JoVE Logo

Oturum Aç

Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliği gereklidir. Oturum açın veya ücretsiz deneme sürümünü başlatın.

Bu Makalede

  • Özet
  • Özet
  • Protokol
  • Tartışmalar
  • Açıklamalar
  • Teşekkürler
  • Malzemeler
  • Referanslar
  • Yeniden Basımlar ve İzinler

Özet

Bu raporda, ışıkla sertleşen diş reçine elektrotlar veya kronik deneylerde mikrodiyaliz probları montaj tabanı için yeni bir uygulama öneriyorum. Bu malzeme, kafatası doğrudan yapıştırma sağlar.

Özet

Kronik kayıt deneylerde, kendi kendine sertleşen diş akrilik reçineler elektrotlar veya mikrodiyaliz-probları bir montaj üssü olarak kullanılmıştır. Bu akrilik kemik bağı olmadığından, vida çapa olarak kullanılmıştır. Ancak, ispinozlar veya fare gibi küçük deney hayvanlarında, kafatasları çok kırılgan ve başarılı bir çapa tutamaz. Bu raporda, ışıkla sertleşen diş reçine elektrotlar veya kronik deneylerde mikrodiyaliz probları montaj tabanı için yeni bir uygulama öneriyorum. Bu malzeme, kafatası doğrudan yapıştırma sağlar. Bu nedenle, demir vida gerekmez ve cerrahi alanında önemli ölçüde azaltılabilir. Geçmiş deneyimler, yapıştırma etkisi en fazla 2 ay koruduğunu göstermektedir. Konvansiyonel reçine pencere malzemeleri, esnek ve uygulanabilir bir kaç dakika. Ancak, bu diş yapıştırıcılar için çalışma süresi pencere, önemli ölçüde daha geniş ve ayarlanabilir.

Protokol

1. Adım. Prob implantasyon hazırlanması

  1. Anestezi (video gösterilmez)

    Interperitoneal ketamin enjeksiyonu (12.5 mg / kg vücut ağırlığı) ve xylazine (25 mg / kg) karışımı cerrahi anestezi istikrarlı bir seviyede üretmek için her kuş anestezisi.

  2. Stereotaksik bir çerçeveye Fix bir kafa

    Xylocaine (TM) jöle, kulak bar basınç yerel ağrılarını azaltmak için kullanın . Kuş baş, kulak bar ve 45 ° açıyla kafa tutan bir gaga sahibinin oluşan bir stereotaksik aparat sabittir . Implantasyonu için stereotaksik cerrahi sırasında, termal kontrol ile cerrahi ped kuş vücut ılık (sıcaklık = 34 ~ 36 ° C).

  3. Cerrahi alan dezenfekte edin

    Ameliyat öncesinde isodine (TM) ile cerrahi alanında dezenfekte edin.

2. Adım. Stereotaksik konumlandırma

  1. Referans noktası hizalaması

    Lambda (Y-noktası) ve işareti Y-nokta boya dolu bir pipet ile kukla prob (cam mikropipet) hizalayın . Kalan son tracer çalışma Dextran-TMR video kullanıldı.

  2. Cilt insizyonu

    Cilt çıkarın ve kafatası yüzeyinde ortaya çıkarmak. Sonra, pamuklu çubukla kafatası yüzeyi temiz.

  3. Kukla kanül yerleştirilmesi (yatay yönde)

    Hedef site (AP ekseni ve Yanal koordinasyon) kukla kanül taşıyın

  4. Küçük kraniotomi ve dura mater kesi.

    Kraniotomi için iyi bir forseps ve duramater kesiler için ince bir enjeksiyon iğnesi (30 G) kullanın. Sonra, kafatası yüzeyi temizleyin.

  5. Kukla kanül Final konumlandırma (implantasyon)

    Mikrodiyaliz prob amaçlanan hedef bölge üzerinde 0.30 mm kılavuz kanül ucu bulun. Son olarak, temiz ve kuru bir yüzey sert yapıştırılması için gerekli olduğundan, tekrar kafatası yüzeyi temiz.

Adım 3. Kraniyal yüzey ön hazırlık

(Diş ürün "doğrudan dolgu restorasyonu" için benzer bir prosedür istihdam edilecektir.)

  1. Primer tedavi
    1. Bir çanak B Mix Primar sıvı.
    2. Kafatasına küçük bir fırça ile yüzey karışımı uygulayın.
    3. 30 saniye bekletin.
    4. Hafif hava akımı ile kurulayın. (Yıkamayın.)

  2. Bonding ajanı uygulaması
    1. Bonding ajanı kafatasına küçük bir fırça ile yüzey üzerinde uygulayın.
    2. Hafif bir hava akımı uygulayın. (Yıkamayın.)
    3. Hafif-20 saniye boyunca tedavi.

Adım 4. Montaj kompozit

  1. Mount düz plugger reçine

    Düz plugger mevcut değilse, bir mikro-spatül yerine kullanılabilir.

  2. Işık kür
  3. Artımlı montaj

    Artımlı montaj reçine tam reaksiyon sağlamak için tavsiye edilir.

    Artımlı montaj için, her montaj önce bonding ajanı geçerlidir.

  4. Son sertleşme ve ışıkla sertleşen kompozit kalıp.
  5. Ameliyat sonu

Cerrahi alanı temizleyin (Gentamisin merhem) antibiyotik uygulamak ve stereotaksik alev hayvan kaldırmak. Sonra, bir termo-kontrollü odası (sıcaklık = 33-35 ° C) anestezi sonrası kurtarma için hayvan tutun.

Videoda görüldüğü gibi, herhangi bir anormal davranış, ertesi gün ameliyat sonrası herhangi bir hayvan gözlendi.

Tartışmalar

Geleneksel kendi kendini iyileştirme akrilik reçine uygulama ile karşılaştırıldığında, piyasaya teknik birkaç önemli avantajı vardır:

1. Doğrudan bağlama:
Bir süre için kendi kendini iyileştirme akrilik kemik bağlı olabilir ama bu kemiğe bağlı değildir. Bu nedenle, ankraj vidaları (Bkz. Şekil 2A) bir montaj üssü düzeltmek için gereklidir. Buna karşılık, ışıkla sertleşen reçine kemik doğrudan vida gerekli değildir (Şekil 2B) bağ. Bu nedenle, montaj tabanı boyutu önemli ölç?...

Açıklamalar

Deneyler hayvanın beyin deney bilim enstitüsü, RIKEN (RIKEN-BSI) ve enstitünün hayvan etik kurul onaylı yönergelere uygun olarak yapılmıştır.

Teşekkürler

Biz bu çalışmaları sırasında nazik destekler ve verimli tavsiyeleri RIKEN-BSI meslektaşlarımıza teşekkür ederiz. Profesör Shigemi Mori, Profesör G bor Juh sz, Dr benim samimi takdirlerimi ifade etmek istiyorum. İleri Araştırmalar Yüksek Lisans Üniversitesi, Japonya lisansüstü ders sırasında bana mikrodiyaliz yöntemin tavsiye Kiyoji Matsuyama, Katalin AK kesi ve rp d Dobolyi. Son olarak, Sayın Chris Sarnecky ve Dr. Akitsugu Takasu video kaydı destekler için teşekkür ederim.

Malzemeler

Fotoğraf 1A mikrodiyaliz prob (a), bir kap somunu (b) ve (c) bir kılavuz kanül gösterir. Bu fotoğrafta, kılavuz kanül doğrudan kafatasına bağlı diş reçine ile çevrilidir. Fotoğraf B ilaç perfüzyon sırasında bir kuş gösterir. Başın üst kısmında ince bir Tefron tüpüne bağlı bir mikrodiyaliz prob vardır. Ölçeği bar B A ve 2 cm = 1 cm, sırasıyla.

figure-materials-362
Şekil 1 - mikrodiyaliz prob (A) ve ilaç perfüzyon sırasında bir kuş fotoğrafları (B)

Referanslar

  1. Adell, A., Artigas, F., Boulton, A., Baker, G., Bateson, A. In vivo Brain microdialysis: Principles and applications. In Vivo Neuromethods: Neuromethods. 32, 325-357 (1998).
  2. Kendrick, K., Robinson, T., Justice, J., Bateson, A. Microdialysis in large unrestrained animals: neuroendocrine and behavioral studies of acetylcholine, amino acid, monoamine and neuropeptide release in the sheep. Microdialysis in the Neuroscience. 7, 327-348 (1991).
  3. Oakley, B., Schafer, R. . Experimental Neurobiology: A laboratory Manual. , (1978).
  4. Okumura, T., Yamashita, Y., Okanoya, K., Tani, J. Function of the sensori-motor nucleus NIf in generation of complex syntactical song in the Bengalese Finch I. A Biological study. Soc. Neurosci Abst. 33, (2007).
  5. Boulton, A., Baker, G., Robinson, T., Bateson, A. The relation of brain electrical activity to behavior. In Vivo Neuromethods: Neuromethods. 32, 325-357 (1998).
  6. Yamashita, Y., Okumura, T., Okanoya, K., Tani, J. Function of the sensori-motor nucleus NIf in generation of complex syntactical song in the Bengalese finch. , 101-104 (2007).

Yeniden Basımlar ve İzinler

Bu JoVE makalesinin metnini veya resimlerini yeniden kullanma izni talebi

Izin talebi

Daha Fazla Makale Keşfet

N robilimSay 6beyinn ronstereotaksikSongbirdre ine

This article has been published

Video Coming Soon

JoVE Logo

Gizlilik

Kullanım Şartları

İlkeler

Araştırma

Eğitim

JoVE Hakkında

Telif Hakkı © 2020 MyJove Corporation. Tüm hakları saklıdır