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A High-Throughput Method For Zebrafish Sperm Cryopreservation and <em>In Vitro</em> Fertilization

This is a method for zebrafish sperm cryopreservation that is an adaptation of the Harvey method (Harvey et al., 1982).  We have introduced two changes to ...

University of California, Davis

T &#x6846;&#x57FA;&#x56E0;&#x7F16;&#x7801;&#x8F6C;&#x5F55;&#x8C03;&#x8282;&#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x80DA;&#x80CE;&#x53D1;&#x80B2;&#x7684;&#x8BF8;&#x591A;&#x65B9;&#x9762;&#x8FDB;&#x884C;&#x63A7;&#x5236;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x8BC1;&#x660E;&#x826F;&#x6027;&#x80BF;&#x7624;&#x8868;&#x793A;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C; spadetail (spt) / VegT &#x548C;&#x6CA1;&#x6709;&#x5C3E;&#x5DF4; (ntl) / Brachyury T &#x6846;&#x57FA;&#x56E0;&#x662F; semi-redundantly &#x548C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x81EA;&#x4E3B;&#x6240;&#x5FC5;&#x9700;&#x7684;&#x6240;&#x6709;&#x8EAF;&#x5E72;&#x548C;&#x5C3E;&#x90E8;&#x7684;&#x4E2D;&#x80DA;&#x5C42;&#x7684;&#x5F62;&#x6210;&#x3002;&#x5C3D;&#x7BA1; spt(-);ntl(-) &#x80DA;&#x80CE;&#x540E;&#x4E2D;&#x80DA;&#x5C42;&#x7684;&#x7F3A;&#x4E4F;&#xFF0C;&#x80CC;&#x8179;&#x4FA7;&#x795E;&#x7ECF;&#x7BA1;&#x9635;&#x5217;&#x662F;&#x76F8;&#x5BF9;&#x6B63;&#x5E38;&#x540E;, &#x5185;&#x4FA7;&#x5730;&#x677F;&#x677F;&#x662F;&#x5B8C;&#x5168;&#x4E0D;&#x5B58;&#x5728;&#x660E;&#x663E;&#x7684;&#x4F8B;&#x5916;&#x3002;&#x8FD9;&#x9C9C;&#x660E;&#x4E0E;&#x5355;&#x4E2A;&#x7A81;&#x53D8;&#x4F53;&#xFF0C;&#x610F;&#x89C1;&#xFF0C;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x5355;&#x72EC;&#x7684; ntl &#x6216; spt &#x7A81;&#x53D8;&#x589E;&#x5F3A;&#x540E;&#x5185;&#x4FA7;&#x5730;&#x677F;&#x677F;&#x53D1;&#x5C55;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x53D1;&#x73B0; ntl &#x51FD;&#x6570;&#x662F;&#x9700;&#x8981;&#x538B;&#x5236;&#x5185;&#x4FA7;&#x5730;&#x677F;&#x677F;&#x548C;&#x4FC3;&#x8FDB;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x810A;&#x7D22;&#x57DF;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x4E2D;&#x7684;&#x810A;&#x7D22;&#x547D;&#x8FD0;&#x548C; spt &#x548C; ntl &#x4E00;&#x8D77;&#x5747;&#x975E;&#x7EC6;&#x80DE;&#x81EA;&#x4E3B;&#x7684;&#x5185;&#x4FA7;&#x5730;&#x677F;&#x677F;&#x5F62;&#x6210;&#xFF0C;&#x6697;&#x793A;&#x76EE;&#x524D;&#x5728;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x4E2D;&#x80DA;&#x5C42;&#x7684;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x4FE1;&#x53F7;&#x7F3A;&#x4E4F; spt(-);ntl(-) &#x80DA;&#x80CE;&#x3002;

T &#x7BB1;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C;&#x57FA;&#x56E0;&#x6CA1;&#x6709;&#x5C3E;&#x5DF4;&#x548C; spadetail &#x6240;&#x9700;&#x7684;&#x8EAF;&#x5E72;&#x548C;&#x5C3E;&#x90E8;&#x7684;&#x4E2D;&#x80DA;&#x5C42;&#x548C;&#x5185;&#x4FA7;&#x697C;&#x5C42;&#x677F;&#x7684;&#x53D1;&#x5C55;&#x3002;

T-box genes encode transcriptional regulators that control many aspects of embryonic development. Here, we demonstrate that the mesodermally expressed zebrafish spadetail (spt)/VegT and no tail (ntl)/Brachyury T-box genes are semi-redundantly and cell-autonomously required for formation of all trunk and tail mesoderm. Despite the lack of posterior mesoderm in spt(-);ntl(-) embryos, dorsal-ventral neural tube patterning is relatively normal, with the notable exception that posterior medial floor plate is completely absent. This contrasts sharply with observations in single mutants, as mutations singly in ntl or spt enhance posterior medial floor plate development. We find that ntl function is required to repress medial floor plate and promote notochord fate in cells of the wild-type notochord domain and that spt and ntl together are required non cell-autonomously for medial floor plate formation, suggesting that an inducing signal present in wild-type mesoderm is lacking in spt(-);ntl(-) embryos.

The zebrafish T-box genes no tail and spadetail are required for development of trunk and tail mesoderm and medial floor plate.

T-box g&egrave;nes codent des r&eacute;gulateurs transcriptionnels qui contr&ocirc;lent de nombreux aspects du d&eacute;veloppement embryonnaire. Ici, nous d&eacute;montrons que le poisson-z&egrave;bre mesodermally expresse spadetail (spt) / VegT et aucune ne queue (ntl) / g&egrave;nes Brachyury T-box sont semi-redundantly et cellule autonome requis pour la formation du m&eacute;soderme tous de tronc et de la queue. Malgr&eacute; l&#39;absence du m&eacute;soderme post&eacute;rieur chez les embryons de spt(-);ntl(-), structuration du tube neural dorsal ventrale est relativement normale, &agrave; l&#39;exception notable que les t&ocirc;les de plancher m&eacute;diale post&eacute;rieure est compl&egrave;tement absent. Cela contraste nettement avec observations chez les mutants simples, s&eacute;par&eacute;ment des mutations ntl ou spt renforceront le d&eacute;veloppement plaque &eacute;tage m&eacute;dian post&eacute;rieur. Nous trouvons que la fonction de la ntl est n&eacute;cessaire pour r&eacute;primer les t&ocirc;les de plancher m&eacute;dial et promouvoir le sort de la notochorde dans les cellules du domaine sauvage notochorde et que spt et ntl ensemble sont tenues sans cellule autonome pour la formation de plaque de plancher m&eacute;dial, sugg&eacute;rant qu&#39;un signal inductrice pr&eacute;sent dans le m&eacute;soderme sauvage fait d&eacute;faut chez les embryons de spt(-);ntl(-).

Les g&egrave;nes du poisson z&egrave;bre T-box sans queue et spadetail sont n&eacute;cessaires pour le d&eacute;veloppement du tronc et queue m&eacute;soderme et plaque de sol m&eacute;dial.

Die Zebrafisch-T-Box-Gene kein Schwanz und spadetail f&#xFC;r den Aufbau von Rumpf und Schwanz Mesoderm und mediale Bodenplatte erforderlich.

T-box geni codificano per regolatori trascrizionali che controllano molti aspetti dello sviluppo embrionale. Qui, ci dimostrano che il spadetail mesodermally espresso zebrafish (spt) / VegT e nessuna coda (ntl) / T-box Brachyury geni sono semi-redundantly e cella-autonomamente richiesti per la formazione del mesoderma tutti tronco e la coda. Nonostante la mancanza di mesoderma posteriore in embrioni spt(-);ntl(-), tubo neurale dorsale-ventrale patterning &egrave; relativamente normale, con l&#39;eccezione che la piastra pavimento mediale posteriore &egrave; completamente assente. Questo contrasta con le osservazioni in singoli mutanti, come mutazioni singolarmente in ntl o spt migliorano lo sviluppo di piastra posteriore piano mediale. Troviamo che ntl funzione &egrave; necessaria per reprimere la piastra pavimento mediale e promuovere la notocorda destino nelle cellule del dominio selvaggio-tipo notocorda e spt e ntl insieme sono necessarie non cella-autonomamente per la formazione di piastra pavimento mediale, suggerendo che un segnale induzione presente nel selvaggio-tipo mesoderma &egrave; privo di embrioni spt(-);ntl(-).

I geni di zebrafish T-box coda e spadetail non sono necessari per lo sviluppo del mesoderma del tronco e la coda e piastra pavimento mediale.

T &#x30DC;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306F;&#x840C;&#x82BD;&#x671F;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x306E;&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x5074;&#x9762;&#x3092;&#x5236;&#x5FA1;&#x3059;&#x308B;&#x8EE2;&#x5199;&#x56E0;&#x5B50;&#x3092;&#x30A8;&#x30F3;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C9;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x5165;&#x3063;&#x3066;&#x8868;&#x660E;&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5; spadetail (spt)/VegT &#x3068; no &#x30C6;&#x30FC;&#x30EB; (ntl)/&#x77ED;&#x5C3E;&#x5947;&#x5F62; T &#x30DC;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306F; semi-redundantly &#x3068;&#x30BB;&#x30EB;&#x81EA;&#x5F8B;&#x7684;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306E;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30AF;&#x3068;&#x30C6;&#x30FC;&#x30EB;&#x4E2D;&#x80DA;&#x8449;&#x306E;&#x5F62;&#x6210;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x3002;Spt(-);ntl(-) &#x80DA;&#x306E;&#x5F8C;&#x90E8;&#x4E2D;&#x80DA;&#x8449;&#x306E;&#x6B20;&#x5982;&#x306B;&#x3082;&#x304B;&#x304B;&#x308F;&#x3089;&#x305A;&#x3001;&#x795E;&#x7D4C;&#x7BA1;&#x306E;&#x80CC;&#x8179;&#x8EF8;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30F3;&#x5F62;&#x6210;&#x306F;&#x5F8C;&#x90E8;&#x306E;&#x5185;&#x5074;&#x306E;&#x5E8A;&#x30D7;&#x30EC;&#x30FC;&#x30C8;&#x304C;&#x5B8C;&#x5168;&#x306B;&#x4E0D;&#x5728;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306F;&#x6CE8;&#x76EE;&#x3059;&#x3079;&#x304D;&#x4F8B;&#x5916;&#x3067;&#x3001;&#x6BD4;&#x8F03;&#x7684;&#x6B63;&#x5E38;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x5F8C;&#x90E8;&#x306E;&#x5185;&#x5074;&#x306E;&#x5E8A;&#x30D7;&#x30EC;&#x30FC;&#x30C8;&#x958B;&#x767A; ntl &#x307E;&#x305F;&#x306F; spt &#x306B;&#x306F;&#x5358;&#x72EC;&#x306E;&#x7A81;&#x7136;&#x5909;&#x7570;&#x3092;&#x9AD8;&#x3081;&#x308B;&#x3088;&#x3046;&#x3053;&#x308C;&#x306F;&#x92ED;&#x304F;&#x5358;&#x4E00;&#x306E;&#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x306E;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3068;&#x5BFE;&#x7167;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005; ntl &#x95A2;&#x6570;&#x304C;&#x5185;&#x5074;&#x306E;&#x5E8A;&#x30D7;&#x30EC;&#x30FC;&#x30C8;&#x3092;&#x93AE;&#x5727;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x810A;&#x7D22;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x810A;&#x7D22;&#x904B;&#x547D;&#x3068; spt &#x3068;&#x4E00;&#x7DD2;&#x306B; ntl &#x975E;&#x81EA;&#x5F8B;&#x30BB;&#x30EB;&#x306E;&#x5185;&#x5074;&#x306E;&#x5E8A;&#x30D7;&#x30EC;&#x30FC;&#x30C8;&#x5F62;&#x6210;&#x5FC5;&#x8981;&#x304C;&#x4FC3;&#x9032;&#x3059;&#x308B;&#x5FC5;&#x8981;&#x304C;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x8A98;&#x5C0E;&#x4FE1;&#x53F7;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x4E2D;&#x80DA;&#x8449;&#x306E;&#x5B58;&#x5728; spt(-);ntl(-) &#x306E;&#x80DA;&#x306B;&#x6B20;&#x3051;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3092;&#x898B;&#x3064;&#x3051;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5; T &#x30DC;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30AF;&#x3068;&#x30C6;&#x30FC;&#x30EB;&#x4E2D;&#x80DA;&#x8449;&#x3068;&#x5185;&#x5074;&#x306E;&#x5E8A;&#x30D7;&#x30EC;&#x30FC;&#x30C8;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x306A;&#x30C6;&#x30FC;&#x30EB;&#x3068; spadetail &#x306F;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;

&#xD2F0; &#xBC15;&#xC2A4; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBC30;&#xC544; &#xBC1C;&#xB2EC;&#xC758; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xCE21;&#xBA74;&#xC744; &#xC81C;&#xC5B4; &#xD558;&#xB294; transcriptional &#xB808; &#xADE4; &#xB808;&#xC774; &#xD130;&#xB97C; &#xC778;&#xCF54;&#xB529;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30;, &#xADF8; &#xC2DC;&#xC5F0; mesodermally &#xD45C;&#xD604;&#xB41C; zebrafish spadetail (spt) / VegT &#xACE0; &#xC5C6;&#xACE0; &#xAF2C;&#xB9AC; (ntl) / Brachyury T-&#xC0C1;&#xC790; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xB294; semi-redundantly &#xBC0F; &#xC140; &#xC790;&#xC728;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xBAA8;&#xB4E0; &#xD2B8;&#xB801;&#xD06C;&#xC640; &#xD14C;&#xC77C; mesoderm&#xC758; &#xD615;&#xC131;&#xC5D0; &#xD544;&#xC694;&#xD55C;. Spt(-);ntl(-) &#xBC30;&#xC544; &#xD6C4;&#xBD80; mesoderm &#xBD80;&#xC871;&#xC5D0;&#xB3C4; &#xBD88;&#xAD6C; &#xD558; &#xACE0; &#xC9C0; &#xBCF5; &#xC2E0;&#xACBD; &#xD29C;&#xBE0C; &#xD328;&#xD134;&#xD654; &#xD6C4;&#xBD80; &#xC911;&#xAC04; &#xBC14;&#xB2E5; &#xD50C;&#xB808;&#xC774;&#xD2B8;&#xB294; &#xC644;&#xC804;&#xD788; &#xACB0; &#xC11D; &#xD558;&#xB294; &#xC8FC;&#xBAA9;&#xD560; &#xB9CC;&#xD55C; &#xC608;&#xC678;&#xC640; &#xD568;&#xAED8; &#xC0C1;&#xB300;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC815;&#xC0C1;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xB2E8;&#xC77C; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAD00;&#xCC30;&#xACFC; ntl &#xB610;&#xB294; spt&#xC5D0; &#xB2E8;&#xB3C5;&#xC73C;&#xB85C; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xD6C4;&#xBD80; &#xC911;&#xAC04; &#xBC14;&#xB2E5; &#xD50C;&#xB808;&#xC774;&#xD2B8; &#xAC1C;&#xBC1C;&#xC744; &#xAC15;&#xD654; &#xD558;&#xB294; &#xC120;&#xBA85; &#xD558; &#xAC8C; &#xB300;&#xC870; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC; &#xC57C;&#xC0DD;-&#xD0C0;&#xC785; mesoderm&#xC5D0; &#xC720;&#xB3C4; &#xC2E0;&#xD638;&#xB97C; spt(-);ntl(-) &#xBC30;&#xC544;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBD80;&#xC871; &#xD55C; &#xC81C;&#xC548; ntl &#xD568;&#xC218;&#xB294; &#xC911;&#xAC04; &#xBC14;&#xB2E5;&#xC5D0; &#xC811;&#xC2DC;&#xB97C; &#xC8FC;&#xCCB4; &#xD560; &#xC57C;&#xC0DD;-&#xD0C0;&#xC785; notochord &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778;&#xC758; &#xC140;&#xC5D0; notochord &#xC6B4;&#xBA85;&#xACFC; spt &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; ntl &#xD568;&#xAED8; &#xC911;&#xAC04; &#xBC14;&#xB2E5; &#xD50C;&#xB808;&#xC774;&#xD2B8; &#xD615;&#xC131;&#xC744; &#xC704;&#xD55C; &#xC138;&#xD3EC; &#xC790;&#xC728;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xBE44; &#xC694;&#xAD6C; &#xB41C;&#xB2E4; &#xD64D;&#xBCF4; &#xD558;&#xB294; &#xB370; &#xD544;&#xC694;&#xD55C; &#xCC3E;&#xC73C;&#xC2ED;&#xC2DC;&#xC624;.

Zebrafish T &#xAE30;&#xBCF8; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xAF2C;&#xB9AC;&#xC640; spadetail&#xB294; &#xD2B8;&#xB801;&#xD06C;&#xC640; &#xD14C;&#xC77C; mesoderm &#xC911;&#xAC04; &#xBC14;&#xB2E5; &#xD50C;&#xB808;&#xC774;&#xD2B8;&#xC758; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xD544;&#xC694;.

Genes T-box codifican reguladores transcripcionales que controlan muchos aspectos del desarrollo embrionario. Aqu&iacute;, demostramos que el pez cebra mesodermally expresa spadetail (spt) / VegT y no cola (ntl) / Brachyury T-box genes son semi-redundantly y celular-aut&oacute;nomamente requeridos para la formaci&oacute;n del mesodermo todos del tronco y la cola. A pesar de la falta de mesodermo posterior en embriones de spt(-);ntl(-), tubo de los nervios dorsal-ventral patrones son relativamente normal, con la notable excepci&oacute;n de que la placa del piso intermedio posterior est&aacute; totalmente ausente. Esto contrasta fuertemente con observaciones en mutantes individuales, como las mutaciones por separado en ntl o spt mejoran desarrollo de placa de piso medial posterior. Encontramos que funci&oacute;n ntl es necesaria reprimir la placa del piso intermedio y promover destino notocordio en c&eacute;lulas del dominio salvaje-tipo notocordio y spt y ntl junto deben no celular-aut&oacute;nomo para la formaci&oacute;n de la placa del piso intermedio, sugiriendo que una se&ntilde;al inductora presente en el mesodermo salvaje-tipo carece de embriones spt(-);ntl(-).

Los genes de pez cebra T-box cola y spadetail no son necesarios para el desarrollo del mesodermo del tronco y la cola y la placa del piso intermedio.

&#x53D1;&#x5C55;&#x7684;&#x810A;&#x690E;&#x52A8;&#x7269;&#x80A2;&#x82BD;&#x5728;&#x4FA7;&#x677F;&#x4E2D;&#x80DA;&#x5C42;&#x5C42;&#x53E0;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#xFF0C;&#x5305;&#x62EC;&#x6210;&#x5458;&#x7684;&#x540E;&#x4EE3;&#x548C; Wnt &#x7684;&#x5BB6;&#x5EAD;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x53CA;&#x8F6C;&#x5F55;&#x56E0;&#x5B50; tbx5 &#x89E6;&#x53D1;&#x3002;Fgf8&#xFF0C;&#x8FD9;&#x8868;&#x793A;&#x4E2D;&#x95F4;&#x7684;&#x4E2D;&#x80DA;&#x5C42;&#x7684;&#x662F;&#x601D;&#x60F3;&#x7740;&#x624B;&#x524D;&#x80A2;&#x5F62;&#x6210;&#x901A;&#x8FC7;&#x6FC0;&#x6D3B; wnt2b&#xFF0C;&#x7136;&#x540E;&#x8BF1;&#x4F7F; tbx5 &#x4E2D;&#x76F8;&#x90BB;&#x7684;&#x5916;&#x4FA7;&#x677F;&#x4E2D;&#x80DA;&#x5C42;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x3002;Tbx5&#xFF0C;&#x53CD;&#x8FC7;&#x6765;&#xFF0C;&#x662F; fgf10 &#x7684;&#x9700;&#x8981;&#x6FC0;&#x6D3B;&#xFF0C;&#x5176;&#x4E2D;&#x7EE7;&#x7535;&#x5668;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x4FE1;&#x53F7;&#x5BF9;&#x4E0A;&#x8986;&#x7684;&#x5916;&#x80DA;&#x5C42;&#x7684;&#x80A2;&#x4F53;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x8868;&#x660E;&#x7684;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C; fgf24 &#x57FA;&#x56E0;&#xFF0C;&#x5C5E;&#x4E8E; Fgf8/17/18 &#x4E9A;&#x79D1;&#x7684;&#x540E;&#x4EE3;&#x914D;&#x4F53;&#xFF0C;&#x4E0B;&#x6E38; tbx5 &#x6FC0;&#x6D3B; fgf10 &#x8868;&#x8FBE;&#x5F0F;&#x4E2D;&#x4FA7;&#x677F;&#x4E2D;&#x80DA;&#x5C42;&#x7684;&#x884C;&#x4E3A;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x8FD8;&#x8868;&#x660E; fgf24 &#x6D3B;&#x52A8;&#x662F;&#x7FC5;&#x82BD;&#xFF0C;&#x5411; tbx5 &#x8868;&#x793A;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8FC1;&#x79FB;&#x548C;&#x6D3B;&#x5316;&#x7684;&#x5FC5;&#x8981;&#x5618;&#xFF0C;&#x4F46;&#x4E0D;&#x662F; hand2&#xFF0C;&#x5728;&#x540E;&#x7FC5;&#x82BD;&#x4E2D;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x3002;

&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C; fgf24 &#x7A81;&#x53D8;&#x4F53;&#x6807;&#x8BC6; Fgf &#x4FE1;&#x53F7;&#x810A;&#x690E;&#x52A8;&#x7269;&#x524D;&#x80A2;&#x521D;&#x59CB;&#x5316;&#x6D89;&#x53CA;&#x7684;&#x5176;&#x4ED6;&#x7EA7;&#x522B;&#x3002;

The development of vertebrate limb buds is triggered in the lateral plate mesoderm by a cascade of genes, including members of the Fgf and Wnt families, as well as the transcription factor tbx5. Fgf8, which is expressed in the intermediate mesoderm, is thought to initiate forelimb formation by activating wnt2b, which then induces the expression of tbx5 in the adjacent lateral plate mesoderm. Tbx5, in turn, is required for the activation of fgf10, which relays the limb inducing signal to the overlying ectoderm. We show that the zebrafish fgf24 gene, which belongs to the Fgf8/17/18 subfamily of Fgf ligands, acts downstream of tbx5 to activate fgf10 expression in the lateral plate mesoderm. We also show that fgf24 activity is necessary for the migration of tbx5-expressing cells to the fin bud, and for the activation of shh, but not hand2, expression in the posterior fin bud.

The zebrafish fgf24 mutant identifies an additional level of Fgf signaling involved in vertebrate forelimb initiation.

Le d&eacute;veloppement des bourgeons des membres vert&eacute;br&eacute;s est d&eacute;clench&eacute; dans le m&eacute;soderme plaque lat&eacute;rale par une cascade de g&egrave;nes, y compris les membres des familles Fgf et Wnt, ainsi que le tbx5 de facteur de transcription. FGF8, qui s&#39;exprime dans le m&eacute;soderme interm&eacute;diaire, est pens&eacute; pour initier la formation des membres ant&eacute;rieurs en activant des wnt2b, qui puis induit l&#39;expression de tbx5 dans le m&eacute;soderme plaque lat&eacute;rale adjacente. Tbx5, &agrave; son tour, est n&eacute;cessaire pour l&#39;activation de fgf10, qui relaie la branche induisant le signal de l&#39;ectoderme sus-jacent. Nous montrons que le poisson-z&egrave;bre fgf24 g&egrave;ne, qui appartient &agrave; la sous-famille Fgf8/17/18 de Fgf ligands, actes en aval de tbx5 pour activer l&#39;expression fgf10 dans le m&eacute;soderme plaque lat&eacute;rale. Nous montrons &eacute;galement que fgf24 activit&eacute; est n&eacute;cessaire pour la migration des cellules exprimant tbx5 &agrave; le &oelig;uf de la nageoire et pour l&#39;activation de chut, mais pas hand2, expression dans le &oelig;uf les nageoires post&eacute;rieures.

Le poisson-z&egrave;bre fgf24 mutant identifie un niveau suppl&eacute;mentaire de Fgf signalisation impliqu&eacute;e dans l&#39;initiation des membres ant&eacute;rieurs vert&eacute;br&eacute;s.

Der Zebrafisch-Mutante identifiziert fgf24 eine zus&#xE4;tzliche Ebene der FGF-Signale beteiligt Wirbeltier Vordergliedma&#xDF;e Initiation.

Lo sviluppo dei germogli di vertebrati arto viene attivato nel mesoderma della placca laterale da una cascata di geni, compresi i membri delle famiglie Fgf e Wnt, come pure il tbx5 di fattore di trascrizione. Fgf8, che si esprime nel mesoderma intermedio, &egrave; pensato per iniziare la formazione degli arti anteriori attivando wnt2b, che poi induce l&#39;espressione di tbx5 nel mesoderma della placca laterale adiacente. Tbx5, a sua volta, &egrave; necessario per l&#39;attivazione di fgf10, che inoltra l&#39;arto che inducono il segnale per l&#39;ectoderma sovrastante. Ci mostrano che il gene fgf24 Danio rerio, che appartiene alla sottofamiglia Fgf8/17/18 di Fgf ligandi, atti a valle di tbx5 per attivare fgf10 espressione nel mesoderma della placca laterale. Mostriamo anche che fgf24 attivit&agrave; &egrave; necessaria per la migrazione delle cellule che esprimono tbx5 al germoglio pinna e per l&#39;attivazione di shh, ma non hand2, espressione in boccio il pinna posteriore.

Il mutante di zebrafish fgf24 identifica un livello aggiuntivo di Fgf segnalando coinvolti nell&#39;iniziazione vertebrati degli arti anteriori.

&#x810A;&#x690E;&#x52D5;&#x7269;&#x306E;&#x80A2;&#x82BD;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x5916;&#x5074;&#x677F;&#x4E2D;&#x80DA;&#x8449;&#x306E;&#x8EE2;&#x5199;&#x56E0;&#x5B50; tbx5 &#x3068;&#x540C;&#x69D8;&#x306B;&#x3001;Fgf &#x3068; wnt &#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x306E;&#x5BB6;&#x65CF;&#x306E;&#x30E1;&#x30F3;&#x30D0;&#x30FC;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x30AB;&#x30B9;&#x30B1;&#x30FC;&#x30C9;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x30C8;&#x30EA;&#x30AC;&#x30FC;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x4E2D;&#x9593;&#x80DA;&#x8449;&#x3067;&#x8868;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3001;Fgf8 &#x524D;&#x80A2;&#x5F62;&#x6210; tbx5 &#x96A3;&#x63A5;&#x3059;&#x308B;&#x5916;&#x5074;&#x677F;&#x4E2D;&#x80DA;&#x8449;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x3092;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3059;&#x308B; wnt2b &#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x958B;&#x59CB;&#x3059;&#x308B;&#x3068;&#x8003;&#x3048;&#x3089;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;Tbx5&#x3001;&#x9806;&#x756A;&#x306B;&#x3001;&#x4FE1;&#x53F7;&#x3092;&#x8986;&#x3046;&#x5916;&#x80DA;&#x8449;&#x306E;&#x8A98;&#x5C0E;&#x80A2;&#x30EA;&#x30EC;&#x30FC; fgf10 &#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x306F;&#x5FC5;&#x8981;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5; fgf24 &#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306F;&#x3001;Fgf &#x30EA;&#x30AC;&#x30F3;&#x30C9;&#x3001;fgf10 &#x5F0F;&#x5916;&#x5074;&#x677F;&#x4E2D;&#x80DA;&#x8449;&#x3092;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x306B;&#x3059;&#x308B; tbx5 &#x306E;&#x4E0B;&#x6D41;&#x306E;&#x884C;&#x70BA;&#x306E; Fgf8/17/18 &#x4E9C;&#x79D1;&#x306B;&#x5C5E;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3059;.&#x307E;&#x305F; fgf24 &#x6D3B;&#x52D5;&#x6CE3;&#x304B;&#x306A;&#x3044;&#x3067;&#x3001;&#x306A;&#x3044; hand2 &#x5F8C;&#x90E8;&#x3072;&#x308C;&#x82BD;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x767A;&#x73FE; tbx5 &#x767A;&#x73FE;&#x7D30;&#x80DE;&#x30D5;&#x30A3;&#x30F3;&#x82BD;&#x3078;&#x306E;&#x79FB;&#x884C;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x3067;&#x3059;&#x304C;. &#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#x306E; fgf24 &#x5909;&#x7570; Fgf &#x306E;&#x810A;&#x690E;&#x52D5;&#x7269;&#x306E;&#x524D;&#x80A2;&#x767A;&#x751F;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3059;&#x308B;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x306E;&#x8FFD;&#x52A0;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3092;&#x8B58;&#x5225;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#xCC99;&#xCD94; &#xC0AC;&#xC9C0; &#xC2F9;&#xC758; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xCE21;&#xBA74; &#xD50C;&#xB808;&#xC774;&#xD2B8; mesoderm&#xC5D0;&#xC11C; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xC804;&#xC0AC; &#xC778;&#xC790; tbx5 Fgf &#xBC0F; Wnt &#xC81C;&#xD488;&#xAD70;&#xC758; &#xAD6C;&#xC131;&#xC6D0;&#xC744; &#xD3EC;&#xD568; &#xD55C; &#xBAA8;&#xB450;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xD2B8;&#xB9AC;&#xAC70;&#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC911;&#xAC04; mesoderm &#xB2E8;&#xC704;&#xB85C; Fgf8 &#xB2E4;&#xC74C; &#xC778;&#xC811; &#xD55C; &#xCE21;&#xBA74; &#xD50C;&#xB808;&#xC774;&#xD2B8; mesoderm&#xC5D0;&#xC11C; tbx5&#xC758; &#xC2DD;&#xC744; &#xC720;&#xB3C4; &#xD558;&#xB294; wnt2b&#xB97C; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xD558; &#xC5EC; forelimb &#xD615;&#xC131; &#xC2DC;&#xC791;&#xD560; &#xC0DD;&#xAC01; &#xC774;&#xB2E4;. Tbx5, &#xCC28;&#xB840;&#xB85C;, &#xC0AC;&#xC9C0; &#xC720;&#xB3C4; &#xC2E0;&#xD638; overlying ectoderm &#xB9B4;&#xB808;&#xC774; &#xD558;&#xB294; fgf10&#xC758; &#xC815;&#xD488; &#xC778;&#xC99D;&#xC5D0; &#xD544;&#xC694;&#xD55C;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; Fgf ligands, &#xD589;&#xC704; &#xD558;&#xB958; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xCE21;&#xBA74; &#xD50C;&#xB808;&#xC774;&#xD2B8; mesoderm&#xC5D0;&#xC11C; fgf10 &#xC2DD; tbx5&#xC758; Fgf8/17/18 &#xC544;&#xC5D0; &#xC18D;&#xD55C; zebrafish fgf24 &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xB97C; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC; &#xB610;&#xD55C; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4; fgf24 &#xD65C;&#xB3D9;&#xC758; &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xB97C; &#xC704;&#xD55C;&#xACFC; &#xC9C0; &#xB290; &#xB7EC; &#xBBF8; &#xBC84;&#xB4DC; &#xC140; tbx5 &#xD45C;&#xD604; &#xB9C8;&#xC774;&#xADF8;&#xB808;&#xC774;&#xC158;&#xC5D0; &#xD544;&#xC694;&#xD55C; &#xC27F;, hand2 &#xD6C4;&#xBD80; &#xD540; &#xAF43; &#xBD09; &#xC624;&#xB9AC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC2DD; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC;.

Zebrafish fgf24 &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; Fgf &#xCC99;&#xCD94; forelimb &#xAC1C;&#xC2DC;&#xC5D0; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xC2E0;&#xD638; &#xCD94;&#xAC00; &#xC218;&#xC900;&#xC744; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

El desarrollo de brotes de la extremidad de vertebrados se dispara en el mesodermo de la placa lateral por una cascada de genes, entre ellos a miembros de las familias Fgf y Wnt, as&iacute; como el tbx5 del factor de transcripci&oacute;n. Fgf8, que se expresa en el mesodermo intermedio, est&aacute; pensado para iniciar la formaci&oacute;n de miembro anterior mediante la activaci&oacute;n de wnt2b, que luego induce la expresi&oacute;n de tbx5 en el mesodermo de la placa lateral adyacente. Tbx5, a su vez, es necesario para la activaci&oacute;n de fgf10, el cual transmite la extremidad induciendo la se&ntilde;al para el ectodermo suprayacente. Demostramos que el gen de la fgf24 de pez cebra, que pertenece a la subfamilia de Fgf8/17/18 de ligandos Fgf, actos aguas abajo de tbx5 para activar la expresi&oacute;n de fgf10 en el mesodermo de la placa lateral. Tambi&eacute;n demostramos que fgf24 actividad es necesaria para la migraci&oacute;n de c&eacute;lulas de tbx5-expresi&oacute;n hasta la yema de la aleta y para la activaci&oacute;n de shh, pero no hand2, expresi&oacute;n de ra&iacute;z posterior de la aleta.

El pez cebra fgf24 mutante identifica un nivel adicional de Fgf se&ntilde;alizaci&oacute;n implicados en la iniciaci&oacute;n del miembro anterior de vertebrados.

&#x78B1;&#x6027;&#x6210;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x7EC6;&#x80DE;&#x751F;&#x957F;&#x56E0;&#x5B50; (Fgf) &#x4FE1;&#x53F7;&#x5728;&#x810A;&#x690E;&#x52A8;&#x7269;&#x80DA;&#x80CE;&#x540E;&#x4E2D;&#x80DA;&#x5C42;&#x7684;&#x5F00;&#x53D1;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x4E2D;&#x53D1;&#x6325;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x963B;&#x6B62; Fgf &#x8868;&#x793A;&#x663E;&#x6027;&#x8D1F; Fgf &#x53D7;&#x4F53;&#x4FE1;&#x53F7;&#x6291;&#x5236;&#x540E;&#x7684;&#x4E2D;&#x80DA;&#x5C42;&#x53D1;&#x5C55;&#x3002;&#x5728;&#x8001;&#x9F20;&#x4F53;&#x5185;&#xFF0C;Fgf8 &#x4F3C;&#x4E4E;&#x662F;&#x4E3B;&#x8981;&#x914D;&#x4F53;&#x6240;&#x9700;&#x7684;&#x4E2D;&#x80DA;&#x53F6;&#x7684;&#x53D1;&#x5C55;&#xFF0C;&#x5982;&#x9F20;&#x6807; Fgf8 &#x7A81;&#x53D8;&#x4F53;&#x4E0D;&#x5F62;&#x6210;&#x4E2D;&#x80DA;&#x5C42;&#x3002;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C;&#xFF0C;Fgf8 &#x7F16;&#x7801;&#x7684; acerebellar &#x8F68;&#x8FF9;&#xFF0C;&#x5E76;&#xFF0C;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x4E8E;&#x5176;&#x9F20;&#x6807; otholog&#xFF0C;&#x8868;&#x793A;&#x5728;&#x65E9;&#x671F;&#x7684;&#x4E2D;&#x80DA;&#x53F6;&#x524D;&#x4F53;&#x5728; gastrulation &#x671F;&#x95F4;&#x3002;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C; fgf8 &#x7A81;&#x53D8;&#x4F53;&#x5728;&#x53EA;&#x6709;&#x8F7B;&#x5FAE;&#x7F3A;&#x9677;&#x540E;&#x7684;&#x4E2D;&#x80DA;&#x53F6;&#x53D1;&#x5C55;&#xFF0C;&#x8868;&#x660E;&#x5B83;&#x4E0D;&#x552F;&#x4E00;&#x7684;&#x540E;&#x4EE3;&#x914D;&#x4F53;&#x53C2;&#x4E0E;&#x672C;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x7684;&#x53D1;&#x5C55;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x62A5;&#x544A;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C;&#xFF0C;fgf24&#xFF0C;&#x5728; gastrulation &#x671F;&#x95F4;&#x662F;&#x591A;&#x53D1;&#x6027;&#x9AA8;&#x9AD3;&#x7624;&#x7684;&#x4E2D;&#x80DA;&#x5C42;&#x524D;&#x4F53; fgf8 fgf8 &#x76F8;&#x5173;&#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x9274;&#x5B9A;&#x3002;&#x4F7F;&#x7528;&#x57FA;&#x4E8E; morpholino &#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x5931;&#x6D3B;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5DF2;&#x7ECF;&#x5728;&#x5F00;&#x53D1;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x4E2D;&#x5206;&#x6790; fgf24 &#x7684;&#x51FD;&#x6570;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x53D1;&#x73B0;&#x6291;&#x5236; fgf24 &#x529F;&#x80FD;&#x4EC5;&#x5BF9;&#x540E;&#x4E2D;&#x80DA;&#x5C42;&#x7684;&#x5F62;&#x6210;&#x4EA7;&#x751F;&#x4EFB;&#x4F55;&#x5F71;&#x54CD;&#x3002;&#x76F8;&#x53CD;&#xFF0C;&#x6291;&#x5236;&#x80DA;&#x80CE;&#x7A81;&#x53D8;&#x4F53; fgf8 &#x4E3A; fgf24 &#x529F;&#x80FD;&#x5757;&#x6700;&#x540E;&#x4E2D;&#x80DA;&#x5C42;&#x7684;&#x5F62;&#x6210;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;fgf8 &#x548C; fgf24 &#x662F;&#x4E00;&#x8D77;&#x4FC3;&#x8FDB;&#x6240;&#x9700;&#x540E;&#x4E2D;&#x80DA;&#x53F6;&#x7684;&#x53D1;&#x5C55;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x63D0;&#x4F9B;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x4FE1;&#x53F7;&#x4E0E;&#x65E0;&#x5C3E;&#x548C; spadetail &#x8FDB;&#x884C;&#x4EA4;&#x4E92;&#x7684;&#x7EC4;&#x4EF6;&#x7684;&#x540E;&#x4EE3;&#xFF0C;&#x4E24;&#x4E2A;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C; T &#x76D2;&#x8F6C;&#x5F55;&#x56E0;&#x5B50;&#xFF0C;&#x8868;&#x578B;&#x548C;&#x9057;&#x4F20;&#x8BC1;&#x636E;&#x6240;&#x9700;&#x7684;&#x6240;&#x6709;&#x540E;&#x7684;&#x4E2D;&#x80DA;&#x5C42;&#x7684;&#x53D1;&#x5C55;&#x3002;&#x6700;&#x540E;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x8868;&#x660E; fgf24 &#x8868;&#x793A;&#x65E9;&#x671F;&#x7FC5;&#x82BD;&#x95F4;&#x8D28;&#x548C;&#x6291;&#x5236; fgf24 &#x51FD;&#x6570;&#x4F1A;&#x5BFC;&#x81F4;&#x7F3A;&#x4E4F;&#x80F8;&#x9CCD;&#x7684;&#x53EF;&#x884C;&#x9C7C;&#x3002;

&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C; fgf24 &#x4E0E; fgf8 &#x4FC3;&#x8FDB;&#x540E;&#x80DA;&#x5C42;&#x53D1;&#x5C55;&#x7684;&#x529F;&#x80FD;&#x3002;

Fibroblast growth factor (Fgf) signaling plays an important role during development of posterior mesoderm in vertebrate embryos. Blocking Fgf signaling by expressing a dominant-negative Fgf receptor inhibits posterior mesoderm development. In mice, Fgf8 appears to be the principal ligand required for mesodermal development, as mouse Fgf8 mutants do not form mesoderm. In zebrafish, Fgf8 is encoded by the acerebellar locus, and, similar to its mouse otholog, is expressed in early mesodermal precursors during gastrulation. However, zebrafish fgf8 mutants have only mild defects in posterior mesodermal development, suggesting that it is not the only Fgf ligand involved in the development of this tissue. We report here the identification of an fgf8-related gene in zebrafish, fgf24, that is co-expressed with fgf8 in mesodermal precursors during gastrulation. Using morpholino-based gene inactivation, we have analyzed the function of fgf24 during development. We found that inhibiting fgf24 function alone has no affect on the formation of posterior mesoderm. Conversely, inhibiting fgf24 function in embryos mutant for fgf8 blocks the formation of most posterior mesoderm. Thus, fgf8 and fgf24 are together required to promote posterior mesodermal development. We provide both phenotypic and genetic evidence that these Fgf signaling components interact with no tail and spadetail, two zebrafish T-box transcription factors that are required for the development of all posterior mesoderm. Last, we show that fgf24 is expressed in early fin bud mesenchyme and that inhibiting fgf24 function results in viable fish that lack pectoral fins.

Zebrafish fgf24 functions with fgf8 to promote posterior mesodermal development.

Signalisation de fibroblastes growth factor (Fgf) joue un r&ocirc;le important au cours du d&eacute;veloppement du m&eacute;soderme post&eacute;rieur chez les embryons de vert&eacute;br&eacute;s. Blocage Fgf signalisation en exprimant un r&eacute;cepteur de Fgf dominant n&eacute;gatif inhibe le d&eacute;veloppement de m&eacute;soderme post&eacute;rieur. Chez les souris, Fgf8 semble le ligand principaux requis pour le d&eacute;veloppement m&eacute;sodermiques, puisque les souris Fgf8 mutantes ne forment pas de m&eacute;soderme. Dans le poisson-z&egrave;bre, Fgf8 est cod&eacute;e par le locus acerebellar, et semblable &agrave; sa souris otholog, s&#39;exprime en pr&eacute;curseurs m&eacute;sodermiques pr&eacute;coces durant la gastrulation. Toutefois, poisson z&egrave;bre fgf8 mutants ont des d&eacute;fauts douces en d&eacute;veloppement m&eacute;sodermiques post&eacute;rieur, ce qui sugg&egrave;re qu&#39;il n&#39;est pas le seul ligand Fgf impliqu&eacute; dans le d&eacute;veloppement de ce tissu. Les auteurs rapportent l&#39;identification d&#39;un g&egrave;ne fgf8 li&eacute;es au poisson-z&egrave;bre, fgf24, qui est co-exprim&eacute;e avec fgf8 m&eacute;sodermiques pr&eacute;curseurs au cours de la gastrulation. &Agrave; l&#39;aide de l&#39;inactivation de g&egrave;nes morpholino-base, nous avons analys&eacute; la fonction de fgf24 au cours du d&eacute;veloppement. Nous avons trouv&eacute; qu&#39;emp&ecirc;chant la fonction de fgf24 seule n&#39;a aucun effet sur la formation du m&eacute;soderme post&eacute;rieur. &Agrave; l&#39;inverse, emp&ecirc;chant la fonction de fgf24 en mutant d&#39;embryons pour fgf8 bloque la formation du m&eacute;soderme plus post&eacute;rieur. Ainsi, fgf8 et fgf24 ensemble doivent promouvoir le d&eacute;veloppement post&eacute;rieur m&eacute;sodermiques. Nous fournissons des preuves g&eacute;n&eacute;tiques et ph&eacute;notypiques que ces Fgf signalisation composants interagissent sans queue et spadetail, deux poissons z&egrave;bres T-box facteurs de transcription qui sont requis pour le d&eacute;veloppement du m&eacute;soderme post&eacute;rieur tout. Enfin, nous montrons que fgf24 est exprim&eacute;e dans le m&eacute;senchyme de bourgeon d&eacute;but fin et cette fonction fgf24 inhibition entra&icirc;ne viables poissons d&eacute;pourvus des nageoires pectorales.

Fonctions du poisson-z&egrave;bre fgf24 avec fgf8 pour promouvoir le d&eacute;veloppement m&eacute;sodermiques post&eacute;rieure.

Zebrafisch fgf24 Funktionen mit FGF8 zu posterioren mesodermalen Entwicklung zu f&#xF6;rdern.

Segnalazione di Fibroblast growth factor (Fgf) svolge un ruolo importante durante lo sviluppo del mesoderma posteriore in embrioni di vertebrati. Blocco Fgf segnalando esprimendo un recettore di Fgf dominante-negativo inibisce lo sviluppo del mesoderma posteriore. Nei topi, Fgf8 sembra di essere il principale ligando necessario per sviluppo mesodermica, come mutanti di topo Fgf8 non formano mesoderm. In zebrafish, Fgf8 &egrave; codificato con il locus acerebellar, e simile al suo mouse otholog, &egrave; espressa in primi precursori mesodermica durante la gastrulazione. Tuttavia, zebrafish fgf8 mutanti hanno solo lievi difetti nello sviluppo posteriore mesodermica, suggerendo che non &egrave; l&#39;unico ligando Fgf coinvolto nello sviluppo di questo tessuto. Riportiamo qui l&#39;identificazione di un gene fgf8-correlati in zebrafish, fgf24, che &egrave; espressi con fgf8 mesodermica dei precursori durante la gastrulazione. Utilizzando l&#39;inattivazione del gene oligonucleotides-based, abbiamo analizzato la funzione di fgf24 durante lo sviluppo. Abbiamo trovato che inibendo la funzione di fgf24 da sola non ha alcun effetto sulla formazione del mesoderma posteriore. Al contrario, inibendo la funzione fgf24 in mutante di embrioni per fgf8 blocca la formazione del mesoderma pi&ugrave; posteriore. Cos&igrave;, fgf8 e fgf24 insieme sono necessari per promuovere lo sviluppo mesodermica posteriore. Forniamo prove fenotipiche e genetiche che questi Fgf segnalando componenti interagiscono senza coda e spadetail, due trascrizione T-box di zebrafish fattori che sono necessari per lo sviluppo del mesoderma tutto posteriore. Ultima, mostriamo che fgf24 &egrave; espressa nel mesenchima di bud fin presto e che inibendo la funzione fgf24 risultati in vitali pesci privi di pinne pettorali.

Zebrafish fgf24 funzioni con fgf8 per promuovere lo sviluppo mesodermica posteriore.

&#x7DDA;&#x7DAD;&#x82BD;&#x7D30;&#x80DE;&#x6210;&#x9577;&#x56E0;&#x5B50; (Fgf) &#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x5F8C;&#x90E8;&#x4E2D;&#x80DA;&#x8449;&#x810A;&#x690E;&#x52D5;&#x7269;&#x306E;&#x80CE;&#x5150;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x4E2D;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x679C;&#x305F;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;Fgf &#x306E;&#x30C9;&#x30DF;&#x30CA;&#x30F3;&#x30C8; &#x30CD;&#x30AC;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6; Fgf &#x30EC;&#x30BB;&#x30D7;&#x30BF;&#x30FC;&#x3092;&#x8868;&#x73FE;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3067;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x3092;&#x30D6;&#x30ED;&#x30C3;&#x30AF;&#x5F8C;&#x90E8;&#x4E2D;&#x80DA;&#x8449;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x3092;&#x963B;&#x5BB3;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B; Fgf8 &#x30DE;&#x30A6;&#x30B9; Fgf8 &#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x4E2D;&#x80DA;&#x8449;&#x5F62;&#x6210;&#x3057;&#x306A;&#x3044;&#x3068;&#x4E2D;&#x80DA;&#x8449;&#x6027;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x306A;&#x30D7;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B7;&#x30D1;&#x30EB;&#x306E;&#x30EA;&#x30AC;&#x30F3;&#x30C9;&#x306B;&#x8868;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3001;&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5; Fgf8 acerebellar &#x8ECC;&#x8DE1;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x30A8;&#x30F3;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C9;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3057;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306B;&#x4F3C;&#x3066; otholog&#x3001;&#x8868;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x521D;&#x671F;&#x4E2D;&#x80DA;&#x8449;&#x6027;&#x524D;&#x99C6;&#x4F53;&#x306E;&#x539F;&#x8178;&#x9665;&#x5165;&#x6642;&#x306B;&#x3002;&#x305F;&#x3060;&#x3057;&#x3001;&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5; fgf8 &#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x306E;&#x307F;&#x8EFD;&#x5EA6;&#x306E;&#x6B20;&#x9665;&#x5F8C;&#x90E8;&#x4E2D;&#x80DA;&#x8449;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x7D44;&#x7E54;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x306B;&#x643A;&#x308F;&#x308B;&#x552F;&#x4E00;&#x306E; Fgf &#x30EA;&#x30AC;&#x30F3;&#x30C9;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x793A;&#x5506;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x3001;&#x539F;&#x8178;&#x9665;&#x5165;&#x6642;&#x306B;&#x4E2D;&#x80DA;&#x8449;&#x6027;&#x524D;&#x99C6;&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;&#x306E; fgf8 &#x3068;&#x30B7;&#x30E7;&#x30A6;&#x30B8;&#x30E7;&#x30A6;&#x30D0;&#x30A8;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x3067;&#x3059; fgf24&#x3001;&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5; fgf8 &#x95A2;&#x9023;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x540C;&#x5B9A;&#x3092;&#x5831;&#x544A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;Morpholino &#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x4E0D;&#x6D3B;&#x5316;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x958B;&#x767A;&#x4E2D;&#x306B; fgf24 &#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3092;&#x5206;&#x6790;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x3060;&#x3051;&#x3067; fgf24 &#x95A2;&#x6570;&#x3092;&#x6291;&#x5236;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x4E0E;&#x3048;&#x308B;&#x5F8C;&#x90E8;&#x4E2D;&#x80DA;&#x8449;&#x306E;&#x5F62;&#x6210;&#x3092;&#x767A;&#x898B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x9006;&#x306B;&#x3001;&#x80DA;&#x306E;&#x5909;&#x7570;&#x682A;&#x306E; fgf8 fgf24 &#x305D;&#x304C;&#x3044;&#x6700;&#x3082;&#x5F8C;&#x90E8;&#x4E2D;&#x80DA;&#x8449;&#x306E;&#x5F62;&#x6210;&#x3092;&#x30D6;&#x30ED;&#x30C3;&#x30AF;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;fgf8 &#x3068; fgf24 &#x306F;&#x4E00;&#x7DD2;&#x306B;&#x5F8C;&#x90E8;&#x4E2D;&#x80DA;&#x8449;&#x6027;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x3092;&#x4FC3;&#x9032;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x3001;&#x306A;&#x3044;&#x306E;&#x5C3E;&#x3068; spadetail &#x3068;&#x30B3;&#x30F3;&#x30DD;&#x30FC;&#x30CD;&#x30F3;&#x30C8;&#x306E;&#x5BFE;&#x8A71;&#x3092;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x3053;&#x308C;&#x3089; Fgf 2 &#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5; T &#x30DC;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x8EE2;&#x5199;&#x304C;&#x8981;&#x56E0;&#x8868;&#x73FE;&#x578B;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x907A;&#x4F1D;&#x7684;&#x8A3C;&#x62E0;&#x306F;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x5F8C;&#x90E8;&#x4E2D;&#x80DA;&#x8449;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x306A;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6700;&#x5F8C;&#x306B;, fgf24 &#x521D;&#x671F;&#x306E;&#x30D5;&#x30A3;&#x30F3;&#x82BD;&#x9593;&#x5145;&#x7E54;&#x3067;&#x8868;&#x73FE;&#x3055;&#x308C;&#x3001;&#x80F8;&#x9C2D;&#x3092;&#x6B20;&#x3044;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x73FE;&#x5B9F;&#x7684;&#x306A;&#x9B5A;&#x3067;&#x305D;&#x306E;&#x963B;&#x5BB3;&#x306E; fgf24 &#x95A2;&#x6570;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5; fgf8 &#x5F8C;&#x90E8;&#x4E2D;&#x80DA;&#x8449;&#x6027;&#x306E;&#x767A;&#x5C55;&#x3092;&#x4FC3;&#x9032;&#x3059;&#x308B; fgf24 &#x6A5F;&#x80FD;&#x3002;

&#xC12C;&#xC720; &#xC544; &#xC138;&#xD3EC; &#xC131;&#xC7A5; &#xC778;&#xC790; (Fgf) &#xC2E0;&#xD638; &#xD6C4;&#xBD80; mesoderm &#xCC99;&#xCD94; &#xB3D9;&#xBB3C; &#xBC30;&#xC544;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xD55C;&#xB2E4;. Fgf &#xC9C0;&#xBC30;&#xC801;&#xC778; &#xBD80;&#xC815;&#xC801;&#xC778; Fgf &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xB97C; &#xD45C;&#xD604; &#xD558; &#xC5EC; &#xC2E0;&#xD638;&#xB97C; &#xCC28;&#xB2E8; &#xD6C4;&#xBD80; mesoderm &#xBC1C;&#xC804;&#xC744; &#xC5B5;&#xC81C; &#xD55C;&#xB2E4;. &#xC950;, Fgf8 &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; Fgf8 &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; mesoderm &#xD615;&#xC131; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;&#xB85C; &#xC8FC; &#xB9AC;&#xAC04;&#xB4DC; mesodermal &#xAC1C;&#xBC1C;&#xC5D0; &#xD544;&#xC694;&#xD55C; &#xAC83; &#xC778; &#xB4EF;&#xD558;&#xB2E4;. Zebrafish&#xC5D0;&#xC11C; Fgf8 acerebellar &#xB85C;&#xCEE4; &#xC2A4;&#xB85C; &#xC778;&#xCF54;&#xB529; &#xD558; &#xACE0; &#xADF8;&#xAC83;&#xC758; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4;&#xC640; &#xBE44;&#xC2B7;&#xD55C; otholog, &#xB2E8;&#xC704;&#xB85C; &#xCD08;&#xAE30; mesodermal &#xC720;&#xB3C4;&#xCCB4; gastrulation &#xB3D9;&#xC548;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, zebrafish fgf8 &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xC21C; &#xACB0;&#xD568;&#xC744; &#xAC16;&#xACE0; &#xD6C4;&#xBD80; mesodermal &#xAC1C;&#xBC1C;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC774; &#xC870;&#xC9C1; &#xAC1C;&#xBC1C;&#xC5D0; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xC720;&#xC77C;&#xD55C; Fgf &#xB9AC;&#xAC04;&#xB4DC; &#xD558;&#xC9C0; &#xC81C;&#xC548;. &#xC6B0;&#xB9AC; &#xBCF4;&#xACE0; &#xC5EC;&#xAE30; zebrafish, gastrulation &#xC911; co-expressed mesodermal &#xC804;&#xC870;&#xC5D0; fgf8&#xC640; &#xD568;&#xAED8; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xB418;&#xB294; fgf24&#xC5D0; &#xC788;&#xB294; fgf8 &#xAD00;&#xB828; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. Morpholino &#xAE30;&#xBC18; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBE44;&#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; fgf24&#xC758; &#xD568;&#xC218;&#xB97C; &#xBD84;&#xC11D; &#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xD6C4;&#xBD80; mesoderm &#xD615;&#xC131;&#xC5D0; &#xC544;&#xBB34;&#xB7F0; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xC8FC;&#xC9C0;&#xB294; &#xD63C;&#xC790; fgf24 &#xAE30;&#xB2A5;&#xC744; &#xC5B5;&#xC81C; &#xBC1C;&#xACAC;. &#xBC18;&#xB300;&#xB85C;, &#xAC00;&#xC7A5; &#xD6C4;&#xBD80; mesoderm &#xD615;&#xC131;&#xC744; &#xCC28;&#xB2E8; fgf8&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xBC30;&#xC544;&#xC5D0;&#xC11C; fgf24 &#xAE30;&#xB2A5;&#xC744; &#xC5B5;&#xC81C; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C;, fgf8 &#xBC0F; fgf24 &#xD568;&#xAED8; &#xD558;&#xB294; &#xB370; &#xD544;&#xC694;&#xD55C; &#xD6C4;&#xBD80; mesodermal &#xAC1C;&#xBC1C;&#xC744; &#xCD09;&#xC9C4;. Phenotypic &#xBC0F; &#xC720;&#xC804;&#xC801; &#xC99D;&#xAC70;&#xB294; &#xB450; zebrafish T &#xAE30;&#xBCF8; &#xC804;&#xC0AC; &#xC694;&#xC18C;&#xB97C; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; Fgf &#xC2E0;&#xD638; &#xAF2C;&#xB9AC;&#xC640; spadetail&#xC640; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; &#xD558;&#xB294; &#xAD6C;&#xC131; &#xC694;&#xC18C;, &#xADF8;&#xB294; &#xBAA8;&#xB4E0; &#xD6C4;&#xBD80; mesoderm &#xBC1C;&#xC804;&#xC744; &#xC704;&#xD574; &#xD544;&#xC694;&#xD55C; &#xC81C;&#xACF5; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB9C8;&#xC9C0;&#xB9C9;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC77C;&#xCC0D; &#xD540; &#xAF43; &#xBD09; &#xC624;&#xB9AC; mesenchyme fgf24&#xC740; &#xD45C;&#xD604; &#xBC0F; &#xADF8; &#xC5B5;&#xC81C; fgf24 &#xD568;&#xC218; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xAC00;&#xB2A5;&#xD55C; &#xBB3C;&#xACE0;&#xAE30; &#xAC00;&#xC2B4; &#xC9C0; &#xB290; &#xB7EC; &#xBBF8;&#xAC00; &#xBD80;&#xC871;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Zebrafish &#xD6C4;&#xBD80; mesodermal &#xAC1C;&#xBC1C;&#xC744; &#xCD09;&#xC9C4; &#xD558;&#xB294; fgf8&#xC640; fgf24 &#xAE30;&#xB2A5;.

Fibroblast growth factor (Fgf) se&ntilde;alizaci&oacute;n juega un papel importante durante el desarrollo del mesodermo posterior en embriones de vertebrados. Bloqueo Fgf se&ntilde;alizaci&oacute;n expresando un dominante negativo Fgf receptor inhibe el desarrollo del mesodermo posterior. En ratones, Fgf8 parece ser el principal ligando requerido para el desarrollo mesod&eacute;rmico, como mutantes de rat&oacute;n Fgf8 no forman mesodermo. En pez cebra, Fgf8 es codificado por el locus acerebellar, y similar a su rat&oacute;n otholog, se expresa en principios precursores mesod&eacute;rmicos durante la gastrulaci&oacute;n. Sin embargo, pez cebra fgf8 mutantes tienen s&oacute;lo leves defectos en el posterior desarrollo mesod&eacute;rmico, sugiriendo que no es el &uacute;nico ligando Fgf implicado en el desarrollo de este tejido. Aqu&iacute; divulgamos la identificaci&oacute;n de un gen fgf8 relacionadas en el pez cebra, fgf24, que es co-expressed con fgf8 en precursores mesod&eacute;rmicos durante la gastrulaci&oacute;n. Mediante la inactivaci&oacute;n del gen Morfolino-base, hemos analizado la funci&oacute;n de fgf24 durante el desarrollo. Encontramos que inhibe la funci&oacute;n fgf24 sola no tiene efecto sobre la formaci&oacute;n del mesodermo posterior. Por el contrario, inhibe la funci&oacute;n fgf24 en el mutante de embriones para fgf8 bloquea la formaci&oacute;n de mesodermo m&aacute;s posterior. As&iacute;, fgf8 y fgf24 juntos est&aacute;n obligados a promover el desarrollo posterior de mesod&eacute;rmico. Proporcionamos evidencia gen&eacute;tica y fenot&iacute;pica que estos Fgf se&ntilde;alizaci&oacute;n componentes interact&uacute;an sin cola y spadetail, transcripci&oacute;n de T-box de pez cebra dos factores son necesarios para el desarrollo del mesodermo todo posterior. Por &uacute;ltimo, demostramos que fgf24 se expresa en principios mes&eacute;nquima de brote de aleta y esa funci&oacute;n inhibidora de la fgf24 como resultado viable peces que carecen de las aletas pectorales.

Pez cebra fgf24 funciones con fgf8 para promover el desarrollo posterior de mesod&eacute;rmico.

&#x6211;&#x4EEC;&#x8C03;&#x67E5;&#x4E86;&#x78B1;&#x6027;&#x6210;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x7EC6;&#x80DE;&#x751F;&#x957F;&#x56E0;&#x5B50; (FGF) &#x5728;&#x53D1;&#x5C55;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C;&#x54BD;&#x7259;&#x4E0E;&#x63ED;&#x9732;&#x65B0;&#x89D2;&#x8272;&#x7684;&#x76EE;&#x6807;&#x4E3A; FGFs &#x7259;&#x9F7F;&#x53D1;&#x80B2;&#x4EE5;&#x53CA;&#x7259;&#x9F7F;&#x53D1;&#x80B2;&#x9014;&#x5F84;&#x4E2D;&#x7684;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x53D1;&#x80B2;&#x548C;&#x5730;&#x5F62;&#x591A;&#x6837;&#x6027;&#x4FE1;&#x53F7;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x53D1;&#x73B0;&#x7259;&#x76F8;&#x5173;&#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x7684;&#x51E0;&#x79CD;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C;&#x662F;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x4E8E;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x7684;&#x9F20;&#x6807; orthologs&#xFF0C;&#x5305;&#x62EC;&#x4E0A;&#x76AE;&#x548C;&#x95F4;&#x8D28;&#x7684;&#x6807;&#x8BB0;&#x3002;&#x53E6;&#x5916;&#xFF0C;&#x7531; fgf8 &#x548C; pax9 &#x5728;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C;&#x7259;&#x80DA;&#x4E2D;&#x8868;&#x8FBE;&#x660E;&#x663E;&#x7F3A;&#x4E4F;&#x8868;&#x793A;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C;&#x548C;&#x9F20;&#x6807;&#x7259;&#x9F7F;&#x4E4B;&#x95F4;&#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x5DEE;&#x5F02;&#x5DE8;&#x5927;&#x3002;&#x5728; 32 h SU5402 FGF &#x53D7;&#x4F53;&#x6291;&#x5236;&#x963B;&#x6B62;&#x7259;&#x9F7F;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7684;&#x5F62;&#x6001;&#x53D1;&#x751F;&#x548C;&#x7259;&#x9F7F;&#x77FF;&#x5316;&#x3002;&#x54BD;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4ECD;&#x7136;&#x4FDD;&#x6301;&#x4E0D;&#x53D8;&#xFF0C;&#x6839;&#x636E;&#x6B63;&#x5E38; pitx2 &#x8868;&#x8FBE;&#x5F0F;&#x6765;&#x5224;&#x65AD;&#xFF0C;&#x800C;&#x4E0D;&#x53EA;&#x662F;&#x95F4;&#x5145;&#x8D28;&#x8868;&#x8FBE;&#x7684; lhx6 &#x548C; lhx7 &#x6D88;&#x9664;&#x5982;&#x9884;&#x671F;&#x90A3;&#x6837;&#x4ECE;&#x9F20;&#x6807;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#xFF0C;&#x4F46;&#x4E0A;&#x76AE;&#x8868;&#x8FBE;&#x7684; dlx2a&#x3001; dlx2b&#x3001; fgf3&#xFF0C;&#x548C; fgf4 &#x4E5F;&#x662F;&#x3002;&#x8FD9;&#x540E;&#x4E00;&#x79CD;&#x7ED3;&#x679C;&#x63D0;&#x4F9B;&#x65B0;&#x7684;&#x8BC1;&#x636E;&#x8868;&#x660E;&#x53E3;&#x8154;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x662F; FGF &#x4FE1;&#x53F7;&#x7684;&#x76EE;&#x6807;&#x3002;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;SU5402 &#x672A;&#x80FD;&#x963B;&#x6B62;&#x672C;&#x5730;&#x5316;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x7684; pitx2 &#x8868;&#x660E;&#x9F7F;&#x5F00;&#x59CB;&#x7684;&#x6700;&#x65E9;&#x7684;&#x6B65;&#x9AA4;&#x662F;&#x72EC;&#x7ACB;&#x7535;&#x5F71;&#x7684;&#x3002;&#x5177;&#x4F53; FGF &#x914D;&#x4F53; morpholino &#x53CD;&#x4E49;&#x5BE1;&#x6838;&#x82F7;&#x9178;&#x7684;&#x8C03;&#x67E5;&#x663E;&#x793A;&#x53EA;&#x6709;&#x540E; fgf4 &#x7EC4;&#x5408;&#x5F0F;&#xFF0C;&#x867D;&#x7136; fgf8 &#x6291;&#x5236;&#x663E;&#x793A;&#x53EA;&#x6709;&#x7EC6;&#x5FAE;&#x4E0B;&#x8C03;&#x7259;&#x79D1; dlx2b &#x8868;&#x8FBE;&#x4E0E;&#x7259;&#x9F7F;&#x5F62;&#x6001;&#x4E0A;&#x6CA1;&#x6709;&#x660E;&#x663E;&#x7684;&#x6548;&#x679C;&#x7684;&#x8F7B;&#x5EA6;&#x7259;&#x9F7F;&#x5F62;&#x72B6;&#x8868;&#x578B;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E;&#x5197;&#x4F59; FGF &#x4FE1;&#x53F7;&#x76EE;&#x6807;&#x53E3;&#x8154;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x548C;&#x5728;&#x4E00;&#x8D77;&#x6240;&#x9700;&#x7684;&#x7259;&#x79D1;&#x5F62;&#x6001;&#x53D1;&#x751F;&#x3002;&#x8FDB;&#x4E00;&#x6B65;&#x7684;&#x5DE5;&#x4F5C;&#x5C06;&#x9700;&#x8981;&#x6F84;&#x6E05;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x4FE1;&#x53F7;&#xFF0C;&#x7279;&#x522B;&#x662F;&#x5728;&#x5176;&#x8D77;&#x6E90;&#x548C;&#x662F;&#x5426;&#x95F4;&#x8D28;&#x901A;&#x8FC7;&#x91C7;&#x53D6;&#x884C;&#x52A8;&#x7684;&#x6027;&#x8D28;&#x3002;

Fgf &#x4FE1;&#x53F7;&#x662F;&#x5FC5;&#x9700;&#x7684;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C;&#x7259;&#x9F7F;&#x53D1;&#x80B2;&#x3002;

We have investigated fibroblast growth factor (FGF) signaling during the development of the zebrafish pharyngeal dentition with the goal of uncovering novel roles for FGFs in tooth development as well as phylogenetic and topographic diversity in the tooth developmental pathway. We found that the tooth-related expression of several zebrafish genes is similar to that of their mouse orthologs, including both epithelial and mesenchymal markers. Additionally, significant differences in gene expression between zebrafish and mouse teeth are indicated by the apparent lack of fgf8 and pax9 expression in zebrafish tooth germs. FGF receptor inhibition with SU5402 at 32 h blocked dental epithelial morphogenesis and tooth mineralization. While the pharyngeal epithelium remained intact as judged by normal pitx2 expression, not only was the mesenchymal expression of lhx6 and lhx7 eliminated as expected from mouse studies, but the epithelial expression of dlx2a, dlx2b, fgf3, and fgf4 was as well. This latter result provides novel evidence that the dental epithelium is a target of FGF signaling. However, the failure of SU5402 to block localized expression of pitx2 suggests that the earliest steps of tooth initiation are FGF-independent. Investigations of specific FGF ligands with morpholino antisense oligonucleotides revealed only a mild tooth shape phenotype following fgf4 knockdown, while fgf8 inhibition revealed only a subtle down-regulation of dental dlx2b expression with no apparent effect on tooth morphology. Our results suggest redundant FGF signals target the dental epithelium and together are required for dental morphogenesis. Further work will be required to elucidate the nature of these signals, particularly with respect to their origins and whether they act through the mesenchyme.

Fgf signaling is required for zebrafish tooth development.

Nous avons examin&eacute; le facteur de croissance fibroblastique (FGF) signalisation au cours du d&eacute;veloppement de la dentition pharyngien du poisson z&egrave;bre dans le but de d&eacute;couvrir des r&ocirc;les nouveaux pour FGFs dans le d&eacute;veloppement des dents, mais aussi la diversit&eacute; phylog&eacute;n&eacute;tique et topographique dans la voie du d&eacute;veloppement de la dent. Nous avons constat&eacute; que l&#39;expression li&eacute;e &agrave; la dent de plusieurs g&egrave;nes de poisson-z&egrave;bre est similaire &agrave; celle de leurs orthologues chez la souris, y compris les marqueurs &eacute;pith&eacute;liaux et m&eacute;senchymateuses. En outre, des diff&eacute;rences significatives dans l&#39;expression des g&egrave;nes entre les dents de poisson-z&egrave;bre et de la souris sont indiqu&eacute;s par le manque apparent d&#39;expression fgf8 et pax9 en germe de dent de poisson-z&egrave;bre. Inhibition des r&eacute;cepteurs FGF avec SU5402 &agrave; 32 h bloqu&eacute; min&eacute;ralisation dentaire de morphogen&egrave;se et dent &eacute;pith&eacute;liale. Alors que l&#39;&eacute;pith&eacute;lium pharyngien est demeur&eacute;e intacte si l&#39;on en juge par l&#39;expression normale pitx2, non seulement a &eacute;t&eacute; l&#39;expression m&eacute;senchymateuse de lhx6 et lhx7 &eacute;limin&eacute; comme pr&eacute;vu &agrave; partir chez les souris, mais l&#39;expression &eacute;pith&eacute;liale de dlx2a, dlx2b, fgf3 et fgf4 &eacute;tait aussi bien. Ce dernier r&eacute;sultat fournit de nouvelles preuves que l&#39;&eacute;pith&eacute;lium dentaire est une cible de signalisation FGF. Cependant, l&#39;&eacute;chec de SU5402 pour bloquer l&#39;expression localis&eacute;e de pitx2 sugg&egrave;re que les premi&egrave;res &eacute;tapes d&#39;initiation de la dent sont ind&eacute;pendantes de la FGF. Enqu&ecirc;tes des ligands sp&eacute;cifiques de FGF avec morpholino antisens ont r&eacute;v&eacute;l&eacute; seulement un ph&eacute;notype de forme doux dent suite knockdown fgf4, alors que l&#39;inhibition fgf8 r&eacute;v&eacute;l&eacute; seulement une subtile down-r&eacute;gulation de l&#39;expression de dlx2b dentaire avec aucun effet apparent sur la morphologie des dents. Nos r&eacute;sultats sugg&egrave;rent signaux redondants de FGF cible l&#39;&eacute;pith&eacute;lium dentaire et ensemble est n&eacute;cessaires pour les soins dentaire morphogen&egrave;se. Il faudra poursuivre les travaux pour &eacute;lucider la nature de ces signaux, particuli&egrave;rement en ce qui concerne leur origine et qu&#39;ils agissent par l&#39;interm&eacute;diaire du m&eacute;senchyme.

Signalisation FGF est n&eacute;cessaire pour le d&eacute;veloppement de dent de poisson-z&egrave;bre.

Fgf Signalisierung wird f&#xFC;r Zebrafisch Zahnentwicklung erforderlich.

Abbiamo studiato fattore di crescita dei fibroblasti (FGF) segnalazione durante lo sviluppo della dentatura faringea zebrafish con l&#39;obiettivo di scoprire nuovi ruoli per FGFs nel dente di sviluppo, come pure la diversit&agrave; filogenetica e topografiche in via dello sviluppo del dente. Abbiamo scoperto che il dente-correlati espressione di diversi geni di zebrafish &egrave; simile a quello della loro orthologs mouse, compresi markers epiteliali e mesenchimali. Inoltre, significative differenze nell&#39;espressione genica tra denti zebrafish e il mouse sono indicate con l&#39;apparente mancanza di espressione germi dente zebrafish fgf8 e pax9. L&#39;inibizione del recettore FGF con SU5402 a 32 h bloccato mineralizzazione dentale di morfogenesi e dente epiteliale. Mentre l&#39;epitelio faringeo &egrave; rimasto intatto come giudicato dall&#39;espressione pitx2 normale, non solo era l&#39;espressione mesenchimale di lhx6 e lhx7 eliminato come previsto dagli studi di mouse, ma l&#39;espressione epiteliale di dlx2a, dlx2b, fgf3, e fgf4 &egrave; stato cos&igrave;. Quest&#39;ultimo risultato fornisce prove romanzo che l&#39;epitelio dentale &egrave; una destinazione di FGF segnalando. Tuttavia, il fallimento di SU5402 per bloccare l&#39;espressione localizzata di pitx2 suggerisce che i primi passi dell&#39;iniziazione del dente sono FGF-indipendente. Le indagini di specifici ligandi FGF con oligonucleotidi antisense oligonucleotides ha rivelato solo un fenotipo di forma di dente mite seguito fgf4 atterramento, mentre l&#39;inibizione fgf8 rivelato solo un sottile down-regulation dell&#39;espressione dlx2b dentale con nessun effetto apparente sulla morfologia del dente. I nostri risultati suggeriscono ridondante FGF segnali target l&#39;epitelio dentale e insieme sono necessari per la morfogenesi dentaria. Ulteriore lavoro sar&agrave; richiesto di chiarire la natura di questi segnali, specialmente per quanto riguarda le loro origini e se essi agiscono attraverso il mesenchima.

FGF di segnalazione &egrave; necessaria per lo sviluppo del dente di zebrafish.

&#x7DDA;&#x7DAD;&#x82BD;&#x7D30;&#x80DE;&#x6210;&#x9577;&#x56E0;&#x5B50; (FGF) &#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x4E2D;&#x306B;&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#x306E;&#x54BD;&#x982D;&#x6B6F;&#x306E;&#x66B4;&#x304F;&#x5C0F;&#x8AAC;&#x30ED;&#x30FC;&#x30EB;&#x306E;&#x76EE;&#x6A19;&#x3068; Fgf &#x306E;&#x6B6F;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x6B6F;&#x306E;&#x767A;&#x9054;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x306E;&#x7CFB;&#x7D71;&#x3068;&#x5730;&#x5F62;&#x306E;&#x591A;&#x69D8;&#x6027;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x3092;&#x8ABF;&#x3079;&#x305F;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x6B6F;&#x95A2;&#x9023;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#x4E0A;&#x76AE;&#x30FB;&#x9593;&#x8449;&#x30DE;&#x30FC;&#x30AB;&#x30FC;&#x306A;&#x3069;&#x3001;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306E;&#x30AA;&#x30EB;&#x30BD;&#x30ED;&#x30B0;&#x306E;&#x305D;&#x308C;&#x306B;&#x985E;&#x4F3C;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x767A;&#x898B;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#x6B6F;&#x80DA;&#x3067;&#x306E; fgf8 &#x3068; pax9 &#x5F0F;&#x306E;&#x6B20;&#x5982;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x767A;&#x73FE;&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306E;&#x6B6F;&#x306E;&#x9593;&#x306B;&#x6709;&#x610F;&#x5DEE;&#x304C;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;SU5402 &#x3067;&#x306E; FGF &#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306E;&#x6291;&#x5236; 32 h &#x6B6F;&#x79D1;&#x4E0A;&#x76AE;&#x5F62;&#x614B;&#x5F62;&#x6210;&#x3084;&#x6B6F;&#x306E;&#x7121;&#x6A5F;&#x5316;&#x30D6;&#x30ED;&#x30C3;&#x30AF;&#x3002;&#x54BD;&#x982D;&#x306E;&#x4E0A;&#x76AE;&#x306F;&#x901A;&#x5E38; pitx2 &#x5F0F;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5224;&#x65AD;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x305D;&#x306E;&#x307E;&#x307E;&#x6B8B;&#x308B;&#x9593;&#x3001;&#x3060;&#x3051;&#x3060;&#x3063;&#x305F; lhx6 &#x3068; lhx7 &#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x304B;&#x3089;&#x306F;&#x3001;&#x671F;&#x5F85;&#x3069;&#x304A;&#x308A;&#x306B;&#x6392;&#x9664;&#x306E;&#x9593;&#x8449;&#x7CFB;&#x8868;&#x73FE;&#x3067;&#x3059;&#x304C;&#x4E0A;&#x76AE;&#x5F0F;&#x306E; dlx2a&#x3001;dlx2b&#x3001;fgf3&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073; fgf4 &#x306F;&#x540C;&#x69D8;&#x3060;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x5F8C;&#x8005;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3001;&#x6B6F;&#x79D1;&#x306E;&#x4E0A;&#x76AE; FGF &#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x306E;&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x5C0F;&#x8AAC;&#x306E;&#x8A3C;&#x62E0;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x305F;&#x3060;&#x3057;&#x3001;&#x30ED;&#x30FC;&#x30AB;&#x30E9;&#x30A4;&#x30BA;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x5F0F; pitx2 &#x306E;&#x30D6;&#x30ED;&#x30C3;&#x30AF;&#x306B;&#x5931;&#x6557; SU5402 &#x306E;&#x6B6F;&#x958B;&#x59CB;&#x306E;&#x6700;&#x3082;&#x65E9;&#x3044;&#x624B;&#x9806; FGF &#x72EC;&#x7ACB;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x8ABF;&#x67FB;&#x7279;&#x5B9A;&#x306E; FGF &#x30EA;&#x30AC;&#x30F3;&#x30C9; morpholino &#x30A2;&#x30F3;&#x30C1;&#x30BB;&#x30F3;&#x30B9; &#x30AA;&#x30EA;&#x30B4;&#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30AA;&#x30C1;&#x30C9;&#x3068;&#x306E; fgf8 &#x963B;&#x5BB3;&#x306E;&#x307F;&#x3001;&#x5FAE;&#x5999;&#x306A;&#x30C0;&#x30A6;&#x30F3; - &#x6B6F;&#x79D1; dlx2b &#x767A;&#x73FE;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x6B6F;&#x306E;&#x5F62;&#x614B;&#x306B;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306A;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x306A;&#x304C;&#x3089;&#x6B21;&#x306E; fgf4 &#x306E;&#x30CE;&#x30C3;&#x30AF;&#x30C0;&#x30A6;&#x30F3;&#x306F;&#x8EFD;&#x5EA6;&#x6B6F;&#x5F62;&#x72B6;&#x8868;&#x73FE;&#x306E;&#x307F;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3002;&#x5197;&#x9577;&#x306E; FGF &#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x6B6F;&#x79D1;&#x4E0A;&#x76AE;&#x3092;&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#x3057;&#x3001;&#x4E00;&#x7DD2;&#x306B;&#x6B6F;&#x306E;&#x5F62;&#x614B;&#x5F62;&#x6210;&#x306E;&#x5FC5;&#x8981;&#x304C;&#x793A;&#x5506;&#x3055;&#x308C;&#x305F;.&#x4ECA;&#x5F8C;&#x306E;&#x4F5C;&#x696D;&#x306F;&#x3001;&#x7279;&#x306B;&#x5F7C;&#x3089;&#x306E;&#x8D77;&#x6E90;&#x3068;&#x9593;&#x5145;&#x7E54;&#x3092;&#x901A;&#x3058;&#x3066;&#x3067;&#x884C;&#x52D5;&#x3059;&#x308B;&#x304B;&#x3069;&#x3046;&#x304B;&#x306B;&#x95A2;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x4FE1;&#x53F7;&#x306E;&#x6027;&#x8CEA;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3059;&#x308B;&#x5FC5;&#x8981;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

Fgf &#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x306F;&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#x306E;&#x6B6F;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x304C;&#x5FC5;&#x8981;&#x3067;&#x3059;&#x3002;

&#xC6B0;&#xB9AC; &#xC12C;&#xC720; &#xC544; &#xC138;&#xD3EC; &#xC131;&#xC7A5; &#xC778;&#xC790; (FGF) &#xAC1C;&#xBC1C; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; zebrafish &#xC778; &#xB450; &#xCE58;&#xC5F4;&#xC758; &#xC7A0;&#xBCF5; &#xC18C;&#xC124; &#xC5ED;&#xD560; &#xBAA9;&#xD45C;&#xC640; Fgfs&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xCE58;&#xC544; &#xAC1C;&#xBC1C; phylogenetic &#xBC0F; &#xC9C0;&#xD615; &#xCE58;&#xC544; &#xBC1C;&#xB2EC; &#xD1B5;&#xB85C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB2E4;&#xC591;&#xC131;&#xC5D0; &#xC2E0;&#xD638;&#xB97C; &#xC870;&#xC0AC; &#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xBC1C;&#xACAC; &#xBA87; zebrafish &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xCE58;&#xC544; &#xAD00;&#xB828; &#xD45C;&#xD604; &#xC0C1;&#xD53C;&#xC640; &#xC911;&#xAC04; &#xC5FD; &#xB9C8;&#xCEE4;&#xB97C; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558; &#xC5EC; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; orthologs&#xC640; &#xBE44;&#xC2B7;&#xD55C;. &#xB610;&#xD55C;, &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBC1C;&#xD604; zebrafish &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xC774;&#xBE68; &#xC0AC;&#xC774;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD070; &#xCC28;&#xC774;&#xAC00; zebrafish &#xCE58;&#xC544; &#xC138;&#xADE0;&#xC758; fgf8 &#xBC0F; pax9 &#xC2DD;&#xC758; &#xBA85;&#xBC31;&#xD55C; &#xBD80;&#xC871;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xD45C;&#xC2DC; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. 32 H su5402&#xC640; FGF &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xC800;&#xD574; &#xCC28;&#xB2E8; &#xCE58;&#xACFC; &#xC0C1;&#xD53C; morphogenesis&#xC640; &#xCE58;&#xC544; &#xAC15;&#xD654;. &#xC778; &#xB450; &#xC0C1;&#xD53C; &#xC815;&#xC0C1;&#xC801;&#xC778; pitx2 &#xC2DD;&#xC73C;&#xB85C; &#xD310;&#xB2E8;&#xC73C;&#xB85C; &#xC628;&#xC804; &#xD558; &#xAC8C; &#xB0A8;&#xC544;, &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xBFD0;&#xB9CC; &#xC544;&#xB2C8;&#xB77C; &#xC0C1;&#xD53C; &#xD45C;&#xD604;&#xC758; dlx2a, dlx2b, fgf3, lhx6 &#xBC0F; lhx7 &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC608;&#xC0C1; &#xB300;&#xB85C; &#xD0C8;&#xB77D;&#xC758; &#xC5FD; &#xC2DD; &#xD588;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xBC0F; fgf4 &#xBFD0;&#xB9CC; &#xC544;&#xB2C8;&#xB77C; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC774; &#xD6C4;&#xC790;&#xC758; &#xACB0;&#xACFC; &#xCE58;&#xACFC; &#xC0C1;&#xD53C; FGF &#xC2DC;&#xADF8;&#xB110;&#xB9C1;&#xC758; &#xBAA9;&#xD45C;&#xB294; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xC99D;&#xAC70;&#xB97C; &#xC81C;&#xACF5; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, su5402&#xC758; pitx2&#xC758; &#xC9C0;&#xC5ED;&#xD654; &#xC2DD; &#xCC28;&#xB2E8; &#xC2E4;&#xD328; &#xCE58;&#xC544; &#xAC1C;&#xC2DC;&#xC758; &#xCD08;&#xAE30; &#xB2E8;&#xACC4;&#xB294; FGF &#xB3C5;&#xB9BD;&#xC801;&#xC778; &#xB098;&#xC654;&#xB2E4;. Morpholino &#xC13C;&#xC2A4; oligonucleotides&#xC640; &#xD2B9;&#xC815; FGF ligands&#xC758; &#xC870;&#xC0AC;&#xB294; &#xAC00;&#xBCBC;&#xC6B4; &#xCE58;&#xC544; &#xBAA8;&#xC591; &#xD615;&#xC744; fgf8 &#xC5B5;&#xC81C;&#xB9CC; &#xBBF8;&#xBB18;&#xD55C; &#xB2E4;&#xC6B4;-&#xCE58;&#xC544; &#xD615;&#xD0DC;&#xD559;&#xC5D0; &#xBA85;&#xBC31;&#xD55C; &#xC601;&#xD5A5;&#xC73C;&#xB85C; &#xCE58;&#xACFC; dlx2b &#xC2DD;&#xC758; &#xADDC;&#xC815;&#xC744; &#xACF5;&#xAC1C; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; fgf4 &#xCD5C;&#xC800;&#xC758; &#xB2E4;&#xC74C; &#xBC1D;&#xD614;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xACB0;&#xACFC; &#xC911;&#xBCF5; FGF &#xC2E0;&#xD638; &#xB300;&#xC0C1;&#xC73C;&#xB85C; &#xCE58;&#xACFC; &#xC0C1;&#xD53C;&#xC640; &#xD568;&#xAED8; &#xCE58;&#xACFC; morphogenesis &#xD544;&#xC694; &#xD558;&#xB294; &#xAC83;&#xC774; &#xC88B;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xCD94;&#xAC00; &#xC791;&#xC5C5;&#xC758; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xAE30;&#xC6D0;&#xACFC; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC774; &#xC5EC;&#xBD80;&#xB97C; mesenchyme&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; &#xD589;&#xB3D9;&#xC5D0; &#xB300;&#xD574; &#xD2B9;&#xD788; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC2E0;&#xD638; &#xD2B9;&#xC131;&#xC744; &#xBA85;&#xB8CC; &#xD558; &#xAC8C; &#xD558;&#xB294; &#xB370; &#xD544;&#xC694;&#xD55C; &#xAC83;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Fgf &#xC2E0;&#xD638; zebrafish &#xCE58;&#xC544; &#xAC1C;&#xBC1C;&#xC744; &#xC704;&#xD55C; &#xD544;&#xC694; &#xC774;&#xB2E4;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Hemos investigado factor de crecimiento fibrobl&aacute;stico (FGF) se&ntilde;alizaci&oacute;n durante el desarrollo de la dentici&oacute;n far&iacute;ngea del pez cebra con el objetivo de descubrir nuevos roles para FGFs en desarrollo de diente, as&iacute; como diversidad filogen&eacute;tica y topogr&aacute;fica en el camino del desarrollo del diente. Se encontr&oacute; que la expresi&oacute;n relacionada con diente de varios genes de pez cebra es similar a la de sus ort&oacute;logos de rat&oacute;n, incluyendo marcadores epiteliales y mesenquimales. Adem&aacute;s, la aparente falta de expresi&oacute;n fgf8 y pax9 los g&eacute;rmenes del diente de pez cebra indican diferencias significativas en la expresi&oacute;n g&eacute;nica entre los dientes de rat&oacute;n y pez cebra. Inhibici&oacute;n de receptores FGF con SU5402 en 32 h hab&iacute;a bloqueado dental epitelial mineralizaci&oacute;n morfog&eacute;nesis y diente. Mientras que el epitelio far&iacute;ngeo permanec&iacute;a intacto, seg&uacute;n lo juzgado por expresi&oacute;n pitx2 normal, no s&oacute;lo era la expresi&oacute;n mesenquimal de lhx6 y lhx7 eliminado como era de esperar de los estudios con ratones, pero la expresi&oacute;n epitelial de dlx2a, dlx2b, fgf3, y fgf4 fue as&iacute;. Este &uacute;ltimo resultado proporciona nueva evidencia que el epitelio dental es un objetivo de FGF Se&ntilde;alizaci&oacute;n. Sin embargo, la falta de SU5402 para bloquear la expresi&oacute;n localizada de pitx2 sugiere que los primeros pasos de la iniciaci&oacute;n del diente son independientes de la FGF. Las investigaciones de ligandos espec&iacute;ficos de FGF con oligonucle&oacute;tidos antisentido Morfolino revelaron s&oacute;lo un fenotipo forma diente suave tras ca&iacute;da en fgf4, mientras que la inhibici&oacute;n fgf8 revel&oacute; s&oacute;lo una sutil abajo-regulaci&oacute;n de la expresi&oacute;n de dlx2b dental con ning&uacute;n efecto aparente en la morfolog&iacute;a del diente. Nuestros resultados sugieren se&ntilde;ales redundantes de FGF apuntar el epitelio dental y juntos se requieren para la morfog&eacute;nesis dental. Trabajo adicional ser&aacute; necesario para aclarar la naturaleza de estas se&ntilde;ales, particularmente con respecto a sus or&iacute;genes y si act&uacute;an a trav&eacute;s del mes&eacute;nquima.

Se&ntilde;alizaci&oacute;n de FGF es necesaria para el desarrollo de diente de pez cebra.

&#x4E00;&#x79CD;&#x8BC6;&#x522B; N-&#x4E59;&#x57FA;-N-&#x4E9A;&#x785D;&#x8132; (ENU) &#x9AD8;&#x541E;&#x5410;&#x91CF;&#x65B9;&#x6CD5;-&#x8BF1;&#x5BFC;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C;&#x70B9;&#x7A81;&#x53D8;&#x3002;

A high-throughput method for identifying N-ethyl-N-nitrosourea (ENU)-induced point mutations in zebrafish.

Une m&#xE9;thode &#xE0; haut d&#xE9;bit pour l&#x26;#39;identification des N-&#xE9;thyl-N-nitroso-ur&#xE9;e (ENU) mutations ponctuelles induites chez le poisson z&#xE8;bre

Ein Hochdurchsatz-Verfahren zur Identifizierung von N-Ethyl-N-nitrosoharnstoff (ENU)-induzierte Punktmutationen im Zebrafisch.

Un metodo di alto-rendimento per l&#39;identificazione di N-etil-N-nitrosourea (ENU)-indotto mutazioni puntiformi in zebrafish.

&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#x3067;&#x306F;&#x3001;N-&#x30A8;&#x30C1;&#x30EB;-N-&#x30CB;&#x30C8;&#x30ED;&#x30BD;&#x30A6;&#x30EC;&#x30A2;&#xFF08;ENU&#xFF09;&#x8A98;&#x767A;&#x70B9;&#x7A81;&#x7136;&#x5909;&#x7570;&#x3092;&#x8B58;&#x5225;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x30CF;&#x30A4;&#x30B9;&#x30EB;&#x30FC;&#x30D7;&#x30C3;&#x30C8;&#x6CD5;

N-&#xC5D0;&#xD2F8;-N-nitrosourea (ENU)&#xB97C; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xD558;&#xB294; &#xB192;&#xC740; &#xCC98;&#xB9AC;&#xB7C9; &#xBC29;&#xBC95;-zebrafish&#xC758; &#xC810; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xC720;&#xBC1C; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Un m&#xE9;todo de alto rendimiento para la identificaci&#xF3;n de la N-etil-N-nitrosourea (ENU) mutaciones puntuales inducidas en el pez cebra

&#x751F;&#x6B96;&#x7684;&#x53D1;&#x5C55;&#x8981;&#x6C42;&#x7684;&#x89C4;&#x8303;&#x548C;&#x751F;&#x5B58;&#x7684;&#x539F;&#x59CB;&#x751F;&#x6B96;&#x7EC6;&#x80DE; (&#x751F;&#x6B96;&#x7EC6;&#x80DE;) &#x5728;&#x80DA;&#x80CE;&#x6216;&#x914D;&#x5B50;&#x5728;&#x6210;&#x4EBA;&#x7684;&#x751F;&#x6B96;&#x5BFF;&#x547D;&#x671F;&#x95F4;&#x751F;&#x4EA7;&#x7EF4;&#x4FEE;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x8FDB;&#x7A0B;&#x4F3C;&#x4E4E;&#x662F;&#x5411;&#x6240;&#x6709;&#x7684; Metazoans&#xFF0C;&#x57FA;&#x672C;&#x548C;&#x751F;&#x6B96;&#x7EC6;&#x80DE;&#x53D1;&#x80B2;&#x53CA;&#x529F;&#x80FD;&#x8C03;&#x8282;&#x7684;&#x9057;&#x4F20;&#x9014;&#x5F84;&#x7684;&#x67D0;&#x4E9B;&#x7EC4;&#x4EF6;&#x4ECE;&#x8FDB;&#x5316;&#x7684;&#x89D2;&#x5EA6;&#xFF0C;&#x5747;&#x53D7;&#x5230;&#x4FDD;&#x80B2;&#x3002;&#x5728;&#x810A;&#x690E;&#x52A8;&#x7269;&#x548C;&#x65E0;&#x810A;&#x690E;&#x52A8;&#x7269;&#xFF0C;&#x7EB3;&#x7C73;&#x76F8;&#x5173;&#x57FA;&#x56E0;&#xFF0C;&#x7F16;&#x7801; RNA &#x7ED3;&#x5408;&#x950C;&#x6307;&#x86CB;&#x767D;&#xFF0C;&#x8868;&#x660E;&#x53EF;&#x53D1;&#x6325;&#x91CD;&#x8981;&#x548C;&#x5B88;&#x6052;&#x7684;&#x89D2;&#x8272;&#x671F;&#x95F4;&#x80DA;&#x82BD;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5F62;&#x6210;&#x3002;&#x5728;&#x679C;&#x8747;&#xFF0C;&#x6BCD;&#x4F53;&#x63D0;&#x4F9B;&#x7684;&#x7EB3;&#x7C73;&#x662F;&#x5FC5;&#x9700;&#x5728;&#x80DA;&#x80CE;&#x751F;&#x6B96;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x751F;&#x5B58;&#xFF0C;&#x800C;&#x5728;&#x6210;&#x4EBA;&#xFF0C;&#x7EB3;&#x7C73;&#x662F;&#x9700;&#x8981;&#x7EE7;&#x7EED;&#x751F;&#x4EA7;&#x7684;&#x5375;&#x6BCD;&#x7EC6;&#x80DE;&#x901A;&#x8FC7;&#x7EF4;&#x62A4;&#x751F;&#x6B96;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x81EA;&#x6211;&#x66F4;&#x65B0;&#x3002;&#x5728;&#x5C0F;&#x9F20;&#x548C;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C;&#xFF0C;&#x7EB3;&#x7C73; orthologs &#x6240;&#x9700;&#x7684; PGC &#x751F;&#x5B58;&#x671F;&#x95F4;&#x80DA;&#x80CE;&#x53D1;&#x751F;&#xFF0C;&#x4F46;&#x5728;&#x6210;&#x4EBA;&#x4E2D;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x6CA1;&#x6709;&#x5F97;&#x5230;&#x63A2;&#x8BA8;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5C55;&#x793A;&#x7684; nanos1 &#x5728;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C;&#x65E9;&#x671F;&#x9636;&#x6BB5;&#x5375;&#x6BCD;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5728;&#x6210;&#x5E74;&#x5973;&#x6027;&#x751F;&#x6B96;&#x7684;&#x8868;&#x793A;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x786E;&#x5B9A;&#x4E86;&#x4E00;&#x79CD;&#x7A81;&#x53D8;&#x5728; nanos1 &#x4E2D;&#x7684;&#x4F7F;&#x7528;&#x53CD;&#x5411;&#x9057;&#x4F20;&#x5B66;&#x65B9;&#x6CD5;&#x548C;&#x663E;&#x793A;&#x5E74;&#x8F7B;&#x5973;&#x6027;&#x7EB3;&#x7C73;&#x7A81;&#x53D8;&#x4F53;&#x5305;&#x542B;&#x5375;&#x6BCD;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x4F46;&#x672A;&#x80FD;&#x4FDD;&#x6301;&#x5375;&#x6BCD;&#x7EC6;&#x80DE;&#x751F;&#x4EA7;&#x3002;&#x6B64;&#x9010;&#x6B65;&#x4E27;&#x5931;&#x751F;&#x80B2;&#x80FD;&#x529B;&#x5408;&#x5B50;&#x5973;&#x6027;&#x4E0D;&#x662F;&#x5F3A;&#x8C03;&#x53CD;&#x5411;&#x9057;&#x4F20;&#x5B66;&#x65B9;&#x6CD5;&#x7684;&#x4EF7;&#x503C;&#xFF0C;&#x5728;&#x6B64;&#x6A21;&#x578B;&#x7CFB;&#x7EDF;&#xFF0C;&#x5DF2;&#x5728;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C;&#x4E2D;&#x524D;&#x9762;&#x63CF;&#x8FF0;&#x7684;&#x8868;&#x578B;&#x3002;

nanos1 &#x88AB;&#x9700;&#x4FDD;&#x6301;&#x5728;&#x6210;&#x5E74;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C;&#x5375;&#x6BCD;&#x7EC6;&#x80DE;&#x751F;&#x4EA7;&#x3002;

Development of the germline requires the specification and survival of primordial germ cells (PGCs) in the embryo as well as the maintenance of gamete production during the reproductive life of the adult. These processes appear to be fundamental to all Metazoans, and some components of the genetic pathway regulating germ cell development and function are evolutionarily conserved. In both vertebrates and invertebrates, nanos-related genes, which encode RNA-binding zinc finger proteins, have been shown to play essential and conserved roles during germ cell formation. In Drosophila, maternally supplied nanos is required for survival of PGCs in the embryo, while in adults, nanos is required for the continued production of oocytes by maintaining germline stem cells self-renewal. In mice and zebrafish, nanos orthologs are required for PGC survival during embryogenesis, but a role in adults has not been explored. We show here that nanos1 in zebrafish is expressed in early stage oocytes in the adult female germline. We have identified a mutation in nanos1 using a reverse genetics method and show that young female nanos mutants contain oocytes, but fail to maintain oocyte production. This progressive loss of fertility in homozygous females is not a phenotype that has been described previously in the zebrafish and underlines the value of a reverse genetics approach in this model system.

nanos1 is required to maintain oocyte production in adult zebrafish.

D&#xE9;veloppement de la lign&#xE9;e germinale exige la sp&#xE9;cification et la survie des cellules germinales primordiales (PGC) dans l&#x26;#39;embryon ainsi que le maintien de la production de gam&#xE8;tes au cours de la vie reproductive de la population adulte. Ces processus semblent &#xEA;tre fondamentales pour tous les m&#xE9;tazoaires, et certains composants de la voie de la r&#xE9;gulation du d&#xE9;veloppement g&#xE9;n&#xE9;tique des cellules germinales et la fonction sont &#xE9;volutivement conserv&#xE9;e. Dans les deux vert&#xE9;br&#xE9;s et les invert&#xE9;br&#xE9;s, les nanos-connexes g&#xE8;nes, qui codent l&#x26;#39;ARN-prot&#xE9;ines de liaison &#xE0; doigts de zinc, ont &#xE9;t&#xE9; montr&#xE9; &#xE0; jouer des r&#xF4;les essentiels et conserv&#xE9;e lors de la formation des cellules germinales. Chez la drosophile, la m&#xE8;re nanos fournies est n&#xE9;cessaire &#xE0; la survie des PGC chez l&#x26;#39;embryon, tandis que chez les adultes, nanos est n&#xE9;cessaire pour la production continue d&#x26;#39;ovocytes par le maintien des cellules souches germinales d&#x26;#39;auto-renouvellement. Chez la souris et poisson-z&#xE8;bre, nanos orthologues sont n&#xE9;cessaires pour la survie PGC cours de l&#x26;#39;embryogen&#xE8;se, mais un r&#xF4;le chez les adultes n&#x26;#39;a pas &#xE9;t&#xE9; explor&#xE9;e. Nous montrons ici que chez le poisson z&#xE8;bre est nanos1 exprim&#xE9; dans des ovocytes &#xE0; un stade pr&#xE9;coce dans la lign&#xE9;e germinale femelle adulte. Nous avons identifi&#xE9; une mutation dans nanos1 en utilisant une m&#xE9;thode de g&#xE9;n&#xE9;tique inverse et de montrer que les jeunes femmes mutants nanos contiennent les ovocytes, mais ne parviennent pas &#xE0; maintenir la production d&#x26;#39;ovocytes. Cette perte progressive de la fertilit&#xE9; chez les femelles homozygotes n&#x26;#39;est pas un ph&#xE9;notype qui a &#xE9;t&#xE9; d&#xE9;crit pr&#xE9;c&#xE9;demment dans le poisson-z&#xE8;bre et souligne la valeur d&#x26;#39;une approche de g&#xE9;n&#xE9;tique inverse dans ce syst&#xE8;me mod&#xE8;le.

Nanos1 est n&#xE9;cessaire pour maintenir la production d&#x26;#39;ovocytes chez le poisson z&#xE8;bre adulte

Entwicklung der Keimbahn erfordert die Spezifikation und &Uuml;berleben der primordialen Keimzellen (PGCs) im Embryo sowie Gamet Produktion w&auml;hrend der reproduktiven Lebens des Erwachsenen. Diese Prozesse scheinen f&uuml;r alle Metazoen von grundlegender Bedeutung zu sein, und einige Komponenten des genetischen Signalweges Regulierung Keimzelle Entwicklung und Funktion sind evolution&auml;r konserviert. In Wirbeltiere und Wirbellose Nanos-bezogenen Gene, die Zink-Finger RNA-bindende Proteine kodieren, sind wesentliche spielen gezeigt worden und konservierte Rollen w&auml;hrend der Keim Zellen-Bildung. Drosophila, Maternal mitgelieferten Nanos ist erforderlich f&uuml;r das &Uuml;berleben der PGCs im Embryo, w&auml;hrend bei Erwachsenen, Nanos ist erforderlich f&uuml;r die kontinuierliche Produktion von Eizellen durch die Aufrechterhaltung der Keimbahn Stammzellen Selbsterneuerung. In M&auml;usen und Zebrafisch Nanos Orthologen sind erforderlich f&uuml;r PGC &uuml;berleben w&auml;hrend der Embryogenese, aber eine Rolle bei Erwachsenen ist nicht untersucht worden. Wir zeigen hier, dass nanos1 im Zebrafisch dr&uuml;ckt sich im fr&uuml;hen Stadium Eizellen in die Erwachsenen weiblichen Keimbahn. Wir haben eine Mutation im nanos1 mit einer Reverser-Methode ermittelt und zeigen, dass junge weibliche Nanos Mutanten Eizellen enthalten, aber nicht in die Eizelle Produktion beizubehalten. Dieser progressive Verlust der Fruchtbarkeit bei homozygoten Frauen ist keinem Ph&auml;notyp, der wurde vorher bei den Zebrafish beschrieben und unterstreicht den Wert ein Reverser-Ansatz in diesem Modellsystem.

NANOS1 wird ben&ouml;tigt, um die Eizelle Produktion in Erwachsenen Zebrafisch beizubehalten.

Lo sviluppo della linea germinale richiede la specificazione e la sopravvivenza delle cellule germinali primordiali (PGC) nell&#39;embrione, nonch&eacute; il mantenimento della produzione di gameti durante la vita riproduttiva dell&#39;adulto. Questi processi sembrano essere fondamentali per tutti i metazoi, e alcuni componenti del percorso genetico che regolano la funzione e lo sviluppo delle cellule germinali sono evolutivamente conservati. In entrambi i vertebrati e invertebrati, nanos relativi geni, che codificano proteine RNA-leganti zinco dito, hanno dimostrati di giocare essenziale e ruoli conservati durante il germe cellula formazione. In drosofila, maternamente fornito nanos &egrave; necessaria per la sopravvivenza di PGC nell&#39;embrione, mentre negli adulti, nanos &egrave; necessaria per la prosecuzione della produzione di ovociti mantenendo germline cellule staminali self-renewal. Nei topi e zebrafish, nanos orthologs sono necessari per la sopravvivenza di PGC durante l&#39;embriogenesi, ma non &egrave; stato esplorato un ruolo negli adulti. Mostriamo qui che nanos1 nello zebrafish &egrave; espressa in ovociti di fase precoce nella linea germinale femminile adulta. Ci hanno identificato una mutazione in nanos1 utilizzando un metodo di genetica inversa e mostrano che la giovane femmina nanos mutanti contengono gli ovociti, ma non riescono a mantenere la produzione di ovociti. Questa perdita progressiva della fertilit&agrave; nelle femmine omozigoti non &egrave; un fenotipo che &egrave; stata descritta in precedenza in the zebrafish e sottolinea il valore di un approccio di genetica inversa in questo sistema di modello.

NANOS1 &egrave; necessaria per mantenere la produzione degli ovociti in zebrafish adulto.

&#x751F;&#x6B96;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x306F;&#x3001;&#x4ED5;&#x69D8;&#x3068;&#x751F;&#x5B58;&#x59CB;&#x539F;&#x751F;&#x6B96;&#x7D30;&#x80DE;&#xFF08;&#x59CB;&#x539F;&#x751F;&#x6B96;&#xFF09;&#x306E;&#x80DA;&#x3060;&#x3051;&#x3067;&#x306A;&#x304F;&#x3001;&#x6210;&#x4F53;&#x306E;&#x751F;&#x6B96;&#x751F;&#x6D3B;&#x4E2D;&#x306E;&#x914D;&#x5076;&#x5B50;&#x751F;&#x7523;&#x306E;&#x7DAD;&#x6301;&#x3092;&#x5FC5;&#x8981;&#x3068;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x306F;&#x3001;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306E;&#x5F8C;&#x751F;&#x52D5;&#x7269;&#x306E;&#x57FA;&#x672C;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x8868;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x3001;&#x907A;&#x4F1D;&#x7684;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x5236;&#x5FA1;&#x751F;&#x6B96;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x767A;&#x9054;&#x3068;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306E;&#x4E00;&#x90E8;&#x306E;&#x30B3;&#x30F3;&#x30DD;&#x30FC;&#x30CD;&#x30F3;&#x30C8;&#x306F;&#x3001;&#x9032;&#x5316;&#x7684;&#x306B;&#x4FDD;&#x5B58;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002; RNA&#x7D50;&#x5408;&#x30B8;&#x30F3;&#x30AF;&#x30D5;&#x30A3;&#x30F3;&#x30AC;&#x30FC;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3092;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C9;&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x810A;&#x690E;&#x52D5;&#x7269;&#x3068;&#x7121;&#x810A;&#x690E;&#x52D5;&#x7269;&#x3001;nanos&#x5024;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x3059;&#x308B;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x751F;&#x6B96;&#x7D30;&#x80DE;&#x5F62;&#x6210;&#x6642;&#x306B;&#x4E0D;&#x53EF;&#x6B20;&#x3068;&#x4FDD;&#x5B58;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x679C;&#x305F;&#x3059;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x6210;&#x4EBA;&#x3067;&#x306F;&#x3001;nanos&#x5024;&#x306F;&#x3001;&#x751F;&#x6B96;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x81EA;&#x5DF1;&#x8907;&#x88FD;&#x3092;&#x7DAD;&#x6301;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x5375;&#x6BCD;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x7D99;&#x7D9A;&#x7684;&#x306A;&#x751F;&#x7523;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x3068;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x4E00;&#x65B9;&#x3001;&#x30B7;&#x30E7;&#x30A6;&#x30B8;&#x30E7;&#x30A6;&#x30D0;&#x30A8;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x6BCD;&#x6027;&#x4F9B;&#x7D66;nanos&#x5024;&#x306F;&#x3001;&#x80DA;&#x306E;&#x59CB;&#x539F;&#x751F;&#x6B96;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x751F;&#x5B58;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x3068;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x3084;&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#x3067;&#x306F;&#x3001;nanos&#x5024;&#x30AA;&#x30EB;&#x30BD;&#x30ED;&#x30B0;&#x306F;&#x3001;&#x80DA;&#x767A;&#x751F;&#x6642;&#x306E;PGC&#x306E;&#x751F;&#x5B58;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x3068;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x304C;&#x3001;&#x5927;&#x4EBA;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x304C;&#x691C;&#x8A0E;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#x306E;nanos1&#x304C;&#x6210;&#x4EBA;&#x5973;&#x6027;&#x751F;&#x6B96;&#x306E;&#x521D;&#x671F;&#x6BB5;&#x968E;&#x306E;&#x5375;&#x6BCD;&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;&#x767A;&#x73FE;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3053;&#x3053;&#x306B;&#x8868;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x79C1;&#x305F;&#x3061;&#x306F;&#x3001;&#x30EA;&#x30D0;&#x30FC;&#x30B9;&#x30B8;&#x30A7;&#x30CD;&#x30C6;&#x30A3;&#x30AF;&#x30B9;&#x6CD5;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x3066;nanos1&#x306E;&#x5909;&#x7570;&#x3092;&#x540C;&#x5B9A;&#x3057;&#x3001;&#x82E5;&#x3044;&#x5973;&#x6027;&#x8DB3;&#x3057;&#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x306F;&#x5375;&#x6BCD;&#x7D30;&#x80DE;&#x304C;&#x542B;&#x307E;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x304C;&#x3001;&#x5375;&#x6BCD;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x751F;&#x7523;&#x3092;&#x7DAD;&#x6301;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5931;&#x6557;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30DB;&#x30E2;&#x63A5;&#x5408;&#x96CC;&#x306E;&#x51FA;&#x751F;&#x7387;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x9032;&#x6B69;&#x7684;&#x306A;&#x640D;&#x5931;&#x306F;&#x3001;&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x4EE5;&#x524D;&#x306B;&#x8A18;&#x8F09;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x8868;&#x73FE;&#x578B;&#x3067;&#x306F;&#x306A;&#x304F;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x306E;&#x9006;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B66;&#x7684;&#x30A2;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30C1;&#x306E;&#x4FA1;&#x5024;&#x3092;&#x5F37;&#x8ABF;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

Nanos1&#x306F;&#x6210;&#x4EBA;&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#x306E;&#x5375;&#x6BCD;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x751F;&#x7523;&#x3092;&#x7DAD;&#x6301;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x3067;&#x3059;

&#xBC88;&#xC9F8;&#xC758; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xD544;&#xC694; &#xC0AC;&#xC591;&#xACFC; &#xC6D0;&#xC2DC; &#xC0DD;&#xC2DD; &#xC138;&#xD3EC; (PGCs)&#xB294; &#xBC30;&#xC544;&#xC758; &#xC0DD;&#xC874; &#xBFD0;&#xB9CC; &#xC544;&#xB2C8;&#xB77C; &#xC131;&#xC778;&#xC758; &#xC0DD;&#xC2DD; &#xC0DD;&#xD65C; &#xB3D9;&#xC548; &#xC0DD;&#xC2DD; &#xCCB4; &#xC0DD;&#xC0B0;&#xC758; &#xC720;&#xC9C0; &#xBCF4;&#xC218;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xD504;&#xB85C;&#xC138;&#xC2A4; &#xADFC;&#xBCF8;&#xC801;&#xC778; &#xBAA8;&#xB4E0; Metazoans&#xC744; &#xD45C;&#xC2DC; &#xD558; &#xACE0; &#xC138;&#xADE0; &#xC804;&#xC9C0; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xBC0F; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC744; &#xC870;&#xC808; &#xD558;&#xB294; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xD1B5;&#xB85C;&#xC758; &#xC77C;&#xBD80; &#xAD6C;&#xC131; &#xC694;&#xC18C;&#xB294; &#xC9C4;&#xD654; &#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xBCF4;&#xC874;. &#xCC99;&#xCD94; &#xB3D9;&#xBB3C; &#xBC0F; &#xBB34;&#xCC99; &#xCD94; &#xB3D9;&#xBB3C;&#xC5D0;&#xC11C; RNA &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xC544;&#xC5F0; &#xC190;&#xAC00;&#xB77D; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC744; &#xBD80;&#xD638;&#xD654; &#xD558;&#xB294; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xAC00; &#xB098;&#xB178; &#xAD00;&#xB828; &#xD544;&#xC218; &#xD50C;&#xB808;&#xC774; &#xD45C;&#xC2DC; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xBC0F; &#xBCF4;&#xC874;&#xB41C; &#xC5ED;&#xD560; &#xC911; &#xC138;&#xADE0; &#xC138;&#xD3EC; &#xD615;&#xC131;. &#xCD08;&#xD30C;&#xB9AC;, &#xC784;&#xC0B0;&#xBD80; &#xC81C;&#xACF5; &#xB41C; &#xB098;&#xB178;&#xB294; &#xD544;&#xC694;&#xD55C; PGCs &#xBC30;&#xC544;&#xC758; &#xC0DD;&#xC874;&#xC744; &#xC704;&#xD55C; &#xC131;&#xC778;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB098;&#xB178;&#xB294; oocytes&#xC758; &#xC9C0;&#xC18D;&#xC801;&#xC778;&#xB41C; &#xC0DD;&#xC0B0;&#xC744; &#xC704;&#xD574; &#xD544;&#xC694;&#xD55C; &#xBC88;&#xC9F8; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC; &#xC790;&#xAE30; &#xAC31;&#xC2E0;&#xC744; &#xC720;&#xC9C0; &#xD558; &#xC5EC;. &#xC950;&#xC640; zebrafish &#xB098;&#xB178; orthologs embryogenesis, &#xC911; PGC &#xC0DD;&#xC874;&#xC744; &#xC704;&#xD574; &#xD544;&#xC694; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xC131;&#xC778; &#xC5ED;&#xD560; &#xD0D0;&#xD5D8; &#xB418;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC740;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xBCF4;&#xC5EC; zebrafish&#xC758; &#xADF8; nanos1 &#xC131;&#xC778; &#xC5EC;&#xC131; &#xBC88;&#xC9F8;&#xC5D0; &#xCD08;&#xAE30; &#xB2E8;&#xACC4; oocytes&#xB97C; &#xB2E8;&#xC704;&#xB85C; &#xC5EC;&#xAE30;. &#xC6B0;&#xB9AC; &#xC5ED;&#xBC29;&#xD5A5; &#xC720;&#xC804;&#xD559; &#xBA54;&#xC11C;&#xB4DC;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; nanos1&#xC5D0; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xD655;&#xC778; &#xD558; &#xACE0; &#xC80A;&#xC740; &#xC5EC;&#xC131; &#xB098;&#xB178; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; oocytes&#xB97C; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; oocyte &#xC0DD;&#xC0B0;&#xC744; &#xC720;&#xC9C0; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xC2E4;&#xD328;&#xB97C; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. Homozygous &#xC5EC;&#xC131;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB2E4; &#xC0B0;&#xC758; &#xC9C4;&#xBCF4;&#xC801;&#xC778; &#xC190;&#xC2E4; &#xB41C; zebrafish&#xC5D0;&#xC11C; &#xC774;&#xC804;&#xC5D0; &#xC124;&#xBA85; &#xD588;&#xB2E4; &#xACE0;&#xC774; &#xBAA8;&#xB378; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC5ED;&#xBC29;&#xD5A5; &#xC720;&#xC804;&#xD559; &#xC811;&#xADFC;&#xBC95;&#xC758; &#xAC12;&#xC744; &#xBC11;&#xC904; &#xD615;&#xC774; &#xC544;&#xB2C8;&#xB2E4;.

nanos1 &#xC131;&#xC778; zebrafish oocyte &#xC0DD;&#xC0B0;&#xC744; &#xC720;&#xC9C0; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xD544;&#xC694; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Desarrollo de la l&#xED;nea germinal requiere la especificaci&#xF3;n y la supervivencia de las c&#xE9;lulas germinales primordiales (PGCs) en el embri&#xF3;n, as&#xED; como el mantenimiento de la producci&#xF3;n de gametos durante la vida reproductiva del adulto. Estos procesos parecen ser fundamental para todos los metazoos, y algunos componentes de la v&#xED;a de la regulaci&#xF3;n del desarrollo gen&#xE9;tico de las c&#xE9;lulas germinales y la funci&#xF3;n se conservan evolutivamente. En ambos vertebrados e invertebrados, los genes relacionados con el iPod nano, que codifican ARN-prote&#xED;nas de uni&#xF3;n a los dedos de zinc, se ha demostrado que desempe&#xF1;an funciones esenciales y conservado durante la formaci&#xF3;n de c&#xE9;lulas germinales. En Drosophila, nanos la madre suministra es necesaria para la supervivencia de PGCs en el embri&#xF3;n, mientras que en los adultos, los nanos se requiere para la producci&#xF3;n continua de ovocitos mediante el mantenimiento de las c&#xE9;lulas madre de l&#xED;nea germinal de auto-renovaci&#xF3;n. En los ratones y peces cebra, nanos orthologs son necesarios para la supervivencia PGC durante la embriog&#xE9;nesis, pero un papel importante en los adultos no ha sido explorado. Mostramos aqu&#xED; que nanos1 en el pez cebra se expresa en los ovocitos de la fase inicial en la l&#xED;nea germinal femenina adulta. Hemos identificado una mutaci&#xF3;n en nanos1 utilizando un m&#xE9;todo de inversi&#xF3;n gen&#xE9;tica y muestran que los j&#xF3;venes mutantes nanos femeninas contienen los ovocitos, pero no para mantener la producci&#xF3;n de ovocitos. Esta p&#xE9;rdida progresiva de la fertilidad en las hembras homocigotos no es un fenotipo que se ha descrito previamente en el pez cebra y subraya el valor de un enfoque de la gen&#xE9;tica inversa en este sistema modelo.

Nanos1 se requiere para mantener la producci&#xF3;n de ovocitos en el pez cebra adultos

Piwi &#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x5728;&#x751F;&#x6B96;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x6307;&#x5B9A;&#x963F;&#x8033;&#x6208;&#x82F1;&#x96C4;&#x5BB6;&#x5EAD;&#x7684;&#x810A;&#x690E;&#x52A8;&#x7269;&#xFF0C;&#x7279;&#x522B;&#x8868;&#x793A;&#x7279;&#x5B9A;&#x4E8E;&#x52A8;&#x7269;&#x7684;&#x5B50;&#x7C7B;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x8868;&#x73B0;&#x51FA;&#x7684;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C; Piwi (Ziwi) &#x8868;&#x793A;&#xFF0C;&#x5728;&#x7537;&#x6027;&#x548C;&#x5973;&#x6027;&#x7684;&#x6027;&#x817A;&#xFF0C;&#x662F;&#x4E00;&#x4E2A;&#x79F0;&#x4E3A; nuage &#x7684;&#x80DA;&#x7CFB;&#x6307;&#x5B9A;&#x7ED3;&#x6784;&#x7684;&#x4E00;&#x4E2A;&#x7EC4;&#x6210;&#x90E8;&#x5206;&#x3002;Ziwi &#x529F;&#x80FD;&#x7684;&#x4E27;&#x5931;&#x5BFC;&#x81F4;&#x671F;&#x95F4;&#x5E7C;&#x866B;&#x53D1;&#x80B2;&#x7684;&#x80DA;&#x7EC6;&#x80DE;&#x51CB;&#x4EA1;&#x7684;&#x9010;&#x6B65;&#x4E27;&#x5931;&#x3002;&#x51CF;&#x5C11;&#x4E86; Ziwi &#x51FD;&#x6570;&#x7684;&#x52A8;&#x7269;&#xFF0C;&#x5728;&#x751F;&#x6B96;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4FDD;&#x6301;&#xFF0C;&#x4F46;&#x5728;&#x6210;&#x4EBA;&#x4E2D;&#x663E;&#x793A;&#x5F02;&#x5E38;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x51CB;&#x4EA1;&#x6C34;&#x5E73;&#x3002;&#x5728;&#x54FA;&#x4E73;&#x52A8;&#x7269;&#xFF0C;Piwi &#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x4E0E;&#x5927;&#x7EA6;&#x4E3A;&#x671F; 29 &#x4E2A;&#x6838;&#x82F7;&#x9178;&#x3001; &#x777E;&#x4E38;&#x7279;&#x5B9A; RNA &#x5206;&#x5B50;&#x79F0;&#x4E3A; piRNAs &#x76F8;&#x5173;&#x8054;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x6211;&#x4EEC;&#x663E;&#x793A;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C; piRNAs &#x76EE;&#x524D;&#x5728;&#x5375;&#x5DE2;&#x548C;&#x777E;&#x4E38;&#x3002;&#x8BB8;&#x591A;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x90FD;&#x6E90;&#x81EA;&#x8F6C;&#x5EA7;&#x5B50;&#xFF0C;&#x7275;&#x8FDE; piRNAs &#x4F5C;&#x7528;&#x5728;&#x810A;&#x690E;&#x52A8;&#x7269;&#x4E2D;&#x7684;&#x91CD;&#x590D;&#x5143;&#x7D20;&#x7684;&#x6C89;&#x9ED8;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x663E;&#x793A; piRNAs &#x662F;&#x5207;&#x5757;&#x673A;&#x72EC;&#x7ACB;&#x548C;&#x5176; 3&#39; &#x7AEF;&#x53EF;&#x80FD;&#x643A;&#x5E26; 2&#39;O-&#x7532;&#x57FA;&#x4FEE;&#x9970;&#x3002;

Piwi &#x548C; piRNAs &#x5728;&#x751F;&#x6B96;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7EF4;&#x4FEE;&#x548C;&#x8F6C;&#x5EA7;&#x5B50;&#x6C89;&#x9ED8;&#x5728;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C;&#x4E2D;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;

Piwi proteins specify an animal-specific subclass of the Argonaute family that, in vertebrates, is specifically expressed in germ cells. We demonstrate that zebrafish Piwi (Ziwi) is expressed in both the male and the female gonad and is a component of a germline-specifying structure called nuage. Loss of Ziwi function results in a progressive loss of germ cells due to apoptosis during larval development. In animals that have reduced Ziwi function, germ cells are maintained but display abnormal levels of apoptosis in adults. In mammals, Piwi proteins associate with approximately 29-nucleotide-long, testis-specific RNA molecules called piRNAs. Here we show that zebrafish piRNAs are present in both ovary and testis. Many of these are derived from transposons, implicating a role for piRNAs in the silencing of repetitive elements in vertebrates. Furthermore, we show that piRNAs are Dicer independent and that their 3' end likely carries a 2'O-Methyl modification.

A role for Piwi and piRNAs in germ cell maintenance and transposon silencing in Zebrafish.

Prot&#xE9;ines Piwi sp&#xE9;cifier une sous-classe des animaux sp&#xE9;cifiques de la famille Argonaute que, chez les vert&#xE9;br&#xE9;s, est exprim&#xE9; sp&#xE9;cifiquement dans les cellules germinales. Nous d&#xE9;montrons que le poisson-z&#xE8;bre Piwi (Ziwi) est exprim&#xE9;e en le m&#xE2;le et la gonade femelle et est une composante d&#x26;#39;une structure de la lign&#xE9;e germinale sp&#xE9;cifiant appel&#xE9; nuage. Perte de r&#xE9;sultats de la fonction Ziwi par une perte progressive des cellules germinales en raison de l&#x26;#39;apoptose au cours du d&#xE9;veloppement larvaire. Chez les animaux qui ont r&#xE9;duit la fonction Ziwi, les cellules germinales sont maintenus, mais affiche des niveaux anormaux de l&#x26;#39;apoptose chez les adultes. Chez les mammif&#xE8;res, les prot&#xE9;ines Piwi associer &#xE0; environ 29 nucl&#xE9;otides-longues, des mol&#xE9;cules d&#x26;#39;ARN des testicules sp&#xE9;cifiques appel&#xE9;es piRNAs. Ici, nous montrons que piRNAs poisson z&#xE8;bre sont pr&#xE9;sents dans les ovaires et les testicules. Beaucoup d&#x26;#39;entre eux proviennent de transposons, impliquant un r&#xF4;le &#xE0; jouer dans la r&#xE9;duction au silence piRNAs d&#x26;#39;&#xE9;l&#xE9;ments r&#xE9;p&#xE9;titifs chez les vert&#xE9;br&#xE9;s. En outre, nous montrons que piRNAs sont Dicer ind&#xE9;pendant et que leur extr&#xE9;mit&#xE9; 3 &#x26;#39;porte vraisemblablement une modification 2&#x26;#39;O-m&#xE9;thyl.

Un r&#xF4;le pour Piwi et PiRNAs en maintenance des cellules germinales et Silencing transposon chez le poisson z&#xE8;bre

Piwi Proteine angeben eine Tier-spezifische Unterklasse der Argonaut-Familie, die speziell bei Wirbeltieren, ausgedr&uuml;ckt wird in Keimzellen. Wir zeigen, dass Zebrafisch Piwi (Ziwi) wird in der m&auml;nnlichen und der weiblichen Gonad ausgedr&uuml;ckt und ist eine Komponente von einer Angabe von Keimbahn-Struktur namens Nuage. Ziwi Funktionsverlust f&uuml;hrt zu einem progressiven Verlust der Keimzellen durch Apoptose w&auml;hrend der larvalen Entwicklung. Bei Tieren, die Ziwi-Funktion reduziert haben, Keimzellen sind gepflegt aber anomaler Apoptose bei Erwachsenen angezeigt. Bei S&auml;ugetieren ordnen Piwi Proteine etwa 29-Nukleotid-langen, Hoden-spezifische RNA-Molek&uuml;le namens PiRNAs. Hier zeigen wir, dass Zebrafisch PiRNAs im Eierstock und Hoden vorhanden sind. Viele davon stammen aus Transposonen, zielbewu&szlig;t eine Rolle f&uuml;r PiRNAs in der Unterdr&uuml;ckung der sich wiederholenden Elemente bei Wirbeltieren. Dar&uuml;ber hinaus zeigen wir, dass PiRNAs Dicer unabh&auml;ngig sind und ihre 3&#39; Ende wahrscheinlich eine 2&#39;O-Methyl-&Auml;nderung f&uuml;hrt.

Eine Rolle f&uuml;r Piwi und PiRNAs in Keimzellen Wartung und Transposon Unterdr&uuml;ckender im Zebrafisch.

Le proteine Piwi specificano una sottoclasse di animale specifico della famiglia Argonaute che, nei vertebrati, in particolare &egrave; espresso nelle cellule germinali. Dimostriamo che zebrafish Piwi (Ziwi) &egrave; espresso sia il maschio che le gonadi femminile ed &egrave; un componente di una struttura specifica di germline chiamata nuage. Perdita della funzione Ziwi si traduce in una progressiva perdita di cellule germinali a causa apoptosi durante lo sviluppo larvale. Negli animali che hanno ridotto la funzione Ziwi, le cellule germinali sono mantenute ma visualizzare livelli anormali di apoptosi negli adulti. Nei mammiferi, le proteine Piwi associano a circa 29-nucleotide-lungo, testicolo specifiche molecole di RNA chiamati piRNAs. Qui vi mostriamo che zebrafish piRNAs sono presenti sia dell&#39;ovaio e del testicolo. Molti di questi sono derivati da trasposoni, implicando un ruolo per piRNAs nel silenziamento degli elementi ripetuti nei vertebrati. Inoltre, mostriamo che piRNAs sono Dicer indipendente e che loro estremit&agrave; 3&#39; probabile che trasporta una modifica 2&#39;O-metile.

Un ruolo per Piwi e piRNAs nel mantenimento delle cellule germinali e transposon silenziamento nello Zebrafish.

Piwi&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306F;&#x3001;&#x810A;&#x690E;&#x52D5;&#x7269;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x7279;&#x306B;&#x751F;&#x6B96;&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;&#x767A;&#x73FE;&#x3055;&#x308C;&#x3001;&#x30A2;&#x30EB;&#x30B4;&#x30CE;&#x30FC;&#x30C8;&#x306E;&#x5BB6;&#x65CF;&#x306E;&#x52D5;&#x7269;&#x56FA;&#x6709;&#x306E;&#x30B5;&#x30D6;&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9;&#x3092;&#x6307;&#x5B9A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;PIWI&#xFF08;Ziwi&#xFF09;&#x306F;&#x7537;&#x6027;&#x3068;&#x5973;&#x6027;&#x306E;&#x751F;&#x6B96;&#x817A;&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x3067;&#x767A;&#x73FE;&#x3057;&#x3001;nuage&#x3068;&#x547C;&#x3070;&#x308C;&#x308B;&#x751F;&#x6B96;&#x7D30;&#x80DE;&#x7CFB;&#x3092;&#x6307;&#x5B9A;&#x3059;&#x308B;&#x69CB;&#x9020;&#x4F53;&#x306E;&#x6210;&#x5206;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x767A;&#x80B2;&#x4E2D;&#x306E;&#x30A2;&#x30DD;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x751F;&#x6B96;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x9032;&#x884C;&#x6027;&#x306E;&#x55AA;&#x5931;&#x3067;Ziwi&#x95A2;&#x6570;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306E;&#x640D;&#x5931;&#x3002; Ziwi&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x304C;&#x4F4E;&#x4E0B;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x52D5;&#x7269;&#x3067;&#x3001;&#x751F;&#x6B96;&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x7DAD;&#x6301;&#x3059;&#x308B;&#x304C;&#x3001;&#x6210;&#x4EBA;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30A2;&#x30DD;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x306E;&#x7570;&#x5E38;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3092;&#x8868;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x54FA;&#x4E73;&#x985E;&#x3067;&#x306F;&#x3001;Piwi&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306F;piRNA&#x306F;&#x3068;&#x547C;&#x3070;&#x308C;&#x308B;&#x7D04;29&#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30AA;&#x30C1;&#x30C9;&#x9577;&#x3001;&#x7CBE;&#x5DE3;&#x7279;&#x7570;&#x7684;&#x306A;RNA&#x5206;&#x5B50;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;piRNA&#x306F;&#x3001;&#x5375;&#x5DE3;&#x3068;&#x7CBE;&#x5DE3;&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x306B;&#x5B58;&#x5728;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x591A;&#x304F;&#x306F;&#x810A;&#x690E;&#x52D5;&#x7269;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x53CD;&#x5FA9;&#x914D;&#x5217;&#x306E;&#x30B5;&#x30A4;&#x30EC;&#x30F3;&#x30B7;&#x30F3;&#x30B0;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;piRNA&#x306F;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x304C;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3057;&#x3001;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30DD;&#x30BE;&#x30F3;&#x304B;&#x3089;&#x6D3E;&#x751F;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;piRNA&#x306F;&#x30C0;&#x30A4;&#x30B5;&#x30FC;&#x306F;&#x72EC;&#x7ACB;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x305D;&#x306E;3 &#x26;#39;&#x672B;&#x7AEF;&#x306F;&#x304A;&#x305D;&#x3089;&#x304F;2&#x26;#39;O-&#x30E1;&#x30C1;&#x30EB;&#x4FEE;&#x98FE;&#x3092;&#x904B;&#x3076;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;

&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x751F;&#x6B96;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x7DAD;&#x6301;&#x3068;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30DD;&#x30BE;&#x30F3;&#x306E;&#x30B5;&#x30A4;&#x30EC;&#x30F3;&#x30B7;&#x30F3;&#x30B0;PIWI&#x3068;piRNA&#x306F;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;

Piwi &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC138;&#xADE0; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xCC99;&#xCD94; &#xB3D9;&#xBB3C;&#xC5D0; &#xBA85;&#xD655; &#xD558; &#xAC8C; &#xD45C;&#xC2DC; &#xB418;&#xB294; Argonaute &#xAC00;&#xC871;&#xC758; &#xB3D9;&#xBB3C; &#xAD00;&#xB828; &#xD558;&#xC704; &#xD074;&#xB798;&#xC2A4;&#xB97C; &#xC9C0;&#xC815; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC; &#xADF8; zebrafish Piwi (Ziwi) &#xB458; &#xB2E4; &#xB0A8;&#xC131;&#xACFC; &#xC5EC;&#xC131; gonad &#xB2E8;&#xC704;&#xB85C; nuage &#xB77C;&#xB294; &#xBC88;&#xC9F8; &#xC9C0;&#xC815; &#xAD6C;&#xC870;&#xC758; &#xAD6C;&#xC131; &#xC694;&#xC18C; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. Ziwi &#xAE30;&#xB2A5;&#xC758; &#xC190;&#xC2E4; &#xB54C;&#xBB38;&#xC5D0; apoptosis &#xC138;&#xADE0; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC9C4;&#xBCF4;&#xC801;&#xC778; &#xC190;&#xC2E4; &#xC560;&#xBC8C;&#xB808; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xBC1C;&#xC0DD;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB3D9;&#xBB3C; Ziwi &#xAE30;&#xB2A5; &#xAC10;&#xC18C;, &#xC138;&#xADE0; &#xC138;&#xD3EC; &#xC720;&#xC9C0; &#xB418;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xC131;&#xC778;&#xC5D0; &#xC788;&#xB294; apoptosis&#xC758; &#xBE44;&#xC815;&#xC0C1;&#xC801;&#xC778; &#xC218;&#xC900;&#xC744; &#xD45C;&#xC2DC; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD3EC;&#xC720;&#xB958;, Piwi &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; piRNAs &#xC774;&#xB77C;&#xACE0; &#xD558; &#xC5EC; &#xC57D; 29 &#xB274;&#xD074;&#xB808;&#xC624;&#xD2F0;&#xB4DC; &#xAE34;, &#xACE0;&#xD658; &#xD2B9;&#xC815; RNA &#xBD84;&#xC790;&#xC640; &#xC5F0;&#xACB0; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; zebrafish piRNAs &#xB09C;&#xC18C;&#xC640; &#xACE0;&#xD658;&#xC5D0; &#xC788;&#xB294;&#xC9C0; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB4E4; &#xC911; &#xB9CE;&#xC740; &#xCC99;&#xCD94; &#xB3D9;&#xBB3C;&#xC5D0; &#xBC18;&#xBCF5; &#xC694;&#xC18C;&#xB97C; &#xC785;&#xC744;&#xC5D0; Pirnas&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC5ED;&#xD560; &#xC5F0;&#xB8E8; transposons&#xC5D0;&#xC11C; &#xD30C;&#xC0DD; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; Pirnas&#xB294; Dicer &#xB3C5;&#xB9BD; &#xBC0F; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; 3&#39; &#xB05D; &#xAC00;&#xB2A5;&#xC131;&#xC774; 2&#39;O-&#xBA54; &#xD2F8; &#xC218;&#xC815; &#xC6B4;&#xBC18;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Piwi &#xBC0F; &#xC138;&#xADE0; &#xC138;&#xD3EC; &#xC720;&#xC9C0; &#xAD00;&#xB9AC;&#xC5D0;&#xC11C; piRNAs &#xBC0F; transposon Zebrafish&#xC758; &#xCE68;&#xBB35;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC5ED;&#xD560;.

Prote&#xED;nas Piwi especificar una subclase animal espec&#xED;fico de la familia Argonaute que, en los vertebrados, se expresa espec&#xED;ficamente en las c&#xE9;lulas germinales. Se demuestra que el pez cebra Piwi (Ziwi) se expresa tanto en el macho y la g&#xF3;nada femenina y es un componente de una estructura de l&#xED;nea germinal de la especificaci&#xF3;n llamada nuage. La p&#xE9;rdida de la funci&#xF3;n Ziwi en una p&#xE9;rdida progresiva de las c&#xE9;lulas germinales, debido a la apoptosis durante el desarrollo larvario. En los animales que han reducido la funci&#xF3;n Ziwi, las c&#xE9;lulas germinales se mantienen, pero mostrar niveles anormales de la apoptosis en los adultos. En los mam&#xED;feros, las prote&#xED;nas Piwi asociarse con aproximadamente 29 nucle&#xF3;tidos de longitud, test&#xED;culos espec&#xED;ficos de mol&#xE9;culas de ARN llamadas piRNAs. Aqu&#xED; nos muestran que piRNAs pez cebra est&#xE1;n presentes en ambos ovarios y los test&#xED;culos. Muchos de &#xE9;stos se derivan de los transposones, lo que implica un papel para piRNAs en el silenciamiento de elementos repetitivos en los vertebrados. Por otra parte, nos muestran que son piRNAs Dicer independiente y que su extremo 3 &#x26;#39;es probable lleva una modificaci&#xF3;n 2O-metilo.

El papel de la Piwi y piRNAs en el mantenimiento de c&#xE9;lulas germinales y el silenciamiento de transposones en el pez cebra

&#x6D4B;&#x5B9A;&#x4E2D;&#x8868;&#x8FBE;&#x5E8F;&#x5217;&#x6807;&#x7B7E;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C; FLP/&#x9996;&#x6B21;&#x767B;&#x8BB0;&#x7A0E;&#x91CD;&#x7EC4;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x7684;&#x6548;&#x7387;&#xFF0C;&#x5236;&#x5B9A;&#x4E86;&#x808C;&#x8089;&#x7279;&#x5F02;&#x6027;&#x542F;&#x52A8;&#x5B50;&#x9A71;&#x52A8;&#x7EFF;&#x8272;&#x8367;&#x5149;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x4E24;&#x4FA7;&#x662F;&#x7531;&#x9996;&#x6B21;&#x767B;&#x8BB0;&#x7A0E;&#x7684;&#x7AD9;&#x70B9;&#x7EC4;&#x6210;&#x7684;&#x6784;&#x9020;&#x3002;FLPe &#x4E0A;&#x9650;&#x7684; RNA &#x5FAE;&#x91CF;&#x6CE8;&#x5C04;&#x5230;&#x8F6C;&#x57FA;&#x56E0;&#x5355;&#x7EC6;&#x80DE;&#x9636;&#x6BB5;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C;&#x80DA;&#x80CE;&#x83B7;&#x5F97;&#x901A;&#x8FC7;&#x8DE8;&#x8D8A; hemizygous &#x8F6C;&#x57FA;&#x56E0;&#x96C4;&#x6027;&#x4E0E;&#x96CC;&#x6027;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x3002;48 H &#x540E;&#x53D7;&#x7CBE; &#xFF08;hpf&#xFF09;&#xFF0C;&#x663E;&#x793A;&#x4EE5;&#x4E0B; FLPe RNA &#x6CE8;&#x5C04;&#x7684;&#x7EFF;&#x8272;&#x8367;&#x5149;&#x7684;&#x80DA;&#x80CE;&#x6240;&#x5360;&#x7684;&#x6BD4;&#x4F8B;&#x662F;&#x663E;&#x8457;&#x8F83;&#x4F4E; &#xFF08;7.7%&#xFF1B;P &lt; 0.001&#xFF09; &#x6BD4;&#x9884;&#x8BA1;&#x4ECE;&#x8DE8;&#x5728;&#x6CA1;&#x6709;&#x91CD;&#x7EC4;&#x9176; (50%)&#x3002;&#x4FDD;&#x7559;&#x8367;&#x5149;&#x7684;&#x80DA;&#x80CE;&#x663E;&#x793A;&#x6807;&#x8BB0;&#x7684;&#x9576;&#x5D4C;&#x3002;&#x7ECF; PCR &#x5206;&#x6790;&#x9A8C;&#x8BC1;&#x975E;&#x8367;&#x5149;&#x3001; &#x8F6C;&#x57FA;&#x56E0;&#x80DA;&#x80CE;&#x79BB;&#x4F53;&#x8F6C;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EE7;&#x627F;&#x548C; FLPe &#x4ECB;&#x5BFC;&#x7684;&#x91CD;&#x7EC4; DNA &#x6D4B;&#x5E8F;&#x8BC1;&#x5B9E;&#x3002;&#x4ECE;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x4E2D;&#x8BC1;&#x5B9E;&#x8F6C;&#x57FA;&#x56E0;&#x7537;&#x6027;&#x7684;&#x7CBE;&#x5B50;&#x88AB;&#x7528;&#x6765;&#x65BD;&#x80A5;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x7684;&#x9E21;&#x86CB;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x786E;&#x5B9A;&#x662F;&#x5426;&#x53D1;&#x751F;&#x4E86;&#x8F6C;&#x57FA;&#x56E0;&#x751F;&#x6B96;&#x5207;&#x9664;&#x3002;FLPe &#x5FAE;&#x91CF;&#x6CE8;&#x5C04;&#x7537;&#x6027;&#x6240;&#x50AC;&#x751F;&#x7684;&#x79BB;&#x5408;&#x5668;&#x6240;&#x8F7D; 0 4%&#x8367;&#x5149;&#x80DA;&#x80CE;&#x3002;&#x662F;&#x8868;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x7684;&#x8F6C;&#x57FA;&#x56E0;&#x96C4;&#x6027;&#x5236;&#x4F5C;&#x6CA1;&#x6709;&#x8367;&#x5149;&#x7684;&#x540E;&#x4EE3;&#xFF0C;&#x4ECE;&#x5176;&#x751F;&#x6B96;&#x8868;&#x660E;&#x8F6C;&#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x5B8C;&#x6574;&#x5207;&#x9664;&#x3002;&#x4FDD;&#x7559;&#x4E00;&#x4E9B;&#x8367;&#x5149;&#x808C;&#x8089;&#x8868;&#x8FBE;&#x7684; FLPe &#x5FAE;&#x91CF;&#x6CE8;&#x5C04;&#x7537;&#x6027;&#x4EA7;&#x751F;&#x8367;&#x5149;&#x7684;&#x540E;&#x4EE3;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x8868;&#x660E;&#x9A6C;&#x8D5B;&#x514B;&#x7537;&#x6027;&#x751F;&#x6B96;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5E76;&#x4E0D;&#x662F;&#x6240;&#x6709;&#x7ECF;&#x5386;&#x4E86; FLPe &#x4ECB;&#x5BFC;&#x7684;&#x8F6C;&#x57FA;&#x56E0;&#x5207;&#x9664;&#x4E00;&#x5C0F;&#x90E8;&#x5206;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x7ED3;&#x679C;&#x663E;&#x793A; FLPe &#x7684;&#x6D3E;&#x751F;&#x81EA;&#x917F;&#x9152;&#x9175;&#x6BCD;&#xFF0C;&#x662F;&#x7EF4;&#x6301;&#x5728; 28.5 &deg; C.&#x7684;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C;&#x9AD8;&#x6548; cre

&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C;&#x80DA;&#x80CE;&#x4E2D;&#x7684; FLPe &#x51FD;&#x6570;&#x3002;

To assay the efficiency of the FLP/FRT site-specific recombination system in Danio rerio, a construct consisting of a muscle-specific promoter driving EGFP flanked by FRT sites was developed. FLPe capped RNA was microinjected into transgenic single cell stage zebrafish embryos obtained by crossing hemizygous transgenic males with wild-type females. By 48 h post fertilization (hpf), the proportion of embryos displaying green fluorescence following FLPe RNA microinjection was significantly lower (7.7%; P < 0.001) than would be expected from a cross in the absence of the recombinase (50%). Embryos that retained fluorescence displayed marked mosaicism. Inheritance of the excised transgene in non-fluorescent, transgenic embryos was verified by PCR analysis and FLPe-mediated recombination was confirmed by DNA sequencing. Sperm derived from confirmed transgenic males in these experiments was used to fertilize wild-type eggs to determine whether germline excision of the transgene had occurred. Clutches sired by FLPe-microinjected males contained 0-4% fluorescent embryos. Transgenic males that were phenotypically wild-type produced no fluorescent progeny, demonstrating complete excision of the transgene from their germline. FLPe microinjected males that retained some fluorescent muscle expression produced a small proportion of fluorescent offspring, suggesting that in mosaic males not all germline cells had undergone FLPe-mediated transgene excision. Our results show that FLPe, which is derived from Saccharomyces cerevisiae, is an efficient recombinase in zebrafish maintained at 28.5Â°C.

FLPe functions in zebrafish embryos.

Pour analyser l&#39;efficacit&eacute; du syst&egrave;me recombinaison site-sp&eacute;cifique FLP/FRT dans Danio rerio, une construction compos&eacute; d&#39;un promoteur sp&eacute;cifiques du muscle EGFP flanqu&eacute; de sites FRT de conduite a &eacute;t&eacute; d&eacute;velopp&eacute;e. FLPe RNA plafonn&eacute; &eacute;tait micro dans des embryons de poisson-z&egrave;bre stade unicellulaire transg&eacute;nique obtenus par croisement h&eacute;mizygote transg&eacute;niques m&acirc;les avec des femelles de type sauvage. Apr&egrave;s la f&eacute;condation (hpf) de l&#39;h 48, la proportion d&#39;embryons affichant une fluorescence verte apr&egrave;s microinjection FLPe ARN &eacute;tait significativement plus faible (7,7 % ; P &lt; 0,001) que pr&eacute;vu d&#39;un croisement en l&#39;absence de la recombinase (50 %). Les embryons qui ont conserv&eacute; la fluorescence affichent mosa&iuml;cisme marqu&eacute;. H&eacute;ritage du transg&egrave;ne excis&eacute; chez les embryons non fluorescent, transg&eacute;niques a &eacute;t&eacute; v&eacute;rifi&eacute;e par l&#39;analyse PCR et recombinaison m&eacute;di&eacute;e par FLPe a &eacute;t&eacute; confirm&eacute;e par le s&eacute;quen&ccedil;age de l&#39;ADN. Sperme provenant des m&acirc;les transg&eacute;niques confirm&eacute;s dans ces exp&eacute;riences a &eacute;t&eacute; utilis&eacute; pour f&eacute;conder les oeufs sauvage pour d&eacute;terminer si l&#39;excision dans les cellules germinales du transg&egrave;ne avait eu lieu. Embrayages engendr&eacute;s par les m&acirc;les FLPe-micro contient 0-4 % des embryons fluorescent. M&acirc;les transg&eacute;niques qui &eacute;taient ph&eacute;notypiquement sauvage ne produit aucune descendance fluorescent, d&eacute;montrant une excision compl&egrave;te du transg&egrave;ne dans leur lign&eacute;e germinale. FLPe micro m&acirc;les qui a conserv&eacute; quelques expression fluorescent muscle produisent une faible proportion de la prog&eacute;niture fluorescent, ce qui sugg&egrave;re que chez les m&acirc;les mosa&iuml;ques pas toutes les cellules de la lign&eacute;e germinale avaient subi transg&egrave;ne FLPe m&eacute;di&eacute;e par l&#39;excision. Nos r&eacute;sultats montrent que le FLPe, qui est d&eacute;riv&eacute; de Saccharomyces cerevisiae, est une recombinase efficace chez le poisson z&egrave;bre, maintenue &agrave; 28,5 &deg; C.

FLPe fonctions dans des embryons de poisson-z&egrave;bre.

Um die Effizienz des Systems FLP/FRT ortsspezifische Rekombination in Danio Rerio Brutversuch, entwickelte sich ein Konstrukt bestehend aus Muskel-spezifische F&ouml;rderer fahren EGFP flankiert von FRT Websites. FLPe aufgestellter RNA in transgenen Einzelzelle B&uuml;hne Zebrafish Embryos gewonnen durch die Kreuzung von transgenen Hemizygous M&auml;nner mit Wildtyp Weibchen microinjected war. Von 48 h Post Befruchtung (hpf) betrug der Anteil der Embryonen, die angezeigte gr&uuml;ne Fluoreszenz nach FLPe RNA Mikroinjektion deutlich niedriger (7,7 %; P &lt; 0.001) als ein Kreuz in Ermangelung der Recombinase (50 %) erwarten w&uuml;rde. Embryonen, die Fluoreszenz beibehalten angezeigt markierte Mosaik. Vererbung von den excised Transgene in nicht-fluoreszierender, transgene Embryonen wurde durch PCR-Analyse &uuml;berpr&uuml;ft und FLPe-vermittelten Rekombination von DNA-Sequenzierung best&auml;tigt wurde. Sperma von best&auml;tigten transgenen M&auml;nnchen in diesen Experimenten abgeleitet wurde zur d&uuml;ngen Wildtyp Eier um festzustellen, ob die Keimbahn Exzision von der Transgene eingetreten war. Kupplungen zeugte von FLPe microinjected M&auml;nner enthalten 0-4 % fluoreszierenden Embryonen. Transgene M&auml;nner, die ph&auml;notypisch Wildtyp waren produziert keine fluoreszenten nachkommen, komplette Exzision der die Transgene aus ihrer Germline demonstrieren. Microinjected FLPe-M&auml;nner, die einige fluoreszierende Muskel-Ausdruck beibehalten produzierte einen kleinen Anteil der fluoreszierenden nachkommen, was darauf hindeutet, dass im Mosaik M&auml;nner nicht alle Germline Zellen FLPe-vermittelte Transgene Exzision durchgemacht hatte. Unsere Ergebnisse zeigen, dass FLPe, die von Saccharomyces Cerevisiae abgeleitet ist, ein effizientes Recombinase im Zebrafisch gepflegt bei 28,5 &deg; C.

FLPe-Funktionen in den Zebrafish Embryos.

Per testare l&#39;efficienza del sistema FLP/FRT ricombinazione site-specific di Danio rerio, &egrave; stato sviluppato un costrutto costituito da un muscolo-specifico promotore guida EGFP fiancheggiato dai siti FRT. FLPe capped RNA era microinjected in embrioni di zebrafish fase transgenici singola cella ottenuti incrociando transgenici maschi emizigoti con selvaggio-tipo femmine. Dalla fecondazione post di 48 h (hpf), la percentuale di embrioni visualizzazione fluorescenza verde seguito microinjection FLPe RNA era significativamente pi&ugrave; bassa (7,7%; P &lt; 0.001) che ci si aspetterebbe da una croce in assenza di ricombinasi (50%). Gli embrioni che mantenne fluorescenza visualizzato contrassegnato mosaicismo. Eredit&agrave; del transgene escissa in embrioni non fluorescenti, transgenici &egrave; stata verificata da analisi di PCR e ricombinazione FLPe-mediata &egrave; stata confermata dal sequenziamento del DNA. Sperma derivato da confermato transgenici maschi in questi esperimenti &egrave; stato utilizzato per fertilizzare le uova wild-type per determinare se l&#39;escissione germinale del transgene era accaduto. Frizioni generati da maschi FLPe-microinjected contenevano 0-4% di embrioni fluorescenti. Transgenici maschi che sono stati fenotipicamente selvaggio-tipo non prodotto alcuna progenie fluorescente, dimostrando l&#39;escissione completa del transgene dalla loro linea germinale. FLPe microinjected maschi che mantenne qualche espressione muscolare fluorescente prodotta una piccola percentuale di prole fluorescente, suggerendo che nei maschi di mosaico non tutte le cellule germinali avevano subito l&#39;escissione transgene FLPe-mediata. I nostri risultati mostrano che il FLPe, che &egrave; derivato da Saccharomyces cerevisiae, &egrave; un&#39;efficiente recombinase in zebrafish mantenuto a 28,5 &deg; C.

FLPe funzioni negli embrioni di zebrafish.

&#x30C0;&#x30CB;&#x30AA;&#x5F62;&#x614B;&#x5B66;&#x306E; FLP/FRT &#x90E8;&#x4F4D;&#x7279;&#x7570;&#x7684;&#x7D44;&#x63DB;&#x3048;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x306E;&#x52B9;&#x7387;&#x3092;&#x5206;&#x6790;&#x3059;&#x308B;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x904B;&#x8EE2;&#x3057;&#x3066; frt &#x793E;&#x306E;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x3067;&#x4E26;&#x3076; EGFP &#x7B4B;&#x56FA;&#x6709;&#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x304B;&#x3089;&#x6210;&#x308B;&#x30B3;&#x30F3;&#x30B9;&#x30C8;&#x30E9;&#x30AF;&#x30C8;&#x304C;&#x958B;&#x767A;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;FLPe &#x30AD;&#x30E3;&#x30C3;&#x30D7; RNA hemizygous &#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30B8;&#x30A7;&#x30CB;&#x30C3;&#x30AF;&#x7537;&#x6027;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x306E;&#x30E1;&#x30B9;&#x3068;&#x306E;&#x4EA4;&#x5DEE;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5F97;&#x3089;&#x308C;&#x305F;&#x5F62;&#x8CEA;&#x8EE2;&#x63DB;&#x306E; 1 &#x3064;&#x306E;&#x30BB;&#x30EB;&#x6BB5;&#x968E;&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#x80DA;&#x3078; microinjected &#x3060;&#x3063;&#x305F;&#x3002;48 H &#x306E;&#x30DD;&#x30B9;&#x30C8;&#x306E;&#x53D7;&#x7CBE; (hpf) &#x306E;&#x3067;&#x3001;&#x6B21;&#x306E; FLPe RNA &#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x30A4;&#x30F3;&#x30B8;&#x30A7;&#x30AF;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x7DD1;&#x8272;&#x86CD;&#x5149;&#x8868;&#x793A;&#x3059;&#x308B;&#x80DA;&#x306E;&#x5272;&#x5408; &#xFF08;7.7 &#xFF05;; &#x6709;&#x610F;&#x306B;&#x4F4E;&#x304F;&#x306A;&#x3063;&#x305F;P &lt; 0.001) recombinase &#xFF08;50 &#xFF05;&#xFF09; &#x306E;&#x4E0D;&#x5728;&#x3067;&#x30AF;&#x30ED;&#x30B9;&#x304B;&#x3089;&#x4E88;&#x60F3;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x3088;&#x308A;&#x3082;&#x3002;&#x86CD;&#x5149;&#x3092;&#x4FDD;&#x6301;&#x80DA;&#x30DE;&#x30FC;&#x30AF; &#x30E2;&#x30B6;&#x30A4;&#x30AF;&#x3092;&#x8868;&#x793A;&#x3002;&#x975E;&#x86CD;&#x5149;&#x6027;&#x3001;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30B8;&#x30A7;&#x30CB;&#x30C3;&#x30AF;&#x80DA;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x6458;&#x51FA; transgene &#x306E;&#x7D99;&#x627F; PCR &#x89E3;&#x6790;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x691C;&#x8A3C;&#x3055;&#x308C;&#x3001;FLPe &#x3092;&#x4ECB;&#x3059;&#x308B;&#x7D44;&#x307F;&#x63DB;&#x3048; DNA &#x30B7;&#x30FC;&#x30B1;&#x30F3;&#x30B9;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x78BA;&#x8A8D;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x5B9F;&#x9A13;&#x3067;&#x78BA;&#x8A8D;&#x3057;&#x305F;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30B8;&#x30A7;&#x30CB;&#x30C3;&#x30AF;&#x7537;&#x6027;&#x304B;&#x3089;&#x6D3E;&#x751F;&#x3057;&#x305F;&#x7CBE;&#x5B50;&#x3001;&#x5C0E;&#x5165;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x751F;&#x6B96;&#x7CFB;&#x5217;&#x5207;&#x9664;&#x304C;&#x767A;&#x751F;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x304B;&#x3069;&#x3046;&#x304B;&#x3092;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x3059;&#x308B;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x306E;&#x5375;&#x3092;&#x53D7;&#x7CBE;&#x3055;&#x305B;&#x308B;&#x306B;&#x4F7F;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;FLPe microinjected &#x306E;&#x7537;&#x6027;&#x304C;&#x8840;&#x7D71;&#x30AF;&#x30E9;&#x30C3;&#x30C1;&#x542B;&#x307E;&#x308C;&#x308B; 0 4% &#x86CD;&#x5149;&#x80DA;&#x3002;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x5F62;&#x8CEA;&#x306E;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x7D44;&#x63DB;&#x3048;&#x306E;&#x7537;&#x6027;&#x86CD;&#x5149;&#x306E;&#x5B50;&#x5B6B;&#x3001;&#x5F7C;&#x3089;&#x306E;&#x751F;&#x6B96;&#x7D30;&#x80DE;&#x304B;&#x3089;&#x3001;transgene &#x306E;&#x5B8C;&#x5168;&#x5207;&#x9664;&#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x751F;&#x7523;&#x3002;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x86CD;&#x5149;&#x7B4B;&#x8089;&#x8868;&#x73FE;&#x3092;&#x4FDD;&#x6301; microinjected FLPe &#x7537;&#x6027;&#x306F;&#x30E2;&#x30B6;&#x30A4;&#x30AF;&#x306E;&#x7537;&#x6027;&#x306E;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306E;&#x751F;&#x6B96;&#x7D30;&#x80DE;&#x7CFB;&#x7D30;&#x80DE; FLPe &#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x305F; transgene &#x5207;&#x9664;&#x3092;&#x53D7;&#x3051;&#x305F;&#x3068;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x86CD;&#x5149;&#x306E;&#x5B50;&#x5B6B;&#x306E;&#x5C0F;&#x3055;&#x306A;&#x5272;&#x5408;&#x3092;&#x751F;&#x7523;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x79C1;&#x305F;&#x3061;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x304C;&#x9175;&#x6BCD;&#x304B;&#x3089;&#x6D3E;&#x751F;&#x3057; FLPe&#x3001;&#x52B9;&#x7387;&#x7684;&#x306A; recombinase 28.5 &deg; C &#x306B;&#x4FDD;&#x305F;&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#x3092;&#x78BA;&#x8A8D;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#x80DA;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B; FLPe &#x6A5F;&#x80FD;&#x3002;

Danio rerio FLP/FRT &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;&#xBCC4; &#xC7AC;&#xC870;&#xD569; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC758; &#xD6A8;&#xC728;&#xC131;&#xC744; &#xBD84;&#xC11D; &#xACB0;&#xACFC;, EGFP FRT &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xD615;&#xBC8C; &#xC6B4;&#xC804; &#xADFC;&#xC721; &#xAD00;&#xB828; &#xBC1C;&#xAE30;&#xC778;&#xC73C;&#xB85C; &#xAD6C;&#xC131; &#xB41C; &#xAD6C;&#xBB38; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. FLPe &#xCD9C;&#xC7A5;&#xB41C; RNA&#xB294; &#xC57C;&#xC0DD; &#xD615; &#xC554;&#xCEF7;&#xACFC; hemizygous &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBCC0;&#xD615; &#xB0A8;&#xC131;&#xC744; &#xD6A1;&#xB2E8; &#xD558; &#xC5EC; &#xC5BB;&#xC5B4;&#xC9C4; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBCC0;&#xD615; &#xB2E8;&#xC77C; &#xC140; &#xBB34;&#xB300; zebrafish &#xD0DC;&#xC544;&#xC5D0; microinjected. 48 H &#xAC8C;&#xC2DC;&#xBB3C; &#xC218;&#xC815; (hpf), &#xD558; &#xC5EC; &#xADF8;&#xB9B0; &#xD615;&#xAD11; FLPe RNA microinjection&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xD45C;&#xC2DC; &#xD558;&#xB294; &#xBC30;&#xC544;&#xC758; &#xBE44;&#xC728;&#xC740; &#xD604;&#xC800;&#xD788; &#xB0AE;&#xC740; (7.7%; P &lt; 0.001) recombinase (50%)&#xC758; &#xBD80;&#xC7AC;&#xC5D0; &#xC2ED;&#xC790;&#xAC00;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC608;&#xC0C1; &#xB418;&#xB294; &#xAC83; &#xBCF4;&#xB2E4;. &#xBC30;&#xC544; &#xBCF4;&#xC874; &#xD615;&#xAD11; &#xD45C;&#xC2DC; mosaicism &#xD45C;&#xC2DC;. &#xBE44; &#xD615;&#xAD11;, &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBCC0;&#xD615; &#xD0DC;&#xC544;&#xC5D0; &#xC0AD;&#xC81C; transgene&#xC758; &#xC0C1;&#xC18D; PCR &#xBD84;&#xC11D;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xD655;&#xC778; &#xD558; &#xACE0; FLPe &#xC911;&#xC7AC; &#xC7AC;&#xC870;&#xD569; DNA &#xC2DC;&#xD000;&#xC2F1;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xD655;&#xC778; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC2E4;&#xD5D8;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD655;&#xC778; &#xB41C; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBCC0;&#xD615; &#xB0A8;&#xC131;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD30C;&#xC0DD; &#xB41C; &#xC815;&#xC790;&#xB294; transgene&#xC758; &#xBC88;&#xC9F8; &#xC808;&#xB2E8; &#xD588;&#xB2E4; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xC5EC;&#xBD80;&#xB97C; &#xD655;&#xC778;&#xD560; &#xC57C;&#xC0DD;-&#xD0C0;&#xC785; &#xACC4;&#xB780;&#xC744; &#xAE30;&#xB984; &#xC9C0; &#xAC8C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. FLPe microinjected &#xB0A8;&#xC131;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xBB3C;&#xB824;&#xBC1B;&#xC740; &#xD074;&#xB7EC;&#xCE58; &#xD3EC;&#xD568; &#xB41C; 0-4% &#xD615;&#xAD11; &#xBC30;&#xC544;. &#xD588;&#xB2E4; phenotypically &#xC57C;&#xC0DD;-&#xD0C0;&#xC785; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBCC0;&#xD615; &#xB0A8;&#xC131; &#xC790;&#xC2E0;&#xC758; &#xBC88;&#xC9F8;&#xC5D0;&#xC11C;&#xB294; transgene&#xC758; &#xC644;&#xC804; &#xD55C; &#xC808;&#xC81C;&#xB97C; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC8FC;&#xB294; &#xC5C6;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xD615;&#xAD11; &#xC790;&#xC190; &#xC0DD;&#xC0B0;. &#xC57D;&#xAC04; &#xD615;&#xAD11; &#xADFC;&#xC721; &#xC2DD; &#xC720;&#xC9C0; FLPe microinjected &#xB0A8;&#xC131; &#xBAA8;&#xC790;&#xC774;&#xD06C; &#xB0A8;&#xC131;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBAA8;&#xB4E0; &#xBC88;&#xC9F8; &#xC140; FLPe &#xC911;&#xC7AC; transgene &#xC808;&#xB2E8; &#xACBD;&#xD5D8; &#xD588;&#xB2E4; &#xC81C;&#xC548; &#xD615;&#xAD11; &#xC790;&#xC190;&#xC758; &#xC791;&#xC740; &#xBE44;&#xC728;&#xC744; &#xC0DD;&#xC0B0;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xACB0;&#xACFC; Saccharomyces cerevisiae&#xC5D0;&#xC11C; &#xD30C;&#xC0DD; &#xB41C; FLPe zebrafish 28.5 &deg; C&#xC5D0;&#xC11C; &#xC720;&#xC9C0; &#xAD00;&#xB9AC;&#xC5D0; &#xD6A8;&#xC728;&#xC801;&#xC778; recombinase&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Zebrafish &#xD0DC;&#xC544;&#xC5D0; &#xC788;&#xB294; FLPe &#xD568;&#xC218;.

Para el an&aacute;lisis de la eficiencia del sistema de recombinaci&oacute;n espec&iacute;fica de FLP/FRT en Danio rerio, se desarroll&oacute; una construcci&oacute;n que consta de un promotor de m&uacute;sculos espec&iacute;ficos conducci&oacute;n EGFP flanqueado por sitios FRT. FLPe tapado RNA fue microinyectado en embriones de pez cebra transg&eacute;nico unicelular etapa obtenidos cruzando hemizygous transg&eacute;nicos machos con hembras de tipo salvaje. Por la fertilizaci&oacute;n de correos 48 h (hpf), la proporci&oacute;n de embriones con fluorescencia verde tras la microinyecci&oacute;n FLPe RNA fue significativamente menor (7,7%; P &lt; 0.001) que pudiera esperarse de una cruz en la ausencia de la Recombinasa (50%). Embriones que retuvo la fluorescencia aparecen marcada mosaicismo. Herencia del transg&eacute;n suprimido en embriones no fluorescente, transg&eacute;nicos se verific&oacute; por an&aacute;lisis PCR y recombinaci&oacute;n mediada por FLPe fue confirmada por la secuenciaci&oacute;n del ADN. Esperma derivada de machos transg&eacute;nicos confirmados en estos experimentos se utiliz&oacute; para fecundar los &oacute;vulos salvaje-tipo para determinar si la supresi&oacute;n de la l&iacute;nea germinal del transg&eacute;n hab&iacute;a ocurrido. Embragues deseados por los machos FLPe-microinyectados contienen 0-4% de embriones fluorescente. Machos transg&eacute;nicos que fueron fenot&iacute;picamente salvaje-tipo no producen fluorescente progenie, demostrando la supresi&oacute;n completa del transg&eacute;n de su l&iacute;nea germinal. Machos FLPe microinyectado que conservan alguna expresi&oacute;n de m&uacute;sculo fluorescente producen una peque&ntilde;a proporci&oacute;n de cr&iacute;as fluorescentes, lo que sugiere que en los machos mosaico no todas las c&eacute;lulas germinales hab&iacute;an experimentado transg&eacute;n mediada por FLPe supresi&oacute;n. Nuestros resultados muestran que el FLPe, que se deriva de Saccharomyces cerevisiae, es un eficiente Recombinasa en pez cebra mantenida a 28,5 &deg; C.

Funciones FLPe en embriones de pez cebra.

&#x6211;&#x4EEC;&#x5728;&#x6B64;&#x5904;&#x63CF;&#x8FF0; 4.8 kb &#x5E8F;&#x5217;&#x5206;&#x79BB; 5&#39; &#x7AEF;&#x7684;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C; ziwi &#x80DA;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7279;&#x5F02;&#x6027;&#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x542F;&#x52A8;&#x5B50;&#x6D3B;&#x6027;&#x7684;&#x8868;&#x5F81;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5C55;&#x793A;&#x6B64;&#x7247;&#x6BB5;&#x662F;&#x4E0D;&#x8DB3;&#x4EE5;&#x9A71;&#x52A8;&#x5916;&#x6E90;&#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x5177;&#x4F53;&#x7684;&#x751F;&#x6B96;&#x7EC6;&#x80DE;&#x65E9;&#x5728; 7 &#x5929; post-fertilization&#xFF0C;&#x4EC5;&#x6709;&#x4E1D;&#x5206;&#x88C2;&#x751F;&#x6B96;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6027;&#x817A;&#x4E2D;&#x51FA;&#x73B0;&#x65F6;&#x7684;&#x65F6;&#x95F4;&#x70B9;&#x5F00;&#x59CB;&#x3002;&#x5728;&#x6210;&#x5E74;&#x7684;&#x52A8;&#x7269;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x53D1;&#x73B0;&#x6B64;&#x7247;&#x6BB5;&#x662F;&#x8DB3;&#x591F;&#x8BA9;&#x6240;&#x6709;&#x751F;&#x6B96;&#x7EC6;&#x80DE;&#x9A71;&#x52A8;&#x5668;&#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x4E0E;&#x7279;&#x5B9A;&#x9636;&#x6BB5;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x6C34;&#x5E73;&#x7684;&#x5DEE;&#x5F02;&#x3002;&#x5973;&#x6027;&#xFF0C;&#x7EFF;&#x8272;&#x8367;&#x5149;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x662F;&#x6700;&#x9AD8;&#x7684; IB&#xFF0C;&#x5375;&#x6BCD;&#x7EC6;&#x80DE;&#x9636;&#x6BB5;&#xFF0C;&#x4F46;&#x660E;&#x663E;&#x8868;&#x8FBE;&#x68C0;&#x6D4B;&#x5230;&#x4E24;&#x4E2A; pre-meiotic &#x7684;&#x751F;&#x6B96;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x4E8C;&#x56DB;&#x4E95;&#x9636;&#x6BB5;&#x5375;&#x6BCD;&#x7EC6;&#x80DE;&#x548C;&#x6210;&#x719F;&#x7684;&#x5375;&#x5B50;&#x3002;&#x5728;&#x7537;&#x6027;&#xFF0C;&#x7EFF;&#x8272;&#x8367;&#x5149;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x662F;&#x6700;&#x9AD8;&#x7684;&#x7CBE;&#x539F;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x4F46;&#x5728;&#x6240;&#x6709;&#x9636;&#x6BB5;&#xFF0C;&#x5305;&#x62EC;&#x7CBE;&#x5B50;&#x4E2D;&#x68C0;&#x6D4B;&#x5230;&#x4F4E;&#x6C34;&#x5E73;&#x3002;

Ziwi &#x542F;&#x52A8;&#x5B50;&#x5728;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C;&#x9A71;&#x52A8;&#x5668;&#x751F;&#x6B96;&#x7279;&#x5B9A;&#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x3002;

We describe here the characterization of the promoter activity of a 4.8-kb sequence isolated from the 5' end of the zebrafish germ cell-specific ziwi gene. We show that this fragment is sufficient to drive heterologous gene expression specifically in germ cell starting as early as 7 days post-fertilization, a time point when only mitotic germ cells are present in the gonad. In adult animals, we find that this fragment is sufficient to drive gene expression in all germ cells with stage-specific differences in expression levels. In females, EGFP expression is highest in stage IB oocytes, but appreciable expression is detected in both pre-meiotic germ cells, as well stage II-IV oocytes and mature eggs. In males, EGFP expression is highest in spermatogonial stem cells, but low levels are detected in all stages, including spermatozoa.

The ziwi promoter drives germline-specific gene expression in zebrafish.

Nous d&eacute;crivons ici la caract&eacute;risation de l&#39;activit&eacute; de promoteur d&#39;une s&eacute;quence de 4. 8 kb isol&eacute;e de l&#39;extr&eacute;mit&eacute; 5&#39; du g&egrave;ne sp&eacute;cifique des cellules germinales ziwi zebrafish. Nous montrons que ce fragment est suffisant pour l&#39;expression de g&egrave;ne h&eacute;t&eacute;rologue disque sp&eacute;cifiquement dans les cellules germinales d&egrave;s post-fertilization de 7 jours, un point de temps lorsque seulement mitose de cellules germinales sont pr&eacute;sents dans les gonades. Chez les animaux adultes, nous constatons que ce fragment est suffisant pour l&#39;expression des g&egrave;nes en voiture dans toutes les cellules germinales avec sc&egrave;ne des diff&eacute;rences dans les niveaux d&#39;expression. Chez les femelles, expression EGFP est plus &eacute;lev&eacute;e dans les ovocytes de phase IB, mais expression appr&eacute;ciable est d&eacute;tect&eacute;e dans les deux cellules germinales pr&eacute;-m&eacute;iotiques, comme les ovocytes bien phase II &agrave; IV et les ovules matures. Chez les m&acirc;les, expression EGFP est plus &eacute;lev&eacute;e dans les cellules souches spermatogoniales, mais faibles niveaux sont d&eacute;tect&eacute;s dans toutes les &eacute;tapes, y compris les spermatozo&iuml;des.

Le promoteur ziwi entra&icirc;ne l&#39;expression des g&egrave;nes dans les cellules germinales sp&eacute;cifiques chez le poisson z&egrave;bre.

Wir beschreiben hier die Charakterisierung der Promotor-Aktivit&auml;t einer 4,8-kb-Sequenz, die aus der 5&#39;-Ende des Gens Germ zellspezifische Ziwi Zebrafisch isoliert. Wir zeigen, dass dieses Fragment ausreichend, um mit dem HETEROLOGE GENEXPRESSION speziell in Keimzellen beginnen so fr&uuml;h wie 7 Tage Post-fertilization, einem Zeitpunkt ist, wenn nur mitotische Keimzellen in den Gonad vorhanden sind. Bei erwachsenen Tieren finden wir, dass dieses Fragment, um mit dem Genexpression in alle Keimzellen mit B&uuml;hne-spezifische Unterschiede im Ausdruck ausreicht. In Frauen EGFP Ausdruck ist im Stadium IB Eizellen am h&ouml;chsten, aber sp&uuml;rbare Ausdruck in beiden pre-meiotic Keimzellen, als auch Stadium II-IV Eizellen und Reifen Eier festgestellt wird. Bei M&auml;nnern EGFP Ausdruck ist am h&ouml;chsten in Spermatogonien-Stammzellen, aber niedrigen Niveau in allen Phasen, einschlie&szlig;lich Spermien erkannt werden.

Der Projekttr&auml;ger Ziwi f&auml;hrt Keimbahn-spezifische Genexpression in Zebrafisch.

Descriviamo qui la caratterizzazione dell&#39;attivit&agrave; di promotore di una sequenza di 4,8 kb isolata dall&#39;estremit&agrave; 5&#39; del gene della cellula di germe specifico ziwi zebrafish. Ci mostrano che questo frammento &egrave; sufficiente per l&#39;espressione del gene eterologo unit&agrave; specificamente nelle cellule germinali a partire pi&ugrave; presto post-fertilization di 7 giorni, un punto di tempo quando solo le cellule germinali mitotica sono presenti nella gonade. In animali adulti, troviamo che questo frammento &egrave; sufficiente per l&#39;espressione del gene di auto in tutte le cellule germinali con differenze di fase nei livelli di espressione. Nelle femmine, espressione di EGFP &egrave; pi&ugrave; alta in ovociti di fase IB, ma apprezzabile espressione viene rilevata in entrambi pre-meiotic cellule germinali, come ben stadio II-IV ovociti e uova mature. Nei maschi, espressione di EGFP &egrave; pi&ugrave; alta in spermatogoni staminali, ma bassi livelli vengono rilevati in tutte le fasi, tra cui gli spermatozoi.

Il promotore ziwi unit&agrave; espressione genica germinale specifico nello zebrafish.

&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#x80DA;&#x7D30;&#x80DE;&#x56FA;&#x6709;&#x306E; ziwi &#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E; 5&#39; &#x7AEF;&#x304B;&#x3089;&#x5206;&#x96E2;&#x3055;&#x308C;&#x305F; 4.8 kb &#x30B7;&#x30FC;&#x30B1;&#x30F3;&#x30B9;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x6D3B;&#x6027;&#x306E;&#x7279;&#x6027;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x8AAC;&#x660E;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x79C1;&#x9054;&#x306F;&#x3053;&#x306E;&#x30D5;&#x30E9;&#x30B0;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#x304C;&#x5177;&#x4F53;&#x7684;&#x306B;&#x80DA;&#x7D30;&#x80DE;&#x3092; 7 &#x65E5;&#x9593; post-fertilization&#x3001;&#x3060;&#x3051;&#x7D30;&#x80DE;&#x5206;&#x88C2;&#x306E;&#x751F;&#x6B96;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x751F;&#x6B96;&#x817A;&#x306E;&#x5B58;&#x5728;&#x3059;&#x308B;&#x5834;&#x5408;&#x306E;&#x6642;&#x9593;&#x306E;&#x30DD;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C8;&#x306B;&#x306F;&#x65E9;&#x304F;&#x3082;&#x958B;&#x59CB;&#x30C9;&#x30E9;&#x30A4;&#x30D6;&#x7570;&#x7A2E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x767A;&#x73FE;&#x306B;&#x5341;&#x5206;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5927;&#x4EBA;&#x306E;&#x52D5;&#x7269;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x30D5;&#x30E9;&#x30B0;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#x304C;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306E;&#x751F;&#x6B96;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x767A;&#x73FE;&#x3092;&#x30C9;&#x30E9;&#x30A4;&#x30D6; &#x30B9;&#x30C6;&#x30FC;&#x30B8;&#x56FA;&#x6709;&#x8868;&#x73FE;&#x306E;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x306E;&#x9055;&#x3044;&#x3068;&#x306B;&#x5341;&#x5206;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x898B;&#x3064;&#x3051;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5973;&#x6027;&#x3001;EGFP &#x767A;&#x73FE;&#x30B9;&#x30C6;&#x30FC;&#x30B8; IB &#x5375;&#x5B50;&#x3067;&#x6700;&#x9AD8;&#x3067;&#x3059;&#x304C;&#x3001;&#x304B;&#x306A;&#x308A;&#x5F0F;&#x4E21;&#x65B9; pre-meiotic &#x306E;&#x751F;&#x6B96;&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;&#x3088;&#x304F;&#x30B9;&#x30C6;&#x30FC;&#x30B8; II &#x301C; IV &#x5375;&#x6BCD;&#x7D30;&#x80DE;&#x3068;&#x6210;&#x719F;&#x5375;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x691C;&#x51FA;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x7537;&#x6027;&#x3001;EGFP &#x767A;&#x73FE;&#x304C;&#x7CBE;&#x539F;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;&#x3001;&#x6700;&#x9AD8;&#x3067;&#x3059;&#x304C;&#x3001;&#x4F4E;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x7CBE;&#x5B50;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306E;&#x6BB5;&#x968E;&#x3067;&#x691C;&#x51FA;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

Ziwi &#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x751F;&#x6B96;&#x7D30;&#x80DE;&#x7279;&#x7570;&#x7684;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x767A;&#x73FE;&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#x3067;&#x99C6;&#x52D5;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#xC5EC;&#xAE30; zebrafish ziwi &#xC138;&#xADE0; &#xC138;&#xD3EC; &#xAD00;&#xB828; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; 5&#39; &#xB05D;&#xC5D0;&#xC11C; &#xACE0;&#xB9BD; &#xB41C; 4.8 kb &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4;&#xC758; &#xBC1C;&#xAE30;&#xC778; &#xD65C;&#xB3D9; &#xD2B9;&#xC131; &#xC124;&#xBA85;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC774; &#xC870;&#xAC01; &#xC138;&#xADE0; &#xC140; &#xC2DC;&#xC791; &#xBE60;&#xB974;&#xBA74; 7 &#xC77C; post-fertilization, &#xC2DC;&#xAC04; &#xD3EC;&#xC778;&#xD2B8;&#xB9CC; mitotic &#xC138;&#xADE0; &#xC138;&#xD3EC;&#xB294; gonad&#xC5D0; &#xC874;&#xC7AC; &#xD558;&#xB294; &#xACBD;&#xC6B0;&#xC5D0; &#xD2B9;&#xD788; &#xB4DC;&#xB77C;&#xC774;&#xBE0C; &#xBD84;&#xB9AC; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBC1C;&#xD604;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC131;&#xC778; &#xB3D9;&#xBB3C; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xCC3E;&#xC544;&#xC774; &#xC870;&#xAC01; &#xB4DC;&#xB77C;&#xC774;&#xBE0C; &#xC2DD; &#xC218;&#xC900;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB2E8;&#xACC4; &#xBCC4; &#xCC28;&#xC774;&#xC640; &#xBAA8;&#xB4E0; &#xC138;&#xADE0; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBC1C;&#xD604;&#xC744; &#xCDA9;&#xBD84; &#xD558;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xC131;&#xC5D0;&#xC11C; EGFP &#xC2DD; &#xBB34;&#xB300; IB oocytes&#xC5D0;&#xC11C; &#xAC00;&#xC7A5; &#xB192;&#xC740; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xAC10;&#xC9C0;&#xD560; &#xC218; &#xC2DD; &#xC798; &#xB2E8;&#xACC4; II-IV oocytes &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xC131;&#xC219; &#xACC4;&#xB780;&#xC73C;&#xB85C; &#xB450; pre-meiotic &#xC138;&#xADE0; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAC10;&#xC9C0; &#xB41C;. &#xB0A8;&#xC131;, EGFP &#xC2DD; spermatogonial &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAC00;&#xC7A5; &#xB192;&#xC740; &#xC788;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xC800;&#xAE09; &#xC815;&#xC790;&#xB97C; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558; &#xC5EC; &#xBAA8;&#xB4E0; &#xB2E8;&#xACC4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAC80;&#xC0C9; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Ziwi &#xBC1C;&#xAE30;&#xC778; zebrafish &#xBC88;&#xC9F8; &#xAD00;&#xB828; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBC1C;&#xD604;&#xC744; &#xB4DC;&#xB77C;&#xC774;&#xBE0C;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Describimos aqu&iacute; la caracterizaci&oacute;n de la actividad del promotor de una secuencia de 4,8 kb aislada desde el extremo 5&#39; del gen espec&iacute;fico de la c&eacute;lula de germen ziwi pez cebra. Demostramos que este fragmento es suficiente para la expresi&oacute;n de genes heter&oacute;logos de coche espec&iacute;ficamente en c&eacute;lulas germinales a partir tan pronto como la fecundaci&oacute;n de 7 d&iacute;as, un punto de tiempo cuando s&oacute;lo mit&oacute;ticas las c&eacute;lulas germinales est&aacute;n presentes en la g&oacute;nada. En animales adultos, encontramos que este fragmento es suficiente para la expresi&oacute;n del gen de unidad en todas las c&eacute;lulas de germen con diferencias de fase espec&iacute;ficas en los niveles de expresi&oacute;n. En las hembras, EGFP expresi&oacute;n es m&aacute;s alto en ovocitos de etapa IB, pero se detecta la expresi&oacute;n apreciable en ambas c&eacute;lulas germinales pre-meiotic, como bien etapa II-IV de ovocitos y huevos maduros. En varones, EGFP expresi&oacute;n es mayor en las espermatogonias c&eacute;lulas madre, pero se detectan niveles bajos en todas las etapas, incluyendo los espermatozoides.

El promotor ziwi unidades de expresi&oacute;n de genes espec&iacute;ficos del germline en pez cebra.

Piwi &#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x529F;&#x80FD;&#x7684;&#x9759;&#x97F3;&#x8F6C;&#x5EA7;&#x5B50;&#x7684; RNAi &#x6837;&#x901A;&#x8DEF;&#x3002;Piwi &#x5173;&#x8054; RNAs&#xFF0C;&#x4E5F;&#x79F0;&#x4E3A; piRNAs&#xFF0C;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x6307;&#x5357;&#x6765;&#x5BFB;&#x627E; Piwi &#x7684;&#x76EE;&#x6807;&#x3002;&#x8FD9;&#x6761;&#x6B65;&#x9053;&#x76F8;&#x8FDE;&#x5DF2;&#x90FD;&#x94CE;&#x98CE;&#x683C;&#x7684;&#x57DF;&#x5305;&#x542B;&#x86CB;&#x767D; Tdrd1&#xFF0C;&#x4F46;&#x5176;&#x529F;&#x80FD;&#x8FC4;&#x4ECA;&#x4ECD;&#x4E0D;&#x6E05;&#x695A;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x663E;&#x793A;&#x8BE5;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C; Tdrd1 &#x662F;&#x9AD8;&#x6548; Piwi &#x901A;&#x8DEF;&#x6D3B;&#x6027;&#x548C;&#x9002;&#x5F53; nuage &#x5F62;&#x6210;&#x6240;&#x5FC5;&#x9700;&#x7684;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x53D1;&#x73B0; Tdrd1 &#x7ED1;&#x5B9A;&#x4E24;&#x4E2A;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C; Piwi &#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x3001; Ziwi &#x548C;&#x81EA;&#x7ACB;&#xFF0C;&#x5E76;&#x63ED;&#x793A;&#x4E86;&#x5E8F;&#x5217;&#x7279;&#x5F02;&#x6027;&#x7684; Tdrd1 &#x90FD;&#x94CE;&#x5F0F;&#x57DF;&#x548C;&#x5BF9;&#x79F0;&#x4E2D;&#x81EA;&#x7ACB;&#x7684; dimethylated arginines (sDMAs) &#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x6700;&#x540E;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x663E;&#x793A; Tdrd1 &#x914D;&#x5408;&#x7269;&#x5305;&#x542B; piRNAs &#x548C; piRNAs &#x6BD4;&#x957F;&#x7684; RNA &#x5206;&#x5B50;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x547D;&#x540D;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x957F;&#x7684;&#x6210;&#x7EE9;&#x5355; Tdrd1 &#x5173;&#x8054;&#x6210;&#x7EE9;&#x5355; (&#x8102;&#x80AA;)&#x3002;&#x8102;&#x80AA;&#x53EF;&#x80FD;&#x4EE3;&#x8868;&#x5288;&#x7684; Piwi &#x901A;&#x8DEF;&#x76EE;&#x6807;&#xFF0C;&#x5E76;&#x53EF;&#x4F5C;&#x4E3A; piRNA &#x751F;&#x7269;&#x53D1;&#x751F;&#x4E2D;&#x95F4;&#x4F53;&#x3002;&#x603B;&#x4E4B;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x6570;&#x636E;&#x8868;&#x660E; Tdrd1 &#x5145;&#x5F53; Piwi &#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x5206;&#x5B50;&#x811A;&#x624B;&#x67B6;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x901A;&#x8FC7;&#x7279;&#x5B9A;&#x7684;&#x90FD;&#x94CE;&#x5F0F;&#x57DF;&#x5740;&#x4E92;&#x52A8;&#x3001; piRNAs &#x548C; piRNA &#x7684;&#x76EE;&#x6807;&#x3002;

Tdrd1 &#x4E3A;&#x5206;&#x5B50;&#x652F;&#x67B6; Piwi &#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x548C;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C; piRNA &#x76EE;&#x6807;&#x7684;&#x884C;&#x4E3A;&#x3002;

Piwi proteins function in an RNAi-like pathway that silences transposons. Piwi-associated RNAs, also known as piRNAs, act as a guide to identify Piwi targets. The tudor domain-containing protein Tdrd1 has been linked to this pathway but its function has thus far remained unclear. We show that zebrafish Tdrd1 is required for efficient Piwi-pathway activity and proper nuage formation. Furthermore, we find that Tdrd1 binds both zebrafish Piwi proteins, Ziwi and Zili, and reveals sequence specificity in the interaction between Tdrd1 tudor domains and symmetrically dimethylated arginines (sDMAs) in Zili. Finally, we show that Tdrd1 complexes contain piRNAs and RNA molecules that are longer than piRNAs. We name these longer transcripts Tdrd1-associated transcripts (TATs). TATs likely represent cleaved Piwi pathway targets and may serve as piRNA biogenesis intermediates. Altogether, our data suggest that Tdrd1 acts as a molecular scaffold for Piwi proteins, bound through specific tudor domain-sDMA interactions, piRNAs and piRNA targets.

Tdrd1 acts as a molecular scaffold for Piwi proteins and piRNA targets in zebrafish.

Piwi prot&#xE9;ines de fonction dans une voie de RNAi-comme les transposons silences. Piwi-associ&#xE9;s ARN, appel&#xE9;s aussi piRNAs, agir comme un guide pour identifier les cibles Piwi. Le Tdrd1 de domaine contenant des prot&#xE9;ines tudor a &#xE9;t&#xE9; li&#xE9;e &#xE0; cette voie, mais sa fonction a jusqu&#x26;#39;&#xE0; pr&#xE9;sent demeuraient floues. Nous montrons que le poisson-z&#xE8;bre Tdrd1 est n&#xE9;cessaire pour l&#x26;#39;efficacit&#xE9; Piwi-voie l&#x26;#39;activit&#xE9; et la formation de nuage correcte. En outre, nous constatons que Tdrd1 lie les deux prot&#xE9;ines de poisson z&#xE8;bre Piwi, Ziwi et Zili, et r&#xE9;v&#xE8;le une sp&#xE9;cificit&#xE9; de s&#xE9;quence dans l&#x26;#39;interaction entre Tdrd1 domaines Tudor et sym&#xE9;triquement arginines dim&#xE9;thyl&#xE9;s (sDMAs) dans Zili. Enfin, nous montrons que Tdrd1 complexes contiennent piRNAs et des mol&#xE9;cules d&#x26;#39;ARN qui sont plus que piRNAs. Nous nommons ces transcriptions plus Tdrd1 associ&#xE9;s transcriptions (d&#xE9;lais d&#x26;#39;ex&#xE9;cution). D&#xE9;lais d&#x26;#39;ex&#xE9;cution susceptibles de repr&#xE9;senter des cibles cliv&#xE9;es voie Piwi et peuvent servir d&#x26;#39;interm&#xE9;diaires biogen&#xE8;se Pirna. Au total, nos donn&#xE9;es sugg&#xE8;rent que Tdrd1 agit comme un &#xE9;chafaudage mol&#xE9;culaire pour les prot&#xE9;ines Piwi, li&#xE9; par tudor sp&#xE9;cifiques au domaine SDMA interactions, et les cibles piRNAs Pirna.

Tdrd1 Agit comme un &#xE9;chafaudage mol&#xE9;culaire pour les prot&#xE9;ines Piwi et cibles Pirna chez le poisson z&#xE8;bre

Piwi Proteine-Funktion in einem RNAi-wie-Weg, die Transposons zu schweigen. Piwi-assoziierte RNAs, auch bekannt als PiRNAs, dienen als Leitfaden f&uuml;r Piwi Ziele zu identifizieren. Das tudor-Dom&auml;ne-haltige Protein Tdrd1 auf diesem Weg verbunden worden, aber ihre Funktion ist bisher unklar geblieben. Wir zeigen, dass das Zebrafish Tdrd1 f&uuml;r effiziente Piwi-Weg-Aktivit&auml;t und richtige Nuage Bildung erforderlich ist. Dar&uuml;ber hinaus finden wir, dass Tdrd1 beide Zebrafisch Piwi Proteine, Ziwi und Zili bindet, und Sequenz Spezifit&auml;t in der Interaktion zwischen Tdrd1 tudor Dom&auml;nen und symmetrisch Dimethylated Arginines (sDMAs) in Zili offenbart. Schlie&szlig;lich zeigen wir, dass Tdrd1-komplexe PiRNAs und RNA-Molek&uuml;le, die l&auml;nger als PiRNAs sind enthalten. Wir nennen diese l&auml;ngeren Abschriften Tdrd1-assoziierte Transkripte (TATs). TATs wahrscheinlich gespalten Piwi Stoffwechselweg Ziele darstellen und als PiRNA Biogenese Zwischenprodukte dienen k&ouml;nnen. Unsere Daten zufolge insgesamt Tdrd1 fungiert als eine molekulare Ger&uuml;st f&uuml;r Piwi Proteine, &uuml;ber spezifische tudor Dom&auml;ne-sDMA Interaktionen, PiRNAs und PiRNA Ziele gebunden.

Tdrd1 fungiert als eine molekulare Ger&uuml;st f&uuml;r Piwi Proteine und PiRNA Ziele in Zebrafisch.

Funzione di proteine Piwi in un percorso di RNAi-like che zittisce trasposoni. Piwi-associated RNAs, noto anche come piRNAs, agiscono come una guida per identificare gli obiettivi Piwi. La proteina dominio contenenti Tdrd1 tudor &egrave; stata collegata a questo percorso, ma la sua funzione &egrave; rimasta finora poco chiara. Mostriamo che zebrafish Tdrd1 &egrave; richiesto per attivit&agrave; Piwi-percorso efficiente e nuage adeguata formazione. Inoltre, troviamo che Tdrd1 associa entrambi proteine Piwi zebrafish, Ziwi e Zili e rivela la specificit&agrave; di sequenza nell&#39;interazione tra domini tudor Tdrd1 e simmetricamente dimetilata ARGININE (sDMAs) in Zili. Infine, ci mostra che Tdrd1 complessi contengono piRNAs e molecole di RNA che sono pi&ugrave; di piRNAs. Abbiamo un nome queste trascrizioni pi&ugrave; Tdrd1-associated transcripts (TATs). TATs probabilmente rappresentano fenduti Piwi pathway destinazioni e pu&ograve; servire come prodotti intermedi di biogenesi di piRNA. Complessivamente, i nostri dati suggeriscono che la Tdrd1 agisce come un&#39;impalcatura molecolare per le proteine Piwi, vincolati attraverso piRNA, piRNAs e interazioni specifico dominio tudor-sDMA obiettivi.

Tdrd1 agisce come un&#39;impalcatura molecolare per le proteine Piwi e piRNA obiettivi nello zebrafish.

RNAi&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x3092;&#x305D;&#x306E;&#x7121;&#x97F3;&#x306E;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30DD;&#x30BE;&#x30F3;&#x306E;Piwi&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3002;&#x307E;&#x305F;piRNA&#x306F;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x77E5;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;PIWI&#x95A2;&#x9023;RNA&#x306F;&#x3001;PIWI&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#x3092;&#x8B58;&#x5225;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x30AC;&#x30A4;&#x30C9;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30C1;&#x30E5;&#x30FC;&#x30C0;&#x30FC;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x542B;&#x6709;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;Tdrd1&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x306B;&#x30EA;&#x30F3;&#x30AF;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x304C;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306F;&#x3053;&#x308C;&#x307E;&#x3067;&#x4E0D;&#x660E;&#x3067;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;Tdrd1&#x304C;&#x52B9;&#x7387;&#x7684;&#x306A;PIWI-&#x7D4C;&#x8DEF;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x3068;&#x9069;&#x5207;&#x306A;nuage&#x5F62;&#x6210;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x3068;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;Tdrd1&#x306F;&#x3001;&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;Piwi&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3001;Ziwi&#x3068;Zili&#x3001;&#x4E21;&#x65B9;&#x3092;&#x7D50;&#x5408;&#x3057;&#x3001;Zili&#x3067;Tdrd1&#x30C1;&#x30E5;&#x30FC;&#x30C0;&#x30FC;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x3068;&#x5BFE;&#x79F0;&#x7684;&#x306B;&#x30B8;&#x30E1;&#x30C1;&#x30EB;&#x5316;&#x30A2;&#x30EB;&#x30AE;&#x30CB;&#x30F3;&#xFF08;sDMAs&#xFF09;&#x3068;&#x306E;&#x9593;&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x306B;&#x914D;&#x5217;&#x7279;&#x7570;&#x6027;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x308F;&#x304B;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6700;&#x5F8C;&#x306B;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;Tdrd1&#x8907;&#x5408;&#x4F53;&#x306F;piRNA&#x306F;&#x3088;&#x308A;&#x9577;&#x3044;piRNA&#x306F;&#x304A;&#x3088;&#x3073;RNA&#x5206;&#x5B50;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x9577;&#x3044;&#x8EE2;&#x5199;&#x7269;&#xFF08;&#x30BF;&#x30C3;&#x30C4;&#xFF09;&#x8EE2;&#x5199;Tdrd1&#x95A2;&#x9023;&#x3068;&#x3044;&#x3046;&#x540D;&#x524D;&#x3092;&#x4ED8;&#x3051;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30BF;&#x30C3;&#x30C4;&#x306F;&#x304A;&#x305D;&#x3089;&#x304F;&#x5207;&#x65AD;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x306E;Piwi&#x7D4C;&#x8DEF;&#x306E;&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#x3092;&#x8868;&#x3059;&#x3068;&#x306E;piRNA&#x751F;&#x5408;&#x6210;&#x4E2D;&#x9593;&#x4F53;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3059;&#x308B;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5B8C;&#x5168;&#x306B;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306E;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x306F;&#x3001;PIWI&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x5206;&#x5B50;&#x8DB3;&#x5834;&#x3068;&#x3057;&#x3066;Tdrd1&#x884C;&#x70BA;&#x306F;&#x3001;&#x7279;&#x5B9A;&#x306E;&#x30C1;&#x30E5;&#x30FC;&#x30C0;&#x30FC;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;-SDMA&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3001;piRNA&#x306F;&#x3068;&#x30D4;&#x30EB;&#x30CA;&#x306E;&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x7D50;&#x5408;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;

&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;PIWI&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3068;&#x30D4;&#x30EB;&#x30CA;&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#x306E;&#x5206;&#x5B50;&#x8DB3;&#x5834;&#x3068;&#x3057;&#x3066;Tdrd1&#x884C;&#x70BA;

Piwi &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xAE30;&#xB2A5; transposons &#xC870;&#xC6A9; &#xD558; &#xAC8C; &#xB9CC;&#xB4E0;&#xB2E4; &#xD558;&#xB294; RNAi &#xAC19;&#xC740; &#xD1B5;&#xB85C;&#xC5D0;. Piwi &#xAD00;&#xB828; RNAs, &#xC77C;&#xCEEC;&#xC5B4; piRNAs Piwi &#xB300;&#xC0C1;&#xC744; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xAC00;&#xC774;&#xB4DC; &#xC5ED;&#xD560;. &#xD29C;&#xB354; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778;&#xC5D0; &#xD3EC;&#xD568; &#xB41C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; tdrd1&#xC774;&#xC774; &#xD1B5;&#xB85C;&#xC5D0; &#xC5F0;&#xACB0; &#xB418;&#xC5B4; &#xC788;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xADF8; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC740; &#xC9C0;&#xAE08;&#xAE4C;&#xC9C0; &#xBD88;&#xBD84;&#xBA85; &#xB0A8;&#xC544; &#xC788;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xADF8; zebrafish tdrd1&#xC740; &#xD6A8;&#xC728;&#xC801;&#xC778; Piwi &#xD1B5;&#xB85C; &#xD65C;&#xB3D9;&#xACFC; &#xC801;&#xC808; &#xD55C; nuage &#xD615;&#xC131;&#xC5D0; &#xD544;&#xC694;&#xD55C; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xCC3E;&#xC744; Tdrd1 Ziwi &#xBC0F; Zili, zebrafish Piwi &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xBAA8;&#xB450; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xD558;&#xACE0; Tdrd1 &#xD29C;&#xB354; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778; &#xBC0F; &#xB300;&#xCE6D; Zili&#xC5D0;&#xC11C; dimethylated arginines (sDMAs) &#xAC04;&#xC758; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4; &#xD2B9;&#xC774;&#xC131;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC900;&#xB2E4;. &#xB9C8;&#xC9C0;&#xB9C9;&#xC73C;&#xB85C;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; Tdrd1 &#xB2E8;&#xC9C0; Pirnas&#xC640; piRNAs &#xBCF4;&#xB2E4; &#xAE34; RNA &#xBD84;&#xC790;&#xB97C; &#xD3EC;&#xD568; &#xAC83;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294;&#xC774; &#xB354; &#xC774;&#xC0C1; &#xC131;&#xC801; &#xC99D;&#xBA85;&#xC11C; Tdrd1 &#xAD00;&#xB828; &#xC99D;&#xBA85;&#xC11C; (&#xBB38;&#xC2E0;) &#xC774;&#xB984;&#xC744;. &#xBB38;&#xC2E0; &#xAC00;&#xB2A5;&#xC131;&#xC774; cleaved Piwi &#xD1B5;&#xB85C; &#xB300;&#xC0C1; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0B4;&#xACE0; piRNA &#xC18D; &#xC911;&#xAC04;&#xCCB4;&#xB85C; &#xC81C;&#xACF5;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB2E4;. &#xBAA8;&#xB450;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xB370;&#xC774;&#xD130; Tdrd1 Piwi &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xBD84;&#xC790; &#xBE44; &#xACC4;&#xB294; &#xB300;&#xC0C1; &#xD2B9;&#xC815; &#xD29C;&#xB354; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778; sDMA &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;, piRNAs &#xBC0F; &#xD53C; &#xB974; &#xB098;&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xB41C; &#xC5ED;&#xD560; &#xAC83;&#xC774; &#xC88B;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Tdrd1 Piwi &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xACFC; piRNA &#xB300;&#xC0C1; zebrafish&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xBD84;&#xC790; &#xBE44; &#xACC4; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

P&#xED;o prote&#xED;nas funcionan en una v&#xED;a de RNAi como el que los transposones silencios. P&#xED;o asociadas a ARN, tambi&#xE9;n conocidas como piRNAs, actuar como una gu&#xED;a para identificar los objetivos Piwi. El dominio que contienen prote&#xED;nas tudor Tdrd1 se ha vinculado a esta v&#xED;a, pero su funci&#xF3;n hasta ahora ha quedado claro. Se demuestra que el pez cebra Tdrd1 se requiere para una eficiente Piwi-v&#xED;a la actividad y la formaci&#xF3;n de nuage adecuada. Por otra parte, nos encontramos con que Tdrd1 une ambos de pez cebra prote&#xED;nas Piwi, la Ziwi y Zili, y pone de manifiesto la especificidad de secuencia en la interacci&#xF3;n entre los dominios Tdrd1 Tudor y sim&#xE9;tricamente arginines dimetilados (sDMAs) en Zili. Finalmente, mostramos que Tdrd1 complejos contienen piRNAs y mol&#xE9;culas de ARN que son m&#xE1;s de piRNAs. Llamamos a estas transcripciones ya las transcripciones Tdrd1-asociados (TAT). TATs probablemente representan los objetivos de la v&#xED;a troceados Piwi y puede servir como intermediarios biog&#xE9;nesis Pirna. En conjunto, nuestros datos sugieren que Tdrd1 act&#xFA;a como un andamio molecular de las prote&#xED;nas Piwi, vinculados a trav&#xE9;s de determinadas tudor SDMA dominio interacciones, piRNAs y metas Pirna.

Tdrd1 Act&#xFA;a como un andamio molecular de las prote&#xED;nas Piwi y Metas Pirna en el pez cebra

T &#x76D2;&#x8F6C;&#x5F55;&#x56E0;&#x5B50; Eomesodermin (Eomes) &#x6709;&#x7275;&#x8FDE;&#x5728;&#x9635;&#x5217;&#x548C;&#x5F62;&#x6001;&#x53D1;&#x751F;&#x4E2D;&#x7684;&#x9752;&#x86D9;&#x3001; &#x9C7C;&#x548C;&#x9F20;&#x6807;&#x3002;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C;&#xFF0C;&#x4E00;&#x4E2A;&#x4E24;&#x4E2A;&#x7684; Eomes &#x540C;&#x6E90;&#xFF0C;Eomesa&#xFF0C;&#x6709;&#x7275;&#x8FDE;&#x80CC;&#x8179;&#x4FA7;&#x9635;&#x5217;&#x3001; &#x5916;&#x5305;&#x548C;&#x5185;&#x80DA;&#x5C42;&#x89C4;&#x8303;&#x7684;&#x8058;&#x7528;&#x8FC7;&#x91CF;&#x8868;&#x8FBE;&#x3001; &#x663E;&#x6027;&#x8D1F;&#x6784;&#x9020;&#x548C;&#x53CD;&#x4E49; morpholino &#x5BE1;&#x6838;&#x82F7;&#x9178;&#x7684;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x4E2D;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x6211;&#x4EEC;&#x62A5;&#x544A;&#x9996;&#x6B21; Eomesa &#x7A81;&#x53D8;&#x4F53;&#x7684;&#x9274;&#x5B9A;&#x53CA;&#x5176;&#x751F;&#x6210;&#x7684;&#x9676;&#x74F7;&#x7816;&#x7C98;&#x7ED3;&#x5242;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x53D1;&#x73B0; Eomesa &#x5F00;&#x59CB;&#x7684;&#x5916;&#x5305;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x6D89;&#x53CA;&#x5230;&#x4E0A;&#x8986;&#x86CB;&#x6E05;&#x86CB;&#x9EC4;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x5411;&#x4E0A;&#x836B;&#x7F69;&#x5177;&#x6709;&#x4E25;&#x683C;&#x7684;&#x6BCD;&#x4EB2;&#x7684;&#x89D2;&#x8272;&#x3002;&#x76F8;&#x6BD4;&#x4E4B;&#x4E0B;&#xFF0C;&#x5916;&#x5305;&#x7EA7;&#x6570;&#x662F;&#x6B63;&#x5E38;&#x7684;&#x5916;&#x5305;&#x5F00;&#x59CB;&#x662F;&#x57FA;&#x56E0;&#x5206;&#x79BB;&#x7814;&#x7A76;&#x8FDB;&#x5C55;&#x7684;&#x7B2C;&#x4E00;&#x6B21;&#x5C55;&#x793A;&#x3002;&#x5375;&#x9EC4;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5FAE;&#x7BA1;&#xFF0C;&#x6240;&#x5FC5;&#x9700;&#x7684;&#x5916;&#x5305;&#xFF0C;&#x662F;&#x5728;&#x4EA7;&#x5987;&#x5408;&#x5B50; eomesa &#x7A81;&#x53D8;&#x4F53;&#x80DA;&#x80CE;&#x5B58;&#x5728;&#x7F3A;&#x9677;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x66F4;&#x7D27;&#x51D1;&#x548C;&#x5C55;&#x793A;&#x66F4;&#x591A;&#x6CE1;&#x72B6;&#x7A81;&#x8D77;&#x7684;&#x63A7;&#x5236;&#x80DA;&#x80CE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6BD4;&#x86CB;&#x6E05;&#x6DF1;&#x5C42;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5047;&#x5B9A;&#x5927;&#x5BFF;&#x5FD7;&#x5E86;&#x5EF6;&#x8FDF;&#x53EF;&#x80FD;&#x662F;&#x540E;&#x679C;&#x90FD;&#x8FC7;&#x4E8E;&#x7A33;&#x5B9A;&#x7684;&#x5375;&#x9EC4;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5FAE;&#x7BA1;&#x548C;&#x7C98;&#x63A5;&#x6027;&#x80FD;&#x6216;&#x52A8;&#x529B;&#x7684;&#x6DF1;&#x90E8;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x7684;&#x7F3A;&#x9677;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x8FD8;&#x663E;&#x793A; Eomesa &#x662F;&#x6240;&#x5FC5;&#x9700;&#x7684;&#x6B63;&#x5E38;&#x8868;&#x8FBE;&#x7684;&#x5185;&#x80DA;&#x5C42;&#x6807;&#x8BB0; sox32&#x3001; &#x82EF;&#x6559;&#x548C; og9x &#xFF1B;&#x4F46;&#x662F;&#x5B83;&#x4E0D;&#x662F;&#x5185;&#x80DA;&#x5C42;&#x5F62;&#x6210;&#x7684;&#x5FC5;&#x8981;&#x6761;&#x4EF6;&#x3002;

&#x5916;&#x5305;&#x542F;&#x52A8;&#x548C;&#x8FDB;&#x5C55;&#x7684;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C; Eomesodermin A.&#x5FAE;&#x5206;&#x8C03;&#x8282;

The T-box transcription factor Eomesodermin (Eomes) has been implicated in patterning and morphogenesis in frog, fish and mouse. In zebrafish, one of the two Eomes homologs, Eomesa, has been implicated in dorsal-ventral patterning, epiboly and endoderm specification in experiments employing over-expression, dominant-negative constructs and antisense morpholino oligonucleotides. Here we report for the first time the identification and characterization of an Eomesa mutant generated by TILLING. We find that Eomesa has a strictly maternal role in the initiation of epiboly, which involves doming of the yolk cell up into the overlying blastoderm. By contrast, epiboly progression is normal, demonstrating for the first time that epiboly initiation is genetically separable from progression. The yolk cell microtubules, which are required for epiboly, are defective in maternal-zygotic eomesa mutant embryos. In addition, the deep cells of the blastoderm are more tightly packed and exhibit more bleb-like protrusions than cells in control embryos. We postulate that the doming delay may be the consequence both of overly stabilized yolk cell microtubules and defects in the adhesive properties or motility of deep cells. We also show that Eomesa is required for normal expression of the endoderm markers sox32, bon and og9x; however it is not essential for endoderm formation.

Differential regulation of epiboly initiation and progression by zebrafish Eomesodermin A.

Le T-box facteur de transcription Eomesodermin (EOMES) a &#xE9;t&#xE9; impliqu&#xE9; dans la structuration et de la morphogen&#xE8;se chez la grenouille, le poisson et la souris. Chez le poisson z&#xE8;bre, l&#x26;#39;un des homologues EOMES deux, Eomesa, a &#xE9;t&#xE9; impliqu&#xE9; dans dorso-ventral de motifs, et la sp&#xE9;cification &#xE9;pibolie endoderme dans les exp&#xE9;riences qui emploient plus de l&#x26;#39;expression, dominants n&#xE9;gatifs des constructions et des oligonucl&#xE9;otides antisens morpholino. Nous rapportons ici pour la premi&#xE8;re fois l&#x26;#39;identification et la caract&#xE9;risation d&#x26;#39;un mutant Eomesa g&#xE9;n&#xE9;r&#xE9; par TILLING. Nous constatons que Eomesa a un r&#xF4;le strictement maternelle dans l&#x26;#39;initiation de &#xE9;pibolie, ce qui implique doming de la cellule jaune vers le haut dans le blastoderme sus-jacente. En revanche, la progression est normal &#xE9;pibolie, d&#xE9;montrant pour la premi&#xE8;re fois que l&#x26;#39;initiation &#xE9;pibolie est g&#xE9;n&#xE9;tiquement s&#xE9;parable de la progression. Les microtubules des cellules vitellines, qui sont n&#xE9;cessaires pour &#xE9;pibolie, sont d&#xE9;fectueux dans les embryons zygotiques eomesa maternelle-mutantes. En outre, les cellules profondes du blastoderme sont plus serr&#xE9;s et pr&#xE9;sentent plus de bulle-comme des saillies que les cellules dans les embryons de contr&#xF4;le. Nous postulons que le retard doming peut &#xEA;tre la cons&#xE9;quence &#xE0; la fois de trop stabilis&#xE9;es microtubules des cellules vitellines et les d&#xE9;fauts dans les propri&#xE9;t&#xE9;s adh&#xE9;sives ou la motilit&#xE9; des cellules profondes. Nous montrons aussi que Eomesa est n&#xE9;cessaire pour l&#x26;#39;expression normale des marqueurs endodermiques sox32, Bon et og9x, mais il n&#x26;#39;est pas indispensable pour la formation de l&#x26;#39;endoderme.

R&#xE8;glement diff&#xE9;rentiel de l&#x26;#39;initiation et la progression par &#xE9;pibolie Zebrafish Eomesodermin Une

Der T-Box-Transkriptionsfaktor Eomesodermin (Eomes) hat in Musterbildung und Morphogenese Frosch, Fisch und Maus verwickelt. In Zebrafisch hat eines der zwei Eomes UCP1, Eomesa, dorsal-Ventral Musterung, Epibolie und Endodermis Spezifikation in Experimenten &Uuml;berexpression, Dominant-negativen Konstrukte und Morpholino antisense Oligonukleotide verwickelt. Hier berichten wir zum ersten Mal, die Identifizierung und Charakterisierung von eine Eomesa Mutante generiert von TILLING. Wir finden, dass Eomesa eine streng Mutterrolle in der Einleitung der Epibolie, die betrifft doming der Eigelb Zelle hat bis in die dar&uuml;berliegenden Blastoderm. Epibolie Fortschreiten ist hingegen normal, zeigen zum ersten Mal, das Epibolie Einleitung genetisch von trennen Fortschreiten ist. Das Eigelb Zelle Mikrotubuli, die f&uuml;r Epibolie ben&ouml;tigt werden, sind Defekte im m&uuml;tterlichen zygotic Eomesa mutant Embryonen. Dar&uuml;ber hinaus die tiefen Zellen das Blastoderm sind mehr dicht gepackt und zeigen weitere Bleb-artigen Vorspr&uuml;ngen als Zellen im Steuerelement Embryonen. Wir gehen davon aus, dass die doming Verz&ouml;gerung zur Folge sowohl &uuml;berm&auml;&szlig;ig stabilisierte Eigelb Zelle Mikrotubuli und Defekte in der Klebeeigenschaften oder Motilit&auml;t des tiefen Zellen m&ouml;glicherweise. Wir zeigen auch, dass Eomesa f&uuml;r normale Ausdruck der Endodermis Marker sox32, Bon und og9x erforderlich ist; jedoch ist es nicht notwendig f&uuml;r Entoderm Bildung.

Differenzielle Regulierung der Epibolie Initiierung und Progression von Zebrafish Eomesodermin A.

Il fattore di trascrizione T-box EOMES (eomesodermin) &egrave; stato implicato nella modellatura e morfogenesi in rana, il pesce e del mouse. In zebrafish, uno dei due omologhi di eomesodermin, Eomesa, &egrave; stato implicato nella specifica patterning, epiboly ed endoderma dorsale-ventrale esperimenti impiegando sovraespressione, oligonucleotidi antisense oligonucleotides e costrutti dominante-negativo. Riportiamo per la prima volta l&#39;identificazione e la caratterizzazione di un mutante di Eomesa generati da TILLING. Troviamo che Eomesa ha un ruolo strettamente materno nell&#39;apertura del epiboly, che coinvolge il marcatore della cella tuorlo fino nel blastoderma sovrastante. Al contrario, epiboly la progressione &egrave; normale, dimostrando per la prima volta che epiboly iniziazione &egrave; geneticamente separabili dalla progressione. I microtubuli delle cellule tuorlo, che sono necessari per epiboly, sono difettosi negli embrioni mutanti eomesa materna-zygotic. Inoltre, le cellule profonde il blastoderma sono pi&ugrave; strettamente imballate ed esibiscono pi&ugrave; protrusioni bleb-come delle cellule negli embrioni di controllo. Abbiamo postulato che il ritardo doming pu&ograve; essere la conseguenza sia dei microtubuli delle cellule tuorlo eccessivamente stabilizzato e difetti nella propriet&agrave; adesive o motilit&agrave; delle cellule profonde. Mostriamo anche che Eomesa &egrave; necessaria per la normale espressione dell&#39;endoderma marcatori sox32, bon e og9x; Tuttavia non &egrave; essenziale per la formazione endoderma.

Regolamento differenziale di epiboly iniziazione e progressione di zebrafish Eomesodermin A.

T-&#x30DC;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x8EE2;&#x5199;&#x56E0;&#x5B50;Eomesodermin&#xFF08;Eomes&#xFF09;&#x306F;&#x3001;&#x30AB;&#x30A8;&#x30EB;&#x3001;&#x9B5A;&#x3001;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306E;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30CB;&#x30F3;&#x30B0;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x5F62;&#x614B;&#x5F62;&#x6210;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#x3067;&#x306F;&#x3001;2&#x3064;&#x306E;Eomes&#x30DB;&#x30E2;&#x30ED;&#x30B0;&#x3001;Eomesa&#x3001;&#x306E;&#x3044;&#x305A;&#x308C;&#x304B;&#x304C;&#x904E;&#x5270;&#x767A;&#x73FE;&#x3001;&#x30C9;&#x30DF;&#x30CA;&#x30F3;&#x30C8;&#x30CD;&#x30AC;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x69CB;&#x7BC9;&#x3057;&#x3001;&#x30A2;&#x30F3;&#x30C1;&#x30BB;&#x30F3;&#x30B9;&#x30E2;&#x30EB;&#x30D5;&#x30A9;&#x30EA;&#x30CE;&#x30AA;&#x30EA;&#x30B4;&#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30AA;&#x30C1;&#x30C9;&#x3092;&#x200B;&#x200B;&#x7528;&#x3044;&#x305F;&#x5B9F;&#x9A13;&#x306B;&#x304A;&#x3044;&#x3066;&#x80CC;&#x8179;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30CB;&#x30F3;&#x30B0;&#x3001;&#x88AB;&#x5305;&#x3068;&#x5185;&#x80DA;&#x8449;&#x306E;&#x4ED5;&#x69D8;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x521D;&#x3081;&#x3066;&#x8015;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x751F;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x305F;Eomesa&#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x306E;&#x540C;&#x5B9A;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x7279;&#x5FB4;&#x4ED8;&#x3051;&#x3092;&#x5831;&#x544A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;Eomesa&#x304C;&#x8986;&#x3046;&#x80DA;&#x76E4;&#x8449;&#x306B;&#x5375;&#x9EC4;&#x7D30;&#x80DE;&#x304B;&#x3089;&#x69CB;&#x6210;&#x3055;&#x30C9;&#x30FC;&#x30DF;&#x30F3;&#x30B0;&#x542B;&#x3080;&#x88AB;&#x5305;&#x306E;&#x958B;&#x59CB;&#x306B;&#x53B3;&#x5BC6;&#x306B;&#x6BCD;&#x89AA;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x62C5;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x308F;&#x304B;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5BFE;&#x7167;&#x7684;&#x306B;&#x3001;&#x88AB;&#x5305;&#x9032;&#x884C;&#x304C;&#x88AB;&#x5305;&#x958B;&#x59CB;&#x304C;&#x9032;&#x884C;&#x304B;&#x3089;&#x907A;&#x4F1D;&#x7684;&#x306B;&#x5206;&#x96E2;&#x53EF;&#x80FD;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x521D;&#x3081;&#x3066;&#x5B9F;&#x8A3C;&#x3057;&#x3001;&#x6B63;&#x5E38;&#x306A;&#x52D5;&#x4F5C;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x88AB;&#x5305;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x306A;&#x5375;&#x9EC4;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x7BA1;&#x306F;&#x3001;&#x6BCD;&#x4F53;&#x63A5;&#x5408;&#x4F53;eomesa&#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x80DA;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x6B20;&#x9665;&#x304C;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;&#x80DA;&#x76E4;&#x8449;&#x306E;&#x6DF1;&#x3044;&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x3001;&#x3088;&#x308A;&#x5BC6;&#x306B;&#x8A70;&#x307E;&#x3063;&#x3066;&#x304A;&#x308A;&#x3001;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C8;&#x30ED;&#x30FC;&#x30EB;&#x306E;&#x80DA;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x3088;&#x308A;&#x3082;&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x6C34;&#x75B1;&#x72B6;&#x306E;&#x7A81;&#x8D77;&#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x30C9;&#x30FC;&#x30DF;&#x30F3;&#x30B0;&#x306E;&#x9045;&#x5EF6;&#x306F;&#x3001;&#x4E21;&#x65B9;&#x306E;&#x6DF1;&#x3044;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x63A5;&#x7740;&#x6027;&#x3084;&#x904B;&#x52D5;&#x6027;&#x306B;&#x904E;&#x5EA6;&#x306B;&#x5B89;&#x5B9A;&#x3057;&#x305F;&#x5375;&#x9EC4;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x7BA1;&#x3068;&#x6B20;&#x9665;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x304B;&#x3082;&#x3057;&#x308C;&#x306A;&#x3044;&#x3068;&#x4EEE;&#x5B9A;&#x3059;&#x308B;&#x3002;&#x307E;&#x305F;&#x3001;Eomesa&#x304C;&#x5185;&#x80DA;&#x8449;&#x30DE;&#x30FC;&#x30AB;&#x30FC;sox32&#x3001;&#x30DC;&#x30F3;&#x3068;og9x&#x306E;&#x6B63;&#x5E38;&#x306A;&#x767A;&#x73FE;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x3002;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x306F;&#x5185;&#x80DA;&#x8449;&#x306E;&#x5F62;&#x6210;&#x306B;&#x5FC5;&#x9808;&#x3067;&#x306F;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;

&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;Eomesodermin&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x88AB;&#x5305;&#x306E;&#x958B;&#x59CB;&#x3068;&#x9032;&#x884C;&#x306E;&#x5DEE;&#x52D5;&#x898F;&#x5236;

T &#xAE30;&#xBCF8; &#xC804;&#xC0AC; &#xC778;&#xC790; Eomesodermin (Eomes) &#xD328;&#xD134;&#xD654;&#xC640; &#xAC1C;&#xAD6C;&#xB9AC;, &#xBB3C;&#xACE0;&#xAE30;&#xC640; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; morphogenesis&#xC5D0; &#xC5F0;&#xB8E8; &#xB418;&#xC5B4;&#xC788;&#xB2E4;. Zebrafish&#xC5D0; &#xD558;&#xB098; &#xB450; Eomes homologs, Eomesa, over-expression, &#xC9C0;&#xBC30;&#xC801;&#xC778; &#xBD80;&#xC815; &#xAD6C;&#xBB38; &#xBC0F; &#xC13C;&#xC2A4; morpholino oligonucleotides &#xC2E4;&#xD5D8; &#xBCF5; &#xB4F1; &#xD328;&#xD134;&#xD654;, epiboly &#xBC0F; endoderm &#xC0AC;&#xC591;&#xC5D0; &#xC5F0;&#xB8E8; &#xB418;&#xC5B4; &#xC788;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30;&#xC11C; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; TILLING&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xCC98;&#xC74C;&#xC73C;&#xB85C; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xBC0F; Eomesa &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xC0DD;&#xC131;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xBCF4;&#xACE0;&#xC11C;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xCC3E;&#xC744; Eomesa overlying blastoderm&#xB85C; &#xCD5C;&#xB300;&#xC758; &#xB178; &#xB978; &#xC790; &#xC140; doming&#xC744; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558;&#xB294; epiboly&#xC758; &#xAC1C;&#xC2DC;&#xC5D0; &#xC5C4;&#xACA9; &#xD558; &#xAC8C; &#xBAA8;&#xC131; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xD558;&#xACE0;&#xC788;&#xB2E4;. &#xB300;&#xC870;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C;, epiboly &#xC9C4;&#xD589; epiboly &#xAC1C;&#xC2DC; &#xC9C4;&#xD589;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBD84;&#xB9AC; &#xAC00;&#xB2A5;&#xC740; &#xCC98;&#xC74C;&#xC73C;&#xB85C; &#xC2DC;&#xC5F0; &#xD558;&#xB294; &#xC815;&#xC0C1;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. Epiboly &#xC704;&#xD574; &#xC694;&#xAD6C; &#xB418;&#xB294; &#xB178; &#xB978; &#xC790; &#xC140; microtubules &#xBAA8;&#xC131; zygotic eomesa &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xCCB4; &#xBC30;&#xC544;&#xC5D0; &#xACB0;&#xD568;&#xC774; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C;,&#xB294; blastoderm&#xC758; &#xAE4A;&#xC740; &#xC140; &#xB354; &#xB2E8;&#xB2E8;&#xD788; &#xD3EC;&#xC7A5; &#xD558; &#xACE0; &#xC81C;&#xC5B4; &#xBC30;&#xC544;&#xC758; &#xC140; &#xBCF4;&#xB2E4; &#xB354; bleb &#xAC19;&#xC740; &#xB3CC;&#xCD9C; &#xC804;&#xC2DC;. &#xC6B0;&#xB9AC; doming &#xC9C0;&#xC5F0; &#xBAA8;&#xB450; &#xC9C0;&#xB098;&#xCE58;&#xAC8C; &#xC548;&#xC815;&#xB41C; &#xB178; &#xB978; &#xC790; &#xC140; microtubules &#xBC0F; &#xC811;&#xCC29; &#xC18D;&#xC131; &#xB610;&#xB294; &#xAE4A;&#xC740; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC6B4;&#xB3D9; &#xC131; &#xACB0;&#xD568;&#xC758; &#xACB0;&#xACFC; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xACF5;&#xC900;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xB610;&#xD55C; Eomesa endoderm &#xB9C8;&#xCEE4; sox32, &#xBD09; &#xBC0F; og9x;&#xC758; &#xC77C;&#xBC18;&#xC801;&#xC778; &#xD45C;&#xD604;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD544;&#xC694; &#xD558;&#xB2E4;&#xB294; &#xD45C;&#xC2DC; &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098; endoderm &#xD615;&#xC131;&#xC744; &#xC704;&#xD574; &#xD544;&#xC218;&#xC801;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Epiboly &#xAC1C;&#xC2DC; &#xBC0F; &#xC9C4;&#xD589; zebrafish Eomesodermin &#xB300;&#xB2F5; &#xD558; &#xC5EC; &#xCC28;&#xB4F1; &#xADDC;&#xC81C;

El T-box factor de transcripci&#xF3;n Eomesodermin (Eomes) ha sido implicada en la morfog&#xE9;nesis y la morfog&#xE9;nesis de la rana, el pescado y el rat&#xF3;n. En el pez cebra, uno de los dos hom&#xF3;logos Eomes, Eomesa, ha sido implicado en dorsal-ventral patr&#xF3;n, y la especificaci&#xF3;n epibolia endodermo en los experimentos que emplean un exceso de expresi&#xF3;n, las construcciones dominante-negativas y oligonucle&#xF3;tidos antisentido morfolino. Aqu&#xED; mostramos por primera vez la identificaci&#xF3;n y caracterizaci&#xF3;n de un mutante Eomesa generado por TILLING. Se encuentra que Eomesa tiene una funci&#xF3;n estrictamente materna en la iniciaci&#xF3;n de epibolia, que implica doming de la celda de yema de arriba en el blastodermo suprayacente. Por el contrario, epibolia progresi&#xF3;n es normal, demostrando por primera vez que la iniciaci&#xF3;n epibolia es gen&#xE9;ticamente separable de progresi&#xF3;n. Los microt&#xFA;bulos de c&#xE9;lulas de huevo, que son necesarios para epibolia, son defectos de la madre y el cig&#xF3;ticos embriones eomesa mutantes. Adem&#xE1;s, las c&#xE9;lulas profundas del blastodermo son m&#xE1;s compactos y exhiben m&#xE1;s ampolla-como protuberancias de c&#xE9;lulas en embriones de control. Postulamos que el retraso abombamiento puede ser la consecuencia tanto de excesivamente estabilizadas microt&#xFA;bulos yema de c&#xE9;lulas y defectos en las propiedades adhesivas o la motilidad de las c&#xE9;lulas de profundidad. Tambi&#xE9;n mostramos que Eomesa se requiere para la expresi&#xF3;n normal de los marcadores del endodermo sox32, Bon y og9x, sin embargo, no es esencial para la formaci&#xF3;n del endodermo.

Bruce W. Draper

Molecular and Cellular Biology

University of California, Davis

A High-Throughput Method For Zebrafish Sperm Cryopreservation and In Vitro Fertilization