x6728;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x8D64;&#x8840;&#x7403;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x63A5;&#x304E;&#x6728;&#x30B3;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x30C8;&#x3068;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3057;&#x3066;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x30D7;&#x30ED;&#x30D1;&#x30C6;&#x30A3;&#x3092;&#x6301;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x3002;&#x63A5;&#x6728; PEG HPG &#x3088;&#x308A;&#x5927;&#x304D;&#x3044;&#x7A0B;&#x5EA6;&#x306B;&#x819C;&#x306E;&#x5909;&#x5F62;&#x7279;&#x6027;&#x306E;&#x5F71;&#x97FF;&#x3002;&#x63A5;&#x6728;&#x306E;&#x8D64;&#x8840;&#x7403;&#x306E;&#x88DC;&#x6570;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x305F;&#x6EB6;&#x89E3;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x3068;&#x30B0;&#x30E9;&#x30D5;&#x30C8;&#x9396;&#x306E;&#x5206;&#x5B50;&#x30B5;&#x30A4;&#x30BA; &#x30B0;&#x30E9;&#x30D5;&#x30C8;&#x30DD;&#x30EA;&#x30DE;&#x30FC;&#x306E;&#x30BF;&#x30A4;&#x30D7;&#x306B;&#x4F9D;&#x5B58;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x3002;&#x9AD8;&#x3044;&#x5206;&#x5B50;&#x91CF;&#x3068;&#x30B0;&#x30E9;&#x30D5;&#x30C8;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x3067; HPG &#x304A;&#x3088;&#x3073; PEG &#x88DC;&#x4F53;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x30C8;&#x30EA;&#x30AC;&#x30FC;&#x3002;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D9;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306E;&#x5927;&#x304D;&#x3055;&#x306F; HPG &#x3068;&#x9AD8;&#x3044;&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x30D2;&#x30C9;&#x30ED;&#x30AD;&#x30B7;&#x30EB; &#x30B0;&#x30EB;&#x30FC;&#x30D7;&#x5206;&#x5B50;&#x5F53;&#x305F;&#x308A;&#x306E;&#x5B58;&#x5728;&#x3059;&#x308B;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x3060;&#x3063;&#x305F;&#x3002;HPG &#x306F;&#x3001;CD47 &#x81EA;&#x5DF1;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x30A2;&#x30AF;&#x30BB;&#x30B7;&#x30D3;&#x30EA;&#x30C6;&#x30A3;&#x306E; PEG &#x6FC3;&#x5EA6;&#x3068;&#x5206;&#x5B50;&#x30B5;&#x30A4;&#x30BA;&#x3092;&#x307E;&#x3063;&#x305F;&#x304F;&#x79FB;&#x690D;&#x30B0;&#x30E9;&#x30D5;&#x30C8;&#x8D64;&#x8840;&#x7403;&#x3088;&#x308A;&#x6709;&#x610F;&#x306B;&#x9AD8;&#x3044;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x8D64;&#x8840;&#x7403;&#x3092;&#x79FB;&#x690D;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;PEG &#x63A5;&#x304E;&#x6728;&#x30DD;&#x30EA;&#x30DE;&#x30FC;&#x306E;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3001;&#x4E00;&#x822C;&#x7684;&#x3088;&#x308A;&#x826F;&#x3044;&#x30B7;&#x30FC;&#x30EB;&#x30C9;&#x3068;&#x4FDD;&#x8B77; ABO &#x3068;&#x30DE;&#x30A4;&#x30CA;&#x30FC;&#x6297;&#x539F;&#x306B;&#x6297;&#x4F53;&#x8A8D;&#x8B58; HPG &#x30DD;&#x30EA;&#x30DE;&#x30FC;&#x3001;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3088;&#x308A;&#x304B;&#x3089;&#x30B3;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x30C8; HPGs &#x5927;&#x304D;&#x3044;&#x4FDD;&#x8B77;&#x7279;&#x5B9A;&#x306E;&#x6297;&#x539F;&#x306E;&#x8D64;&#x8840;&#x7403;&#x8868;&#x9762;&#x306B;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;PEG 10 kDa &#x8D64;&#x8840;&#x7403;&#x540C;&#x7B49;&#x306E;&#x6D41;&#x4F53;&#x529B;&#x5B66;&#x7684;&#x5927;&#x304D;&#x3055;&#x306E;&#x63A5;&#x6728;&#x3057;&#x3001;&#x30DA;&#x30B0; 5 kDa &#x3088;&#x308A;&#x30CD;&#x30A4;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6; RBC &#x306B;&#x5339;&#x6575;&#x3059;&#x308B;&#x30D7;&#x30ED;&#x30D1;&#x30C6;&#x30A3; HPG 20 kDa &#x3068; HPG 60 kDa &#x8D64;&#x8840;&#x7403;&#x3092;&#x63A5;&#x6728;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x6211;&#x3005; &#x306E;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x3092;&#x5C55;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x7814;&#x7A76;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306E; RBC &#x306E;&#x6CBB;&#x7642;&#x914D;&#x4FE1;&#x30A2;&#x30D7;&#x30EA;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306E;&#x751F;&#x6210;&#x5C0F;&#x3055;&#x306A;&#x30B3;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x30C8;&#x306A;&#x30DD;&#x30EA;&#x30DE;&#x30FC; HPG 20 kDa &#x306A;&#x3069;&#x5927;&#x304D;&#x306A;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5927;&#x304D;&#x3044;&#x6297;&#x539F;&#x8FF7;&#x5F69;&#x3088;&#x308A;&#x4F4E;&#x3044;&#x63A5;&#x6728;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x3067;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x4E2D;&#x9593;&#x30B5;&#x30A4;&#x30BA; &#x30DD;&#x30EA;&#x30DE;&#x30FC;&#x306F;&#x3001;&#xFF08;&#x30DA;&#x30B0;&#x307E;&#x305F;&#x306F; HPG&#xFF09; &#x5927;&#x304D;&#x306A;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x666E;&#x904D;&#x7684;&#x306A;&#x8D64;&#x3044;&#x8840;&#x6DB2;&#x30C9;&#x30CA;&#x30FC;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x8F38;&#x8840;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x6297;&#x539F;&#x8FF7;&#x5F69;&#x3001;CD47 &#x4FDD;&#x8B77;&#x3068;&#x88DC;&#x4F53;&#x9AD8;&#x5206;&#x5B50;&#x30A2;&#x30FC;&#x30AD;&#x30C6;&#x30AF;&#x30C1;&#x30E3;&#x306E;&#x5F71;&#x97FF;&#x306F;&#x63A5;&#x6728;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x8868;&#x9762;&#x306E;&#x8D64;&#x8840;&#x7403;&#x306E;&#x63DB;&#x6563;&#x4EF2;&#x4ECB;&#x3002;

Hyperbranched polyglycerol (HPG) &#xBC0F; &#xC194;&#xB8E8;&#xC158;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC720;&#xC0AC;&#xD55C; &#xC720;&#xCCB4; &#xD06C;&#xAE30;&#xC640; &#xACE0;&#xBD84;&#xC790; &#xD3F4; &#xB9AC; &#xC5D0;&#xD2F8;&#xB80C; &#xAE00;&#xB9AC;&#xCF5C; (&#xD398;&#xADF8;) &#xC801;&#xD608;&#xAD6C; (Rbc) &#xD3F4;&#xB9AC;&#xBA38; &#xC544;&#xD0A4;&#xD14D;&#xCC98; &#xC140; &#xAD6C;&#xC870;&#xC640; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC5D0; &#xBBF8;&#xCE58;&#xB294; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xC870;&#xC0AC; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xD22C;&#xC785; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xACE0;&#xBD84;&#xC790; &#xC720;&#xCCB4; &#xD06C;&#xAE30; &#xCE21;&#xC815; &#xD384;&#xC2A4; &#xD544;&#xB4DC; &#xADF8;&#xB77C;&#xB370;&#xC774;&#xC158; NMR&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xD655;&#xC0B0; &#xACC4;&#xC218; &#xB85C;&#xBD80;&#xD130; &#xACC4;&#xC0B0; &#xD588;&#xB2E4;. HPG&#xC640; &#xBABB;&#xC758; &#xC218; &#xD654;&#xB294; &#xCC28;&#xB3D9; &#xC2A4;&#xCE90;&#xB2DD; &#xC5F4; &#xB7C9; &#xBD84;&#xC11D;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xACB0;&#xC815; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. Rbc &#xC120;&#xD615; &#xD398;&#xADF8;&#xC640; &#xD22C;&#xC785; HPG &#xD22C;&#xC785; Rbc. HPG &#xC774;&#xC2DD;&#xD560;&#xB41C; Rbc &#xBE44;&#xC2B7;&#xD55C; &#xC811;&#xBAA9; &#xB18D;&#xB3C4; &#xBC0F; &#xC140; &#xD45C;&#xBA74;&#xC5D0; &#xD3F4;&#xB9AC;&#xBA38; &#xC81C;&#xC678; &#xACC4;&#xCE35; &#xAD6C;&#xC870;&#xC758; &#xCC28;&#xC774; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0B4;&#xB294; &#xC720;&#xCCB4; &#xD06C;&#xAE30;&#xC5D0; &#xC774;&#xC2DD;&#xD560;&#xB41C; Rbc&#xB97C; &#xB358;&#xC9C0;&#xB2E4; &#xBCF4;&#xB2E4; &#xAC12;&#xC774; &#xD6E8;&#xC52C; &#xB354; &#xB192;&#xC740; &#xC804;&#xAE30; &#xC774;&#xB3D9; &#xAE30;&#xB3D9;&#xC131;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC8FC;&#xC5C8;&#xB2E4; &#xCEF4;&#xD329;&#xD2B8;&#xC5D0; &#xBE44;&#xD574; &#xB2E4;&#xB978; &#xC18D;&#xC131; &#xD588;&#xB2E4;. &#xD398;&#xADF8; &#xC811;&#xBAA9; HPG &#xBCF4;&#xB2E4; &#xB354; &#xD070; &#xC815;&#xB3C4;&#xB85C; &#xB9C9;&#xC758; &#xBCC0;&#xD615; &#xC18D;&#xC131;&#xC5D0; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744;. &#xC774;&#xC2DD;&#xD560;&#xB41C; Rbc&#xC758; &#xBCF4;&#xC644; &#xC911;&#xC7AC; lysis &#xB18D;&#xB3C4; &#xC774;&#xC2DD;&#xD560;&#xB41C; &#xCCB4;&#xC778;&#xC758; &#xBD84;&#xC790; &#xD06C;&#xAE30;&#xB97C; &#xC811;&#xBAA9; &#xD558;&#xB294; &#xD3F4;&#xB9AC;&#xBA38;&#xC758; &#xC885;&#xB958;&#xC5D0; &#xC758;&#xC874; &#xD588;&#xB2E4;. &#xB192;&#xC740; &#xBD84;&#xC790; &#xBB34;&#xAC8C;&#xC640; &#xC774;&#xC2DD; &#xB18D;&#xB3C4; HPG&#xC640; &#xBABB; &#xBCF4;&#xC644; &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xAC00; &#xD2B8;&#xB9AC;&#xAC70;&#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xC758; &#xC9C4;&#xB3C4; HPG&#xC640; &#xBD84;&#xC790; &#xB2F9; &#xB9CE;&#xC740; &#xC218; &#xC0B0; &#xAE30; &#xADF8;&#xB8F9;&#xC758; &#xC874;&#xC7AC;&#xB85C; &#xC778;&#xD574; &#xAC00;&#xB2A5;&#xC131;&#xC774; &#xB192;&#xC558;&#xB2E4;. HPG &#xD22C;&#xC785; Rbc CD47 &#xC790;&#xAE30; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC811;&#xADFC;&#xC131; &#xBAA8;&#xB4E0; &#xB18D;&#xB3C4; &#xBC0F; &#xBD84;&#xC790; &#xD06C;&#xAE30;&#xB97C; &#xC811;&#xBAA9; &#xD558;&#xB294; &#xC735;&#xD569; &#xD558;&#xC600;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; Rbc&#xB97C; &#xB358;&#xC9C0;&#xB2E4; &#xBCF4;&#xB2E4; &#xC0C1;&#xB2F9;&#xD788; &#xB192;&#xC740; &#xC218;&#xC900;&#xC758; &#xBCF4;&#xC600;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098; &#xD398;&#xADF8; &#xD22C;&#xC785; &#xACE0;&#xBD84;&#xC790; &#xC81C;&#xACF5;, &#xC77C;&#xBC18;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C;, &#xB354; &#xB098;&#xC740; &#xCC28;&#xD3D0; &#xBC0F; HPG &#xACE0;&#xBD84;&#xC790;,, &#xBCF4;&#xB2E4; &#xD56D; &#xCCB4; &#xC778;&#xC2DD;&#xC5D0;&#xC11C; ABO &#xBC0F; &#xBD80; &#xD56D; &#xC6D0;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xBCF4;&#xD638; &#xC18C;&#xD615; HPGs &#xC81C;&#xACF5; &#xD2B9;&#xC815; &#xD56D; &#xC6D0;&#xC5D0;&#xC758; &#xB354; &#xC911;&#xB300; &#xD55C; &#xBCF4;&#xD638; RBC &#xD45C;&#xBA74;&#xC5D0;. HPG 20 Kda&#xACFC; HPG 60 kDa Rbc &#xD22C;&#xC785; &#xD588;&#xB2E4; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xB370;&#xC774;&#xD130; &#xB354; &#xB124;&#xC774;&#xD2F0;&#xBE0C; RBC&#xB97C; &#xB358;&#xC9C0;&#xB2E4; 5 kDa &#xBCF4;&#xB2E4; &#xBE44;&#xAD50; &#xB418;&#xB294; &#xC18D;&#xC131;&#xC744; &#xC804;&#xC2DC; &#xD558; &#xACE0; &#xB9D0;&#xB69D; 10 kDa &#xC720;&#xC0AC;&#xD55C; &#xC720;&#xCCB4; &#xD06C;&#xAE30;&#xC758; Rbc &#xD22C;&#xC785;. &#xC5F0;&#xAD6C; HPG 20 kDa &#xAC19;&#xC740; &#xC791;&#xC740; &#xC18C;&#xD615; &#xACE0;&#xBD84;&#xC790; &#xCE58;&#xB8CC; &#xBC30;&#xB2EC; &#xC751;&#xC6A9; &#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB7A8;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC801; RBC&#xC758; &#xC138;&#xB300;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD070; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xB825;&#xC744;&#xAC00;&#xC9C0;&#xACE0; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC911;&#xAC04; &#xD06C;&#xAE30;&#xC758; &#xACE0;&#xBD84;&#xC790; (&#xB9D0;&#xB69D; &#xB610;&#xB294; HPG) &#xC811;&#xBAA9; &#xB0AE;&#xC740; &#xB18D;&#xB3C4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB192;&#xC740; &#xD56D; &#xC6D0; &#xC704;&#xC7A5; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC8FC;&#xB294; &#xBCF4;&#xD3B8;&#xC801;&#xC778; &#xBD89;&#xC740; &#xD608;&#xC561; &#xAE30;&#xC99D;&#xC790; &#xC138;&#xD3EC;&#xB85C; &#xC218;&#xD608;&#xC5D0; &#xC0C1;&#xB2F9;&#xD55C; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xB825;&#xC744;&#xAC00;&#xC9C0;&#xACE0;.

&#xD56D; &#xC6D0; &#xC704;&#xC7A5;, CD47 &#xBCF4;&#xD638; &#xBC0F; &#xBCF4;&#xC644;&#xC5D0; &#xD3F4;&#xB9AC;&#xBA38; &#xAD6C;&#xC870;&#xC758; &#xC601;&#xD5A5; &#xD45C;&#xBA74; &#xC774;&#xC2DD;&#xD560;&#xB41C; &#xC801;&#xD608;&#xAD6C;&#xC758; lysis &#xC911;&#xC7AC;.

Hiper-ramificados poliglicerol (HPG) y pol&iacute;meros de polietilenglicol (PEG) con tama&ntilde;os similares hidrodin&aacute;micos en soluci&oacute;n se injertaron a gl&oacute;bulos rojos (gr) para investigar el impacto de la arquitectura de pol&iacute;mero en la estructura de la c&eacute;lula y la funci&oacute;n. Los tama&ntilde;os hidrodin&aacute;micos de pol&iacute;meros se calcularon los coeficientes de difusi&oacute;n medidos por RMN de gradiente de campo pulsado. La hidrataci&oacute;n del HPG y PEG fue determinada por an&aacute;lisis de calorimetr&iacute;a de barrido diferencial. Gl&oacute;bulos rojos injertados con PEG lineal ten&iacute;an propiedades diferentes en comparaci&oacute;n con el Pacto que HPG injertado RBCs. HPG RBCs injertados demostraron que mucha movilidad electrofor&eacute;tica m&aacute;s alto valores de PEG RBCs injertadas en concentraciones similares de injertos y tama&ntilde;os hidrodin&aacute;micos indicando diferencias en la estructura de la capa de la exclusi&oacute;n de pol&iacute;mero en la superficie celular. PEG injerto hab&iacute;a impactado las propiedades de la deformaci&oacute;n de la membrana en mayor grado que HPG. El complemento mediada por lisis de los hemat&iacute;es injertados era dependiente en el tipo de pol&iacute;mero, concentraci&oacute;n y tama&ntilde;o molecular de cadenas injertadas. A mayores pesos moleculares y concentraciones de injerto HPG tanto PEG desencadena la activaci&oacute;n del complemento. La magnitud de la activaci&oacute;n fue mayor con HPG posiblemente debido a la presencia de muchos grupos hidroxilo por mol&eacute;cula. HPG injertaron gl&oacute;bulos rojos mostraron niveles significativamente m&aacute;s altos de accesibilidad de uno mismo-prote&iacute;na CD47 que PEG injertados RBCs injerto en todas las concentraciones y tama&ntilde;os moleculares. PEG injertado pol&iacute;meros proporcionadas, en general, un mejor blindaje y protecci&oacute;n a ABO y ant&iacute;genos menores de reconocimiento de anticuerpos que los pol&iacute;meros HPG, sin embargo, los HPGs compactos proporcionaban una mayor protecci&oacute;n de ciertos ant&iacute;genos en la superficie de RBC. Nuestros datos demostradas que HPG 20 kDa y HPG 60 kDa injertan gl&oacute;bulos rojos exhiben propiedades que son m&aacute;s comparables a la RBC nativa que PEG 5 kDa y PEG 10 kDa hab&iacute;a injertado RBCs de tama&ntilde;os comparables de hidrodin&aacute;micos. El estudio muestra que pol&iacute;meros compactos peque&ntilde;os como HPG 20 kDa tienen un mayor potencial en la generaci&oacute;n de RBC funcional para aplicaciones terap&eacute;uticas de la entrega. Los pol&iacute;meros tama&ntilde;os intermedios (PEG o HPG) que demostr&oacute; mayor camuflaje de ant&iacute;geno en concentraciones m&aacute;s bajas de injertos tienen gran potencial en transfusi&oacute;n como c&eacute;lulas del donante de sangre universal.

Influencia de la arquitectura de pol&iacute;mero en camuflaje de ant&iacute;genos CD47 protecci&oacute;n y complemento mediada por lisis de eritrocitos injertados superficiales.

Iren Constantinescu

Centre for Blood Research,
Canadian Blood Services

University of British Columbia

Antigens Protected Functional Red Blood Cells By The Membrane Grafting Of Compact Hyperbranched Polyglycerols

Iren Constantinescu

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University of British Columbia

Antigens Protected Functional Red Blood Cells By The Membrane Grafting Of Compact Hyperbranched Polyglycerols

Centre for Blood Research,
Canadian Blood Services