Oturum Aç

DNA isolation protocols can be fast and straightforward or complex and time-consuming depending on the type and quality of DNA required for further processing. For example, plasmid DNA extraction is a bit more complicated than genomic DNA extraction because of the need for an appropriate lysis method to separate plasmid DNA from gDNA during isolation. However, for specific applications, such as long-range DNA sequencing that require a good yield of high- quality DNA samples, we need to follow specific protocols even for genomic DNA extraction.

Types of genomic DNA extraction methods

The main aim of genomic DNA extraction methods is to separate gDNA from proteins, RNA, and other cell content. It involves four basic steps - 1. Disruption of the cell structure mechanically or using chemicals to obtain the cell lysate 2. Protection of DNA from degradation during processing 3. Separation of the soluble DNA from cell debris 4. Elution of purified DNA.

Most genomic DNA isolation protocols are either solution-based or solid-phase extraction methods. Solution-based methods rely on precipitation and centrifugation steps to separate DNA from other cellular material, followed by organic extraction or "salting out" to separate soluble DNA from cellular proteins. The final DNA precipitation is done using ethanol. In contrast, solid-phase extraction methods use solid support, such as silica or cellulose matrices, to bind DNA, followed by washing and DNA elution from the solid support. It involves centrifugation, vacuum, or magnetic methods to separate the bound DNA from other cellular components.

The choice of gDNA extraction method depends on the type of sample, the number of samples to be processed at once, and the downstream application of the DNA.

Etiketler

DNA IsolationDNA ExtractionPlasmid DNAGenomic DNALysis MethodLong range DNA SequencingYield Of High quality DNAGenomic DNA Extraction MethodsDisruption Of Cell StructureProtection Of DNASeparation Of Soluble DNAElution Of Purified DNASolution based MethodsSolid phase Extraction MethodsPrecipitation And Centrifugation StepsOrganic ExtractionSalting OutEthanol Precipitation

Bölümden 15:

article

Now Playing

15.2 : DNA Isolation

DNA ve RNA Çalışmaları

36.9K Görüntüleme Sayısı

article

15.1 : Rekombinant DNA

DNA ve RNA Çalışmaları

16.5K Görüntüleme Sayısı

article

15.3 : DNA Agaroz Jel Elektroforezi

DNA ve RNA Çalışmaları

91.7K Görüntüleme Sayısı

article

15.4 : DNA Problarının Etiketlenmesi

DNA ve RNA Çalışmaları

8.0K Görüntüleme Sayısı

article

15.5 : Güney Lekesi

DNA ve RNA Çalışmaları

17.6K Görüntüleme Sayısı

article

15.6 : DNA Mikrodizileri

DNA ve RNA Çalışmaları

16.9K Görüntüleme Sayısı

article

15.7 : Tamamlayıcı DNA

DNA ve RNA Çalışmaları

5.5K Görüntüleme Sayısı

article

15.8 : FISH - Floresan Yerinde Hibridizasyon

DNA ve RNA Çalışmaları

19.0K Görüntüleme Sayısı

article

15.9 : PCR - Polimeraz Zincir Reaksiyonu

DNA ve RNA Çalışmaları

80.7K Görüntüleme Sayısı

article

15.10 : Gerçek Zamanlı RT-PCR

DNA ve RNA Çalışmaları

56.0K Görüntüleme Sayısı

article

15.11 : RACE - cDNA Uçlarının Hızlı Amplifikasyonu

DNA ve RNA Çalışmaları

6.2K Görüntüleme Sayısı

article

15.12 : Sanger Dizileme

DNA ve RNA Çalışmaları

750.4K Görüntüleme Sayısı

article

15.13 : Yeni Nesil Dizileme

DNA ve RNA Çalışmaları

85.6K Görüntüleme Sayısı

article

15.14 : RNA dizisi

DNA ve RNA Çalışmaları

9.6K Görüntüleme Sayısı

article

15.15 : Genom Açıklama ve Derleme

DNA ve RNA Çalışmaları

18.6K Görüntüleme Sayısı

See More

JoVE Logo

Gizlilik

Kullanım Şartları

İlkeler

Araştırma

Eğitim

JoVE Hakkında

Telif Hakkı © 2020 MyJove Corporation. Tüm hakları saklıdır