Göttingen Minipig Cerrahi Temel Teknikleri: Entübasyon, Mesane Kateterizasyon, Femoral Gemi Kateterizasyon, ve Transcardial Perfüzyon

Özet

Bilim yerli ve minyatür domuz kullanımı son yıllarda önemli ölçüde artmıştır. Entübasyon, transüretral mesane kateterizasyonu, femoral arter ve ven kateterizasyon, yanı sıra transcardial perfüzyon nasıl gerçekleştirileceğinin ortaya koyarak, biyomedikal araştırma Göttingen minipigs değerini daha da artırmayı hedefliyoruz.

Özet

Göttingen minipig nörobilim, toksikoloji, diyabet, obezite, ve deneysel cerrahi gibi konularda araştırma ortaya çıkması, insan anatomisi ve ^fizyolojisi 1-6 bu hayvanların yakın benzerlik yansıtır. Göttingen minipig boyutu cerrahi kullanılmasına izin verir İnsanlarda ^6-8 kullanılan benzer ekipman ve gelişmiş görüntüleme yöntemleri. Bu öğretim video amacı, trakeal entübasyon, transüretral mesane kateterizasyonu, femoral arter ve ven kateterizasyon, yanı sıra transcardial perfüzyon nasıl gerçekleştirileceği göstererek, biyomedikal araştırma minipigs değeri bilincini artırmak.

Endotrakeal entübasyon, solunum yolu tutar destekli havalandırma izin ve aspiratlarda gelen hava yolları korur çünkü minipig, genel anestezi uğrar zaman yapılmalıdır. Transüretral mesane kateterizasyonu, uzun cerrahi prosedürler sırasında ile ilgili hidrasyon durumu hakkında yararlı bilgiler yanı sıra böbrek ve kardiyovasküler fonksiyon sağlayabilir. Ayrıca, üriner kateterizasyon hassas mediko-teknik donanım ve hayvan zarar ve gereksiz vagal tonusun artmış ve değişmiş fizyolojik parametrelere bağlı olarak deney etkileyebilir ağrılı mesane uzantısı kirlenmesini önlemek. Arteriyel ve venöz kateterizasyon tekrarlanan kan örnekleri elde etmek ve çeşitli fizyolojik parametrelerin izlenmesi için yararlıdır. Çerçeve tabanlı stereotaksik nöroşirürji ve beyin görüntüleme ile ilgili deneyler yaparken femoral damarların Kateterizasyon, erişim kolaylığı için boyun damarları, kateterizasyon tercih edilir. Sağkalımın damar kateterizasyon yaparken, sıkı aseptik teknik enfeksiyonları ⁶ önlemek için istihdam edilmelidir. Transcardial perfüzyon en etkili fiksasyon yöntemi, histoloji ve histokimyada ^2,9 minipig organları hazırlanması, önde gelen sonuçlar vermektedir. , Genel domuz anestezi, cerrahi ve deneysel teknikler hakkında daha fazla bilgi için 2007 Swindle bakın. Premedikasyon ve anestezi indüksiyonu hakkında ek bilgi, destekli havalandırma, analjezi, Göttingen minipigs öncesi ve ameliyat sonrası bakım azından internet üzerinden http://www.minipigs.com ^10. Domuz anatomisi hakkında geniş bilgi için, Nikel ve ark bakın . Vol. ^1-05 Kasım.

Protokol

1. Entübasyon

1. Endotrakeal entübasyon için gerekli ekipman: destekli havalandırma, ağız, künt ucu ile düşük basınçlı emme, 17 ve 25 cm uzunluğunda arasında düz bir bıçak ile veteriner laringoskop, stile sahip, klimalı, şırınga, stetoskop ve yapışkan bant açmak için sapanlar anlamına gelir. Yetişkin Göttingen endotrakeal tüp boyutu minipigs için 5 ila 7 mm ¹⁰ uygun. Bu video 5.5 mm tüp ¹⁰ kullanıldı.
2. Minipig laringeal geçit düz tutulmasını sağlamak amacıyla sırtında yerleştirilir ve düzgün bir şekilde desteklenmektedir.
3. Dil hafifçe dışarı çekti ve çene kafa overextending bir asistan tarafından açık tutulur. Solunum yollarında ya da başın aşırı uzatma dönmesi, laringeal açılış tanımlamak için daha zor hale ve trakeal tüpün yerleştirilmesi komplike solunum yolları tıkamaktadır.
4. Laringoskop farenks boşluğuna geçti ve dil bastırmak için kullanılan, epiglot görünür. Emme ucu yumuşak damak epiglot yerinden için kullanılır. Sonra laringeal açılış açığa dil tabanına doğru yukarı doğru epiglot basın laringoskop ucu kullanılır.
5. Arytenoids kıkırdaklar ve ses tellerinin görüntülemek girer ve ekspirasyon sırasında endotrakeal tüp trakea içine hafif bir rotasyon ile hafifçe ileri düzeydedir.
6. Solunum yollarındaki şişme ve ödem neden olabilir aşırı enflasyon, özen üretim özelliklerine göre ise tüp kaf şişirilir. Domuzlar doğru kafa pulmonal lob havalandırılması bronşu var. Trakeal bifurkasyon üzerinde tüp yerleştirmek için bu nedenle önemlidir. Bu ve daha önemlisi, yapışkan bant kullanarak burnu düzeyinde tüpün proksimal ucuna bağlayarak doğru tüp boyutu ile kolaylaştırılır.
7. Minipig düzgün entübe olduğunda, havanın serbest geçiş tüp aracılığıyla hissedilir olmalıdır ve göğüs oskültasyon toraks sol ve sağ tarafında solunum sesleri açığa çıkarmalıdır.
8. Minipig izleme sistemi ile ventilatör bağlanması üzerine, fizyolojik ekspiratuar karbondioksit değerleri ölçülebilir ve ^6,10 gözlenen ventilatör ayarları karar solunum paterni takip karbondioksit eğrisi.
9. Karbon dioksit ve oksimetre değerleri başlangıçta premedikasyon ve anestezi indüksiyonu etkilenebilir. Ancak bu değerler uygun havalandırma ^6,10 ile hızlı bir şekilde normale döner. Yapay-destekli ventilasyon rağmen siyanoz herhangi bir işaret tüpün yanlış yerleştirilmesi göstermektedir. En yaygın hata, yanlışlıkla yemek borusuna tüp yerleştirilmesi.

2. Transüretral mesane kateterizasyonu

1. Bu prosedür, sadece kadın domuz için. Yetişkin minipigs Foley kateter Fransız boyutu, 8 ya da 10 uygun. Eksternal üretral açılış eğriliği ve boyutu nedeniyle, bir stile ile bir kateter tercih edilir. Uzun bıçaklar ile bir spekulum büyük hayvanlar için yararlı olabilir oysa küçük minipigs nazal spekulum kullanılabilir. Gerekli ekipman da, künt ucu forseps, tuzlu, yağ ile bir şırınga ve kapalı bir sistem idrar drenaj torbası içerir.
2. Minipig en iyi kateterizasyon sırasında dış üretral orifis görselleştirmek için bir asistan cranially arka ayakları çeker, lomber bölgenin altında bir destek sırtında yerleştirilir.
3. Yağlanır spekulum yerleştirilir vajinal duvarın görselleştirmek için açıldı. Kadın dış üretral açılış, vajina, serviks (Şekil 1A) mesafe bir buçuk yaklaşık üçte biri katta yer almaktadır . Ancak hayvan arkasına yerleştirilen, üretral açılış pozisyonuna ters görünecektir.
4. Kateterin ucu künt-forseps ile kontrol edilir, kateterin ucu forseps devamı. Üretral açıklık ^{(Şekil 1B)} kateter dikkatlice yerleştirin. Kateterizasyon sırasında aşırı güç kullanıldığı takdirde üretra kolay bir travma. Ancak, kateter sfinkterin geçinceye kadar hafif bir direnç başlangıçta hissettim olabilir. Bu sorun devam ederse, bu hayvan yeterince derin sedasyon olmadığını gösterebilir. Bu çözüm, bir süre bekleyin ve anestezi etkisi atalım.
5. Mesane kateteri ulaştığında, stile kaldırmak ve idrar akan görülecektir.
6. Üretim özelliklerine göre, tuzlu su ile balon şişirme ve balon mesane boynu yakalar kadar kateter yavaşça dışarı doğru çekin.
7. Kapalı sistem idrar drenaj torbası takın.
8. Hayvan işlerken kateter yanlışlıkla yer değiştirmesini engellemek için kuyruk Teyp kateter.

3. Femoral arter ve ven catheterization

1. Gerekli ekipman içerir: kateter açıklığını korumak için neşter, künt-tip cerrahi makas, doku forseps, ucu künt-küçük cerrahi forseps, küçük doku retraktörü kendinden tutucu, iğne tutucu, cerrahi swapları, iğne ile dikiş, gömme sıvısı olarak heparinli serum fizyolojik , iki adet 18-gauge IV kanül, tanıtıcı ve Seldinger kılavuz tel ile iki 4-Fransızca brite ucu kılıfları.
2. Anestezi derinliği işlemleri başlatmadan önce interdijital ağrı refleks testi ile değerlendirilmelidir.
3. Femoral arter ve ven sırtında yerleştirilen minipig yaklaştı ve arka bacak laterale doğru çekilmelidir. Medial safen arter yüzeysel nabız kaybolur gracilis ve sartorius kas arasındaki kıvrımda belirleyin.
4. Böylece yanlışlıkla medial safen damarlar zarar kaçınarak, bu noktaya kafatası boyuna yüzeysel bir cilt insizyonu olun.
5. Temel subkutan doku incelemek ucu künt bir makas kullanın.
6. Sartorius ve gracilis kas fasya bölümü medial safen küçük bir künt-tip cerrahi forseps ile ilk gemiler ve daha sonra dijital penetrasyon sitesine kafatası ayrılmıştır.
7. Femoral sinir ve damarların zarar vermemeye dikkat çekerken iki kas gruplarının küçük bir öz-istinat doku retraktörü ile ayrılmış.
8. Arter künt diseksiyon kullanılarak yaklaşık 1-2 cm uzunluğunda için izole edilmiştir.
9. Eğimli venflon iğne lümen yukarı bakacak şekilde çevirin. Iğne küçük bir damarı eğrilik daha kolay takip edecek şekilde bükün. Iğne hala küçük bir çaba ile ileri ve geri hareket sağlamak için unutmayın.
10. Arter delinirse, iğne geri çekilir ve Seldinger kılavuz tel venflon tüp sokulur.
11. Hafifçe kılavuz tel fiksasyonu sağlamak için arter üzerinde baskı uygularken venflon tüpü çıkarın.
12. Uygulayıcıya ile kılıf Seldinger tel üzerinden takılı ve tanıtıcı ve Seldinger tel kaldırıldıktan sonra, istenilen konuma gelişmiş.
13. Femoral ven hemen altında bulunan ve arterin medial. Künt diseksiyon kullanılarak ven izole sonra ven, arter için daha önce açıklandığı gibi kanüle edilmiştir.
14. Arter ve ven doğru kateterize olduğunu doğrulamak için, hem de kınlarındandır kan çizmek ve renk örneklerinin karşılaştırılması. Her bir kan örneği çizim, daha sonra kateter açıklığını korumak için heparinli serum fizyolojik ile kateter floş hatırlıyorum.
15. Birkaç dikişlerle kateterleri güvenli ve cilt kapatılır.
16. Arter ve ven damarları dikmek için önce ponksiyon etrafında bir gemi döngüsü yerleştirilebilir. Avantajlara rağmen, biz genellikle damarların aşırı diseksiyonu gerektirir ve lateral ve derin dallara zarar riskini artırabilir çünkü, bu ek adım önlemek.

4. Transcardial perfüzyon

1. Aşağıdaki ekipman prosedürü için gerekli olan perfüzyon sistemi (Şekil 2), ilgili perfüzyon sıvıları, neşter, künt-tip cerrahi makas, kemik makaslar ve en az bir kavisli ucu olan iki büyük kendini tutma forseps. Sternal retraktörü istinat kendini kesinlikle gerekli değildir, fakat bu prosedür oldukça kolaylaştırır.
2. Transcardial perfüzyon yüksek güç hava emiş sistemi ve sonraki emniyetli bir şekilde bertaraf için perfüzat sıvı toplanması ve kan izin tesisleri ile iyi havalandırılmış bir odada yapılmalıdır.
3. Pentobarbital bir öldürücü doz intravenöz enjekte ettikten sonra, devam etmeden önce interdijital ağrı refleks testi.
4. Medyan sternotomi ile kalp ve aort iyi erişim sağlanır. Manubrium kılıç şeklinde sternum sürecine kadar uzanan derin bir longitudinal cilt insizyonu olun. Göğüs boşluğu diyafram sadece kılıç şeklinde bir süreç altında küçük bir kesi yaparak erişin.
5. Kemik makası göğüs boşluğuna yerleştirin ve sternum iki eşit parçaya böler. Bu işlemi yaparken kalp sternum içine bir yere yapışık olabilir, çünkü Bakım alınmalıdır. Bu nedenle, kemik makas bıçak sternumun iç karşı göğüs boşluğunun içine tüm zamanların aittir emin olun.
6. Sternum bölünmüş edildikten sonra, kendi kendine istinat sternal retraktörü koymak ve göğüs boşluğu açmak.
7. Eğer hala bozulmamış, perikard, kalp tepesinde küçük bir kesi yapmak ve sonra dijital olarak perikardiyal kese açık.
8. Üstün kaval ven (Şekil 1C) ile birlikte sol ventrikül, sağ kulak kepçesi ve aort belirleyin
9. Kalbin apeks yakınında küçük bir yüzeysel kesik ve künt uçlu bir alet ile miyokard perforan sol ventrikül erişim.
10. Perfus takıniyon sol ventrikül içindeki kanül ve aort cranially içine kanül ucu hareket ettirin.
11. Kanül aorta parmaklar arasında hissedilir, kendini tutma kavisli bir forseps ile yerine kanül kelepçe.
12. Sağ kulak kepçesi bir kesi yapın ve perfüzyon kanül aracılığı ile başlar fiksatif enjekte. Aorta perfüzat akışı hissedilir olabilir ve minipig damarlarının içine perfüzat akış devam ettiği kesik sağ kulak kepçesi ile kan dökeceğim. Paraformaldehid sistemik perfüzyon ekstremitelerin hiperekstansiyon indükler ve aldehit çapraz-bağlantı sinirler ve kaslar nedeniyle yüzeysel kas seğirmesi nasıl dikkat edin. Sıkıştırılmış hava yerine yerçekimi tarafından desteklenmektedir perfüzyon sistemi kullanırken, damar sistemine girmeden hava önlemek için, teneke kutu boş önce kanül kaldırmak, ya da net bir silikon tüp kelepçe emin olun.

Şekil 1. A: kadın Göttingen minipig dış üretral açılış B: kateter sonra üretral açılış C: medyan sternotomi sonra minipig kalp Ventral.

Şekil 2. A: perfüzyon sistemi, ayarlanabilir bir basınç valf ve perfüzat tutan kap içine basınçlı hava giriş kontrol etmek için kullanılan bir kolu ile giriş boru oluşur . Clear silikon tüp konteyner bağlayan 4 mm çelik borudan yapılmış-ucu künt bir kanül: B ve C giriş kolunu sıkıştırarak basınç kabı ve perfüzat yükseliyor. Kanül D üzerinden yürür: açık silikon tüp ve kanül perfüzat ile doldurulur, akış, bir kelepçe ile durdurulur ve sistem kullanımı için hazırdır.

Tartışmalar

Bu sunumda, ^araştırma 12,13 minipig sık kullanılan dört yordamları gerçekleştirmek için nasıl adım adım görsel talimatları sağlar . Açıklanan teknikler landrace domuz ve diğer büyük araştırma gibi köpekler ve koyun ¹⁴ gibi hayvanların içinde az ya da hiç uyum ile kullanılıyor olabilir. Aseptik teknik sağkalımın belirtilen prosedürleri yaparken, enfeksiyonları önlemek için istihdam edilmelidir.

Hayvan refahı ve bilimsel nedenlerle anestezi indüksiyonu için önemlidir ve endotrakeal entübasyon çalışılmadan önce, kornea refleksleri ve iyi bir kas gevşemesi yokluğu vermelidir. Ancak, anestezikler indüksiyonu için kullanılan sabit dozda verilen, ancak istenen etkiyi elde edilinceye kadar uygulanan değildir çünkü, apne riski nedeniyle hayvan yakından izlemek için özellikle propofol ^6,10 kullanıyorsanız önemlidir. Xylocaine spreyi ya da kas gevşetici, trakeal entübasyon, tüp giriş kolaylaştırabilir, ancak nöromüsküler bloker kullanımı sadece etik ilkelere uygun şekilde, bu prosedürlerin, iyi eğitilmiş personel tarafından yapılmalıdır. Trakeal şişlik ve ödemi önlemek için, entübasyon sırasında laringeal geçit travmatize değil alınmalıdır. Havayolu ödem NSAİİ veya benzeri bir anti-inflamatuar ilaçlar ¹⁰ ile tedavi edilebilir. Domuzlar çeşitli pozisyonlarda entübe, ancak benzer bir şekilde ⁶ havayolu hediye olarak sırtında hayvan, insan entübasyon düzenli yürütmek kim için daha kolay olma eğilimindedir. Entübasyon sırasında en yaygın hata, sadece hayvan sırtında yerleştirilir laringeal geçit altında yer, yemek borusu, tüpün yanlışlıkla yerleştirme. Not tüp ilk kez açıkça arytenoids kıkırdaklar ve ses tellerinin tespit olmadan gelişmiş asla.

Üretra yoluyla mesaneye transüretral kateterizasyon bu yordamı ⁶ erkek, belki de imkansız, son derece zor iken, kadın domuz kolayca yapılır . Kadın üretral orifis vajina ön olduğundan, daha büyük vajinal açılış yanlışlıkla kateterize edilebilir olduğu unutulmamalıdır. Sağkalım çalışmaları için steril ve dezenfekte yağ kullanımı tavsiye edilir. Ayrıca, lokal anestezi etkisi ile yağ kateterizasyon prosedürü kolaylaştırmak.

Femoral arter ve ven kateterizasyon, damar kateter seçimi ve ne yaparken kateterler süresi ⁶ uzun bir süre boyunca implant, özellikle de farklı olmayan hayatta kalma ve yaşama çalışmaları arasında güvenli. Kronik implantasyon örneğin kateterler için yüksek biyouyumlu olmalıdır yanı sıra zaman içinde damar duvarında travmatize olarak, böylece tromboz veya erozyon ⁶ inducing sabitleme için tutma boncuk veya manşet var.

Bu video, transcardial perfüzyon için sıkıştırılmış hava ile çalışan kapalı bir sistem kullanın. Başka bir seçenek de, yerçekimi tarafından yönlendirilen bir sistem kullanmak. Ağırlık sistemlerinin basınçlı hava kullanan sistemlere göre avantajı da etkin, basit olması ve vasküler sisteme giren basınçlı hava herhangi bir risk teşkil. Ancak, yerçekimi sistemleri tarafından uygulanan hidrostatik basınç perfüzyon sırasında sürekli değişen ve histolojik sonuçlar ¹⁵ etkileyebilir. Hangi tip birini gerçekleştirmek istiyor histopatolojik çalışmalar bağlı olarak, ilk heparinize salin ile hayvan serpmek için avantajlı olabilir. Eritrositler tarafından kaynaklanan otofloresansı sorunları önlemek için immunofluorescent boyama yaparken özellikle importantance. Ayrıca, ilgi organ beyin ise, inen aort fiksatif kaydetmek klempe olabilir. Ancak, domuz, bu adımı diseksiyon ek gerektirir ve prosedür uzatır.

Malzemeler

Name	Company	Catalog Number	Comments
Prosedür	Ekipman	Şirket	Katalog-numarası
Entübasyon
	Gaz maskesi	Datex-Ohmeda S / S Avance, GE Healthcare	1009-9002-000
	Künt ucu emme	Unomedical	34091181
	Larengoskop	Değirmenci	85-0045 (Laringoskop seti)
	Endotrakeal tüp 5.5 mm ID	Smiths Medical International Ltd.	100/199/055
	Keski	Hudson RCI	5-151001
	Şırınga 5ml
	Stetoskop	Martin	17-262-00
Mesane kateterizasyon
	Gliserin silikon Foley kateter stile ile 8-Fransızca AquaFlate	Rüsch	178003
	Spekulum burun	Martin	36-859-50
	Spekulum rektal	Martin	30-613-15
	Blunt-ucu forseps	Martin	13-374-16
	Kateter yağ Jeli
	Cathejell Lidocain	Montavit	CJL08501
	Instillagel Tarak.	Farco Pharma	08-40-200
	A4 İdrar drenaj torbası	Unomedical	38 155 1S
	Yapışkan bant
Femoral arter ve ven kateterizasyon
	Skalpel	Martin	10-295-11
	Blunt-ucu cerrahi makas	Martin	11-881-18
	Doku forseps	Martin	12-100-14
	Küçük künt-tip cerrahi forseps	Martin	13-375-13
	Küçük self-istinat Doku retraktörü	Martin	15-753-13
	İğne	Martin	20-634-14
	Cerrahi swapları
	İğnenin ile sütür
	Tuzlu
	Heparin	LEO	585679
	18-ölçer venflon	BD Venflon Pro	393206
	Uygulayıcıya ve Seldinger kılavuz tel ile 4-Fransızca brite ucu kılıfları	Cordis	154-2629-1/0017
Transcardial perfüzyon
	Basınçlı perfüzyon sistemi	En profesyonel donanım mağazalar mevcuttur parçaları ev yapımı
	Emiş sistemi	Gram A / S	01750000 ve 0303700
	Perfusant 5L
	Blunt-ucu cerrahi makas	Martin	11-881-18
	Kemik makaslar	FST	16150-24
	Geniş kavisli ucu kendini tutma forseps	Martin	13-421-18
	Kendinden istinat sternal retraktörü	Rudolf Tıp	7520-10
	Pentobarbital	TheRoyal Veteriner ve Tarım Üniversitesi (KVL)	200 mg / ml
	22-ölçer venflon	BD Venflon Pro	393202