JoVE Logo

Oturum Aç

Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliği gereklidir. Oturum açın veya ücretsiz deneme sürümünü başlatın.

Bu Makalede

  • Özet
  • Özet
  • Protokol
  • Tartışmalar
  • Malzemeler
  • Referanslar
  • Yeniden Basımlar ve İzinler

Özet

Doğal katil hücreler, lenfosit küçük bir nüfus. Burada StemCell Teknolojileri kit kullanarak, bu hücrelerin insan kanı negatif seleksiyon tarafından nasıl izole etmek göstermektedir. Elde edilen hücreler, bu nedenle bir takım prosedürler için kullanılacak hazır antikorlar tarafından uygulanabilir ve bakir, ve.

Özet

Doğal öldürücü (NK) hücreleri doğuştan gelen bağışıklık sistemine ait olup, kanser ve enfeksiyonlara karşı mücadelede önemli bir rol oynamak, büyük granüllü sitotoksik lenfositler, ancak, gebelik ve transplant reddini erken aşamalarında da sorumlu tutulmaktadır. Bu hücreler izole edilebilir olan periferik kan, mevcut. Hücreler, pozitif veya negatif seçim kullanılarak izole edilebilir. Olumlu seçimi için biz sadece tüm hücreleri ama ilgi hücreler mevcut yüzey belirteçleri hedefleyen antikor kokteylleri kullanan negatif seçimi için ise ilgi hücreleri mevcut bir yüzey işaretleyici yönelik antikorlar kullanır. Bu son teknik, böylece istenmeyen hücre aktivasyonu ya da farklılaşma riskini azaltarak, hücrelerin antikor serbest ilgi bırakarak avantajı sunuyor. Bu video protokol StemCell teknolojileri RosetteSep kiti kullanılarak, negatif seleksiyon tarafından nasıl insan kanı NK hücreleri ayrı göstermektedir. Bu prosedür, insan periferik kan (insan denekler korumak için bir kurumsal inceleme kurulu tarafından onaylanmış protokol altında) elde ve NK hücreleri yok belirteçlerinin bağlamak antikorların bir kokteyl ile karıştırma, ancak, periferik diğer tüm mononükleer hücreler içerir kan (örneğin, T lenfositleri, monositler ...). Kokteyl bulunan antikorlar, A üzerinde eritrosit glycophorin yönelik antikorlar konjuge. Bu nedenle, tüm istenmeyen hücre ve kırmızı kan hücrelerinin kompleksleri kalmış olacak. Kan ve antikor kokteyli karışımı, daha sonra seyreltilmiş Histopaque degrade üzerine yerleştirilmiştir ve santrifüj edilir. NK hücreleri (>% 80 saf) Histopaque ve seyreltilmiş plazma arasındaki arayüz toplanabilir. Benzer kokteyller, insan T lenfositleri gibi diğer hücre popülasyonlarının, zenginleştirilmesi için kullanılabilir.

Protokol

Her Rozet Eylül izolasyon kokteyl ile birlikte ayrıntılı bir protokol ve StemCell teknolojileri 1 online olarak mevcuttur.

Tartışmalar

Bu tekniği kullanarak izole hücreler diğer hücre ayırma kitleri kullanılarak farklı popülasyonlar daha ayrılabilir.

Malzemeler

PBS% 2 FCS ve Histopaque çözümleri ile desteklenmiş prosedürü başlamadan önce oda sıcaklığına getirilmelidir.

Referanslar

  1. . . Procedures and instruction manuals. , .

Yeniden Basımlar ve İzinler

Bu JoVE makalesinin metnini veya resimlerini yeniden kullanma izni talebi

Izin talebi

Daha Fazla Makale Keşfet

mm nolojisay 8kanh cre izolasyonudo al ld r clenfositbirincil h crelernegatif seleksiyonh creFicoll degradeh cre ay rma

This article has been published

Video Coming Soon

JoVE Logo

Gizlilik

Kullanım Şartları

İlkeler

Araştırma

Eğitim

JoVE Hakkında

Telif Hakkı © 2020 MyJove Corporation. Tüm hakları saklıdır